CN103976894B - 使用黑莓提取物增强发质的方法和组合物 - Google Patents

使用黑莓提取物增强发质的方法和组合物 Download PDF

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Abstract

本发明提供了利用在局部施用到期望毛发生长的皮肤区域时有效诱导毛发生长的量的黑莓提取物来诱导毛发生长并改善发质的组合物和方法。

Description

使用黑莓提取物增强发质的方法和组合物
技术领域
本发明涉及利用来自黑莓植物(欧洲黑莓(Rubus fruticosus))的提取物来诱导毛发生长并改善发质的局部组合物和方法。
背景技术
遗传倾向以及自然老化过程和/或疾病均是男性和女性的毛发损失和毛发生长较慢的原因。大约50％的人口到50岁时在一定程度上表现出该性状，并且毛发变稀与性别无关，可在年龄介于12和40岁之间开始。因此，能够刺激毛发生长以及防止并减慢或减少毛发损失的试剂不仅于对治疗脱发，而且对于积极影响与毛发疾病相关联的心理事件可能是有益的。研究表明受毛发损失影响的心理包括与负面刻板印象相关联的身体形象的不满意，诸如感觉更老、更弱和较不具有吸引力。
包括米诺地尔(Rogaine)、非那雄胺(Propecia)和度他雄胺 (Avodart)在内的药物是经批准的毛发损失用制剂。然而，它们可需要药物处方，并且仅对一定百分比的群体是活性的。此外，这些药物中的一些由于荷尔蒙效应而不允许被女性使用。例如，由于胎儿的男性假两性畸形的风险，绝经前女性应不服用非那雄胺。已发现非那雄胺人为地降低了前列腺特异性抗原(PSA)测试，能够延缓疾病检测和治疗的前列腺癌的标准筛选测试的结果。
米诺地尔是局部施用药，其对诱导一部分患者的毛发生长有效并且将仅在头皮的顶部使毛发重新生长。另外，其对老年人的效果有限。米诺地尔可减慢十个男性患者中一半的毛发损失的速度。
可用于处理毛发损失的其它医学治疗包括剧烈的手术技术，诸如头皮缝缩、头皮皮瓣或毛囊单位移植。这些手术带有并发症的风险，诸如与供体区域相关联的发际线升高、坏死的可能性和毛发生长方向的不自然外观、麻醉和术后护理，更不用说高成本。
声称诱导毛发生长的草本植物制剂(例如Hair Prime)可以低成本获得但其效果非常有限。
M.Herrmann等人已说明了黑莓叶的水醇提取物(SymMatrix)，表现出MMP-1、MMP-2和MMP-9抑制活性。(参见，例如US2008/0095719)。
发明内容
令人惊奇地，已发现浓缩的含水欧洲黑莓提取物可有效诱导毛发生长，其通过将包含局部活性组合物、基本上由此类提取物组成以及由此类提取物组成的组合物施用到患者的头皮、皮肤、睫毛、眉毛、八字须区域和胡须区域而进行，所述局部活性组合物包含浓度为至少90mg提取物/ml 溶液但小于300mg/ml的欧洲黑莓提取物，例如所述局部活性组合物包含浓度为至少120mg提取物/ml溶液但小于300mg/ml的欧洲黑莓提取物，或者所述局部活性组合物包含浓度为至少250mg提取物/ml溶液但小于 300mg/ml的欧洲黑莓提取物，所述组合物可在每天持续施用至少五(5)或七(7)天之后开始增加所关注区域的毛发覆盖。对于用浓缩的欧洲黑莓提取物处理的所有动物均观察到体内毛发生长的强效增加。甚至更令人惊奇地，包含欧洲黑莓提取物的本发明组合物在快速进入生长期(即，毛囊的活跃生长期)之前，最初诱导可见的休止期(即，棒毛脱落)。本发明的组合物诱导100％的经过至少八天时间处理的动物进入生长期。
具体实施方式
如本文所用，“黑莓提取物”是指悬钩子(Rubus)属植物的提取物。优选地，用于本发明组合物中的种类是欧洲黑莓。黑莓提取物可以为分离自悬钩子属植物的化合物的共混物。在一个实施例中，所述化合物分离自所述植物的花。在另一个实施例中，所述化合物可分离自所述植物的干燥花。其还可分离自植物的一个或多个部分，包括整株植物、植物的花、种子、根、根状茎、茎、果实和/或叶。优选地，可用于本发明组合物的黑莓提取物分离自黑莓植物的叶。
提取过程可包括物理法移取一块黑莓植物并对其进行研磨。还可使用本领域技术人员已知的有机溶剂提取方法以获得可用于本发明组合物的黑莓提取物。还可使用如下溶剂从黑莓植物中提取活性化合物，所述溶剂诸如低级C1-C8醇、C1-C8烷基多元醇、C1-C8烷基酮、C1-C8烷基醚、乙酸C1-C8烷基酯及氯仿、和/或无机溶剂如水、无机酸如盐酸、和无机碱如氢氧化钠。
黑莓叶提取物还可通过由水产生的提取物、使用醇诸如乙醇或它们的组合作为提取剂来制备。然而，提取物由包含乙醇和水提取剂的提取剂来制备。
在提取前，优选对黑莓叶进行干燥。还优选仅将黑莓植物的叶，并且不将黑莓的其它植物部分诸如果实(浆果)、其分枝、花或根用于提取。
在一个实施例中，用于制备黑莓叶提取物的提取工艺可具有如下步骤：a)向黑莓叶添加包含醇的提取剂，所述醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇，以及b)用所述提取剂提取黑莓叶并持续至多72小时。
优选确定提取剂与叶子固形物的质量比，使得获得相对于叶子固形物至少10倍质量的提取剂，和优选相对于叶子固形物不超过50倍质量，优选地10至20倍质量的提取剂。特别优选相对于叶子固形物14至18倍质量的提取剂用于提取。用16倍质量的含醇溶剂(再次相对于叶子固形物) 获得了良好的结果。
进行步骤b)的提取时间为最多72小时，但还可更短。如果提取时间特别短，则在步骤b)中获得相对稀的提取物。因此优选步骤(b)中提取黑莓叶至少一(1)小时，并且更优选地至少两(2)小时。优选的提取时间是根据待提取的黑莓叶子的性质(特别是它们的叶龄)以及其它提取条件 (特别是提取温度)来选择。
在升高的提取温度下，例如在约60至约100℃范围内，优选在约80 至约100℃范围内的提取温度下，提取时间优选为约一小时至约六小时，还更优选约两小时至约四小时。
此外，最优选通过尤其是在约60℃至约100℃范围内，还更优选在约 80至约100℃范围内的提取温度下，使提取剂回流来进行步骤(b)中的提取。当使用回流方法时，提取时间优选不超过约24小时。
提取温度是根据所用的提取剂来确定。如果使用含醇溶剂，尤其是如果将乙醇和水的混合物用作提取剂，则优选提取温度在约60℃至约100℃的范围内，具体地讲提取温度在约80℃至约100℃的范围内。
优选地，提取剂包含相对于总提取剂，比例为至少约20重量％的低级烷基醇溶剂，更优选地乙醇。优选地，提取剂还应包含相对于所述总提取剂，比例为至少15重量％的水。更优选所述提取剂同时包含相对于总提取剂，至少20重量％的醇(优选地乙醇)和相对于总提取剂，比例为至少15 重量％的水。
对本发明的组合物和方法尤其有效的黑莓叶提取物由包含的乙醇和水的提取物获得，所述乙醇和水的比率为约2:8(2重量份的乙醇与8重量份的水混合)至约8:2，更优选地比率为约3:7至约7:3，并且最优选地比率为约3:7至约1:1。
因此，在一个优选的实施例中，黑莓提取物是黑莓叶提取物，即提取物是从黑莓植物的叶子生产的。在一个特别优选的实施例中，黑莓提取物由欧洲黑莓的叶子制得。在又一个特别优选的实施例中，通过用如上所述的水和低级醇(如乙醇)的混合物提取欧洲黑莓的叶子来制备黑莓提取物。
一种特别合适的黑莓提取物通过用水和乙醇的混合物提取欧洲黑莓叶，用麦芽糖糊精基质(从Symrise Inc.(Teterboro，NJ)商购获得并且以名称“SymMatrix”销售)配混成约5％至约10％的活度而制备。
制备合适的黑莓叶提取物的详细程序在如美国专利公布2008/0095719 中所示，该专利申请全文并入本文。
如本文所用，“局部施用”是指直接敷在或抹在外层皮肤上，例如使用手或涂敷器，如擦拭物、粉扑、滚轮或喷雾器。
如本文所用，“美容上可接受的”指该术语描述的一种或多种产品或一种或多种组合物适用于与组织(例如，皮肤)接触而不具有不适当的毒性、不相容性、不稳定性、刺激性、过敏反应等。该术语并非意图限制其描述的成分/产品，只能用作化妆品(例如成分/产品可用作药物)。
如本文所用，“局部载体”意指一种或多种适用于局部施用至哺乳动物的相容的固体或液体填充剂稀释剂。局部载体的例子包括但不限于水、蜡、油、润肤剂、乳化剂、增稠剂、胶凝剂、以及它们的混合物。
如本文所用，“毛发”意指头皮、头部、面部和/或身体毛发，其包括但不限于头皮上的毛发、睫毛、眉毛、八字须、胡须、耳毛、鼻毛、胸毛、耻毛、辅助性毛发等。
如本文所用，“诱导毛发生长”意指新毛发周期的早期诱导生长、和/ 或延长所述毛发周期的活性生长期(生长期)、和/或增加毛发的生长速率、和/或增加毛干的宽度，包括但不限于诱导毛发生长并使其更能让肉眼可见。
如本文所用，“改善发质”意指增加毛干直径和/或增强毛发的视觉属性如毛发体积、毛发光泽和毛发厚度，和/或影响毛干和/或毛发角质层的特性，包括但不限于产生更光滑的外观或感觉、和/或增加光泽。
如本文所用，“安全有效量”意指生理上活性化合物或组合物的量足以在待调节或处理的条件下诱导积极改性(例如，毛发生长)但足够低以避免严重的副作用。化合物或组合物的安全有效量将随以下因素而变化：所治疗的具体病症、最终使用者的年龄和身体状况、所治疗/预防的病症的严重程度、治疗的持续时间、其它治疗的性质、所用的具体化合物或产品/ 组合物、所用的特定美容上可接受的载体等。
局部组合物
可用于本发明的局部组合物包含适用于局部施用到毛发和头皮上的制剂。在一个实施例中，所述组合物包含黑莓提取物和美容上可接受的局部载体。在一个实施例中，美容上可接受的局部载体占所述组合物的约75重量％至约95重量％，更优选地占所述组合物的约75重量％至约85重量％。
本发明的组合物可制成多种的产品类型，包括但不限于固体和液体组合物，诸如乳液、霜膏、凝胶、棒状物、喷剂、软膏剂、清洗液和实心棒、洗发剂、糊剂、粉末、泡沫、摩丝、和擦拭物。这些产品类型可含有几种美容上可接受的局部载体类型，包括但不限于溶液、乳液(如微乳液和纳米乳液)、凝胶、固体和脂质体。此类载体的非限制性例子如本文所示。其它的载体可由本领域普通技术人员配制。
可用于本发明的局部组合物可配制成溶液。溶液应优选包含水性溶剂 (例如，约75％至约95％，或约75％至约85％的美容上可接受的水性溶剂)。更优选地，此类组合物应包含约30％溶剂，但这可根据制剂而改变。此类溶剂可包括乙醇、丙二醇、聚乙二醇、它们的混合物等，其为成功递送至毛囊的良载体。
可用于本主题发明的局部组合物可配制成包含润肤剂的溶液。此类组合物优选包含约2％至约50％的一种或多种润肤剂。如本文所用，“润肤剂”是指用来防止或缓解干燥，以及用来保护皮肤的物质。多种合适的润肤剂是已知的，并且可用于本文。TheInternational Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook，第十四版，1012第3卷，由 Gottschlack和Breslawec编辑，第3868-80页，由Personal Care Products Council出版(下文中为“INCI Handbook”)，其以引用的方式并入本文。
洗剂可由溶液制成。洗剂通常含有约1％至约20％(更优选地，约5％至约10％)的一种或多种润肤剂和约50％至约90％(更优选地，约60％至约 80％)的水。
其它类型的产品可以为溶液，所述溶液为霜膏。霜膏通常包含约5％至约50％(更优选地，约10％至约20％)的一种或多种润肤剂和约45％至约85％ (更优选地，约50％至约75％)的水。
还可以由溶液配制的另一种产品是软膏剂。软膏剂可由动物或植物油或半固体烃的简单基料构成。软膏剂可包含约2％至约100％的一种或多种润肤剂和约0.1％至约2％的一种或多种增稠剂。INCI Handbook在第1693页至 1697页包含了可用于本发明组合物和方法的可令人接受的增稠剂和增粘剂的列表。
可用于本发明的局部组合物还可优选配制成乳液。如果载体为乳液，则约1％至约10％(优选地约2％至约5％)的载体应由一种或多种乳化剂组成。乳化剂可以为非离子型、阴离子型或阳离子型。合适的乳化剂可见于例如INCI Handbook，第3816-191页和第3954-67页。
洗剂和霜膏还可配制成乳液。通常此类洗剂优选包含0.5％至约5％的一种或多种乳化剂。此类霜膏通常可包含约1％至约20％(优选地约5％至约 10％)的一种或多种润肤剂；约20％至约80％(优选地30％至约70％)的水；以及约1％至约10％(优选地，约2％至约5％)的一种或多种乳化剂。
水包油和油包水型单乳液护肤制剂，例如洗剂和霜剂是化妆品领域所熟知的，并且可用于本主题发明。多相乳状液组合物(例如水包油包水型)也可用于本主题发明。通常，此类单相乳液或多相乳液含有水分、润肤剂和乳化剂作为基本成分。
本发明的组合物还可以洗发剂、毛发调理产品、免洗型发膜、摩丝、喷剂的形式，与染料和其它毛发护理产品组合，用于洗涤、处理、调理和着色毛发，同时局部施用本发明的新型组合物。
本发明的局部组合物还可配制成凝胶(例如，使用一种或多种合适的胶凝剂制成的水凝胶)。适用于水凝胶的胶凝剂包括但不限于天然树胶、丙烯酸和丙烯酸酯聚合物和共聚物以及纤维素衍生物(例如羟甲基纤维素和羟丙基纤维素)。用于油(例如矿物油)的适当胶凝剂包括但不限于氢化丁烯/乙烯/苯乙烯共聚物和氢化乙烯/丙烯/苯乙烯共聚物。此类凝胶通常包含介于约0.1重量％和5重量％之间的此类胶凝剂。还可使用微凝胶以增强制剂的毛囊递送。
本发明的局部组合物也可配制成固体制剂(例如蜡基棒、睫毛膏、条皂组合物、粉末、含有粉末的擦拭物)。
除了上述组分外，可用于本发明的局部组合物还可含有以其技术领域确定的含量常用于在皮肤和毛发上使用的组合物中的多种其它油溶性物质、有机溶剂可溶性和/或水溶性物质。例如，可将70％乙醇和30％丙二醇或者不同量的两种试剂的制剂用于增强活性物质的递送。
表面活性剂
在一个实施例中，本发明的组合物包含一种或多种表面活性剂。在一个实施例中，本发明包含起泡表面活性剂。所谓“起泡表面活性剂”是指当与水混合并且机械搅拌时产生泡沫的表面活性剂。在一个实施例中，在 ASTM标准1001，第15部分第15.04卷中的ASTMAnnual Book所示的“Standard Test Method for Foaming Properties of Surface-Active Agents D1173-53”中(使用5克/升的浓度，49℃的温度，以及8克/加仑的水硬度)，起泡表面活性剂具有至少20mm，如至少50mm的初始泡沫高度。发泡表面活性剂的例子包括但不限于阴离子、非离子、阳离子、和两性发泡表面活性剂。
阴离子表面活性剂的非限制性例子包括选自肌氨酸、硫酸盐、羟乙基磺酸盐、牛磺酸盐、磷酸盐、乳酸盐和谷氨酸盐的那些。具体的例子包括但不限于选自下列的那些：月桂基硫酸钠、十二烷基硫酸铵、月桂基聚氧乙烯醚硫酸铵、月桂基聚氧乙烯醚硫酸钠、十三烷基聚氧乙烯醚硫酸钠、鲸蜡基硫酸铵、鲸蜡基硫酸钠、椰油基羟乙基磺酸铵、月桂酰羟乙基磺酸钠、月桂酰乳酸钠、月桂酰乳酸三乙醇胺、己酰乳酸钠、月桂酰肌氨酸钠、肉豆寇酰肌氨酸钠、椰油基肌氨酸钠、月桂酰甲基牛磺酸钠、椰油基甲基牛磺酸钠、月桂酰谷氨酸钠、肉豆寇酰谷氨酸钠、以及椰油基谷氨酸钠、以及它们的混合物。
非离子发泡表面活性剂的非限制性例子包括选自下列的那些：烷基糖苷类、烷基多糖苷类、多羟基脂肪酸酰胺、烷氧基化的脂肪酸酯、发泡蔗糖酯、氧化胺、以及它们的混合物。具体的例子包括但不限于那些选自下列的非离子表面活性剂：C8-C14葡萄糖酰胺、C8-C14烷基多葡糖苷、蔗糖椰油酸酯、蔗糖月桂酸酯、月桂基氧化胺、椰油基氧化胺、以及它们的混合物。
两性发泡表面活性剂(还包括两性离子表面活性剂)的非限制性例子为选自下列的那些：甜菜碱、磺基甜菜碱、羟磺基甜菜碱、烷基亚氨基乙酸盐、亚氨基二链烷酸盐、氨基链烷酸盐、以及它们的混合物。
本发明的两性表面活性剂的非限制性例子包括月桂酰两性基二乙酸二钠、月桂酰两性基乙酸钠、鲸蜡基二甲基甜菜碱、椰油酰氨基丙基甜菜碱、椰油酰氨基丙基羟基磺基甜菜碱、以及它们的混合物。
另外的美容活性剂
在一个实施例中，根据本发明的组合物还可包含一种或多种另外的美容活性剂以及上述组分。“美容活性剂”指对组织具有美容或治疗作用的化合物，其可以是合成的化合物或是自天然源分离、纯化或浓缩的化合物，或指含对组织具有美容或治疗作用的化合物的混合物的天然提取物，包括但不限于：抗微生物剂如抗酵母剂、抗真菌和抗细菌剂、抗炎剂、抗老化剂、抗寄生虫剂、外用止痛剂、防晒剂，光保护剂、抗氧化剂、角质层分离剂、洗涤剂/表面活性剂、保湿剂、营养素、维生素、矿物、能量增强剂、抗汗剂、收敛剂、头发生长促进剂，毛发着色剂、颜料、固化剂、皮肤调理剂、以及气味控制剂如恶臭掩蔽剂或pH调节剂。
在一个实施例中，美容活性剂也可选自但不限于羟基酸、过氧化苯甲酰、D-泛醇、甲氧基肉桂酸辛酯、二氧化钛、水杨酸辛酯、胡莫柳酯、阿伏苯宗、类胡萝卜素、自由基清除剂、自旋捕截剂、类视色素如视黄酸 (维生素A酸)和类视色素前体如视黄醇和棕榈酸视黄醇酯、维生素如维生素E(α，β或δ生育酚和/或它们的混合物)、神经酰胺、多不饱和脂肪酸、必需脂肪酸、酶、酶抑制剂、矿物、激素如孕酮、类固醇如氢化可的松、2-二甲基氨乙醇、金属(包括但不限于铁或锌)盐如氯化铜、含铜肽如Cu：甘氨酸-组氨酸-赖氨酸、辅酶Q10、氨基酸、维生素、乙酰辅酶A、烟酸、核黄素、硫胺素、核糖、电子转运体如NADH和FADH2、植物提取物如芦荟、小白菊、大豆以及它们的衍生物和混合物。美容活性剂可优选以约0.001重量％至约20重量％，更优选地约0.005重量％至约10重量％，最优选地约0.01重量％至约5重量％的量存在于本发明的组合物中。
还预计对本发明的组合物和方法尤其有效的是存在合成或天然的5-α还原酶抑制剂、或其它抗皮脂成分，包括但不限于Sepicontrol(辛酰甘氨、肌氨酸和锡兰肉桂树皮提取物)、甘草粉末或提取物、以及类似物。 MC5受体拮抗剂也可用于本发明的组合物。MC5-R拮抗剂的例子也可见于美国专利7,049,331。
本发明的组合物还可与已知促进毛发生长的化合物组合使用，所述化合物可作为药物购得，诸如非那雄胺(Propecia)(2型5-α-还原酶抑制剂)、和度他雄胺(1型和2型-5-α-还原酶抑制剂)、以及氟他胺、比卡鲁胺、孕烷衍生物、孕酮衍生物、实验试剂如FCE 28260等。还可使用螺甾内酯和其它利尿剂，因为其在一些情况下指定用于妇女(还称为Aldactone：醛固酮受体拮抗剂)。钾通道开放剂如米诺地尔 (Rogaine)，其已知用于促进毛发生长，据信其也是特别有潜力的组合。
可具有5-α-还原酶抑制作用的草药可包括：沙巴棕和非洲臀果木。可具有此类活性的其它试剂为β-甾醇、Sepicontrol和甘草、γ-亚麻酸酸和其它不饱和脂肪酸(TehmingLIANG和Shutsung LIAO，Biochem.J. (1992)285，557-562，Inhibition of steroid 5-alpha-reductase by specific aliphatic unsaturated fatty acids)、锌锌盐、绿茶儿茶素 (-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)以及其它多酚等。葡萄籽、苹果籽、和苹果汁以及大麦提取物也可以是可诱导毛发生长的潜在试剂，虽然不认为它们是非常常见的或在实现满意的结果方面是令人满意的 (Takahashi等人，Procyanidin OligomersSelectively and Intensively Promote Proliferation of Mouse Hair EpithelialCells In Vitro and Activate Hair Follicle Growth In Vivo，J Invest Dermatol112:310-316)。
附加的组合可包括毛发生长的其它已知刺激剂，诸如锌、钙调神经磷酸酶抑制剂如FK506(他克莫司、藤霉素)、由链霉菌属(Streptomyces tsukubaensis)产生的大环内酯类抗生素及其衍生物、或环孢菌素A、环状内癸肽以及T细胞特异性免疫抑制剂等。
本发明的组合物中还可包含Provillus活性成分，建议阻断DHT的产品(维生素B6、生物素、镁、锌、沙巴棕、荨麻、雷公根、南瓜、刺五加根、北美熊莓叶、巴西晃晃木)。
可以为本发明组合物的组分的维生素的例子包括但不限于维生素A，维生素B类如维生素B3、维生素B5、和维生素B12，维生素C，维生素K，维生素E如α,γ或δ生育酚，以及它们的衍生物(如盐和酯)和混合物。
羟基酸的例子包括但不限于乙醇酸、乳酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸和酒石酸。据信此类羟基酸用于支持头皮角质层的再生。还相信此类羟基酸有助于使本发明组合物的pH正常化，并且与乳酸一样，可增加对头发的调理效果。
可用于本发明组合物和方法的抗氧化剂的例子包括但不限于：水溶性抗氧化剂如巯基化合物和它们的衍生物(例如焦亚硫酸钠和N-乙酰-半胱氨酸)、硫辛酸和二氢硫辛酸、白藜芦醇、乳铁蛋白以及抗坏血酸和抗坏血酸衍生物(例如抗坏血酸棕榈酸酯和抗坏血酸多肽)。适用于本发明组合物的油溶性抗氧化剂包括但不限于：丁基化羟基甲苯、类视色素(例如视黄醇和视黄基棕榈酸酯)、不同类型的生育酚(例如α、γ和δ生育酚以及它们的酯(如乙酸酯))和它们的混合物、生育三烯酚和泛醌。含有适用于本发明组合物的抗氧化剂的天然提取物包括但不限于：含有类黄酮、异类黄酮和它们的衍生物如染料木黄酮(genistein)和黄豆甙原 (daidzein)的提取物(例如大豆和三叶草提取物)、含有白藜芦醇的提取物等。这种天然提取物的例子包括葡萄籽、绿茶、松树皮和蜂胶。
另一方面，可能有用的是孕酮和具有孕酮状活性的天然衍生成分，以及收敛剂如金缕梅、三氯生、浅蓝菌素、α-亚甲基-γ-丁内酯、甘氨酸衍生物如辛酰基甘氨酸和甲基甘氨酸、水杨酸或过氧化苯甲酰。
在本发明的组合物还可包含具有以下活性成分的Fabao 101：西洋参 (AraliaQuinquetolia)、豆科黄芪属(Astragalus Glycyphyllos)、圆叶当归根(AngelicaArhangelica Root)、药用鼠尾草(Salvia Officinalis)、辣椒(Capsicum)、山核桃木(Carya Alba)、红花 (Corthamis Tinctorius)、白鲜皮(Cortex dictamni radicis)、野菊花(Flos Chrysanthemum)、何首乌(Heshouwu)、铁拳人参(Iron-Fist Ginseng)、丹参(Miltiorrhizae)、三七(Notoginseng)、补骨脂 (Paorulca Glandulosa)、桃仁油(PeachKernel Oil)、川穹 (Rhizome of Szechuan Lovage)、黄芪(Radix astragali)、人参(Radix Ginseng)、何首乌(Radix Polygoni Multiflori)、丹参 (Red-rooted Salvia)、天麻人参(Rhizhoma gastroidia ginseng)、羌活(Seu radix notopterygii)、苦参(Sopheraflavescens)。
其它材料
在可用于主题发明的组合物中还可存在各种其它材料。这些材料包括保湿剂、蛋白质和多肽、防腐剂以及碱性剂。此类实际的例子公开在INCI Handbook，第1650-1667页中。本发明的组合物还可包含螯合剂(例如， EDTA)和防腐剂(例如，对羟基苯甲酸酯)。合适的防腐剂和螯合剂的例子在INCI Handbook的第1626页和第1654-55页中列出。此外，可用于本文的局部组合物可包含常规化妆品佐剂，诸如染料、遮光剂(例如，二氧化钛)、颜料、和香料。
暗化剂
在一个实施例中，本发明的组合物还包含暗化剂如黑素或合成黑素衍生物、或类黑素分子、香草醛聚合物、天然提取物诸如但不限于毛喉鞘蕊花(Coleus Forskoli)提取物、Bugrane-P提取物、来自包含颜料的天然来源的提取物(例如来自姜花(Hedychium)属或熊果(Bearberry)属的植物的棕色颜料或者来自包含类胡萝卜素或角黄素的植物的黄色、橙色和红色颜料)；或合成化合物诸如包含铜的化合物(例如，铜盐如CuCl2)或合成类胡萝卜素或角黄素。合成黑素衍生物的例子如美国专利5,618,519、 5,384,116、和5,227,459中所示。可溶性黑素衍生物的例子如 5,744,125、5,225,435、5,218,079、和5,216,116中所示。可商购获得的可溶性黑素衍生物的例子包括得自San-mar laboratories，Inc.(Elmsford，N.Y.)的Melasyn-100TM和得自Zylepsis(Ashford，Kent， United Kingdom)的MelanZeTM。
这些试剂在组合物中的存在量优选将为约0.001重量％至约10重量％，具体地讲约0.01重量％至约5重量％。
在另一个实施例中，组合物可包括肽。暗肤肽的例子如美国专利7,025,951中所示。在此所示的本发明的肽可以美容上可接受的盐的形式提供。优选的盐的例子为治疗学上可接受的有机酸，例如，乙酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、乳酸、马来酸、柠檬酸、苹果酸、抗坏血酸、琥珀酸、苯甲酸、水杨酸、甲磺酸、或扑酸、以及聚合酸如鞣酸或羧甲基纤维素，以及无机酸诸如氢卤酸(例如，盐酸)、硫酸或磷酸的盐。
肽在组合物中的存在量取决于所用的肽。肽在组合物中的存在量为约 0.001重量％至约10重量％，具体地讲约0.005重量％至约5重量％。
矿泉水
本发明的组合物可使用矿泉水，例如天然矿化的矿泉水诸如矿泉水(Evian，France)来制备。在一个实施例中，矿泉水具有至少约 200mg/L(例如，约300mg/L至约1000mg/L)的矿化度。在一个实施例中，矿泉水包含至少约10mg/L的钙和/或至少约5mg/L的镁。
使用方法
本发明的组合物可用于通过将所述组合物局部施用到期望毛发生长的身体区域上来诱导毛发生长。优选地，将本发明的组合物每天至少一次局部施用到身体的期望区域并持续至少五(5)天，还更优选基于每天施用并持续至少六周，并且最优选无限期。为改善发质，应至少每天一次施用所述组合物并持续至少十二周。约两周后，使用者可开始观察到毛发生长增加，并还能够观察到毛干直径增加和/或毛发的视觉属性诸如毛发体积、毛发光泽和毛发厚度增强。
实例
实例1
根据下表1制备凝胶基料配方A1：
在混合容器中将以下成分混合：去离子水、乙二胺四乙酸二钠、甘油、聚二甲基硅氧烷和丁基化羟基甲苯(BHT)并加热至40-45℃，同时在中至高速下高使用螺旋桨式混合(平铲)并混合直至均匀。一旦达到40℃以下的温度，则在螺旋桨混合下(平铲，中等速度)一次加入以下成分： Sepigel 305、Phenonip XB。用氢氧化钠将pH调节至5.0。
表1
实例2
用表2中所示的以下配方，根据实例1中所示的程序制备包含黑莓提取物的组合物(A2)和仅包含丁二醇和水的组合物(A3)。
表2
实例3
根据表3中的以下配方制备组合物E1和C1 。本发明实例E1通过将实例1的凝胶基料A1和实例2的黑莓提取物组合物A2混合，通过混合直至达到均匀而获得浓度为25％的黑莓提取物(A1和A2的比率为1:1)。另外，比较例C1通过将实例2的凝胶基料A1和A3混合来制备。
表3
实例4
用黑莓(欧洲黑莓)提取物诱导C3H小鼠的毛发生长
对C3H小鼠的毛发生长的诱导以根据时间(研究天数)进入生长期的小鼠的百分比来测量。
年龄为6-7周的C3H雌性小鼠购自Taconic Farms(Germantown， NY)。小鼠在具有12小时光照12小时黑暗的光周期环境控制的房间内饲养在适当大小的笼子中，并提供有食物和水自由采食。动物护理依照“Guide for the Care and Use of LaboratoryAnimals”，NIH Publication No.85-23(实验动物护理和使用指南，NIH出版号85- 23)。在研究开始前使动物适应一周。一旦所有小鼠进入其毛发周期的延长的休止期/休息期(约50-60天长)，则对它们在约1.5×5cm的背侧区域进行修剪(Wahl Clippers 8900系列，刀片#1086)。对每组四只雌性小鼠进行修剪同时镇静，用2％异氟醚和0.5L氧气诱导并维持。除了E1 (250mg/ml欧洲黑莓配方)，包括安慰剂的处理组(C1)和未处理组 (n＝4)用作天然毛发生长诱导的对照物，并观察安慰剂效果，并且将 200μl的测试材料以每天、每周五天(周一至周五)局部施用到区域上。在生长期/活性生长期的第一迹象时，并且在需要时基于视觉观察来获取图像。记录观察小鼠(灰皮)进入生长期的日常研究日志。连续处理并持续约8周。
表4
根据时间(研究天数)，进入生长期的小鼠中代表性C3H小鼠的毛发生长诱导％
每组米诺地尔基准的动物数：7-22天(N＝7)，23-26天(N＝6)，27- 44天(N＝5)
NA＝未评估
令人惊奇的是，到第8天，欧洲黑莓局部处理(E1)诱导所有C3H小鼠的毛发生长。当相对于可商购获得的毛发生长产品(购自Eckerd Pharmacy的用于男性的5％通用米诺地尔溶液)，使用相同的测试模型进行评价比较时，在E1局部施用情况下的诱导以更高的发生/响应率更快地发生。平均约63％的用5％市售米诺地尔处理的小鼠到6周进入生长期(N＝4次研究)，并且在米诺地尔作为阳性对照表现最好时，100％到4周(29天) 进入生长期。
因此，结论是与用5％市售米诺地尔(其中平均约63％的小鼠到6周进入生长期(N＝4次研究)，并且在米诺地尔作为阳性对照表现最好时，100％到4周(29天)进入生长期)相比，当用E1处理时，毛发生长诱导更高发生率更快地发生，从而导致在八(8)天时100％的响应率。
实例5
制备由培养基，所述培养基由Williams E培养基(减去谷氨酰胺)、 L-谷氨酰胺、两性霉素、青霉素和链霉素(Gibco公司提供)组成。制备黑莓提取物和培养基的原液。制备原液的1:10系列稀释液直至实现合适的浓度。
从新鲜的面部外科手术样品中分离出人类终毛毛囊。将各个毛囊置于 12孔Falcon小室细胞培养板的填充有0.5ml培养基的0.4um小室中。使用 w/v计算将制剂添加到培养基中。隔天更换培养基。在0、1、3、5、7和9 天时获取图像。通过测量毛干的长度进行图像分析。计算每组的平均值的百分比增量。
表5：
处理 N 与未处理相比的变化％
未处理 9 0
黑莓提取物0.01％ 10 -4.278326281
黑莓提取物0.001％ 7 63.6577339
与不具有黑莓提取物的毛囊生长培养基相比，0.001％(w/v)的黑莓提取物(欧洲黑莓能够使毛干伸长率增加63.65％。
实例6
从新鲜的面部外科手术样品中分离出人类终毛毛囊。将各个毛囊置于 6孔Falcon小室细胞培养板的填充有2.0mL培养基的0.4μm小室上。制备培养基和如实例5中的原液。使用w/v计算将制剂添加到培养基中。隔天更换培养基。在0、1、3、5、7和9天时获取图像。通过测量毛干的长度进行图像分析。计算每组的平均值的百分比增量。
表6：
处理 N 与未处理相比的变化％
未处理 12 0
黑莓提取物0.001％ 5 51.936
黑莓提取物0.001％ 4 44.412
黑莓提取物0.0001％ 4 15.466
黑莓提取物0.05％ 5 -27.4437
与不具有黑莓提取物的毛囊生长培养基相比，浓度范围介于0.0001％至0.001％(w/v)之间的黑莓提取物(欧洲黑莓能够使毛干伸长率增加多于 15％。应该指出的是，出人意料的是，0.05％的更高浓度范围的黑莓提取物不增加毛干伸长率。
实例7
以下实施例使用如表7中所示的制剂制成：
表7中所示的实施例组合物中每一个如下独立地制备：
E2-E5：
将水计量到主容器中并在引发涡旋的情况下搅拌。通过筛网细分缓慢加入卡波姆-丙烯酸、环己烷。加热混合物直至温度达到55-60℃。制得 20％氢氧化钠溶液。用20％氢氧化钠溶液将pH调节至pH 5.5-6以中和卡波姆。停止加热并将混合物冷却至45℃。在聚甲基丙烯酸甘油酯中将麦芽糖糊精(40％)、欧洲黑莓(黑莓)叶提取物(60％)预混合。在搅拌下将麦芽糖糊精(40％)、欧洲黑莓(黑莓)叶提取物(60％)、聚甲基丙烯酸甘油酯加入容器中。粘度随着其添加而连续下降。用20％氢氧化钠溶液将pH 调节至pH5.5-6.0 。 在搅拌下，向烧杯中加入苯氧基乙醇(和)1,2-辛二醇(和)山梨酸(具有苯氧基乙醇和苯甲酸钠的制剂C12)。用20％氢氧化钠溶液将pH调节至pH 5.5-6。用水调节至适量。形成凝胶。
E2：形成稳定的凝胶和经过13周的制剂的稳定性。使用T锭子以 20RPM对两周和四周进行稳定性测试。将样品保持在室温、4℃、40℃和 50℃下。保持在50℃下的样品在六周时从测试中取出，并且其它样品(室温、4℃和40℃)在八周和13周时读取。冻结/解冻测试进行三个周期。随着添加更多(40％)欧洲黑莓(黑莓)叶提取物(60％)，必须添加更多的卡波姆。
C2：就C2而言，除了脱氢黄原胶用甘油预润湿并在搅拌下缓慢添加到容器中之外，按照相同的程序。麦芽糖糊精(40％)欧洲黑莓(黑莓)叶提取物(60％)不用聚甲基丙烯酸甘油酯预润湿。添加的防腐剂为苯氧基乙醇和苯甲酸钠。
C3：就C3而言，除了在容器中加入水之后，将其加热直至温度达到 55-60℃之外，按照相同的程序。缓慢加入甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素并搅拌30分钟。麦芽糖糊精(40％)欧洲黑莓(黑莓)叶提取物(60％)不用聚甲基丙烯酸甘油酯预润湿。将其直接喷洒在容器中。
C4和C5：就C4和C5而言，除了将聚丙烯酰胺(和)C13-14异链烷烃(和)月桂基聚氧乙烯醚-7后加入到组合物中之外，按照相同的程序。
C6：就C6而言，除了将聚丙烯酸钠(和)氢化聚癸烯喷洒在水中，将聚丙烯酰胺(和)C13-14异链烷烃(和)月桂基聚氧乙烯醚-7后加入到制剂中之外，按照相同的程序。
C7、C8和C9：就C7、C8和C9而言，按照相同的程序，并且在丁二醇中加入预润湿的脱氢黄原胶。持续搅拌并缓慢加入硅酸钠镁锂。值得注意的是，随着在组合物中加入更多的合成锂皂石，与成为凝胶相反，稠度变得更像糊剂。

Claims (8)

1.欧洲黑莓叶提取物用于制造局部组合物的用途，所述局部组合物施用于患者的皮肤、睫毛、眉毛或胡须区域来增强毛发生长，所述局部组合物包含浓度为至少90mg提取物/ml溶液但小于300mg提取物/ml溶液的欧洲黑莓叶提取物，所述提取物用于增强所述毛发生长；
其中，所述提取物由包括以下步骤的方法制备所得：
(a)向黑莓叶添加包含水和乙醇的提取剂，所述乙醇和水的重量比为2:8至8:2；
(b)用所述提取剂提取黑莓叶持续至多72小时，提取温度为60至100℃。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含浓度为至少120mg提取物/ml溶液但小于300mg提取物/ml溶液的欧洲黑莓叶提取物。
3.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物包含浓度为至少250mg提取物/ml溶液但小于300mg提取物/ml溶液的欧洲黑莓叶提取物。
4.根据权利要求1所述的用途，所述皮肤为头皮。
5.根据权利要求1所述的用途，所述胡须区域为八字须区域。
6.根据权利要求1所述的用途，所述提取温度为80至100℃。
7.根据权利要求1所述的用途，所述局部组合物还包含按所述组合物重量计至少1重量％的卡波姆。
8.根据权利要求1所述的用途，其中所述局部组合物还包含皮肤护理剂，所述皮肤护理剂由维生素、矿物、蛋白质、肽、脂肪酸、抗氧化剂、抗炎剂、暗化剂、植物提取物、以及它们的混合物组成。
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