CN103966107B - 一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 - Google Patents
一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103966107B CN103966107B CN201410198266.1A CN201410198266A CN103966107B CN 103966107 B CN103966107 B CN 103966107B CN 201410198266 A CN201410198266 A CN 201410198266A CN 103966107 B CN103966107 B CN 103966107B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture medium
- powder
- ganoderma
- ganoderma lucidum
- high activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 59
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 235000001637 Ganoderma lucidum Nutrition 0.000 title claims abstract description 33
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 title claims abstract description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 claims abstract description 45
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 35
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 35
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 28
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 16
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 claims abstract description 9
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 240000002503 Vitis amurensis Species 0.000 claims abstract description 9
- 235000004283 Vitis amurensis Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims abstract description 8
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims abstract description 8
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 235000017784 Mespilus germanica Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 244000182216 Mimusops elengi Species 0.000 claims abstract description 3
- 235000000560 Mimusops elengi Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 235000007837 Vangueria infausta Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 claims abstract 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 6
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 6
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 5
- 244000000231 Sesamum indicum Species 0.000 claims description 2
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- -1 flavone compound Chemical class 0.000 abstract description 10
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 abstract description 9
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 abstract description 9
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 abstract description 9
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 abstract description 9
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 abstract description 9
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 abstract description 7
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 239000000470 constituent Substances 0.000 abstract description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000306 component Substances 0.000 description 8
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 6
- ZRWPUFFVAOMMNM-UHFFFAOYSA-N Patulin Chemical compound OC1OCC=C2OC(=O)C=C12 ZRWPUFFVAOMMNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 108050000194 Expansin Proteins 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 241001489089 Ganoderma neojaponicum Species 0.000 description 2
- 241001489091 Ganoderma sinense Species 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 229930182483 coumarin glycoside Natural products 0.000 description 2
- 150000008140 coumarin glycosides Chemical class 0.000 description 2
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 2
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 2
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 2
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 2
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000005426 pharmaceutical component Substances 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 241000050051 Chelone glabra Species 0.000 description 1
- 208000001778 Coronary Occlusion Diseases 0.000 description 1
- 206010011086 Coronary artery occlusion Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- RDMQPKIDHAFXKA-JNORPAGFSA-N Ganoderic Acid Am1 Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CC(=O)C1=C2C(=O)C[C@]2(C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)CC(C)C(O)=O)C)CC(=O)[C@]21C RDMQPKIDHAFXKA-JNORPAGFSA-N 0.000 description 1
- 229930182735 Ganoderic acid Natural products 0.000 description 1
- 206010061998 Hepatic lesion Diseases 0.000 description 1
- 235000002710 Ilex cornuta Nutrition 0.000 description 1
- 241001310146 Ilex cornuta Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 235000010326 Osmanthus heterophyllus Nutrition 0.000 description 1
- 241000222341 Polyporaceae Species 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 235000009392 Vitis Nutrition 0.000 description 1
- 241000219095 Vitis Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009655 industrial fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明公开了一种深层发酵生产多成分高活性灵芝的培养基，所述培养基中每升含有大米粉1‑5g，马铃薯汁1‑40 g，山葡萄籽粉1‑6 g，人参粉1‑2 g，杏仁粉1‑3 g，枸杞子粉1‑3 g，山楂汁1‑4 g，银杏叶1‑5 g，磷酸二氢钾0.1‑0.5 g，硫酸镁0.1‑0.5 g，葡萄糖1‑5 g，其余为水，PH值自然；利用本发明的培养基，将具有天然药物活性成分的灵芝菌经过液体深层发酵制得多成分高活性的灵芝菌粉，所获灵芝菌粉中除含有灵芝本身活性成分外，还含有黄酮类化合物和皂角苷活性物质，是一种纯生物不含有其他任何有害物质灵芝菌粉；而且培养基的来源广泛，易得，成本低。
Description
技术领域
本发明属于生物深层发酵技术领域，具体涉及一种多成分高活性灵芝及灵芝菌粉的制备方法。
背景技术
灵芝：治愈万症，其功能应验，灵通神效，故名灵芝，又名“不死药”俗称“灵芝草”，多孔菌科类、一年生真菌，灵芝作为药物已正式被国家药典收载，同时它又是国家批准的新资源食品，无毒副作用，可以药食两用。科学研究表明，灵芝的药理成分非常丰富，其中有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸（其中含有七种人体必需氨基酸）、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸（主含延胡索酸），以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。灵芝对人体具有双向调节作用，所治病种，涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统，尤其对肿瘤、肝脏病变、失眠以及衰老的防治作用十分显著。
通过生物发酵的方式提高灵芝药用活性成分的含量因为其具有生产周期短、节省劳动力和受外部环境影响小等优点被认为是一种有效的方法。但目前国内外对灵芝的研究主要集中在发酵条件及活性成分分离等层面上，整体发酵水平不高，如专利（申请号00111953.2）公开了一种液体发酵法同时生产灵芝多糖和灵芝酸的工艺，灵芝酸含量可达2.8mg/100mg，胞内和胞外多糖总量高达2.34克/升，但该方法效率低，不能满足工业化发酵生产的需要；而专利（申请号201210110969.5）虽然公开了一种利用扩张蛋白提高灵芝菌丝体中总黄酮产量的方法，即通过向液体发酵培养基中加入扩张蛋白来提高总黄酮的产量，但此专利中所用的扩张蛋白液制备方法繁复，不利于工厂化生产。
发明内容
本发明提供一种简单易行且成本低的利用具有天然活性成分的灵芝菌，通过培养基的选择，经液体深层发酵、生物转化合成含有高比率黄酮类化合物和皂角苷活性成分的灵芝菌粉的方法，具体技术方案如下。
本发明提供了一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，所述培养基每升中含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-40 g，山葡萄籽粉1-6 g，人参粉1-2 g，杏仁粉1-3 g，枸杞子粉1-3 g，山楂汁1-4 g，银杏叶1-5 g，磷酸二氢钾0.1-0.5 g，硫酸镁0.1-0.5 g，葡萄糖1-5 g，其余为水，PH值自然。
优选地，本发明提供的培养基每升中含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-10 g，山葡萄籽粉1-3.5 g，人参粉1-1.5 g，杏仁粉1-1.2g，枸杞子粉1-2.5g，山楂汁1-2.5g，银杏叶1-2.5g，磷酸二氢钾0.1-0.5g，硫酸镁0.1-0.25g，葡萄糖1-3g，其余为水，PH值自然。
基于上述的培养基，本发明提供了深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法，主要包括如下步骤：
1）将灵芝菌种在斜面培养基上培养得到斜面菌种；
2）将斜面菌种接种到液体种子培养基中，进行扩繁培养，得到液体种子；
3）将步骤2）得到的液体种子按0.5-1%的接种量接种到一级种子罐的培养基中培养得到一级种子液；
4）将步骤3）得到的一级种子液按5-10%的接种量接种到上述权利要求所述的培养基中，在条件为温度25-27℃，压力0.03-0.05MPa，空气流量1：0.5-1.0v/v,菌丝浓度40-55w/v的条件下，深层发酵培养56-72h，得到发酵液；
5）将步骤4）得到的发酵液经过滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨得到灵芝菌粉。
优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤1）所述的斜面培养基为PDA培养基，斜面培养的条件为：在温度为22-25℃的条件下，培养5-7天。
优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤2）所述液体种子培养基为PDA培养基，培养条件为在22-25℃的温度下，摇床转数为100-120转/min，暗培养3-5天。
优选地，在上述深层发酵生产多成分高活性灵芝的方法中，步骤3）所述一级种子罐培养基为综合培养基，培养条件为在25-27℃的温度下，培养48h。
目前，由于野生灵芝资源有限，而通过人工栽培获得的灵芝实体所带来的农药及污染很难去除。发酵法可以通过调节培养基的组成、培养温度及时间等条件，在短时间内得到大量的灵芝菌丝体，其在组成上与人工栽培得到的灵芝实体相似，但其克服了污染及农药问题。
灵芝本身药理成分非常丰富，其中有效成份可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、16种氨基酸（其中含有七种人体必需氨基酸）、蛋白质、甾类、甘露醇、香豆精苷、生物碱、有机酸（主含延胡索酸），以及微量元素Ge、P、Fe、Ca、Mn、Zn等。经研究，野生灵芝含有极其微量的黄酮类化合物。而黄酮类化合物具有促进血液循环，阻抗动脉硬化形成，改善降低血液中胆固醇含量减少脂肪在血液血管壁上的积累，降低冠状动脉阻塞，止痛、止血治疗外伤引发的症状，对防止体内各组织发炎形成的抗体和消除体内过多的氧化自由基有明显疗效。目前经研究已经从野生灵芝中分离出黄酮类化合物，但其含量是抑制其应用的主要因素。
灵芝本身不含有皂角苷活性物质，但皂角苷具有抗癌抑制肿瘤，降低血糖，改善代谢，降低血脂，抑制肥胖，降低血小板凝聚，避免形成血栓，改善血液流变避免心肌梗塞和增强机体免疫抗病能力。
本发明就是利用深层发酵方法通过调节培养基的组成，提高灵芝菌丝中黄酮类化合物和皂角苷活性物质的含量。具体来讲，本发明培养基中所选用的组分中含有大量的黄酮类化合物和皂角苷活性物质，如山葡萄籽、银杏叶等有效成分主要为黄酮类化合物，而人参、杏仁粉等则含有皂角苷等有效成分，这些组分通过液体深层发酵、生物转化合成含有黄酮类化合物和皂角苷活性物质的灵芝菌丝。
本发明的优点如下：
1）本发明通过灵芝菌经液体深层发酵获得比一般普通灵芝及其菌丝体粉活性成分多的灵芝菌粉；
2）本发明获得的灵芝菌粉中除含有灵芝本身活性成分外，还含有黄酮类化合物和皂角苷活性物质，是一种纯生物不含有其他任何有害物质的多成分、高活性灵芝菌粉；
3）培养基的来源广泛，易得，成本低；
4）本发明所采用的制备方法工艺简单，重复性好，环境可控，适合工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做详细说明。
实施例中所用灵芝菌为黑灵芝（Ganoderma），赤灵芝（Ganoderma Lucidum）和紫灵芝（Ganoderma neo-japonicum）均购自于北京普天同创生物科技有限公司。
灵芝菌粉中活性成分的确定由国家药物代谢产物分析中心和青岛科标化工分析检测有限公司完成。具体而言，相应的方法为：
蛋白质的测定：凯氏定氮法；活性多糖、三萜：紫外分光光度计；总黄酮：芦丁计；皂角苷、腺苷：高效液相色谱方法。
实施例1
1）制备培养基：每升培养基中含有马铃薯汁40g，大米粉5g，山葡萄籽粉6g，人参粉2g，杏仁粉3g，枸杞子3g，山楂汁4g，银杏叶5g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.5g，葡萄糖5g，其余为水，PH自然；
2）将黑灵芝（Ganoderma），接种到斜面PDA培养基上培养得到斜面菌种，温度为25℃，培养7天；
3）将斜面菌种接种到PDA液体种子培养基中，进行扩繁培养，在25℃条件下，培养5天，得到液体种子；
4）将液体种子按0.5%的接种量接种到一级种子罐中在27℃条件下，培养48h，得到一级种子；
5）将一级种子液按10%的接种量接种步骤1）所述的培养基中，在条件为温度27℃，压力0.05MPa，空气流量1： 1.0v/v,菌丝浓度55w/v的条件下，深层发酵培养72h，得到发酵液；
6）将步骤5）得到的发酵液经板框滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到过80目筛灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨过80目得到灵芝菌粉。
实施例2：与实施例1条件相同，灵芝菌种为赤灵芝（Ganoderma Lucidum）。
实施例3：与实施例1条件相同，灵芝菌种为紫灵芝（Ganoderma neo-japonicum） 。
实施例4
1）制备培养基：每升培养基中含有马铃薯汁20g，大米粉3g，山葡萄籽粉3g，人参粉2g，杏仁粉2g，枸杞子2g，山楂汁2g，银杏叶3g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.2g，葡萄糖3g，其余为水，PH自然；
2）将黑灵芝（Ganoderma），接种到斜面PDA培养基上培养得到斜面菌种，温度为22℃，培养5天；
3）将斜面菌种接种到PDA液体种子培养基中，进行扩繁培养，在22℃条件下，培养3天，得到液体种子；
4）将液体种子按1%的接种量到一级种子罐中在25℃条件下，培养48h，得到一级种子；
5）将一级种子液按5%的接种量接种步骤1）所述的培养基中，在条件为温度25℃，压力0.03MPa，空气流量1： 0.5v/v,菌丝浓度40w/v的条件下，深层发酵培养56h，得到发酵液；
6）将步骤5）得到的发酵液经板框滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到过80目筛灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨过80目得到灵芝菌粉。
实施例5
1）制备培养基：每升培养基中含有马铃薯汁10g，大米粉2g，山葡萄籽粉2g，人参粉1g，杏仁粉1g，枸杞子2g，山楂汁1g，银杏叶2g，磷酸二氢钾0.3g，硫酸镁0.2g，葡萄糖2g，其余为水，PH自然；
2）将黑灵芝（Ganoderma），接种到斜面PDA培养基上培养得到斜面菌种，温度为23℃，培养5天；
3）将斜面菌种接种到PDA液体种子培养基中，进行扩繁培养，在24℃条件下，培养4天，得到液体种子；
4）将液体种子按0.8%的接种量接种到一级种子罐中在26℃条件下，培养48h，得到一级种子；
5）将一级种子液按10%的接种量接种步骤1）所述的培养基中，在条件为温度26℃，压力0.04MPa，空气流量1： 0.8v/v,菌丝浓度40w/v的条件下，深层发酵培养66h，得到发酵液；
6）将步骤5）得到的发酵液经板框滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到过80目筛灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨过80目得到灵芝菌粉。
实施例中各个主要活性成分通过相应的测定方法得到表1和表2的数据：
表1为相同条件下不同接种菌种的活性成分测定：
表2为同一菌种不同条件下的活性成分测定：
通过以上实施例说明，本发明通过选择培养基的组分，有效地发酵生产了多成分高活性的灵芝菌粉，从实验数据还可以看出相同条件下，赤灵芝相对于黑灵芝和紫灵芝作为菌种效果更好。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，其特征在于，所述培养基中每升含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-40 g，山葡萄籽粉1-6 g，人参粉1-2 g，杏仁粉1-3 g，枸杞子粉1-3 g，山楂汁1-4 g，银杏叶1-5 g，磷酸二氢钾0.1-0.5 g，硫酸镁0.1-0.5 g，葡萄糖1-5 g，其余为水，pH值自然；
所述培养基深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的方法，包括如下步骤：
1）将灵芝菌种在斜面培养基上培养得到斜面菌种；
2）将斜面菌种接种到液体种子培养基中，进行扩繁培养，得到液体种子；
3）将步骤2）得到的液体种子按0.5-1%的接种量接种到一级种子罐的培养基中培养得到一级种子液；
4）将步骤3）得到的一级种子液按5-10%的接种量接种到深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基中，在温度25-27℃，压力0.03-0.05MPa，空气流量1：0.5-1.0v/v,菌丝浓度40-55w/v的条件下，深层发酵培养56-72h，得到发酵液；
5）将步骤4）得到的发酵液经过滤得到灵芝湿菌丝体和过滤液，湿菌丝体干燥后研磨得到灵芝菌粉；过滤液经真空浓缩干燥后研磨得到灵芝菌粉。
2.根据权利要求1所述的一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，其特征在于，所述每升培养基中含有大米粉1-5g，马铃薯汁1-10 g，山葡萄籽粉1-3.5 g，人参粉1-1.5 g，杏仁粉1-1.2g，枸杞子粉1-2.5g，山楂汁1-2.5g，银杏叶1-2.5g，磷酸二氢钾0.1-0.5g，硫酸镁0.1-0.25g，葡萄糖1-3g，其余为水，pH值自然。
3.根据权利要求1所述的一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，其特征在于，步骤1）中所述的斜面培养基为PDA培养基，培养条件为22-25℃，培养5-7天。
4.根据权利要求1所述的一种深层发酵生产多成分高活性灵芝菌粉的培养基，其特征在于，步骤2）中所述液体种子培养基为PDA培养基，培养条件为22-25℃，摇床转数为100-120转/min，暗培养3-5天。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410198266.1A CN103966107B (zh) | 2014-05-13 | 2014-05-13 | 一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410198266.1A CN103966107B (zh) | 2014-05-13 | 2014-05-13 | 一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103966107A CN103966107A (zh) | 2014-08-06 |
| CN103966107B true CN103966107B (zh) | 2016-08-24 |
Family
ID=51236116
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410198266.1A Expired - Fee Related CN103966107B (zh) | 2014-05-13 | 2014-05-13 | 一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103966107B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104893992B (zh) * | 2015-06-30 | 2018-04-17 | 福建天斯顿生物科技有限公司 | 一种灵芝菌的深层发酵方法 |
| CN106278557A (zh) * | 2016-07-29 | 2017-01-04 | 武夷山元生泰生物科技有限公司 | 一种利用银杏栽培灵芝的方法 |
| CN107641042A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-01-30 | 江西仙芝来生物科技有限公司 | 一种栽培灵芝的培养土及其制备方法和应用 |
| CN113261664A (zh) * | 2021-03-01 | 2021-08-17 | 宁夏职业技术学院（宁夏广播电视大学） | 一种发酵葡萄籽灵芝菌粉的制备方法 |
| CN115634241A (zh) * | 2022-11-16 | 2023-01-24 | 青岛农业大学 | 一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101481658A (zh) * | 2008-10-13 | 2009-07-15 | 中丹康灵（北京）生物技术有限公司 | 一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺 |
| CN101560118A (zh) * | 2009-02-26 | 2009-10-21 | 浙江大学 | 一种灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方和优化方法 |
| CN102618594A (zh) * | 2012-04-16 | 2012-08-01 | 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 | 一种提高灵芝菌丝体中总黄酮产量的方法 |
-
2014
- 2014-05-13 CN CN201410198266.1A patent/CN103966107B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101481658A (zh) * | 2008-10-13 | 2009-07-15 | 中丹康灵（北京）生物技术有限公司 | 一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺 |
| CN101560118A (zh) * | 2009-02-26 | 2009-10-21 | 浙江大学 | 一种灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方和优化方法 |
| CN102618594A (zh) * | 2012-04-16 | 2012-08-01 | 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 | 一种提高灵芝菌丝体中总黄酮产量的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 10种中药对灵芝液体发酵的影响;刘媛等;《食品与生物技术学报》;20080331;第27卷(第2期);123-126 * |
| 8种中药对灵芝子实体成分的作用;张志才等;《中国食用菌》;20111231;第30卷(第5期);40-42 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103966107A (zh) | 2014-08-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103966107B (zh) | 一种培养基及用该培养基生产多成分高活性灵芝菌粉方法 | |
| CN101760478B (zh) | 一种葛根红曲的制造方法 | |
| CN104623122B (zh) | 一种具有抗疲劳功能的生物制剂及其制作方法 | |
| CN104000855A (zh) | 一种生产多成分高活性灵芝及灵芝菌粉的方法 | |
| CN103316058A (zh) | 利用灵芝-当归双向发酵以提高其药效技术 | |
| US11376292B2 (en) | Microbial fermentation composition subjected to enzymolysis, microbial fermentation and microbial transformation and use thereof | |
| CN102424625B (zh) | 一种食药用菌乌发剂、其制备方法及用途 | |
| CN100350969C (zh) | 一种具有美容养颜作用的冲剂 | |
| CN105935143A (zh) | 灵芝酵素的制作方法 | |
| CN106148200A (zh) | 一种富硒低铅、砷的冬虫夏草菌丝体的培养基及其培植方法 | |
| CN103815279B (zh) | 一种富含辅酶q10红曲及其制备方法 | |
| CN102274271B (zh) | 一种大豆冬虫夏草菌丝体粉及其制备方法 | |
| CN106434380A (zh) | 一种利用黄芪培养冬虫夏草菌的方法及其应用 | |
| CN106916860A (zh) | 一种食药用菌发酵产物的制备方法及其应用 | |
| CN110367460A (zh) | 一种提高航天员体质的舞茸天贝复合制剂 | |
| CN103468515A (zh) | 一种糙米灵芝酒及其酿制方法 | |
| CN104351744A (zh) | 一种蛹虫草口服液的制作方法 | |
| CN112370516A (zh) | 一种具有活性成分的破壁灵芝孢子粉制品及其制备方法 | |
| CN106119126A (zh) | 一种辣木灵芝菌丝体 | |
| CN103229666A (zh) | 一种蛹虫草花生及其制备方法 | |
| CN106085878A (zh) | 一种辣木香菇菌丝体的培育方法 | |
| CN101401646A (zh) | 一种煲汤添加剂 | |
| CN103478706B (zh) | 一种天然葛酵素及其制法 | |
| CN103230003B (zh) | 一种具有增强免疫力功能的保健食品及其制备方法 | |
| CN107893035A (zh) | 一种猴头菌的培养基、黄精生物转化菌丝体、黄精生物转化菌丝体的提取物及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160824 |