CN103933220B - 一种治疗更年期综合症的药物 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种治疗和/或预防更年期综合症的药物，其特征在于，按质量份数计，含有如下的成分：白芍300‑400份，熟地黄 200‑300份，枸杞子 200‑300份，黄芪 300‑400份，淫羊藿 300‑400份，钩藤 300‑400份，合欢皮 200‑300份，茯苓 200‑300份，牡蛎 400‑600份。

Description

一种治疗更年期综合症的药物

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗和/或预防更年期综合症的药物。

背景技术

围绝经期综合征(perimenopausesyndome)，俗称更年期综合征(climactericsyndome),是由于卵巢功能衰退,雌激素分泌减少，导致自主神经系统功能紊乱而出现的一组症候群。其发病与体质、健康状况、个性特征、环境和文化修养等有密切关系。围绝经期的妇女有90%出现不同程度的临床表现，早期以血管舒缩及精神症状为主，晚期可出现心血管疾病及骨质疏松症。更年期综合征，是由于卵巢功能衰退，雌激素分泌减少，导致自主神经系统功能紊乱而出现的一组症候群。其发病与体质、健康状况、个性特征、环境和文化修养等有密切关系。围绝经期是从出现卵巢功能衰退症状到绝经后1年的一段过渡时期。我国妇女的平均绝经年龄为49岁，按平均女性寿命80岁计算，有三分之一的时间是在绝经后度过的。随着妇女地位的提高,承受的社会、家庭、事业压力越来越大,该病发病率逐年上升。2000年我国50岁以上的妇女达1.2亿,2030年将达2.8亿。因此，本病已成为公众医学亟待解决的问题。

目前现代医学治疗本病主要是针对体内雌激素缺乏，对更年期及绝经后妇女采用以激素替代疗法(HRT)为主流的治疗方法，激素替代疗法虽然能缓解症状，但因其存在着七大方面的禁忌证和副作用，而且在改善症状和预防远期并发症的同时，增加了心脑血管疾病、乳腺癌的风险，许多患者不愿接受，因而在国内并未广泛推广应用。并且许多学者对妇女长期激素治疗的受益/风险比尚未肯定，所以在应用过程中受到一定的限制。因此人们正在寻求新的绿色疗法，中医药防治本病就是其中之一，正在日益受到关注。

治疗更年期综合征，中医药具有其独特的优势。近年来很多学者致力于中医药治疗更年期综合征的研究，对其病因病机、临床治疗以及疗效等方面作了深入探讨，均取得一定研究成果。本病的病因病机在祖国医学书籍中已有相关记载，《素问·上古天真论》中对女性生理衰退变化的描述为：“七七，任脉虚，太冲脉衰少，天癸竭，地道不通，故形坏而无子也。”妇女的各个阶段以肾气的盛衰为主导，本病的发生与冲任脉虚，天癸竭，肾气虚衰有关。陆启滨提出了肾阴亏虚，心肝火旺为本病之因。刘晓伟等认为肾精不足，冲任脉虚为发病之本，故本病的发生以肾虚为致病之本，并可涉及到其他脏腑，引起阴阳气血的变化。中医认为本病的病因以肾虚为主，因肾阴虚，或肾阳虚、或肾阴阳两虚而影响心肝脾导致多种病理变化。核心病机是肾衰阴虚、兼及心、肝、脾，症状繁多，中医统称为绝经前后诸证，亦即更年期综合征。更年期综合征辨证分型，目前临床尚无统一分型的标准。在所查阅的书籍和文献中，更年期综合征分型名称可达几十种之多。临床辨证分型多为肝肾阴虚，脾肾阳虚，肾阴阳两虚，心肾不交，肝郁气滞，心肝火旺及痰瘀互结等证型。综合多数学者报道，本病阴虚型最多见，占发病的70－75％，阴阳两虚型约占15％，其他兼夹型约占15％左右。

按照中医理论分析更年期综合征病理基础主要为肾阴亏虚，这与本病证型中阴虚型最多见的综合报导也是一致的。肾阴亏虚、水不涵木、肝木失养、可致肝阳偏亢，又肾水不能上济于心，致心神失养，心肾不交，临床可见潮热汗出、头晕耳鸣、腰膝酸软、心烦易怒、失眠健忘等症状。中医药治疗围绝经期综合征的研究已引起广大学者的关注,但由于临床辨征分型繁多,分型过细,药物加减变化大,没有统一标准。且证名不规范,加之辨证论治缺乏客观化指标,导致其在临床治疗效果方面的优势难以推广运用。因此如何运用现代先进科学技术重点进行药效学和治疗机理研究,以期得出围绝经期综合征各证型特异性,综合性的诊断标准,有待我们进一步研究和探讨。目前对围绝经期综合征的治疗主要有以下几种常见的形式：辨证论治、辨病结合辨证治疗、专方（验方、经方）治疗、单味草药治疗等。辨证论治中由于辨证分型种类繁多，不利于针对疾病的特异性进行临床及药效学方面的研究。辨病结合辨证，运用专方专药治疗日益受到人们的重视。专方专药是在大量临床实践的基础上总结出来的，目前主要有经方和验方两种形式。运用于围绝经期综合征的经方主要有六味地黄丸、杞菊地黄丸、知柏地黄丸、左归丸（饮）、肾气丸、逍遥丸、佳蓉片、归肾丸、更年安等。

熟地250克 山药120克 山茱萸肉120克 茯苓120克 当归90克 枸杞120克 杜仲(盐水炒)120克 菟丝子(制)120克 。具有滋阴养血，填精益髓。用于肾水不足，腰酸脚软，精亏血少，头 晕耳鸣之功效。而针对肾阴亏虚、水不涵木、肝木失养、可致肝阳偏亢，心神失养，心肾不交，导致的潮热汗出、头晕耳鸣、腰膝酸软、心烦易怒、失眠健忘更年期的症状效果不显著。

发明内容

一种治疗和/或预防更年期综合症的药物，其特征在于，按质量份数计，每1000g药物中含有如下的成分：

白芍300-400份 熟地黄 200-300份 枸杞子 200-300份

黄芪 300-400份 淫羊藿 300-400份 钩藤 300-400份

合欢皮 200-300份 茯苓 200-300份 牡蛎 400-600份

进一步地，每1000份药物中含有如下的成分：

白芍 333.3份 熟地黄 250份 枸杞子 250份

黄芪 333.3份 淫羊藿 333.3份 钩藤 333.3份

合欢皮 250份 茯苓 250份 牡蛎 500份

本发明还提供一种制备治疗和/或预防更年期综合症的药物的方法，其步骤如下：

以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量10-20倍量的60-80%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次1-2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味。

上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量15-30量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次1-2小时，合并水煎液，滤过，

滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达40-60%，搅匀，放置48小时，滤过。

滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，在进口风温为150～180℃，出口风温70～100℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉。取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

进一步地，该方法的步骤如下：

以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量15倍量的70%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味。

上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量20倍量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次1.5小时，合并水煎液，滤过，

滤液浓缩至相对密度为1.05～1.08（60℃），冷却，加乙醇至含醇量达50%，搅匀，放置48小时，滤过。

滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至相对密度1.05～1.08（50℃），加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉。取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

确定喷雾干燥条件为：药材提取液经滤过、浓缩至相对密度1.05～1.08（50℃），于进口风温165～175℃，塔内负压300～350Pa，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥，所得喷干粉末呈黄棕色至棕色疏松的固体粉末，含水量在5%以内。

制剂颗粒成型工艺为：浸膏粉∶糖粉∶糊精（1∶0.7∶0.7），以85%乙醇湿法制颗粒，制得的颗粒60℃干燥至颗粒含水量为4%左右，整粒，即得。

以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量15倍量的70%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味。上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量20倍量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次1.5小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.08（60℃），冷却，加乙醇至含醇量达50%，搅匀，放置48小时，滤过。滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至相对密度1.05～1.08（50℃），加入糊精适量，在进口风温为165～175℃，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉。取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

更年期综合症病理基础主要为肾阴亏虚。这与本病证型中阴虚型最多见的综合报导也是一致的。肾阴亏虚、水不涵木、肝木失养、可致肝阳偏亢，又肾水不能上济于心，致心神失养，心肾不交，临床可见潮热汗出、头晕耳鸣、腰膝酸软、心烦易怒、失眠健忘等症状。针对其主要病理基础，本发明提出了滋肾养阴，平肝宁心的治疗大法。在长期临床实践的基础上，根据肝肾阴虚型围绝经期综合征的病理特点，以《景岳全书.新方八阵.补阵》中的归肾丸为基本方，经过临床实践筛选本发明药物的组方：熟地、枸杞子、白芍、生牡蛎、钩藤、合欢皮、黄芪、茯苓，淫羊藿。滋肾与宁心相结合能明显缓解和消除本病主症，相应改善性激素水平，取得较好疗效。

方中以熟地、枸杞子、白芍为君药，以滋养肝肾之阴，生牡蛎、钩藤、合欢皮平肝宁心，黄芪、茯苓健脾培土，以后天而养先天，并佐以淫羊藿以求“善补阴者，必阳中求阴，则阴得阳助，泉源不竭”之意。淫羊藿有明显的促性腺机能，具有激素样作用，能提高性腺细胞对促性腺激素的反应，能明显增加大鼠垂体前叶、卵巢和子宫的重量；熟地、牡蛎、黄芪、白芍、枸杞子对免疫系统均有积极的促进作用，且后四者有抗氧化作用，可以延缓组织细胞的衰老；牡蛎、钩藤又镇静作用，且后者有抗心律失常作用。经临床观察表明，本发明药物治疗肾阴虚型更年期综合征，滋肾与宁心相结合能明显缓解和消除本病主症，达到改善卵巢功能，延缓卵巢衰老，调节内分泌，提高免疫力，改善精神神经症状，使神经-内分泌-免疫网络失衡状态得到纠正，使临床症状得到改善。本发明药物以调节性腺轴为出发点，通过发挥机体内在的潜能，使阴阳失调的机体达到新的动态平衡。

具体实施方式

实施例1

处方

白芍300g 熟地黄 200g 枸杞子200g

黄芪 300g 淫羊藿 300g 钩藤 300g

合欢皮 200g 茯苓 200g 牡蛎 400g

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量10倍量的60%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量15量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次1-2小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达40%，搅匀，放置48小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，在进口风温为150～180℃，出口风温70～100℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

实施例2

处方

白芍400g 熟地黄 300g 枸杞子 300g

黄芪 400g 淫羊藿 400g 钩藤 400g

合欢皮 300g 茯苓 300g 牡蛎 600g

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量20倍量的80%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量30量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次2小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达60%，搅匀，放置48小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，在进口风温为150～180℃，出口风温70～100℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

实施例3

白芍 333.3g 熟地黄 250g 枸杞子 250g

黄芪 333.3g 淫羊藿 333.3g 钩藤 333.3g

合欢皮 250g 茯苓 250g 牡蛎 500g

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量15倍量的70%乙醇分三次回流提取（三次用量分别为总量的40%、30%，30%），每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量20倍量的水分二次煎煮（二次用量分别为总量的60%、40%），每次1.5小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.08（60℃），冷却，加乙醇至含醇量达50%，搅匀，放置48小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至相对密度1.05～1.08（50℃），加入糊精适量，喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

对比例1

白芍 333.3g 熟地黄 250g 枸杞子 250g

黄芪 333.3g 钩藤 333.3g 合欢皮 250g

茯苓 250g 牡蛎 500g

参照实施例3的方法制备，不添加淫羊藿。

对比例2

白芍 333.3g 熟地黄 250g 枸杞子 250g

黄芪 333.3g 淫羊藿 333.3g 牡蛎 500g

合欢皮 250g 茯苓 250g

参照实施例3的方法制备，不添加钩藤。

对比例3

白芍 333.3g 熟地黄 250g 枸杞子 250g

黄芪 333.3g 淫羊藿 333.3g 钩藤 333.3g

合欢皮 250g 茯苓 250g

参照实施例3的方法制备，不添加牡蛎。

中医药治疗围绝经期综合征的研究方向主要体现在两个方面：辨证分型的相关微观指标的研究以及验方（经方）的临床与实验研究。中医辨证与客观检测指标的相关性研究：围绝经期综合征的病理生理基础是卵巢功能的下降，故中医辨证与客观检测指标的相关性研究中，主要观察性激素水平的变化，并涉及其他检测指标。肝郁型的雌二醇水平高于肾虚以及肝郁肾虚型。阴虚阳亢型的雌二醇水平明显降低，卵泡刺激素（FSH）明显升高。阴虚火旺型的血清黄体生成素（LH）、FSH水平明显高于单纯阴虚组。围绝经期妇女可出现植物神经功能紊乱，经检测发现，围绝经期阴虚心火旺者尿中儿茶酚胺升高，阴虚肝火旺者尿中17-羟皮质类固醇增高。因血管舒缩症状为围绝经期综合征的典型症状，在中医辨证中多数为阴虚型，许小凤等通过对血管舒缩因子血管内皮素（ET）和一氧化氮（NO）的测定发现 ET/NO 在阴虚组中低于正常组以及阳虚组，且与症状表现程度成反比。围绝经期妇女由于性激素缺乏而发生脂质代谢紊乱，实验结果表明：更年安对正常大鼠血清中血脂含量无明显影响,而对高脂血症大鼠不但能显著降低血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时能降低血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,提高血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量。对有效方药治疗机制的研究较为深入的是围绕中药对神经-内分泌-免疫网络体系的调控作用。网络的功能性环路主要通过神经肽、激素、免疫因子三者之间的相互作用而构成，任何环节的紊乱与失调都会直接或间接地影响其他环节的功能。许多临床和动物实验结果显示围绝经期患者的神经、内分泌、免疫系统发生变化，而通过补肾或（和）疏肝、健脾、活血等中药的治疗，可起到很好的调节作用。

试验例1对自然衰老型围绝经期综合征大鼠的影响

1.分组及给药

选用老龄雌性SD大鼠，经阴道细胞涂片检查15天，呈现不规则的动情周期确定为围绝经期综合征大鼠。阴道涂片检查：左手按常规捉拿大鼠，右手用棉莶沾少许生理盐水，轻轻插入阴道1cm左右，微微转动后取出，并涂于玻片上，吹干后用亚甲基蓝染液染色10min，固定后冲洗，并进行镜检。

将合格大鼠按体重随机分为5组：每组10只：（1）模型组：生理盐水10ml/kg；(2)更年安片组：0.55g/kg；（3）实施例1组4）实施例2组（5）实施例3组。另选10只3月龄雌性SD大鼠，体重180～220g，作为（6）正常对照组（青年对照组）：生理盐水10ml/kg。各组大鼠按上述剂量以10ml/kg灌胃给药，每日1次，连续30～34日（以保证阴道涂片检查处于动情间期）。

2.测定指标及方法

在连续给药30～34日的第二天，大鼠阴道细胞涂片检查，选取处于动情间期（镜下可见大部分白细胞，偶可见较小的有核扁平上皮细胞）的大鼠进行实验。

血清性激素水平

大鼠眼眶取血5ml，分离血清，采用化学发光法测定雌二醇（E2）；用放免法测定促滤泡生成激素（FSH）、促黄体生成激素（LH）。

脏器系数

摘取卵巢、子宫、垂体、肾上腺，并称重，计算脏器系数（mg/g）。

卵巢、子宫的组织学检查

将大鼠卵巢和子宫用福尔马林固定、石蜡包埋，切片，HE染色。光学显微镜观察下列指标：

（1）卵巢内各期卵泡数，包括原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、闭锁卵泡数及黄体数。

（2）子宫上皮层、固有层、肌层的病理变化。病理观察指标为:①子宫内膜上皮细胞形状有无变性坏死；②固有层腺体数目有无减少，纤维组织有无增生；③肌层有无炎症，血管有无增生等病变。根据病变由轻到重的程度分别记为0－4分，积分标准为：无病变记为0分；极轻度记为1分；轻度记2分；中度病变记3分；重度病变记4分。肌层血管增生的程度也由轻到重记为0－4分。累加所有分数，计算每组动物的均分值。

3.实验结果

3.1 血清性激素水平

表1 本大明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠血清E₂、FSH 、LH的影响

^△△p<0.01 与正常对照组比较；*p<0.05 **p<0.01 与模型组比较

实验显示：自然衰老型围绝经期综合征大鼠血清E2水平下降，FSH、LH水平升高，与正常对照组比较有显著性差异（p<0.01）。本发明实施例1、2和3组均能明显增加自然衰老型围绝经期综合征大鼠血清E2水平，降低血清FSH、LH水平，与模型组比较有显著性差异（p<0.05，0.01）。表明芍杞本发明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠血清性激素水平有明显改善作用。

脏器系数

表2 本发明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠子宫、卵巢、垂体、肾上腺的影响

^△△p<0.01 与正常对照组比较；*p<0.05 **p<0.01 与模型组比较

实验显示：自然衰老型围绝经期综合征大鼠卵巢、子宫、肾上腺明显萎缩，与正常对照组比较有显著性差异（p<0.05，0.01），垂体也有萎缩倾向。本发明实施例1、2和3的药物能明显增加大鼠卵巢、子宫、肾上腺的重量，增加脏器系数，与模型组比较有显著性差异（p<0.05，0.01），同时亦能增加垂体系数。表明本发明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠卵巢、子宫、肾上腺等脏器的萎缩有一定抑制作用。

卵巢、子宫组织学检查

实验显示：①自然衰老型围绝经期综合征大鼠卵巢早衰的形态学表现为各期卵泡数量减少，包括原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡。黄体数量减少，发育不好。而在使用芍杞本发明药物后能改善卵巢内卵泡发育的状况，初级卵泡、次级卵泡数量、黄体数量较模型组增多，发育良好。②自然衰老型围绝经期综合征大鼠子宫病变主要表现为内膜固有层腺体数目减少，间质纤维组织增生，肌层血管不同程度扩张。本发明3组药物有减轻子宫萎缩性病变的作用，其中实施例2和3组与模型组比较具有显著性差异（p<0.05，0.01）。

Ⅰ卵巢

①正常对照组：

大鼠卵巢由皮质和髓质组成。皮质部可见各期卵泡，包括原始卵泡、初级卵泡及处于不同成熟期的次级卵泡，多数大鼠卵泡发育正常，黄体体积大，黄体细胞发育正常。髓质部富含血管及疏松结缔组织。卵巢具体表现如下：

原始卵泡数：7只大鼠原始卵泡数在1个到5个之间(包括5个)、3只在5个以上。

初级卵泡数：9只大鼠卵巢内有5个以下的（包括5个）初级卵泡，1只为6个。

次级卵泡数：7只大鼠有5个以下的（包括5个）次级卵泡，其中3只多于5个。

黄体数：黄体发育正常，3只黄体数在5个以下（包括5个）。5只在6到10个（包括10个），2只10个以上。黄体细胞体积大，呈多角形，核大而圆，发育良好。

②模型组：本组原始卵泡，生长卵泡，黄体数目较正常组减少。

原始卵泡数：2只大鼠原始卵泡数1个，1只有7个，7只未见明显原始卵泡。

初级卵泡数：8只大鼠卵巢内未查见初级卵泡，2只各有1个。

次级卵泡数：1只大鼠有2个次级卵泡，9只未见明显的次级卵泡。

黄体数：6只黄体数目为1－5个，3只有5个以上，1只未见明显黄体。出现的黄体部分呈萎缩状态，中央部有较为明显的退行性变。

③更年安片组：本组大鼠各级卵泡及黄体数较正常组少，但较模型组增多。

原始卵泡数：3只原始卵泡数分别为1个、2个、9个，7只未见明显原始卵泡。

初级卵泡数：3只卵巢内有1－3个初级卵泡，7只未见明显原始卵泡。

次级卵泡数：6只卵巢内有1－5个次级卵泡，4只未见明显次级卵泡。

黄体数：5只黄体数目为1－5个，4只有6－8个，1只未见明显黄体。部分黄体细胞发育良好，部分有萎缩现象，发育不佳。

④实施例1组：

原始卵泡数：7只大鼠原始卵泡数在1－5个之间，3只未见明显的原始卵泡。

初级卵泡数：5只有1－2个初级卵泡，5只未见明显的初级卵泡。

次级卵泡数：5只有1－2个次级卵泡，5只未见明显的次级卵泡。

黄体数：6只黄体数目为1－5个，4只在5个以上。黄体细胞发育较模型组好，但较正常组差。

⑤实施例2组：各期卵泡及黄体数量较模型组增多。

原始卵泡数：3只大鼠原始卵泡数在1－2个之间，7只未见明显的原始卵泡。

初级卵泡数：5只有1－2个初级卵泡，5只未见明显的初级卵泡。

次级卵泡数：7只有1－3个次级卵泡，3只未见明显的次级卵泡。

黄体数：7只黄体数目为1－5个，3只在6个以上。黄体细胞发育较模型组好。

⑥实施例3组：本组初级卵泡，次级卵泡及黄体数量较模型组增多，具体如下：

原始卵泡数：1只大鼠原始卵泡数为1个，2只有6个，7只未见明显的原始卵泡。

初级卵泡数：6只有1－2个初级卵泡，4只未见明显的初级卵泡。

次级卵泡数：7只有1－3个次级卵泡，3只未见明显的次级卵泡。

黄体数：3只黄体数目各有4个，2只有7个，5只多于10个。黄体细胞发育较模型组好。

表3 本发明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠卵巢病理变化的平均积分值结果

^△△p<0.01 与正常对照组比较；*p<0.05 **p<0.01 与模型组比较

Ⅱ子宫

①正常对照组：

正常大鼠子宫由内膜层、肌层及外膜组成。内膜上皮为单层柱状，固有层内见子宫腺体、血管及淋巴管，并有少量嗜酸性白细胞。肌层内层为环行肌，外层为纵行肌，两层间可见少量管壁较厚、直径较大的血管。

本组1只大鼠固有层纤维组织轻度增生。其它未见明显病变。

②模型组：

子宫壁三层结构尚清楚，内膜上皮细胞为柱状，但固有层腺体数目减少，间质纤维组织增生，肌层血管不同程度扩张。

子宫内膜层：内膜上皮细胞为柱状，变性、坏死不明显。

固有层腺体减少，其中轻度2只，中度7只，重度1只。

固有层间质纤维组织增生，其中轻度4只，中度4只，重度2只。

肌层：肌细胞无明显变性、坏死，但间质血管不同程度扩张，其中轻度扩张5只，中度2只，重度3只。

③更年安片组：本组病变程度轻于模型组。

子宫内膜层：内膜上皮细胞8只为柱状，2只为低柱状，变性、坏死不明显。

固有层腺体减少，其中轻度2只，中度8只。

固有层间质纤维组织增生，其中轻度5只，中度5只。

肌层：6只大鼠间质血管不同程度扩张，其中轻度扩张4只，中度1只，重度1只。

④实施例1组：

子宫内膜层：内膜上皮细胞为柱状，9只为柱状，1只为低柱状，变性、坏死不明显。

固有层腺体减少，其中轻度4只，中度3只，重度3只。

固有层间质纤维组织增生，其中轻度7只，中度2只，重度1只。

肌层：5只大鼠间质血管不同程度扩张，其中轻度扩张1只，中度2只，重度2只，其它未见异常。

⑤实施例2组：本组病变程度较模型组减轻，较大剂量组略重。

子宫内膜层：上皮细胞8只为柱状，1只为立方，1只内膜表面不平。1只内膜有鳞状化生。

固有层腺体减少，其中轻度4只，中度3只，重度1只，2只腺体无明显减少。1只大鼠内膜腺体腔内有中性粒细胞，为腺腔积浓。

固有层间质纤维组织增生，其中轻度7只，中度3只。

肌层：6只大鼠间质血管不同程度扩张，其中轻度扩张2只，中度4只，4只无明显扩张。

⑥实施例3组：本组病变程度较模型组明显减轻。

子宫内膜层：上皮细胞7只为柱状，2只为立方，1只为低立方，变性、坏死不明显。

固有层腺体减少，其中轻度4只，中度3只，重度1只，2只腺体无明显减少。

固有层间质纤维组织增生，其中轻度5只，中度4只，1只不明显。

肌层：6只大鼠间质血管不同程度扩张，其中轻度扩张2只，中度3只，5只无明显扩张。

表4 本发明药物对自然衰老型围绝经期综合征大鼠子宫病变综合评分值结果

^△△p<0.01 与正常对照组比较；*p<0.05 **p<0.01 与模型组比较

4.1 临床效果

治疗方法：治疗组口服本发明药物口服液（熟地、枸杞子、白芍、生牡蛎、钩藤、合欢皮、黄芪、茯苓，淫羊藿）制成，10ml/支，每ml含生药量为1.7克。服药方法：口服，每日三次，每次1支，连续服用3个月。对照组口服利维爱，由荷兰欧加农公司生产，每片剂量是2.5mg。服药方法：口服，隔日一次，每次2.5mg，连续服用3个月。

采用本制剂治疗肾阴虚型更年期综合征患者103例，治疗组70例，对照组33例，连续服药3个月，结果表明：治疗组痊愈10例，显效45例，有效11例，无效4例，愈显率为78.57%，总有效率为94.29%；对照组临床痊愈2例，显效15例，有效12例，无效4例，愈显率为51.51%，总有效率为87.88%。临床上将103例肾阴虚型更年期综合征患者，随机分为本发明药物治疗组70例，利维爱对照组33例。治疗3个月，通过对临床症状、性激素、骨密度、肝肾功能、血脂等观察疗效及安全性，提示本发明药物愈显率为78.57%，总有效率为94.29%，疗效优于对照组，且临床运用未观察到明显的不良反应。动物试验表明，本发明药物能显著提高更年期大鼠血清雌二醇的水平，及大鼠造模后的血清5-HIAA水平，能有效调整植物神经递质的含量,使其达到平衡水平。

试验例2 制备工艺的研究

根据方中白芍等药物成分理化性质，对白芍、黄芪、钩藤、合欢皮进行醇提，经HPLC测定法样品中芍药苷、黄芪甲苷含量，以芍药苷、黄芪甲苷、浸出物为指标，考察乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间等因素不同水平对提取效率的影响。综合芍药苷、黄芪甲苷方差分析结果，结合实际生产，得出最佳醇提工艺条件为：加15倍量的70%乙醇分三次提取，每次1.5小时。并进行了醇提工艺的验证，验证结果表明：该工艺稳定、可行。

（1）白芍、黄芪、钩藤、合欢皮醇提后的药渣和熟地黄、枸杞子、淫羊藿、茯苓、牡蛎等水煎煮工艺研究

根据方中熟地黄等药物成分理化性质，对熟地黄、淫羊藿等及醇提药渣进行水提，以HPLC法测定正交样品中淫羊藿苷含量、经可见—紫外分光光度法测定正交样品中多糖含量，以淫羊藿苷、总多糖、浸出物为指标，考察加水量、煎煮时间、提取次数等因素不同水平对提取效率的影响。结果经过方差分析，得出最佳水提工艺条件为：加20倍量的水分二次煎煮，每次1.5小时。并进行了水提工艺的验证，验证结果表明：该工艺稳定、可行。

（2）水提液醇沉工艺的研究

为了减少颗粒剂的服用剂量，改善其溶化性、澄明度，实验沿用乙醇沉淀进行分离纯化。取白芍、黄芪、钩藤、合欢皮、熟地黄、枸杞子、淫羊藿等九味药材，按上述最佳工艺进行醇提、水提，水提液浓缩至1∶1，分别采取不加乙醇醇沉、40%醇沉、50%醇沉、60%醇沉的方法处理，所得澄清液减压回收乙醇并浓缩成稠膏。经测定淫羊藿苷及多糖的含量。结果表明：40%乙醇和60%乙醇醇沉对淫羊藿苷与处理前相比均有显著性影响，而50%乙醇醇沉与处理前相比，对淫羊藿苷未见显著性影响；60%乙醇醇沉对多糖与处理前相比有显著性影响，而40%乙醇和50%乙醇醇沉与处理前相比，对多糖均未见显著性影响。考虑到活性成分的提取以及生产成本，兼顾本制剂的服用剂量、颗粒的溶化性、澄明度及成型等因素，确定水提液浓缩后加乙醇至醇含量达50%为最佳。

（3）浓缩、干燥工艺对芍药苷及淫羊藿苷含量的影响

以芍药苷及淫羊藿苷的含量为指标，比较0.08Mpa，70℃减压薄膜浓缩和喷雾干燥前后对活性成分的影响。结果减压浓缩前后比较（t检验），未见显著性差异，说明采用薄膜浓缩方法可行。

根据生产预试验选择本制剂喷雾干燥的相关参数为：浓缩液相对密度1.08（50℃热测），喷雾干燥条件为进口风温165～175℃、塔内负压300～350Pa、出口风温85～90℃。在上述条件下制得喷干粉末呈黄棕色疏松的固体粉末，同时进行干燥前后芍药苷、淫羊藿苷含量比较及含水量的测定。结果表明，喷干前后比较（t检验），未见显著性差异，说明采用喷雾干燥方法可行。确定喷雾干燥条件为：药材提取液经滤过、浓缩至相对密度1.05～1.08（50℃），于进口风温165～175℃，塔内负压300～350Pa，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥，所得喷干粉末呈黄棕色至棕色疏松的固体粉末，含水量在5%以内。

（4）颗粒成型工艺研究

根据颗粒剂成型工艺要求对辅料、软材制备及深化性进行考察。浸膏粉、糖粉、糊精按1∶0.5∶0.5；1∶0.6∶0.6；1∶0.7∶0.7三种比例，分别都以80%、85%、90%的乙醇制粒，结果浸膏粉、糖粉、糊精按1∶0.5∶0.5；1∶0.6∶0.6的比例用三种不同浓度的乙醇制粒，粒度均达不到要求。而浸膏粉、糖粉、糊精按1∶0.7∶0.7比例，用80% 乙醇制得的软材较粘、易结块，制粒过筛均较为困难，90%乙醇制得的软材较松散、颗粒成粉状，颗粒粒度达不到药典规定的要求，但用85%乙醇制颗粒，制得的软材软硬度适中，制粒过筛较容易，粒度亦能达到药典规定的要求。故确定本制剂颗粒成型工艺为：浸膏粉∶糖粉∶糊精（1∶0.7∶0.7），以85%乙醇湿法制颗粒，制得的颗粒60℃干燥至颗粒含水量为4%左右，整粒，即得。

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。

Claims (8)

1.一种治疗和/或预防更年期综合症的药物，其特征在于，按质量份数计，含有如下的成分：

白芍300-400 份 熟地黄 200-300 份 枸杞子 200-300 份

黄芪 300-400 份 淫羊藿 300-400 份 钩藤 300-400 份

合欢皮 200-300 份 茯苓 200-300 份 牡蛎 400-600 份

其制备方法步骤如下：

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量10-20倍量的60-80% 乙醇分三次回流提取，三次乙醇用量分别为总量的40%、30%、30%，每次1-2 小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量15-30量的水分二次煎煮，二次水用量分别为总量的60%、40%，每次1-2 小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达40-60%，搅匀，放置48 小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，在进口风温为150～180℃，出口风温70～100℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得；

其特征还在于该药物对自然衰老型绝经期综合征性激素水平有明显改善作用。

2.如权利要求1所述的药物，其特征在于，按质量份数计，药物中含有如下的成分：

白芍 333.3 份 熟地黄 250 份 枸杞子 250 份

黄芪 333.3 份 淫羊藿 333.3 份 钩藤 333.3 份

合欢皮 250 份 茯苓 250 份 牡蛎 500 份

其制备方法步骤如下：

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量15 倍量的70%乙醇分三次回流提取，三次乙醇用量分别为总量的40%、30%，30%，每次1.5 小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量20倍量的水分二次煎煮，二次水用量分别为总量的60%、40%，每次1.5 小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达50%，搅匀，放置48 小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得；

其特征还在于该药物对自然衰老型绝经期综合征性激素水平有明显改善作用。

3.制备如权利要求1或2所述的治疗和/或预防更年期综合症的药物的方法，其步骤如下：

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量10-20倍量的60-80% 乙醇分三次回流提取，三次乙醇用量分别为总量的40%、30%、30%，每次1-2 小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量15-30量的水分二次煎煮，二次水用量分别为总量的60%、40%，每次1-2 小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达40-60%，搅匀，放置48 小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，在进口风温为150～180℃，出口风温70～100℃条件下喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

4.根据权利要求3 所述的方法，其特征在于，其步骤如下：

1）醇提，以上九味，白芍、钩藤、黄芪、合欢皮四味，加饮片总量15 倍量的70%乙醇分三次回流提取，三次乙醇用量分别为总量的40%、30%，30%，每次1.5 小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至无醇味；

2）水提，上述药渣与熟地黄、枸杞子、牡蛎、茯苓、淫羊藿合并，加饮片总量20倍量的水分二次煎煮，二次水用量分别为总量的60%、40%，每次1.5 小时，合并水煎液，滤过；

3）醇沉，滤液浓缩至60℃相对密度为1.05～1.08，冷却，加乙醇至含醇量达50%，搅匀，放置48 小时，滤过；

4）制浸膏粉，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，加入糊精适量，喷雾干燥成干浸膏粉；

5）制粒，取浸膏粉，加适量糖粉、糊精混匀进行湿法制粒，干燥，即得。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，喷雾干燥条件为：药材提取

液经滤过、浓缩至50℃相对密度1.05～1.08，于进口风温165～175℃，塔内负压300～350Pa，出口风温85～90℃条件下喷雾干燥，得固体粉末。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所得固体粉末含水量在5% 以内。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，制剂颗粒工艺为，浸膏粉∶糖

粉∶糊精为1 ∶ 0.7 ∶ 0.7，以85%乙醇湿法制颗粒，整粒，即得。

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，制剂颗粒工艺为，制得的颗粒

60℃干燥至颗粒含水量为4%。