CN103931983B - 一种蜂蜜酵素产品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蜂蜜酵素产品及其制备方法。本发明是先在蜂蜜中加入果胶酶，然后加入植物乳杆菌活化液进行第一梯式发酵，加入青春双岐乳杆菌活化液进行第二梯式发酵，加入嗜酸乳杆菌活化液进行第三梯式发酵，最后当其总酸值达到10g/L值时，密封状态保持温度25℃，窖贮120天；然后300目过滤，在600公斤压力的匀质机进行匀质后，得到蜂蜜酵素产品。本发明的蜂蜜酵素产品口感酸甜可口，远胜蜂蜜，而且具有增强人体免疫力、抗氧化延衰老、修复受损细胞防止癌变等保健功能；同时本品还含有大量的益生活性菌，具有增加人体益生菌群，排毒通肠的功效。
Description
技术领域
本发明具体涉及的是一种蜂蜜酵素产品及其制备方法。
背景技术
蜂蜜是一种不可多得的高级营养品，具有较强的保健功能的产品，但是糖类物质含量太高，平均约为70%左右，占干物质的99%。目前市场上有许多对蜂蜜进行深加产品，全部都是通过物理稀释制作成蜂蜜饮料或通过酵母、醋酸菌发酵制备蜂蜜醋饮料。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种蜂蜜酵素产品及其制备方法。
本发明的技术方案如下：
一种蜂蜜酵素产品的制备方法，其步骤如下：
（1）将采集的新鲜蜂蜜过滤去杂质测定含水值，然后加入0.5%wt的花粉，加水调至含水值为60%wt，加入0.01%wt食盐；将温度升至75℃，保持30分钟，密封，再将温度降至40℃，加入50mg/L果胶酶；
（2）将（1）中制得的混合物的1/5转入发酵罐中，然后加入体积百分比为4%的植物乳杆菌活化液，充入CO2，密闭，37℃发酵24小时，其为第一梯式发酵；
（3）将混合物剩下的1/3再转入发酵罐中，加入体积百分比为4%的青春双岐乳杆菌活化液，密闭，37℃发酵24小时，其为第二梯式发酵；
（4）将剩下的全部混合物转入发酵罐中，加体积百分比为2%的嗜酸乳杆菌活化液，密闭，37℃发酵24小时，其为第三梯式发酵；
（5）在密闭状态下搅拌30min，保持37℃，并每天测定其总酸值，当其达到10g/L值时，密封状态保持温度25℃，窖贮120天；然后300目过滤，在600公斤压力的匀质机进行匀质后，得到蜂蜜酵素产品。
所述的植物乳杆菌活化液、青春双岐乳杆菌活化液和嗜酸乳杆菌活化液，其制备方法相同；具体为：1）用0.3-0.4mlMRS液体培养基将冻干菌体溶解呈悬浮状；取0.2ml菌体悬浮液，移植于琼脂斜面/平板培养基上作为继代培养之用；剩余的菌液注入10mlMRS液体培养基内，在37℃下培养48小时；然后将培养后的菌液注入100mlMRS液体培养基中，在无氧状态下，37℃盖特厌氧培养培养箱中培养22小时；2）用纯蜂蜜、水配制含糖量为20%（W/V）的培养液2000ml，然后加入质量体积比为1%乳清粉、0.5%花粉和1‰食盐，升温至75℃、30分钟后将温度降至40℃，然后加入1）中培养后的100mLMRS液体培养基，37℃下厌氧培养48小时，即得菌种活化液。
所述的MRS液体培养基为乳清培养基，其成份按质量体积百分比计算为：2％乳清粉、1.5％牛肉膏、1.5％蛋白胨、0.058％硫酸镁、0.025％硫酸锰、0.22％乙酸钠、0.2％磷酸氢二钾。
所述的制备方法制得的蜂蜜酵素产品。
所述菌种GIM1.268嗜酸乳杆菌、ACCC00217青春双岐杆菌、CICC21786植物乳杆菌购于北京纳创联生物技术研究院。
本发明的生产的蜂蜜酵素产品，具有如下特点和效果：（1）通过对蜂蜜的乳酸发酵，大大降低了糖份含量，本产品实测其含糖量为30%，相对于蜂蜜的70%以上的含糖量大大降低了，而且口感酸甜可口，远胜蜂蜜。（2）本产品其营养成份发生了巨大提升，特别是增加了许多的益生酶类物质，其中含有SOD酶，氨基酸含量是蜂蜜的4倍。从而具有了增强人体免疫力、抗氧化延衰老、修复受损细胞防止癌变等保健功能。（3）本品还含有大量的益生活性菌，具有增加人体益生菌群，排毒通肠的功效。
具体实施方式
以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。
实施例
一、采集纯天然蜂蜜（产于长白山的椴树蜜），通过过滤去掉杂质，测定其含水量为30%。
二、根据计算，生产10000升蜂蜜酵素产品，称取5600公斤椴树蜜加入配料罐中，然后加入花粉28公斤，加入水至10000升时止。
三、升温至75℃，保持30分钟，密封，并降温至40℃后加入50mg/L的果胶酶，即加入500克果胶酶。
四、在配料前两天制备植物乳杆菌活化液80升。
1）用浸过70％酒精的脱脂棉擦净植物乳杆菌冻干安瓿管。
2）用火焰将安瓿管顶端加热。
3）滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。
4）用锉刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。
5）用无菌吸管，吸取0.3-0.4mlMRS液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。
6）取0.2ml菌体悬浮液，移植于指定的琼脂斜面/平板培养基上作为继代培养之用。剩余的菌液注入MRS液体培养基内（10ml），然后在37℃的温度下培养48小时。
7）乳清培养基：（MRS）
培养基配比为：2％乳清粉（w/v），1.5％牛肉膏（w/v），1.5％蛋白胨（w/v），0.058％硫酸镁（w/v），0.025％硫酸锰（w/v），0.22％乙酸钠（w/v），0.2％磷酸氢二钾（w/v）。
8）将6）中培养的10ml培养液注入100mlMRS液体培养基中，在无氧状态下，37℃盖特厌氧培养培养箱中，培养22小时。
9）用纯蜂蜜、水配制含糖量为20%（W/V）的培养液2000ml，其中加入乳清粉1%（W/V）、花粉0.5%（W/V）和食盐1‰（W/V）。升温至75℃，30分钟后，将温度降至40℃，然后加入8）中培养后的100mlMRS液体培养基。
10）在37℃温度下，厌氧培养48小时后，即得植物乳杆菌种子液。
11）在种子罐内用纯蜂蜜、水配制含糖量为20%（W/V）的培养液80升，其中加入乳清粉1%（W/V）、花粉0.5%（W/V）食盐1‰（W/V）。升温至75℃、30分钟后，将温度降至40℃，加入10）中的植物乳杆菌种子液，培养48小时即植物乳杆菌活化液。（依次按间隔1天制备青春双岐杆菌活化液190升、间隔2天制备嗜酸乳杆菌活化液200升）
五、将配料罐中的发酵液2000升打入灭菌后发酵罐中，加入80升植物乳杆菌活化液。
六、在罐内充入CO2发酵罐内，密闭，保持温度37℃、静置发酵24小时。
从配料罐中转入2666升发酵液至发酵罐中，加入190升的青春双岐杆菌活化液。密闭、保持温度37℃、静置发酵24小时。
八、将配料罐中的全部发酵液转入发酵罐中，加入205升嗜酸乳杆菌活化液，密闭，保持温度37℃、静置发酵24小时。
九、在密闭状态下，搅拌30分钟。保持37℃，并保持每天测定其总酸值，当达到10克/升时，保持25℃窖贮至少120天。
十、开罐300目过滤，在600公斤压力的匀质机进行匀质后，得到蜂蜜酵素产品。
表1蜂蜜与蜂蜜酵素产品的比较
| 项目 | 蜂蜜 | 蜂蜜酵素 |
| 糖份含量 | 70% | 30% |
| 乳酸菌数含量 | 无 | 800亿cfu/100ml |
| 总酸值 | 低于1g/L | 10g/L |
应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (3)
1.一种蜂蜜酵素产品的制备方法，其特征是，其步骤如下：
(1)将采集的新鲜蜂蜜过滤去杂质测定含水值，然后加入0.5％wt的花粉，加水调至含水值为60％wt，加入0.01％wt食盐；将温度升至75℃，保持30分钟，密封，再将温度降至40℃，加入50mg/L果胶酶；
(2)将(1)中制得的混合物的1/5转入发酵罐中，然后加入体积百分比为4％的植物乳杆菌活化液，充入CO2，密闭，37℃发酵24小时，其为第一梯式发酵；
(3)将混合物剩下的1/3再转入发酵罐中，加入体积百分比为4％的青春双岐乳杆菌活化液，密闭，37℃发酵24小时，其为第二梯式发酵；
(4)将剩下的全部混合物转入发酵罐中，加体积百分比为2％的嗜酸乳杆菌活化液，密闭，37℃发酵24小时，其为第三梯式发酵；
(5)在密闭状态下搅拌30min，保持37℃，并每天测定其总酸值，当其达到10g/L值时，密封状态保持温度25℃，窖贮120天；然后300目过滤，在600公斤压力的匀质机进行匀质后，得到蜂蜜酵素产品；
所述植物乳杆菌活化液、青春双岐乳杆菌活化液和嗜酸乳杆菌活化液，其制备方法相同；具体为：1)用0.3-0.4mlMRS液体培养基将冻干菌体溶解呈悬浮状；取0.2ml菌体悬浮液，移植于琼脂斜面/平板培养基上作为继代培养之用；剩余的菌液注入10mlMRS液体培养基内，在37℃下培养48小时；然后将培养后的菌液注入100mlMRS液体培养基中，在无氧状态下，37℃亨盖特厌氧培养培养箱中培养22小时；2)用纯蜂蜜、水配制含糖量为20％的培养液2000ml，然后加入质量体积比为1％乳清粉、0.5％花粉和1‰食盐，升温至75℃、30分钟后将温度降至40℃，然后加入1)中培养后的100mLMRS液体培养基，37℃下厌氧培养48小时，即得菌种活化液。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述MRS液体培养基为乳清培养基，其成份按质量体积百分比计算为：2％乳清粉、1.5％牛肉膏、1.5％蛋白胨、0.058％硫酸镁、0.025％硫酸锰、0.22％乙酸钠、0.2％磷酸氢二钾。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法制得的蜂蜜酵素产品。
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