CN103919558B - 荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及痕量检测技术领域，具体公开了一种荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，该方法为一种利用荧光猝灭体系的“turn-on”效应即重新发出荧光而显现出潜在指纹的方法。先制备荧光猝灭体系，所述荧光猝灭体系的猝灭状态可被指纹成分破坏；然后将其喷、涂到各种物品上，有指纹的部分，其中的氯离子、氨基酸或者葡萄糖等指纹成分破坏所述荧光猝灭体系的猝灭状态，使荧光再现从而显现指纹；在特殊光照下透过滤光片或者在自然光照下直接拍照。本发明的优点在于方法简单、快速，而且在指纹细节不够清晰的时候，可以再使用常用的DFO、IND、茚三酮、硝酸银等继续显现指纹，即该方法还可用于指纹“标记”或者“示踪”。
Description
技术领域
本发明涉及痕量检测技术领域，具体涉及一种荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，该方法为一种利用荧光猝灭体系的“turn-on”效应即重新发出荧光而显现出潜在指纹的方法。
背景技术
指纹具有“因人而异、终身不变”的特点，据此可以锁定涉案人员，曾是“证据之王”。目前因为DNA技术的发展和普及，指纹与DNA并列“证据之王”。2012年5月30日，新修订的《居民身份证法》明确规定居民身份证登记项目包括指纹信息，2013年1月我国全面启动身份证登记指纹信息和停用一代证。因此，潜在指纹显现技术的研究仍然具有重要的应用价值。
室温下，能够在几分钟内显现潜在指纹的方法主要有粉末法、502熏（贴）显法、硝酸银法，这些方法各有其最佳应用领域，也有相应的缺点和局限。近年来，人们将纳米金属、量子点等新型材料试用于潜在指纹显现，这些材料通过与指纹成分的静电吸引、化学反应等作用，可以在指纹上富集或者沉积，在自然光或者特定波长的光照射下，显现出更加清晰的指纹。例如专利申请200910066558“金纳米粒子一步显现潜指纹”的方法，发明人使用葡萄糖修饰的金纳米粒子或蔗糖修饰的金纳米粒子，在一定的pH范围内与潜指纹中的成分发生相互作用，诱导金纳米粒子的沉积析出，从而清晰有效地显现潜指纹纹线。该方法简化了显现步骤，实现了一步显现潜指纹。在专利申请200710055254.3“显现潜在指纹的方法及其显现系统”中，发明人制备了CdTe荧光纳米粒子，利用ICP玻璃高效雾化器或超声雾化器将荧光纳米粒子溶液喷附到载有指纹的指纹载体表面，再用氰基丙烯酸酯熏蒸指纹载体表面形成指纹的加固膜以及采用紫外线荧光照相法获取荧光指纹图像，这些新方法也各有利弊。
我们注意到，已经有人先制备出荧光猝灭体系，然后将其与某种物质例如氯离子、葡萄糖等进行反应，利用荧光猝灭体系被破坏后发出的荧光即“turn-on”（荧光开关，荧光增强型）效应进行含量的分析。相对于荧光逐步猝灭的过程，“turn-on”效应更加明显，因为在一个黑暗的房间内开灯，即使灯光不强，其效果肯定比将已开着的灯光调暗更加明显。据此我们建立了自己的新思路：制备各种荧光猝灭体系，将其与指纹接触，当荧光猝灭体系被指纹成分破坏后，重新发出的荧光即可显现指纹。
经过试验，我们的设想得到了验证，目前该方法尚未见报道。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供了一种荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，该方法能在常温下几分钟内快速显现或者“标记”出各种物品上的指纹。
本发明的一种荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法的步骤如下：
先制备荧光猝灭体系，所述荧光猝灭体系的猝灭状态可被指纹成分破坏；然后将其喷、涂到各种物品上，有指纹的部分，其中的氯离子、氨基酸或者葡萄糖等指纹成分破坏所述荧光猝灭体系的猝灭状态，使荧光再现从而显现指纹；在特殊光照下透过滤光片或者在自然光照下直接拍照；
所述的荧光猝灭体系包括荧光物质和能够将荧光物质的荧光猝灭的物质；
所述荧光物质包括能够受激发光的量子点、碳点、荧光素、染料、席夫碱类化合物、芳香族氨基酸、钙黄绿素蓝、聚乙烯吡咯烷酮、8-羟基喹啉铝、二苯乙烯荧光蓝-S、水杨基荧光酮、诺氟沙星、苯基荧光酮等；
所述量子点包括修饰或者不修饰的氧化锌、硫化锌、二氧化钛、硒化镉、硫化镉、碲化镉等；
所述的量子点表面可以使用巯基乙酸、DNA、RNA、氨基酸（例如L-半胱氨酸等）、蛋白质、酶等进行修饰；
所述荧光素包括荧光素（CAS：2321-07-5）、5-羧基荧光素(5-FAM)和6-羧基荧光素（6-FAM）中的一种或两种以上的任意比例混合物；
所述能够将荧光物质的荧光猝灭的物质包括纳米金、纳米银、银离子、量子点、铜离子、镍离子、锌离子、铁离子、钼（Ⅵ）离子、碳点、DNA、RNA、氨基酸（如L-半胱氨酸）、蛋白质、酶、抗坏血酸、锰离子等；
所述纳米金表面可以使用巯基乙酸、DNA、RNA、氨基酸（L-半胱氨酸）、蛋白质、酶等进行修饰。
所述荧光猝灭体系选自纳米金-荧光素荧光猝灭体系、水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系、碳点-铜离子荧光猝灭体系、硫化锌量子点-镍离子荧光猝灭体系、纳米银-染料（罗丹明B、罗丹明6G或者吖啶橙）荧光猝灭体系、纳米银-荧光素荧光猝灭体系、纳米银-荧光染料曙红Y荧光猝灭体系、纳米银-聚乙烯吡咯烷酮荧光猝灭体系、纳米银-8-羟基喹啉铝荧光猝灭体系、纳米银-诺氟沙星荧光猝灭体系、铜离子-席夫碱类化合物（3,5-二溴水杨醛缩邻氨基酚）荧光猝灭体系、芳香族氨基酸（色氨酸、酪氨酸或苯丙氨酸）-抗坏血酸荧光猝灭体系、钙黄绿素蓝-锰离子荧光猝灭体系、镍离子-吖啶橙-曙红Y荧光猝灭体系、锌离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系、铁离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系、钼（Ⅵ）离子-水杨基荧光酮荧光猝灭体系或锰（Ⅱ）离子-苯基荧光酮荧光猝灭体系；
所述荧光猝灭体系优选自纳米金-荧光素荧光猝灭体系、纳米银-荧光素荧光猝灭体系、水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系、碳点-铜离子荧光猝灭体系。
以上这些荧光猝灭体系的构建方法都是常规技术。
如果指纹细节不够清晰，可以再使用目前已知的各种经典指纹显现方法进行后续处理。
与现有技术相比，本发明方法的优点和有益效果在于：
1、为发现、显现复杂案发现场的汗潜指纹提供了快速、简便、安全的方法。
2、该方法既可用于渗透性物品，又可用于半渗透性及非渗透性物品，即应用对象不受限制。
3、有些荧光猝灭体系遇指纹发出的光，只有在特殊光照下透过滤光片才能观察到，在自然光或者普通灯光下肉眼看不出物品上的异常，因此可以实现隐蔽侦察，完成指纹拍照后也不会惊动嫌疑人。
附图说明
图1为实施例1在宽带定额专用发票上显现的指纹。
图2为实施例1在滤纸上显现的指纹，左图为仅涂抹了纳米金-荧光素荧光猝灭体系显现的指纹，只有大概的轮廓，纹路不清，直接加热也无明显变化；右图为在左图涂抹了猝灭体系的基础上再涂“DFO/乙醇”溶液（DFO，1,8-diazo-fluorene-9-one，1,8-二氮-9-芴酮），电热板上100℃加热5min后显现的指纹，纹路清晰可见。
图3为实施例2在镀锌铁板上显现的指纹。
具体实施方式
下面申请人将结合具体的实施例对本发明的产品及应用过程做进一步的详细说明。
实施例1纳米金的合成可参考文献：吕秉峰,李国平,罗运军.金纳米颗粒的水相法合成及荧光性能[J].高等学校化学学报,2010,31(8):1502～1505；或：郑海霞,黄博能,胡君曼,龚龚.制备特定尺寸的纳米金颗粒方法及性能表征[J].北京大学学报（自科版）,2011,47(5):777～782。
具体的，一种纳米金-荧光素荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，其步骤如下：
1、纳米金制备：称取0.60g氯金酸，蒸馏水溶解，转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得黄色氯金酸溶液；称取3.40g柠檬酸三钠，蒸馏水溶解，转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得柠檬酸三钠溶液；称取0.10g聚乙烯吡咯烷酮，蒸馏水溶解转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得保护剂PVP溶液。取5mL柠檬酸三钠溶液和25mLPVP溶液，于圆底烧瓶中，水浴加热10min，加入50mL氯金酸溶液再加热10min；停止加热，手晃动烧瓶5min（目的是搅拌），自来水冷却至室温，制得纳米金，其颜色为酒红色。
2、取10mL1×10-4mol/L荧光素于烧杯中，选465nm为激发波长，透过490nm滤光片观察，可看到荧光素的亮绿色荧光。往荧光素溶液中加纳米金0.25mL，荧光减弱至最弱（一般有很弱的背景荧光，从彩图中可以看出，很弱的背景荧光不影响效果），制成纳米金-荧光素体系。
3、将纳米金-荧光素体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，选465nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。结果见图1和图2左，图1为在宽带定额专用发票上显现的指纹，图2左边为在滤纸上显现的指纹。
4、在指纹细节不够清晰的时候，可以再使用常用的DFO法继续显现指纹，即本发明方法还可用于指纹“标记”或者“示踪”。
见图2，左图显现的指纹只有大概的轮廓，纹路不清，直接加热也无明显变化；右图为在左图涂抹了猝灭体系的基础上再涂“DFO/乙醇”溶液，电热板上100℃加热5min，纹路清晰可见；使用IDO(1,2-indanedione；1,2-茚(满)二酮)进行后续处理可以得到同样的效果。
实施例2
一种纳米金-荧光素荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，其步骤如下：
1、纳米金制备：称取0.60g氯金酸，蒸馏水溶解，转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得黄色氯金酸溶液；称取3.40g柠檬酸三钠，蒸馏水溶解，转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得柠檬酸三钠溶液；称取0.10g聚乙烯吡咯烷酮，蒸馏水溶解转至100mL容量瓶，蒸馏水定容，制得保护剂PVP溶液。取5mL柠檬酸三钠溶液和25mLPVP溶液，于圆底烧瓶中，水浴加热10min，加入50mL氯金酸溶液再加热10min；停止加热，手晃动烧瓶5min（目的是搅拌），自来水冷却至室温，制得纳米金，其颜色为酒红色。
2、取10mL1×10-4mol/L6-羧基荧光素（6-FAM）于烧杯中，选465nm为激发波长，透过490nm滤光片观察，可看到荧光素的亮绿色荧光。往荧光素溶液中加纳米金0.25mL，荧光减弱至最弱，制成纳米金-荧光素体系。
3、将纳米金-荧光素体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，选465nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。结果见图3，图3为镀锌铁板上的指纹。
实施例3
水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系的制备可参考文献：许智祥,李海兵,常雪灵,杨祥良等.新型银离子纳米荧光探针研究[J].分析科学学报,2007,23(4):453～456。
具体的，一种水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，其步骤如下：
1、水溶性CdTe量子点的制备：在不断搅拌下，向含有巯基乙酸（TGA）的2.0×10-4mol/L硝酸镉溶液中加入新制备的无氧NaHTe溶液，其中各物质的摩尔比为Cd2+∶Te-∶TGA=1∶0.5∶3。将反应液加热回流，即得到尺度较为均一的CdTe纳米粒子溶液。本实验制备的水溶性CdTe量子点的理论浓度为1.0×10-4mol/L。
2、取上述溶液10mL于烧杯中，选480nm为激发波长，透过490nm滤光片观察，可看到红色荧光。加入5×10-5mol/L的硝酸银乙醇溶液直到荧光减至最弱，制成水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系。
3、将水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，选480nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。
实施例4
一种酶修饰的金纳米荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、纳米金的制备。将0.05MHAuCl41.5mL加入到500mL锥形瓶中，加水至150mL。搅拌状态下将水溶液加热至沸并保持沸腾状态3min左右，在剧烈搅拌下迅速加入8.5mL2%（m/v)的柠檬酸钠水溶液，保持沸腾状态反应15min后关闭热源，继续搅拌冷却至室温。
2、apo-葡萄糖氧化酶（apo-glucoseoxidase，apo-GOx)（去活化的葡萄糖氧化酶（apo-GOx））的制备。
将10mg的葡萄糖氧化酶GOX溶于1mL（pH=5.1）的乙酸钠缓冲溶液中，然后加入10mL新制备的（25%Saturated，pH=1.4）的硫酸铵溶液，将混合溶液置于冰浴（4℃）中搅拌。然后少量多次的向冰浴中的溶液中加入过量的硫酸铵至有沉淀产生，冰浴中继续搅拌至少2h保证蛋白质和黄素腺嘌呤二核甘酸（FAD）的分离。之后在4℃的环境下4500rpm离心10min，去掉上层悬浮物，沉淀用2.5M乙酸钠溶液（2mL）溶解。然后再重复以上步骤继续用硫酸铵盐析沉淀直至去除所有黄色，直至所得的沉淀为白色。最终用0.01M磷酸缓冲溶液（PBS，pH=7）溶解，去活化的葡萄糖氧化酶的最终浓度为0.5mg/mL，密封并置于冰箱中4℃中保存备用。
3、巯基十六酸修饰的AuNPs的制备：由于巯基十六酸（16-MHDA）在水中的溶解度比较小而且过量的乙醇会导致金纳米粒子的团聚，所以采用乙醇与水的混合溶剂（乙醇与水的体积比为1：9）来溶解16-MHDA，并且向溶液中加入几滴0.1M的NaOH溶液轻轻摇晃，将16-MHDA溶液调至澄清透明备用。向20mL金纳米粒子的原始溶液中加入表面活性剂吐温-20（1.82mg/mL，PBS缓冲配置）20mL，轻轻摇匀至少0.5h，然后向其中加入20mL16-MHDA（0.06mM）溶液，缓慢搅拌0.5h之后放置过夜。13000rpm离心10min，弃去上清液，沉淀用0.01M的PBS缓冲20mL溶解备用。
4、apo-GOx修饰的AuNPs的制备。向2mLAuNPs-16-MHDA储备液之中加入0.5mgEDC和0.25mgNHS搅拌活化羧基，反应0.5h之后，13000rpm，10min离心，去除上清液，沉淀用10mLPBS溶解。向2mL活化之后的AuNPs-16-MHDA溶液中加入apo-GOx（0.5mg/mL）0.2mL，于4℃下搅拌反应2h后，置于冰箱中过夜。所得样品用30K的超虑离心管离心（12000rpm，10min），去除下层清液，上层固体用PBS溶解之后备用。
5、AuNPs-apo-GOx-Dextran-FITC偶合物的制备FITC-Dextran（异硫氰酸荧光素右旋糖酐(FITC-dextran)）。向3mLAuNPs-apo-GOx储备液中，加入0.6mL1mg/mL的FITC-Dextran充分反应完全之后，离心去除过量的FITC-Dextran（12000rpm，10min），沉淀用PBS缓冲溶解备用。
6、将AuNPs-apo-GOx-Dextran-FITC偶合物喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，选488nm为激发波长，透过565nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-5参考文献：叶建.基于FRET原理构建金纳米猝灭的荧光探针实现活细胞中葡萄糖的检测[D].山东师范大学,2010.，2010年，硕士学位论文.中的方法建立荧光猝灭体系。
实施例5
一种碳点-铜离子荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、碳点的合成及钝化。0.59g油烟（安徽省绩溪胡开文墨业有限公司）经丙酮洗涤后，110℃烘干，加入到含150mLHNO3溶液(5mol/L)的圆底烧瓶中，在140℃下磁力搅拌回流12小时；反应完后，用碳酸钠将溶液中和至中性，接着用透析袋(MWCO8000-14000)透析两天(期间不断换水)，除去盐；然后加入3倍体积的丙酮，在Z383K高速台式冷冻离心机(德国HERMLE公司)上高速(16000rpm)离心15分钟，除去上层浅黄色清液，所得沉淀用氮气吹干，然后加入超纯水超声分散，再用超滤管除去大颗粒物质，即得到未钝化的荧光碳点；取制备好的未钝化碳点溶液50mL于烧杯中，放在WP800TL23-K3型微波炉(中国格兰仕，功率800W)中央，调中高火加热2分钟，冷却后用超纯水定容到原来的体积，再加热2分钟，如此重复8次，4℃保存。
2、取制备好的碳点50mL(约含碳点0.0257g)，倒入三颈烧瓶中，加入200mgPEG1500N，氮气氛下120℃搅拌回流72小时；反应结束后，将溶液冷却至室温，然后用透析袋透析两天，再用超滤管超滤，即得到PEG1500N修饰的碳点。
3、碳点-铜离子荧光猝灭体系的制备。在10mL比色管中依次加入1.0mLpH=5.8的B-R缓冲液，0.40mL的钝化碳点(4×10-5M)储备液，加入一定量的CuSO4工作液(1×10-4M)，调至荧光减弱至最弱），再用超纯水或者乙醇定容到10mL，最后超声分散均匀备用。
4、将碳点-铜离子荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过515nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-3参考文献：毛小娇.荧光碳点的合成表征及应用[D].西南大学,2010.制备出碳点-铜离子猝灭体系。
实施例6
一种硫化锌量子点-镍离子荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将57μL99%MPA(3-巯基丙酸(3-Mercaptopropylacid))加入到36mL去离子水中，剧烈搅拌5min后，缓慢滴加2mL0.04mol/LZn(NO3)2溶液至该溶液中，继续搅拌10min后，用1mol/LNaOH调节混合溶液至pH12，再搅拌10min后，迅速加入4mL0.02mol/LNa2S溶液，停止搅拌。5min后再加入6mL0.04mol/LZn(NO3)2溶液。继续调整混合液至pH12，搅拌5min，得到清澈无色的MPA修饰的ZnSQDs溶液。
2、将硫酸镍溶解在pH8.5的PBS缓冲液（也就是磷酸缓冲液phosphatebuffersolution）中，镍离子的含量控制在60μmol/L；搅拌下将该溶液缓慢滴加到上述MPA修饰的ZnSQDs溶液中，至荧光最弱，即可得到MPA修饰硫化锌量子点-镍离子荧光猝灭体系。
3、将MPA修饰硫化锌量子点-镍离子猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，310nm为激发波长，透过450nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：徐琴,魏焕平,胡效亚.基于ZnS量子点荧光淬灭-恢复方法测定还原型谷胱甘肽[J].分析化学,2013,41(7):1102～1106。
实施例7
一种纳米银-染料荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将罗丹明B（CAS：81-88-9）、罗丹明6G（CAS：989-38-8）或者吖啶橙（CAS：10127-02-3）分别溶于乙醇制成1×10-5mol/L的溶液；488或者515nm为激发波长，透过565nm滤光片观察，搅拌下将某一溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱。即可得到相应的纳米银-染料荧光猝灭体系。
3、将纳米银-染料荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，488或者515nm为激发波长，透过565nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：于芳,方炎,王亚利,于永澄.染料分子荧光淬灭规律研究[J].光子学报,1993,22(3):239～244。
实施例8
一种铜离子-席夫碱类化合物荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列溶液：3mg/L的硫酸铜水溶液；1×10-4mol/L的3,5-二溴水杨醛缩邻氨基酚(简称BSAP，席夫碱类化合物)乙醇溶液；0.2mol/L的醋酸铵水溶液；1×10-2mol/L的溴化十六烷基三甲胺(简称CTMAB)水溶液。
2、于25mL比色管中，依次加入4.0mLBSAP溶液，4.0mLCTMAB溶液;4.0mL醋酸铵溶液，在365nm紫外灯下，充分搅拌，缓慢滴加硫酸铜水溶液，直到荧光最弱，即可得到铜离子-席夫碱类化合物荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的铜离子-席夫碱类化合物荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：尤进茂,朱庆存,孙学军.表面活性剂单分子猝灭效应--荧光猝灭法测定痕量铜[J].曲阜师范大学学报,1997,23(1):85～88。
实施例9
一种芳香族氨基酸-抗坏血酸荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、分别配制下列水溶液：色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸均为500mg/L，抗坏血酸10mg/L，pH为7的BR缓冲溶液。
2、于50mL烧杯中，依次加入10mL芳香族氨基酸溶液，10mLBR缓冲溶液，在254nm紫外灯下，充分搅拌，缓慢滴加抗坏血酸水溶液，直到荧光最弱，即可得到芳香族氨基酸-抗坏血酸荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的芳香族氨基酸-抗坏血酸荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，254nm为激发波长，手持紫外成像仪查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：董存智,桂王艳,吴雯辉.芳香族氨基酸作探针荧光猝灭法测定痕量抗坏血酸[J].光谱实验室,2013,30(2):645～648。
实施例10
一种钙黄绿素蓝(CalceinBlue,简称CB)-锰离子荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列水溶液：硫酸锰，锰离子含量1mg/L；钙黄绿素蓝1×10-5mol/L；pH为9.8的硼砂-氢氧化钾缓冲溶液。
2、于100mL烧杯中，依次加入15mL钙黄绿素蓝溶液，10mL硼砂-氢氧化钾缓冲溶液，在365nm紫外灯下，透过415nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加硫酸锰溶液，直到荧光最弱，即可得到钙黄绿素蓝-锰离子荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的钙黄绿素蓝-锰离子荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过415nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：邹淑仙,敖登高娃,斯琴高娃,赛音,杨文斌.钙黄绿素蓝荧光碎灭测定茶叶中的锰[J].分析化学,1995,23(4):398～400。
实施例11
一种纳米银-荧光素（CAS：2321-07-5）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将荧光素溶于乙醇制成1×10-5mol/L的溶液；465nm为激发波长，透过490nm滤光片观察，搅拌下将该溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱。即可得到纳米银-荧光素荧光猝灭体系。
3、将纳米银-荧光素荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，465nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：王悦辉,周济,石士考.纳米银对表面吸附荧光素的荧光增强和荧光猝灭效应及KCl的荧光猝灭释放效应[J].无机化学学报,2006,22(9):1579～1584。
实施例12
一种纳米银-荧光染料曙红Y（CAS：15086-94-9）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将曙红Y溶于乙醇制成2×10-5mol/L的溶液；465nm为激发波长，透过490nm滤光片观察，搅拌下将该溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱。即可得到纳米银-荧光染料曙红Y荧光猝灭体系。
3、将纳米银-荧光染料曙红Y荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，465nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：刘哲,毛学锋,王海燕,宋玉民.纳米银对荧光染料曙红的荧光猝灭效应[J].化学试剂,2009,31(6):463～465;468。
实施例13
一种纳米银-聚乙烯吡咯烷酮（CAS：9003-39-8）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将聚乙烯吡咯烷酮溶于乙醇制成10g/L的溶液；365nm为激发波长，透过410nm滤光片观察，搅拌下将该溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱。即可得到纳米银-聚乙烯吡咯烷酮荧光猝灭体系。
3、将纳米银-聚乙烯吡咯烷酮荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过410nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：侯宜栋,叶松,苏亚荣,杜惊雷.纳米银胶中PVP和Alq3的荧光猝灭研究[J].光散射学报,2013,25(4):433～439。
实施例14
一种纳米银-8-羟基喹啉铝（CAS：2085-33-8）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将8-羟基喹啉铝溶于乙醇制成10mg/L的溶液；365nm为激发波长，透过410nm滤光片观察，搅拌下将该溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱。即可得到纳米银-8-羟基喹啉铝荧光猝灭体系。
3、将纳米银-8-羟基喹啉铝荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过490nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：侯宜栋,叶松,苏亚荣,杜惊雷.纳米银胶中PVP和Alq3的荧光猝灭研究[J].光散射学报,2013,25(4):433～439。
实施例15
一种镍离子-吖啶橙（CAS：10127-02-3）-曙红Y（CAS：15086-94-9）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列乙醇溶液：20mg/L的乙酸镍；2×10-4mol/L的吖啶橙；50mg/L的曙红；1×10-3mol/L的十二烷基硫酸钠。
2、于100mL烧杯中，依次加入6mL吖啶橙溶液，10mL曙红溶液，50mL十二烷基硫酸钠溶液，充分搅拌；在465nm光照下，透过540nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加乙酸镍溶液，直到荧光最弱，得到镍离子-吖啶橙-曙红Y荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的镍离子-吖啶橙-曙红Y荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，465nm为激发波长，透过540nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：汪菊玲,侯明.吖啶橙-曙红Y能量转移荧光猝灭法测定痕量镍[J].食品科学,2009,30(8):167～170。
实施例16
一种锌离子-二苯乙烯荧光蓝-S(2,2′-二磺基-4,4′-二氨基二苯乙烯-N,N,N′,N′-四乙酸二钠盐)荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列乙醇溶液：氯化锌20mg/L；二苯乙烯荧光蓝-S5×10-5mol/L。
2、于100mL烧杯中，加入50mL二苯乙烯荧光蓝-S溶液，在365nm紫外灯下，透过415nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加氯化锌溶液，直到荧光最弱，得到锌离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的锌离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过415nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：邹淑仙,敖登高娃,斯琴高娃,赛音.二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭测定微量锌(Ⅱ)[J].内蒙古大学学报(自然科学版),1997,28(6):816～818。
实施例17
一种铁离子-二苯乙烯荧光蓝-S(2,2′-二磺基-4,4′-二氨基二苯乙烯-N,N,N′,N′-四乙酸二钠盐)荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列乙醇溶液：氯化铁25mg/L；二苯乙烯荧光蓝-S5×10-5mol/L。
2、于100mL烧杯中，加入50mL二苯乙烯荧光蓝-S溶液，在365nm紫外灯下，透过415nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加氯化铁溶液，直到荧光最弱，得到铁离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的铁离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过415nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：邹淑仙,敖登高娃,王瑞峰,张浩峰,赛音.二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭法测定茶叶中的微量铁(Ⅲ)[J].内蒙古大学学报(自然科学版),1998,29(1):73～75。
实施例18
一种钼（Ⅵ）离子-水杨基荧光酮（CAS：3569-82-2）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、配制下列溶液：称取15mg三氧化钼溶于少量氢氧化钠或氨水中，用水稀释至1L得钼（Ⅵ）溶液；将浓盐酸用乙醇稀释至0.1mol/L；量取吐温80（CAS：9005-65-6）10mL，用乙醇稀释至1L；1×10-4mol/L的水杨基荧光酮乙醇溶液。
2、于100mL烧杯中，依次加入1mL水杨基荧光酮溶液，20mL吐温80溶液，20mL盐酸溶液，在365nm紫外灯下，透过515nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加钼（Ⅵ）溶液，直到荧光最弱，得到钼（Ⅵ）离子-水杨基荧光酮荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的钼（Ⅵ）离子-水杨基荧光酮荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过515nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：高艳君.水杨基荧光酮荧光猝灭法测定茶叶中微量钼[J].齐齐哈尔大学学报(自然科学版),2008,24(4):56～58。
实施例19
一种纳米银-诺氟沙星（CAS：9005-65-6）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、将9mg硝酸银加入到50mL去离子水中，加热至沸腾；滴加1%的柠檬酸钠水溶液1mL，继续加热10min后即得呈灰绿色的纳米银溶胶。
2、将诺氟沙星溶于体积比为1:1的乙醇水混合溶剂中，制成1mg/L的溶液；在276nm紫外光照下，透过444nm滤光片观察，充分搅拌搅拌下，将该溶液滴加到上述的纳米银溶胶中，直到荧光最弱，即可得到纳米银-诺氟沙星荧光猝灭体系。
3、将纳米银-诺氟沙星荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，276nm为激发波长，透过444nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：邓树明,邹玉杰,王学东等.银纳米粒子对抗生素诺氟沙星的荧光猝灭效应[J].光谱实验室,2012,29(1):16～20。
实施例20
一种锰离子（Ⅱ）离子-苯基荧光酮（CAS：975-17-7）荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，步骤如下：
1、使用1:1的乙醇水混合溶剂配制下列溶液：硫酸锰，锰离子含量1mg/L；1×10-4mol/L的苯基荧光酮；1×10-2mol/L的十二烷基苯磺酸钠；β-环糊精(β-CD)（CAS：7585-39-9）10mg/L。
2、于100mL烧杯中，依次加入4mL苯基荧光酮溶液，20mL十二烷基苯磺酸钠溶液，8mLβ-环糊精溶液，在365nm紫外灯下，透过530nm滤光片观察，充分搅拌，缓慢滴加硫酸锰溶液，直到荧光最弱，得到锰离子（Ⅱ）离子-苯基荧光酮荧光猝灭体系。
3、将步骤2制备的锰离子（Ⅱ）离子-苯基荧光酮荧光猝灭体系喷、刷或者涂抹于纸张、玻璃、金属、搪瓷、塑料、油漆等各种材质的表面上，365nm为激发波长，透过530nm滤光片查找并且拍摄指纹。
步骤1-2参考文献：陈世界,李英杰,乔成立.苯基荧光酮-SDBS-β-CD-荧光猝灭法测定微量Mn(Ⅱ)[J].化学试剂,2010,32(3):243～244;254。
本说明书中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。
Claims (9)
1.一种荧光猝灭体系用于潜在指纹显现的方法，其步骤如下：
先制备荧光猝灭体系，所述荧光猝灭体系的猝灭状态可被指纹成分破坏；然后将其喷、涂到各种物品上，有指纹的部分，指纹成分破坏所述荧光猝灭体系的猝灭状态，使荧光再现从而显现指纹；
所述的荧光猝灭体系包括荧光物质和能够将荧光物质的荧光猝灭的物质。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述荧光物质为能够受激发光的量子点、染料、席夫碱类化合物、芳香族氨基酸、聚乙烯吡咯烷酮、8-羟基喹啉铝、二苯乙烯荧光蓝-S、水杨基荧光酮、诺氟沙星、苯基荧光酮中的一种。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
所述量子点为氧化锌、硫化锌、二氧化钛、硒化镉、硫化镉、碲化镉中的一种，该氧化锌、硫化锌、二氧化钛、硒化镉、硫化镉、碲化镉中的一种可修饰或不修饰。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：
当氧化锌、硫化锌、二氧化钛、硒化镉、硫化镉、碲化镉中的一种被修饰时，所述量子点表面使用巯基乙酸、DNA、RNA、氨基酸、蛋白质或酶进行修饰。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
当所述荧光物质为荧光素时，所述荧光素为CAS：2321-07-5的荧光素、5-羧基荧光素、6-羧基荧光素中的一种或两种以上的任意比例混合物。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述能够将荧光物质的荧光猝灭的物质为纳米金、纳米银、银离子、量子点、铜离子、镍离子、锌离子、铁离子、钼（Ⅵ）离子、DNA、RNA、氨基酸、蛋白质、酶、抗坏血酸、锰离子中的一种。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：
当所述能够将荧光物质的荧光猝灭的物质为纳米金时，所述纳米金表面使用巯基乙酸、DNA、RNA、氨基酸、蛋白质或酶进行修饰。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述荧光猝灭体系选自纳米金-荧光素荧光猝灭体系、水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系、碳点-铜离子荧光猝灭体系、硫化锌量子点-镍离子荧光猝灭体系、纳米银-染料荧光猝灭体系、纳米银-聚乙烯吡咯烷酮荧光猝灭体系、纳米银-8-羟基喹啉铝荧光猝灭体系、纳米银-诺氟沙星荧光猝灭体系、铜离子-席夫碱类化合物荧光猝灭体系、芳香族氨基酸-抗坏血酸荧光猝灭体系、钙黄绿素蓝-锰离子荧光猝灭体系、镍离子-吖啶橙-曙红Y荧光猝灭体系、锌离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系、铁离子-二苯乙烯荧光蓝-S荧光猝灭体系、钼（Ⅵ）离子-水杨基荧光酮荧光猝灭体系或锰（Ⅱ）离子-苯基荧光酮荧光猝灭体系。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：
所述荧光猝灭体系选自纳米金-荧光素荧光猝灭体系、纳米银-荧光素荧光猝灭体系、水溶性CdTe量子点-银离子荧光猝灭体系、碳点-铜离子荧光猝灭体系。
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