CN103906509A - 脑啡肽酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明的一方面涉及具有式(I)的化合物：其中R1到R6、a、b和Z如本说明书中所定义，或者是其医药上可接受的盐。这些化合物具有脑啡肽酶抑制活性。另一方面，本发明涉及包含所述化合物的医药组合物、使用所述化合物的方法以及制备所述化合物的方法和中间物。

Description

脑啡肽酶抑制剂
技术领域
本发明涉及具有脑啡肽酶抑制活性的新颖化合物。本发明还涉及包含所述化合物的医药组合物、制备所述化合物的方法和中间物、和使用所述化合物治疗疾病(例如高血压、心力衰竭、肺高血压和肾病)的方法。
背景技术
脑啡肽酶(中性肽链内切酶，EC3.4.24.11)(NEP)是在包括脑、肾、肺、胃肠道、心脏和周围血管结构的许多器官和组织中发现的内皮膜结合的Zn2+金属肽酶。NEP降解大量内源性肽，例如脑啡肽、循环缓激肽、血管紧张素肽和利尿钠肽且使其失活，其中利尿钠肽具有数种作用，包括例如血管舒张和尿钠排泄/利尿以及抑制心脏肥大和心室纤维化。因此，NEP在血压体内平衡和心血管健康中起重要作用。
NEP抑制剂，例如噻尔芬(thiorphan)、坎沙曲(candoxatril)和坎沙曲拉(candoxatrilat)已经作为潜在治疗剂加以研究。还已知抑制NEP和血管紧张素I转化酶(ACE)两者的化合物，且其包括奥马帕曲拉(omapatrilat)、吉姆帕曲拉(gempatrilat)和赛帕曲拉(sampatrilat)。这后一类化合物称为血管肽酶抑制剂，描述于罗毕尔(Robl)等人，(1999)治疗术专利专家意见(Exp.Opin.Ther.Patents)9(12)：1665-1677中。
卡桑德(Ksander)等人，(1995)药物化学杂志(J.Med.Chem.)38：1689-1700描述具有下式的二羧酸二肽NEP抑制剂：
Figure BDA0000498843530000011
化合物 R IC50(nM)
21g -C(O)-CH2-COOH 92
21a(R，S) -C(O)-(CH2)2-COOH 5
21b(S，R) -C(O)-(CH2)2-COOH 190
21c(R，R) -C(O)-(CH2)2-COOH 700
21d(S，S) -C(O)-(CH2)2-COOH 27
21e -C(O)-(CH2)3-COOH 90
21f -C(O)-(CH2)4-COOH 324
具有琥珀酸取代基的化合物21a为活性最大的化合物，其中IC50为5nM。作者观察到“因为通过一个(21e)和两个(21f)亚甲基单元延长羧酸链会使活性降低18倍和65倍，所以P2′位点中的琥珀酸看来似乎最佳”。作者进一步指出，“通过一个亚甲基(21g)而降低链长也显示活性降低18倍。”(第1692页，第2栏)。
发明内容
本发明提供已发现具有脑啡肽酶(NEP)酶抑制活性的新颖化合物。因此，预期本发明化合物作为治疗病状(例如高血压和心力衰竭)的治疗剂有用且有利。
本发明的一个方面涉及一种式I化合物：
Figure BDA0000498843530000021
其中：
R1选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000022
R10选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR11R12、-CH(R15)-NH2、-CH(R15)-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R11和R12独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R11和R12合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R13选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR11R12；且R14为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R15为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；
R2为-OR21或-CH2OR21；且R3为H或-CH3；其中R21为H、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-CH(R22)-NH2、-C(O)-CH(R22)-NHC(O)O-C1-6烷基或-P(O)(OR23)2；R22为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；R23为H、-C1-6烷基或苯基；或
R2与R1合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-且R3选自H和-CH3，其中R15和R16独立地选自H、-C1-6烷基和-O-C3-7环烷基，或R15和R16合起来形成＝O；或
R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-；或
R2和R3均为-CH3；
Z选自-CH-和-N-；
R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40、-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000031
R40选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR41R42、-CH(R45)-NH2、-CH(R45)-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R41和R42独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R41和R42合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R43选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR41R42；且R44为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R45为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；
a为0或1；R5选自卤基、-CH3、-CF3和-CN；
b为0或1到3的整数；每一R6独立地选自卤基、-OH、-CH3、-OCH3、-CN和-CF3；
其中R1和R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；且
其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经1或2个-C1-6烷基或环丙基取代；
或其医药上可接受的盐。
本发明的另一方面涉及包含医药上可接受的载剂和本发明化合物的医药组合物。所述组合物可任选地含有其它治疗剂。因此，在本发明的另一方面中，医药组合物包含作为第一治疗剂的本发明化合物、一或多种第二治疗剂和医药上可接受的载剂。本发明的另一方面涉及活性剂的组合，其包含本发明化合物和第二治疗剂。本发明化合物可与其它试剂一起或分开调配。当分开调配时，医药上可接受的载剂可与其它试剂一起被包括在内。因此，本发明的另一方面涉及医药组合物的组合，所述组合包含：第一医药组合物，其包含本发明化合物和第一医药上可接受的载剂；和第二医药组合物，其包含第二治疗剂和第二医药上可接受的载剂。在另一方面中，本发明涉及含有所述医药组合物的试剂盒，例如其中所述第一和第二医药组合物为单独的医药组合物。
本发明化合物具有NEP酶抑制活性，且因而预期其适用作治疗患有通过抑制NEP酶或通过增加其肽底物的含量而治疗的疾病或病症的患者的治疗剂。因此，本发明的一个方面涉及一种治疗患有通过抑制NEP酶而治疗的疾病或病症的患者的方法，其包括向患者投与治疗有效量的本发明化合物。本发明的另一方面涉及一种治疗高血压、心力衰竭或肾病的方法，其包括向患者投与治疗有效量的本发明化合物。本发明的再一方面涉及一种抑制哺乳动物中的NEP酶的方法，其包括向所述哺乳动物投与NEP酶抑制量的本发明化合物。
因为本发明化合物具有NEP抑制活性，所以其也可用作研究工具。因此，本发明的一个方面涉及一种将本发明化合物用作研究工具的方法，所述方法包括使用本发明化合物进行生物分析。本发明化合物还可用于评估新的化合物。因此，本发明的另一方面涉及一种在生物分析中评估测试化合物的方法，其包括：(a)使用测试化合物进行生物分析以提供第一分析值；(b)使用本发明化合物进行所述生物分析以提供第二分析值；其中步骤(a)是在步骤(b)之前、之后或与步骤(b)同时进行；和(c)将来自步骤(a)的第一分析值与来自步骤(b)的第二分析值进行比较。示例性生物分析包括NEP酶抑制分析。本发明的另一方面涉及一种研究包含NEP酶的生物系统或样本的方法，所述方法包括：(a)使所述生物系统或样本与本发明化合物接触；和(b)测定由所述化合物对所述生物系统或样本所造成的影响。
本发明的另一方面涉及适用于制备本发明化合物的方法和中间物。因此，本发明的另一方面涉及一种制备式I化合物的方法，其包括使式1化合物与式2化合物偶联以产生式I化合物的步骤：
Figure BDA0000498843530000041
其中P为H或选自叔丁氧基羰基、三苯甲基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、甲酰基、三甲基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基的氨基保护基；且其中当P为氨基保护基时，所述方法进一步包括脱除式1化合物的保护基；且其中R1-R6、a、b和Z如针对式I所定义。本发明的另一方面涉及一种制备式I化合物的医药上可接受的盐的方法，其包括使呈游离酸或碱形式的式I化合物与医药上可接受的碱或酸接触。在其它方面中，本发明涉及通过本文中所述的任何方法而制备的产物以及在所述方法中所用的新颖中间物。在本发明的一个方面中，新颖中间物具有如本文中所定义的式1或其盐。
本发明的另一方面涉及式I化合物或其医药上可接受的盐的用途，其用于制造药物，尤其用于制造适用于治疗高血压、心力衰竭或肾病的药物。本发明的另一方面涉及本发明化合物用于抑制哺乳动物中的NEP酶的用途。本发明的再一方面涉及本发明化合物用作研究工具的用途。本文中揭示本发明的其它方面和实施例。
一组特定的式I化合物为揭示于2011年11月2日提交的美国临时申请案第61/554,625号中的一组化合物。此组包括式I′化合物；其中：
Figure BDA0000498843530000051
其中：R1选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000052
R10选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR11R12、-CH[CH(CH3)2]-NH2、-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R11和R12独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R11和R12合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R13选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR11R12；且R14为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R2选自-OH、-CH2OH、-OP(O)(OH)2和-CH2OP(O)(OH)2；且R3选自H和-CH3；或R2与R1合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-，且R3选自H和-CH3，其中R15和R16独立地选自H、-C1-6烷基和-O-C3-7环烷基，或R15和R16合起来形成＝O；或R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-；或R2和R3均为-CH3；Z选自-CH-和-N-；R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40、-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000061
R40选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR41R42、-CH[CH(CH3)2]-NH2、-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R41和R42独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R41和R42合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R43选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR41R42；且R44为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；a为0或1；R5选自卤基、-CH3、-CF3和-CN；b为0或1到3的整数；每一R6独立地选自卤基、-OH、-CH3、-OCH3和-CF3；且其中R1和R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；且其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经1或2个-C1-6烷基或环丙基取代；或其医药上可接受的盐。
具体实施方式
定义
当描述本发明化合物、组合物、方法和工艺时，除非另有说明，否则以下术语具有下列含义。另外，除非使用的上下文另外明确规定，否则文中所用的单数形式“一”和“所述”包括对应复数形式。术语“包含”、“包括”和“具有”打算为包括性的且意指可存在除所列要素之外的其它要素。除非另有说明，否则本文中所用的表示成分的数量、性质，例如分子量、反应条件等的所有数字都应理解为在所有情形中通过术语“约”修饰。因此，本文中阐明的数字为近似值，其取决于本发明试图获得的所需性质。至少，且不试图将等同原则(doctrine of equivalents)的应用限制于权利要求书的范围内，每一数字应至少按照所报道的有效数字且通过应用一般舍入技术来解释。
术语“烷基”意指可为直链或分支链的单价饱和烃基。除非另有定义，否则所述烷基一般包含1到10个碳原子且包括例如-C1-4烷基、-C1-5烷基、-C2-5烷基、-C1-6烷基、-C1-8烷基和-C1-10烷基。代表性烷基包括例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等。
当具体数目的碳原子打算用于本文中所用的特定术语时，碳原子的数目以下标形式展示在所述术语之前。例如分别来说，术语“-C1-6烷基”意指具有1到6个碳原子的烷基，且术语“-C3-7环烷基”意指具有3到7个碳原子的环烷基，其中碳原子位于任何可接受的配置中。
术语“亚烷基”意指可为直链或分支链的二价饱和烃基。除非另有定义，否则所述亚烷基一般包含0到10个碳原子且包括例如-C0-1亚烷基-、-C0-6亚烷基-、-C1-3亚烷基-和-C1-6亚烷基-。代表性亚烷基包括例如亚甲基、乙烷-1，2-二基(“亚乙基”)、丙烷-1，2-二基、丙烷-1，3-二基、丁烷-1，4-二基、戊烷-1，5-二基等。应理解，当亚烷基术语包括0个碳原子(例如-C0-1亚烷基-)时，所述术语打算包括不存在碳原子，即除连接由亚烷基项分开的基团的共价键以外不存在亚烷基。
术语“芳基”意指具有单环(即苯基)或一或多个稠环的单价芳族烃。稠环系统包括完全不饱和的那些(例如萘)以及部分不饱和的那些(例如1，2，3，4-四氢萘)。除非另有定义，否则所述芳基一般包含6到10个碳环原子且包括例如-C6-10芳基。代表性芳基包括例如苯基和萘-1-基、萘-2-基等。
术语“环烷基”意指单价饱和碳环烃基。除非另有定义，否则所述环烷基一般包含3到10个碳原子且包括例如-C3-5环烷基、-C3-6环烷基和-C3-7环烷基。代表性环烷基包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
术语“卤基”意指氟、氯、溴和碘。
术语“杂芳基”打算意指具有单环或两个稠环的单价不饱和(芳族)杂环。单价不饱和杂环类也通常称为“杂芳基”。除非另有定义，否则杂芳基一般包含5到10个总环原子，其中1到9个为环碳原子，且1到4个为环杂原子，且包括例如-C1-9杂芳基和-C5-9杂芳基。代表性杂芳基包括例如吡咯(例如3-吡咯基和2H-吡咯-3-基)、咪唑(例如2-咪唑基)、呋喃(例如2-呋喃基和3-呋喃基)、噻吩(例如2-噻吩基)、三唑(例如1，2，3-三唑基和1，2，4-三唑基)、吡唑(例如1H-吡唑-3-基)、噁唑(例如2-噁唑基)、异噁唑(例如3-异噁唑基)、噻唑(例如2-噻唑基和4-噻唑基)和异噻唑(例如3-异噻唑基)、吡啶(例如2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基)、吡啶基咪唑、吡啶基三唑、吡嗪、哒嗪(例如3-哒嗪基)、嘧啶(例如2-嘧啶基)、四唑、三嗪(例如1，3，5-三嗪基)、吲哚(例如1H-吲哚-2-基、1H-吲哚-4-基和1H-吲哚-5-基)、苯并呋喃(例如苯并呋喃-5-基)、苯并噻吩(例如苯并[b]噻吩-2-基和苯并[b]噻吩-5-基)、苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并三唑、喹啉(例如2-喹啉基)、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉等。
术语“任选地经取代”意指相关基团可未经取代或其可以经取代一次或若干次，例如1到3次，或1到5次，或1到8次。例如，“任选地经氟原子取代”的烷基可未经取代，或其可包含1、2、3、4、5、6、7或8个氟原子。类似地，“任选地经1或2个-C1-6烷基取代”的基团可未经取代，或其可包含1或2个-C1-6烷基。
本文中所用的短语“具有式”或“具有结构”不打算具有限制且以与术语“包括”通常使用的相同的方式使用。例如，如果描绘一种结构，那么应了解，除非另有说明，否则涵盖所有立体异构体和互变异构体形式。
术语“医药上可接受的”是指当用于本发明时生物上或在其它方面可接受的物质。例如，术语“医药上可接受的载剂”是指可并入组合物且投与患者而不引起不可接受的生物效应或不会以不可接受的方式与组合物的其它组分相互作用的物质。所述医药上可接受的物质一般满足毒物学和制造测试所要求的标准，且包括通过美国食品和药品局(U.S.FoodAnd Drug administration)鉴定为适当的非活性成分的那些物质。
术语“医药上可接受的盐”意指由碱或酸制备的盐，其可接受用于投与患者，例如哺乳动物(例如，对于给定剂量方案具有可接受的哺乳动物安全性的盐)。然而，应理解本发明涵盖的盐类不要求为医药上可接受的盐，例如不预期投与患者的中间化合物的盐。医药上可接受的盐可源于医药上可接受的无机或有机碱和源于医药上可接受的无机或有机酸。此外，当式I化合物包含碱性部分(例如胺、吡啶或咪唑)和酸性部分(例如羧酸或四唑)时，可形成两性离子且其包括在本文中所用的术语“盐”内。源于医药上可接受的无机碱的盐包括铵、钙、铜、三价铁、亚铁、锂、镁、三价锰、二价锰、钾、钠和锌盐等。源于医药上可接受的有机碱的盐包括以下各物的盐：伯胺、仲胺和叔胺，包括经取代胺、环胺、天然产生的胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二氨、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡糖胺、葡糖胺、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基还原葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因(procaine)、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、缓血酸胺等。源于医药上可接受的无机酸的盐包括以下各酸的盐：硼酸、碳酸、氢卤酸(氢溴酸、盐酸、氢氟酸或氢碘酸)、硝酸、磷酸、氨基磺酸和硫酸。源于医药上可接受的有机酸的盐包括以下各酸的盐：脂肪族羟基酸(例如柠檬酸、葡糖酸、乙醇酸、乳酸、乳糖酸、苹果酸和酒石酸)、脂肪族单羧酸(例如乙酸、丁酸、甲酸、丙酸和三氟乙酸)、氨基酸(例如天冬氨酸和谷氨酸)、芳香族羧酸(例如苯甲酸、对氯苯甲酸、二苯基乙酸、龙胆酸(gentisic acid)、马尿酸(hippuric acid)和三苯基乙酸)、芳香族羟基酸(例如邻羟苯甲酸、对羟苯甲酸、1-羟基萘-2-甲酸和3-羟基萘-2-甲酸)、抗坏血酸、二羧酸(例如富马酸、马来酸、草酸和琥珀酸)、葡萄糖醛酸、杏仁酸、粘液酸、烟酸、乳清酸、双羟萘酸、泛酸、磺酸(例如苯磺酸、樟脑磺酸、1，2-乙烷二磺酸(edisylicacid)、乙烷磺酸、羟乙磺酸、甲烷磺酸、萘磺酸、萘-1，5-二磺酸、萘-2,6-二磺酸和对甲苯磺酸)、昔萘酸(xinafoic acid)等。
本文中所用的术语“前药”一般打算意指在生理条件下，例如通过正常代谢过程在体内转化成其活性形式的药物的非活性前驱物。所述化合物可能不具有对NEP的药理活性，但可经口或不经肠投与且之后在体内代谢以形成具有对NEP的药理活性的化合物。当经口投与时，相比经口投与活性形式，所述化合物还可提供对于经肾递送的更佳的吸收比例(即更佳的pK性质)。示例性前药包括酯，例如C1-6烷酯和芳基-C1-6烷酯。在一个实施例中，活性化合物具有游离羧基且前药为其酯的衍生物，即前药为酯例如-C(O)OCH2CH3。所述酯前药接着通过溶剂分解或在生理条件下转化成游离羧基化合物。术语“前药”还打算包括在体内转化成更具活性形式的药物的较少活性的前驱物。例如，某些前药可具有对NEP的药理活性，但不必在要求的程度上；所述化合物在体内转化成具有要求的活性程度的形式。所述术语还打算包括某些式I化合物的经保护的衍生物，其可在最终脱除保护基阶段之前制备。因此，式I化合物的所有经保护的衍生物和前药都包括在本发明的范围内。
术语“治疗有效量”意指当投与所需患者时足以引起治疗的量，即为获得所要治疗效应所需的药物量。举例来说，治疗高血压的治疗有效量为例如减轻、遏制、消除或预防高血压的症状或治疗高血压的潜伏病因所需的化合物量。在一个实施例中，治疗有效量为降低血压所需的药物量或维持正常血压所需的药物量。在另一方面，术语“有效量”意指足以获得可能未必为治疗结果的所要结果的量。举例来说，当研究包含NEP酶的系统时，“有效量”可为抑制所述酶所需的量。
如本文所用的术语“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”意指治疗患者，如哺乳动物(尤其为人类)的疾病或医学病状(如高血压)，此包括以下一或多个方面：(a)预防疾病或医学病状发生，即预防疾病或医学病状复发或预防性治疗易于患有疾病或医学病状的患者；(b)改善疾病或医学病状，即消除患者的疾病或医学病状或使患者的疾病或医学病状消退；(c)遏制疾病或医学病状，即减缓或遏止患者的疾病或医学病状的发展；或(d)减轻患者的疾病或医学病状的症状。举例来说，术语“治疗高血压”将包括预防高血压发生、改善高血压、遏制高血压和减轻高血压的症状(例如降低血压)。术语“患者”打算包括需要治疗或疾病预防或目前正接受治疗以达成疾病预防或治疗特定疾病或医学病状的哺乳动物(如人类)以及在分析中评估或使用本发明化合物的测试个体，例如动物模型。
本文中所用的所有其它术语都打算具有如其所属领域的技术人员所理解的其一般含义。
在一个方面中，本发明涉及式I化合物：
Figure BDA0000498843530000101
或其医药上可接受的盐。
本文中所用的术语“本发明化合物”包括通过式I涵盖的所有化合物，例如以式Ia和Ib所体现的种类，以及通过式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVb涵盖的化合物。此外，本发明化合物还可包含若干碱性或酸性基团(例如氨基或羧基)且因此，所述化合物可呈游离碱、游离酸或各种盐形式存在。所有所述盐形式都包括在本发明的范围内。而且，本发明化合物还可呈前药形式存在。因此，所属领域的技术人员应认识到除非另有说明，否则本文中对化合物的引用，例如对“本发明化合物”或“式I化合物”的引用包括式I化合物以及所述化合物的医药上可接受的盐和前药。而且，术语“或其医药上可接受的盐和/或前药”打算包括盐和前药的所有排列，例如前药的医药上可接受的盐。而且，式I化合物的溶剂化物包括在本发明的范围内。
式I化合物可包含一或多个手性中心且因此，所述化合物可以各种立体异构体形式制备和使用。因此，除非另有说明，否则本发明涉及外消旋混合物、纯立体异构体(例如对映异构体和非对映异构体)、富集立体异构体的混合物等。当本文未在任何立体化学方面描绘化学结构时，应理解所述结构涵盖所有可能的立体异构体。因此，例如，术语“式I化合物”、“式II化合物”等打算包括所述化合物的所有可能的立体异构体。类似地，当本文中展示或命名特定立体异构体时，所属领域的技术人员应理解除非另有说明，否则微量其它立体异构体可能存在于本发明的组合物中，只要所述组合物的效用总体上不因存在的所述其它异构体而消除。可通过业内已熟知的大量方法获得个别立体异构体，所述方法包括使用适当手性固定相或支撑物的手性色谱法，或通过以化学方式将其转化成非对映异构体，通过常规方式例如色谱法或再结晶法分离所述非对映异构体，接着再生原有立体异构体。
另外，除非另有说明，否则当适用时，本发明化合物的所有顺式-反式或E/Z异构体(几何异构体)、互变异构形式和拓扑异构形式都包括在本发明的范围内。
更具体来说，当“Z”部分为-CH-时，式I化合物可包含至少两个手性中心，且当“Z”部分为-N-时可包含至少一个手性中心。这些手性中心在下式Ia和Ib中通过符号*和**表明：
Figure BDA0000498843530000111
然而，注意当R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-或R2与R3均为-CH3时，不存在*手性中心。
在式Ia化合物的一个立体异构体中，通过符号*和**识别的两个碳原子具有(R)配置。在所述实施例中，化合物在*和**碳原子处具有(R，R)配置或富集为在这些碳原子处具有(R，R)配置的立体异构体形式。在式Ia化合物的另一立体异构体中，通过符号*和**识别的两个碳原子具有(S)配置。在所述实施例中，化合物在*和**碳原子处具有(S，S)配置或富集为在这些碳原子处具有(S，S)配置的立体异构体形式。在式Ia化合物的另一立体异构体中，通过符号*识别的碳原子具有(S)且通过符号**识别的碳原子具有(R)配置。在所述实施例中，化合物在*和**碳原子处具有(S，R)配置或富集为在这些碳原子处具有(S，R)配置的立体异构体形式。在式Ia化合物的再一立体异构体中，通过符号*识别的碳原子具有(R)配置且通过符号**识别的碳原子具有(S)配置。在所述实施例中，化合物在*和**碳原子处具有(R，S)配置或富集为在这些碳原子处具有(R，S)配置的立体异构体形式。
在式Ib化合物的一个立体异构体中，通过符号*识别的碳原子具有(R)配置。在所述实施例中，化合物在*碳原子处具有(R)配置或富集为在所述碳原子处具有(R)配置的立体异构体形式。在式Ib化合物的另一立体异构体中，通过符号*识别的碳原子具有(S)配置。在所述实施例中，化合物在*碳原子处具有(S)配置或富集为在所述碳原子处具有(S)配置的立体异构体形式。
这些不同实施例可展示为式Ia-1：
Figure BDA0000498843530000121
式Ia-2：
式Ia-3：
Figure BDA0000498843530000123
式Ia-4：
Figure BDA0000498843530000124
式Ib-1：
Figure BDA0000498843530000131
和式Ib-2：
Figure BDA0000498843530000132
Figure BDA0000498843530000133
Figure BDA0000498843530000141
在一些实施例中，为使本发明化合物的治疗活性(例如治疗高血压)最优化，可能需要通过*和**符号识别的碳原子具有特定配置或富集为具有所述配置的立体异构体形式。因此，在某些方面中，本发明涉及各个别对映异构体或包含占优势的一种对映异构体或另一种对映异构体的富集对映异构体的对映异构体混合物。在其它实施例中，本发明化合物以对映异构体的外消旋混合物形式存在。
本发明化合物以及用于其合成的那些化合物还可包括经同位素标记的化合物，即其中一或多种原子已经富集具有不同于在自然中主要发现的原子质量的原子质量的原子。可并入式I化合物中的同位素的实例例如包括但不限于2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、35S、36Cl和18F。尤其受关注的是可用于例如组织分布研究中的富集氚或碳-14的式I化合物；尤其在代谢位点处富集氘的式I化合物，其产生例如具有更大代谢稳定性的化合物；和富集正子发射同位素(例如11C、18F、15O和13N)的式I化合物，其可用于例如正子发射断层扫描(PET)研究中。
本文中用于命名本发明化合物的命名法阐明于本文中的实例中。使用可购得的AutoNom软件(加利福尼亚州圣莱安德罗的MDL公司(MDL，San Leandro，California))获得所述命名法。
代表性实施例
以下取代基和值打算提供本发明的各方面和实施例的代表性实例。所述代表性值打算进一步定义和说明所述方面和实施例且不打算排除其它实施例或限制本发明的范围。就此来说，除非明确说明，否则优选特定值或取代基的表述不打算以任何方式将其它值或取代基从本发明排除。
在一个方面中，本发明涉及式I化合物：
Figure BDA0000498843530000151
所述R1部分选自：
H；
-C1-8烷基，例如-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)4CH3、-(CH2)2CH(CH3)2、-(CH2)5CH3和-(CH2)6CH3；
-C1-3亚烷基-C6-10芳基，例如苄基；
-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基，例如-CH2-吡啶基和-(CH2)2-吡啶基；
-C3-7环烷基，例如环戊基；
-[(CH2)2O]1-3CH3，例如-(CH2)2OCH3和-[(CH2)2O]2CH3；
-C1-6亚烷基-OC(O)R10，例如-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2CH(CH3)OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)OCH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH(CH3)OC(O)OCH2CH3、-CH(CH3)OC(O)O-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)OC(O)-环戊基、-CH2OC(O)O-环丙基、-CH(CH3)-OC(O)-O-环己基、-CH2OC(O)O-环戊基、-CH2CH(CH3)OC(O)-苯基、-CH2OC(O)O-苯基、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3和-CH(CH3)OC(O)-CH(NH2)CH2COOCH3；
-C1-6亚烷基-NR11R12，例如-(CH2)2-N(CH3)2、
-C1-6亚烷基-C(O)R13，例如-CH2C(O)OCH3、-CH2C(O)O-苄基、-CH2C(O)-N(CH3)2和
-C0-6亚烷基吗啉，例如-(CH2)2-吗啉和-(CH2)3-吗啉：
Figure BDA0000498843530000163
-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基，例如-(CH2)2SO2CH3；
Figure BDA0000498843530000164
Figure BDA0000498843530000171
所述R10部分选自：
-C1-6烷基，例如-CH3和-CH2CH3；
-O-C1-6烷基，例如-OCH3、-O-CH2CH3和-O-CH(CH3)2；
-C3-7环烷基，例如环戊基；
-O-C3-7环烷基，例如-O-环丙基、-O-环己基和-O-环戊基；
苯基；
-O-苯基；
-NR11R12；
-CH(R15)-NH2，例如-CH[CH(CH3)2]-NH2；
-CH(R15)-NHC(O)O-C1-6烷基，例如-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3；和
-CH(NH2)CH2COOCH3。
所述R11和R12部分独立地选自H、-C1-6烷基(例如CH3)和苄基。或者，R11和R12部分可合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-，例如形成基团，例如：
所述R13部分选自-O-C1-6烷基，例如-OCH3、-O-苄基，和-NR11R12，例如-N(CH3)2和
Figure BDA0000498843530000173
所述R14部分为-C1-6烷基(例如-CH3和-C(CH3)3)或-C0-6亚烷基-C6-10芳基。所述R15部分为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基。
此外，R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。例如，当R1为-C1-8烷基时，R1还可为基团例如-CH2CF3、-CH(CH3)CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH(CH2F)2、-C(CF3)2CH3和-CH(CH3)CF2CF3。
在一个实施例中，R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure BDA0000498843530000181
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。在一个具体实施例中，R1选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)6CH3、-CH2CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3和
Figure BDA0000498843530000182
其中R14为-CH3。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IId、IIi-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
在一个实施例中，R1为H。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IId、IIi-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
在另一实施例中，R1选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000183
在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IId、IIi-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。在本发明的一个方面中，可见这些化合物作为在本文中所述的合成程序中的前药或中间物的特定用途。所述前药部分的具体实例包括：其中R1为-C1-6亚烷基-OC(O)R10，例如-CH(CH3)OC(O)-O-环己基：
Figure BDA0000498843530000191
使得化合物为西来替昔酯(cilexetil ester)；或R1为-C0-6亚烷基吗啉，例如-(CH2)2-吗啉：
Figure BDA0000498843530000192
使得化合物为2-吗啉基乙基或霉酚酸酯(mofetil ester)；或
Figure BDA0000498843530000193
例如-CH2-5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮：
Figure BDA0000498843530000194
使得化合物为麦多米尔酯(medoxomil ester)。
在一个实施例中，R2为-OR21或-CH2OR21且R3为H或-CH3。这些实施例可描绘为式IIa-IId：
Figure BDA0000498843530000195
Figure BDA0000498843530000201
所述R21部分为H、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-CH(R22)-NH2、-C(O)-CH(R22)-NHC(O)O-C1-6烷基或-P(O)(OR23)2；且在一个特定实施例中，R21部分为H。所述R22部分为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基。所述R23部分为H、-C1-6烷基或苯基。
在一个实施例中，本发明化合物具有式IIa，且在一个示例性实施例中，R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure BDA0000498843530000202
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；Z选自-CH-和-N-；R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
Figure BDA0000498843530000203
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为卤基；或a为0，b为2且一个R6为卤基且另一R6为卤基或-CH3；或a为1，R5为卤基且b为0；或a为1，R5为卤基，b为1且R6为卤基；或a为1，R5为卤基，b为2且每一R6为卤基；且其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代；且在另一示例性实施例中，R1选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)6CH3、-CH2CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3和
Figure BDA0000498843530000204
其中R14为-CH3；R4选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-(CH2)3-O-CH2CH3、-(CH2)2-O-苯基、-(CH2)2OCH3和
Figure BDA0000498843530000211
其中R44为-CH3；且a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；或a为1，R5为3-氯且b为0；或a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯。
在一个实施例中，本发明化合物具有式IIb且在一个示例性实施例中，R1为H或-C1-8烷基；Z为-N-；R4为H或-C1-8烷基；且a和b为0；且在另一示例性实施例中，R1和R4为H。
在一个实施例中，本发明化合物具有式IIc且在一个示例性实施例中，R1为H或-C1-8烷基；Z为-CH-；R4为H或-C1-8烷基；a为0或a为1且R5为卤基；b为0或b为1或2且R6为卤基；且其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代且在另一示例性实施例中，R1为H、-CH2CH3或-(CH2)3CH3；R4为H；a为0或a为1且R5为3-氯；b为0或b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟。
在一个实施例中，本发明化合物具有式IId且在一个示例性实施例中，R1为H或-C1-8烷基；Z为-CH-；R4为H或-C1-8烷基；a为0；且b为0或b为1且R6为卤基；且在另一示例性实施例中，R1为H或-CH2CH3；R4为H或-CH2CH(CH3)2；且b为0或b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟。
在另一实施例中，R2与R1合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-且R3选自H和-CH3。所述R15和R16部分独立地选自H、-C1-6烷基和-O-C3-7环烷基，或R15和R16合起来形成＝O。这些可描绘为式IIe-IIh：
Figure BDA0000498843530000212
Figure BDA0000498843530000221
在本发明的一个方面中，可见这些化合物作为在本文中所述的合成程序中的前药或中间物的特定用途。R2为-CH2OP(O)(OH)2的化合物也可用作前药。在式IIe、IIf、IIg和IIh的化合物的一个实施例中，Z为-CH-，R4为H，a为0，b为1，R6为3′Cl且R15和R16为H。
在另一实施例中，R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-，其可分别描绘为式IIi和IIj：
Figure BDA0000498843530000222
在另一实施例中，R2和R3均为-CH3，其可描绘为式IIk：
Figure BDA0000498843530000223
在式IIi、IIj和IIk的化合物的一个实施例中，R1为H，Z为-CH-，R4为-C1-8烷基(例如-CH2CH(CH3)2)，a为0，b为1且R6为3′Cl。
所述Z部分选自-CH-和-N-。这些实施例可描绘为式IIIa和IIIb：
Figure BDA0000498843530000231
所述R4部分选自：
H；
-C1-8烷基，例如-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)4CH3、-(CH2)2CH(CH3)2、-(CH2)5CH3和-(CH2)6CH3；
-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基，例如-(CH2)3-O-CH2CH3；
-C1-3亚烷基-C6-10芳基，例如苄基；
-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基，例如-(CH2)2-O-苯基；
-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基，例如-CH2-吡啶基和-(CH2)2-吡啶基；
-C3-7环烷基，例如环戊基；
-[(CH2)2O]1-3CH3，例如-(CH2)2OCH3和-[(CH2)2O]2CH3；
-C1-6亚烷基-OC(O)R40，例如-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2CH(CH3)OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)OCH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH(CH3)OC(O)OCH2CH3、-CH(CH3)OC(O)O-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)OC(O)-环戊基、-CH2OC(O)O-环丙基、-CH(CH3)-OC(O)-O-环己基、-CH2OC(O)O-环戊基、-CH2CH(CH3)OC(O)-苯基、-CH2OC(O)O-苯基、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3和-CH(CH3)OC(O)-CH(NH2)CH2COOCH3；
-C1-6亚烷基-NR41R42，例如-(CH2)2-N(CH3)2、
Figure BDA0000498843530000232
-C1-6亚烷基-C(O)R43，例如-CH2C(O)OCH3、-CH2C(O)O-苄基、-CH2C(O)-N(CH3)2和
Figure BDA0000498843530000241
-C0-6亚烷基吗啉，例如-(CH2)2-吗啉和-(CH2)3-吗啉：
Figure BDA0000498843530000242
-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基，例如-(CH2)2SO2CH3；
Figure BDA0000498843530000243
所述R40部分选自：
-C1-6烷基，例如-CH3和-CH2CH3；
-O-C1-6烷基，例如-OCH3、-O-CH2CH3和-O-CH(CH3)2；
-C3-7环烷基，例如环戊基；
-O-C3-7环烷基，例如-O-环丙基、-O-环己基和-O-环戊基；
苯基；
-O-苯基；
-NR41R42；
-CH(R45)-NH2，例如-CH[CH(CH3)2]-NH2；
-CH(R45)-NHC(O)O-C1-6烷基，例如-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3；和
-CH(NH2)CH2COOCH3。
所述R41和R42部分独立地选自H、-C1-6烷基(例如CH3)和苄基。或者，所述R41和R42部分可合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-，例如形成基团，例如：
Figure BDA0000498843530000251
所述R43部分选自-O-C1-6烷基，例如-OCH3、-O-苄基，和-NR41R42，例如-N(CH3)2和
Figure BDA0000498843530000252
所述R44部分为-C1-6烷基(例如-CH3和-C(CH3)3)或-C0-6亚烷基-C6-10芳基。所述R45部分为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基。
此外，R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。例如，当R4为-C1-8烷基时，R4还可为基团例如-CH2CF3、-CH(CH3)CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH(CH2F)2、-C(CF3)2CH3和-CH(CH3)CF2CF3。
在一个实施例中，R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
Figure BDA0000498843530000253
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。在一个具体实施例中，R4选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-(CH2)3-O-CH2CH3、-(CH2)2-O-苯基、-(CH2)2OCH3和
Figure BDA0000498843530000254
其中R44为-CH3。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
在一个实施例中，R1为H。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。在另一实施例中，R1和R4均为H。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIh、IIm-IIo、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
在另一实施例中，R4选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40，-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000261
在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。在本发明的一个方面中，可见这些化合物作为在本文中所述的合成程序中的前药或中间物的特定用途。在一个实施例中，R1和R4均为所述前药部分。在另一实施例中，R1和R4中的一者为前药部分且另一者为H。所述前药部分的具体实例包括：其中R4为-C1-6亚烷基-OC(O)R10，例如-CH(CH3)OC(O)-O-环己基：
Figure BDA0000498843530000262
使得化合物为西来替昔酯；或R4为-C0-6亚烷基吗啉，例如-(CH2)2-吗啉：
Figure BDA0000498843530000263
使得化合物为2-吗啉基乙基或霉酚酸酯；或
Figure BDA0000498843530000264
例如-CH2-5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮：
Figure BDA0000498843530000265
使得化合物为麦多米尔酯。
R5和R6基团的编号如下：
Figure BDA0000498843530000271
整数“a”为0或1。R5部分(当存在时)选自卤基、-CH3、-CF3和-CN。在一个实施例中，a为0。在另一实施例中，a为1且R5为卤基，例如3-氯或3-氟。在另一实施例中，a为0或a为1且R5为卤基。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
整数“b”为0或1到3的整数。R6部分(当存在时)独立地选自卤基、-OH、-CH3、-OCH3、-CN和-CF3。在一个实施例中，b为0。在另一实施例中，b为1且R6选自Cl、F、-OH、-CH3、-OCH3、-CN和-CF3、2′-氯、3′-氯、2′-氟、3′-氟、2′-羟基、3′-羟基、3′-甲基、2′-甲氧基、3′-氰基或3′-三氟甲基。在另一实施例中，b为1且R6为卤基、-CH3或-OCH3、3′-氯、3′-甲基或2′-甲氧基。在另一实施例中，b为2且R6为2′-氟-5′-氯、2′，5′-二氯、2′，5′-二氟、2′-甲基-5′-氯、3′-氟-5′-氯、3′-羟基-5′-氯、3′，5′-二氯、3′，5′-二氟、2′-甲氧基-5′-氯、2′-甲氧基-5′-氟、2′-羟基-5′-氟、2′-氟-3′-氯、2′-羟基-5′-氯或2′-羟基-3′-氯。在另一实施例中，b为3且每一R6独立地为卤基或-CH3，例如2′-甲基-3′，5′-二氯或2′-氟-3′-甲基-5′-氯。在一个特定实施例中，b为0，或b为1且R6为卤基，或b为2且每一R6独立地选自卤基和-CH3。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。
在其它示例性实施例中，a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；a为1，R5为3-氯且b为0；或a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯。在其它实施例中，这些化合物具有式IIa-IIk、IIIa-IIIb和IVa-IVd。尤其受关注的为下式的化合物：
Figure BDA0000498843530000272
联苯基上的亚甲基连接基团任选地经1或2个-C1-6烷基或环丙基取代。例如，在一个实施例中，联苯基上的亚甲基连接基团未经取代；在另一实施例中，联苯基上的亚甲基连接基团经1个-C1-6烷基(例如-CH3)取代；且在另一实施例中，联苯基上的亚甲基连接基团经2个-C1-6烷基(例如2个-CH3基团)取代；在另一实施例中，联苯基上的亚甲基连接基团经环丙基取代。这些实施例分别描绘为式IVa-IVd：
Figure BDA0000498843530000281
在式IVa、IVb、IVc和IVd的化合物的一个实施例中，R1为H，R2为-OR21且R21为H，R3为H，Z为-CH-，R4为-C1-8烷基(例如-CH2CH(CH3)2)，a为0，b为1且R6为3′Cl。
在另一实施例中，R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure BDA0000498843530000282
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
Figure BDA0000498843530000283
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；或a为1，R5为3-氯且b为0；或a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯；且其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代。在这些化合物的一个特定实施例中，R2为-OR21或-CH2OR21；且R3为H或-CH3；其中R21为H。
另外，受关注的特定式I化合物包括在下列实例中阐明的那些化合物以及其医药上可接受的盐。
一般合成程序
本发明化合物可以由容易获得的起始物质，使用以下一般方法、实例中阐明的程序或使用所属领域的技术人员知晓的其它方法、试剂和起始物质而制备。尽管以下程序可说明本发明的特定实施例，但是应理解本发明的其它实施例可使用相同或相似的方法或使用所属领域的技术人员知晓的其它方法、试剂和起始物质以相似方式制备。还应理解在给出典型或优选处理条件(例如反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)的情况下，除非另有说明，否则也可使用其它处理条件。在一些情形下，在室温下进行反应且未进行实际温度测量。应理解室温可用于意指通常与实验室环境中的环境温度相关的范围内的温度，且一般将位于约18℃到约30℃的范围内。在其它情形下，在室温下进行反应且实际测量并记录温度。尽管最佳反应条件一般依不同反应参数(例如特定反应物、溶剂和用量)而变化，所属领域的技术人员可使用常规最优化程序容易地确定适宜的反应条件。
另外，正如所属领域的技术人员所明了，需要或要求常用保护基以预防某些官能团进行不需要的反应。相关技术中已熟知用于特定官能团的适宜的保护基和用于所述官能团的保护和脱除保护基的适宜条件和试剂的选择。如果需要，可使用除在本文中所述的程序中说明的那些之外的保护基。例如，大量保护基和其引入和去除描述于T.W.格林(Greene)和G.M.伍兹(Wuts)，有机合成中的保护基(Protecting Groups in OrganicSynthesis)，第四版，威利(Wiley)，纽约，2006和其中引用的参考文献中。
羧基保护基适用于预防羧基(carboxy group)处的不需要的反应，且实例包括但不限于甲基、乙基、叔丁基、苄基(Bn)、对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)、三甲基硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)、二苯基甲基(二苯甲基，DPM)等。氨基保护基适用于预防氨基处的不需要的反应，且实例包括但不限于叔丁氧基羰基(BOC)、三苯甲基(Tr)、苄氧基羰基(Cbz)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、甲酰基、三甲基硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)等。羟基保护基适用于预防羟基处的不需要的反应，且实例包括但不限于C1-6烷基；硅烷基，包括三C1-6烷基硅烷基，例如三甲基硅烷基(TMS)、三乙基硅烷基(TES)和叔丁基二甲基硅烷基(TBDMS)；酯(酰基)，包括C1-6烷酰基，例如甲酰基、乙酰基和特戊酰基，和芳族酰基(例如苯甲酰基)；芳基甲基，例如苄基(Bn)、对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)等。
使用标准脱除保护基技术和试剂以去除保护基，且可依使用的基团而变化。例如，当羧基保护基为甲基时，通常使用氢氧化钠或氢氧化锂，当羧基保护基为乙基或叔丁基时，通常使用酸例如TFA或HCl，且当羧基保护基为苄基时，可使用H2/Pd/C。BOC氨基保护基可使用酸性试剂(例如含于DCM中的TFA或含于1，4-二噁烷中的HCl)去除，而Cbz氨基保护基可通过采用催化氢化条件例如H2(1atm)和含于醇溶剂中的10％Pd/C(“H2/Pd/C”)去除。当羟基保护基为苄基时，通常使用H2/Pd/C，而当羟基保护基为酰基时，通常使用NaOH。
用于这些方案中的适宜的碱包括(通过说明而非限制的方式)碳酸钾、碳酸钙、碳酸钠、三乙胺、吡啶、1，8-二氮杂二环-[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、4-甲基吗啉、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁醇钾和金属氢化物。
用于这些方案的适宜的惰性稀释剂或溶剂包括(通过说明而非限制的方式)四氢呋喃(THF)、乙腈(MeCN)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、二甲基亚砜(DMSO)、甲苯、二氯甲烷(DCM)、氯仿(CHCl3)、四氯化碳(CCl4)、1，4-二噁烷、甲醇、乙醇、水等。
适宜的羧酸/胺偶联剂包括六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻(BOP)、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(N-吡咯烷基)鏻(PyBOP)、六氟磷酸N，N，N′，N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓(HATU)、(六氟磷酸2-(6-氯-1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基铵)(HCTU)、1，3-二环己基碳化二亚胺(DCC)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺(EDCI)、羰基二咪唑(CDI)、1-羟基苯并三唑(HOBt)等。偶联反应在惰性稀释剂中、在碱(例如DIPEA)存在下进行且在常规酰胺键形成条件下进行。
所有反应一般在约-78℃到100℃的范围内的温度(例如室温)下进行。可以通过使用薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和/或LCMS监测反应直到完成。反应可在数分钟内或可经历数小时(一般1-2小时且至多48小时)完成。一旦完成，可进一步处理所得混合物或反应产物以获得所需产物。例如，所得混合物或反应产物可进行如下程序中的一或多者：浓缩或分配(例如，在EtOAc与水之间或在含于EtOAc中的5％THF与1M磷酸之间分配)；萃取(例如，使用EtOAc、CHCl3、DCM、氯仿萃取)；洗涤(例如，使用饱和NaCl水溶液、饱和NaHCO3水溶液、Na2CO3(5％)、CHCl3或1M NaOH洗涤)；干燥(例如，经MgSO4、Na2SO4干燥或真空干燥)；过滤；结晶(例如从EtOAc和己烷结晶)；浓缩(例如真空浓缩)；和/或纯化(例如硅胶色谱法、快速色谱法、制备型HPLC、反相HPLC或结晶法)。
可如方案I所示，制备式I化合物以及其盐：
方案I
Figure BDA0000498843530000311
所述方法包括使化合物1与化合物2偶联的步骤，其中R1-R6、Z、a和b如针对式I所定义，且P选自H和适宜的氨基保护基，其实例包括叔丁氧基羰基、三苯甲基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、甲酰基、三甲基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基。当P为氨基保护基时，所述方法进一步包括在偶联步骤之前或在偶联步骤原位脱除式I化合物的保护基。
在R1为例如-OCH3或-OCH2CH3的基团的情形下，偶联步骤之后可为脱除保护基步骤以提供其中R1为例如-OH的基团的式I化合物。因此，一种制备本发明化合物的方法包括使化合物1与2偶联，任选地进行脱除保护基步骤以形成式I化合物或其医药上可接受的盐。
实例中描述制备化合物1的方法。化合物2一般可购得或可使用业内已知的程序制备。
认为本文中所述的某些中间物是新颖的且因此，所述化合物以本发明的其它方面提供，其包括例如式1化合物或其盐：
Figure BDA0000498843530000312
其中P为H或适宜的氨基保护基，其实例包括叔丁氧基羰基、三苯甲基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、甲酰基、三甲基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基；且R1、R2、R3、R5、R6、Z、a和b如针对式I所定义。
有关用于制备本发明的代表性化合物或其中间物的具体反应条件和其它程序的其它细节描述于以下阐明的实例中。
效用
本发明化合物具有脑啡肽酶(NEP)抑制活性，即所述化合物能够抑制酶催化活性。在另一实施例中，所述化合物不显示显著的血管紧张素转化酶抑制活性。化合物抑制NEP活性的能力的一种量度为抑制常数(pKi)。pKi值为以10为底数的离解常数(Ki)的负对数，其一般以摩尔单位报告。尤其受关注的本发明化合物为具有大于或等于6.0的对NEP的pKi的那些化合物，特定来说具有大于或等于7.0的pKi的那些化合物，且尤其更特定来说具有大于或等于8.0的pKi的那些化合物。在一个实施例中，受关注的化合物具有在6.0-6.9的范围内的pKi；在另一实施例中，受关注的化合物具有在7.0-7.9的范围内的pKi；在另一实施例中，受关注的化合物具有在8.0-8.9的范围内的pKi；且在再一实施例中，受关注的化合物具有在大于或等于9.0的范围内的pKi。所述值可通过业内熟知的技术以及在本文中所述的分析中来测定。
化合物抑制NEP活性的能力的另一种量度为表观抑制常数(IC50)，其为使NEP酶对底物的转化受半数最大抑制的化合物的摩尔浓度。pIC50值为以10为底数的IC50的负对数。尤其受关注的本发明化合物包括显示大于或等于约5.0的对NEP的pIC50的那些化合物。受关注的化合物还包括具有≥约6.0的对NEP的pIC50或≥约7.0的对NEP的pIC50的那些化合物。在另一实施例中，受关注的化合物具有在约7.0-11.0的范围内的对NEP的pIC50；且在另一实施例中，在约8.0-11.0的范围内，例如在约8.0-10.0的范围内。
应注意在一些情形中，本发明化合物可具有弱NEP抑制活性。在所述情形中，所属领域的技术人员应认识到所述化合物仍具有作为研究工具的效用。
确定本发明化合物的性质(例如NEP抑制活性)的示例性分析描述于实例中且通过说明而非限制的方式包括测量NEP抑制的分析(描述于分析1中)。有用的第二分析包括测量ACE抑制的分析(也描述于分析1中)和氨基肽酶P(APP)抑制的分析(描述于苏睿德(Sulpizio)等人(2005)药理学与实验治疗学杂志(JPET)315：1306-1313中)。评估麻醉大鼠中的ACE和NEP的活体内抑制效力的药效学分析描述于分析2中(也参见西摩(Seymour)等人(1985)高血压(Hypertension)7(增刊I)：I-35-I-42和威格尔(Wigle)等人(1992)加拿大生理药理杂志(Can.J.Physiol.Pharmacol.)70：1525-1528)，其中ACE抑制经测量为血管紧张素I压力反应的抑制百分比且NEP抑制经测量为增加的尿液环鸟甘3′，5′-单磷酸(cGMP)输出量。
有许多种可用于确定本发明化合物的其它效用的活体内分析。有意识的自发性高血压大鼠(SHR)模型为肾素依赖性高血压模型，且描述于分析3中。还参见因特甘(Intengan)等人(1999)循环(Circulation)100(22)：2267-2275和巴达尔(Badyal)等人(2003)印度药理杂志(Indian Journal of Pharmacology)35：349-362。有意识的乙酸脱氧皮质酮-盐(DOCA-盐)大鼠模型为可用于测量NEP活性的体积依赖性高血压模型，且描述于分析4中。还参见特拉帕尼(Trapani)等人(1989)心血管药理杂志(J.Cardiovasc.Pharmacol.)14：419-424，因特甘(Intengan)等人(1999)高血压(Hypertension)34(4)：907-913和上文的巴达尔(Badyal)等人(2003))。DOCA-盐模型尤其可用于评估测试化合物降低血压的能力以及测量测试化合物预防或延迟血压升高的能力。Dahl盐敏感性(DSS)高血压大鼠模型为对食用盐(NaCl)敏感的高血压模型，且描述于分析5中。还参见拉普(Rapp)(1982)高血压(Hypertension)4：753-763。在例如加藤(Kato)等人(2008)心血管药理杂志(J.Cardiovasc.Pharmacol.)51(1)：18-23中所述的肺动脉高血压的大鼠野百合碱模型为治疗肺动脉高血压的临床功效的可靠预测者。心力衰竭动物模型包括针对心力衰竭的DSS大鼠模型和主动脉-腔静脉瘘模型(动静脉短路(AV shunt))，后者描述于例如诺林(Norling)等人(1996)美国肾脏病学杂志(J.Amer.Soc.Nephrol.)7：1038-1044中。其它动物模型(例如热板、甩尾和福尔马林测试)以及神经病变性疼痛的脊神经结扎(SNL)模型可用于测量本发明化合物的止痛性质。参见例如马姆伯格(Malmberg)等人(1999)神经科学实验指南(Current Protocols in Neuroscience)8.9.1-8.9.15。
预期本发明化合物在以上所列的任何分析或具有相似性质的分析中抑制NEP酶。因此，上述分析可用于确定本发明化合物的治疗效用，例如其作为抗高血压药剂或止泻药剂的效用。本发明化合物的其它性质和效用可使用所属领域的技术人员熟知的其它活体外和活体内分析而证明。式I化合物可为活性药物以及前药。因此，当论述本发明化合物的活性时，应理解任何所述前药可在分析中不显示预期的活性，但预期一旦代谢可显示所需活性。
预期本发明化合物可用于治疗和/或预防对NEP抑制起反应的医学病状。因此，预期可通过投与治疗有效量的本发明化合物治疗患有可通过抑制NEP酶或通过增加其肽底物的含量而治疗的疾病或病症的患者。例如，通过抑制NEP，预期所述化合物可强化由NEP代谢产生的内源性肽(例如利尿钠肽、铃蟾肽、缓激肽、降血钙素、内皮素、脑啡肽、神经降压素、P物质和血管活性肠肽)的生物作用。因此，预期所述化合物具有针对例如肾、中枢神经、生殖和胃肠道系统的其它生理作用。
在本发明的一个实施例中，通过投与呈活性形式的本发明化合物(即，其中R1和R4为H且R2、R3、R5、R6、a、b和Z为如针对式I所定义的式I化合物)，治疗患有可通过抑制NEP酶治疗的疾病或病症的患者。
在另一实施例中，通过投与在活体外代谢以形成式I化合物(其中R1和R4为H且R2、R3、R5、R6、a、b和Z如针对式I所定义)的化合物治疗患者。
在另一实施例中，通过投与在R1基团处呈其前药形式的本发明化合物，即式I化合物来治疗患者，其中R1选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000341
在另一实施例中，通过投与在R4基团处呈其前药形式的本发明化合物，即式I化合物来治疗患者，其中R4选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40、-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure BDA0000498843530000342
在再一实施例中，通过投与在R1基团处且在R4基团处呈其前药形式的本发明化合物，治疗患者。
心血管疾病
预期本发明化合物可通过增强血管活性肽，如利尿钠肽和缓激肽的效应而适用于治疗和/或预防如心血管疾病的医学病状。参见例如罗克斯(Roques)等人(1993)药理学评论(Pharmacol.Rev.)45：87-146和登普西(Dempsey)等人(2009)美国病理学杂志(Amer.J.of Pathology)174(3)：782-796。特别相关的心血管疾病包括高血压和心力衰竭。高血压(通过说明而非限制的方式)包括：原发性高血压，其也称为本态性高血压或特发性高血压；继发性高血压；伴有肾病的高血压；伴有或不伴有肾病的重度高血压；肺高血压，包括肺动脉高血压；和顽固性高血压。心力衰竭(通过说明而非限制的方式)包括：充血性心力衰竭；急性心力衰竭；慢性心力衰竭，例如伴有左心室射血分数降低(也称为收缩性心力衰竭)或伴有左心室射血分数保持(也称为舒张性心力衰竭)；和急性和慢性代偿失调心力衰竭，伴有或不伴有肾病。因此，本发明的一个实施例涉及一种治疗高血压，具体来说原发性高血压或肺动脉高血压的方法，其包括向患者投与治疗有效量的本发明化合物。
对于原发性高血压的治疗，治疗有效量一般为足以降低患者血压的含量。这将包括温和到中度高血压和严重高血压。当用于治疗高血压时，所述化合物可与其它治疗剂(例如醛固酮拮抗剂、醛固酮合成酶抑制剂、血管紧张素转化酶抑制剂和双重作用性血管紧张素转化酶/脑啡肽酶抑制剂、血管紧张素转化酶2(ACE2)活化剂和刺激剂、血管紧张素II疫苗、抗糖尿病药剂、抗脂质药剂、抗血栓药剂、AT1受体拮抗剂和双重作用性AT1受体拮抗剂/脑啡肽酶抑制剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、双重作用性β-肾上腺素能受体拮抗剂/α1-受体拮抗剂、钙通道阻断剂、利尿剂、内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、脑啡肽酶抑制剂、利尿钠肽和其类似物、利尿钠肽清除受体拮抗剂、一氧化氮供体、非类固醇消炎剂、磷酸二酯酶抑制剂(具体来说PDE-V抑制剂)、前列腺素受体激动剂、肾素抑制剂、可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂和其组合)组合投与。在本发明的一个特定实施例中，本发明化合物与AT1受体拮抗剂、钙通道阻断剂、利尿剂或其组合组合且用于治疗原发性高血压。在本发明的另一特定实施例中，本发明化合物与AT1受体拮抗剂组合且用于治疗伴有肾病的高血压。当用于治疗顽固性高血压时，所述化合物可与其它治疗剂(例如醛固酮合成酶抑制剂)组合给予。
对于肺动脉高血压的治疗，治疗有效量一般足以降低肺血管阻力的量。疗法的其它目的在于改进患者的运动能力。例如，在临床设置中，治疗有效量可为提高患者舒适地行走达6分钟时间(涵盖约20-40米距离)的能力的量。当用于治疗肺动脉高血压时，所述化合物可与其它治疗剂(例如α-肾上腺素能受体拮抗剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、β2-肾上腺素能受体激动剂、血管紧张素转化酶抑制剂、抗凝血剂、钙通道阻断剂、利尿剂、内皮素受体拮抗剂、PDE-V抑制剂、前列腺素类似物、选择性血清素再摄取抑制剂和其组合)组合给予。在本发明的一个特定实施例中，本发明化合物与PDE-V抑制剂或选择性血清素再摄取抑制剂组合且用于治疗肺动脉高血压。
本发明的另一实施例涉及一种治疗心力衰竭，特定来说充血性心力衰竭(包括收缩性和舒张性充血性心力衰竭)的方法，其包括向患者给予治疗有效量的本发明化合物。治疗有效量一般为足以降低血压和/或改进肾功能的量。在临床设置中，治疗有效量可为足以改进心脏血流动力学(例如降低楔压、右心房压、填充压和血管阻力)的量。在一个实施例中，化合物呈静脉内剂型给予。当用于治疗心力衰竭时，所述化合物可与其它治疗剂例如腺苷受体拮抗剂、晚期糖基化终产物裂解剂、醛固酮拮抗剂、AT1受体拮抗剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、双重作用性β-肾上腺素能受体拮抗剂/α1-受体拮抗剂、糜蛋白酶抑制剂、地高辛(digoxin)、利尿剂、内皮素转化酶(ECE)抑制剂、内皮素受体拮抗剂、利尿钠肽和其类似物、利尿钠肽清除受体拮抗剂、一氧化氮供体、前列腺素类似物、PDE-V抑制剂、可溶性鸟苷酸环化酶活化剂和刺激剂和血管加压素受体拮抗剂组合投与。在本发明的一个特定实施例中，本发明化合物与醛固酮拮抗剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、AT1受体拮抗剂或利尿剂组合且用于治疗充血性心力衰竭。
腹泻
作为NEP抑制剂，预期本发明化合物抑制内源性脑啡肽的降解且因此所述化合物还可用于治疗腹泻(包括感染性和分泌性/水样腹泻)。参见例如鲍默(Baumer)等人(1992)内脏(Gut)33：753-758；法辛(Farthing)(2006)消化系统疾病(Digestive Diseases)24：47-58；和马克思-克拉达(
Figure BDA0000498843530000361
-Collado)(1987)欧洲药理杂志(Eur.J.Pharmacol.)144(2)：125-132。当用于治疗腹泻时，本发明化合物可与一或多种其它止泻药剂组合。
肾病
通过强化血管活性肽(如利尿钠肽和缓激肽)的作用，预期本发明化合物可提高肾功能(参见陈(Chen)等人(1999)循环(Circulation)100：2443-2448；李普金(Lipkin)等人(1997)国际肾脏杂志(Kidney Int.)52：792-801；和杜少尔(Dussaule)等人(1993)临床科学(Clin.Sci.)84：31-39)且可用于治疗和/或预防肾病。尤其受关注的肾病包括糖尿病性肾病变、慢性肾病、蛋白尿且尤其为急性肾损伤或急性肾功能衰竭(参见沙卡娃夫斯卡(Sharkovska)等人(2011)临床实验室(Clin.Lab.)57：507-515和纽瓦茨(Newaz)等人(2010)肾衰竭(Renal Failure)32：384-390)。当用于治疗肾病时，所述化合物可与其它治疗剂(例如血管紧张素转化酶抑制剂、AT1受体拮抗剂和利尿剂)组合投与。
预防性疗法
由于利尿钠肽的抗肥大和抗纤维化效果(参见波特(Potter)等人(2009)实验药理手册(Handbook of Experimental Pharmacology)191：341-366)，还预期本发明化合物可通过强化利尿钠肽的作用而用于预防性疗法中，例如用于预防心肌梗塞后的心功能不全的进展、预防血管成形术后的动脉再狭窄、预防血管手术后的血管壁增厚、预防动脉粥样硬化和预防糖尿病性血管病变。
青光眼
通过强化利尿钠肽的作用，预期本发明化合物可用于治疗青光眼。参见例如迪斯特豪斯特(Diestelhorst)等人(1989)国际眼科学(International Ophthalmology)12：99-101。当用于治疗青光眼时，本发明化合物可与一或多种其它抗青光眼药剂组合。
疼痛缓解
作为NEP抑制剂，预期本发明化合物可抑制内源性脑啡肽的降解且因此所述化合物还可用作止痛剂。参见例如洛克斯(Roques)等人(1980)自然(Nature)288：286-288和撒娜瓦拉(Thanawala)等人(2008)药靶研究最新进展(Current Drug Targets)9：887-894。当用于治疗疼痛时，本发明化合物可与一或多种其它抗痛觉药物(例如氨基肽酶N或二肽基肽酶III抑制剂、非类固醇消炎剂、单胺再摄取抑制剂、肌肉松弛剂、NMDA受体拮抗剂、阿片样物质受体激动剂、5-HT1D血清素受体激动剂和三环抗抑郁剂)组合。
其它效用
因其NEP抑制性质，还预期本发明化合物可用作镇咳剂，以及可用于治疗与肝硬化相关的门静脉高压症(参见姗绍(Sansoe)等人(2005)肝脏病学杂志(J.Hepatol.)43：791-798)、癌症(参见魏塞丽(Vesely)(2005)调查医学杂志(J.Investigative Med.)53：360-365)、抑郁症(参见诺贝尔(Noble)等人(2007)治疗目标的实验观点(Exp.Opin.Ther.Targets)11：145-159)、月经失调、早产、子痫前期、子宫内膜异位、生殖病症(例如，男性和女性不育、多囊性卵巢综合症、移植失败)和男性和女性性功能障碍(包括男性勃起障碍和女性性唤起病症)。更具体来说，预期本发明化合物可用于治疗女性性功能障碍(参见佩雷德(Pryde)等人(2006)医药化学杂志(J.Med.Chem.)49：4409-4424)，其通常定义为女性患者难以或不能在性表现上找到满足感。此包括多种不同的女性性功能障碍，其包括(通过说明而非限制的方式)性欲减退病症、性唤起病症或性高潮病症和性疼痛病症。当用于治疗所述病症，尤其女性性功能障碍时，本发明化合物可与一或多种以下第二药剂组合：PDE-V抑制剂、多巴胺激动剂、雌激素受体激动剂和/或拮抗剂、雄激素和雌激素。因其NEP抑制性质，还预期本发明化合物具有消炎性质，且尤其当与斯他汀(statin)组合使用时，预期具有所述效用。
近期研究表明NEP在胰岛素缺乏性糖尿病和饮食诱发的肥胖症中在调节神经功能方面起作用。科皮(Coppey)等人(2011)神经药理学(Neuropharmacology)60：259-266。因此，因其NEP抑制性质，还预期本发明化合物可用于提供预防由糖尿病或饮食诱发的肥胖症引起的神经损害。
本发明化合物的每剂投与量或每天总投与量可预先确定或其可基于个别患者通过考虑众多因素加以确定，所述因素包括患者病状的性质和严重性；所治疗的病状；患者的年龄、体重和一般健康状况；患者对活性药剂的耐受性；投药途径；药理学考虑，如所投与的化合物和任何第二药剂的活性、功效、药物动力学和毒理学概况；等。治疗患有疾病或医学病状(如高血压)的患者可以预定剂量或由治疗医师确定的剂量开始，且将持续一段为预防、改善、遏制或减轻疾病或医学病状的症状所必需的时期。经受此治疗的患者通常将受常规监测以确定疗法的有效性。举例来说，在治疗高血压时，血压测量结果可用于确定治疗的有效性。本文所述的其它疾病和病状的类似指标已熟知且易由治疗医师获得。医师进行连续监测将确保将在任何既定时间投与最佳量的本发明化合物，以及有助于确定治疗的持续时间。当还投与第二药剂时，此举特别有价值，因为所述第二药剂的选择、剂量和疗法的持续时间也可能需要调整。以此方式，可在治疗过程中调整治疗方案和给药时程以便投与展现所要有效性的最低量活性药剂且另外，只要成功治疗疾病或医学病状必需，便可连续投药。
研究工具
因为本发明化合物具有NEP酶抑制活性，故所述化合物还可用作研究工具以调查或研究具有NEP酶的生物系统或样本，例如，以研究其中NEP酶或其肽底物起作用的疾病。具有NEP酶的任何适宜的生物系统或样本都可用于可在活体外或活体内进行的所述研究中。适合所述研究的代表性生物系统或样本包括但不限于细胞、细胞提取物、质膜、组织样本、离体器官、哺乳动物(例如小鼠、大鼠、豚鼠、兔、狗、猪、人等)等，其中哺乳动物尤其受关注。在本发明的一个特定实施例中，通过投与NEP抑制量的本发明化合物，抑制哺乳动物中的NEP酶活性。本发明化合物还可通过使用所述化合物进行生物分析而用作研究工具。
当用作研究工具时，包含NEP酶的生物系统或样本一般与NEP抑制量的本发明化合物接触。在所述生物系统或样本暴露于所述化合物之后，使用常规程序和设备，例如通过在结合性分析中测量受体结合性或在功能分析中测量配位体介导的变化，来测定抑制NEP酶的效果。暴露包括使细胞或组织与化合物接触；例如通过腹膜内、口服、静脉内、皮下、或吸入投与等向哺乳动物投与所述化合物。所述测定步骤可包括测量反应(定量分析)或可包括做出观察(定性分析)。测量反应包括例如使用常规程序和设备，例如酶活性分析和在功能分析中测量酶底物或产物介导的变化，来测定化合物对生物系统或样本的作用。分析结果可用于确定活性程度以及实现所需结果所必需的化合物的量，即NEP酶抑制量。一般来说，测定步骤将包括测定抑制NEP酶的效果。
另外，本发明化合物可用作评估其它化合物的研究工具，且因此还适用于筛选分析中以发现例如具有NEP抑制活性的新的化合物。以此方式，将本发明化合物用作分析中的标准物，以允许比较用测试化合物获得的结果和用本发明化合物获得的结果，从而鉴别具有大约相等或较高活性的测试化合物(如果存在)。举例来说，对一种测试化合物或一组测试化合物的pKi数据与本发明化合物的pKi数据进行比较，从而识别具有所要性质的测试化合物，例如pKi值约等于或高于本发明化合物的测试化合物(如果存在)。本发明的此方面包括产生比较数据(使用适当分析)与分析测试数据两者作为各别实施例以识别相关测试化合物。因此，可在生物分析中通过包括以下步骤的方法评估测试化合物：(a)用测试化合物进行生物分析以提供第一分析值；(b)用本发明化合物进行所述生物分析以提供第二分析值；其中步骤(a)是在步骤(b)之前、之后或与步骤(b)同时进行；和(c)将来自步骤(a)的所述第一分析值与来自步骤(b)的所述第二分析值进行比较。示例性生物分析包括NEP酶抑制分析。
医药组合物和调配物
本发明化合物通常以医药组合物或调配物形式投与患者。这些医药组合物可通过任何可接受的投药途径投与患者，包括(但不限于)口服、经直肠、经阴道、经鼻、吸入、局部(包括经皮)、经眼和不经肠投药模式。另外，本发明化合物可例如口服以每天多次剂量(例如每日两次、三次或四次)、单次每日剂量或单次每周剂量投与。应了解适于特定投药模式的本发明化合物的任何形式(即游离碱、游离酸、医药上可接受的盐、溶剂化物等)都可用于本文论述的医药组合物中。
因此，在一个实施例中，本发明涉及一种包含医药上可接受的载剂和本发明化合物的医药组合物。所述组合物必要时可含有其它治疗剂和/或调配剂。当论述组合物时，“本发明化合物”还可在本文中称为“活性剂”，以与调配物的其它组分(例如载剂)区分。因此，应理解术语“活性剂”包括式I化合物以及所述化合物的医药上可接受的盐、溶剂化物和前药。
本发明的医药组合物一般包含治疗有效量的本发明化合物。然而，所属领域的技术人员认识到医药组合物可包含超过治疗有效量(例如呈整体组合物)，或少于治疗有效量(即设计用于多次投与以达到治疗有效量的个别单位剂量)。一般来说，组合物包含约0.01-95重量％的活性剂，其包括约0.01-30重量％，例如约0.01-10重量％，其中实际量取决于调配物自身、投与途径、给药频率等。在一个实施例中，适合口服剂型的组合物例如可包含约5-70重量％或约10-60重量％的活性剂。
任何常规载剂或赋形剂都可用于本发明的医药组合物中。特定载剂或赋形剂或载剂或赋形剂的组合的选择取决于用于治疗特定患者的投与模式或医学病状或疾病状态的类型。就此来说，用于特定投与模式的适宜组合物的制备完全在医药领域的技术人员的技术范围内。另外，可购得在所述组合物中使用的载剂或赋形剂。通过进一步说明的方式，常规调配技术描述于雷明顿(Remington)：药学科学和实践(The Science and Practice ofPharmacy)，第20版，利平科特·威廉姆斯与怀特出版社(Lippincott Williams&White)，巴尔的摩(Baltimore)，马里兰(Maryland)(2000)；和H.C.安塞尔(Ansel)等人，药物剂型和药品递送系统(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)，第7版，利平科特.威廉姆斯与怀特出版社(Lippincott Williams&White)，巴尔的摩(Baltimore)，马里兰(Maryland)(1999)中。
可充当医药上可接受的载剂的物质的代表性实例包括但不限于以下：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，例如微晶纤维素和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油，例如花生油、棉花籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原质水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；压缩推进剂气体，例如氟氯碳化物和氢氟碳化物；和用于医药组合物中的其它无毒相容性物质。
一般通过将活性剂与医药上可接受的载剂和一或多种可选的成分充分且精细地混合或掺和，来制备医药组合物。接着可使用常规程序和设备，将所得均匀掺和的混合物成形为或装入片剂、胶囊、药丸、药罐、药筒、分配器等。
在一个实施例中，医药组合物适合经口投与。用于经口投与的适宜的组合物可呈如下形式：胶囊、片剂、药丸、糖锭、扁囊剂、糖衣药丸、粉剂、颗粒；含于水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；水包油或油包水型液体乳液；酏剂或糖浆等；各自包含预定量的活性剂。
当计划以固体剂型(胶囊、片剂、药丸等)经口投与时，所述组合物一般包含活性剂和一或多种医药上可接受的载剂，例如柠檬酸钠或磷酸二钙。固体剂型还可包含：填料或延伸剂，例如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和/或碳酸钠；溶解延迟剂，例如石蜡；吸收加速剂，例如季铵化合物；润湿剂，例如鲸蜡醇和/或单硬脂酸甘油酯；吸收剂，例如高岭土和/或膨润土；润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和/或其混合物；着色剂；和缓冲剂。
释放剂、润湿剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于医药组合物中。用于片剂、胶囊、药丸等的示例性包衣剂包括用于肠溶性包衣的那些包衣剂，例如邻苯二甲酸乙酸纤维素、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、偏苯三酸乙酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、琥珀酸乙酸羟丙基甲基纤维素等。医药上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸、山梨醇、酒石酸、磷酸等。
还可使用例如呈不同比例的羟丙基甲基纤维素或其它聚合物基质、脂质体和/或微球体，调配组合物以提供活性剂的缓慢或控制释放。另外，本发明的医药组合物可包含乳浊剂且可经调配以使其任选地地以延迟方式仅或优先在胃肠道的某些部分释放活性剂。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。活性剂还可任选地与一或多种上述赋形剂一起呈微囊封形式。
用于经口投与的适宜的液体剂型包括(通过说明的方式)医药上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型一般包括活性剂和惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(例如，棉籽、花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、甘油、四氢呋喃基醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯和其混合物。悬浮液可包含悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶和其混合物。
当计划用于经口投与时，本发明的医药组合物可呈单位剂型包装。术语“单位剂型”是指适合对患者给药的物理个别单元，即每一单元包含经计算以单独或与一或多个其它单元组合产生所需治疗效果的预定量的活性剂。例如，所述单位剂型可为胶囊、片剂、药丸等。
在另一实施例中，本发明组合物适于吸入投药，且通常将呈气雾剂或粉剂形式。通常使用熟知递送装置，如喷雾器、干粉或定剂量吸入器投与这些组合物。喷雾器装置产生高速气流，其使组合物喷成雾状而携带入患者的呼吸道中。一种示例性喷雾器调配物包含活性剂溶解于载剂中以形成溶液，或活性剂经微粒化并与载剂合并而形成具有可呼吸尺寸的微粒化粒子的悬浮液。干粉吸入器投与呈自由流动粉末形式的活性剂，其在吸气期间分散于患者的气流中。一种示例性干粉调配物包含活性剂与赋形剂(如乳糖、淀粉、甘露醇、右旋糖、聚乳酸、聚丙交酯-共-乙交酯和其组合)的干燥掺合物。定剂量吸入器使用压缩推进剂气体放出数量经测量的活性剂。一种示例性定剂量调配物包含活性剂于液化推进剂(如氯氟碳化物或氢氟烷烃)中的溶液或悬浮液。这些调配物的任选的组分包括共溶剂，如乙醇或戊烷；和表面活性剂，如脱水山梨糖醇三油酸酯、油酸、卵磷脂、甘油和月桂基硫酸钠。这些组合物通常通过将经冷冻或加压的氢氟烷烃加入含有活性剂、乙醇(如果存在)和表面活性剂(如果存在)的适合容器中来制备。为制备悬浮液，使活性剂微粒化且接着与推进剂合并。或者，悬浮液调配物可通过使活性剂的微粒化粒子上的表面活性剂涂层喷雾干燥来加以制备。调配物接着装入形成吸入器的一部分的气雾剂罐中。
本发明化合物还可不经肠(例如通过皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内注射)投与。对于此类投与，活性剂是以无菌溶液、悬浮液或乳液形式提供。用于制备所述调配物的示例性溶剂包括水、盐水、低分子量醇(如丙二醇)、聚乙二醇、油、明胶、脂肪酸酯(如油酸乙酯)等。不经肠调配物还可含有一或多种抗氧化剂、增溶剂、稳定剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。表面活性剂、其它稳定剂或pH值调节剂(酸、碱或缓冲剂)和抗氧化剂尤其可适用于对调配物提供稳定性，例如使可存在于化合物中的酯和酰胺键的水解降到最低或避免所述水解。可通过使用无菌可注射介质、杀菌剂、过滤、辐照或加热使这些调配物无菌。在一个特定实施例中，不经肠调配物包含环糊精水溶液作为医药上可接受的载剂。适合的环糊精包括含有6个或更多个在1，4位经键联连接的α-D-吡喃葡萄糖单元的环状分子，如淀粉酶、β-环糊精或环庚直链淀粉中。示例性环糊精包括环糊精衍生物，例如羟丙基和磺酸丁基醚环糊精，例如羟丙基-β-环糊精和磺酸丁基醚β-环糊精。所述调配物的示例性缓冲液包括基于羧酸的缓冲液，例如柠檬酸盐、乳酸盐和马来酸盐缓冲溶液。
本发明化合物还可使用已知经皮递送系统和赋形剂经皮投与。举例来说，化合物可与渗透增强剂(例如丙二醇、聚乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等)混合，且并入贴片或类似递送系统中。必要时，在所述经皮组合物中可使用其它赋形剂，包括胶凝剂、乳化剂和缓冲剂。
第二药剂
本发明化合物可用作疾病的唯一治疗或可与一或多种其它治疗剂组合以获得所需治疗效果。因此，在一个实施例中，本发明的医药组合物含有可与本发明化合物共同投与的其它药物。例如，所述组合物可进一步包含一或多种药物(也称为“第二药剂”)。所述治疗剂在业内已熟知，且包括腺苷受体拮抗剂、α-肾上腺素能受体拮抗剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、β2-肾上腺素能受体激动剂、双重作用性β-肾上腺素能受体拮抗剂/α1-受体拮抗剂、晚期糖基化终产物裂解剂、醛固酮拮抗剂、醛固酮合成酶抑制剂、氨基肽酶N抑制剂、雄激素、血管紧张素转化酶抑制剂和双重作用性血管紧张素转化酶/脑啡肽酶抑制剂、血管紧张素转化酶2活化剂和刺激剂、血管紧张素II疫苗、抗凝血剂、抗糖尿病药剂、止泻药剂、抗青光眼药剂、抗脂质药剂、镇痛药剂、抗血栓药剂、AT1受体拮抗剂和双重作用性AT1受体拮抗剂/脑啡肽酶抑制剂以及多功能血管紧张素受体阻断剂、缓激肽受体拮抗剂、钙通道阻断剂、糜蛋白酶抑制剂、地高辛、利尿剂、多巴胺激动剂、内皮素转化酶抑制剂、内皮素受体拮抗剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、雌激素、雌激素受体激动剂和/或拮抗剂、单胺再摄取抑制剂、肌肉松弛剂、利尿钠肽和其类似物、利尿钠肽清除受体拮抗剂、脑啡肽酶抑制剂、一氧化氮供体、非类固醇消炎剂、N-甲基d-天冬氨酸受体拮抗剂、阿片样物质受体激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、前列腺素类似物、前列腺素受体激动剂、肾素抑制剂、选择性血清素再摄取抑制剂、钠通道阻断剂、可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂、三环抗抑郁剂、血管加压素受体拮抗剂和其组合。本文中详细描述了这些药剂的具体实例。
因此，在本发明的另一方面中，医药组合物包含本发明化合物、第二活性剂和医药上可接受的载剂。第三、第四等活性剂也可包括于所述组合物中。在组合疗法中，投与的本发明化合物的量以及第二药剂的量可小于一般在单一疗法中投与的量。
本发明化合物可与第二活性剂以物理方式混合，从而形成含有两种药剂的组合物；或每一药剂可存在于分开且不同的组合物中，所述组合物同时或在不同时间投与患者。举例来说，可使用常规程序和设备将本发明化合物与第二活性剂组合以形成包含本发明化合物和第二活性剂的活性剂组合。另外，活性剂可与医药上可接受的载剂组合，从而形成包含本发明化合物、第二活性剂和医药上可接受的载剂的医药组合物。在此实施例中，通常混合或掺和组合物的组分以产生物理混合物。接着使用本文所述的任何途径以治疗有效量投与物理混合物。
或者，活性剂可在投与患者之前保持分开且不同。在此实施例中，药剂在投与之前不以物理方式混合在一起，而是以各别组合物形式同时或在不同时间投与。这些组合物可分开包装或可一起包装于试剂盒中。当在不同时间投与时，第二药剂通常将在投与本发明化合物之后不到24小时(从投与本发明化合物同时到给药后约24小时范围内的任何时间)投与。此也称为依序投与。因此，本发明化合物与另一活性剂可使用两种片剂(一种片剂对应一种活性剂)同时或依序口服投与，其中依序可意指在投与本发明化合物之后立即投与或在某一预定时间后(例如1小时后或3小时后)投与。还预期第二药剂可在投与本发明化合物之后超过24小时加以投与。或者，所述组合可通过不同投与途径投与，即一种药剂口服投与且另一药剂通过吸入投与。
在一个实施例中，试剂盒包含含量足以实施本发明方法的包含本发明化合物的第一剂型、和至少一种包含本文阐述的一或多种第二药剂的另一剂型。第一剂型和第二(或第三等)剂型合起来包含用于治疗或预防患者疾病或医学病状的治疗有效量的活性剂。
当包括第二药剂时，其是以治疗有效量存在以便其在与本发明化合物共投与时通常以产生治疗有益效应的量投与。第二药剂可呈医药上可接受的盐、溶剂化物、光学纯立体异构体等形式。第二药剂还可呈前药形式，例如具有已经酯化的羧酸基团的化合物。因此，本文所列的第二药剂打算包括所有这些形式，且可在市面上购得或可使用常规程序和试剂制备。
在一个实施例中，本发明化合物是与腺苷受体拮抗剂组合投与，所述拮抗剂的代表性实例包括但不限于那昔茶碱(naxifylline)、罗咯茶碱(rolofylline)、SLV-320、茶碱(theophylline)和托纳普茶碱(tonapofylline)。
在一个实施例中，本发明化合物是与α-肾上腺素能受体拮抗剂组合投与，所述拮抗剂的代表性实例包括但不限于多沙唑嗪(doxazosin)、哌唑嗪(prazosin)、坦索罗新(tamsulosin)和特拉唑嗪(terazosin)。
本发明化合物还可与β1-肾上腺素能受体拮抗剂(“β1-阻断剂”)组合投与。代表性β1-阻断剂包括但不限于醋丁洛尔(acebutolol)、阿普洛尔(alprenolol)、氨磺洛尔(amosulalol)、阿罗洛尔(arotinolol)、阿替洛尔(atenolol)、苯呋洛尔(befunolol)、倍他洛尔(betaxolol)、贝凡洛尔(bevantolol)、比索洛尔(bisoprolol)、波吲洛尔(bopindolol)、布新洛尔(bucindolol)、布库洛尔(bucumolol)、布非洛尔(bufetolol)、丁呋洛尔(bufuralol)、布尼洛尔(bunitrolol)、布拉洛尔(bupranolol)、布瑞丁(bubridine)、丁非洛尔(butofilolol)、卡拉洛尔(carazolol)、卡替洛尔(carteolol)、卡维洛尔(carvedilol)、噻利洛尔(celiprolol)、塞他洛尔(cetamolol)、氯拉洛尔(cloranolol)、地来洛尔(dilevalol)、依泮洛尔(epanolol)、艾司洛尔(esmolol)、茚诺洛尔(indenolol)、拉贝洛尔(labetolol)、左布诺洛尔(levobunolol)、甲吲洛尔(mepindolol)、美替洛尔(metipranolol)、美托洛尔(metoprolol)(例如琥珀酸美托洛尔和酒石酸美托洛尔)、莫普洛尔(moprolol)、纳多洛尔(nadolol)、萘肟洛尔(nadoxolol)、奈必洛尔(nebivalol)、尼普洛尔(nipradilol)、氧烯洛尔(oxprenolol)、喷布洛尔(penbutolol)、皮布洛尔(perbutolol)、吲哚洛尔(pindolol)、普拉洛尔(practolol)、丙萘洛尔(pronethalol)、普萘洛尔(propranolol)、索他洛尔(sotalol)、舒非洛尔(sufinalol)、他林洛尔(talindol)、特他洛尔(tertatolol)、替利洛尔(tilisolol)、替莫洛尔(timolol)、托利洛尔(toliprolol)、希苯洛尔(xibenolol)和其组合。在一个特定实施例中，β1-拮抗剂选自阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、普萘洛尔、索他洛尔和其组合。一般来说，β1-阻断剂将以足以提供每剂约2-900mg的量投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与β2-肾上腺素能受体激动剂组合投与，所述激动剂的代表性实例包括但不限于沙丁氨醇(albuterol)、比托特罗(bitolterol)、非诺特罗(fenoterol)、福莫特罗(formoterol)、茚达特罗(indacaterol)、异他林(isoetharine)、左旋沙丁氨醇(levalbuterol)、奥西那林(metaproterenol)、吡布特罗(pirbuterol)、沙丁氨醇(salbutamol)、沙甲氨醇(salmefamol)、沙美特罗(salmeterol)、特布他林(terbutaline)、维兰特罗(vilanterol)等。一般来说，β2-肾上腺素能受体激动剂将以足以提供每剂约0.05-500μg的量投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与晚期糖基化终产物(AGE)裂解剂组合投与，所述裂解剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)阿拉布利(alagebrium)(或ALT-711)和TRC4149。
在另一实施例中，本发明化合物是与醛固酮拮抗剂组合投与，所述拮抗剂的代表性实例包括但不限于依普利酮(eplerenone)、螺内酯和其组合。一般来说，醛固酮拮抗剂将以足以提供每天约5-300mg的量投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与氨基肽酶N或二肽基肽酶III抑制剂组合投与，所述抑制剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)苯丁抑制素(bestatin)和PC18(2-氨基-4-甲基磺酰基丁烷硫醇、甲硫氨酸硫醇)。
本发明化合物还可与血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂组合投与。代表性ACE抑制剂包括但不限于奎那普利(accupril)、阿拉普利(alacepril)、苯那普利(benazepril)、苯那普利拉(benazeprilat)、卡托普利(captopril)、西罗普利(ceranapril)、西拉普利(cilazapril)、地拉普利(delapril)、依拉普利(enalapril)、依拉普利拉(enalaprilat)、福辛普利(fosinopril)、福辛普利拉(fosinoprilat)、咪达普利(imidapril)、赖诺普利(lisinopril)、莫西普利(moexipril)、蒙诺普利(monopril)、莫维托普利(moveltopril)、喷托普利(pentopril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利(quinapril)、喹那普利拉(quinaprilat)、雷米普利(ramipril)、雷米普利拉(ramiprilat)、乙酸萨拉新(saralasin acetate)、螺普利(spirapril)、替莫普利(temocapril)、群多普利(trandolapril)、佐芬普利(zofenopril)和其组合。在一个特定实施例中，ACE抑制剂选自：苯那普利、卡托普利、依拉普利、赖诺普利、雷米普利和其组合。一般来说，ACE抑制剂将以足以提供每天约1-150mg的量投与。
在另一实施例中，本发明化合物是与双重作用性血管紧张素转化酶/脑啡肽酶(ACE/NEP)抑制剂组合投与，所述抑制剂的实例包括但不限于：AVE-0848((4S,7S，12bR)-7-[3-甲基-2(S)-硫基丁酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]-苯并氮呯-4-甲酸)；AVE-7688(艾尔帕曲(ilepatril))和其母体化合物；BMS-182657(2-[2-氧代-3(S)-[3-苯基-2(S)-硫基丙酰胺基]-2,3，4，5-四氢-1H-1-苯并氮呯-1-基]乙酸)；CGS-35601(N-[1-[4-甲基-2(S)-硫基戊酰胺基]环戊基羰基]-L-色氨酸)；法西多曲(fasidotril)；法西多曲拉(fasidotrilate)；依拉普利拉(enalaprilat)；ER-32935((3R,6S,9aR)-6-[3(S)-甲基-2(S)-硫基戊酰胺基]-5-氧代全氢噻唑并[3,2-a]氮呯-3-甲酸)；吉姆帕曲拉(gempatrilat)；MDL-101264((4S,7S，12bR)-7-[2(S)-(2-(N-吗啉基)乙酰硫基)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；MDL-101287([4S-[4α，7α(R*)，12bβ]]-7-[2-(羧甲基)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；奥马帕曲拉(omapatrilat)；RB-105(N-[2(S)-(巯基甲基)-3(R)-苯基丁基]-L-丙氨酸)；赛帕曲拉(sampatrilat)；SA-898((2R,4R)-N-[2-(2-羟基苯基)-3-(3-巯基丙酰基)噻唑烷-4-基羰基]-L-苯基丙氨酸)；Sch-50690(N-[1(S)-羧基-2-[N2-(甲磺酰基)-L-离氨酰基氨基]乙基]-L-缬氨酰-L-酪氨酸)；且还可包括其组合。在一个特定实施例中，ACE/NEP抑制剂选自：AVE-7688、依拉普利拉、法西多曲、法西多曲拉、奥马帕曲拉、赛帕曲拉和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与血管紧张素转化酶2(ACE2)活化剂或刺激剂组合投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与血管紧张素II疫苗组合投与，所述疫苗的实例包括但不限于ATR12181和CYT006-AngQb。
在一个实施例中，本发明化合物是与抗凝血剂组合投与，所述抗凝血剂的代表性实例包括但不限于香豆素，例如华法令(warfarin)；肝素；和直接凝血酶抑制剂，例如阿加曲班(argatroban)、比伐卢定(bivalirudin)、达比加群(dabigatran)和来匹卢定(lepirudin)。
在另一实施例中，本发明化合物是与抗糖尿病药剂组合投与。代表性抗糖尿病药剂包括可注射药物以及口服有效药物和其组合。可注射药物的实例包括但不限于胰岛素和胰岛素衍生物。口服有效药物的实例包括但不限于双胍，例如二甲双胍(metformin)；胰高血糖素拮抗剂；α-葡萄糖苷酶抑制剂，例如阿卡波糖(acarbose)和米格列醇(miglitol)；二肽基肽酶IV抑制剂(DPP-IV抑制剂)，例如阿格列汀(alogliptin)、德纳列汀(denagliptin)、利拉列汀(linagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、西他列汀(sitagliptin)和维格列汀(vildagliptin)；美格列奈(meglitinides)，例如瑞格列奈(repaglinide)；噁二唑烷二酮；磺酰脲，例如氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(glyburide)和妥拉磺脲(tolazamide)；噻唑烷二酮，例如吡格列酮(pioglitazone)和罗格列酮(rosiglitazone)；和其组合。
在另一实施例中，本发明化合物是与止泻治疗组合投与。代表性治疗选项包括但不限于口服复水溶液(ORS)、洛哌丁胺(loperamide)、地芬诺酯(diphenoxylate)和次水杨酸铋(bismuth sabsalicylate)。
在另一实施例中，本发明化合物是与抗青光眼药剂组合投与。代表性抗青光眼药剂包括但不限于：α-肾上腺素能激动剂，例如溴莫尼定(brimonidine)；β1-肾上腺素能受体拮抗剂；表面β1-阻断剂，例如贝他索洛尔(betaxolol)、左布诺洛尔(levobunolol)和噻吗洛尔(timolol)；碳酸酐酶抑制剂，例如乙酰唑胺(acetazolamide)、布尔佐胺(brinzolamide)或多佐胺(dorzolamide)；胆碱能激动剂，例如西维美林(cevimeline)和DMXB-假木贼碱(DMXB-anabaseine)；肾上腺素化合物；缩瞳剂，例如毛果芸香碱(pilocarpine)；和前列腺素类似物。
在另一实施例中，本发明化合物是与抗脂质药剂组合投与。代表性抗脂质药剂包括但不限于：胆固醇酯转移蛋白抑制剂(CETP)，例如安彻普(anacetrapib)、达彻普(dalcetrapib)和托彻普(torcetrapib)；斯他汀类，例如阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、罗素他汀(rosuvastatin)和辛伐他汀(simvastatin)；和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与抗血栓药剂组合投与。代表性抗血栓药剂包括但不限于：阿司匹林；抗血小板药剂，例如氯吡格雷(clopidogrel)、普拉格雷(prasugrel)和噻氯匹定(ticlopidine)；肝素；和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与AT1受体拮抗剂(也称为血管紧张素II1型受体阻断剂(ARB))组合投与。代表性ARB包括但不限于阿比沙坦(abitesartan)、阿齐沙坦(azilsartan)(例如阿齐沙坦酯(azilsartan medoxomil))、苄基氯沙坦(benzyllosartan)、坎地沙坦(candesartan)、坎地沙坦酯(candesartan cilexetil)、依利沙坦(elisartan)、恩布沙坦(embusartan)、伊洛他沙坦(enoltasosartan)、依普罗沙坦(eprosartan)、EXP3174、福沙坦(fonsartan)、福拉沙坦(forasartan)、甘氨酰洛沙坦(glycyllosartan)、厄贝沙坦(irbesartan)、异特林(isoteoline)、洛沙坦酯(losartan)、美多西米(medoximil)、米法沙坦(milfasartan)、奥美沙坦(olmesartan)(例如奥美沙坦麦多米尔(olmesartan medoxomil))、奥泊米沙坦(opomisartan)、普拉沙坦(pratosartan)、利匹沙坦(ripisartan)、沙普立沙坦(saprisartan)、色拉新(saralasin)、沙梅新(sarmesin)、TAK-591、他索沙坦(tasosartan)、替米沙坦(telmisartan)、缬沙坦(valsartan)、佐拉沙坦(zolasartan)和其组合。在一个特定实施例中，ARB选自阿齐沙坦酯、坎地沙坦酯、依普罗沙坦、厄贝沙坦、洛沙坦、奥美沙坦麦多米尔、沙普立沙坦、他索沙坦、替米沙坦、缬沙坦和其组合。示例性盐和/或前药包括坎地沙坦酯、甲磺酸依普罗沙坦、洛沙坦钾盐和奥美沙坦麦多米尔。一般来说，ARB将以足以提供每剂约4-600mg的量投与，其中示例性日剂量在每日20-320mg的范围内。
本发明化合物还可与双重作用性药剂，例如AT1受体拮抗剂/脑啡肽酶抑制剂(ARB/NEP)抑制剂组合投与，所述药剂的实例包括但不限于描述于阿里格雷迪(Allegretti)等人于2008年4月23日申请的美国公开案第2008/0269305号和第2009/0023228号中的化合物，例如化合物4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰胺基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸。
本发明化合物还可与如科鲁兹(Kurtz)和凯尔文(Klein)(2009)高血压研究(Hypertension Research)32：826-834中所述的多功能血管紧张素受体阻断剂组合投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与缓激肽受体拮抗剂(例如，艾替班特(icatibant)(HOE-140))组合投与。预期所述组合疗法可呈现预防血管神经性水肿或缓激肽含量升高的其它非所需结果的优势。
在一个实施例中，本发明化合物是与钙通道阻断剂组合投与。代表性钙通道阻断剂包括但不限于氨氯地平(amlodipine)、阿尼帕米(anipamil)、阿拉尼平(aranipine)、巴尼地平(barnidipine)、苄环烷(bencyclane)、贝尼地平(benidipine)、苄普地尔(bepridil)、克仑硫卓(clentiazem)、西尼地平(cilnidipine)、桂益嗪(cinnarizine)、地尔硫卓(diltiazem)、依福地平(efonidipine)、依高地平(elgodipine)、依他苯酮(etafenone)、非洛地平(felodipine)、芬地林(fendiline)、氟桂利嗪(flunarizine)、戈洛帕米(gallopamil)、依拉地平(isradipine)、拉西地平(lacidipine)、乐卡地平(lercanidipine)、利多氟嗪(lidoflazine)、洛美利嗪(lomerizine)、马尼地平(manidipine)、米贝地尔(mibefradil)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼古地平(niguldipine)、尼鲁地平(niludipine)、尼伐地平(nilvadipine)、尼莫地平(nimodipine)、尼索地平(nisoldipine)、尼群地平(nitrendipine)、尼伐地平(nivaldipine)、呱克昔林(perhexiline)、普尼拉明(prenylamine)、罗斯定(ryosidine)、司莫地尔(semotiadil)、特罗地林(terodiline)、噻帕米(tiapamil)、维拉帕米(verapamil)和其组合。在一个特定实施例中，钙通道阻断剂选自氨氯地平、苄普地尔、地尔硫卓、非洛地平、依拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼鲁地平、尼莫地平、尼索地平、罗斯定、维拉帕米和其组合。一般来说，钙通道阻断剂将以足以提供每剂约2-500mg的量投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与糜蛋白酶抑制剂，例如TPC-806和2-(5-甲酰基氨基-6-氧代-2-苯基-1，6-二氢嘧啶-1-基)-N-[{3，4-二氧代-1-苯基-7-(2-吡啶基氧基)}-2-庚基]乙酰胺(NK3201)组合投与。
在一个实施例中，本发明化合物是与利尿剂组合投与。代表性利尿剂包括但不限于：碳酸酐酶抑制剂，例如乙酰唑胺和双氯非那胺(dichlorphenamide)；亨氏环(loop)利尿剂，其包括磺酰胺衍生物(例如乙酰唑胺、安布赛特(ambuside)、阿佐赛特(azosernide)、布美他尼(bumetanide)、布他唑胺(butazolamide)、氯米非那胺(chloraminophenamide)、氯非那胺(clofenamide)、氯帕胺(clopamide)、氯索隆(clorexolone)、二磺法胺(disulfamide)、艾索唑胺(ethoxolamide)、呋塞米(furosemide)、美夫西特(mefruside)、醋甲唑胺(methazolamide)、吡咯他尼(piretanide)、托拉塞米(torsemide)、曲帕胺(tripamide)和希帕胺(xipamide))以及非磺酰胺利尿剂(例如依他尼酸(ethacrynic acid))和其它苯氧基乙酸化合物(例如替尼酸(tienilic acid)、茚达立酮(indacrinone)和喹唑嗪(quincarbate))；渗透利尿剂，例如甘露醇；保钾利尿剂，其包括醛固酮拮抗剂(例如螺内酯)和Na+通道抑制剂(例如阿米洛利(amiloride)和氨苯蝶啶(triamterene))；噻嗪(thiazide)和噻嗪类利尿剂，例如阿尔噻嗪(althiazide)、苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)、苄氢氯噻嗪(benzylhydrochlorothiazide)、苄噻嗪(benzthiazide)、布噻嗪(buthiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、氯噻嗪(chlorothiazide)、环戊噻嗪(cyclopenthiazide)、环噻嗪(cyclothiazide)、依匹噻嗪(epithiazide)、乙噻嗪(ethiazide)、芬喹唑(fenquizone)、氟甲噻嗪(flumethiazide)、氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氢氟甲噻嗪(hydroflumethiazide)、吲哒帕胺(indapamide)、甲氯噻嗪(methylclothiazide)、美替克仑(meticrane)、美托拉宗(metolazone)、对氟噻嗪(paraflutizide)、聚噻嗪(polythiazide)、喹乙唑酮(quinethazone)、四氯噻嗪(teclothiazide)和三氯甲噻嗪(trichloromethiazide)；和其组合。在一个特定实施例中，利尿剂选自阿米洛利、布美他尼、氯噻嗪、氯噻酮、双氯非那胺、依他尼酸、呋塞米、氢氯噻嗪、氢氟甲噻嗪、吲哒帕胺、甲氯噻嗪、美托拉宗、托拉塞米、氨苯蝶啶和其组合。利尿剂将以足以提供每天约5-50mg，更一般来说每天6-25mg的量投与，常用剂量为每天6.25mg、12.5mg或25mg。
本发明化合物还可与内皮素转化酶(ECE)抑制剂组合投与，所述抑制剂的实例包括但不限于膦酰二肽(phosphoramidon)、CGS26303和其组合。
在一个特定实施例中，本发明化合物是与内皮素受体拮抗剂组合投与。代表性内皮素受体拮抗剂包括但不限于：影响内皮素A受体的选择性内皮素受体拮抗剂，例如阿伏生坦(avosentan)、安倍生坦(ambrisentan)、阿曲生坦(atrasentan)、BQ-123、克拉生坦(clazosentan)、达卢生坦(darusentan)、西他生坦(sitaxentan)和兹博替坦(zibotentan)；和影响内皮素A和B受体的双重内皮素受体拮抗剂，例如波生坦(bosentan)、马西替坦(macitentan)、替唑生坦(tezosentan)。
在另一实施例中，本发明化合物是与一或多种HMG-CoA还原酶抑制剂(其也称为斯他汀)组合投与。代表性斯他汀包括但不限于阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、罗素他汀(rosuvastatin)和辛伐他汀(simvastatin)。
在一个实施例中，本发明化合物是与单胺再摄取抑制剂组合投与，所述抑制剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)去甲肾上腺素再摄取抑制剂，例如阿托莫西汀(atomoxetine)、安非他酮(buproprion)和安非他酮代谢物羟基安非他酮(hydroxybuproprion)、麦普替林(maprotiline)、瑞波西汀(reboxetine)和维洛沙秦(viloxazine)；选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)，例如西酞普兰(citalopram)和西酞普兰代谢物去甲西酞普兰(desmethylcitalopram)、达帕西汀(dapoxetine)、依地普仑(escitalopram)(例如草酸依地普仑)、氟西汀(fluoxetine)和氟西汀去甲基代谢物诺氟西汀(norfluoxetine)、乐服克(fluvoxamine)(例如马来酸乐服克)、帕罗西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)和舍曲林代谢物去甲舍曲林(demethylsertraline)；双重血清素-去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)，例如比西发定(bicifadine)、度洛西汀(duloxetine)、米那普伦(milnacipran)、奈法唑酮(nefazodone)和文拉法新(venlafaxine)；和其组合。
在另一实施例中，本发明化合物是与肌肉松弛剂组合投与，所述肌肉松弛剂的实例包括但不限于卡利普多(carisoprodol)、氯唑沙宗(chlorzoxazone)、环苯扎林(cyclobenzaprine)、二氟尼柳(diflunisal)、美他沙酮(metaxalone)、美索巴莫(methocarbamol)和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与利尿钠肽或类似物组合投与，所述利尿钠肽或类似物的实例包括但不限于：卡培立肽(carperitide)、CD-NP(利莱疗法(NileTherapeutics))、CU-NP、奈西利肽(nesiritide)、PL-3994(帕拉丁技术公司(PalatinTechnologies，Inc.))、乌拉立肽(ularitide)、蛇毒肽(cenderitide)和描述于小川(Ogawa)等人(2004)生物化学杂志(J.Biol.Chem.)279：28625-31中的化合物。所述化合物还称为利尿钠肽受体-A(NPR-A)激动剂。在另一实施例中，本发明化合物是与利尿钠肽清除受体(NPR-C)拮抗剂(例如SC-46542、cANF(4-23)和AP-811(威尔(Veale)(2000)生物有机医药化学快报(Bioorg Med Chem Lett)10：1949-52))组合投与。例如，当与NEP抑制剂噻尔芬(thiorphan)组合时，AP-811显示协同作用(魏格纳(Wegner)(1995)临床与实验高血压(Clin.Exper.Hypert.)17：861-876)。
在另一实施例中，本发明化合物是与脑啡肽酶(NEP)抑制剂组合投与。代表性NEP抑制剂包括但不限于：AHU-377；坎沙曲(candoxatril)；坎沙曲拉(candoxatrilat)；右卡多曲(dexecadotril)((+)-N-[2(R)-(乙酰基硫甲基)-3-苯基丙酰基]甘氨酸苄酯)；CGS-24128(3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-24592((S)-3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-25155(N-[9(R)-(乙酰基硫甲基)-10-氧代-1-氮杂环癸-2(S)-基羰基]-4(R)-羟基-L-脯氨酸苄酯)；描述于海普沃斯(Hepworth)等人的WO2006/027680(辉瑞公司(Pfizer Inc.))中的3-(1-氨甲酰基环己基)丙酸衍生物；JMV-390-1(2(R)-苄基-3-(N-羟基氨甲酰基)丙酰基-L-异亮氨酰基-L-亮氨酸)；依卡曲尔(ecadotril)；膦酰二肽(phosphoramidon)；利托噻尔芬(retrothiorphan)；RU-42827(2-(巯基甲基)-N-(4-吡啶基)苯丙酰胺)；RU-44004(N-(4-吗啉基)-3-苯基-2-(硫基甲基)丙酰胺)；SCH-32615((S)-N-[N-(1-羧基-2-苯基乙基)-L-苯基丙氨酰基]-β-丙氨酸)和其前药SCH-34826((S)-N-[N-[1-[[(2,2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-基)甲氧基]羰基]-2-苯基乙基]-L-苯基丙氨酰基]-β-丙氨酸)；斯洛芬(sialorphin)；SCH-42495(N-[2(S)-(乙酰基硫甲基)-3-(2-甲基苯基)丙酰基]-L-甲硫氨酸乙酯)；斯平洛芬(spinorphin)；SQ-28132(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]亮氨酸)；SQ-28603(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]-β-丙氨酸)；SQ-29072(7-[[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]庚酸)；噻尔芬(thiorphan)和其前药消旋卡多曲(racecadotril)；UK-69578(顺式-4-[[[1-[2-羧基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]环戊基]羰基]氨基]环己烷甲酸)；UK-447,841(2-{1-[3-(4-氯苯基)丙基氨甲酰基]-环戊基甲基}-4-甲氧基丁酸)；UK-505,749((R)-2-甲基-3-{1-[3-(2-甲基苯并噻唑-6-基)丙基氨甲酰基]环戊基}丙酸)；5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸和5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸乙酯(WO2007/056546)；达路曲(daglutril)[(3S,2′R)-3-{1-[2′-(乙氧基羰基)-4′-苯基丁基]-环戊-1-羰基氨基}-2,3，4，5-四氢-2-氧代-1H-1-苯并氮呯-1-乙酸]，其描述于肯德(Khder)等人的WO2007/106708(诺华公司(Novartis AG))中；和其组合。在一个特定实施例中，NEP抑制剂选自AHU-377、坎沙曲、坎沙曲拉、CGS-24128、膦酰二肽、SCH-32615、SCH-34826、SQ-28603、赛尔芬和其组合。在一个特定实施例中，NEP抑制剂为化合物，例如达路曲或CGS-26303([N-[2-(联苯-4-基)-1(S)-(1H-四唑-5-基)乙基]氨基]甲基膦酸)，其具有作为内皮素转化酶(ECE)和NEP的抑制剂的活性。还可使用其它双重作用性ECE/NEP化合物。NEP抑制剂将以足以提供每天约20-800mg的量投与，典型日剂量在每天50-700mg，更一般来说每天100-600或100-300mg的范围内。
在一个实施例中，本发明化合物是与一氧化氮供体组合投与，所述供体的实例包括但不限于尼可地尔(nicorandil)；有机硝酸酯，例如四硝酸季戊四醇酯；和斯德酮亚胺(sydnonimine)，例如林西多明(linsidomine)和吗多明(molsidomine)。
在另一实施例中，本发明化合物是与非类固醇消炎剂(NSAID)组合投与。代表性NSAID包括但不限于：阿西美辛(acemetacin)、乙酰基水杨酸、阿氯芬酸(alclofenac)、阿明洛芬(alminoprofen)、氨芬酸(amfenac)、氨普立糖(amiprilose)、阿莫西平(amoxiprin)、阿尼罗酸(anirolac)、阿扎丙宗(apazone)、阿扎丙酮(azapropazone)、贝诺酯(benorilate)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、贝比派瑞(bezpiperylon)、溴哌莫(broperamole)、布氯酸(bucloxicacid)、卡洛芬(carprofen)、环氯茚酸(clidanac)、双氯芬酸(diclofenac)、二氟尼柳(diflunisal)、地弗他酮(diftalone)、依诺利康(enolicam)、依托度酸(etodolac)、依托考昔(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬氯酸(fenclofenac)、苯克洛酸(fenclozic acid)、非诺洛芬(fenoprofen)、芬替酸(fentiazac)、非普拉宗(feprazone)、氟芬那酸(flufenamic acid)、氟苯柳(flufenisal)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、呋罗芬酸(furofenac)、异丁芬酸(ibufenac)、异布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚布洛芬(indoprofen)、伊索克酸(isoxepac)、异噁噻酰胺(isoxicam)、酮洛芬(ketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、罗非咪唑(lofemizole)、氯诺昔康(lornoxicam)、甲氯芬那酸盐(meclofenamate)、甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)、美洛昔康(meloxicam)、美色拉明(mesalamine)、米诺布洛芬(miroprofen)、莫非布宗(mofebutazone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、氟尼酸(niflumic acid)、奥沙普秦(oxaprozin)、欧比那酸(oxpinac)、氧代苯丁氮酮(oxophenbutazone)、苯基丁氮酮(phenylbutazone)、吡罗昔康(piroxicam)、吡咯布洛芬(pirprofen)、普拉洛芬(pranoprofen)、双水杨酯(salsalate)、舒多昔康(sudoxicam)、柳氮磺氨吡啶(sulfasalazine)、舒林酸(sulindac)、舒洛芬(suprofen)、替诺昔康(tenoxicam)、硫平酸(tiopinac)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、硫噁洛芬(tioxaprofen)、托芬那酸(tolfenamicacid)、托美汀(tolmetin)、三氟米酯(triflumidate)、齐多美辛(zidometacin)、佐美酸(zomepirac)和其组合。在一个特定实施例中，NSAID选自依托度酸、氟比洛芬、异布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、美洛昔康、萘普生、奥沙普秦、吡罗昔康和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与N-甲基d-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂组合投与，所述拮抗剂的实例(通过说明而非限制的方式)包括金刚烷胺(amantadine)、右美沙芬(dextromethorphan)、右丙氧芬(dextropropoxophene)、氯胺酮(ketamine)、凯托米酮(ketobemidone)、美金刚胺(memantine)、美沙酮(methadone)等。
在再一实施例中，本发明化合物是与阿片样物质受体激动剂(也称为阿片样物质止痛剂)组合给予。代表性阿片样物质受体激动剂包括但不限于：丁丙诺啡(buprenorphine)、布托啡诺(butorphanol)、可待因(codeine)、二氢可待因(dihydrocodeine)、芬太尼(fentanyl)、氢可酮(hydrocodone)、氢吗啡酮(hydromorphone)、左洛啡烷(levallorphan)、羟甲左吗喃(levorphanol)、哌替啶(meperidine)、美沙酮(methadone)、吗啡、纳布啡(nalbuphine)、纳美芬(nalmefene)、纳络芬(nalorphine)、纳洛酮(naloxone)、纳曲酮(naltrexone)、羟考酮(oxycodone)、羟吗啡酮(oxymorphone)、喷他佐辛(pentazocine)、丙氧芬(propoxyphene)、曲马多(tramadol)和其组合。在某些实施例中，阿片样物质受体激动剂选自可待因、二氢可待因、氢可酮、氢吗啡酮、吗啡、羟考酮、羟吗啡酮、曲马多和其组合。
在一个特定实施例中，本发明化合物是与磷酸二酯酶(PDE)抑制剂，尤其PDE-V抑制剂组合给予。代表性PDE-V抑制剂包括但不限于阿伐那非(avanafil)、罗地那非(lodenafil)、米罗那非(mirodenafil)、西地那非(sildenafil)他达那非(tadalafil)
Figure BDA0000498843530000532
伐地那非(vardenafil)和乌地那非(udenafil)。
在另一实施例中，本发明化合物是与前列腺素类似物(也称为类前列腺素或前列腺环素类似物)组合给予。代表性前列腺素类似物包括但不限于贝前列素钠(beraprostsodium)、比马前列素(bimatoprost)、依前列醇(epoprostenol)、伊洛前列素(iloprost)、拉坦前列素(latanoprost)、他氟前列素(tafluprost)、曲伏前列素(travoprost)和曲前列环素(treprostinil)，尤其受关注的为比马前列素、拉坦前列素和他氟前列素。
在另一实施例中，本发明化合物是与前列腺素受体激动剂组合给予，所述激动剂的实例包括但不限于比马前列素、拉坦前列素和他氟前列素等。
本发明化合物还可与肾素抑制剂组合给予，所述抑制剂的实例包括但不限于阿利吉仑(aliskiren)、依那吉仑(enalkiren)、雷米吉林(remikiren)和其组合。
在另一实施例中，本发明化合物是与选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)组合给予。代表性SSRI包括但不限于：西酞普兰(citalopram)和西酞普兰代谢物去甲西酞普兰(desmethylcitalopram)、达帕西汀(dapoxetine)、依地普仑(escitalopram)(例如草酸依地普仑)、氟西汀(fluoxetine)和氟西汀去甲基代谢物诺氟西汀(norfluoxetine)、乐服克(fluvoxamine)(例如马来酸乐服克)、帕罗西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)和舍曲林代谢物去甲舍曲林(demethylsertraline)和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与5-HT1D血清素受体激动剂组合给予，所述激动剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)曲坦类(triptans)，例如阿莫曲坦(almotriptan)、阿维曲坦(avitriptan)、依来曲坦(eletriptan)、夫罗曲坦(frovatriptan)、纳拉曲坦(naratriptan)、利扎曲坦(rizatriptan)、舒马曲坦(sumatriptan)和佐米曲坦(zolmitriptan)。
在一个实施例中，本发明化合物是与钠通道阻断剂组合投与，所述阻断剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)卡马西平(carbamazepine)、磷苯妥英(fosphenytoin)、拉莫三嗪(lamotrignine)、利多卡因(lidocaine)、美西律(mexiletine)、奥卡西平(oxcarbazepine)、苯妥英(phenytoin)和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂或活化剂组合投与，所述刺激剂或活化剂的实例包括但不限于阿他西呱(ataciguat)、里奥西呱(riociguat)和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与三环抗抑郁剂(TCA)组合投与，所述三环抗抑郁剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)阿米替林(amitriptyline)、氧阿米替林(amitriptylinoxide)、布替林(butriptyline)、氯咪帕明(clomipramine)、地美替林(demexiptiline)、地昔帕明(desipramine)、二苯西平(dibenzepin)、二甲他林(dimetacrine)、度硫平(dosulepin)、多塞平(doxepin)、丙咪嗪(imipramine)、氧米帕明(imipraminoxide)、洛非帕明(lofepramine)、美利曲辛(melitracen)、美他帕明(metapramine)、硝沙西平(nitroxazepine)、去甲替林(nortriptyline)、诺昔替林(noxiptiline)、哌泊非嗪(pipofezine)、丙吡西平(propizepine)、普罗替林(protriptyline)、奎纽帕明(quinupramine)和其组合。
在一个实施例中，本发明化合物是与血管加压素受体拮抗剂组合投与，所述拮抗剂的实例包括(通过说明而非限制的方式)考尼伐坦(conivaptan)和托伐普坦(tolvaptan)。
组合的第二治疗剂还可用于与本发明化合物的其它组合疗法中。例如，本发明化合物可与利尿剂和ARB、或钙通道阻断剂和ARB、或利尿剂和ACE抑制剂、或钙通道阻断剂和斯他汀组合。具体实例包括ACE抑制剂依拉普利(呈马来酸盐形式)与利尿剂氢氯噻嗪的组合(在商标下出售)、或钙通道阻断剂氨氯地平(呈苯磺酸盐形式)和ARB奥美沙坦(呈麦多米尔前药形式)的组合、或钙通道阻断剂和斯他汀的组合，所有这些实例也都可与本发明化合物一起使用。其它治疗剂(例如α2-肾上腺素能受体激动剂和血管加压素受体拮抗剂)也可用于组合疗法中。示例性α2-肾上腺素能受体激动剂包括可乐定(clonidine)、右美托咪啶(dexmedetomidine)和胍法辛(guanfacine)。
以下调配物说明本发明的代表性医药组合物。
用于口服投与的示例性硬质明胶胶囊
充分掺和本发明化合物(50g)、440g经喷雾干燥的乳糖和10g硬脂酸镁。然后将所得组合物装入硬质明胶胶囊中(500mg组合物/胶囊)。或者，将本发明化合物(20mg)与淀粉(89mg)、微晶纤维素(89mg)和硬脂酸镁(2mg)充分掺和。然后将混合物通过No.45目U.S.筛且装入硬质明胶胶囊中(200mg组合物/胶囊)。
或者，将本发明化合物(30g)、第二药剂(20g)、440g经喷雾干燥的乳糖和10g硬脂酸镁充分掺和，且如上文所述进行处理。
用于口服投与的示例性明胶胶囊调配物
将本发明化合物(100mg)与聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(50mg)和淀粉粉末(250mg)充分掺和。然后将混合物装入明胶胶囊中(400mg组合物/胶囊)。或者，将本发明化合物(70mg)和第二药剂(30mg)与聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(50mg)和淀粉粉末(250mg)充分掺和，且将所得混合物装入明胶胶囊中(400mg组合物/胶囊)。
或者，将本发明化合物(40mg)与微晶纤维素(Avicel PH103；259.2mg)和硬脂酸镁(0.8mg)充分掺和。然后将混合物装入明胶胶囊(尺寸#1，白色，不透明)中(300mg组合物/胶囊)。
用于口服投与的示例性片剂调配物
使本发明化合物(10mg)、淀粉(45mg)和微晶纤维素(35mg)通过No.20目U.S.筛且充分混合。在50-60℃下干燥如此产生的颗粒且通过No.16目U.S.筛。将聚乙烯吡咯烷酮溶液(4mg，呈含于无菌水中的10％溶液)与羧甲基淀粉钠(4.5mg)、硬脂酸镁(0.5mg)和滑石(1mg)混合，且然后将所述混合物通过No.16目U.S.筛。然后将羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石添加到颗粒。在混合之后，在压片机上压制所述混合物以获得重100mg的片剂。
或者，将本发明化合物(250mg)与微晶纤维素(400mg)、发烟二氧化硅(10mg)和硬脂酸(5mg)充分掺和。然后压制所述混合物以形成片剂(665mg组合物/片剂)。
或者，将本发明化合物(400mg)与玉米淀粉(50mg)、交联羧甲基纤维素钠(25mg)、乳糖(120mg)和硬脂酸镁(5mg)充分掺和。然后压制所述混合物以形成单刻痕片剂(600mg组合物/片剂)。
或者，使用明胶水溶液(20mg)将本发明化合物(100mg)与玉米淀粉(100mg)充分掺和。所述混合物经干燥且研磨成精细粉末。然后将微晶纤维素(50mg)和硬脂酸镁(5mg)与明胶调配物混合，制粒且压制所得混合物以形成片剂(100mg本发明化合物/片剂)。
用于口服投与的示例性悬浮液调配物
混合以下成分以形成每10mL悬浮液包含100mg本发明化合物的悬浮液：
Figure BDA0000498843530000551
Figure BDA0000498843530000561
用于口服投与的示例性液体调配物
适宜的液体调配物为包含基于羧酸的缓冲液(例如柠檬酸盐、乳酸盐和马来酸盐缓冲剂溶液)的调配物。例如，将本发明化合物(其可与DMSO预混合)与100mM柠檬酸铵缓冲液掺和且将pH调整到pH5，或与100mM柠檬酸溶液掺和且将pH调整到pH2。所述溶液还可包括增溶性赋形剂(例如环糊精)，例如所述溶液可包括10重量％的羟丙基-β-环糊精。
其它适宜的调配物包括5％NaHCO3溶液，含有或不含环糊精。
用于注射投与的示例性可注射调配物
将本发明化合物(0.2g)与0.4M乙酸钠缓冲溶液(2.0mL)掺和。必要时使用0.5N盐酸水溶液或0.5N氢氧化钠水溶液将所得溶液的pH调整到pH4，且然后添加足够的注射用水以提供20mL的总体积。然后通过无菌过滤器(0.22微米)过滤所述混合物以提供适合注射投与的无菌溶液。
用于吸入投与的示例性组合物
将本发明化合物(0.2mg)微粒化且然后与乳糖(25mg)掺和。接着将所述经掺和的混合物装入明胶吸入药筒中。使用例如干粉吸入器投与药筒的内容物。
或者，将微粒化的本发明化合物(10g)分散于通过将卵磷脂(0.2g)溶于去矿物质水(200mL)中而制备的溶液中。所得悬浮液经喷雾干燥且然后微粒化以形成包括具有小于约1.5μm平均直径的颗粒的微粒化组合物。然后，当通过吸入器投与时，以足以提供每剂约10μg到约500μg本发明化合物的量将所述微粒化组合物装入含有加压1，1，1，2-四氟乙烷的定剂量吸入药筒中。
或者，将本发明化合物(25mg)溶于经柠檬酸盐缓冲(pH5)的等渗盐水(125mL)中。搅拌所述混合物且进行声波处理直到化合物溶解。检查溶液的pH且必要时通过缓慢添加1N NaOH水溶液调整到pH5。使用提供每剂约10μg到约500μg本发明化合物的喷雾器装置，投与所述溶液。
实例
提供以下制备和实例以说明本发明的具体实施例。然而，除非明确说明，否则所述具体实施例不打算以任何方式限制本发明的范围。
除非另有说明，否则以下缩写具有下列含义，且本文中使用且未定义的任何其它缩写都具有其标准公认含义：
AcOH                 乙酸
BOC                  叔丁氧基羰基(-C(O)OC(CH3)3)
(BOC)2O              二碳酸二叔丁酯
Bn                   苄基
DCC                  二环己基碳化二亚胺
DCM                  二氯甲烷(dichloromethane/methylene chloride)
DIBAL                氢化二异丁基铝
DIPEA                N，N-二异丙基乙胺
DMAP                 4-二甲基氨基吡啶
DMF                  N，N-二甲基甲酰胺
DMSO                 二甲基亚砜
Dnp                  2,4-二硝基苯基
EDC                  1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺
Et3N                 三乙胺
Et2O                 乙醚
EtOAc                乙酸乙酯
EtOH                 乙醇
HEPES                4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸
HOBt                 1-羟基苯并三唑
LiHMDS               双(三甲基硅烷)氨基锂
Mca                  (7-甲氧基香豆素-4-基)酰基
MeCN                 乙腈
MeOH                 甲醇
MTBE                 甲基叔丁基醚
NaHMDS               双(三甲基硅烷)氨基钠
Pd(dppf)2Cl2          1，1-双(联苯基膦基)二茂铁二氯化钯
Pd(PPh3)4             四(三苯基膦)钯(0)
PE                   石油醚
Figure BDA0000498843530000581
DPP-Pd   基于二氧化硅的联苯基膦钯(II)催化剂
Figure BDA0000498843530000582
Pd(0)    基于二氧化硅的钯(0)催化剂
TFA             三氟乙酸
THF             四氢呋喃
除非另有说明，否则所有物质(例如试剂、起始物质和溶剂)都可购自商业供货商(例如西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)、福路卡里德尔-德汉公司(Fluka Riedel-de
Figure BDA0000498843530000584
)等)且无需进一步纯化即使用。
除非另有说明，否则在氮气氛围下进行反应。反应进展通过薄层色谱法(TLC)、分析型高效液相色谱法(分析型HPLC)和质谱法监测，其细节在具体实例中给出。分析型HPLC中所用的溶剂如下：溶剂A为98％H2O/2％MeCN/1.0mL/LTFA；溶剂B为90％MeCN/10％H2O/1.0mL/L TFA。
如例如每个制备中明确所述处理反应物；通常通过萃取和其它纯化方法，如温度依赖性和溶剂依赖性结晶和沉淀来纯化反应混合物。此外，反应混合物是通过通常使用Microsorb C18和Microsorb BDS柱填充物和常规洗脱剂进行制备型HPLC来加以常规纯化的。反应进展通常通过液相色谱质谱(LCMS)来测量。异构体的表征是通过核奥弗豪泽效应光谱分析(Nuclear Overhauser effect spectroscopy，NOE)进行。通过质谱和1H-NMR光谱按常规进行反应产物的表征。对于NMR测量，将样品溶解于氘化溶剂(CD3OD、CDCl3或DMSO-d6)中，且用Varian Gemini2000仪器(400MHz)在标准观察条件下获得1H-NMR光谱。通常使用以Applied Biosystems(加利福尼亚州福斯特城(Foster City，CA))型号API150EX仪器或Agilent(加利福尼亚州帕洛阿尔托(Palo Alto，CA))型号1200LC/MSD仪器进行的电喷雾电离法(ESMS)来进行化合物的质谱识别。
制备1
乙酰氧基(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯
在氮气下，在0℃下，在搅拌下逐滴添加2-氧代乙酸乙酯(50％)(74g，724.8mmol)到含于甲苯(100mL)中的亚磷酸二乙酯(50g，362.1mmol)的溶液中。在0℃下，在搅拌下逐滴添加Et3N(110g，1.1mol)。在室温下搅拌所得溶液1小时。在0℃下，在搅拌下逐滴添加乙酸酐(37g，362.4mmol)到所述混合物。在室温下搅拌所得混合物过夜。使用2N HCl将溶液的pH值调整到6。使用DCM(3×150mL)萃取所得溶液且合并有机层，经Na2SO4干燥且真空浓缩。将残留物装于具有EtOAc：己烷(1：2～1：5)的硅胶柱上以产生呈淡黄色液体的标题化合物(52g)。
制备2
(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000591
将含于THF(无水)(150mL)中的乙酰氧基(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(15.6g，55.3mmol，1.2当量)的溶液在氮气下冷却到-78℃。在-78℃下，在搅拌下逐滴添加LiHMDS(1M，含于THF中)(55.3mL)。在所述温度下搅拌30分钟之后，经15分钟逐滴添加含于THF(无水)(30mL)中的粗制((R)-2-联苯-4-基-1-甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁酯(15.0g，1.0eq.)的溶液。在-78℃下持续搅拌1.5小时，然后将混合物倒入具有水(200mL)和EtOAc(200mL)的冷溶液中。重复分离有机层且使用EtOAc(2×100mL)再萃取水层。合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且蒸发，且通过快速色谱法(EtOAc/己烷＝0～1：10)纯化残留物以产生呈白色固体的化合物1(10.5g)。
Figure BDA0000498843530000592
在氮气下，将含于EtOH(无水)(100mL)中的化合物1(10.5g，23.2mmol)的经搅拌溶液与钯碳(1.0g)组合。使用氢气净化所述混合物4次且然后在室温下经2小时鼓吹氢气。过滤出钯碳，且真空浓缩滤液以产生呈淡黄色油的粗化合物2(10.0g)，其无需进一步纯化即使用。
将含于EtOH(无水)(100mL)中的化合物2(10.0g，22.0mmol)与碳酸钾(6.1g，44.1mmol)组合且在室温下搅拌所得溶液2小时。过滤出固体且真空浓缩滤液。将残留物装于硅胶柱(EtOAc/己烷＝0～1：5)上以产生呈白色固体的化合物3(6.0g)。
Figure BDA0000498843530000601
将化合物3(6.0g，14.5mmol)溶于DCM(无水)(120mL)中，且在室温下，经5～6小时将HCl鼓吹入混合物中。观察固体沉淀物。将混合物浓缩到一半体积，然后过滤。收集固体且使用冷EtOAc洗涤，减压干燥以产生呈灰白色固体HCl盐的标题化合物(4.2g)。LC-MS(ES，m/z)：314[M-HCl+H]+。
1H NMR(300MHz，DMSO)：δ(ppm)＝8.07(s，1.9H)，7.96(s，1.2H)，7.65-7.69(m，4.0H)，7.45-7.50(m，2.0H)，7.33-7.39(m，3.OH)，6.05-6.07(m，0.63H)，5.88-5.90(m，0.88H)，4.32-4.38(m，0.80H)，4.18-4.31(m，0.51H)，4.05-4.11(m，2H)，3.50(s，1H)，2.75-3.05(m，2.8H)，1.83-1.94(m，1H)，1.71-1.82(m，1H)，1.10-1.20(m，3.3H)。
制备3
(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0000498843530000602
在-5℃下，向含于MeCN(700mL)中的(R)-2-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸(50g，0.2mol)的溶液添加含于水(700mL)中的NaOH(16.4g，0.4mol)溶液。搅拌10分钟之后，添加含于MeCN(100mL)中的(BOC)2O(44.7g，0.2mol)的溶液。将混合物升温到室温且搅拌过夜。在蒸发MeCN之后，在-5℃下，使用DCM(800mL)稀释残留物且使用1M HCl酸化到pH2。使用DCM(3×200mL)萃取水层。使用饱和NaCl水溶液(500mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥且浓缩以产生呈白色固体的化合物1(66.5g)。LC-MS：366(M+Na)，709(2M+Na)。
在氮气下，在-5℃下经1小时向含于无水DCM(600mL)中的化合物1(66.5g，193μmol)、米氏酸(Meldrum′s acid)(33.4g，232mmol)和DMAP(37.7g，309mmol)的溶液中逐滴添加含于无水DCM(200mL)中的DCC(47.9g，232mmol)的溶液。在-5℃下搅拌所述混合物8小时，然后冷冻过夜。观察二环己基脲的晶体。混合物经过滤，使用5％KHSO4(5×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，然后在冷冻下经无水MgSO4干燥过夜。接着蒸发溶液以产生呈淡黄色固体的粗化合物2(91g)。LC-MS：492(M+Na)，961(2M+Na)。
Figure BDA0000498843530000611
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(1L)中的粗化合物2(91g，193mmol)的溶液中逐滴添加AcOH(127.5g，2.1mol)。在-5℃下搅拌所述混合物30分钟，然后经1小时分小份添加NaBH4(18.3g，483mmol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，添加饱和NaCl水溶液(500mL)。使用饱和NaCl水溶液(2×300mL)和水(2×300mL)洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过Et2O洗涤而纯化以产生呈淡黄色固体的化合物3(68g)。LC-MS：478(M+Na)，933(2M+Na)。
将含于无水甲苯(500mL)中的化合物3(68g，149mmol)的溶液在氮气下回流3小时。在蒸发溶剂之后，通过色谱法(己烷：EtOAc＝10：1)纯化残留物以产生呈淡黄色油的标题化合物(38g)。LC-MS：376(M+Na)，729(2M+Na)。
制备4
(2R,4R)-4-氨基-5-(4-溴苯基)-2-羟基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000612
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(250mL)中的(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(38g，107mmol)的溶液中添加TFA(20mL，0.27mol)。将混合物升温到室温且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，残留物使用EtOAc(300mL)稀释且使用饱和NaHCO3水溶液(3×200mL)、水(200mL)、饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩以产生呈淡黄色固体的粗化合物1(24g)。LC-MS：254[M+H]。
在氮气下，在0℃下经30分钟向含于无水THF(200mL)中的NaH(8.6g，250mmol)的溶液中逐滴添加含于无水THF(200mL)中的化合物1(24g，94mmol)的溶液。混合物升温到室温且搅拌2小时。在冷却到0℃之后，经30分钟逐滴添加特戊酰氯(18g，150mmol)。混合物升温到室温且搅拌过夜。反应使用饱和NH4Cl水溶液(300mL)中止且使用EtOAc(3×200mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过色谱法(己烷：EtOAc＝25：1)纯化以产生呈淡黄色固体的化合物2(18g)。LC-MS：360(M+Na)。
Figure BDA0000498843530000621
在氮气下，在-78℃下经30分钟向含于无水THF(250mL)中的化合物2(18g，53mmol)的溶液中逐滴添加NaHMDS(47.7mL，96mmol)。在-78℃下搅拌90分钟之后，经30分钟逐滴添加(+)-(8,8-二氯樟脑基磺酰基)-氧杂氮丙啶(31.6g，106mmol)的溶液。在-78℃下搅拌2小时之后，反应使用饱和NH4Cl水溶液(400mL)中止且使用EtOAc(3×300mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过色谱法(己烷：EtOAc＝15：1)纯化以产生呈淡黄色固体的化合物3(8.9g)。LC-MS：376(M+Na)。
在100℃下加热含于浓HCl(81mL，81mmol)中的化合物3(8.9g，25mmol)的溶液达16小时。接着浓缩混合物以产生粗产物，其可进一步通过Et2O洗涤以产生呈淡黄色固体HCl盐的化合物4(7g)。LC-MS：323(M+H)。
在室温下，将含于EtOH(10mL)中的化合物4(7g，22mmol)的溶液与8M HCl的EtOH溶液(120mL，960mmol)组合。在50℃下加热所述混合物16小时，然后浓缩。通过Et2O洗涤进一步纯化粗产物以产生呈淡黄色固体HCl盐的标题化合物(6g)。LC-MS：352(M+H)。
制备5
(3R，5R)-5-(3′-氯联苯-4-基甲基)-1-(2，2-二甲基丙酰基)-3-羟基吡咯烷-2-酮
Figure BDA0000498843530000622
在氮气下，在室温下向含于1，4-二噁烷(600mL)中的(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15g，43mmol)的溶液添加3-氯苯基硼酸(8g，51mmol)和Pd(dppf)2Cl2(3.1g，4.2mmol)。在搅拌10分钟之后，添加含于水(60mL)中的K2CO3(11.7g，85mmol)的溶液。混合物加热到60℃且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，添加水(200mL)且使用EtOAc(3×200mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(400mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝6：1)纯化以产生呈淡黄色固体的化合物1(15g)。LC-MS：408(M+Na)。
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(250mL)中的化合物1(15g，0.039mol)的溶液添加TFA(20mL，270mmol)。混合物升温到室温且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，使用EtOAc(300mL)稀释残留物，然后使用饱和NaHCO3水溶液(3×200mL)、水(200mL)和饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，接着经Na2SO4干燥且浓缩以产生呈淡黄色固体的粗化合物2(11g)。LC-MS：286[M+H]。
Figure BDA0000498843530000631
在氮气下，在0℃下经30分钟向含于无水THF(200mL)中的NaH(2.3g，98mmol)的溶液逐滴添加含于无水THF(100mL)中的化合物2(11g，39mmol)的溶液。混合物升温到室温且搅拌2小时。在冷却到0℃之后，经30分钟逐滴添加特戊酰氯(6g，51mmol)。混合物升温到室温且搅拌过夜。使用饱和NH4Cl水溶液(200mL)中止反应且使用EtOAc(3×200mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过色谱法(己烷：EtOAc＝25：1)纯化以产生呈淡黄色固体的化合物3(10.5g)。LC-MS：391(M+Na)。
在氮气下，在-78℃下经30分钟向含于无水THF(120mL)中的化合物3(10.5g，29mmol)的溶液逐滴添加NaHMDS(29mL，58mmol)。在-78℃下搅拌90分钟之后，经30分钟逐滴添加(+)-(8,8-二氯樟脑基磺酰基)-氧杂氮丙啶(15.6g，52mmol)溶液。在-78℃下搅拌2小时之后，使用饱和NH4Cl(400mL)中止反应且使用EtOAc(3×300mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可进一步通过色谱法(己烷：EtOAc＝15：1)纯化以产生呈淡黄色固体的标题化合物(9.6g)。LC-MS：408(M+Na)。
制备6
(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000641
在100℃下加热含于浓HCl(81mL，81mmol)中的(3R，5R)-5-(3′-氯联苯-4-基甲基)-1-(2，2-二甲基丙酰基)-3-羟基吡咯烷-2-酮(9.6g，25mmol)的溶液达16小时。然后浓缩混合物以产生粗产物，其可进一步通过Et2O洗涤纯化以产生呈淡黄色固体HCl盐的化合物1(5.7g)。LC-MS：320(M+H)。
在室温下，向含于EtOH(10mL)中的化合物1(5.7g，18mmol)的溶液添加8M HCl的EtOH溶液(120mL，960mmol)。在50℃下加热所述混合物16小时。浓缩之后，通过Et2O洗涤进一步纯化粗产物以产生呈淡黄色固体HCl盐的标题化合物(2.1g)。LC-MS：348(M+H)。
制备7
(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸
将1M HCl水溶液(2.0mmol)添加到(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(150.0mg，431μmol)中且在100℃下搅拌所述混合物2小时。真空浓缩所述混合物3小时且通过反相纯化残留物以产生呈白色固体的标题化合物(117mg)。
制备8
氯-氧代-乙酸异丙酯
Figure BDA0000498843530000651
在0℃下经5分钟将异丙醇(158μL，2.1mmol，1.0eq.)逐滴添加到草酰氯(350μL，414μmol，2.0eq.)中，且在室温下搅拌所得混合物2小时。通过旋转蒸发(40℃，50mmHg)去除过量草酰氯且无需进一步纯化即使用。
制备9
氯-氧代-乙酸异丁酯
Figure BDA0000498843530000652
在0℃下，经5分钟将异丁醇(191μL，2.1mmol，1.0eq.)逐滴添加到草酰氯(350μL，414μmol，2.0eq.)中，且在室温下搅拌所得混合物2小时。通过旋转蒸发(40℃，40mmHg)去除过量草酰氯且无需进一步纯化即使用。
制备10
叔丁基草酰氯
Figure BDA0000498843530000653
将草酰氯(274μL，3.2mmol)添加到含于醚(2.0mL，19.0mmol)中的叔丁醇(289μL，3.0mmol)的溶液中且在室温下搅拌混合物1小时且接着真空浓缩以产生透明无色液体。通过将透明无色液体溶于DCM(～3.0mL)中制备约1M叔丁基草酰氯溶液。
制备11
氯-氧代-乙酸2-甲氧基乙酯
Figure BDA0000498843530000654
在0℃下将含于DCM中的2-甲氧基乙醇(295mg，3.9mmol)的溶液(总体积：0.5mL)添加到含于DCM中的草酰氯(0.5mL，5.8mmol)的溶液(总体积1.0mL)中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空浓缩所述混合物且将所得残留物溶于DCM(3.9mL)中以产生1.0M的DCM溶液。
制备12
氯-氧代-乙酸3-乙氧基丙酯
Figure BDA0000498843530000661
在0℃下，将含于DCM中的3-乙氧基丙-1-醇(404mg，3.9mmol)的溶液(总体积：0.5mL)添加到含于DCM中的草酰氯(0.5mL，5.8mmol)的溶液(总体积1.0mL)中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空浓缩所述混合物且将所得残留物溶于DCM(3.9mL)中以产生1.0M的DCM溶液。
制备13
氯-氧代-乙酸2-苯氧基乙酯
Figure BDA0000498843530000662
在0℃下，将含于DCM中的2-苯氧基乙醇(536mg，3.9mmol)的溶液(总体积：0.5mL)添加到含于DCM中的草酰氯(0.5mL，5.8mmol)的溶液(总体积1.0mL)中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空浓缩所述混合物且将所得残留物溶于DCM(3.9mL)中以产生1.0M的DCM溶液。
制备14
(2R，4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸
Figure BDA0000498843530000663
在100℃下搅拌含于浓HCl(30mL)中的(3R，5R)-5-(3′-氯联苯-4-基甲基)-1-(2，2-二甲基丙酰基)-3-羟基吡咯烷-2-酮(4.5g，11.7mmol)的溶液16小时。真空浓缩所述混合物以产生呈白色固体HCl盐的化合物1(4g)。LC-MS：321[M+H]+。
向含于水(100mL)中的NaOH(1.8g，45.2mmol)的溶液逐滴添加含于MeCN(100mL)中的化合物1(4g，11.3mmol)。在0℃下搅拌所述混合物10分钟。添加二碳酸二叔丁酯(7.17g，33.8mmol)且在室温下搅拌混合物15小时。真空浓缩所得混合物以去除MeCN，接着使用DCM(300mL)稀释，且使用1N HCl水溶液将pH调整到pH＝5-6。然后收集有机层且使用DCM(3×300mL)萃取残留物。浓缩合并的有机层且使用己烷(150mL)洗涤以产生呈白色固体的标题化合物(4g)。LC-MS：442[M+Na]+。
制备15
(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸2，2，3，3，3-五氟丙酯
Figure BDA0000498843530000671
向含于DCM(30mL)中的(2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸(0.9g，6mmol)和2,2,3,3,3-五氟丙-1-醇(450mg，3mmol)的溶液中添加DCC(880mg，4.3mmol)和DMAP(260mg，2.1mmol)。在室温下搅拌所得混合物15小时，然后真空浓缩。将残留物溶于EtOAc(100mL)中且使用水(30mL)和饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤。收集有机层且浓缩并通过柱色谱法(己烷/EtOAc＝5：1)纯化以产生呈白色固体的化合物3(0.4g)。LC-MS：574[M+Na]+。
Figure BDA0000498843530000672
搅拌含于1.4M HCl的1，4-二噁烷溶液(15mL)中的化合物3(0.4g，690μmol)的溶液过夜，且然后真空浓缩。将残留物分散于EtOAc(10mL)中，且通过过滤收集沉淀物以产生呈灰白色固体HCl盐的标题化合物(165mg)。LC-MS：452[M+H]+。1H NMR：(DMSO-d6)1.95-1.82(m，2H)，2.99-2.98(m，2H)，3.56(br，1H)，4.41-4.38(m，1H)，4.92-4.82(m，2H)，6.35(s，1H)，7.71-7.38(m，8H)，8.09(s，3H)。
制备16
(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸5-甲基-2-氧代[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲酯
Figure BDA0000498843530000681
在室温下搅拌含于DMF(20mL)中的(2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸(740mg，1.8mmol)、4-(溴甲基)-5-甲基-1，3-间二氧杂环戊烯-2-酮(340mg，1.8mmol)、碘化钾(58mg，350μmol)和K2CO3(486mg，3.5mmol)的悬浮液达4小时。使用EtOAc(150mL)稀释所述混合物且使用水(30mL)洗涤。收集有机层且浓缩并通过柱色谱法(己烷/EtOAc＝1：1)纯化以产生白色固体(490mg)。LC-MS：554[M+23]+。搅拌含于3N HCl的1，4-二噁烷溶液(20mL)中的所述固体(476mg，890μmol)的溶液过夜，且然后真空浓缩。将残留物分散于EtOAc(10mL)中，且通过过滤收集沉淀物以产生呈灰白色固体的标题化合物(290mg)。LC-MS：432[M+H]+。1H NMR：(DMSO-d6)1.92-1.82(m，2H)，2.16(s，3H)，2.99(br，2H)，3.56(br，1H)，4.35-4.32(m，1H)，5.017(s，2H)，6.17(s，1H)，7.39-7.36(m，4H)，7.71-7.68(m，4H)，8.05(s，3H)。
制备17
(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸丁酰氧基甲酯
Figure BDA0000498843530000682
在30℃下搅拌含于DMF(20mL)中的(2R,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸(900mg，2.1mmol)、丁酸氯甲酯(350mg，2.6mmol)、碘化钠(481mg，3.21mmol)和DIPEA(828mg，6.42mmol)的溶液达16小时。使用EtOAc(150mL)稀释所述混合物且使用水(50mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤。收集且浓缩有机层并通过柱色谱法(己烷/EtOAc＝5：1)纯化以产生白色固体(240mg)。LC-MS：542[M+Na]+。搅拌含于1.4M HCl的1，4-二噁烷溶液(15mL)中的所述固体(240mg，460μmol)的溶液过夜，且然后真空浓缩。将残留物分散于EtOAc(10mL)中，且通过过滤收集沉淀物以产生呈灰白色固体HCl盐的标题化合物(140mg)。LC-MS：420[M+H]+。1H NMR：(DMSO)0.85(t，J＝7.5Hz，3H)，1.61-1.52(m，2H)，1.89-1.86(m，2H)，2.30(t，J＝7.5Hz，2H)，2.98(br，2H)，3.56(br，1H)，4.33-4.30(m，1H)，5.74-5.68(m，2H)，6.21(s，1H)，7.37-7.35(m，4H)，7.70-7.767(m，4H)，8.01(brs，3H)。
制备18
(2R,4R)-4-氨基-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000691
在氮气下，在室温下向含于1，4-二噁烷(1.2L)中的(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(33.5g，95mmol)的溶液添加2,5-二氯苯基硼酸(21.7g，114mmol)和Pd(dppf)2Cl2(3.5g，4.7mmol)。在搅拌10分钟之后，添加含于水(120mL)中的K2CO3(26.1g，189mmol)的溶液。将所述混合物加热到60℃且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，添加水(400mL)且使用EtOAc(3×400mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(500mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝6：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物1(35.8g)。LC-MS：442[M+Na]。
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(300mL)中的化合物1(35.8g，85mmol)的溶液添加TFA(30mL，405mmol)。将所述混合物升温到室温且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，使用EtOAc(500mL)稀释残留物，然后使用饱和NaHCO3水溶液(3×300mL)、水(200mL)和饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，接着经Na2SO4干燥且浓缩以产生呈淡黄色固体的粗化合物2(26g)。LC-MS：320[M+H]。
Figure BDA0000498843530000692
在氮气下，在-78℃下经1小时向含于无水THF(500mL)中的化合物2(26g，81mmol)的溶液逐滴添加含于己烷中的n-BuLi(39mL，97mmol)。在-78℃下搅拌2小时之后，经30分钟逐滴添加特戊酰氯(12.7g，105mmol)来中止反应。在-78℃下搅拌2小时之后，使用饱和NH4Cl水溶液(200mL)中止反应且使用EtOAc(3×200mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经无水MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝25：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物3(33g)。LC-MS：426[M+Na]。
在氮气下，在-78℃下经30分钟向含于无水THF(120mL)中的化合物3(10g，0.025mol)的溶液逐滴添加NaHMDS(18.6mL，37mmol)。在-78℃下搅拌2小时之后，经30分钟逐滴添加含于THF(80mL)中的(+)-(8,8-二氯樟脑基磺酰基)-氧杂氮丙啶(11.1g，37mmol)的溶液。在-78℃下搅拌2小时之后，使用饱和NH4Cl水溶液(500mL)中止反应且使用EtOAc(3×300mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝15：1)进一步纯化以产生呈淡黄色油的化合物4(4.2g)。LC-MS：442[M+Na]。
在100℃下加热含于浓HCl(80mL，0.96mol)中的化合物4(4.2g，10mmol)的溶液达16小时。然后浓缩所述混合物以产生粗产物，其可通过Et2O洗涤进一步纯化以产生呈白色固体的化合物5(3.8g)。LC-MS：354[M+H]。
在室温下，向含于EtOH(5mL)中的化合物5(3.8g，10mmol)的溶液添加4M HCl的EtOH溶液(100mL，0.4mol)。在50℃下加热所述混合物16小时。浓缩之后，通过Et2O洗涤进一步纯化粗产物以产生呈白色固体的标题化合物(3.3g)。LC-MS：382[M+H]。
制备19
(3R，5R)-5-氨基-6-(4-溴-2-氯苯基)-2-乙氧基己-1-烯-3-醇
Figure BDA0000498843530000702
在0℃下，向含于MeOH(500mL)中的4-溴-2-氯苯甲醛(50g，22.8mmol)的悬浮液逐份添加NaBH4(17.3g，45.6mmol)。搅拌所述混合物30分钟且然后添加NH4Cl水溶液以中止所述反应。真空浓缩所述混合物。使用EtOAc(2×200mL)萃取残留物且经无水Na2SO4干燥合并的有机层，且真空浓缩以产生呈白色固体的化合物1(48g)。
在氮气下，在0℃下向含于无水DCM(500mL)中的化合物1(46.8g，21.1mmol)的溶液逐滴添加三溴化磷(68.6g，25.3mmol)。搅拌混合物2小时且然后使用饱和NaHCO3水溶液(2×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩以产生呈无色油的化合物2(36g)。
Figure BDA0000498843530000711
在0℃下，经3小时向含于异丙醇(330mL)中的(R)-吡咯烷-2-甲酸(57.7g，0.5mol)和KOH(84g，1.5mol)的经搅拌的溶液逐滴添加苄基氯(70mL，0.6mol)。然后在相同温度下搅拌混合物过夜。使用浓HCl将所得混合物中和到pH＝6，然后添加氯仿(200mL)。搅拌所述混合物30分钟，然后过滤且使用氯仿(3×100mL)洗涤沉淀物。经无水Na2SO4干燥合并的氯仿溶液，且真空浓缩以产生呈白色固体的化合物3(52g)。LC-MS：206[M+H]+。
在氮气下，在-20℃下向含于无水DCM(50mL)中的化合物3(10g，48.8mmol)的溶液添加SO2Cl2(7.3g，61mmol)。在-20℃下搅拌所述混合物3小时，然后添加含于无水DCM(25mL)中的(2-氨基苯基)(苯基)甲酮(6g，30.5mmol)的溶液且在室温下搅拌混合物过夜。在0℃下添加含于水(40mL)中的Na2CO3(10.3g)的溶液。分离有机层且使用DCM(50mL×3)萃取水层。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，且真空浓缩。使用MTBE(2×50mL)洗涤残留物以产生呈黄色固体的化合物4(8.5g)。LC-MS：385[M+H]+。
Figure BDA0000498843530000712
在氮气下，在45℃下向含于MeOH(280mL)中的化合物4(29.4g，76.5mmol)、甘氨酸(28.7g，382.4mmol)和Ni(NO3)2·6H20(44.5g，152.9mmol)的溶液逐滴添加含于MeOH(100mL)中的KOH(30g，535.3mmol)的溶液。在60℃下搅拌所述混合物1小时。使用AcOH(31mL)中和所得溶液且倒入冰水(380mL)中。过滤所得固体且溶于DCM(450mL)中，使用饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且浓缩。使用EtOAc(2×50mL)洗涤残留物以产生呈红色固体的化合物5(38g)。LC-MS：498[M+H]+。
将化合物5(14.3g，28.7mmol)和NaOH(3.4g，81.6mmol)添加到使用氮气净化2次的烧瓶中。添加无水DMF(100mL)且在0℃下搅拌混合物5分钟，然后添加含于DMF(20mL)中的化合物2(8.6g，30.1mmol)的溶液。在室温下搅拌反应混合物30分钟直到完全消耗化合物4(通过TLC检查)。将所得混合物倒入5％AcOH水溶液(120mL)中，然后使用DCM(3×150mL)萃取且使用饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。使用DCM/Et2O(1：1)使残留物再结晶以产生呈红色固体的化合物6(15.5g)。LC-MS：702[M+H]+。
向含于MeOH(300mL)中的化合物6(46g，65.6mmol)的溶液添加3N HCl(200mL)。使所述混合物回流直到红色变绿色。真空浓缩所得溶液且添加浓NH3·H2O(100mL)，然后使用DCM(2×200mL)萃取。真空浓缩水相且使其通过阳离子交换树脂(使用NH3·H2O/EtOH1：1洗脱)以产生呈白色固体的化合物7(15g)。LC-MS：280[M+H]+。
Figure BDA0000498843530000721
在0℃下，向含于MeCN(150mL)中的化合物7(15g，53.9mmol)的溶液逐滴添加含于水(150mL)中的NaOH(4.3g，107.7mmol)的溶液，且然后添加(BOC)2O(17.6g，80.8mmol)。在室温下搅拌混合物过夜。所得溶液经真空浓缩，然后使用DCM(2×150mL)萃取。使用1N HCl将水相酸化到pH＝3且使用EtOAc(3×150mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩以产生呈白色固体的化合物8(12.3g，60％)。LC-MS：402[M+Na]+。
在-5℃下，向含于DCM(400mL)中的化合物8(18.4g，48.5mmol)和米氏酸(8.4g，58.2mmol)的悬浮液添加DMAP(9.5g，77.6mmol)。在搅拌10分钟之后，在-5℃下逐滴添加含于DCM(100mL)中的DCC(12g，58.2mmol)的溶液。在室温下搅拌混合物过夜。将所得溶液冷却到0℃且过滤。使用柠檬酸水溶液(3×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤滤液，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。使用Et2O(2×50mL)洗涤残留物以产生呈淡黄色固体的化合物9(22g)。
Figure BDA0000498843530000731
在0℃下，向含于DCM(400mL)中的化合物9(22g，43.6mmol)的溶液添加AcOH(28.8g，479.4mmol)。搅拌10分钟之后，分数份添加NaBH4(4.1g，109mmol)。在0℃下搅拌混合物1小时。使用饱和NaHCO3水溶液(2×200mL)和饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤所得溶液，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。使用醚(2×100mL)洗涤残留物以产生呈灰白色固体的化合物10(18.6g)。LC-MS：514[M+Na]+。
将含于甲苯(350mL)中的化合物10(18.6g，37.9mmol)的溶液在回流下加热2小时。冷却时，混合物蒸发到干以产生呈黄色浆液的化合物11(14g)。LC-MS：334[M-tBu+H]+。
向含于DCM(250mL)中的化合物11(14g，36.0mmol)的溶液添加TFA(20mL)。在0℃下搅拌所述混合物4小时。真空浓缩所得溶液以去除TFA。将残留物溶于DCM(400mL)且使用饱和NaHCO3水溶液(2×200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生呈黄色固体的化合物12(10g)。LC-MS：290[M+H]+。
在0℃下向含于无水THF(250mL)中的化合物12(10g，34.7mmol)的溶液添加NaH(2.4g，69.3mmol，70％)。在氮气下，在0℃下搅拌所述混合物1小时。接着添加特戊酰氯(5g，41.6mmol)。另外搅拌2小时之后，添加饱和NaHCO3水溶液(100mL)以中止所述反应。所得混合物经浓缩且使用EtOAc(3×100mL)萃取，且使用饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。通过硅胶色谱法(己烷/EtOAc，5：1)纯化残留物以产生呈白色固体的化合物13(11.8g)。LC-MS：374[M+H]+。
在氮气下，在-78℃下向含于无水THF(70mL)中的化合物13(11.8g，31.8mmol)的溶液逐滴添加NaHMDS(24mL，47.7mmol，2.0M，含于THF中)。搅拌30分钟之后，在-78℃逐滴添加含于THF(70mL)中的(+)-(8，8-二氯樟脑基磺酰基)氧杂氮丙啶(15.2g，50.8mmol)的溶液。在相同温度下另外搅拌混合物1小时，然后添加NH4Cl水溶液(70mL)以中止所述反应。使用EtOAc(3×150mL)萃取所得混合物且使用饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，真空浓缩且通过硅胶色谱法(己烷/EtOAc，20：1～5：1)纯化以产生粗产物(5g)，其可通过制备型HPLC进一步纯化以产生呈黄色固体的化合物14(4g)。LC-MS：390[M+H]+。
Figure BDA0000498843530000741
在回流下，加热含于浓HCl(50mL)中的化合物14(4g，10.3mmol)的溶液过夜。真空浓缩混合物且使用Et2O(2×50mL)洗涤所得固体以产生呈白色固体HCl盐的化合物15(3.1g)。LC-MS：324[M+H]+。
在50℃下搅拌含于HCl/EtOH(6.7M，40mL)中的化合物15(3.1g，8.6mmol)的溶液过夜。真空浓缩所得混合物且使用醚(2×50mL)洗涤残留物以产生呈灰白色固体HCl盐的标题化合物(2.9g)。LC-MS：352[M+H]+。1H NMR：(CD3OD)1.268(t，J＝6.9Hz，3H)，1.862-1.946(m，1H)，2.068-2.143(m，1H)，3.104-3.199(m，2H)，3.769-3.809(m，1H)，4.162-4.209(m，2H)，4.274-4.881(m，1H)，7.325(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，7.522(dd，J＝8.3，3.0Hz，1H)，7.696(d，J＝1.8Hz，1H)。
制备20
[(R)-1-联苯-4-基甲基-2-(2，2-二甲基-4，6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸 叔丁酯
在氮气下，在-5℃下经1小时向含于无水DCM(500mL)中的(R)-3-联苯-4-基-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸(50g，146mmol)、米氏酸(23.3g，161mmol)和DMAP(27.8g，227mmol)的溶液添加含于无水DCM(200mL)中的DCC(33.3g，161mmol)的溶液。在-5℃下搅拌混合物8小时，然后冷冻过夜，期间沉淀二环己基脲的微小晶体。过滤之后，使用5％KHSO4(4×200mL)和饱和NaCl水溶液(1×200mL)洗涤混合物，然后在冷冻下，使用MgSO4干燥过夜。蒸发溶液以产生标题化合物(68g，淡黄色固体)，其无需进一步纯化即使用。LC-MS：490[M+Na]，957[2M+Na]。
制备21
(2R,4S)-5-联苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基戊酸乙酯(化合物6)和(2S,4S)-5-联 苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基戊酸乙酯(化合物7)
Figure BDA0000498843530000751
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(1L)中的粗[(R)-1-联苯-4-基甲基-2-(2，2-二甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(68g，147mmol)的溶液添加AcOH(96.7g，1.6mol)。在-5℃下搅拌混合物0.5小时，然后经1小时以小份添加NaBH4(13.9g，366mmol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，添加饱和NaCl水溶液(300mL)。使用饱和NaCl水溶液(2×300mL)和水(2×300mL)洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生化合物1(46g，淡黄色固体)。LC-MS：476[M+Na]，929[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530000752
在氮气下，使含于无水甲苯(300mL)中的化合物1(46g，101mmol)的溶液回流3小时。在蒸发溶剂之后，通过色谱法(己烷：EtOAc＝10：1)纯化残留物以产生化合物2(27g，淡黄色固体)。LC-MS：374[M+Na]，725[2M+Na]。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.64-7.62(m，4H)，7.51-7.46(m，2H)，7.42-7.39(m，1H)，7.39-7.30(m，2H)，4.50-4.43(m，1H)，3.27-3.89(m，1H)，2.88-2.80(m，1H)，2.48-2.42(m，2H)，2.09-1.88(m,2H)，1.66(s,9H)。
在氮气下，将化合物2(27g，77mmol)和叔丁氧基-N，N，N′，N′-四甲基甲烷二胺(40.3g，231mmol)的混合物加热到80℃。在80℃下搅拌3小时之后，使用EtOAc(300mL)稀释混合物，使用水(2×150mL)和饱和NaCl水溶液(2×150mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生粗化合物3(29.7g，淡黄色油)。LC-MS：425[M+H]，835[2M+H]。
Figure BDA0000498843530000761
在氮气下，在0℃下向含于THF(200mL)中的粗化合物3(29.7g，73mmol)的溶液添加1M HCl(81mL)。在室温下搅拌1小时之后，使用EtOAc(100mL)稀释混合物且使用饱和NaHCO3水溶液调整到pH7。使用EtOAc(2×150mL)萃取水层且使用水(2×150mL)和饱和NaCl水溶液(1×150mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生粗化合物4(29.4g，黄色油)。LC-MS：402[M+Na]，781[2M+Na]。
在氮气下，在-5℃下向含于无水THF(300mL)中的化合物4(29.4g，77mmol)的溶液添加无水EtOH(30mL)和AcOH(92.5g，1.5mol)。在-5℃下搅拌所述混合物0.5小时，然后经1小时以小份添加NaBH3CN(19.4g，308mmol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，使用饱和NaHCO3水溶液将混合物调整到pH7。使用EtOAc(2×200mL)萃取水层且使用水(2×150mL)和饱和NaCl水溶液(1×150mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，浓缩且蒸发以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生化合物5(11.2g，淡黄色固体)。LC-MS：404[M+Na]，785[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530000762
在氮气下，在0℃下向含于无水EtOH(500mL)中的化合物5(11.2g，29mmol)的溶液添加无水K2CO3(8.0g，58mmol)。在0℃下搅拌1小时之后，将混合物升温到室温且搅拌16小时。过滤之后，浓缩滤液且使用水(150mL)、DCM(200mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)稀释残留物。分离之后，使用DCM(2×150mL)萃取水层。使用饱和NaCl水溶液(2×200mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生化合物6和7(8.3g，淡黄色固体)。
化合物6：LC-MS：450[M+Na]，877[2M+Na]。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.58-7.23(m，9H)，4.46-4.43(d，1H)，4.20-4.13(m，2H)，3.94(s，1H)，3.82-3.70(m，2H)，2.85-2.70(m，3H)，2.25-2.22(d，1H)，2.01-1.92(m，1H)，1.47(s，9H)，1.26-1.24(m，3H)。
化合物7：LC-MS：450[M+Na]，877[2M+Na]。1H NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.58-7.55(m，4H)，7.50-7.43(m，2H)，7.40-7.30(m，1H)，7.26-7.23(m，1H)，4.46(m，1H)，4.21-4.13(m，2H)，3.94(m，1H)，3.82-3.77(m，2H)，2.83-2.81(d，2H)，2.66-2.63(m，1H)，2.24(m，1H)，1.83-1.81(m，2H)，1.38(s，9H)，1.30-1.25(m，3H)。
制备22
(2S,4S)-5-联苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基戊酸(R 7 ＝H；P 2 ＝BOC)和(2S,4S)-4- 氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基戊酸乙酯(R 7 ＝-CH 2 CH 3 ；P 2 去除)
Figure BDA0000498843530000771
使用LiOH将(2S,4S)-5-联苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基-戊酸乙酯(210mg)皂化以产生经BOC保护的酸(R7＝H；P2＝BOC)(120mg)。使用HCl脱除(2S,4S)-5-联苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基-戊酸乙酯(～180mg)的保护基，产生呈HCl盐的胺酯(R7＝-CH2CH3；P2去除)(120mg)。
制备23
(2S,4S)-4-氨基-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000772
在氮气下，在室温向含于1，4-二噁烷(500mL)中的(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(18.4g，52mmol)的溶液添加2-氟苯基硼酸(8.7g，63mmol)和Pd(dppf)2Cl2(3.8g，5.2mmol)。在搅拌10分钟之后，添加含于水(50mL)中的K2CO3(14.4g，104mmol)的溶液。将混合物加热到80℃且在所述温度下搅拌5小时。在蒸发溶剂之后，添加水(300mL)且使用EtOAc(3×200mL)萃取混合物。使用饱和NaCl水溶液(400mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝8：1)进一步纯化以产生呈红色油的化合物1(17.3g)。LC-MS：392[M+Na]。
在氮气下，将化合物1(17.3g，46.7mmol)和叔丁氧基-N，N，N′，N′-四甲基甲烷二胺(24.4g，140mmol)的混合物加热到80℃。在80℃下搅拌3小时之后，使用EtOAc(300mL)稀释混合物且使用水(2×150mL)、饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生呈红色油的粗化合物2(20.6g)。LC-MS：425[M+H]，849(2M+H)。
Figure BDA0000498843530000781
在氮气下，在0℃下向含于THF(300mL)中的粗化合物2(20.6g，48.6mmol)的溶液添加1M HCl(58mL，58mmol)。在室温下搅拌1小时之后，使用EtOAc(100mL)稀释混合物且使用饱和NaHCO3水溶液调整到pH7。使用EtOAc(2×150mL)萃取水层且使用水(2×150mL)和饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且蒸发以产生呈红色油的粗化合物3(18.9g)。LC-MS：420(M+Na)，817(2M+Na)。
在氮气下，在-5℃下向含于无水THF(400mL)中的粗化合物3(18.9g，47.6mmol)的溶液添加无水EtOH(50mL)和AcOH(57.2g，952mmol)。在-5℃下搅拌混合物30分钟，然后经1小时以小份添加NaBH3CN(15g，238mmol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，使用饱和NaHCO3水溶液将混合物调整到pH7。使用EtOAc(3×200mL)萃取水层且使用水(2×150mL)和饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝6：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物4(7.1g)。LC-MS：422(M+Na)，821(2M+Na)。
在氮气下，在0℃下向含于无水EtOH(500mL)中的化合物4(7.1g，17.7mmol)的溶液添加无水K2CO3(9.8g，70.8mmol)。在0℃下搅拌1小时之后，将混合物升温到室温且搅拌16小时。过滤之后，浓缩滤液且使用水(150mL)、DCM(200mL)和饱和NaCl水溶液(50mL)稀释残留物。分离之后，使用DCM(2×150mL)萃取水层。使用饱和NaCl水溶液(2×200mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物5(2g)。还获得呈淡黄色固体的2.1g(R，S)异构体。
Figure BDA0000498843530000791
将化合物5(400mg，0.9mmol)溶于MeCN(3mL)和4M HCl的二噁烷溶液(0.5mL)中。在室温下搅拌混合物1小时，然后浓缩以产生呈HCl盐的标题化合物(340mg)，其呈油形式形成且固化过夜。
制备24
[(R)-2-联苯-4-基-1-(2，2，5-三甲基-4，6-二氧代-1，3-二氧六环-5-基甲基)乙基]氨基甲酸叔丁 酯
Figure BDA0000498843530000792
在氮气下，在-5℃下向含于无水MeCN(90mL)中的粗[(R)-1-联苯-4-基甲基-2-(2，2-二甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-2-氧代-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(6.4g，14mmol)的溶液添加AcOH(8.6mL)。在-5℃下搅拌混合物30分钟，然后经2小时以小份添加硼氢化钠(1.3g，34.5mmol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，添加饱和NaCl水溶液和1.7M NaCl水溶液(30mL)。分离层且使用饱和NaCl水溶液(2×30mL)和水(2×30mL)洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且蒸发。通过色谱法(5：1庚烷：EtOAc)进一步纯化所得粗产物以产生呈淡黄色固体的[(S)-2-联苯-4-基-1-(2，2-二甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基甲基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.1g，纯度98.4％)。
在氮气下，在搅拌下将[(S)-2-联苯-4-基-1-(2，2-二甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基甲基)-乙基]氨基甲酸叔丁酯(5.0g，11mmol)和K2CO3(1.8g，13.2mmol)溶于DMF(33.9mL)中且冷却到0℃。添加甲基碘(892μL)且在0℃下搅拌所得混合物1小时。使混合物升温到室温。添加饱和NaCl水溶液(35mL)和EtOAc(35mL)，且搅拌所得混合物2分钟。分离各层且蒸发有机层。使用EtOAc(20mL)湿磨残留物。滤出固体且真空干燥。浓缩滤液且再用EtOAc湿磨以产生标题化合物(3.9g)。
制备25
(2S，4R)-5-联苯-4-基-4-叔丁氧基羰基氨基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(P 2 ＝BOC)和(2S，4R)-4- 氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(P 2 去除)
用氮气吹洗蒸馏水(140mL)30分钟，然后导入含有0.1M二碘化钐的THF溶液(800mL)的容器中，小心勿使任何空气与溶液接触。当维持在氮气氛围时，经由导管添加[(R)-2-联苯-4-基-1-(2，2，5-三甲基-4,6-二氧代-1，3-二氧六环-5-基甲基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.7g，8.0mmol)和THF(100mL)的脱气溶液。搅拌所得混合物15分钟，然后暴露于空气中。添加饱和NaCl水溶液(12mL)、10％柠檬酸(6mL)和EtOAc(30mL)。搅拌混合物5分钟，然后萃取两层。经Na2SO4干燥有机层且真空浓缩。通过色谱法(330g金柱，具有0.5％AcOH的50％EtOAc/醚梯度)纯化粗产物以产生经BOC保护的酸(P2＝BOC)(1.4g)。将经BOC保护的酸溶于MeCN(10mL)中，然后添加4N HCl的二噁烷溶液(10mL)。蒸发溶剂且产物与甲苯(2×)共沸以产生酸(P2去除)(1.0g)。
制备26
(2S,4R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000802
将(2S,4R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(0.3g，957μmol)与EtOH(6mL)和4M HCl的1，4-二噁烷溶液(718μL)组合，且搅拌过夜。蒸发溶剂且产物与甲苯(2×)共沸以产生标题化合物(295mg)，其无需进一步纯化即使用。
制备27
[(R)-1-(3′-氟联苯-4-基甲基)-2-(2，2，5-三甲基-4，6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-乙基]氨基甲 酸叔丁酯
Figure BDA0000498843530000811
在-5℃下，向含于MeCN(700mL)中的(R)-2-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸(50g，0.2mol)的溶液添加含于水(700mL)中的NaOH(16.4g，0.4mol)的溶液。在搅拌10分钟之后，添加含于MeCN(100mL)中的(BOC)2O(44.7g，0.2mol)的溶液。使混合物升温到室温且搅拌过夜。在蒸发MeCN之后，使用DCM(800mL)稀释残留物且在-5℃下使用1M HCl酸化到pH2。使用DCM(3×200mL)萃取水层。使用饱和NaCl水溶液(500mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生化合物1(64.2g，白色固体)。LC-MS：366[M+Na]，709[2M+Na]。
在氮气下，在室温下向含于1，4-二噁烷(500mL)中的化合物1(64.2g，187mmol)的溶液添加3-氟苯基硼酸(31.3g，224mmol)和Pd(dppf)2Cl2(13.7g，19mmol)。搅拌10分钟之后，添加含于水(250mL)中的K2CO3(51.7g，374mmol)的溶液。将混合物加热到100℃且搅拌过夜。在蒸发溶剂之后，添加水(200mL)。使用1M HCl酸化到pH2且使用EtOAc(3×200mL)萃取水层。使用饱和NaCl水溶液(400mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生粗产物，其可通过柱色谱法(己烷：EtOAc＝4：1)进一步纯化以产生化合物2(45g，淡黄色油)。LC-MS：382[M+Na]，741[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530000812
在氮气下，在-5℃下经1小时向含于无水DCM(500mL)中的化合物2(45g，125mmol)、米氏酸(23.5g，163mmol)和DMAP(26.0g，213mmol)的溶液添加含于无水DCM(200mL)中的DCC(33.3g，163mmol)的溶液。在-5℃下搅拌混合物8小时，然后冷冻过夜，期间沉淀二环己基脲的微小晶体。过滤之后，使用5％KHSO4(4×200mL)和饱和NaCl水溶液(1×200mL)洗涤混合物，然后在冷冻下，使用无水MgSO4干燥过夜。蒸发溶液以产生粗化合物3(57.7g，淡黄色油)。LC-MS：508[M+Na]，993[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530000821
在氮气下，在5℃下向含于无水DCM(1L)中的粗化合物3(57.7g，119mmol)的溶液添加AcOH(78.4g，1.3mol)。在-5℃下搅拌混合物0.5小时，然后经1小时以小份添加NaBH4(11.3g，0.3mol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，添加饱和NaCl水溶液(300mL)。使用饱和NaCl水溶液(2×300mL)和水(2×300mL)洗涤有机层，经无水MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝6：1)进一步纯化以产生化合物4(28g，淡黄色油)。LC-MS：494[M+Na]，965[2M+Na]。
在氮气下，在0℃下向含于无水DMF(250mL)中的化合物4(28g，60mmol)的溶液添加K2CO3(9.9g，72mmol)和CH3I(25.6g，180mmol)。在0℃下搅拌1小时之后，混合物升温到室温且搅拌过夜。使用水(3L)稀释混合物且使用EtOAc(3×300mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(500mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，且浓缩以产生粗产物，其通过色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生标题化合物(11.7g，淡黄色固体)。LC-MS：508[M+Na]，993[2M+Na]。1H NMR(300MHz，CD3OD)：δ7.52-7.49(m，2H)，7.41-7.39(m，2H)，7.32-7.27(m，3H)，7.07-7.01(m，1H)，6.21-6.18(d，1H)，3.79(m，1H)，2.78-2.61(m，2H)，2.35-2.20(m，2H)，1.76(s，6H)，1.59(s，3H)，2.21(s，1H)，1.28(s，9H)。
制备28
(2S,4R)-4-叔丁氧基羰基氨基-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(P 2 ＝BOC)和 (2S，4R)-4-氨基-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(P 2 去除)
用氮气吹洗蒸馏水(181mL)1小时，然后导入含有0.1M二碘化钐的THF溶液(800mL)的容器中。当维持在氮气氛围时，经由导管添加[(R)-1-(3′-氟联苯-4-基甲基)-2-(2，2，5-三甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(4.9g，10.0mmol)和THF(20mL)的类似脱气溶液。搅拌所得混合物15分钟，然后暴露于空气中。蒸发溶剂，且添加EtOAc(200mL)、饱和NaCl水溶液(50mL)和10％柠檬酸(20mL)。搅拌混合物5分钟，然后萃取两层。经Na2SO4干燥有机层且真空浓缩。通过色谱法(330g金柱，1：1醚：具有0.5％AcOH的EtOAc)纯化粗产物以产生经BOC保护的酸(P2＝BOC)(1.5g)。将一部分经BOC保护的酸溶于含4M HCl的二噁烷(6mL)和MeCN(10mL)中。真空蒸发溶剂以产生酸(P2去除)。
制备29
3-(N-联苯-4-基甲基-N′-叔丁氧基羰基肼基)-2-羟基-2-甲基丙酸甲酯
Figure BDA0000498843530000831
将4-(溴甲基)联苯(2.00g，8.09mmol)和DIPEA(1.4mL，8.1mmol)溶于DMF(40.0mL)中，然后添加肼基甲酸叔丁酯(2.1g，16.2mmol)且在室温下搅拌混合物过夜。在反应完成之后，部分浓缩混合物，且将残留物分配在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间。经Na2SO4干燥且浓缩EtOAc层。通过快速色谱法(0-60％EtOAc/具有0.5％DIPEA的己烷)纯化粗产物以产生化合物1(1.3g)。
Figure BDA0000498843530000832
将化合物1(460mg，1.5mmol)溶于异丙醇(10.0mL)中，然后添加2-甲基缩水甘油酸甲酯(180μL，1.7mmol)且将混合物加热到85℃过夜。完成反应后，将混合物分配在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间。接着经Na2SO4干燥EtOAc层且浓缩以产生标题化合物(0.5g)，其无需进一步纯化即使用。
制备30
(R)-3-[N-(4-溴苄基)-N′-叔丁氧基羰基肼基]-2-羟基丙酸甲酯
Figure BDA0000498843530000841
将4-溴苄基溴(5.0g，20mmol)和DIPEA(3.48mL，20.0mmol)溶于DMF(20mL)中。添加肼基甲酸叔丁酯(7.9g，60.0mmol)且在室温下搅拌混合物直到反应完成。部分浓缩混合物，然后将残留物分配在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间。接着经Na2SO4干燥EtOAc层且浓缩。通过快速色谱法纯化粗产物以产生化合物1(3.8g)。
Figure BDA0000498843530000842
将化合物1(1.9g，6.3mmol)溶于异丙醇(26.4mL)中。添加(2R)-缩水甘油酸甲酯(1.1mL，12.6mmol)且在90℃下加热混合物直到反应完成(～4天)。将混合物冷却到室温且浓缩以产生呈白色固体的标题化合物(2.5g)。
制备31
(R)-3-[N-(3′-氯联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯
Figure BDA0000498843530000843
将(R)-3-[N-(4-溴苄基)-N′-叔丁氧基羰基肼基]-2-羟基丙酸甲酯(600mg，1mmol)、3-氯苯基硼酸(419mg，2.7mmol)和K2CO3(617mg，4.5mmol)在EtOH(5mL)和水(1mL)中组合，然后添加Pd(0)(0.09mmol/g装填物，1160mg，104μmol)。在120℃的微波反应器中加热混合物直到反应完成(～30分钟)。过滤且浓缩混合物。将残留物溶于MeCN/AcOH中且通过反相色谱法(55g柱；梯度：具有0.1％TFA的30-95％MeCN水溶液)纯化。收集澄清溶离份，浓缩且接着溶于4M HCl二噁烷溶液(6mL)和EtOH(6mL)中。在室温下搅拌混合物过夜，然后浓缩以产生标题化合物(250mg)，其无需进一步纯化即使用。
制备32
(S)-2-(1-联苯-4-基-1-甲基乙基)-5-氧代-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0000498843530000851
在10℃下，以小份添加NaH(含于矿物油中的60％分散液，66.7g，1.7mol)到含于THF(1.0L)中的2-(4-溴苯基)乙腈(130.0g，0.7mol)和碘甲烷(103.9mL，1.7mol)的溶液。添加完成之后，在10℃下另外搅拌混合物2小时。将混合物倒入冰水(2.0L)中且使用EtOAc(1.5L)萃取。使用饱和NaCl水溶液洗涤有机层，经无水MgSO4干燥且浓缩以产生呈黄色油的化合物1(175g，包含矿物油)，其无需进一步纯化即直接使用。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.52(d，J＝9.0Hz，2H)，7.38(d，J＝9.0Hz，2H)，1.72(s，6H)。
在-78℃下逐滴添加DIBAL(含于DCM中的1.0M溶液，700mL，0.70mol)到含于DCM(1.0L)中的化合物1(175g，包含矿物油)的溶液中。在-78℃下搅拌反应混合物1.5小时且然后使用3.0N HCl(1.0L)小心地中止。在室温下搅拌所得混合物过夜且使用饱和NaCl水溶液洗涤有机层，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生呈黄色油的化合物2(180g)，其无需进一步纯化即直接使用。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.48(s，1H)，7.53(d，J＝11.0Hz，2H)，7.17(d，J＝11.0Hz，2H)，1.46(s，6H)。
Figure BDA0000498843530000852
向NaCN(32.7g，含于1.0L H2O中，0.7mol)水溶液添加(NH4)2CO3(380g，4.0mol)和化合物2(180g)。使反应混合物回流过夜且接着在75℃下减压浓缩。将水(350mL)添加到残留物中且再次浓缩混合物。使残留物悬浮于石油醚(700mL)和水(250mL)中且在室温下搅拌所得混合物15分钟。通过过滤收集沉淀物且干燥以产生呈白色固体的化合物3(150g)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ10.39(s，1H)，8.05(s，1H)，7.48(d，J＝9.0Hz，2H)，7.28(d，J＝9.0Hz，2H)，4.17(s，1H)，1.42(s，3H)，1.34(s，3H)。
在120℃下，搅拌含于6.0N NaOH(400mL)和乙烷-1，2-二醇(300mL)中的化合物3(150g，0.51mol)的悬浮液38小时。将混合物冷却到室温且使用HCl溶液中和。通过过滤收集沉淀物且干燥以产生呈白色固体的化合物4(250g，包含NaCl盐)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.35(d，J＝9.0Hz，2H)，7.17(d，J＝9.0Hz，2H)，3.22(s，1H)，1.16(s，3H)，1.15(s，3H)。
在5℃下，向含于MeOH(1.0L)中的化合物4(250g，含有NaCl盐)的悬浮液中逐滴添加亚硫酰氯(72.0mL，1.0mol)。使混合物回流过夜且在减压下去除溶剂。将残留物分配在DCM(1.0L)和饱和NaHCO3水溶液(1.5L)之间。使用饱和NaCl水溶液洗涤有机层，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生相应甲酯(90.0g)。在0℃下，将2-苯基乙酰氯(48.6g，0.32mol)逐滴添加到含于DCM(1.0L)中的所述酯(90.0g)和Et3N(56.5mL，0.41mol)的溶液中且在0℃下搅拌混合物30分钟。分别使用1.0N HCl(500mL)和饱和NaCl水溶液洗涤混合物。经无水Na2SO4干燥有机层且浓缩以产生化合物5(120g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.32(m，5H)，7.18(m，2H)，6.95(m，2H)，5.68(br s，1H)，4.76(d，J＝9.0Hz，1H)，3.57(s，3H)，3.53(d，J＝5.0Hz，2H)，1.30(s，3H)，1.25(s，3H)。
Figure BDA0000498843530000861
向含于MeOH(500mL)中的化合物5(120g，0.30mol)的溶液中添加4.0N NaOH(200mL)。在室温下搅拌混合物4小时且随后使用3.0N HCl将pH调整到pH＝1。使用EtOAc(2×300mL)萃取所得混合物。使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水Na2SO4干燥且减压浓缩。残留物从EtOAc/己烷再结晶以产生化合物6(82.0g)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.41(d，J＝6.0Hz，2H)，7.22(m，5H)，6.99(d，J＝6.0Hz，2H)，4.65(d，J＝9.0Hz，1H)，3.52(d，J＝14.0Hz，1H)，3.36(d，J＝14.0Hz，1H)，1.34(s，3H)，1.30(s，3H)。
使用3.0N LiOH将含于蒸馏水(3.0L)中的化合物6(82.0g，0.21mol)的悬浮液调整到pH＝8.5且形成澄清溶液。添加固定青霉素酶(20.0g)且在37℃下搅拌所得混合物60小时。过滤混合物且使用3.0N HCl将滤液调整到pH＝1且使用EtOAc萃取。使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生化合物7(59.0g，80％ee，含有2-苯基乙酸)。
使含于6.0N HCl(500mL)中的化合物7(59.0g，含有2-苯基乙酸)的悬浮液回流过夜。使用EtOAc(300mL)洗涤所述混合物且减压浓缩水相以产生呈其盐酸盐的对应氨基酸。将所述盐溶于水(300mL)中且将溶液调整到pH＝11。添加含于丙酮(200mL)中的(BOC)2O(33.0g，0.2mol)的溶液且在室温下搅拌混合物2小时。使用己烷(200mL)洗涤混合物且将水相调整到pH＝2。使用EtOAc(2×300mL)萃取所得混合物。使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生呈白色固体的化合物8(37.0g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.48(br s，1H)，7.46(d，J＝7.0Hz，2H)，7.26(d，J＝7.0Hz，2H)，5.02(br s，1H)，4.56(d，J＝9.0Hz，1H)，1.39(s，9H)。
Figure BDA0000498843530000871
使用氮气将含于二噁烷(200mL)中的化合物8(37.0g，0.1mol)和1.0N K2CO3(200mL)的混合物脱气30分钟，然后添加苯基硼酸(13.4g，0.1mol)和Pd(PPh3)4(1.6g，1.4mmol)。在75℃下将混合物加热8小时且接着冷却到室温。使用EtOAc/己烷(150mL，1：1)洗涤混合物且将水相调整到pH＝2且使用EtOAc(2×300mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水Na2SO4干燥且浓缩以产生呈白色固体的化合物9(31.0g，84％产率)。
将含于DCM(400mL)中的化合物9(31.0g，84mmol)、米氏酸(13.3g，92mmol)和DMAP(15.4g，0.13mol)的溶液冷却到-5℃且经1小时添加含于DCM(200mL)中的DCC(19.0g，92mmol)的溶液。在-5℃下搅拌混合物过夜。滤出沉淀物且分别使用1.0NHCl(2×700mL)和饱和NaCl水溶液洗涤滤液。含有化合物10的有机层经无水MgSO4干燥之后，其直接用于下一步而无需浓缩。
将含于DCM(600mL)中的化合物10的溶液冷却到-5℃且添加AcOH(45.0mL)。然后经30分钟以小份添加NaBH4(7.0g，0.2mol)且在-5℃下搅拌混合物3小时。逐滴添加水(50.0mL)，然后添加饱和NaCl水溶液(450mL)。使用水(2×300mL)和饱和NaHCO3水溶液(2×300mL)洗涤有机层，经无水MgSO4干燥且浓缩以产生呈灰白色固体的化合物11(32.0g，75％ee)。在从EtOH再结晶之后，获得手性纯的化合物11(13.0g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.61(m，10H)，4.46(br s，1H)，4.26(m，1H)，3.72(br s，1H)，2.23(m，1H)，1.79(s，3H)，1.76(s，3H)，1.48(s，6H)，1.39(s，9H)。
使含于甲苯(100.0mL)中的化合物11(13.0g，27.0mmol)的溶液回流3小时。在蒸发溶剂之后，残留物从己烷/EtOAc(3：1)再结晶以产生呈白色固体的标题化合物(8.0g)。
制备33
(2R,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基-5-甲基己酸乙酯
Figure BDA0000498843530000881
在室温下，将(S)-2-(1-联苯-4-基-1-甲基乙基)-5-氧代-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(14.0g，36.9mmol，外消旋)于3.0N HCl-EtOAc溶液(150mL)中的混合物搅拌3小时。在减压下去除溶剂以产生呈白色固体的化合物1(10.0g)。
在-78℃下，将BuLi(2.5M于己烷中，15.0mL)逐滴添加到含于THF(80.0mL)中的化合物1(10.0g，35.8mmol)的溶液中。在搅拌混合物30分钟之后，逐滴添加特戊酰氯(4.8mL，39.4mmol)。在-78℃下搅拌混合物1小时且接着使用饱和NH4Cl水溶液中止。使用EtOAc萃取所得混合物且使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水MgSO4干燥且浓缩。通过硅胶快速柱色谱法纯化残留物以产生呈白色固体的化合物2(9.0g)。
Figure BDA0000498843530000882
在-78℃下，向含于THF(50.0mL)中的化合物2(9.0g，24.7mmol)的溶液中逐滴添加双(三甲基硅烷基)氨基钠(2.0M于THF中，18.5mL，37.0mmol)。搅拌混合物20分钟且逐滴添加含于THF(30.0mL)中的氧杂氮丙啶衍生物(10.8g，37.0mmol)的溶液。在-78℃下搅拌混合物30分钟且接着使用饱和NH4Cl水溶液中止。使用EtOAc(1.0L)萃取所得混合物且使用1.0N HCl和饱和NaCl水溶液洗涤萃取物，经无水MgSO4干燥且蒸发以去除大多数溶剂。滤出沉淀物且浓缩滤液。通过硅胶快速柱色谱法(DCM：己烷＝1：1到DCM)纯化残留物以产生化合物3(4.3g，外消旋物)。对所述外消旋物进行手性AD-柱色谱法以提供手性纯的化合物3(1.4g)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.63(m，4H)，7.49(m，4H)，4.83(d，1H)，3.29(m，1H)，2.31(m，2H)，1.40(s，3H)，1.36(s，3H)，1.28(s，9H)。LC-MS(ESI)：m/z380.1[M+H]+。
在90～95℃下加热含于EtOH(15.0mL)和12.0N HCl(15.0mL)中的化合物3(1.7g，160mmol)的溶液20小时。去除溶剂且使用3.0N HCl-EtOH溶液(25.0mL)，在回流下再处理残留物3小时。在去除溶剂之后，通过制备型HPLC纯化残留物以产生呈泡沫状固体HCl盐的标题化合物(0.6g)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ7.88(br s，3H)，7.68(m，4H)，7.49(m，4H)，7.35(m，1H)，6.11(br s，1H)，4.11(br s，1H)，4.05(q，2H)，3.61(br s，1H)，1.67(m，2H)，1.40(s，3H)，1.36(s，3H)，1.09(t，3H)。LC-MS(ESI)：m/z342.1[M+H]+。
制备34
(2S，4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-5-甲基己酸乙酯
在80℃下加热(S)-2-(1-联苯-4-基-1-甲基乙基)-5-氧代-吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(8.0g，21.2mmol)和叔丁氧基-N，N，N′，N′-四甲基甲烷二胺(10.0g，63.6mmol)的混合物3小时。将所述混合物冷却到室温且使用EtOAc(200mL)稀释。使用水(2×100mL)和饱和NaCl水溶液洗涤所得溶液，经无水MgSO4干燥且浓缩以产生呈油的化合物1(9.2g，定量)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.53(m，9H)，6.95(s，1H)，4.60(br s，1H)，2.90(s，1H)，2.62(m，2H)，1.61(s，9H)，1.39(s，3H)，1.34(s，3H)。
在0℃下，向含于THF(80.0mL)中的化合物1(9.2g，21.2mmol)的溶液中添加1.0NHCl(25.0mL)。在室温下搅拌混合物2小时且然后使用EtOAc(100mL)稀释。使用饱和NaHCO3水溶液中和所得混合物且使用EtOAc(2×100mL)萃取。使用水(2×100mL)和饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水MgSO4干燥且浓缩以产生呈油的化合物2(8.6g，定量)。LC-MS(ESI)：m/z430.1[M+Na]+。
Figure BDA0000498843530000892
在-5℃下，向含于THF(150mL)和EtOH(15.0mL)中的化合物2(8.6g，21.2mmol)的溶液中添加AcOH(24.3mL，0.4mol)。在-5℃下搅拌混合物30分钟之后，经1小时以小份添加NaBH3CN(5.3g，84.8mmol)。在-5℃下搅拌混合物1小时且使用饱和NaHCO3水溶液中和。使用EtOAc(2×100mL)萃取所得混合物。使用水(2×100mL)和饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水MgSO4干燥且浓缩以产生呈泡沫状固体的化合物3(8.67g，定量)。
在0℃下，向含于EtOH(30.0mL)中的化合物3(3.5g，8.6mmol)的溶液中添加K2CO3(2.4g，17.1mmol)。在0℃下搅拌混合物1小时且接着使其升温到室温且搅拌过夜。过滤混合物且浓缩滤液。使用水(20mL)处理残留物且使用DCM(3×25mL)萃取所得混合物。使用饱和NaCl水溶液洗涤合并的萃取物，经无水MgSO4干燥且浓缩。通过硅胶快速柱色谱法(己烷：EtOAc＝6：1)纯化残留物以产生呈泡沫状固体的化合物4(2.2g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.53(m，9H)，4.35(br s，1H)，4.15(m，2H)，3.95(br s，1H)，3.65(m，2H)，2.61(br s，1H)，1.79(m，1H)，1.45(s，9H)，1.35(s，3H)，1.29(s，3H)，1.25(t，3H)。LC-MS(ESI)：m/z478.2[M+Na]+。
Figure BDA0000498843530000901
在室温下搅拌化合物4(2.2g，4.8mmol)于2.0N HCl-EtOH溶液(30.0mL)中的混合物3小时。在减压下去除溶剂，产生呈泡沫状固体HCl盐的标题化合物(1.6g)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ8.08(br s，3H)，7.55(m，9H)，4.95(br s，1H)，3.95(m，2H)，3.48(m，2H)，2.75(br s，1H)，1.79(m，2H)，1.47(s，3H)，1.40(s，3H)，1.09(t，3H)。LC-MS(ESI)：m/z356.1[M+H]+。
制备35
3-[N-(4-溴苄基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯
Figure BDA0000498843530000902
搅拌含于EtOH/HCl(310mL，1.0M，0.3mol)中的(R)-3-[N-(4-溴苄基)-N′-叔丁氧基羰基肼基]-2-羟基丙酸甲酯(25g，62mmol)的溶液过夜。浓缩所述混合物且使用EtOAc(120mL)洗涤残留物且过滤以产生呈白色固体HCl盐的标题化合物(15g)。
制备36
草酸(R)-2-[N-(4-溴苄基)-N′-乙氧基草酰基肼基]-1-乙氧基羰基乙酯乙酯
Figure BDA0000498843530000911
在0℃下，将乙基草酰氯(70μL，630μmol)逐滴添加到含于DCM(4.0mL，62.2mmol)中的3-[N-(4-溴苄基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯(200mg，630μmol)和Et3N(220μL，1.6mmol)的溶液。在0℃下搅拌所得混合物15分钟且在室温下搅拌15分钟。添加水(3mL)，分离各层，且使用DCM(2×2mL)萃取水层。合并DCM层，经MgSO4干燥且浓缩以产生标题化合物(275mg)。
制备37
N′-(4-溴苄基)肼甲酸叔丁酯
Figure BDA0000498843530000912
向含于无水THF(400mL)中的肼基甲酸叔丁酯(50g，0.4mol)的经搅拌的溶液中逐滴添加含于无水THF(200mL)中的4-溴苯甲醛(70g，0.4mol)的溶液。在室温下搅拌混合物2小时，且接着真空浓缩以产生呈黄色固体的化合物1(113.8g)。LC-MS：243[M-tBu+H]+。
在0℃下，将NaCNBH3(36g，0.6mol)分数份添加到含于无水THF(1L)中的化合物1(113.8g，0.4mol)的溶液中。逐滴添加AcOH(180mL)且在室温下搅拌所得混合物过夜。添加水(2L)和EtOAc(1.5L)且使用饱和Na2CO3水溶液将水相调整到pH＝7。分离有机层，使用NaCl水溶液和水(200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。使用MeOH(2L)和1N NaOH(1.5L)处理残留物，且接着在室温下搅拌2小时。在去除MeOH溶剂之后，通过过滤收集沉淀物，以产生呈白色固体的标题化合物(112g)。LC-MS：245[M-tBu+H]+。
制备38
(R)-3-[N′-叔丁氧基羰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸甲酯
Figure BDA0000498843530000921
向含于1，4-二噁烷(1.5mL)中的N′-(4-溴苄基)肼甲酸叔丁酯(60g，0.2mol)的溶液中添加5-氯-2-氟苯基硼酸(38g，0.2mol)和Pd(dppf)Cl2(7.3g)。在氮气下，在室温下搅拌混合物10分钟，且接着添加含于水(240mL)中的K2CO3(55.2g，0.4mol)。在60℃下搅拌所得混合物3小时，且接着冷却到室温且真空浓缩。使用EtOAc(3×300mL)萃取残留物。经无水Na2SO4干燥合并的有机层且真空浓缩。通过柱色谱法(PE：EtOAc＝10：1～5：1)纯化产物以产生呈粉色固体的化合物1(56g)。LC-MS：701[2M+H]+。
Figure BDA0000498843530000922
在氮气下，向含于异丙醇(250mL)中的化合物1(20g，57mmol)的溶液中添加(2R)-缩水甘油酸甲酯(8.7g，86mmol)。在85℃下搅拌混合物3天，接着冷却到室温。通过过滤收集沉淀的固体，产生呈灰白色固体的标题化合物(18.5g)。LC-MS：397[M-tBu+H]+。
制备39
(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯
Figure BDA0000498843530000923
搅拌含于HCl/EtOH(1.1M，200mL)中的(R)-3-[N′-叔丁氧基羰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸甲酯(20g，16mmol)的溶液过夜且接着真空浓缩。将残留物分散于EtOAc(2×40mL)中，通过过滤收集沉淀物，产生呈灰白色固体HCl盐的标题化合物(8.8g)。LC-MS：367[M+H]+。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.05(t，J＝7.2Hz，3H)，3.05-3.03(q，J＝7.2Hz，2H)，4.06-3.95(m，4H)，4.42(br，1H)，6.46(br，1H)，7.62-7.40(m，7H)，9.42(s，3H)。
制备40
(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯
Figure BDA0000498843530000931
将3-[N-(4-溴苄基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯(3.1g，9.6mmol)与二碳酸二叔丁酯(4.2g，19.2mmol)和DCM(92.4mL，1.4mol)组合。添加DIPEA(5.0mL，28.8mmol)且在室温下搅拌所得混合物24小时。浓缩混合物且将残留物溶于DCM中并通过快速色谱法(含于己烷中的10-95％EtOAc)纯化。收集全部溶离份且浓缩以产生呈白色粉末的化合物1(4.0g)。
将化合物1(3.5g，8.4mmol)与含于EtOH(29.4mL，503mmol)和水(7.6mL，419mmol)中的5-氯-2-氟苯基硼酸(1.8g，10.1mmol)和K2CO3(3.5g，25.2mmol)组合。将所得混合物放置于氮气下且接着添加SilicaCat DPP-Pd(0.28mmol/g装填物；3.0g，839μmol)。在120℃下，对所述混合物进行微波处理达15分钟。然后过滤混合物且减压蒸发。使用快速色谱法(含于己烷中的10-90％EtOAc)纯化粗残留物以产生化合物2(2.0g)。
Figure BDA0000498843530000933
将化合物2(500mg，1mmol)与含于DMF(5.3mL，68.4mmol)中的K2CO3(315mg，2.3mmol)组合。然后添加2-溴苯乙酮(249mg，1.3mmol)且在室温下搅拌所得混合物15分钟。然后使用快速色谱法(含于己烷中的50-100％EtOAc)纯化混合物。接着将这一纯化的物质(605mg)溶于MeCN(3.6mL，68.4mmol)中。然后添加4M HCl的1，4-二噁烷溶液(1.4mL，5.7mmol)，且搅拌所得混合物1小时以产生标题化合物(245mg)。
制备41
(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530000941
通过将草酰氯(102μL，1.2mmol)添加到含于乙醚(632μL，6.0mmol)中的叔丁基醇(35μL，361μmol)的溶液，制备叔丁基草酰氯。在室温下搅拌所得混合物15分钟且接着真空浓缩以产生透明无色液体。
将(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯(55.0mg，120μmol)溶于DCM(463μL，7.2mmol)中。添加叔丁基草酰氯，且在室温下搅拌所得混合物30分钟，且接着真空浓缩。将所得残留物溶于AcOH(411μL，7.2mmol)中。将锌(394mg，6.0mmol)添加到混合物中，然后在室温下搅拌10分钟。过滤且纯化(Interchim反相柱)所述混合物以产生标题化合物(25.0mg)。
制备42
(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯 -4-基甲酯
将含于水(60mL)中的LiOH水合物(3g，73mmol)添加到含于MeOH(300mL)中的(R)-3-[N′-叔丁氧基羰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸甲酯(16.5g，36.5mmol)中。在室温下搅拌混合物2小时，且真空蒸发MeOH。使用1M HCl水溶液将混合物调整到pH＝5，且使用EtOAc(2×300mL)萃取残留物。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，且真空浓缩以产生呈白色固体的化合物1(18g)。LC-MS：383[M-tBu+H]。
Figure BDA0000498843530000951
向含于DMF(40mL)中的化合物1(1.5g，3.42mmol)、K2CO3(0.95g，6.84mmol)和碘化钾(20mg)的溶液中添加含于DMF(15mL)中的4-(溴甲基)-5-甲基-1，3-间二氧杂环戊烯-2-酮(0.8g，4.1mmol)。在室温下搅拌所得混合物4小时。添加饱和NaCl水溶液(30mL)且使用EtOAc(2×50mL)萃取混合物。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，且真空浓缩。通过柱色谱法(己烷/EtOAc＝1：1)纯化残留物以产生呈黄色固体的化合物2(930mg)。LC-MS：495[M-tBu+H]+。
Figure BDA0000498843530000952
将化合物2(400mg，0.73mmol)溶于MeCN(20mL)中，且冷却到0℃。逐滴添加N-三甲基硅烷基咪唑(290mg，1.46mmol)且搅拌所得混合物2小时。添加MeOH(50mL)以中止所述反应。使用饱和NaCl水溶液(2×50mL)洗涤混合物且使用DCM(2×80mL)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，且真空浓缩。收集产物以产生呈黄色固体的标题化合物(200mg)。LC-MS：451[M+H]+。
制备43
(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530000961
在氮气下，在0℃下向(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯(2.0g，4.4mmol)于DCM(10mL)中的混合物中逐滴添加2-氯-2-氧代乙酸叔丁酯(1.5g，8.8mmol)。然后逐滴添加DIPEA(1.15g，8.8mmol)，且在0℃下搅拌所得混合物5分钟。通过蒸发去除溶剂且通过柱色谱法(PE：EtOAc＝2：1)纯化残留物以产生呈黄色液体的化合物1(2.0g)。LC-MS：585[M+H]+。
Figure BDA0000498843530000962
在室温下搅拌化合物1(2.0g，3.4mmol)和Zn(15.5g，240mmol)于AcOH(15mL)中的混合物1小时，然后过滤。添加水(30mL)到滤液中，且使用EtOAc(3×40mL)萃取混合物。使用饱和NaCl水溶液(2×50mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，且真空浓缩。通过柱色谱法(DCM/MeOH＝10：1)纯化残留物以产生呈黄色液体的标题化合物(1.4g)。LC-MS：467[M+H]+。
实例1
(R)-5-联苯-4-基-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530000971
将(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基戊酸乙酯(HCl盐；47mg，0.2mmol)和乙基草酰氯(18.4μL，1.1eq)与含于DMF(0.3mL)/DCM(0.3mL)中的DIPEA(52.2μL，0.3mmol)组合。在室温下搅拌混合物直到反应完成。去除溶剂且将残留物溶于EtOH(750μL)和1MNaOH水溶液(750μL)中，且在室温下搅拌过夜。去除溶剂且通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(28.2mg，纯度100％)。MS m/z[M+H]+针对C19H19NO6的计算值为358.12；实验值为358.0。
实例2
A.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
向含于DIPEA(165μL，0.9mmol)中的乙基草酰氯(70.7μL，0.6mmol)的溶液中添加(2R,4R)-4-氨基-5-(4-溴苯基)-2-羟基戊酸乙酯(100mg，0.3mmol)和DCM(0.7mL)的溶液，且在室温下搅拌混合物10分钟，然后减压蒸发溶剂。添加3-氯苯基硼酸、频哪醇酯(112mg，468μmol)、K2CO3(97mg，702μmol)、EtOH(2mL)和水(0.6mL)，然后添加
Figure BDA0000498843530000973
(0.09mmol/g装填物，260mg，23.4μmol)。在120℃下将混合物加热20分钟。浓缩反应混合物且添加10M NaOH水溶液(316μL)和含有1滴MeOH的THF(4.0mL)。在室温下搅拌所得混合物1小时。将残留物溶于AcOH中且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(9mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C19H18ClNO6的计算值为392.08；实验值为392.4。
B.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000981
将草酰氯(54.5μL，0.6mmol)添加到含于乙醚(1.0mL)中的叔丁基醇(56.0μL)的溶液中且在室温下搅拌混合物1小时。真空浓缩混合物且添加含于DCM(1.0mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(67.9mg，0.2mmol)和DIPEA(102μL，0.6mmol)的溶液到所得透明无色液体残留物中。在室温下搅拌所得混合物2小时且真空浓缩以产生透明黄色液体。将1：1TFA/DCM(1.6mL)添加到粗制液体中且在室温下搅拌反应混合物2小时且真空浓缩以产生透明黄色液体。通过反相制备型HPLC(40-90％MeCN/H2O)纯化粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(25.0mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C21H22ClNO6的计算值为420.11；实验值为420.1。
C.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-4-(乙氧基草酰基氨基)-2-羟基戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530000982
在0℃下，经10分钟时期将含于DCM(0.4mL)中的乙基草酰氯(24.6μL，0.2mmol)的溶液添加到含于DCM(1.0mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(69.6mg，0.2mmol)和Et3N(69.7μL，0.5mmol)的溶液中。在0℃下搅拌所得混合物30分钟，且接着在室温下搅拌15分钟。添加水(2mL)，分离各层，且使用DCM(2×2mL)萃取水层。合并DCM层，经Na2SO4干燥且浓缩以产生透明黄色液体。通过快速色谱法(4g柱，16mL/min，使用35％EtOAc/己烷(2min)，35-50％(1min)，50％(4min)，50-70％(1min)和70％EtOAc/己烷(3min))纯化粗制液体以产生呈透明无色液体的标题化合物(63.9mg，纯度90％)，其在静置时固化成白色固体。MS m/z[M+H]+针对C23H26ClNO6的计算值为448.14；实验值为448.2。
D.(2R，4R)-4-(丁氧基草酰基氨基)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸丁酯
Figure BDA0000498843530000991
将对甲苯磺酸一水合物(849μg，4μmol)添加到含于1-丁醇(0.5mL)中的(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-4-(乙氧基草酰基氨基)-2-羟基戊酸乙酯(20.0mg，45μmol)的溶液中。在80℃下搅拌反应混合物14小时，在90℃下搅拌4小时，且接着使其冷却到室温。添加饱和NaHCO3水溶液(2mL)，且使用DCM(3×2mL)萃取水层。合并DCM层，经Na2SO4干燥且真空浓缩以产生透明无色液体。通过快速色谱法(4g柱，40％EtOAc/己烷)纯化粗制液体以产生呈透明无色液体的标题化合物(18.1mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C27H34ClNO6的计算值为504.21；实验值为504.2。
E.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲 氧基草酰基)氨基]戊酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲酯
Figure BDA0000498843530000992
将草酰氯(22.4μL，264μmol)添加到含于乙醚(1.5mL)中的4-羟基甲基-5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮(29.1mg，224μmol)的溶液中且在室温下搅拌混合物2小时。在真空下去除乙醚且将残留物溶于DMF(1.5mL)中。在0℃下，将所得溶液添加到(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(65.0mg，203μmol)和NaHCO3(51.2mg)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物3小时，然后真空浓缩。接着，通过反相制备型HPLC(30％-90％MeCN/H2O)纯化残留物以产生呈白色固体的化合物1(19.1mg)。
Figure BDA0000498843530000993
将1-羟基苯并三唑(7.7mg，56.8μmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳化二亚胺盐酸盐(10.9mg，56.8μmol)添加到含于DCM(1.0mL)中的化合物1(19.1mg，37.9μmol)的溶液中且在室温下搅拌混合物10分钟。添加4-羟基甲基-5-甲基-[1，3]二氧杂环戊烯-2-酮(14.8mg，114μmol)和4-甲基吗啉(7.7mg，75.8μmol)且在室温下搅拌所得混合物6小时。添加水且使用DCM(3×1.5mL)萃取混合物。合并DCM层，经Na2SO4干燥且浓缩以产生黄色液体。通过反相制备型HPLC纯化粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(5.1mg)。MS m/z[M+H]+针对C29H26ClNO12的计算值为616.11；实验值为616.1。
F.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-4-(乙氧基草酰基氨基)-2-羟基戊酸
Figure BDA0000498843530001001
在0℃下，将乙基草酰氯(46.1μL，0.4mmol)添加到含于DMF(2.0mL，25.8mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(120mg，0.4mmol)和Et3N(157μL，1.1mmol)的溶液中，且在室温下搅拌所得混合物20分钟。添加额外的乙基草酰氯(30μL)且另外搅拌混合物10分钟。添加水(2mL)且使用DCM(3×2mL)萃取混合物。合并萃取物，经Na2SO4干燥且浓缩以产生黄色液体。通过(C-18柱色谱法，20g；具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)纯化粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(28.5mg)。MSm/z[M+H]+针对C21H22ClNO6的计算值为420.11；实验值为420.2。
G.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丙氧基草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001002
在0℃下，将氯-氧代-乙酸异丙酯(62.1mg，413μmol；～53μL)逐滴添加到含于DMF(2.0mL，25.8mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(100mg，313μmol)和Et3N(157μL，1.1mmol)的溶液中，且在室温下搅拌所得混合物10分钟。添加额外的乙基草酰氯(50μL)且另外搅拌混合物10分钟。添加饱和NaHCO3水溶液(5mL)且在室温下搅拌混合物1小时。使用DCM(3×3mL)萃取混合物，合并萃取物，经Na2SO4干燥且浓缩以产生黄色液体。纯化(制备型HPLC C-18柱色谱法，小型柱，使用具有0.05％TFA的40-95％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(53.0mg)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClNO6的计算值为434.13；实验值为434.1。
H.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丁氧基草酰基氨基)戊酸
将1.0M HCl水溶液(2.5mL，2.5mmol)添加到(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(100mg，287μmol)中，且在100℃下搅拌所得混合物1小时。浓缩混合物以产生(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸。
在0℃下，将氯-氧代-乙酸异丁酯(99.4mg，604μmol)逐滴添加到含于DMF(2.0mL，25.8mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸和Et3N(160μL，1.2mmol)的溶液中，且在室温下搅拌10分钟。添加饱和NaHCO3水溶液(5mL)且在室温下搅拌混合物2小时。使用DCM(3×5mL)萃取混合物，合并DCM萃取物，使用饱和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩以产生白色固体残留物。通过制备型HPLC C18柱色谱法(小型柱；具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)纯化粗固体以产生呈白色固体的标题化合物(40.0mg)。MS m/z[M+H]+针对C23H26ClNO6的计算值为448.14；实验值为448.1。
I.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丁酯
Figure BDA0000498843530001012
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(216μL，862μmol)添加到含于异丁基醇(0.5mL，5.4mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(75.0mg，216μmol)的悬浮液中，且在60℃下搅拌所得混合物2小时。接着真空浓缩混合物以产生白色固体。将白色固体溶于DCM中且然后将DIPEA(113μL，647μmol)逐滴添加到混合物中，随后逐滴添加～0.22mL含于DCM(0.2mmol)中的1M叔丁基草酰氯溶液。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.3mL，7.7mmol)溶液添加到所述黄色液体中且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(70.5mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C23H26ClNO6的计算值为448.14；实验值为448.1。
J.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丙酯
Figure BDA0000498843530001021
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(216μL，862μmol)添加到含于异丙醇(0.5mL，6.5mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(75.0mg，216μmol)的悬浮液中且在60℃下搅拌所得混合物过夜。接着真空浓缩混合物以产生白色固体。将白色固体溶于DCM中且然后将DIPEA(113μL，647μmol)逐滴添加到混合物中，随后逐滴添加～0.22mL1M叔丁基草酰氯DCM溶液(0.2mmol)。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.3mL，7.7mmol)溶液添加到所述黄色液体中且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(62.8mg，纯度98％)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClNO6的计算值为434.13；实验值为434.1。
K.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸庚酯
Figure BDA0000498843530001022
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(216μL，862μmol)添加到含于1-庚醇(250μL，1.8mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(75.0mg，216μmol)的悬浮液中且在60℃下搅拌所得混合物2小时。接着真空浓缩混合物以产生白色固体，其经纯化(Interchim反相色谱柱；具有0.5％TFA的30-90％MeCN水溶液梯度)。将经纯化的白色固体溶于DCM中且然后将DIPEA(113μL，647μmol)逐滴添加到混合物中，随后逐滴添加～0.22mL1M叔丁基草酰氯的DCM溶液(0.2mmol)。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.3mL，7.7mmol)溶液添加到所述黄色液体中且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(43.3mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C26H32ClNO6的计算值为490.19；实验值为490.2。
L.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸3，3，3-三氟丙酯
Figure BDA0000498843530001031
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(287μL，1.2mmol)添加到含于3,3,3-三氟丙-1-醇(492mg，4.3mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(50.0mg，144μmol)的悬浮液中且在80℃下搅拌所得混合物12小时。接着真空浓缩混合物以产生白色固体，将其溶于DCM(1.0mL)和～0.2mL1M叔丁基草酰氯的DCM溶液(0.2mmol)中。然后逐滴添加DIPEA(75.1μL，431μmol)且在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.3mL，7.7mmol)溶液添加到所述黄色液体中且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(44.9mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C22H21ClF3NO6的计算值为488.10；实验值为488.1。
M.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸2，2，2-三氟乙酯
Figure BDA0000498843530001041
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(287μL，1.2mmol)添加到含于2,2,2-三氟乙醇(0.5mL，6.9mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(50.0mg，144μmol)的悬浮液中且在110℃下搅拌所得混合物12小时。接着真空浓缩混合物以产生白色固体，将其溶于DCM(1.0mL)和～0.2mL1M叔丁基草酰氯的DCM溶液(0.2mmol)中。然后逐滴添加DIPEA(75.1μL，431μmol)且在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.3mL，7.7mmol)溶液添加到所述黄色液体中且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(22.5mg，纯度98％)。MS m/z[M+H]+针对C21H19ClF3NO6的计算值为474.09；实验值为474.1。
N.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-[(3，3，3-三氟丙氧基草酰基)-氨基]戊酸
将苄基醇(13.0mL，126mmol)添加到(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(1.9g，5.3mmol)中，然后添加4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(5.3mL，21.3mmol)，且在60℃下搅拌混合物1小时。纯化(Interchim反相色谱柱；具有0.05％TFA的30-90％MeCN水溶液)混合物以产生呈白色固体的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸苄酯(2.2g)。(使用水(4×300mL)真空蒸发以去除过量苄基醇)。
Figure BDA0000498843530001051
通过添加草酰氯(51.6μL，610μmol)到含于乙醚(500μL，4.8mmol)中的3，3，3-三氟丙-1-醇(62.6mg，549μmol)的溶液中，制备3,3,3-三氟丙基草酰氯。在室温下搅拌所得混合物1小时且接着真空浓缩以产生透明无色液体。通过将所得液体溶于～0.61mL DCM中，制备～1M草酰氯溶液。
在0℃下，将3,3,3-三氟丙基草酰氯溶液(～140μL)添加到含于DCM(1.0mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸苄酯(50.0mg，122μmol)的溶液中，且在0℃下搅拌混合物15分钟。添加饱和NaHCO3水溶液(1mL)且在室温下搅拌混合物1小时。分离各层且使用DCM(2×2mL)萃取水层。合并DCM层，经Na2SO4干燥且浓缩以产生透明黄色液体。将10％Pd/C、50％湿(0.45mmol/g装填物；13.6mg，6.1μmol)添加到含于DCM和THF(1.0mL)中的所述黄色液体溶液中且在氮气下搅拌混合物30分钟。过滤混合物且浓缩滤液以产生透明黄色液体。通过制备型HPLC(具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)纯化粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(16.5mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C22H21ClF3NO6的计算值为488.10；实验值为4880。
O.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸2，2，3，3，3-五氟丙酯
Figure BDA0000498843530001052
在0℃下，将～1M叔丁基草酰氯(～0.2mL)溶液添加到含于DCM(1.0mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸2,2,3,3,3-五氟丙酯(50.0mg，111μmol)的溶液中，然后经10分钟逐滴添加DIPEA(21.2μL，122μmol)。在0℃下搅拌混合物15分钟。添加饱和NaHCO3水溶液(5mL)且使用DCM(3×5mL)萃取混合物。合并DCM层，经Na2SO4干燥且浓缩以产生透明无色液体。通过快速色谱法(50％EtOAc/己烷)纯化粗制液体以产生透明无色液体。将1：1TFA/DCM(1.0mL)添加到所述透明无色液体中且在室温下搅拌30分钟。真空浓缩混合物以产生透明黄色液体。通过制备型HPLC(具有0.05％TFA的40％-90％MeCN水溶液)纯化粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(21.6mg，纯度98％)。MS m/z[M+H]+针对C22H19ClF5NO6的计算值为524.08；实验值为524.0。
P.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧 杂环戊烯-4-基甲酯
Figure BDA0000498843530001061
在0℃下，将～1M叔丁基草酰氯(160μL)溶液添加到含于DCM(1.00mL，15.6mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸5-甲基-2-氧代[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲酯(50.0mg，116μmol)的溶液中，然后经10分钟逐滴添加N,N-二异丙胺(17.8μL，127μmol)。在0℃下搅拌所得混合物15分钟，然后真空浓缩。将1：1TFA/DCM(1.0mL，6.2mmol)添加到残留物中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空浓缩混合物以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模C18柱色谱法，小型柱，使用具有0.05％TFA的30-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(9.6mg)。MS m/z[M+H]+针对C24H22ClNO9的计算值为504.10；实验值为504.0。
O.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸丁酰氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001062
在0℃下，将～1M叔丁基草酰氯(160μL)溶液添加到含于DCM(1.00mL，15.6mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸丁酰氧基甲酯(48.6mg，116μmol)的溶液中，然后经10分钟逐滴添加N,N-二异丙胺(17.8μL，127μmol)。在0℃下搅拌所得混合物15分钟，然后真空浓缩。将1：1TFA/DCM(1.0mL，6.2mmol)添加到残留物中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空浓缩混合物以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模C18柱色谱法，小型柱，使用具有0.05％TFA的30-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(10.2mg)。MS m/z[M+H]+针对C24H26ClNO8的计算值为492.13；实验值为492.0。
R.(2R，4R)-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酰氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001071
向含于DMF(2mL)中的(2R,4R)-4-(叔丁氧基草酰基氨基)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸(200mg，450μmol)和乙酸溴甲酯(97mg，0.9mmol)的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(144mg，1.3mmol)和NaI(67mg，450μmol)。在室温下搅拌24小时之后，使用水(20mL)稀释混合物且使用EtOAc(2×20mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(2×70mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其通过制备型TLC(PE：EtOAc＝2：1)进一步纯化以产生呈黄色固体的化合物1(100mg)。LC-MS：542[M+Na]+。
在0℃下，向含于DCM(5mL)中的化合物1(100mg，0.2mmol)的溶液中添加TFA(2mL)。在室温下搅拌混合物2小时，去除溶剂，且通过制备型TLC(DCM：MeOH＝8：1)进一步纯化残留物以产生呈白色固体的标题化合物(10mg)。LC-MS：464[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.61(s，1H)，7.55(d，J＝8.0Hz，3H)，7.42(t，J＝7.8Hz，1H)，7.34(d，J＝8.1Hz，3H)，5.78(s，2H)，4.40(s，1H)，4.31(t，J＝5.9Hz，1H)，2.94(ddd，J＝22.0，13.8，7.2Hz，2H)，2.09(m，5H)。
S.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙氧基羰基氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001081
向含于DMF(3mL)中的(2R,4R)-4-(叔丁氧基草酰基氨基)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸(100mg，220μmol)和碳酸氯甲基乙酯(61mg，440μmol)的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(72mg，660μmol)和NaI(33mg，220μmol)。在室温下搅拌24小时之后，使用水(20mL)稀释混合物且使用EtOAc(2×20mL)萃取。使用饱和NaCl水溶液(2×70mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其通过制备型TLC(PE：EtOAc＝2：1)进一步纯化以产生呈黄色固体的化合物1(40mg)。LC-MS：572[M+Na]+。
在0℃下，向含于DCM(3mL)中的化合物1(40mg，70μmol)的溶液中添加TFA(1mL)。在室温下搅拌混合物2小时，去除溶剂，且通过制备型TLC(DCM：MeOH＝8：1)进一步纯化残留物以产生呈白色固体的标题化合物(18mg)。LC-MS：494[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.55(m，4H)，7.38(m，4H)，5.80(d，J＝18.6Hz，2H)，4.34(s，2H)，4.21(dd，J＝14.3，7.1Hz，2H)，2.95(m，2H)，2.07(d，J＝28.0Hz，2H)，1.29(dd，J＝12.6，5.5Hz，3H)。MS m/z[M+H]+针对C23H24ClNO9的计算值为494.11；实验值为494。
T.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-[(2-甲氧基乙氧基草酰基)氨基]-戊酸
将DIPEA(64μL，366μmol)添加到含于DCM(3mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸苄酯(50.0mg，122μmol)的溶液中，然后逐滴添加含于DCM中的1.0M氯-氧代-乙酸2-甲氧基乙酯(22mg，134μmol)溶液。在室温下搅拌所得混合物30分钟，然后浓缩以产生透明黄色液体。纯化(Interchim C18色谱柱，20g，具有0.05％TFA的340-90％MeCN水溶液)粗制液体。将THF(3mL)添加到经纯化的物质中，然后添加钯碳(10重量％，在碳上，湿50g，12.9mg，12μmol)且在氢气下搅拌混合物30分钟。过滤混合物且真空浓缩，并将残留物溶于AcOH(0.5mL)中且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(9.8mg)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClNO7的计算值为450.12；实验值为450.2。
U.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-[(2-苯氧基乙氧基草酰基)氨基]-戊酸
Figure BDA0000498843530001091
将DIPEA(64μL，366μmol)添加到含于DCM(3mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸苄酯(50.0mg，122μmol)的溶液中，然后逐滴添加含于DCM中的1.0M氯-氧代-乙酸2-苯氧基乙酯(31mg，134μmol)溶液。在室温下搅拌所得混合物30分钟，然后浓缩以产生透明黄色液体。纯化(Interchim C18色谱柱，20g，具有0.05％TFA的340-90％MeCN水溶液)粗制液体。将THF(3mL)添加到经纯化的物质中，然后添加钯碳(10重量％于碳上，湿50g，12.9mg，12μmol)且在氢气下搅拌混合物30分钟。过滤混合物且真空浓缩，并将残留物溶于AcOH(0.5mL)中且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(3.5mg)。MS m/z[M+H]+针对C27H26ClNO7的计算值为512.14；实验值为512.2。
V.(2R，4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-4-[(3-乙氧基丙氧基草酰基)氨基]-2-羟基-戊酸
Figure BDA0000498843530001092
将DIPEA(64μL，366μmol)添加到含于DCM(3mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸苄酯(50.0mg，122μmol)的溶液中，然后逐滴添加含于DCM中的1.0M氯-氧代-乙酸3-乙氧基丙酯(26g，134μmol)溶液。在室温下搅拌所得混合物30分钟，然后浓缩以产生透明黄色液体。纯化(Interchim C18色谱柱，20g，具有0.05％TFA的340-90％MeCN水溶液)粗制液体。将THF(3mL)添加到经纯化的物质中，然后添加钯碳(10重量％，在碳上，湿50g，12.9mg，12μmol)且在氢气下搅拌混合物30分钟。过滤混合物且真空浓缩，并将残留物溶于AcOH(0.5mL)中且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(10.5mg)。MS m/z[M+H]+针对C24H28ClNO7的计算值为478.16；实验值为478.2。
W.(2R,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸(S)-2-甲氧基羰基氨基-3- 甲基丁酰氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001101
遵照本文中所述的方法，还制备标题化合物(12.6mg)。MS m/z[M+H]+针对C27H31ClN2O10的计算值为579.17；实验值为579.2。
实例3
A.(2R，4R)-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001102
将含于DCM(0.4mL，6mmol)中的乙基草酰氯(42.4μL，0.4mmol)的溶液添加到含于DCM(1mL)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(4-溴苯基)-2-羟基戊酸乙酯(80mg，0.2mmol)和Et3N(0.1mL，0.8mmol)的溶液中，且在室温下搅拌所得混合物30分钟，然后减压蒸发。接着将产物与2,5-二氯苯基硼酸(72.4mg，0.4mmol)、K2CO3(104.9mg，759μmol)、EtOH(0.9mL)和水(0.2mL)组合。将混合物放置于氮气下且添加
Figure BDA0000498843530001103
(0.28mmol/g装填物，90.4mg，25.3μmol)。在120℃下对混合物进行微波处理达20分钟，然后过滤。添加1M LiOH水溶液(2.5mL，2.5mmol)以产生标题化合物(11.9mg，纯度100％)。MS m/z[M+H]+针对C19H17Cl2NO6的计算值为426.04；实验值为426.0。
B.(2R,4R)-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丁酯
Figure BDA0000498843530001111
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(196μL，785μmol)添加到含于异丁醇(0.5mL，5.4mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸乙酯(75.0mg，196μmol)的悬浮液中，且在60℃下搅拌所得混合物2小时。然后真空浓缩混合物以产生白色固体。将白色固体溶于DCM(1mL)中且接着将DIPEA(102μL，588μmol)逐滴添加到混合物，随后逐滴添加～0.2mL1M叔丁基草酰氯的DCM溶液(0.2mmol)。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.1mL，7.0mmol)溶液添加到所述黄色液体且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(80mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C23H25Cl2NO6的计算值为482.11；实验值为482.1。
C.(2R，4R)-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丙酯
Figure BDA0000498843530001112
将4.0M HCl的1，4-二噁烷溶液(196μL，785μmol)添加到含于异丙醇(0.5mL，6.5mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸乙酯(75.0mg，196μmol)的悬浮液中，且在60℃下搅拌所得混合物过夜。然后真空浓缩混合物以产生白色固体。将白色固体溶于DCM(1mL)中且接着将DIPEA(102μL，588μmol)逐滴添加到混合物，随后逐滴添加～0.2mL1M叔丁基草酰氯的DCM溶液(0.2mmol)。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩以产生黄色液体。将TFA/DCM(1：1，1.1mL，7.0mmol)溶液添加到所述黄色液体且在室温下搅拌所得混合物30分钟且随后真空浓缩以产生透明黄色液体。纯化(制备型规模HPLC C18柱色谱法，具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)粗制液体以产生呈白色固体的标题化合物(60.6mg，纯度98％)。MS m/z[M+H]+针对C22H23Cl2NO6的计算值为468.09；实验值为468.1。
D.(2R,4R)-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丁氧基草酰基氨基)-戊酸
Figure BDA0000498843530001121
将1.0M HCl水溶液(3.5mL，3.5mmol)添加到(2R,4R)-4-氨基-5-(2′，5′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-戊酸乙酯(155mg，405μmol)中且在100℃下搅拌混合物1小时，然后浓缩。将产物与含于DMF(2.5mL，32.3mmol)中的Et3N(226μL，1.6mmol)组合。在0℃下逐滴添加氯-氧代-乙酸异丁酯(140mg，851μmol)且在室温下搅拌所得混合物10分钟。添加饱和NaHCO3水溶液(5mL)且在室温下搅拌混合物2小时。使用DCM(3×5mL)萃取混合物，合并萃取物，使用饱和NaCl水溶液洗涤，经Na2SO4干燥且浓缩以产生白色固体残留物。经由制备型HPLC(C18柱；具有0.05％TFA的40-90％MeCN水溶液)纯化粗固体以产生呈白色固体的标题化合物(98.0mg，纯度99％)。MS m/z[M+H]+针对C23H25Cl2NO6的计算值为482.11；实验值为482.1。
实例4
(2R,4R)-5-(3-氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001122
将含于DCM(0.5mL)中的乙基草酰氯(41μL，0.4mmol)的溶液添加到含于DCM(1.4mL)中的(3R，5R)-5-氨基-6-(4-溴-2-氯-苯基)-2-乙氧基-己-1-烯-3-醇(96mg，0.3mmol)和Et3N(0.1192mL，0.8556mmol)的溶液中，且在室温下搅拌20分钟。在减压下蒸发混合物且与苯基硼酸(52.2mg，0.4mmol)、K2CO3(100mg，0.9mmol)、水(0.2mL)和EtOH(1mL)组合。将所得混合物放置于氮气下，且添加
Figure BDA0000498843530001123
DPP-Pd(0.28mmol/g装填物；100mg，0.03mmol)。在120℃下将混合物加热20分钟直到反应完成。过滤混合物且添加1M LiOH水溶液(3mL，3mmol)。然后，纯化(Interchim反相色谱柱)产物以产生标题化合物(12.6mg)。MS m/z[M+H]+针对C19H18ClNO6的计算值为392.08；实验值为392.2。
实例5
遵照本文实例中所述的程序，并替代适宜的起始物质和试剂，制备以下化合物：
Figure BDA0000498843530001131
Figure BDA0000498843530001132
1.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-甲基联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)-戊酸
2.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-甲基联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)-戊酸异丙酯
3.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-甲基联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
4.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-甲基联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丁酯
5.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
6.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
7.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丁酯
8.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丙酯
9.(2R,4R)-5-(3，3′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸
10.(2R,4R)-5-(3，3′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丁氧基草酰基氨基)-戊酸
11.(2R,4R)-5-(3，3′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丁酯
12.(2R,4R)-5-(3，3′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸异丙酯
13.(R)-3-[N-(3，5′-二氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基-肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530001141
Figure BDA0000498843530001142
14.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-4-(乙氧基草酰基氨基)-2-羟基-戊酸
15.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丙氧基草酰基-氨基)-戊酸
16.(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-(异丁氧基草酰基氨基)-戊酸
17.(2R,4R)-5-(3，3′-二氯联苯-4-基)-2-羟基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
实例6
A.(2S,4S)-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001143
将乙基草酰氯(27μL，0.2mmol，1.1eq)添加到含于DMF(0.5mL)/DCM(0.5mL)中的(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-戊酸乙酯(HCl盐；80mg，0.22mmol)的溶液中，且在室温下搅拌20分钟。去除溶剂并将残留物溶于LiOH(一水合物；92.2mg，2.2mmol)、水(1.0mL)和EtOH(2.0mL)中，且在室温下搅拌30分钟。使用AcOH中止反应并去除溶剂。将残留物溶于AcOH/MeCN中且通过制备型HPLC纯化。合并澄清溶离份且冻干以产生标题化合物(37mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C20H21NO6的计算值为372.14；实验值为372.2。
B.(2S，4S)-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530001151
在0℃下，在氮气下，使草酰氯(232μL，2.8mmol)和叔丁醇(228μL)在乙醚(6.7mL)中组合。在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空蒸发溶剂以形成氯-氧代-乙酸叔丁酯，接着将其溶于DCM(10mL)中且与在0℃下已经溶于含Et3N(2.6mL)的DCM中的(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-戊酸乙酯(HCl盐；667mg，1.8mmol)组合。在室温下搅拌所得混合物5分钟。浓缩粗产物，溶于DCM中且通过快速色谱法(20-80％EtOAc/己烷)纯化。去除溶剂并将残留物溶于DCM(5mL)和TFA(1mL)中，且搅拌1小时。真空干燥产物且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(135mg，纯度95％)。MSm/z[M+H]+针对C22H25NO6的计算值为400.17；实验值为400.2。
实例7
A.(2S,4S)-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸丁酯
Figure BDA0000498843530001152
使草酰氯(44.1μL，0.5mmol)和叔丁醇(46.5μL)在乙醚(1mL)中组合且在室温下搅拌30分钟。真空蒸发溶剂以形成氯-氧代-乙酸叔丁酯，接着将其溶于DCM(2mL)中。使(2S,4S)-4-氨基-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基戊酸乙酯(HCl盐；120mg，0.3mmol)与1-丁醇(3mL)和4M HCl的1，4-二噁烷溶液(3mL)组合且在60℃下搅拌2小时。蒸发溶剂且与甲苯(2×)共沸且将产物溶于Et3N(155μL)和DCM中，然后与氯-氧代-乙酸叔丁酯组合。在室温下搅拌所得混合物20分钟。蒸发溶剂并将残留物再溶于1：1TFA：DCM中，且在40℃下搅拌20分钟。添加AcOH且通过制备型HPLC纯化产物以产生标题化合物(30mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C24H28FNO6的计算值为446.19；实验值为446.4。
B.(2S，4S)-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001161
使乙基草酰氯(13.8μL，0.1mmol)和DIPEA(39.2μL，0.2mmol)在溶于DCM(0.9mL)中的(2S,4S)-4-氨基-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基戊酸乙酯(HCl盐；43mg，0.1mmol)中组合。在室温下搅拌混合物10分钟，然后真空浓缩。添加1M LiOH水溶液(0.9mL)和EtOH(0.9mL)且在室温下搅拌所得混合物1小时。使用AcOH中止反应混合物且蒸发溶剂。将残留物溶于AcOH/MeCN中且通过制备型HPLC纯化。合并澄清溶离份且冻干以产生标题化合物(32.7mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C20H20FNO6的计算值为390.13；实验值为390.2。
实例8
遵照本文实例中所述的程序，且替代适宜的起始物质和试剂，制备以下化合物：
Figure BDA0000498843530001162
Figure BDA0000498843530001163
1.(2S,4S)-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
2.(2S,4S)-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
3.(2S,4S)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001171
Figure BDA0000498843530001172
4.(2S,4S)-5-(4′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001173
5.(2S,4S)-5-(3-氯联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
6.(2R,4S)-5-(3-氯联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
实例9
A.(2S，4R)-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001175
使乙基草酰氯(13.1μL，0.1mmol)与溶于DCM(0.3mL)的(2S,4R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸乙酯(40mg，0.1mmol)和少量DMF组合。在室温下搅拌混合物20分钟，然后真空浓缩。添加1M NaOH水溶液(117μL)和THF(1.5mL)且在室温下搅拌所得混合物30分钟。将残留物溶于AcOH中且通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(8mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C21H23NO6的计算值为386.15；实验值为386.0。
B.(2S，4R)-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基氨基)戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530001181
在0℃下，在氮气下，使草酰氯(12.4μL，0.1mmol)和叔丁醇(13.1μL)在乙醚(0.3mL)中组合。在室温下搅拌所得混合物30分钟。真空蒸发溶剂以形成氯-氧代-乙酸叔丁酯，接着将其溶于DCM(0.7mL)中且与(2S,4R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-2-甲基戊酸乙酯(33.4mg，98μmol)组合。在0℃下添加Et3N(43.6μL)且在室温下搅拌所得混合物30分钟。蒸发溶剂且将残留物溶于1：1TFA：DCM中且搅拌1小时。添加AcOH且通过制备型HPLC纯化产物以产生标题化合物(7mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C23H27NO6的计算值为414.18；实验值为414.4。
实例10
(2S，4R)-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001182
使乙基草酰氯(9.1μL，0.1mmol)与溶于DCM(0.2mL)中的(2S,4R)-4-氨基-5-(3′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基戊酸(27mg，0.1mmol)和少量DMF组合。在室温下搅拌混合物20分钟。蒸发溶剂且添加10M NaOH水溶液(81.5μL)和THF(1.0mL)且在室温下搅拌所得混合物30分钟。将残留物溶于AcOH中并通过制备型HPLC纯化以产生标题化合物(6mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C21H22FNO6的计算值为404.14；实验值为404.4。
实例11
遵照本文实例中所述的程序，且替代适宜的起始物质和试剂，制备以下化合物：
Figure BDA0000498843530001191
Figure BDA0000498843530001192
1.(2S,4R)-5-(2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
2.(2R,4S)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基-氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001193
Figure BDA0000498843530001194
3.(2S,4R)-5-(4′-氟联苯-4-基)-2-羟基甲基-2-甲基-4-(草酰基氨基)戊酸
Figure BDA0000498843530001195
Figure BDA0000498843530001196
Figure BDA0000498843530001201
4.(2S,4R)-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基甲基-4-(异丁氧基草酰基-氨基)-2-甲基戊酸
实例12
3-(N-联苯-4-基甲基-N′-草酰基肼基)-2-羟基-2-甲基丙酸
Figure BDA0000498843530001202
将3-(N-联苯-4-基甲基-N′-叔丁氧基羰基肼基)-2-羟基-2-甲基丙酸甲酯(0.1g，241μmol)溶于DCM(1.0mL)中，然后添加TFA(1.0mL)且在室温下搅拌混合物1小时。浓缩混合物且将残留物溶于DMF(2.00mL)中。添加DIPEA(126μL，724μmol)，然后添加乙基草酰氯(29.6μL，265μmol)且在室温下搅拌所得混合物直到反应完成(～3小时)。浓缩混合物且将残留物溶于THF(1.5mL)中，然后添加含于水(1.50mL)中的氢氧化锂一水合物(101mg，2.4mmol)且在室温下搅拌混合物30分钟。使用AcOH中止反应且浓缩溶液。通过制备型HPLC(10-70％MeCN/H2O)纯化粗产物以产生标题化合物(10.9mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C19H20N2O6的计算值为373.13；实验值为373.2。
实例13
(R)-3-[N-(3′-氯联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530001203
将(R)-3-[N-(3′-氯联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基-丙酸乙酯(70mg，0.2mmol)溶于DCM(1.5mL)中，然后添加乙基草酰氯(24.7μL，221μmol)和DIPEA(69.9μL，401μmol)。在室温下搅拌混合物直到反应完成(～10分钟)。真空浓缩所述混合物。添加1M氢氧化锂水溶液(1.6mL，1.6mmol)和EtOH(1.5mL)且在室温下搅拌混合物直到反应完成(～2小时)。使用AcOH中止反应且蒸发溶剂。将残留物溶于AcOH/MeCN中且通过制备型HPLC纯化。合并澄清溶离份且冻干以产生标题化合物(8.3mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C18H17ClN2O6的计算值为393.08；实验值为393.2。
实例14
A.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530001211
使草酸(R)-2-[N-(4-溴苄基)-N′-乙氧基草酰基肼基]-1-乙氧基羰基乙酯乙酯(675mg，1.3mmol)与含于EtOH(4.6mL，78.3mmol)和水(1.2mL，65.2mmol)中的5-氯-2-氟苯基硼酸(273mg，1.6mmol)和K2CO3(541mg，3.9mmol)组合。将所得混合物放置于氮气氛围下且接着添加
Figure BDA0000498843530001213
DPP-Pd(0.28mmol/g装填物；466mg，130μmol)。混合物在120℃下进行微波处理达10分钟，然后过滤且减压蒸发。通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(40mg)。MS m/z[M+H]+针对C18H16ClFN2O6的计算值为411.07；实验值为411.0。
B.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸乙酯
Figure BDA0000498843530001212
在0℃下，将含于DCM(136μL)中的～1M叔丁基草酰氯溶液添加到含于DCM(1.3mL，20mmol)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯(HCl盐；55.0mg，136μmol)的经搅拌溶液中。在室温下搅拌2小时之后，逐滴添加含于DCM溶液(80μL)中的DIPEA(11.9μL，68μmol)。1分钟之后，添加额外的含于DCM(80μL)中的DIPEA(10μL)，且在室温下搅拌混合物过夜。浓缩混合物且通过快速色谱法(4g硅胶，0-100％EtOAc/己烷)纯化所得残留物。合并所需溶离份且浓缩以产生无色油(60mg)。在室温下使用DCM：TFA(0.2mL)的1：1混合物处理一部分所述油(20mg)达20分钟。浓缩所述混合物，将残留物溶于50％水/AcOH(1.5mL)中，过滤，且通过反相制备型HPLC纯化以产生呈TFA盐的标题化合物(10mg)。MS m/z[M+H]+针对C20H20ClFN2O6的计算值为439.10；实验值为439.4。
C.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-异丁氧基草酰基肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530001221
通过将草酰氯(21μL，252μmol)添加到含于乙醚(206μL，2.0mmol)中的异丁醇(21μL，226μmol)的溶液，制备氯-氧代-乙酸异丁酯。在室温下搅拌混合物15分钟且接着蒸发。
随后在0℃下，将氯-氧代-乙酸异丁酯添加到含于DCM(413μL，6.4mmol)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯(23.0mg，50μmol)的溶液中。在0℃下搅拌所得混合物15分钟。然后添加饱和NaHCO3水溶液且分离各层。使用DCM萃取水层。合并DCM层，经MgSO4干燥且浓缩以产生透明黄色液体。将锌(164mg，2.5mmol)添加到含于AcOH(172μL，3.0mmol)中的所述黄色液体的溶液中且在室温下搅拌混合物10分钟。使用AcOH和水过滤所述混合物，真空蒸发溶剂，且通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(9.0mg)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClFN2O6的计算值为467.13；实验值为467.1。
D.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-(2，2-二氟丙氧基草酰基)-肼基]-2-羟基丙 酸
Figure BDA0000498843530001222
通过将草酰氯(21μL，252μmol)添加到含于乙醚(206μL，2.0mmol)中的2,2-二氟丙醇(21.8mg，226μmol)的溶液中，制备2,2-二氟丙基草酰氯。在室温下搅拌混合物15分钟且接着蒸发。
随后在0℃下，将2,2-二氟丙基草酰氯添加到含于DCM(413μL，6.4mmol)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯(23.0mg，50μmol)的溶液中。在0℃下搅拌所得混合物15分钟。然后添加饱和NaHCO3水溶液且分离各层。使用DCM萃取水层。合并DCM层，经MgSO4干燥且浓缩以产生透明黄色液体。将锌(164mg，2.5mmol)添加到含于AcOH(172μL，3.0mmol)中的所述黄色液体的溶液中且在室温下搅拌混合物10分钟。使用AcOH和水过滤所述混合物，真空蒸发溶剂，且通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(1.1mg)。MS m/z[M+H]+针对C21H20ClF3N2O6的计算值为489.10；实验值为489.0。
E.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基-肼基]-2-羟基丙酸5-甲基-2-氧代 -[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲酯
在0℃下，向含于无水DCM(15mL)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸5-甲基-2-氧代-[1，3]二氧杂环戊烯-4-基甲酯(350mg，780μmol)的溶液中添加叔丁基草酰氯(193mg，1.2mmol)和DIPEA(302mg，2.3mmol)。在室温下搅拌所得混合物5小时。接着使用饱和NaCl水溶液(2×30mL)洗涤混合物且使用DCM(3×50mL)萃取。经无水Na2SO4干燥合并的有机层，真空浓缩以产生白色固体(300mg)。LC-MS：523[M-tBu+H]+。
将所述固体(100mg，170μmol)溶于TFA(5mL)和DCM(15mL)中。搅拌所得混合物过夜。真空蒸发混合物，且通过制备型HPLC纯化残留物以产生呈白色固体的标题化合物(20mg)。LC-MS：523.1[M+H]+。1H-NMR：(DMSO-d6)：δ2.14(s，3H)，3.17-3.16(m，2H)，4.11-4.08(m，2H)，4.26(br，1H)，4.98(br，2H)，5.50(br，1H)，7.58-7.36(m，7H)，9.94(s，1H)，13.8(br，1H)。
F.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-乙氧基草酰基肼基]-2-羟基丙酸
Figure BDA0000498843530001241
在0℃下，将乙基草酰氯(12.4μL，111μmol)添加到含于DCM(413μL，6.4mmol)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸2-氧代-2-苯基乙酯(23.0mg，50μmol)的溶液中且在0℃下搅拌所得混合物15分钟。接着添加饱和NaHCO3水溶液(1mL)且分离各层。使用DCM(2×2mL)萃取水层。合并DCM层，经MgSO4干燥且浓缩。将锌(164mg，2.5mmol)添加到含于AcOH(172μL，3.0mmol)中的所述残留物溶液中且在室温下搅拌所得混合物10分钟。过滤所述混合物，且通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(10mg)。MS m/z[M+H]+针对C20H20ClFN2O6的计算值为439.10；实验值为439.1。
G.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯基-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸2,2-二氟丙酯
Figure BDA0000498843530001242
使(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]2-羟基-丙酸(15.0mg，32μmol)与含于DCM(0.2mL，4mmol)中的HOBt(26.0mg，193μmol)和EDC(34μL，0.2mmol)组合。搅拌溶液10分钟且添加2,2-二氟丙醇(24.7mg，257μmol)。在室温下搅拌反应且监测是否完成。2小时之后，通过旋转蒸发浓缩混合物且真空去除溶剂。将所得残留物溶于DCM(124μL，1.9mmol)中。添加TFA(124μL，1.6mmol)，且搅拌所得混合物2小时。真空去除溶剂且通过制备型HPLC纯化残留物以产生标题化合物(2.2mg)。MS m/z[M+H]+针对C21H20ClF3N2O6的计算值为489.10；实验值为489.1。
H.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸异丁酯
在室温下，向(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯(HCl盐；500.0mg，1.3mmol)于DCM(6.0mL，94mmol)中的混合物添加二碳酸二叔丁酯(342μL，1.5mmol)和DIPEA(216μL，1.3mmol)。在室温下搅拌过夜之后，浓缩混合物且通过快速色谱法(12g硅胶，0-50％EtOAc/己烷)纯化残留物。合并所需溶离份且浓缩以产生淡黄色油。将所述油状残留物溶于MeOH(6.0mL，150mmol)和水(1.0mL，56mmol)中，然后在室温下使用LiOH一水合物(104mg，2.5mmol)处理30分钟。浓缩混合物且使用水(2.0mL)和EtOAc(10.0mL)稀释残留物，接着在强力搅拌下，使用1N HCl水溶液酸化直到pH～2.0。使用饱和NaCl水溶液(2×2.0mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤且浓缩以产生呈白色固体的化合物1(528.6mg)。
将化合物1(65.0mg，148μmol)溶于异丁醇(684μL，7.4mmol)中。添加含于1，4-二噁烷(1.2mL，4.9mmol)中的4.0M HCl溶液且在室温下搅拌所得混合物2小时，接着在60℃下另外搅拌2小时，直到反应完成。真空去除溶剂以产生化合物2，其无需进一步纯化即使用。
Figure BDA0000498843530001253
通过将草酰氯(63μL，741μmol)添加到含于乙醚(778μL，7.4mmol)中的叔丁醇(43μL，444μmol)的溶液中，制备叔丁基草酰氯。在室温下搅拌混合物15分钟，然后真空浓缩。将化合物2(58.5mg，148μmol)溶于DCM(570μL，8.9mmol)中且添加叔丁基草酰氯。在室温下搅拌所得混合物30分钟且接着真空浓缩。将残留物溶于1：1DCM：TFA溶液中且在室温下搅拌1小时。真空去除溶剂且通过制备型纯化残留物以产生标题化合物(8.5mg)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClFN2O6的计算值为467.13；实验值为467.0。
I.(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯
Figure BDA0000498843530001261
在氮气下，在0℃下向含于DCM(2.0mL)中的(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸乙酯(200mg，0.5mmol)的溶液中逐滴添加叔丁基草酰氯(165mg，1.0mmol)溶液。搅拌所得混合物5分钟且接着逐滴添加DIPEA(130mg，1.0mmol)。蒸发去除溶剂，且通过柱色谱法(石油醚/EtOAc＝4：1)纯化残留物以产生呈黄色液体的标题化合物(144mg)。LC-MS：495[M+H]+。1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ1.30(t，J＝7.1Hz，3H)，1.56(s，9H)，3.37-3.24(m，2H)，4.27-4.16(m，4H)，4.38-4.30(m，1H)，7.14-7.09(m，1H)，7.30-7.28(m，1H)，7.48-7.41(m，3H)，7.56-7.50(m，2H)，8.05(s，1H)。
J.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基-丙酸乙氧基羰基氧 基甲酯
Figure BDA0000498843530001262
在室温下搅拌(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸(270mg，580μmol)、碳酸氯甲基乙酯(160mg，1.16mmol)、NaI(174mg，1.2mmol)和2,6-二甲基吡啶(620mg，5.8mmol)于DMF(10mL)中的混合物过夜。将混合物倒入水(30mL)中且接着使用EtOAc(3×30mL)萃取混合物。使用饱和NaCl水溶液(2×30mL)洗涤合并的有机层，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。粗化合物1(300mg)无需纯化即使用。LC-MS：569[M+H]+。
Figure BDA0000498843530001271
在室温下，将TFA(1.0mL)逐滴添加到含于DCM(5mL)中的化合物1(300mg，530μmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物2小时，且接着去除溶剂。通过柱色谱法(DCM/MeOH，10：1)纯化残留物以产生呈黄色液体的标题化合物(10mg)。LC-MS：512.9[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD)δ1.28(t，J＝7.3Hz，3H)，3.24-3.28(m，2H)，4.18-4.20(m，4H)，4.41(br，1H)，5.80(dd，J＝11.6，5.8Hz，2H)，7.22(d，J＝10.1Hz，1H)，7.34-7.40(m，1H)，7.48-7.51(m，5H)。
K.丁酸(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酰基氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001272
在室温下搅拌(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸(300mg，430μmol)、丁酸氯甲酯(175mg，1.3mmol)、NaI(192mg，1.3mmol)和2,6-二甲基吡啶(680mg，6.4mmol)于DMF(10mL)中的混合物过夜。将所述混合物倒入水(30mL)中且接着使用EtOAc(3×20mL)萃取所述混合物。分离有机层，使用饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。粗化合物1(300mg)无需纯化即使用。LC-MS：567[M+H]+。
Figure BDA0000498843530001281
在室温下，将TFA(1.0mL)逐滴添加到含于DCM(5mL)中的化合物1(300mg，464μmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物2小时，且接着去除溶剂。通过柱色谱法(DCM/MeOH，10：1)纯化残留物以产生呈黄色油的标题化合物(21mg)。LC-MS：511.1[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD)δ0.94(t，J＝7.4Hz，3H)，1.62(dd，J＝14.8，7.4Hz，2H)，2.33(t，J＝7.3Hz，2H)，3.28(d，J＝6.1Hz，2H)，4.14(q，J＝13.2Hz，2H)，4.38(dd，J＝6.0，4.2Hz，1H)，5.80(br，2H)，7.16-7.26(m，1H)，7.33-7.40(m，1H)，7.47-7.52(m，5H)。
L.(R)-3-[N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)-N′-草酰基肼基]-2-羟基丙酸乙酰氧基甲酯
Figure BDA0000498843530001282
在室温下搅拌(R)-3-[N′-叔丁氧基草酰基-N-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基甲基)肼基]-2-羟基丙酸(300mg，640μmol)、乙酸溴甲酯(196mg，1.3mmol)、NaI(192mg，1.3mmol)和2,6-二甲基吡啶(680mg，6.4mmol)于DMF(10mL)中的混合物过夜。将所述混合物倒入水(30mL)中且接着使用EtOAc(3×20mL)萃取所述混合物。分离有机层，使用饱和NaCl水溶液(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥且真空浓缩。粗化合物1(300mg)无需纯化即使用。LC-MS：539[M+H]+。
在室温下，将TFA(1.0mL)逐滴添加到含于DCM(5mL)中的化合物1(300mg，550μmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物2小时，且接着去除溶剂。通过柱色谱法(DCM/MeOH，10：1)纯化残留物以产生呈黄色油的标题化合物(15mg)。LC-MS：482.9[M+H]+。1H NMR(400MHz，MeOD)δ2.07(s，3H)，3.25-3.28(m，2H)，4.14(q，J＝13.2Hz，2H)，4.38(t，J＝5.9Hz，1H)，5.88-5.71(m，2H)，7.25-7.17(m，1H)，7.41-7.31(m，1H)，7.70-7.46(m，5H)。
实例15
(2R,4S)-5-联苯-4-基-2-羟基-5-甲基-4-(草酰基氨基)己酸
将(2R,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基-5-甲基己酸乙酯(70mg，0.2mmol)溶于DCM(5mL)中且搅拌2分钟，然后添加乙基草酰氯(23μL，0.2mmol)和DIPEA(79mg，0.6mmol)。在室温下搅拌混合物1小时，然后减压蒸发。真空浓缩混合物。将残留物溶于EtOH中，且添加充足当量的10N NaOH使得溶液呈碱性。经1小时监测反应直到最终完成脱除保护基。使用相同体积的AcOH酸化溶液且减压蒸发。然后，使用反相色谱法(10-70％MeCN的梯度)纯化产物以产生标题化合物(37mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C21H23NO6的计算值为386.15；实验值为386.4。
实例16
(2S，4S)-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-5-甲基-4-(草酰基氨基)己酸
Figure BDA0000498843530001301
将(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-5-甲基己酸乙酯(HCl盐；40mg，0.1mmol)溶于DCM和DMF(1mL)中，然后添加乙基草酰氯(17μL，0.2mmol)和DIPEA(53.3μL，0.3mmol)。在室温下搅拌混合物直到反应完成(～5分钟)。使用水中止反应。使用EtOAc萃取产物且浓缩所得有机层。添加1M氢氧化锂水溶液(1.0mL，1.0mmol)和EtOH(2.0mL)且在室温下搅拌混合物直到反应完成(～2小时)。使用AcOH中止反应且通过制备型HPLC纯化产物。合并澄清溶离份且冻干以产生标题化合物(19mg，纯度95％)。MS m/z[M+H]+针对C22H25NO6的计算值为400.17；实验值为400.2。
使用以下初始物质可制备本发明的其它化合物：
(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基-2-甲基-戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530001302
在氮气下，在-5℃下经1小时向含于无水DCM(500mL)中的(R)-3-联苯-4-基-2-叔丁氧基羰基氨基-丙酸(50g，0.1mol)、米氏酸(23.3g，0.2mol)和DMAP(27.8g，0.2mol)的溶液中添加含于无水DCM(200mL)中的DCC(33.3g，0.2mol)的溶液。在-5℃下搅拌混合物8小时，然后冷冻过夜，期间沉淀二环己基脲的微小晶体。过滤之后，使用5％KHSO4(4×200mL)、饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤混合物，在冷冻下使用MgSO4干燥过夜。蒸发所得溶液以产生呈淡黄色固体的粗化合物1(68g)。LC-MS：490[M+Na]，957[2M+Na]。
在氮气下，在-5℃下向含于无水DCM(1L)中的粗化合物1(68g，0.1mol)的溶液中添加AcOH(96.8g，1.6mol)。在-5℃下搅拌混合物0.5小时，然后经1小时以小份添加NaBH4(13.9g，0.4mol)。在-5℃下另外搅拌1小时之后，添加饱和NaCl水溶液(300mL)。使用饱和NaCl水溶液(2×300mL)和水(2×300mL)洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝5：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物2(46g)。LC-MS：476[M+Na]，929[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530001311
在氮气下，在室温下向含于叔丁醇(100mL)中的化合物2(46g，0.1mol)的溶液中添加碘化二甲基亚甲基铵(46.3g，0.3mol)。将混合物加热到65℃且在所述温度下搅拌16小时。过滤之后，浓缩滤液以产生粗产物，其可通过色谱法(己烷：EtOAc＝20：1～10：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物3(18g)。LC-MS：460[M+Na]，897[2M+Na]。
向含于丙酮(430mL)和水(22mL)中的化合物3(18g，44mmol)的溶液中添加作为指示剂的苏丹红。在0℃下将臭氧氛围引入混合物直到苏丹红的红色消失。添加二甲硫(45mL)且在室温下搅拌混合物过夜。接着浓缩混合物且通过色谱法(己烷：EtOAc＝15：1～7：1)纯化残留物以产生呈淡黄色固体的化合物4(9.5g)。LC-MS：434[M+H]，845[2M+H]。
在氮气下，在-70℃下向含于无水THF(120mL)中的化合物4(9.5g，23mmol)的溶液中逐滴添加含于THF(9.2mL，28mmol)中的甲基溴化镁溶液。在-60℃下搅拌混合物3小时且接着使用饱和NH4Cl水溶液(50mL)中止反应。分离有机层且经MgSO4干燥。然后浓缩混合物且通过色谱法(己烷：EtOAc＝10：1～5：1)纯化残留物以产生呈油的化合物5(7.9g)。LC-MS：450[M+H]，877[2M+H]。
在0℃下，向含于无水DCM(300mL)中的化合物5(7.9g，18.4mmol)的溶液中泵入HCl氛围达6小时。然后浓缩混合物且使用无水Et2O洗涤残留物以产生呈白色固体HCl盐的标题化合物(5.8g)。LC-MS：364[M+H]，727[2M+H]。1H NMR(300MHz，DMSO)：δ8.00-7.97(d，4H)，7.67-7.62(m，6H)，7.47-7.28(m，8H)，6.32(s，1H)，6.09(s，1H)，4.13-4.06(m，2H)，3.95-3.78(m，2H)，3.60(s，1H)，3.22-3.08(m，3H)，2.95-2.65(m，2H)，1.99-1.79(m，4H)，1.30-0.87(m，9H)。
(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2，2-二甲基-戊酸乙酯
Figure BDA0000498843530001321
在氮气下，使含于无水甲苯(300mL)中的[(S)-1-联苯-4-基甲基-2-(2，2-二甲基-4,6-二氧代-[1，3]二噁烷-5-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(46g，0.1mol)的溶液回流3小时。蒸发溶剂之后，通过色谱法(己烷：EtOAc＝10：1)纯化残留物以产生呈淡黄色固体的化合物1(27g)。LC-MS：374[M+Na]，725[2M+Na]。
在氮气下，在-78℃下，向含于无水THF(100mL)中的化合物1(6.2g，17.6mmol)的溶液中添加LiHMDS的THF溶液(39mL，39mmol)。在-78℃下搅拌混合物2小时，且接着添加甲基碘(7.5g，53mmol)。在-78℃下搅拌0.5小时之后，将混合物升温到室温且在室温下搅拌3小时。在混合物冷却到-10℃之后，使用饱和NH4Cl水溶液(100mL)中止反应且使用EtOAc(100mL×4)萃取。使用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤且浓缩以产生粗产物，其通过色谱法(己烷：EtOAc＝10：1)进一步纯化以产生呈淡黄色固体的化合物2(5.7g)。LC-MS：402[M+Na]，781[2M+Na]。
Figure BDA0000498843530001322
在氮气下，在-5℃下，向含于丙酮(120mL)中的化合物2(5.7g，15mmol)的溶液中添加1M NaOH(60mL，60mmol)。将混合物升温到室温且在室温下搅拌20小时。浓缩混合物且使用水(250mL)稀释残留物且使用EtOAc(150mL)洗涤。在0℃下，使用6M HCl将水层的pH调整到2，且过滤固体且真空干燥以产生呈白色固体的粗化合物3(5g)。LC-MS：420[M+Na]，817[2M+Na]。
在氮气下，在-30℃下，向含于无水EtOH(300mL)中的粗化合物3(5g，12.7mmol)的溶液中添加SOCl2(13.4mL，190mmol)。将混合物升温到室温且在室温下搅拌20小时。浓缩混合物且使用无水Et2O洗涤残留物以产生呈白色固体HCl盐的标题化合物(3.7g)。LC-MS：326[M+H]，651[2M+H]。1H NMR(300MHz，DMSO)：δ7.86(s，3H)，7.67-7.64(m，4H)，7.49-7.33(m，5H)，4.09-3.97(m，2H)，3.42(m，1H)，2.90-2.80(m，2H)，1.88-1.84(m，2H)，1.17-1.12(m，9H)。
1-((R)-2-氨基-3-联苯-4-基-丙基)-环丙烷甲酸
Figure BDA0000498843530001331
在0℃下，经30分钟向含有含于DCM(100mL)中的BOC-D-4,4′-联苯基丙氨酸(11.3g，33.1mmol，1.0eq.)、4-二甲基氨基吡啶(6.5g，53.0mmol，1.6eq.)、2,2-二甲基-1，3-二噁烷-4,6-二酮(5.3g，36.4mmol，1.1eq.)的烧瓶中添加含于DCM(38.1mL)中的1MDCC。混合物维持在0℃下达6小时且滤出所得沉淀物。使用10％KHSO4水溶液(2×50mL)洗涤滤液，然后干燥。在0℃下使用AcOH(20mL)酸化溶液且经30分钟分3份添加硼氢化钠(3.1g，82.7mmol，2.5eq.)。混合物维持在0℃下达3小时，使用水洗涤且干燥，然后真空浓缩。通过色谱法(0-40％EtOAc/己烷梯度)纯化粗物质。添加含于叔丁基醇(70mL)中的申莫瑟氏(Eschenmoser)盐(15.9g，86.0mmol)且在65℃下搅拌所得混合物过夜。浓缩混合物且添加Et2O(10mL)。然后，使用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和10％KHSO4(10mL)洗涤有机溶液。经Na2SO4干燥有机溶液且浓缩。通过色谱法(0-40％EtOAc/己烷梯度)纯化粗产物以产生化合物1(3.3g)。
Figure BDA0000498843530001332
将于二甲基亚砜(50mL)中的三甲基碘化亚砜(2.0g，9.2mmol，1.0eq.)与NaH(366mg，9.2mmol，1.1eq.)组合且在室温下搅拌15分钟。向其中添加溶于二甲基亚砜(50mL)中的化合物1(3.6g，8.3mmol，1.0eq)。在室温下搅拌所得混合物过夜。使溶液与饱和NaCl水溶液(50mL)混合且使用EtOAc(3×10mL)萃取，且使用饱和NaCl水溶液(2×50mL)洗涤有机层且经无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂之后，通过色谱法(0-40％EtOAc/己烷梯度)纯化粗反应物以产生化合物2：1-((R)-3-联苯-4-基-2-叔丁氧基羰基氨基丙基)-环丙烷甲酸叔丁酯。添加TFA(200μL)和DCM(500μL)且搅拌所得混合物30分钟。真空蒸发溶剂且使用甲苯(2×)共沸以获得标题化合物。
分析1
用于定量对人类和大鼠NEP和人类ACE的抑制剂效能的活体外分析
使用下述活体外分析测定化合物对人类和大鼠脑啡肽酶(EC3.4.24.11；NEP)和人类血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性。
从大鼠肾脏提取NEP活性
从成年斯普拉道来(Sprague Dawley)大鼠肾脏制备大鼠NEP。在冷的磷酸盐缓冲生理食盐水(PBS)中洗涤整个肾脏，并以每克肾脏5mL缓冲液的比例在冰冷的溶解缓冲液(1％Triton X-114、150mM NaCl、50mM三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)pH7.5；波迪尔(Bordier)(1981)生物化学杂志(J.Biol.Chem.)256：1604-1607)中处理。使用polytron手持式组织研磨器使样本在冰上均质化。组织匀浆在3℃下于浮桶式转头中以1000×g离心5分钟。离心块再悬浮于20mL冰冷溶解缓冲液中且在冰上培育30分钟。样本(15mL到20mL)接着层铺于25mL冰冷垫层缓冲液(cushion buffer)(6％w/v蔗糖、50mM pH7.5Tris、150mM NaCl、0.06％Triton X-114)上，加热到37℃后持续3到5分钟，且在室温下于浮桶式转头中以1000×g离心3分钟。吸出上两层，留下含有增浓膜部分的粘稠油状沉淀物。加入甘油到50％的浓度且样本储存在-20℃下。使用BCA检测系统，以牛血清白蛋白(BSA)作为标准物定量蛋白质浓度。
酶抑制分析
重组人类NEP和重组人类ACE是购得的(明尼苏达州明尼阿波利斯的R&D系统公司(R&D Systems，Minneapolis，MN)，目录号分别为1182-ZN和929-ZN)。荧光肽底物Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH(梅代罗斯(Medeiros)等人(1997)巴西医学和生物学研究杂志(Braz.J.Med.Biol.Res.)30：1157-62；加利福尼亚州圣何塞的安斯派克公司(Anaspec，San Jose，CA))和Abz-Phe-Arg-Lys(Dnp)-Pro-OH(阿劳约(Araujo)等人(2000)生物化学(Biochemistry)39：8519-8525；加利福尼亚州托兰斯的巴亨公司(Bachem，Torrance，CA))分别用于NEP和ACE分析中。
在37℃下，使用含于分析缓冲液(NEP：50mM HEPES，pH7.5，100mM NaCl，0.01％聚乙二醇脱水山梨糖醇单月桂酸酯(Tween-20)，10μM ZnSO4；ACE：50mM HEPES，pH7.5，100mM NaCl，0.01％Tween-20，1μM ZnSO4)中的10μM浓度的荧光肽底物，在384孔白色不透明板中进行分析。各别酶的使用浓度应使得在37℃下20分钟后定量1μM底物的蛋白质水解作用。
在10μM到20pM的浓度范围内分析测试化合物。将测试化合物添加到酶中且在37℃培育30分钟，然后通过添加底物引发反应。在37℃下培育20分钟之后，通过添加冰乙酸到3.6％(v/v)的最终浓度而终止反应。
在将激发波长和发射波长分别设为320nm和405nm的荧光计上读取板。通过数据的非线性回归，使用等式(GraphPad软件公司，圣迭戈(San Diego)，加利福尼亚(CA))获得抑制常数：
v＝v0/[1+(I/K′)]
其中v为反应速率，v0为未受抑制的反应速率，I为抑制剂浓度且K′为表观抑制常数。
在所述分析中测试本发明化合物且发现其具有如下在人类NEP中的pKi值。一般来说，前药化合物在所述活体外分析中不抑制酶，或前药因预期不具有活性而未测试(n.d.)。
Figure BDA0000498843530001351
Figure BDA0000498843530001361
n.d.＝未测定
分析2
在麻醉大鼠中的ACE和NEP活性的药效学(PD)分析
用120mg/kg(腹膜内)仲丁硫巴比妥(inactin)使雄性斯普拉道来正常血压大鼠麻醉。一旦麻醉，即插入颈静脉、颈动脉(PE50管)和膀胱(扩口PE50管)导管且进行气管切开术(特富龙针(Teflon Needle)，第14号尺寸)以促进自发呼吸。接着使动物稳定60分钟的时期且期间用5mL/kg/h盐水(0.9％)保持连续输注，从而保持其吸入水分并确保产生尿。在整个实验期间通过使用加热垫来维持体温。在60分钟稳定期结束时，相隔15分钟静脉内(i.v.)给予动物两剂AngI(1.0μg/kg，针对ACE抑制剂活性)。在第二剂AngI后15分钟，用媒剂或测试化合物治疗动物。5分钟后，动物另外以快速静脉内注射心房利尿钠肽(ANP；30μg/kg)加以治疗。在ANP治疗之后即刻开始收集尿(置入预称重的eppendorf管中)且持续60分钟。在尿收集30分钟和60分钟时，动物用AngI再激发。使用Notocord系统(密歇根州卡拉马祖(Kalamazoo，MI))进行血压测量。尿样本在-20℃下冷冻直到用于cGMP分析。通过使用商业化试剂盒(密歇根州安阿伯的分析设计公司(Assay Designs，Ann Arbor，Michigan)，目录号901-013)进行酶免疫分析来测定尿cGMP浓度。以重量分析方式测定尿体积。尿cGMP输出量计算为尿输出量与尿cGMP浓度的乘积。ACE抑制是通过定量对AngI的升压反应的抑制％加以评估。NEP抑制是通过定量ANP诱导的尿cGMP输出量升高的增强加以评估。
分析3
在有意识的高血压SHR模型中的抗高血压效果的活体内评估
自发高血压大鼠(SHR，14到20周龄)一送达测试地点即适应环境最少48小时，其中可自由获取食物和水。为了记录血压，用手术将小型啮齿动物无线电传输器(遥测单元；DSI型号TA11PA-C40或C50-PXT，美国数据科学公司(Data Science Inc.，USA))植入这些动物中。将与传输器连接的导管尖端插入位于髂总动脉分叉处上方的下行主动脉(descending aorta)中且用组织粘着剂适当固定。传输器保持在腹膜内且固定于腹壁上，同时用不可吸收缝合线闭合腹部切口。外部皮肤用缝合线和缝合钉闭合。以适当术后照护使动物恢复。在实验当天，笼中动物放置在遥测接收器单元的上方以适应测试环境且进行基线记录。在进行至少2小时基线测量之后，动物接着用媒剂或测试化合物给药且随后为给药后24小时血压测量。使用Notocord软件(密歇根州卡拉马祖)在研究期间连续记录数据且储存为电子数字信号。测量的参数为血压(收缩压、舒张压和平均动脉压)和心率。
分析4
在有意识的高血压DOCA-盐大鼠模型中的抗高血压效果的活体内评估
CD大鼠(雄性，成年，200-300g，查尔斯河实验室(Charles River Laboratory)，美国)一送达测试地点即适应环境最少48小时，然后将其放置在高盐膳食上。在高盐膳食(8％于食物中或1％NaCl于饮用水中)开始之后1周，皮下植入乙酸脱氧皮质酮(DOCA)丸粒(100mg，90天释放时间，佛罗里达州萨拉索塔的美国创新研究公司(Innovative Researchof America，Sarasota，FL))且进行单侧肾切除术。此时，还用手术将小型啮齿动物无线电传输器植入动物中以测量血压(详见分析3)。以适当术后照护使动物恢复。研究设计、数据记录和测量的参数类似于对于分析3所述者。
分析5
在有意识的高血压Dahl/SS大鼠模型中的抗高血压效果的活体内评估
雄性Dahl盐敏感性大鼠(Dahl/SS，6到7周龄，来自美国查尔斯河实验室)一送达测试地点即适应环境至少48小时，随后将其放置在8％NaCl高盐膳食(TD.92012，美国哈兰(Harlan，USA))上，接着用手术将小型啮齿动物无线电传输器植入以测量血压(详见分析3)。以适当术后照护使动物恢复。在高盐膳食开始之后约4到5周，预期这些动物变得具有高血压。一旦确认高血压水平，这些动物即用于研究，同时继续高盐膳食以维持其高血压水平。研究设计、数据记录和测量的参数类似于分析3中所述者。
对照实例1
(2R,4S)-5-联苯-4-基-2-甲基-4-(草酰基-氨基)-戊酸(对照化合物A；R＝-C(O)-COOH)
使(2R,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-甲基-戊酸乙酯(HCl盐；527mg，0.2mmol)和乙基草酰氯(18.4μL，1.1eq)与含于DMF(0.3mL)/DCM(0.3mL)中的DIPEA(52.2μL，0.3mmol)组合。在室温下搅拌混合物直到反应完成。去除溶剂且将残留物溶于EtOH(750μL)和1M NaOH水溶液(750μL)中，且在室温下搅拌过夜。去除溶剂且通过制备型HPLC纯化残留物以产生对照化合物A(11.2mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C20H21NO5的计算值为356.14；实验值为356.2。
(2R,4S)-5-联苯-4-基-4-(3-羧基-丙酰基氨基)-2-甲基-戊酸(对照化合物B； R＝-C(O)-(CH 2 ) 2 -COOH)
使(2R,4S)-5-联苯-4-基-4-(3-羧基-丙酰基氨基)-2-甲基-戊酸乙酯(Na盐；400mg，923μmol)与EtOH(7mL，0.1mol)混合，然后与THF(6mL，0.1mol)混合。接着添加1M NaOH水溶液(2.8mL，2.8mmol)且在室温下搅拌所得混合物4小时且随后浓缩。通过制备型HPLC(10-60％MeCN：水w/0.5％TFA)纯化产物以产生对照化合物B(150mg，97％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C22H25NO5的计算值为384.17；实验值为384.6。
如分析1中所述来测试对照化合物A和B且发现其具有如下在人类NEP中的pKi值：
化合物 R pKi
对照化合物A -C(O)-COOH 8.2
对照化合物B -C(O)-(CH2)2-COOH 8.2
数据显示对照化合物A和B具有抑制NEP的相同的pKi值。
对照实例2
(R)-5-联苯-4-基-4-(2-羧基乙酰基氨基)-2-羟基戊酸(对照化合物C；R＝-C(O)-CH 2 -COOH)
使(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基戊酸乙酯(HCl盐；60.3mg，0.2mmol)和甲基丙二酰氯(21μL，0.2mmol)与含于DMF(5mL)中的DIPEA(84μL，0.5mmol)组合。在室温下搅拌混合物直到反应完成(1小时)。去除溶剂并将残留物溶于MeOH(3mL)和10NNaOH(250μL)中，且在60℃下搅拌直到反应完成(1小时)。添加冰乙酸(250μL)且减压蒸发产物且通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物C(6.3mg，98％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C20H21NO6的计算值为372.14；实验值为372.2。
(R)-5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-羟基戊酸(对照化合物D； R＝-C(O)-(CH 2 ) 2 -COOH)
使(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基戊酸乙酯(HCl盐；60.3mg，0.2mmol)和3-(甲氧甲酰基)丙酰氯(24μL，0.2mmol)与含于DMF(5mL)中的DIPEA(84μL，0.5mmol)组合。在室温下搅拌混合物直到反应完成(1小时)。去除溶剂且将残留物溶于MeOH(3mL)和10N NaOH(250μL)中，且在60℃下搅拌直到反应完成(1小时)。添加冰乙酸(250μL)且减压蒸发产物且通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物D(8.0mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C21H23NO6的计算值为386.15；实验值为386.2。
(R)-5-联苯-4-基-4-(4-羧基丁酰基氨基)-2-羟基戊酸(对照化合物E； R＝-C(O)-(CH 2 ) 3 -COOH)
使(R)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基戊酸乙酯(HCl盐；60.3mg，0.2mmol)和5-氯-5-氧代戊酸甲酯(31.7mg，0.2mmol)与含于DMF(5mL)中的DIPEA(84μL，0.5mmol)组合。在室温下搅拌混合物直到反应完成(1小时)。去除溶剂且将残留物溶于MeOH(3mL)和10N NaOH(250μL)中，且在60℃下搅拌直到反应完成(1小时)。添加冰乙酸(250μL)且减压蒸发产物且通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物E(8.7mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C22H25NO6的计算值为400.17；实验值为400.2。
如分析1中所述来测试实例1的化合物和对照化合物C、D和E且发现其具有如下在人类NEP中的pKi值：
化合物 R pKi
实例1 -C(O)-COOH 7.9
对照化合物C -C(O)-CH2-COOH 6.7
对照化合物D -C(O)-(CH2)2-COOH 7.4
对照化合物E -C(O)-(CH2)3-COOH 7.3
数据显示实例1的化合物具有比对照化合物C、D和E高的对NEP的效能。
对照实例3
Figure BDA0000498843530001401
(2S，4S)-5-联苯-4-基-4-(2-羧基-乙酰基氨基)-2-羟基甲基戊酸(对照化合物F； R＝-C(O)-CH 2 -COOH)
将(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-戊酸(HCl盐；5mg，10μmol)溶于1MNaOH水溶液(119μL，119μmol)中且缓慢添加到甲基丙二酰氯(1.9μL，18μmol)和MeCN(0.5mL，10mmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物直到反应完成(过夜)且通过制备型HPLC纯化产物以产生对照化合物F(1.0mg，95％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C21H23NO6的计算值为386.15；实验值为386.1。
(2S,4S)-5-联苯-4-基-4-(3-羧基-丙酰基氨基)-2-羟基甲基戊酸(对照化合物G； R＝-C(O)-(CH 2 ) 2 -COOH)
将(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-戊酸(HCl盐；5mg，10μmol)溶于1MNaOH水溶液(119μL，119μmol)中且缓慢添加到3-(甲氧甲酰基)丙酰氯(2.2μL，18μmol)和MeCN(0.5mL，10mmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物直到反应完成(过夜)且通过制备型HPLC纯化产物以产生对照化合物G(3.4mg，95％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C22H25NO6的计算值为400.17；实验值为400.3。
(2S，4S)-5-联苯-4-基-4-(4-羧基-丁酰基氨基)-2-羟基甲基戊酸(对照化合物H； R＝-C(O)-(CH 2 ) 3 -COOH)
将(2S,4S)-4-氨基-5-联苯-4-基-2-羟基甲基-戊酸(HCl盐；5mg，10μmol)溶于1MNaOH水溶液(119μL，119μmol)中且缓慢添加到5-氯-5-氧代戊酸甲酯(2.5μL，18μmol)和MeCN(0.5mL，10mmol)的溶液中。在室温下搅拌所得混合物直到反应完成(过夜)且通过制备型HPLC纯化产物以产生对照化合物H(3.0mg，95％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C23H27NO6的计算值为414.18；实验值为414.7。
如分析1中所述来测试实例5A的化合物且对照化合物F、G和H且发现其具有如下在人类NEP中的pKi值：
化合物 R pKi
实例5A -C(O)-COOH 9.2
对照化合物F -C(O)-CH2-COOH 8.2
对照化合物G -C(O)-(CH2)2-COOH 9
对照化合物H -C(O)-(CH2)3-COOH 8.6
数据显示实例5A的化合物具有比对照化合物F、G和H高的对NEP的效能。
对照实例4
Figure BDA0000498843530001411
(2R,4R)-4-(2-羧基-乙酰基氨基)-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(对照化合物I； R＝-C(O)-CH 2 -COOH)
将甲基丙二酰氯(18.5μL，172μmol)添加到含于DCM(1.5mL，23.4mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(50.0mg，144μmol)和DIPEA(75.1μL，431μmol)的溶液中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。接着浓缩混合物以产生黄色液体。将1M LiOH水溶液(719μL，719μmol)逐滴添加到油中，且在60℃下搅拌混合物1小时。真空浓缩混合物且将所得残留物溶于AcOH(1.0mL)中，通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物I(2.0mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C20H20ClNO6的计算值为406.10；实验值为406.1。
(2R，4R)-4-(3-羧基-丙酰基氨基)-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(对照化合物J； R＝-C(O)-(CH 2 ) 2 -COOH)
将3-(甲氧甲酰基)丙酰氯(21.2μL，172μmol)添加到含于DCM(1.5mL，23.4mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(50.0mg，144μmol)和DIPEA(75.1μL，431μmol)的溶液中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。接着浓缩混合物以产生黄色液体。将1M LiOH水溶液(719μL，719μmol)逐滴添加到油中，且在60℃下搅拌混合物1小时。真空浓缩混合物且将所得残留物溶于AcOH(1.0mL)中，通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物J(31.1mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C21H22ClNO6的计算值为420.11；实验值为420.2。
(2R，4R)-4-(4-羧基-丁酰基氨基)-5-(3′-氯-联苯-4-基)-2-羟基-戊酸(对照化合物K； R＝-C(O)-(CH 2 ) 3 -COOH)
将5-氯-5-氧代戊酸甲酯(23.8μL，172μmol)添加到含于DCM(1.5mL，23.4mmol)中的(2R,4R)-4-氨基-5-(3′-氯联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(50.0mg，144μmol)和DIPEA(75.1μL，431μmol)的溶液中且在室温下搅拌所得混合物30分钟。接着浓缩混合物以产生黄色液体。将1M LiOH水溶液(719μL，719μmol)逐滴添加到油中，且在60℃下搅拌混合物1小时。真空浓缩混合物并将所得残留物溶于AcOH(1.0mL)中，通过制备型HPLC纯化以产生对照化合物K(29.2mg，100％纯度)。MS m/z[M+H]+针对C22H24ClNO6的计算值为434.13；实验值为434.2。
如分析1中所述来测试实例2A的化合物和对照化合物I、J和K且发现其具有如下在人类NEP中的pKi值：
化合物 R pKi
实例2A -C(O)-COOH 9.7
对照化合物I -C(O)-CH2-COOH 8.4
对照化合物J -C(O)-(CH2)2-COOH 9.5
对照化合物K -C(O)-(CH2)3-COOH 9.3
数据显示实例2A的化合物具有比对照化合物I、J和K高的对NEP的效能。
尽管本发明已经参考其具体方面或实施例加以描述，但是所属领域的技术人员应理解在不脱离本发明的真正精神和范围下可做出各种改变或可替换等效物。另外，在可适用专利法令和法规允许的范围内，本文中引用的所有公开案、专利和专利申请案都以引用的方式全文并入本文，所述引用的程度就如同每一文献已个别地以引用的方式并入本文中一般。

Claims (34)

1.一种式I化合物，
Figure FDA0000498843520000011
其中：
R1选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure FDA0000498843520000012
R10选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR11R12、-CH(R15)-NH2、-CH(R15)-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R11和R12独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R11和R12合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R13选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR11R12；且R14为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R15为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；
R2为-OR21或-CH2OR21；且R3为H或-CH3；其中R21为H、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-CH(R22)-NH2、-C(O)-CH(R22)-NHC(O)O-C1-6烷基或-P(O)(OR23)2；R22为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；R23为H、-C1-6烷基或苯基；或
R2与R1合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-，且R3选自H和-CH3，其中R15和R16独立地选自H、-C1-6烷基和-O-C3-7环烷基，或R15和R16合起来形成＝O；或
R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-；或
R2和R3均为-CH3；
Z选自-CH-和-N-；
R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40、-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure FDA0000498843520000021
R40选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR41R42、-CH(R45)-NH2、-CH(R45)-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R41和R42独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R41和R42合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R43选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR41R42；且R44为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R45为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；
a为0或1；R5选自卤基、-CH3、-CF3和-CN；
b为0或1到3的整数；每一R6独立地选自卤基、-OH、-CH3、-OCH3、-CN和-CF3；
其中R1和R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；以及
其中联苯基上的亚甲基连接基团任选地经1或2个-C1-6烷基或环丙基取代；
或其医药上可接受的盐。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为H。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R1选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure FDA0000498843520000022
或R1与R2合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure FDA0000498843520000031
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中R1选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)6CH3、-CH2CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3和
Figure FDA0000498843520000032
其中R14为-CH3。
6.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的化合物，其中R2为-OR21，R3为H且R21为H。
7.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的化合物，其中R2为-OR21，R3为-CH3且R21为H。
8.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的化合物，其中R2为-CH2OR21，R3为H且R21为H。
9.根据权利要求1到5中任一权利要求所述的化合物，其中R2为-CH2OR21，R3为-CH3且R21为H。
10.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物，其中R4为H。
11.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物，其中R4选自-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R40、-C1-6亚烷基-NR41R42、-C1-6亚烷基-C(O)R43、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure FDA0000498843520000041
12.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物，其中R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
Figure FDA0000498843520000042
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代。
13.根据权利要求12所述的化合物，其中R4选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-(CH2)3-O-CH2CH3、-(CH2)2-O-苯基、-(CH2)2OCH3和
Figure FDA0000498843520000043
其中R44为-CH3。
14.根据权利要求1到13中任一权利要求所述的化合物，其中a为0或a为1且R5为卤基。
15.根据权利要求1到14中任一权利要求所述的化合物，其中b为0或b为1且R6为卤基，或b为2且每一R6独立地选自卤基和-CH3。
16.根据权利要求1所述的化合物，其中：
a为0且b为0；或
a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或
a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；或
a为1，R5为3-氯且b为0；或
a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或
a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯。
17.根据权利要求6所述的化合物，其中R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure FDA0000498843520000051
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
Z选自-CH-和-N-；
R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为卤基；或a为0，b为2且一个R6为卤基且另一个R6为卤基或-CH3；或a为1，R5为卤基且b为0；或a为1，R5为卤基，b为1且R6为卤基；或a为1，R5为卤基，b为2且每一R6为卤基；以及
其中所述联苯基上的所述亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中R1选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-(CH2)6CH3、-CH2CF3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-CH2CF2CF3、-CH2OC(O)CH3、-CH2OC(O)CH2CH3、-CH2OC(O)(CH2)2CH3、-CH2OC(O)OCH2CH3、-CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3和
Figure FDA0000498843520000061
其中R14为-CH3；
R4选自H、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-(CH2)3CH3、-C(CH3)3、-(CH2)2CF3、-CH2CF2CH3、-(CH2)3-O-CH2CH3、-(CH2)2-O-苯基、-(CH2)2OCH3和
Figure FDA0000498843520000062
其中R44为-CH3；以及
a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；或a为1，R5为3-氯且b为0；或a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯。
19.根据权利要求7所述的化合物，其中R1为H或-C1-8烷基；Z为-N-；R4为H或-C1-8烷基；且a和b为0。
20.根据权利要求19所述的化合物，其中R1和R4为H。
21.根据权利要求8所述的化合物，其中R1为H或-C1-8烷基；Z为-CH-；R4为H或-C1-8烷基；a为0或a为1且R5为卤基；b为0或b为1或2且R6为卤基；且其中所述联苯基上的所述亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中R1为H、-CH2CH3或-(CH2)3CH3；R4为H；a为0或a为1且R5为3-氯；b为0或b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟。
23.根据权利要求9所述的化合物，其中R1为H或-C1-8烷基；Z为-CH-；R4为H或-C1-8烷基；a为0；且b为0，或b为1且R6为卤基。
24.根据权利要求23所述的化合物，其中R1为H或-CH2CH3；R4为H或-CH2CH(CH3)2；且b为0，或b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟。
25.根据权利要求1所述的化合物，其中R1选自H、-C1-8烷基、-C1-6亚烷基-OC(O)R10和
Figure FDA0000498843520000071
其中R10为-C1-6烷基、-O-C1-6烷基或-CH[R15]-NHC(O)O-C1-6烷基；R14为-C1-6烷基；R15为-CH(CH3)2；且R1中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
R4选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-O-C6-10芳基、-[(CH2)2O]1-3CH3和
Figure FDA0000498843520000072
其中R44为-C1-6烷基；且R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；
a为0且b为0；或a为0，b为1且R6为2′-氟、3′-氟、3′-氯或4′-氟；或a为0，b为2且R6为2′-氟，5′-氯、或2′-甲基，5′-氯、或2′，5′-二氯；或a为1，R5为3-氯且b为0；或a为1，R5为3-氯，b为1且R6为3′-氯；或a为1，R5为3-氯，b为2且R6为2′-氟，5′-氯；以及
其中所述联苯基上的所述亚甲基连接基团任选地经2个-CH3基团取代。
26.根据权利要求25所述的化合物，其中R2为-OR21或-CH2OR21；且R3为H或-CH3；其中R21为H。
27.一种制备根据权利要求1到26中任一权利要求所述的化合物的方法，其包括使式1化合物与式2化合物偶联以产生式I化合物的步骤：
Figure FDA0000498843520000081
其中R1到R6、a和b如权利要求1中所定义，且P选自H和选自叔丁氧基羰基、三苯甲基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、甲酰基、三甲基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基的氨基保护基；且其中当P为氨基保护基时，所述方法进一步包括脱除所述式1化合物的保护基。
28.一种式1化合物，
Figure FDA0000498843520000082
其中：
R1选自H、-C1-8烷基、-C1-3亚烷基-C6-10芳基、-C1-3亚烷基-C1-9杂芳基、-C3-7环烷基、-[(CH2)2O]1-3CH3、-C1-6亚烷基-OC(O)R10、-C1-6亚烷基-NR11R12、-C1-6亚烷基-C(O)R13、-C0-6亚烷基吗啉基、-C1-6亚烷基-SO2-C1-6烷基、
Figure FDA0000498843520000083
R10选自-C1-6烷基、-O-C1-6烷基、-C3-7环烷基、-O-C3-7环烷基、苯基、-O-苯基、-NR11R12、-CH(R15)-NH2、-CH(R15)-NHC(O)O-C1-6烷基和-CH(NH2)CH2COOCH3；且R11和R12独立地选自H、-C1-6烷基和苄基；或R11和R12合起来为-(CH2)3-6-、-C(O)-(CH2)3-或-(CH2)2O(CH2)2-；R13选自-O-C1-6烷基、-O-苄基和-NR11R12；且R14为-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-C6-10芳基；R15为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；
R2为-OR21或-CH2OR21；且R3为H或-CH3；其中R21为H、-C(O)-C1-6烷基、-C(O)-CH(R22)-NH2、-C(O)-CH(R22)-NHC(O)O-C1-6烷基或-P(O)(OR23)2；R22为H、-CH3、-CH(CH3)2、苯基或苄基；R23为H、-C1-6烷基或苯基；或
R2与R1合起来形成-OCR15R16-或-CH2O-CR15R16-，且R3选自H和-CH3，其中R15和R16独立地选自H、-C1-6烷基和-O-C3-7环烷基，或R15和R16合起来形成＝O；或
R2与R3合起来形成-CH2-O-CH2-或-CH2-CH2-；或
R2和R3均为-CH3；
Z选自-CH-和-N-；
a为0或1；R5选自卤基、-CH3、-CF3和-CN；
b为0或1到3的整数；每一R6独立地选自卤基、-OH、-CH3、-OCH3、-CN和-CF3；
其中R1和R4中的每一烷基任选地经1到8个氟原子取代；且其中所述联苯基上的所述亚甲基连接基团任选地经1或2个-C1-6烷基或环丙基取代；以及
P为H或选自叔丁氧基羰基、三苯甲基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、甲酰基、三甲基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基的氨基保护基；
或其盐。
29.一种医药组合物，其包含根据权利要求1到26中任一权利要求所述的化合物和医药上可接受的载剂。
30.根据权利要求29所述的医药组合物，其进一步包含选自以下各项的治疗剂：腺苷受体拮抗剂、α-肾上腺素能受体拮抗剂、β1-肾上腺素能受体拮抗剂、β2-肾上腺素能受体激动剂、双重作用性β-肾上腺素能受体拮抗剂/α1-受体拮抗剂、晚期糖基化终产物裂解剂、醛固酮拮抗剂、醛固酮合成酶抑制剂、氨基肽酶N抑制剂、雄激素、血管紧张素转化酶抑制剂和双重作用性血管紧张素转化酶/脑啡肽酶抑制剂、血管紧张素转化酶2活化剂和刺激剂、血管紧张素II疫苗、抗凝血剂、抗糖尿病药剂、止泻药剂、抗青光眼药剂、抗脂质药剂、镇痛药剂、抗血栓药剂、AT1受体拮抗剂和双重作用性AT1受体拮抗剂/脑啡肽酶抑制剂以及多功能血管紧张素受体阻断剂、缓激肽受体拮抗剂、钙通道阻断剂、糜蛋白酶抑制剂、地高辛、利尿剂、多巴胺激动剂、内皮素转化酶抑制剂、内皮素受体拮抗剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、雌激素、雌激素受体激动剂和/或拮抗剂、单胺再摄取抑制剂、肌肉松弛剂、利尿钠肽和其类似物、利尿钠肽清除受体拮抗剂、脑啡肽酶抑制剂、一氧化氮供体、非类固醇消炎药剂、N-甲基d-天冬氨酸受体拮抗剂、阿片样物质受体激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、前列腺素类似物、前列腺素受体激动剂、肾素抑制剂、选择性血清素再摄取抑制剂、钠通道阻断剂、可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂、三环抗抑郁剂、血管加压素受体拮抗剂和其组合。
31.根据权利要求30所述的医药组合物，其中所述治疗剂为AT1受体拮抗剂。
32.根据权利要求1到26中任一权利要求所述的化合物，其用于疗法中。
33.根据权利要求32所述的化合物，其用于治疗高血压、心力衰竭或肾病。
34.一种根据权利要求1到26中任一权利要求所述的化合物的用途，其用于制造用以治疗高血压、心力衰竭或肾病的药物。
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