MX2014005339A - Inhibidores de neprilisina. - Google Patents

Inhibidores de neprilisina.

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Abstract

Compuestos de la fórmula (ver Fórmula) en donde R1-R6, a, b y Z tienen los valores que se definen en la memoria descriptiva, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Estos compuestos tienen actividad de inhibición de la neprilisina. Composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos; métodos para usar dichos compuestos; y procesos e intermediarios para preparar dichos compuestos.

Description

INHIBIDORES DE NEPRILISINA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos novedosos que tienen actividad inhibidora de la neprilisina. La invención también se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, con procesos y con intermediarios para preparar dichos compuestos y con métodos para usar dichos compuestos en el tratamiento de enfermedades tales como hipertensión, insuficiencia cardiaca, hipertensión pulmonar e insuficiencia renal.
ESTADO DE LA TÉCNICA La neprilisina (endopeptidasa neutra, EC 3.4.24.11) (NEP) , es una metalopeptidasa de Zn2+ unida a la membrana endotelial observada en muchos órganos y tejidos, incluyendo cerebro, ríñones, pulmones, tracto gastrointestinal, corazón y la vasculatura periférica. La NEP degrada e inactiva una cantidad de péptidos endógenos, tales como encefalinas, bradiquinina circulante, péptidos de angiotensina, y péptidos natriuréticos , de los cuales el último diferentes efectos que incluyen, por ejemplo, vasodilatación y natriuresis/diuresis , así como inhibición de la hipertrofia cardíaca y fibrosis ventricular. Por lo tanto, NEP cumple un rol importante en la homeostasis de la presión sanguínea y la salud cardiovascular .
Los inhibidores de NEP, tales como tiorfano, candoxatril, y candoxatrilat , han sido estudiados como potenciales terapéuticos. Los compuestos que inhiben NEP y enzima convertidora de angiotensina-I (ACE) también son conodicos, e incluyen omapatrilat, gempatrilat y sampatrilat. Referidos como inhibidores de vasopeptidasa, esta última clase de compuestos se describe en Robl et al. (1999) Exp. Opin. Ther. Patents 9(12): 1665-1677.
Ksander et al., (1995) J. Med. Chem. , 38: 1689-1700 describen inhibidores del dipéptido de ácido dicarboxílico NEP de la fórmula: El compuesto 21a, que tiene un sustituyente de ácido succinico, es el compuesto más activo, con un valor de IC50 de 5 nM. Los autores observaron que "el ácido succinico en el sitio P2 ' parece ser óptimo dado de la extensión de la cadena de ácido carboxilico en una (21e) y dos (21f) unidades metileno disminuía la actividad en 18 y 65 veces". Los autores notaron además que "la disminución de la longitud de la cadena en un metileno (21g) también mostró una disminución de 18 veces en la actividad", (página 1692, 2a columna).
SÍNTESIS DE LA INVENCIÓN La presente invención provee compuestos novedosos para los cuales se ha demostrado que poseen actividad inhibidora de la enzima neprilisina (NEP) . Por lo tanto, se espera que los compuestos de la invención sean de utilidad y ventajosos como agentes terapéuticos para el tratamiento de condiciones tales como hipertensión e insuficiencia cardíaca.
Un aspecto de la invención se relaciona con un compuesto de fórmula I : donde : R1 se selecciona entre H, -Ci_8alquilo, -Ci_3alquilen-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen-Ci-9heteroarilo, -C3-7CÍcloalquilo, -[ (CH2)20] 1-3CH3, -C^alquilen-OCÍOR10, -Ci-6alquilen-NRnR12, -Ci-6alquilen-C (0) R13, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-S02-Ci-6alquilo, R se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, -C3-7cicloalquilo, -0-C3-7cicloalquilo, fenilo, -0-fenilo, -NRnR12, -CH (R15) -NH2, -CH (R15) -NHC (0) 0-d-6alquilo , y -CH (NH2) CH2COOCH3; y R11 y R12 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R11 y R12 se toman juntos como -(CH2)3_6-, -C (0) - (CH2) 3-, o - (CH2) 20 (CH2) 2-; R13 se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, -0-bencilo, y -NR1:LR12; y R14 es -Ci-6alquilo o -Co-6alquilen-C6-ioarilo R15 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; R2 es -OR21 o -CH2OR21; y R3 es H o -CH3; donde R21 es H, -C(O) -Ci-6alquilo, -C (O) -CH (R22) -NH2, -C (0) -CH (R22) -NHC (O) 0-Ci-6alquilo, o -P(0) (OR23)2; R22 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; R23 es H, -Ci-ealquilo, o fenilo; o R2 se toma junto con R1 para formar -OCR15R16- o -CH20-CR15R16-, y R3 se selecciona entre H y -CH3, donde R15 y R16 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y -0-C3-7cicloalquilo, o R15 y R16 se toman juntos para formar =0; o R2 se toma junto con R3 para formar -CH2-0-CH2- o -CH2-CH2-; o R2 y R3 son. ambos -CH3; Z se selecciona entre -CH- y -N-; R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo; -Ci-3alquilen-0-Ci_8alquilo, -Ci-3alquilen-C6-ioa ilo, -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen-Ci-9heteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci_6alquilen-OC (0) R40, -Ci_6alquilen-NR41R42, -Ci-6alquilen-C (0) R43, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-S02-Ci-6alquilo, R se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci_6alquilo, -C3_7cicloalquilo, -0-C3_7cicloalquilo, fenilo, -O-fenilo, -NR41R42, -CH (R45) -NH2, -CH (R45) -NHC (O) 0-Ci-5alquilo, y -CH (NH2) CH2COOCH3; y R41 y R42 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R41 y R42 se toman juntos como -(CH2)3_6-, -C (0) - (CH2) 3- o - ( CH2 ) 20 ( CH2 ) 2-R43 se selecciona entre -0-Ci_6alquilo, -0-bencilo, y -NR41R42; y R44 es -Ci-6alquilo o -C0-6alquilen-C6-ioarilo; R45 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; a es 0 o 1; R5 se selecciona entre halo, -CH3, -CF3, y -CN; b es 0 o un entero entre 1 y 3; cada R6 se selecciona en forma independiente entre halo, -OH, -CH3, -0CH3, -CN, y -CF3; donde cada grupo alquilo en R1 y R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos -Ci~6alquilo o ciclopropilo ; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Otro aspecto de la invención se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de acuerdo con la invención. Dichas composiciones pueden contener opcionalmente otros agentes terapéuticos. Por lo tanto, en aún otro aspecto de la invención, una composición farmacéutica comprende un compuesto de la invención como un primer agente terapéutico, un agente terapéutico secundario o más de uno y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto de la invención se relaciona con una combinación de agentes activos, que comprende un compuesto de la invención y un segundo agente terapéutico. El compuesto de la invención se puede formular junto o por separado de uno o más agentes adicionales. Cuando se fórmula por separado, se puede incluir un vehículo farmacéuticamente aceptable con el o los agentes adicionales. Por lo tanto, aún otro aspecto de la invención se relaciona con una combinación de composiciones farmacéuticas, en donde la combinación comprende: una primera composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención y un primer vehículo farmacéuticamente aceptable; y una segunda composición farmacéutica que comprende un segundo agente terapéutico y un segundo vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra forma de realización, la invención se relaciona con un conjunto de elementos que contiene dichas composiciones farmacéuticas, por ejemplo en donde la primera y la segunda composición farmacéuticas comprenden composiciones farmacéuticas separadas.
Los compuestos de la invención poseen actividad inhibidora de la enzima NEP, y por lo tanto se espera que sean útiles como agentes terapéuticos para tratar pacientes que sufren de una enfermedad o trastorno que se trata por inhibición de la enzima NEP o por aumento de los niveles de sus sustratos peptidicos. Por consiguiente, un aspecto de la invención se relaciona con un método para tratar pacientes que sufren de una enfermedad o trastorno que es tratado por medio de la inhibición de la enzima NEP, que comprende administrarle a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención. Otro aspecto de la invención se relaciona con un método de tratamiento de hipertensión, de insuficiencia cardiaca o de enfermedad renal, que comprende administrarle a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención. Aún otro aspecto de la invención se relaciona con un método para inhibir una enzima NEP en un mamífero que comprende administrarle al mamífero una cantidad inhibidora de la enzima NEP de un compuesto de la invención.
Debido a que los compuestos de la invención poseen actividad inhibidora de NEP, también son útiles como herramienta para investigación. Por lo tanto, un aspecto de la invención se relaciona con un método de uso de un compuesto de la invención como una herramienta para investigación, en donde dicho método comprende conducir un ensayo biológico usando un compuesto de la invención. Los compuestos de la invención también se pueden usar para evaluar nuevos compuestos químicos. Por lo tanto otro aspecto de la invención se relaciona con un método para evaluar un compuesto de ensayo en un ensayo biológico, que comprende: (a) realizar un ensayo biológico con un compuesto de ensayo para proveer un primer valor de ensayo; (b) realizar el ensayo biológico con un compuesto de la invención para proveer un segundo valor de ensayo; en donde el paso (a) se realiza antes, después o concurrentemente con el paso (b) ; y (c) comparar el primer valor de ensayo del paso (a) con el segundo valor de ensayo del paso (b) . Los ensayos biológicos ej emplificativos incluyen un ensayo de inhibición de la enzima NEP . Aún otro aspecto de la invención se relaciona con un método para estudiar un sistema biológico o muestra que comprende una enzima NEP, en donde el método comprende: (a) poner en contacto el sistema biológico o muestra con un compuesto de la invención; y (b) determinar los efectos causados por el compuesto sobre el sistema biológico o muestra .
Aún otro aspecto de la invención se relaciona con procesos e intermediarios útiles para preparar compuestos de la invención. Por lo tanto, otro aspecto de la invención se relaciona con un proceso para preparar los compuestos de la fórmula I, que comprende el paso de acoplar un compuesto de la fórmula 1 con un compuesto de la fórmula 2: para producir un compuesto de fórmula I; en donde P es H o un grupo protector de amino seleccionado de t-butoxicarbonilo, tritilo, benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo, formilo, trimetilsililo, y t-butildimetilsililo; y en donde el proceso además comprende desproteger el compuesto de fórmula 1 cuando P es un grupo protector de amino; y en donde R1-R6, a, b y Z son como se definen para la fórmula I . Otro aspecto de la invención se relaciona con un proceso para preparar una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula I, que comprende poner en contacto un compuesto de fórmula I en forma de ácido o base libre con una base o ácido farmacéuticamente aceptable. En otros aspectos, la invención se relaciona con productos preparados mediante cualquiera de los procesos que se describen en la presente, asi como nuevos intermediarios usados en dicho proceso. En un aspecto de la invención los intermediarios novedosos tienen las fórmulas 1, o una sal de los mismos, como se define en la presente.
Aun otro aspecto de la invención se relaciona con el uso de un compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento, en especial en la elaboración de un medicamento de utilidad para tratar hipertensión, insuficiencia cardiaca o enfermedad renal. Otro aspecto de la invención se relaciona con el uso de un compuesto de la invención para inhibir una enzima NEP en un mamífero. Aun otro aspecto de la invención se relaciona con el uso de un compuesto de acuerdo con la invención como una herramienta para investigación. En la presente documentación se describen otros aspectos y formas de realización de la invención.
Un grupo de compuestos de la fórmula I son aquellos que se divulgan en la Solicitud Provisional de Patente de los EE.UU. N°: 61/554.625, presentada el 2 de noviembre, 2011. Este grupo incluye los compuestos de la fórmula I ' : donde: R1 se selecciona entre H, -Ci_8alquilo, -Ci-3alquilen- C6-ioarilo, -Ci-3alquilen-Ci-c,heteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci-6alquilen-OC (0) R10, -Ci-6alquilen-NRnR12, -Ci_6alquilen-C (O) R13, -C0-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen- S02-Ci-6alquilo, R10 se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci_6alquilo, -C3-7cicloalquilo, -0-C3-7cicloalquilo, fenilo, -O-fenilo, -NRUR12, -CH[CH(CH3) 2] -NH2, -CH [CH (CH3) 2] "NHC (0) 0-Ci-6alquilo, y -CH (NH2) CH2COOCH3; y R11 y R12 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R11 y R12 se toman juntos como -(CH2)3-6-/ -C (O) - (CH2) 3-, o - (CH2) 20 (CH2) 2~; R13 se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, -0-bencilo, y -NR11R12; y R14 es -Ci-6alquilo o -C0-6alquilen-C6-xoarilo; R2 se selecciona entre -OH, -CH20H, -0P(0) (0H)2, y -CH20P (0) (OH) 2; y R3 se selecciona entre H y -CH3; o R2 se toma junto con R1 para formar -OCR15R16- o -CH20-CR15R16-, y R3 se selecciona entre H y -CH3, donde R15 y R16 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y -0-C3-7cicloalquilo, o R15 y R16 se toman juntos para formar =0; o R2 se toma junto con R3 para formar -CH2-0-CH2- o -CH2-CH2-; o R2 y R3 son ambos -CH3; Z se selecciona entre -CH- y -N-; R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-C6-i0arilo, -Ci_3alquilen-Ci-9heteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci_6alquilen-0C (0) R40, -Ci_6alquilen-NR41R42, -Ci_6alquilen-C (0) R43, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci_5alquilen-S02-Ci-6alquilo, R se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, -C3-7cicloalquilo, -0-C3_7cicloalquilo, fenilo, -O-fenilo, -NR41R42 , -CH[CH(CH3)2] -NH2, -CH [CH (CH3) 2] -NHC (0) 0-Ci-6alquilo, y -CH (NH2) CH2COOCH3; y R41 y R42 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R41 y R42 se toman juntos como -(CH2)3-6-, -C (0) - (CH2) 3-, o - (CH2) 20 (CH2) 2-; R43 se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, -0-bencilo, y -NR1R42; y R44 es -Ci-6alquilo o -C0-6alquilen-C6-ioarilo/ a es 0 o 1; R5 se selecciona entre halo, -CH3, -CF3, y -CN; b es 0 o un entero entre 1 y 3; cada R6 se selecciona en forma independiente entre halo, -OH, -CH3, -OCH3, y -CF3; y donde cada grupo alquilo en R1 y R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; y; donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos -Ci-6alquilo o ciclopropilo; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN DEFINICIONES Cuando se describen los compuestos, las composiciones, los métodos y los procesos de la presente invención, los siguientes términos tienen los significados que se indican a continuación, a menos que se indique lo contrario. Además, según se usa en la presente, las formas en singular "un" "una", "la" y "el" incluyen las correspondientes formas en plural a no ser que el contexto del uso indique claramente otra cosa. Los términos "que comprende/n" , "que incluye/n" y "que tiene/n" han de interpretarse de manera inclusiva, y denotan que puede haber elementos adicionales, diferentes de los elementos enumerados. Todos los valores que reflejan las cantidades de los ingredientes, sus propiedades, tales como su peso molecular, las condiciones de reacción y otros elementos que se proveen en la presente han de interpretarse como valores aproximados, a menos que se indique lo contrario. Por lo tanto, los valores que se proveen en la presente son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se desea obtener a través de la presente invención. Por lo menos, y sin el objeto de limitar la aplicación de la doctrina de equivalentes al alcance de las reivindicaciones, cada valor ha de considerarse sobre la base de los dígitos significativos informados, de acuerdo con técnicas de redondeo convencionales.
El término "alquilo" hace referencia a un grupo hidrocarburo monovalente saturado que puede ser lineal o ramificado. A menos que se defina de otra manera, dichos grupos alquilo contienen típicamente entre 1 y 10 átomos de carbono e incluyen, por ejemplo, -Ci-4alquilo, -Ci-5alquilo, -C2-5alquilo, -Ci-6alquilo, -Ci-8alquilo y -Ci-i0alquilo . Los grupos alquilo representativos incluyen, a modo de ejemplo, metilo, etilo, r¡-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, isobutilo, t-butilo, n-pentilo, r¡-hexilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo y similares.
Cuando se menciona una cantidad específica de átomos de carbono para un término particular en la presente, se indica la cantidad de átomos de carbono antes del término como un subíndice. Por ejemplo, el término "-Ci-6alquilo" significa un grupo alquilo que tiene entre 1 y 6 átomos de carbono, y el término "-C3-7cicloalquilo" significa un grupo cicloalquilo que tiene entre 3 y 7 átomos de carbono, respectivamente, donde los átomos de carbono se encuentran en cualquier configuración aceptable.
El término "alquileno" hace referencia a un grupo hidrocarburo divalente saturado que puede ser lineal o ramificado. A menos que se defina de otra manera, dichos grupos alquileno contienen típicamente entre 0 y 10 átomos de carbono e incluyen, por ejemplo, -C0-ialquileno-, -C0-6alquileno-, -Ci-3alquileno- y -Ci-6alquileno- . Los grupos alquileno representativos incluyen, a modo de ejemplo, metileno, etan-1 , 2-diilo ("etileno"), propan-1 , 2-diilo, propan-1, 3-diilo, butan-1, 4-diilo, pentan-1, 5-diilo y similares. Se entiende que cuando el término alquileno incluye cero carbonos tal como -Co-ialquileno-, dichos términos tienen como intención incluir la ausencia de átomos de carbono, es decir, el grupo alquileno no está presente excepto para un enlace covalente que une los grupos separados por el término alquileno.
El término "arilo" hace referencia a un hidrocarburo monovalente aromático que tiene un único anillo (es decir, fenilo) o uno o más anillos fusionados. Los sistemas de anillos fusionados incluyen los que están completamente insaturados (por ejemplo, naftaleno) asi como los que están parcialmente insaturados (por ejemplo, 1,2,3,4-tetrahidronaftaleno) . A menos que se defina de otra manera, dichos grupos arilo contienen típicamente entre 6 y 10 átomos de carbono del anillo e incluyen, por ejemplo, -C6-ioarilo. Los grupos arilo representativos incluyen, a modo de ejemplo, fenilo y naftalen-l-ilo, naftalen-2-ilo y similares.
El término "cicloalquilo" hace referencia a un grupo hidrocarburo carbocíclico monovalente saturado. A menos que se defina de otra manera, dichos grupos cicloalquilo contienen típicamente entre 3 y 10 átomos de carbono e incluyen, por ejemplo, -C3-5cicloalquilo, -C3-6cicloalquilo y -C3-7CÍcloalquilo . Los grupos cicloalquilo representativos incluyen, a modo de ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y similares.
El término "halo" hace referencia a flúor, cloro, bromo e iodo.
El término "heteroarilo" hace referencia a heterociclos insaturados monovalentes (aromáticos) que tienen un anillo único o dos anillos fusionados. Los heterociclos insaturados monovalentes también son comúnmente referidos como grupos "heteroarilo". A menos que se defina de otro modo, los grupos heteroarilo típicamente contienen entre 5 y 10 átomos anulares totales, de los cuales entre 1 y 9 son átomos de carbono anulares, y entre 1 y 4 son heteroátomos anulares, e incluyen, por ejemplo, -Ci-9heteroarilo y -Cs-gheteroarilo . Los grupos heteroarilo representativos incluyen, a modo de ejemplo, pirrol (por ejemplo, 3-pirrolilo y 2H-pirrol-3-ilo) , imidazol (por ejemplo, 2-imidazolilo) , furano (por ejemplo, 2-furilo y 3-furilo) , tiofeno (por ejemplo, 2-tienilo) , triazol (por ejemplo, 1, 2, 3-triazolilo y 1, 2, -triazolilo) , pirazol (por ejemplo, lH-pirazol-3-ilo) , oxazol (por ejemplo, 2-oxazolilo) , isoxazol (por ejemplo, 3-isoxazolilo) , tiazol (por ejemplo, 2-tiazolilo y 4-tiazolilo) , e isotiazol (por ejemplo, 3-isotiazolilo) , piridina (por ejemplo, 2-piridilo, 3-piridilo, y 4-piridilo) , piridilimidazol, piridiltriazol , pirazina, piridazina (por ejemplo, 3-piridazinilo) , pirimidina (por ejemplo, 2-pirimidinilo) , tetrazol, triazina (por ejemplo, 1, 3, 5-triazinilo) , indolilo (por ejemplo, 1H-indol-2-ilo, lH-indol-4-il e lH-indol-5-ilo) , benzofurano (por ejemplo, benzofuran-5-ilo) , benzotiofeno (por ejemplo, benzo [j Jtien-2-ilo y benzo [¿Jtien-5-ilo) , benzimidazol, benzoxazol, benzotiazol, benzotriazol , quinolina (por ejemplo, 2-quinolila) , isoquinolina, quinazolina, quinoxalina y similiares.
El término "opcionalmente sustituido" significa que el grupo en cuestión puede no estar sustituido o que puede estar sustituido una o varias veces, tal como entre 1 y 3 veces, entre 1 y 5 veces o entre 1 y 8 veces. Por ejemplo, un grupo alquilo que está "opcionalmente sustituido" con átomos de flúor puede estar no sustituido, o puede contener 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 o 8 átomos de flúor. Similarmente, un grupo que está "opcionalmente sustituido" con uno o dos grupos -Ci-6alquilo, pueden estar no sustituido, o puede contener uno o dos grupos -Ci_6alquilo .
Tal como se la emplea en la presente, la expresión "que tiene la fórmula" o "que tiene la estructura" no se usa en sentido limitativo, y su significado es equivalente al del término "que comprende". Por ejemplo, si se describe una estructura, se entiende que están abarcadas todas las formas de estereoisómeros y tautómeros, a menos que se indique de otro modo.
El término "farmacéuticamente aceptable" hace referencia a un material que no es inaceptable desde el punto de vista biológico ni de otra manera cuando se lo utiliza en la invención. Por ejemplo, el término "vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un material que se puede incorporar a una composición y administrar a un paciente sin causar efectos biológicos inaceptables ni interacciones inaceptables con los otros componentes de la composición. Estos materiales farmacéuticamente aceptables típicamente satisfacen los requerimientos convencionales de las evaluaciones toxicológicas y de elaboración, e incluyen aquellos materiales identificados como ingredientes inactivos apropiados por la Administración de Drogas y Alimentos de los EEUU.
El término "sal farmacéuticamente aceptable" significa una sal preparada a partir de una base o un ácido que sea aceptable para su administración a un paciente, tal como un mamífero (por ejemplo, sales que tienen una seguridad aceptable en mamíferos para un régimen de dosificación dado) . Sin embargo, se comprenderá que no se requiere que las sales comprendidas por la invención sean sales farmacéuticamente aceptables, tales como las sales de los compuestos intermediarios que no se pretende administrarlas a un paciente. Las sales farmacéuticamente aceptables pueden derivar de bases inorgánicas u orgánicas farmacéuticamente aceptables, y de ácidos inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables. Además, cuando un compuesto de la fórmula I contiene tanto una porción básica, tal como una amina, piridina o imidazol, como una porción ácida, tal como un ácido carboxilico o tetrazol, se pueden formar zwiteriones y se incluyen asimismo en el término "sal" según se usa en la presente. Las sales derivadas de bases inorgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de amonio, calcio, cobre, férricas, ferrosas, de litio, magnesio, mangánicas, manganosas, de potasio, sodio y cinc y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, incluyendo aminas sustituidas, aminas cíclicas, aminas de ocurrencia natural y semejantes, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, ?,?'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol , 2-dimetilaminoetanol , etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolino, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolino, piperazina, piperadina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares. Las sales derivadas de ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables incluyen sales de los ácidos bórico, carbónico, hidrohálico (bromhídrico, clorhídrico, fluorhídrico o yodhídrico) , nítrico, fosfórico, sulfámico y sulfúrico. Las sales derivadas de ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables incluyen sales de ácidos hidroxilalifáticos (por ejemplo, los ácidos cítrico, glucónico, glicólico, láctico, lactobiónico, málico y tartárico) , ácidos monocarboxílieos alifáticos (por ejemplo, los ácidos acético, butírico, fórmico, propiónico y trifluoroacético) , aminoácidos (por ejemplo, los ácidos aspártico y glutámico) , ácidos carboxílicos aromáticos (por ejemplo, los ácidos benzoico, p-clorobenzoico, difenilacético, gentísico, hipúrico y trifenilacético) , ácidos hidroxilaromáticos (por ejemplo, los ácidos o-hidroxibenzoico, p-hidroxibenzoico, 1-hidroxinaftalen-2-carboxílico y 3-hidroxinaftalen-2-carboxílico) , ascórbico, ácidos dicarboxílicos (por ejemplo, los ácidos fumárico, maleico, oxálico y succínico) , ácidos glucurónico, mandélico, múcico, nicotínico, orótico, pamoico, pantoténico, sulfónico (por ejemplo, los ácidos bencensulfónico, alcanforsulfónico, edisílico, etansulfónico, isetiónico, metansulfónico, naftalensulfónico, naftalen-1 , 5-disulfónico, naftalen-2 , 6-disulfónico y p-toluensulfónico) , ácido xinafoico y similares.
Según se usa en la presente, el término "prodroga" generalmente significa un precursor inactivo de una droga gue es convertido en su forma activa en el cuerpo bajo condiciones fisiológicas, por ejemplo, mediante procesos metabólicos normales. Dichos compuestos pueden no contener actividad farmacológica sobre NEP, pero pueden administrarse oral o parenteralmente y luego ser metabolizados en el cuerpo para formar compuestos que son farmacológicamente activos contra NEP. Cuando son administrados por via oral, dichos compuestos también pueden proporcionar una mejor fracción absorbida (es decir, con mejores propiedades pK) para una administración renal, en comparación con una administración por via oral de la forma activa. Las prodrogas e emplificativas incluyen ésteres tales como Ci_6alquilésteres y aril-Ci-6alquilésteres . En una forma de realización, el compuesto activo tiene un carboxilo libre y la prodroga es un derivado éster del mismo, es decir, la prodroga es un éster tal como -C (0) OCH2CH3. Dichas prodrogas éster luego son convertidas por solvólisis o bajo condiciones fisiológicas para ser libres del compuesto carboxilo. El término "prodroga" también pretende incluir un precursor menos activo de una droga que será convertida en una forma más activa en el cuerpo. Por ejemplo, determinadas prodrogas pueden tener actividad farmacológica en el NEP, pero no necesariamente al nivel deseado; dichos compuestos son convertidos en el cuerpo en una forma que presenta el nivel de actividad deseado. El término también pretende incluir determinados derivados protegidos de los compuestos de la fórmula I que se pueden elaborar antes de una etapa de desprotección final. Por consiguiente, todos los derivados y prodrogas protegidos de los compuestos de la fórmula I están incluidos dentro del alcance de la invención.
El término "cantidad terapéuticamente eficaz" significa una cantidad suficiente para efectuar el tratamiento cuando es administrada a un paciente que lo necesita, es decir, la cantidad de droga necesaria para obtener el efecto terapéutico deseado. Por ejemplo, una cantidad terapéuticamente eficaz para tratar la hipertensión es una cantidad de compuesto necesaria, por ejemplo, para reducir, suprimir, eliminar o impedir los síntomas de la hipertensión, o para tratar la causa subyacente de la hipertensión. En una forma de realización, una cantidad terapéuticamente eficaz es aquella cantidad de droga necesaria para reducir la presión sanguínea o la cantidad de droga necesaria para mantener una presión sanguínea normal. Por otro lado, el término "cantidad eficaz" hace referencia a una cantidad que es suficiente para obtener un resultado deseado, que no necesariamente es un resultado terapéutico. Por ejemplo, al estudiar un sistema que comprende una enzima NEP, una "cantidad eficaz" puede ser la cantidad necesaria para inhibir la enzima.
El término "tratar" o "tratamiento", como se lo usa en la presente documentación, hace referencia a tratar o al tratamiento de una enfermedad o una condición médica (tal como la hipertensión) en un paciente, tal como un mamífero (particularmente un humano) , que incluye uno o más de los siguientes pasos: (a) prevenir la ocurrencia de la enfermedad o condición médica, es decir, prevenir la reocurrencia de la enfermedad o condición médica o tratamiento profiláctico de un paciente que tiene predisposición para la enfermedad o condición médica; (b) atenuar la enfermedad o condición médica, es decir, eliminar o provocar la regresión de la enfermedad o condición médica en un paciente; (c) suprimir la enfermedad o condición médica, es decir, enlentencer o detener el desarrollo de la enfermedad o condición médica en un paciente; o (d) aliviar los síntomas de la enfermedad o condición médica en un paciente. Por ejemplo, el término "tratar la hipertensión" puede incluir prevenir que ocurra la hipertensión, mejorar la hipertensión, suprimir hipertensión, y aliviar los síntomas de la hipertensión (por ejemplo, bajar la presión sanguínea) . El término "paciente" tiene como intención incluir aquellos mamíferos, tal como humanos, que tienen una necesidad por el tratamiento o prevención de la enfermedad o que están siendo tratados para la prevención de la enfermedad o tratamiento de una enfermedad o condición médica especifica, asi como sujetos de ensayo en los cuales se están evaluando los compuestos de la invención o que se están usando en un ensayo, por ejemplo un modelo animal.
Todos los otros términos que se usan en la presente documentación han de tener el significado que comúnmente le dan aquellos con experiencia en la técnica a los que les concierne .
En un aspecto, la invención se relaciona con compuestos de fórmula I: o con sales farmacéuticamente aceptable de éstos.
Como se usa en la presente, el término "compuesto de la invención" incluye todos los compuestos abarcados por la fórmula la y Ib, tal como las especies abarcadas en las fórmulas la y Ib, asi como los compuestos abarcados por las fórmulas II-IIk, IlIa-IIIb y Iva-IVd. Además, los compuestos de la invención también pueden contener varios grupos básicos o ácidos (por ejemplo, grupos amino o carboxilo) y por ello, dichos compuestos pueden existir como una base libre, un ácido libre o en diversas formas salinas. Todas estas formas de sales están incluidas dentro del alcance de la invención. Los compuestos de la invención también pueden existir como prodrogas. Por lo tanto, los especialistas en la técnica comprenderán que la referencia a un compuesto en la presente, por ejemplo, la referencia a un "compuesto de la invención" o a un "compuesto de la fórmula I" incluye un compuesto de la fórmula I asi como sales y prodrogas farmacéuticamente aceptables de dicho compuesto, a menos que se indique de otra manera. Además, el término "o una sal y/o prodroga farmacéuticamente aceptable del mismo" pretende incluir todas las permutaciones de sales y prodrogas, tal como una sal farmacéuticamente aceptable de una prodroga. Adicionalmente, los solvatos de los compuestos de fórmula I están incluidos dentro del alcance de esta invención.
Los compuestos de fórmula I pueden contener uno o más centros quirales y por lo tanto, estos compuestos pueden prepararse y usarse de diferentes formas estereoisoméricas . En consecuencia, la invención también se relaciona con mezclas racémicas, estereoisómeros puros (por ejemplo, enantiómeros y diastereoisómeros ) , mezclas enriquecidas en estereoisómeros, y similares a menos que se indique de otro modo. Cuando una estructura química se representa en la presente sin ninguna estereoquímica, se considera que todos los estereoisómeros posibles están comprendidos por dicha estructura. Por lo tanto, por ejemplo, los términos "compuesto de fórmula I", "compuestos de fórmula II", etc., tienen como intención incluir todos los estereoisómeros posibles del compuesto. De manera similar, cuando en la presente se representa o nombra un estereoisómero en particular, a menos que se indique lo contrario, en las composiciones de la invención puede haber cantidades menores de otros estereoisómeros, teniendo en cuenta que la utilidad de la composición como un todo no se vea alterada por la presencia de dichos otros isómeros. Se pueden obtener estereoisómeros individuales mediante numerosos métodos que son bien conocidos en la técnica, que incluyen cromatoqrafía quiral usando una fase o soporte estacionario quiral adecuado, o por conversión química de los mismos en diastereoisómeros, separación de los diastereoisómeros con medios convencionales, tal como cromatografía o recristalización, luego regeneración en el estereoisómero original .
Adicionalmente, donde sea aplicable, todos los isómeros cís-trans o E/Z (isómeros geométricos), formas tautoméricas y formas topoisoméricas de los compuestos de la invención están incluidos dentro del alcance de la invención salvo que se especifique lo contrario.
Más específicamente, compuestos de fórmula I pueden contener al menos dos centros quirales cuando la unidad "Z" es -CH-, y pueden contener al menos un centro quiral cuando la unidad "Z" es -N- . Estos centros quirales se indican por medio de los símbolos * y ** en las siguientes fórmulas la y Ib: Nótese, sin embarso, que no existe centro quiral * cuando R2 se toma junto con R3 para formar -CH2-0-CH2- o -CH2-CH2-, o R2 y R3 son ambos -CH3.
En un estereoisómero del compuesto de fórmula la, ambos átomos de carbono identificados por los símbolos * y ** tienen configuración (R) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (R,R) en los átomos de carbono * y o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (R,R) en estos átomos de carbono. En otro estereoisómero del compuesto de fórmula la, ambos átomos de carbono identificados por los símbolos * y ** tienen configuración (S) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (S,S) en los átomos de carbono * y ** o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (S,S) en estos átomos de carbono. En aun otro estereoisómero del compuesto de fórmula la, el átomo de carbono identificado por el símbolo * tiene configuración (S) y el átomo de carbono identificado por el símbolo ** tiene configuración (R) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (S,R) en los átomos de carbono * y ** o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (S,R) en estos átomos de carbono. En aun otro estereoisómero del compuesto de fórmula la, el átomo de carbono identificado por el símbolo * tiene configuración (R) y el átomo de carbono identificado por el símbolo ** tiene configuración (S) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (R,S) en los átomos de carbono * y ** o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (R,S) en estos átomos de carbono.
En un estereoisómero del compuesto de fórmula Ib, el átomo de carbono identificado por el símbolo * tiene configuración (R) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (R) en el átomo de carbono * o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (R) en este átomo de carbono. En otro estereoisómero del compuesto de fórmula Ib, el átomo de carbono identificado por el símbolo * tiene configuración (S) . En esta forma de realización, los compuestos tienen configuración (S) en el átomo de carbono * o están enriquecidos en una forma estereoisomérica que tiene configuración (S) en este átomo de carbono.
Estas diversas formas de realización pueden representarse como la fórmula Ia-1: f fórmula Ia-3: fórmula Ib En algunas formas de realización, con el fin de optimizar la actividad terapéutica de los compuestos de la invención, por ejemplo, para tratar la hipertensión, puede ser deseable que los átomos de carbono identificados por los símbolos * y ** tengan una configuración particular o que se encuentren enriquecidos en una forma estereoisomérica con dicha configuración. Por consiguiente, en determinados aspectos, esta invención se relaciona con cada enantiómero individual o con una mezcla enriquecida en enantiómeros de los enantiómeros que comprende predominantemente un enantiómero o el otro enantiómero. En otras formas de realización, los compuestos de la invención están presentes como mezclas racémicas de enantiómeros.
Los compuestos de la invención, asi como aquellos compuestos utilizados en su síntesis, pueden también incluir compuestos marcados isotópicamente, es decir, donde uno o más átomos han sido enriquecidos con átomos que tienen una masa atómica diferente de la masa atómica predominante encontrada en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en los compuestos de la fórmula I, incluyen, por ejemplo, pero en un sentido no limitativo, 2H, 3H, 13C, 14C, 1 N, 180, 170, 35S, 36C1 y 18F. Los compuestos de fórmula I enriquecidos en tritio o carbono-14 son de interés particular los cuales pueden usarse, por ejemplo, en estudios de distribución en tejidos; los compuestos de fórmula I enriquecidos en deuterio especialmente en un sitio del metabolismo que resultan, por ejemplo, en compuestos que tienen mayor estabilidad metabólica; y compuestos de fórmula I enriquecidos en un isótopo emisor de positrones, tal como 11 , 18F, 150 y 13N, que se pueden usar, por ejemplo, en estudios de Topografía por Emisión de Positrones (PET) .
La nomenclatura usada en la presente para denominar los compuestos de acuerdo con la invención se ilustra en los Ejemplos en la presente. Esta nomenclatura ha sido obtenida usando el software AutoNom (MDL, San Leandro, California) , disponible comercialmente .
FORMAS DE REALIZACIÓN REPRESENTATIVAS Los siguientes sustituyentes y valores sirven como ejemplos representativos de diversos aspectos y formas de realización de la invención. Estos valores representativos sirven para definir e ilustrar con mayor detalle dichos aspectos y formas de realización, y no tienen por objeto excluir otras formas de realización o limitar el alcance de la invención. Con relación a esto, se prefiere la representación de un valor o un sustituyente particular que no excluya de modo alguno otros valores o sustituyentes de la invención, a menos que se lo indique de manera especifica.
En un aspecto, esta invención se relaciona con compuestos de fórmula I: La unidad R1 se selecciona entre: H; -Ci_8alquilo, por ejemplo, -CH3, -CH2CH3, -(CH2)2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)4CH3, - (CH2)2CH(CH3)2, -(CH2)5CH3, y -(CH2)6CH3; -Ci-3alquilen-C6-ioarilo, por ejemplo, bencilo; -Ci-3alquilen-Ci-9heteroarilo, por ejemplo, -CH2-piridinilo y - (CH2) 2-piridinilo; -C3-7cicloalquilo, por ejemplo, ciclopentilo; -[ (CH2)20]1-3CH3, por ejemplo, -(CH2)2OCH3 y - [ (CH2 ) 20] 2CH3; -Ci-6alquilen-OC (0) R10, por ejemplo, -CH20C (0) CH3, -CH20C (0) CH2CH3, -CH20C(0) (CH2)2CH3, -CH2CH (CH3) OC (0) CH2CH3, -CH20C (0) 0CH3, -CH20C (0) OCH2CH3, -CH (CH3) OC (0) OCH2CH3, -CH (CH3) OC (0) 0-CH (CH3) 2, -CH2CH (CH3) OC (0) -ciclopentilo, -CH20C (0) O-ciclopropilo, -CH (CH3) -0C (0) -O-ciclohexilo, -CH20C (0) O-ciclopentilo, -CH2CH (CH3) OC (0) -fenilo, -CH20C(0)0-fenilo, -CH20C (0) -CH [CH (CH3) 2] -NH2, -CH2OC(0)-CH[CH(CH3)2]-NHC(0)OCH3, y -CH (CH3) OC (0) - CH (NH2) CH2COOCH3; -Ci_6alquilen-NRnR12, por ejemplo, - (CH2) 2-N (CH3) 2, -Ci_6alquilen-C (0) R 13 por ej emplo, -CH2C (0) 0CH3, -CH2C (0) 0-bencilo, -CH2C (0) -N (CH3) 2, y -C0-6alquilenmorfolina, por ejemplo, - (CH2) 2-morfolina y - (CH2) 3-morfolina: -Ci-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, por ejemplo, - (CH2) 2S02CH3; La unidad R se selecciona entre: -Ci-6alquilo, por ejemplo, -CH3 y -CH2CH 3; -0-Ci-6alquilo, por ejemplo, -OCH3, -0-CH2CH3, y -O- CH(CH3)2; -C3-7cicloalquilo, por ejemplo, ciclopentilo; -0-C3_7cicloalquilo, por ejemplo, -O-ciclopropilo, -0-ciclohexilo, y -O-ciclopentilo; fenilo; -O-fenilo; -NRUR12; -CH (R15) -NH2, por ejemplo, -CH [CH (CH3) 2] -NH2; -CH (R15) -NHC (O) 0-Ci-6alquilo, por ejemplo, -CH [CH (CH3) 2] -NHC (O) OCH3; y -CH (NH2) CH2COOCH3.
Las unidades R11 y R12 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo (por ejemplo, CH3) , y bencilo. Como alternativa, las unidades R11 y R12 pueden tomarse juntas como -(CH2)3-6-, -C(0)-(CH2)3-, o -(CH2)20(CH2)2-,' por ejemplo para formar un grupo como por ejemplo: La unidad R se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, por ejemplo, -OCH3, -O-bencilo, y -NRnR12, por ejemplo, -N(CH3)2, y La unidad R14 es -Ci-6alquilo (por ejemplo, -CH3 y -C(CH3)3) o -Co-6alquilen-C6_ioarilo . La unidad R15 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo.
Además, cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor. Por ejemplo, cuando R1 es -Ci-Balquilo, R1 también puede ser un grupo como por ejemplo -CH2CF3/ -CH(CH3)CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3/ -CH(CF3)2, -CH(CH2F)2, -C(CF3)2CH3, y -CH (CH3) CF2CF3.
En una forma de realización, R1 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-6alquilen-OC (O) R10, y donde RiU es -Cx-galquilo, -0-d-6alquilo, o -CH [R ] -NHC (O) 0-Ci-6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo; R15 es -CH(CH3)2; y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor. En una forma de realización especifica, R1 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -(CH2)3CH3, -(CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH20C (0) CH3, -CH20C (0) CH2CH3, -CH2OC (0) (CH2) 2CH3, -CH20C (0) OCH2CH3, -CH2OC(0)-CH[CH(CH3)2]-NHC(0)0-CH3, y donde R14 es -CH3. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IId, Ili-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd.
En una forma de realización, R1 es H. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IId, Ili-IIk, Ula-IHb, y IVa-IVd.
En otra forma de realización, R1 se selecciona entre -Ci_8alquilo, -Ci-3alquilen-C6-ioarilo, -Ci-3alquilen- Ci-gheteroarilo, -C3-7cicloalquilo, - t (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci_6alquilen-OC (0) R10, -Ci-ealquilen-NR1^12 , -Ci_6alquilen-C (0) R13, -C0-6alquilenmorfolinilo, -Ci-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IId, Ili-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd. En un aspecto de la invención, estos compuestos tienen una utilidad particular como prodroqas o como intermediarios en los procedimientos sintéticos descritos en la presente. Los ejemplos específicos de dichas unidades de prodroga incluyen aquellas donde R1 es -Ci_6alquilen-OC (0) R10, como por ejemplo -CH (CH3) OC (0) -O-ciclohexilo: haciendo del compuesto un éster de cilexetilo; o R es -C0-6alquilenmorfolina como por ejemplo - ((¾) 2_inorfolina : haciendo del compuesto un éster de 2-morfolinoetilo o mofetilo; o como por ejemplo -CH2-5-metil- [ 1 , 3 ] dioxol-2-ona : haciendo del compuesto un éster de medoxomilo.
En una forma de realización, R2 es -0R21 o -CH2OR21, y R3 es H o -CH3. Estas formas de realización pueden ilustrarse como las fórmulas Ila-IId: (lie) (Hd) La unidad R21 es H, -C (O) -Ci-6alquilo, -C (O) -CH (R22) -NH2, -C(O)-CH (R22) -NHC (O) 0-Ci-6alquilo, o -P (O) (OR23) 2 ; y en una forma de realización particular, la unidad R21 es H. La unidad R22 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo. La unidad R23 es H, -Ci-6alquilo, o fenilo.
En una forma de realización, compuestos de la invención tienen la fórmula lia, y en una forma de realización de ejemplo, R1 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-6alquilen-OC(0)R10, y donde RiU es -Ci-6alquilo, -0-Ci_6alquilo, o -CH [R ] -NHC (0) 0-Ci_6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo ; R15 es -CH(CH3)2; y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; Z se selecciona entre -CH- y -N-; R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci-.8alquilo, -d^alquilen-O-Ce-ioarilo, - [ (CH2 ) 20] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci-6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R6 es halo; o a es 0, b es 2, y un R6 es halo y el otro R6 es halo o -CH3; o a es 1, R5 es halo, y b es 0; o a es 1, R5 es halo, b es 1, y R6 es halo; o a es 1, R5 es halo, b es 2, y cada R6 es halo; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3; y en otra forma de realización de ejemplo, R1 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, - (CH2) 6CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH20C (0) CH3, -CH2OC (O) CH2CH3, -CH2OC(0) (CH2)2CH3, -CH20C(O)OCH2CH3, -CH2OC (0) -CH [CH (CH3) 2] -NHC (0) 0-CH3, y donde R14 es -CH3; R4 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -(CH2)3-0-CH2CH3, -(CH2)2-0-fenilo, -(CH2)2OCH3, y donde R44 es -CH3; y a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 ' -cloro o 2 '-metilo, 5' -cloro o 2 ', 5 ' -dicloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3 '-cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro.
En una forma de realización, compuestos de la invención tienen la fórmula Ilb, y en una forma de realización de ejemplo, H o -Ci-8alquilo; Z es -N-;R4 es H o -Ci-8alquilo; y a y b son 0; y en otra forma de realización de ejemplo, R1 y R4 son H .
En una forma de realización, compuestos de la invención tienen la fórmula lie, y en una forma de realización de ejemplo, R1 es H o -Ci-ealquilo; Z es -CH-;R4 es H o -Ci-8alquilo; a es 0 o a es 1 y R5 es halo; b es 0 o b es 1 o 2 y R6 es halo; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3; y en otra forma de realización de ejemplo, R1 es H, -CH2CH3, o -(CH2)3CH3; R4 es H; a es 0 o a es 1 y R5 es 3-cloro; b es 0 o b es 1 y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro.
En una forma de realización, compuestos de la invención tienen la fórmula lid, y en una forma de realización de ejemplo, R1 es H o -Ci-salquilo; Z es -CH-; R4 es H o -Ci-salquilo ; a es 0; y b es 0, o b es 1 y R6 es halo; y en otra forma de realización de ejemplo, R1 es H o -CH2CH3; R4 es H o -CH2CH (CH3) 2; y b es 0, o b es 1 y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro.
En otra forma de realización, R2 se toma junto con R1 para formar -OCR15R16- o -CH20-CR15R16- , y R3 se selecciona entre H y -CH3. Las unidades R15 y R16 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci~6alquilo, y -0-C3_7cicloalquilo, o R15 y R16 se toman juntos para formar =0. Ésta puede ilustrarse como las fórmulas Ile-IIh: (Ilg) (Hh) En un aspecto de la invención, estos compuestos tienen una utilidad particular como prodrogas o como intermediarios en los procedimientos sintéticos descritos en la presente. Los compuestos donde R2 es -CH2OP (0) (OH) 2 también pueden tener utilidad como prodrogas. En una forma de realización de los compuestos de las fórmulas He, Hf, Ilg, y Hh, Z es -CH-, R4 es H, a es 0, b es 1, R6 es 3'C1, y R15 y R16 son H.
En otra forma de realización, R2 se toma junto con R3 para formar -CH2-0-CH2- o -CH2-CH2-, que puede ilustrarse como las fórmulas Ili y Hj, respectivamente: (Ili) (II ) En otra forma de realización, R2 y R3 son ambos -CH3, que puede ilustrarse como la fórmula Ilk: En una forma de realización de los compuestos de las fórmulas Ili, Ilj, y Ilk, R1 es H, Z es -CH-, R4 es -Ci-8alquilo (por ejemplo, -CH2CH (CH3) 2) , a es 0, b es 1, y R6 es 3'C1.
El grupo Z se selecciona entre -CH- y -N-. Estas formas de realización pueden ilustrarse como las fórmulas Illa y Illb: (Illa) (IHb) La unidad R4 se selecciona entre: H; -Ci-8alquilo, por ejemplo, -CH3, -CH2CH3, -(CH2)2CH3/ -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, - (CH2) 4CH3, -(CH2)2CH(CH3)2, -(CH2)5CH3, y -(CH2)5CH3; -Ci-3alquilen-0-Ci-.8alquilo por ejemplo, - (CH2) 3-0-CH2CH3; -Ci_3alquilen-C6-ioarilo, por ejemplo, bencilo; -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, por ejemplo, - (CH2) 2-0-fenilo; -Ci-3alquilen-Ci_9heteroarilo, por ejemplo, -CH2-piridinilo y - (CH2) 2-piridinilo; -C3-7cicloalquilo, por ejemplo, ciclopentilo; -[ (CH2)20]i-3CH3, por ejemplo, -(CH2)2OCH3 y - [ (CH2) 20] 2CH3; -Ci_6alquilen-OC (O) R40, por ejemplo, -CH2OC (0) CH3, -CH20C (O) CH2CH3, -CH2OC(0) (CH2)2CH3, -CH2CH (CH3) OC (O) CH2CH3, -CH20C (0) 0CH3, -CH20C (0) 0CH2CH3, -CH (CH3) OC (0) 0CH2CH3/ -CH (CH3) OC (0) 0-CH (CH3) 2, -CH2CH (CH3) OC (0) -ciclopentilo, -CH2OC (0) O-ciclopropilo, -CH (CH3) -OC (0) -O-ciclohexilo, -CH20C (0) O-ciclopentilo, -CH2CH (CH3) OC (0) -fenilo, -CH20C(0)0- fenilo, -CH2OC (0) -CH [CH (CH3) 2] -NH2, -CH2OC(0)-CH[CH(CH3)2]-NHC(0)OCH3, y -CH (CH3) OC (0) - CH(NH2)CH2COOCH3; -C!-6alquilen-NR1R42, por ejemplo, - (CH2) 2-N (CH3) 2, -Ci-6alquilen-C (0) R , por ejemplo, -CH2C (O) OCH3, -CH2C (0) O-bencilo, -CH2C (0) -N (CH3) 2, y -C0-6alquilenmorfolina, por ejemplo, - (CH2) 2-morfolina y - (CH2) 3-morfolina: -Ci-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, por ejemplo, - (CH2) 2S02CH3; La unidad R se selecciona entre: -Ci-6alquilo, por ejemplo, -CH3 y -CH2CH 3; -0-Ci_6alquilo, por ejemplo, -OCH3, -0-CH2CH3, y -0-CH(CH3)2; -C3-7cicloalquilo, por ejemplo, ciclopentilo; -0-C3_7cicloalquilo, por ejemplo, -O-ciclopropilo, -0-ciclohexilo, y -0-ciclopentilo; fenilo ; -0-fenilo ; -NR41R42; -CH (R45) -NH2, por ejemplo, -CH [CH (CH3) 2] -NH2; -CH (R45) -NHC (0) 0-Ci-6alquilo, por ejemplo, -CH [CH (CH3) 2] -NHC (0) 0CH3; y -CH (NH2) CH2COOCH3.
Las unidades R41 y R42 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo (por ejemplo, CH3) , y bencilo. Como alternativa, las unidades R41 y R42 pueden tomarse juntas como -(CH2) 3-6-, -C(0)-(CH2)3-, o -(CH2)20(CH2)2-, por ejemplo para formar un grupo como por ejemplo: La unidad R se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, por ejemplo, -OCH3, , -O-bencilo, y -NR41R42, por ejemplo, -N(CH3)2, y La unidad R es -Ci-6alquilo (por ejemplo, -CH3 y -C(CH3)3) o -Co-6alquilen-C6-ioarilo. La unidad R45 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo.
Además, cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor. Por ejemplo, cuando R4 es -Ci_8alquilo, R4 también puede ser un grupo como por ejemplo -CH2CF3, -CH(CH3)CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH(CF3)2, -CH(CH2F)2, -C(CF3)2CH3, y -CH (CH3) CF2CF3.
En una forma de realización, R4 se selecciona entre H, -Ci-ealquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci_8alquilo, -Ci-3alquilen-0- Ce-ioarilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci-6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor.. En una forma de realización especifica, R4 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, - (CH2) 3-0-CH2CH3, - (CH2) 2-0-fenilo, -(CH2)2OCH3, y donde R es -CH3. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd.
En una forma de realización, R1 es H. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd. En aun otra forma de realización, R1 y R4 son ambos H. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIh, Ilm-IIo, IlIa-IIIb, y IVa-IVd.
En otra forma de realización, R4 se selecciona entre -Ci-salquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen- C6-ioarilo, -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen- Ci-gheteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] i_3CH3, -Ci-6alquilen-OC(0)R , -Ci_6alquilen-NR41R , -Ci-6alquilen-C (0) R43, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd. En un aspecto de la invención, estos compuestos tienen una utilidad particular como prodrogas o como intermediarios en los procedimientos sintéticos descritos en la presente. En una forma de realización, R1 y R4 son ambos dichas unidades de prodroga. En otra forma de realización, uno de R1 y R4 es una unidad de prodroga y el otro es H. Los ejemplos específicos de dichas unidades de prodroga incluyen aquellas donde R4 es -Ci-6alquilen-OC (0) R10, como por ejemplo -CH (CH3) OC (0) -0- ciclohexilo : haciendo del compuesto un éster de cilexetilo; o R4 es -C0-6alquilenmorfolina como por ejemplo - (CH2) 2-morfolina : haciendo del compuesto un éster de 2-morfolinoetilo o mofetilo; o como por ejemplo -CH2-5-metil- [1, 3] dioxol-2-ona : haciendo del compuesto un éster de medoxomilo .
La numeración para los grupos R5 y R6 es la siguiente: El entero "a" es 0 o 1. La unidad R5, cuando está presente, se selecciona entre halo, -CH3, -CF3, y -CN. En una forma de realización, a es 0. En otra forma de realización, a es 1, y R5 es halo, como por ejemplo 3-cloro o 3-fluoro. En aun otra forma de realización a es 0, o a es 1 y R5 es halo. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd.
El entero "b" es 0 o un entero entre 1 y 3. La unidad R6, cuando está presente, se selecciona en forma independiente entre halo, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, y -CF3. En una forma de realización, b es 0. En otra forma de realización, b es 1 y R6 se selecciona entre Cl, F, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, y -CF3, como por ejemplo 2' -cloro, 3 '-cloro, 2'-fluoro, 3'-fluoro, 2'-hidroxi, 3'-hidroxi, 3 '-metilo, 2'-metoxi, 3'-ciano, o 3 ' -trifluorometilo . En otra forma de realización, b es 1 y R6 es halo, -CH3, o -OCH3, como por ejemplo 3' -cloro, 3 '-metilo, o 2'-metoxi. En otra forma de realización, b es 2 y R6 es 21 -fluoro-5 ' -cloro, 2 ',5'-dicloro, 21 , 5 ' -difluoro, 2 ' -metil-51 -cloro, 3 ' -fluoro-5 ' -cloro, 3'-hidroxi -5' -cloro, 3 ', 5 ' -dicloro, 3 ', 5 ' -di luoro, 2 ' -metoxi-51 -cloro, 2 ' -metoxi-5 ' -fluoro, 2 ' -hidroxi-51 -fluoro, 2 ' -fluoro-3 ' -cloro, 2 ' -hidroxi-51 -cloro, o 2'-hidroxi-3 ' -cloro . En otra forma de realización, b es 3 y cada R6 es en forma independiente halo o -CH3, como por ejemplo 2'-metil-3', 51 -dicloro o 21 -fluoro-31 -metil-51 -cloro . En una forma de realización particular, b es 0, o b es 1 y R6 es halo, o b es 2 y cada R6 se selecciona en forma independiente entre halo y -CH3. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd.
En otras formas de realización de ejemplo, a es 0 y b es 0 o a es 0, b es 1, y R6 es 2 ' -fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 ' -cloro o 2 '-metilo, 51 -cloro o 21 , 5 ' -dicloro; a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3' -cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro. En otras formas de realización estos compuestos tienen las fórmulas Ila-IIk, IlIa-IIIb, y IVa-IVd. Son de interés particular los compuestos de las fórmulas: El ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos -Ci-6alquilo o ciclopropilo . Por ejemplo, en una forma de realización, el ligando metileno en el bifenilo no está sustituido; en otra forma de realización, el ligando metileno en el bifenilo está sustituido con un grupo -Ci-6alquilo (por ejemplo, -CH3) ; y en aun otra forma de realización, el ligando metileno en el bifenilo está sustituido con dos grupos -Ci-6alquilo (por ejemplo, dos grupo -CH3) ; en otra forma de realización, el ligando metileno en el bifenilo está sustituido con un grupo ciclopropilo. Estas formas de realización se ilustran, respectivamente, como las fórmulas IVa-IVd: En una forma de realización de los compuestos de las fórmulas IVa, IVb, IVc, y IVd, R1 es H, R2 es -OR21 y R21 es H, R3 es H, Z es -CH-, R4 es -Ci-salquilo (por ejemplo, -CH2CH (CH3) 2) , a es 0, b es 1, y R6 es 3'C1.
En otra forma de realización, R1 se selecciona entre H, -Ci_8alquilo, -Ci_6alquilen-OC (O) R10, y donde RiU es -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, o -CH [R ] -NHC (O) 0-Ci_6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo; R15 es -CH(CH3)2 y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; R4 se selecciona entre H, -Ci_8alquilo, -C1-.3alquiler.-O-Ci-galquilo, -Ci-3alquilen-0-C6-.i0arilo, - [ (CH2 ) 20] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci-6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3 '-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 ' -cloro o 2 '-metilo, 5 ' -cloro o 21 , 5 ' -dicloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3 '-cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3. En una forma de realización particular de estos compuestos, R2 es -OR21 o -CH2OR21; y R3 es H o -CH3; donde R21 es H.
Además, los compuestos particulares de fórmula I que son de interés incluyen aquellos provistos en los Ejemplos a continuación, asi como también sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
PROCEDIMIENTOS GENERALES DE SÍNTESIS Los compuestos de acuerdo con la invención se pueden preparar fácilmente a partir de materiales de partida disponibles usando los siguientes métodos generales, los procedimientos indicados en los Ejemplos o usando otros métodos, reactivos y materiales de partida que son conocidos por los especialistas en la técnica. Aunque los siguientes procedimientos pueden ilustrar una forma de realización particular de la invención, se comprenderá que otras formas de realización de la invención se pueden preparar de manera similar usando los mismos métodos o métodos similares o usando otros métodos, reactivos y materiales de partida conocidos por los especialistas en la técnica. También se podrá apreciar que cuando se indican condiciones de proceso típicas o preferidas (por ejemplo, temperaturas de reacción, tiempos, relaciones molares de los reactivos, solventes, presiones, etc.), también se pueden usar otras condiciones de proceso a menos que se definan de otra manera. En algunos casos, las reacciones se realizaron a temperatura ambiente y en realidad no se realizó una medición de la temperatura. Se entiende que a temperatura ambiente se puede tomar como una temperatura dentro del rango que comúnmente se asocia con la temperatura ambiente en un laboratorio, y típicamente estará en el rango entre aproximadamente 18 °C y aproximadamente 30°C. En otros casos, se realizaron reacciones a temperatura ambiente y la temperatura en realidad se midió y se registró. Aunque las condiciones de reacción óptimas típicamente variarán dependiendo de diversos parámetros de reacción, tales como los reactivos, los solventes y las cantidades particulares que se usen, aquellos con experiencia en la técnica han de poder determinar fácilmente las condiciones de reacción apropiadas usando procedimientos rutinarios de optimización.
Además, como ha de ser evidente para aquellos con experiencia en la técnica, pueden ser necesarios grupos protectores convencionales para evitar que determinados grupos funcionales sufran reacciones indeseadas. La selección de un grupo protector apropiado para un grupo funcional en particular, asi como las condiciones y los reactivos apropiados para la protección y la desprotección de dichos grupos funcionales, son bien conocidos en la técnica. Si se lo desea, se pueden usar grupos protectores diferentes de aquellos que se ilustran en los procedimientos que se describen en la presente documentación. Por ejemplo, se describen numerosos grupos protectores y su introducción y eliminación, en T . . Greene y G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Cuarta Edición, Wiley, Nueva York, 2006, y en las referencias citadas en dicha publicación.
Los grupos protectores de carboxilo son adecuados para prevenir reacciones indeseadas en un grupo carboxilo, y ejemplos de los mismos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, ésteres, tales como metilo, etilo, ter-butilo, bencilo (Bn) , p-metoxibencilo (PMB) , 9-fluroenilmetilo (Fm) , trimetilsililo (TMS) , ter-butildimetilsililo (TBS) , difenilmetilo (benzhidrilo, DPM) y similares. Los grupos protectores de amino son adecuados para prevenir reacciones indeseadas en un grupo amino, y ejemplos de los mismos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, t-butoxicarbonilo (BOC) , tritilo (Tr) , benciloxicarbonilo (Cbz), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) , formilo, trimetilsililo (TMS), t-butildimetilsililo (TBDMS) y similares. Los grupos protectores de hidroxilo son adecuados para prevenir reacciones indeseadas en un grupo hidroxilo, y ejemplos de los mismos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, Ci_ 6alquilos, grupos sililo incluyendo grupos triCi-6alquilsililo, tal como trimetilsililo (TMS) , trietilsililo (TES) y ter-butildimetilsililo (TBDMS); ásteres (grupos acilo) incluyendo grupos Ci-6alcanoílo, tales como formilo, acetilo y pivaloilo, y grupos acilo aromáticos tales como benzoilo; grupos arilmetilo tales como bencilo (Bn) , p-metoxibencilo (PMB), 9-fluorenilmetilo (Fm) y difenilmetilo (benzhidrilo, DPM); y similares.
Se usan técnicas de desprotección estándar y reactivos para eliminar los grupos protectores, y pueden variar dependiendo del grupo utilizado. Por ejemplo, comúnmente se usa hidróxido de sodio o litio cuando el grupo protector de carboxilo es metilo, un ácido tal como TFA o HC1 se usa comúnmente cuando el grupo protector de carboxilo es etilo o t-butilo, y se puede usar H2/Pd/C cuando el grupo protector de carboxilo es bencilo. Un grupo protector de amino BOC puede eliminarse usando un reactivo ácido tal como TFA en DCM o HC1 en 1,4-dioxano, mientras que un grupo protector de amino Cbz puede eliminarse empleando condiciones de hidrogenación catalíticas tal como H2 (1 atm) y Pd/C 10% en un solvente alcohólico ("H2/Pd/C") . Comúnmente se usa H2/Pd/C cuando el grupo protector de hidroxilo es bencilo, mientras que comúnmente se usa NaOH cuando el grupo protector de hidroxilo es un grupo acilo.
Las bases adecuadas para su uso en estos esquemas incluyen, a modo ilustrativo y no en un sentido limitativo, carbonato de potasio, carbonato de calcio, carbonato de sodio, trietilamina, piridina, 1, 8-diazabiciclo- [5.4.0] undec-7-eno ( DBU ) , N, N-diisopropiletilamina (DIPEA) , 4-metilmorfolina, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, t-butóxido de potasio e hidruros de metales.
Los diluyentes o solventes inertes adecuados para su uso en estos esquemas incluyen, a modo ilustrativo y no en un sentido limitativo, tetrahidrofurano (THF) , acetonitrilo (MeCN) , -V,JV-dimetilformamida (DMF) , A^IV-dimetilacetamida (DMA), dimetilsulfóxido (DMSO), tolueno, diclorometano (DCM), cloroformo (CHCI3) , tetracloruro de carbono (CC14) , 1,4-dioxano, metanol, etanol, agua y similares.
Los reactivos de acoplamiento de ácido carboxilico/amina adecuados incluyen hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris (dimetilamino) fosfonxo (BOP) , hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidinofosfonio (PyBOP) , hexafluorofosfato de ?,?,?' ,W'-tetrametil-0- (7-azabenzotriazol-l-il ) uronio (HATU) , (hexafluorofosfato de 2-( 6-cloro-lH-benzotriazol-l-il) -1,1,3, 3-tetrametilaminio) (HCTU), 1, 3-diciclohexilcarbodiimida (DCC), N- (3-dimetilaminopropil ) -IV'-etilcarbodiimida (EDCI) , carbonildiimidazol (CDI) , 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) y similares. Las reacciones de acoplamiento se conducen en un diluyente inerte en la presencia de una base tal como DIPEA, y se llevan a cabo bajo condiciones formadoras de enlaces amida convencionales.
Todas las reacciones se conducen típicamente a una temperatura dentro del rango de entre aproximadamente -78 °C y 100 °C, por ejemplo a temperatura ambiente. Las reacciones se pueden monitorear mediante el uso de cromatografía en capa delgada (TLC) , cromatografía líquida de alta presión (HPLC) y/o LCMS hasta completar las mismas. Las reacciones se pueden completar en minutos, o pueden demorar horas, típicamente entre 1 y 2 horas y hasta 48 horas. Una vez completada, la mezcla o el producto de reacción resultante se puede tratar además con el fin de obtener el producto deseado. Por ejemplo, la mezcla resultante o producto de reacción puede ser sometida a uno o más de los siguientes procedimientos: concentración o partición (por ejemplo, entre EtOAc y agua o entre THF 5% en EtOAc y ácido fosfórico 1M) ; extracción (por ejemplo, con EtOAc, CHC13, DCM, cloroformo) ; lavado (por ejemplo, con NaCl acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, Na2C03 (5%), CHCI3 o NaOH 1M) ; secado (por ejemplo, sobre MgS04, sobre Na2S04, o en vacio) ; filtración; cristalización (por ejemplo, a partir de EtOAc y hexanos) ; concentración (por ejemplo, en vacio); y/o purificación (por ejemplo, cromatografía en gel de sílice, cromatografía rápida, HPLC preparativa, HPLC en fase reversa, o cristalización) .
Los compuestos de fórmula I, así como sus sales, pueden prepararse como se muestra en el Esquema I: Esquema I El proceso comprende el paso de acoplamiento del compuesto 1 con el compuesto 2, en donde R1-R6, Z, a, y b son como se definieron para la fórmula I, y P se selecciona entre H y un grupo protector de amino adecuado, los ejemplos de tales incluyen, t-butoxicarbonilo, tritilo, benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo, formilo, trimetilsililo, y t-butildimetilsililo . Cuando P1 es un grupo protector de amino, el proceso además comprende desproteger el compuesto de fórmula 1, antes o in situ con el paso de acoplamiento .
En casos en donde R1 es un grupo tal como -OCH3 o -OCH2CH3, el paso de acoplamiento puede estar seguido de un paso de desprotección para proveer un compuesto de fórmula I en donde R1 es un grupo tal como -OH. Por lo tanto, un método para preparar los compuestos de la invención involucra el acoplamiento de los compuestos 1 y 2, con un paso opcional de desprotección para formar un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
Los métodos para preparar el compuesto 1 se describen en los Ejemplos. El compuesto 2 se encuentra generalmente disponible comercialmente o puede prepararse usando procedimientos que son conocidos en el arte.
Se considera que ciertos intermediarios descritos en la presente son novedosos y, de manera acorde, dichos compuestos se proveen como aspectos adicionales de la invención incluyendo, por ejemplo, los compuestos de fórmula 1, o una de los mismos: donde P es H o un grupo protector de amina adecuado, y ejemplos de los mismos incluyen, t-butoxicarbonilo, tritilo, benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo, formilo, trimetilsililo y fc-butildimetilsililo; y R1, R2, R3, R5, R6, Z, a y b son como se definieron para la fórmula I.
En los ejemplos descritos más adelante se presentan detalles adicionales relacionados con condiciones de reacción especificas y con otros procedimientos para preparar compuestos representativos de la invención o intermediarios de éstos.
UTILIDAD Los compuestos de la invención poseen actividad inhibidora de neprilisina (NEP) , es decir, los compuestos tienen la capacidad de inhibir la actividad catalítica de la enzima .
Una medida de la capacidad de un compuesto para inhibir la actividad de NEP es la constante de inhibición (??±) . El valor de pK± es el logaritmo negativo en base 10 de la constante de disociación (Kj.) , que se informa típicamente en unidades molares. Los compuestos de la invención de interés particular son aquellos que tienen un pKi de NEP mayor o igual a 6,0, particularmente aquellos que tienen un pKi mayor o igual a 7,0, e incluso más particularmente aquellos que tienen un pKi mayor o igual a 8,0. En una forma de realización, los compuestos de interés tienen un pKi en el rango entre 6,0 y 6,9; en otra forma de realización, los compuestos de interés tienen un pKi en el rango entre 7,0 y 7,9; en aún otra forma de realización, los compuestos de interés tienen un pKi en el rango entre 8,0 y 8,9; y en aún otra forma de realización, los compuestos de interés tienen un pKi en el rango mayor o igual a 9.0. Dichos valores pueden determinarse por técnicas que son bien conocidas en el arte, así como en los ensayos descritos en la presente.
Otra medida de la capacidad de un compuesto para inhibir la actividad de NEP es la constante de inhibición aparente (IC50) , que es la concentración molar del compuesto que da como resultado la inhibición media de la máxima de la conversión de sustrato por la enzima NEP. El valor pICso es el logaritmo negativo en base 10 de la IC50. Los compuestos de la invención que son de interés particular, incluyen aquellos que exhiben un pIC50 para NEP mayor o igual a aproximadamente 5,0. Los compuestos de interés también incluyen aquellos que tienen un pIC 0 para NEP mayor o igual a aproximadamente 6,0 o un pIC50 para NEP mayor o igual a aproximadamente 7,0. En otra forma de realización, los compuestos de interés tienen un pIC50 para NEP dentro del rango entre aproximadamente 7,0 y 11,0; y en otra forma de realización, dentro del rango entre aproximadamente 8,0 y 11,0, tal como dentro del rango entre aproximadamente 8,0 y 10,0.
Se hace notar que en algunos casos, los compuestos de la invención pueden una débil actividad de inhibición de NEP. En dichos casos, aquellos con experiencia en el arte reconocerán que estos compuestos aún tienen utilidad como herramienta para investigación.
Los ensayos ej emplificativos para determinar las propiedades de los compuestos de la invención, tal como la actividad de inhibición de NEP, se describen en los Ejemplos e incluyen a modo de ilustración y no como limitación, ensayos que miden la inhibición de NEP (decrito en el Ensayo 1). Los ensayos secundarios útiles incluyen ensayos para medir la inhibición de la enzima convertidora de angiotensina (ACE) (también descrita en el ensayo 1) e inhibición de la aminopeptidasa P (APP) (descrita en Sulpizio et al. (2005) JPET 315:1306-1313). Un ensayo farmacodinámico para evaluar las potencias de inhibición in vivo para ACE y NEP en ratas anestesiadas se describe en el Ensayo 2 (véase también Seymour et al. (1985) Hypertension 7 (Supl I):I-35-I-42 y Wigle et al. (1992) Can. J. Physiol. Pharmacol. 70:1525-1528) , en donde la inhibición de ACE se mide como el porcentaje de inhibición de la respuesta presora de angiotensina I y la inhibición de NEP se mide como la salida urinaria de guanosina 3', 51 -monofosfato cíclico (cGMP) .
Hay muchos ensayos in vivo que pueden usarse para determinar utilidades adicionales de los compuestos de la invención. El modelo de rata espontáneamente hipertensa (SHR) consciente es un modelo de hipertensión dependiente de renina, y se describe en el Ensayo 3. Véase también Intengan et al. (1999) Circulation 100 (22) : 2267-2275 y Badyal et al. (2003) Indian Journal of Pharmacology 35:349-362. El modelo de rata consciente acetato de desoxicorticosterona-sal (DOCA-salt) es un modelo de hipertensión dependiente del volumen que es útil para mediar la actividad de NEP, y se describen en el Ensayo 4. Véase también Trapani et al. (1989) J. Cardiovasc. Pharmacol. 14:419-424, Intengan et al. (1999) Hypertension 34 ( 4 ): 907-913 , y Badyal et al. (2003) más arriba) . El modelo de DOCA-sal es particularmente útil para evaluar la capacidad de un compuesto de ensayo para reducir la presión sanguínea así como para medir la capacidad del compuesto de ensayo para prevenir o retrasar un aumento en la presión sanguínea. El modelo de rata hipertensa sensible a sal Dahl (DSS) es una modelo de hipertensión que es sensible a la sal de la dieta (NaCl) , y se describe en el Ensayo 5. Véase también Rapp (1982) Hypertension 4:753-763. El modelo de monocrotalina de hipertensión arterial pulmonar descrito, por ejemplo, en Kato et al. (2008) J. Cardiovasc. Pharmacol . 51(l):18-23, es un predictor confiable de eficacia clínica para el tratamiento de hipertensión arterial pulmonar. Los modelos animales de insuficiencia cardíaca incluyen el modelo de rata DSS para insuficiencia cardíaca y el modelo de fístula aorto-cava (cortocircuito AV) , de los cuales el último se describe, por ejemplo, en Norling et al. (1996) J. Amer. Soc. Nephrol. 7:1038-1044. Otros modelos animales, tal como los ensayos de placa caliente, golpe en la cola y formalina, se pueden usar para medir las propiedades analgésicas de los compuestos de la invención, así como el modelo de ligado del nervio espinal (SNL) . de dolor neuropático. Véase, por ejemplo, Malmberg et al. (1999) Current Protocols in Neuroscience 8.9.1-8.9.15.
Se espera que los compuestos de la invención inhiban la enzima NEP en cualquiera de los ensayos listados más arriba, o ensayos de naturaleza similar. Por lo tanto, los ensayos mencionados precedentemente son útiles para determinar la utilidad terapéutica de los compuestos de la invención, por ejemplo, su utilidad como agentes antihipertensivos o antidiarreicos . Otras propiedades y utilidades de los compuestos de la invención pueden demostrarse usando otros ensayos in vitro y in vivo bien conocidos por los especialistas en la técnica. Por lo tanto, cuando se expone sobre la actividad de los compuestos de la invención, se entiende que cualquiera de dichas prodrogas puede no exhibir la actividad esperada en un ensayo, pero se espera que exhiban la actividad deseada una vez metabolizada .
Se espera que los compuestos de la invención sean de utilidad para el tratamiento y/o la prevención de condiciones médicas que responden a la inhibición de NEP. Por lo tanto se espera que los pacientes que sufren de una enfermedad o trastorno que se trata por inhibición de la enzima NEP o por aumento de los niveles de sus sustratos peptidicos, puedan ser tratados por administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención. Por ejemplo, al inhibir a NEP, se espera que los compuestos potencien los efectos biológicos de los péptidos endógenos que son metabolizados por NEP, tal como los péptidos natriuréticos, bombesina, bradiquininas, calcitonina, endotelinas, encefalinas, neurotensina, sustancia P y el péptido vasoactivo intestinal. Por lo tanto, se espera que estos compuestos tengan otras acciones fisiológicas, por ejemplo, sobre los sistemas renal, nervioso central, reproductor y gastrointestinal.
En una forma de realización de la invención, los pacientes que sufren de una enfermedad o trastorno que es tratado por inhibición de la enzima NEP, reciben como tratamiento la administración de un compuesto de la invención que se encuentra en su forma activa, es decir, un compuesto de la fórmula I donde R1 y R4 son H, y R2, R3, R5, R6, a, b y Z son como se definieron para la fórmula I.
En otra forma de realización, los pacientes son tratados mediante la administración de un compuesto que es metabolizado in vi tro para formar un compuesto de la fórmula I donde R1 y R4 son H, y R2, R3, R5, R6, a, b y Z son como se definieron para la fórmula I.
En otra forma de realización, los pacientes son tratados mediante la administración de un compuesto de la invención que se encuentra en la forma de su prodroga en el grupo R1, es decir, un compuesto de la fórmula I donde R1 se selecciona entre -Ci-ealquilo, -Ci-3alquilen-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen-Ci-gheteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 2O] 1-3CH3, -Ci-6alquilen-OC (0) R10, -Ci-ealquilen-NR^R12, -Ci_6alquilen-C (O) R13, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-S02-Ci_6alquilo, En otra forma de realización, los pacientes son tratados mediante la administración de un compuesto de la invención que se encuentra en la forma de su prodroga en el grupo R4, es decir, un compuesto de la fórmula I donde R4 se selecciona entre -Ci_8alquilo, -Ci_3alquilen-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen-Ci-gheteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci-6alquilen-OC (0) R40, -Ci_6alquilen-NR1R42, -d-6alquilen-C (0) R43, -C0-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-S02-Ci-6alquilo, En aún otra forma de realización, los pacientes son tratados mediante administración de un compuesto de la invención que se encuentra en la forma de su prodroga en el grupo R1 y en el grupo R4.
Enfermedades cardiovasculares Se espera encontrar que los compuestos de la invención tengan utilidad para tratar y/o prevenir condiciones médicas tales como enfermedades cardiovasculares por potenciar los efectos de péptidos vasoactivos como los péptidos natriuréticos y bradiquinina . Véase, por ejemplo, Roques et al. (1993) Pharmacol. Rev. 45:87-146 y Dempsey et al. (2009) Amer. J. of Pathology 17 ( 3 ) : 782-796. Las enfermedades cardiovasculares de interés particular incluyen hipertensión e insuficiencia cardiaca. La hipertensión incluye, a modo de ilustración y no como limitación: hipertensión primaria, que también es referida como hipertensión esencial o hipertensión idiopática; hipertensión secundaria; hipertensión con enfermedad renal acompañante; hipertensión severa con o sin enfermedad renal acompañante; hipertensión pulmonar, incluyendo hipertensión arterial pulmonar; e hipertensión resistente. La insuficiencia cardiaca incluye, a modo de ilustración y no como limitación: insuficiencia cardiaca congestiva; insuficiencia cardiaca aguda; insuficiencia cardiaca crónica, por ejemplo con fracción de eyección ventricular izquierda reducida (también referida como insuficiencia cardiaca sistólica) o con fracción de eyección ventricular izquierda preservada (también referida como insuficiencia cardiaca diastólica) ; e insuficiencia cardiaca aguda y crónica descomponsada, con o sin enfermedad renal acompañante. Por lo tanto, una forma de realización de la invención se relaciona con un método para tratar hipertensión, particularmente hipertensión primaria o hipertensión arterial pulmonar, que comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención.
Para el tratamiento de hipertensión primaria, la cantidad terapéuticamente eficaz es típicamente la cantidad que es suficiente para disminuir la presión sanguínea del paciente. Esto podría incluir hipertensión de leve a moderada e hipertensión severa. Cuando se usa para tratar la hipertensión, el compuesto puede administrarse en combinación con otros agentes terapéuticos tales como antagonistas de la aldosterona, inhibidores de la aldosterona sintasa, inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina e inhibidores de doble acción enzima convertidora de angiotensina/neprilisina, activadores y estimuladores de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2) , vacunas de angiotensina-II , agentes antidiabéticos, agentes antilipídicos , agentes antitrombóticos, antagonistas del receptor de ATi e inhibidores de doble acción antagonistas del receptor de ATi/neprilisina, antagonistas del receptor ß?-adrenérgico, antagonistas de doble acción antagonista del receptor ß-adrenérgico/ai-receptor, bloqueadores de canal de calcio, diuréticos, antagonistas del receptor de endotelina, inhibidores de la enzima convertidora de endotelina, inhibidores de neprilisina, péptidos natriuréticos y sus análogos, antagonistas del receptor de depuración de péptidos natriuréticos , donantes de óxido nítrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, inhibidores de fosfodiesterasa (específicamente inhibidores de PDE-V) , agonistas del receptor de prostaglandina, inhibidores de renina, estimuladores y activadores de guanilato ciclasa soluble, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización particular de la invención, se combina un compuesto de la invención con un antagonista del receptor ATi, un diurético, un bloqueador del canal de calcio, o una combinación de los mismos, y se usa para tratar la hipertensión primaria. En otra forma de realización particular de la invención, se combina un compuesto de la invención con un antagonista del receptor de ATi, y se usa para tratar la hipertensión con enfermedad renal acompañante. Cuando se utiliza para tratar una hipertensión resistente, el compuesto se puede administrar en combinación con otros agentes terapéuticos tales como inhibidores de la aldosterona sintasa .
Para el tratamiento de hipertensión arterial pulmonar, Ia cantidad terapéuticamente eficaz es típicamente la cantidad que es suficiente para disminuir la resistencia vascular pulmonar. Otro objetivo de la terapia es mejorar la capacidad para el ejercicio del paciente. Por ejemplo, en el cuadro clínico, la cantidad terapéuticamente eficaz puede ser la cantidad que mejora la capacidad de un paciente para caminar cómodamente durante un periodo de 6 minutos (cubriendo una distancia de aproximadamente entre 20 y 40 metros) . Cuando el compuesto de se usa para tratar la hipertensión arterial pulmonar puede administrarse en combinación con otros agentes terapéuticos tales como antagonistas a-adrenérgicos, antagonistas de receptores ß?-adrenérgicos , antagonistas de receptores p2-adrenérgicos , inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, anticoagulantes, bloqueadores de canales de calcio, diuréticos, antagonistas del receptor de endotelina, inhibidores de PDE-V, análogos de prostaglandina, inhibidores de recaptura selectiva de seretonina, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización particular de la invención, un compuesto de la invención se combina con un inhibidor de PDE-V o un inhibidor de recaptura selectiva de serotonina y usado para tratar la hipertensión arterial pulmonar .
Otra forma de realización de la invención se relaciona con un método para tratar la insuficiencia cardiaca, en particular insuficiencia cardiaca congestiva (que incluye insuficiencia cardiaca congestiva sistólica y diastólica) , que comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención.
Típicamente, la cantidad terapéuticamente eficaz es la cantidad que es suficiente como para reducir la presión sanguínea y/o mejorar la función renal. En un cuadro clínico, la cantidad terapéuticamente eficaz puede ser la cantidad que es suficiente para mejorar la hemodinamia cardíaca, como por ejemplo reducción de la presión de enclavamiento, presión de la aurícula derecha, presión de llenado y resistencia vascular. En una forma de realización, el compuesto se administra como una forma de dosificación intravenosa. Cuando se usa parar tratar la insuficiencia cardíaca, el compuesto puede administrarse en combinación con otros agentes terapéuticos tal como antagonistas del receptor de adenosxna, destructores de productos terminales de glicosilacion avanzada, antagonistas de aldosterona, antagonistas de receptores de ???, antagonistas de receptores ß?-adrenérgicos, antagonistas de doble acción antagonista del receptor ß-adrenérgico/oti-receptor , inhibidores de quimasa, digoxina, diuréticos, inhibiidores de la enzima convertidora de endotelina (ECE), antagonistas del receptor de endotelina, péptidos natriuréticos y sus análogos, antagonistas del receptor de depuración de péptidos natriurético , donantes de ácido nítrico, análogos de prostaglandina, inhibidores de PDE-V, activadores de guanilato ciclasa soluble, y antagonistas del receptor de vasopresina. En una forma de realización particular de la invención, un compuesto de la invención se combina con una antagonista de aldosterona, un antagonista del receptor ß?-adrenérgico, un antagonista del receptor de ???, o un diurético, y se usa parar tratar la insuficiencia cardiaca congestiva.
Diarrea Como inhibidores de NEP, se espera que los compuestos de la invención inhiban la degradación de encefalinas endógenas y por lo tanto dichos compuestos también pueden ser útiles para el tratamiento de diarrea, que incluye diarrea infecciosa y secretora/aguada. Véase, por ejemplo, Baumer et al. (1992) Gut 33:753-758; Farting (2006) Digestive Diseases 24:47-58; y Margáis-Collado (1987) Eur. J. Pharmacol. 144(2) :125-132. Cuando los compuestos de la invención se usan para tratar diarrea, pueden combinarse con uno o más agentes antidiarreicos adicionales.
Enfermedades renales Se espera que los compuestos de la invención potencien la función renal debido a la potenciación de los efectos de péptidos vasoactivos como los péptidos natriuréticos y bradiquinina (véase Chen et al. (1999) Circulation 100:2443-2448; Lipkin et al. (1997) Kídney Int. 52:792-801; y Dussaule et al. (1993) Clin. Sci. 84:31-39) y tengan utilidad para tratar y/o prevenir enfermedades renales. Las enfermedades renales de interés particular incluyen nefropatia diabética, enfermedad renal crónica, proteinuria, y particularmente daño renal agudo o insuficiencia renal aguda (véase Sharkovska et al. (2011) Clin. Lab. 57:507-515 y Newaz et al. (2010) Renal Failure 32:384-390). Cuando el compuesto se usa para tratar la enfermedad renal, el compuesto puede administrarse en combinación con otros agentes terapéuticos tales como inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina , antagonistas del receptor de ???, y diuréticos.
Terapia preventiva Se espera que los compuestos de la invención sean útiles como terapia preventiva por potenciar los efectos de los péptidos natriuréticos , debido a los efectos antihipertróficos antifibróticos de los péptidos natriuréticos (véase Potter et al. (2009) Handbook of Experimental Pharmacology 191:341-366), por ejemplo para prevenir la progresión de insuficiencia cardiaca luego de infarto de miocardio, prevenir la restenosis arterial luego de angioplastia, prevenir el engrosamiento de las paredes de los vasos sanguíneos luego de operaciones vasculares, prevenir aterosclerosis , y prevenir angiopatia diabética.
Glaucoma Al potenciar los efectos de los péptidos natriuréticos, se espera que los compuestos de acuerdo con la invención sean de utilidad para tratar glaucoma. Véase, por ejemplo, Diestelhorst et al. (1989) International Ophthalmology 12:99-101. Cuando se usan para tratar el glaucoma, los compuestos de la invención pueden combinarse con uno o más agentes adicionales anti-glaucoma .
Alivio del dolor Como inhibidores de NEP, se espera que los compuestos de la invención inhiban la degradación de encefalinas endógenas y por lo tanto dichos compuestos también pueden tener utilidad como analgésicos. Véase, por ejemplo, Roques et al. (1980) Nature 288:286-288 y Thanawala et al. (2008) Current Drug Targets 9:887-894. Cuando se usan para tratar el dolor, los compuestos de la invención pueden combinarse con una o más drogas adicionales antinociceptivas tales como inhibidores de aminopeptidasa N o dipeptidil peptidasa III, agentes antiinflamatorios no esteroideos, inhibidores de la recaptura de monoamina, relajantes musculares, antagonistas del receptor de NMDA, agonistas del receptor opioide, agonistas del receptor de serotonina 5-HTiD, y antidepresivos triciclicos .
Otras utilidades Debido a sus propiedades de inhibición de NEP, también se espera que los compuestos de la invención sean útiles como agentes antitusivos, asi como también que sean útiles en el tratamiento de hipertensión portal asociada con cirrosis hepática (véase Sansoe et al. (2005) J. Hepatol. 43:791-798), cáncer (véase Vesely (2005) J. Investigative ed. 53:360-365), depresión (véase Noble et al. (2007) Exp. Opin. Ther. Targets 11:145-159), desordenes menstruales, alumbramiento pretérmino, preeclampsia, endometriosis , trastornos reproductivos (por ejemplo, infertilidad masculina y femenina, síndrome de ovario poliquístico, falla de implantación) , y disfunción sexual masculina y femenina, incluyendo disfunción eréctil masculina y trastorno de excitación sexual femenina. Más específicamente, se espera que los compuestos de la invención sean útiles en el tratamiento de disfunción sexual femenina (véase Pryde et al. (2006) J. Med. Chem. 49:4409-4424), que con frecuencia se define como una dificultad o incapacidad del paciente femenino para encontrar satisfacción en la expresión sexual. Esto cubre una variedad de diversos trastornos sexuales femeninos que incluyen, como ilustración y no como limitación, trastorno de deseo sexual hipoactivo, trastorno de excitación sexual, trastorno orgásmico y trastorno sexual por dolor. Cuando se usan para tratar tales trastornos, en especial la disfunción sexual femenina, los compuestos de la invención se pueden combinar con uno o más de los siguientes agentes secundarios: inhibidores de PDE-V, agonistas de dopamina, agonistas y/o antagonistas de receptores de estrogenos, andrógenos y estrogenos. Debido a sus propiedades de inhibición de NEP, también se espera que los compuestos de la invención tengan propiedades antiinflamatorias, y se espera que sean útiles como tales, en particular cuando se usan en combinación con estatinas.
Estudios recientes sugieren que NEP tiene un rol en la regulación de la función nerviosa en diabetes insulino deficiente y obesidad inducida por dieta. Coppey et al. (2011) Neuropharmacology 60:259-266. Por lo tanto, debido a sus propiedades de inhibición de NEP, también se espera que los compuestos de la invención sean útiles para proveer protección contra daño nervioso causado por diabetes u obesidad inducida por dieta.
La cantidad del compuesto de la invención que se administra por dosis o la cantidad total que se administra por dia puede estar predeterminada o se puede determinar en base a un paciente individual tomando en consideración numerosos factores, que incluyen la naturaleza y gravedad de la condición del paciente, la condición que esté siendo tratada, la edad, peso, y salud general del paciente, la tolerancia del paciente al agente activo, la ruta de administración, consideraciones farmacológicas tales como la actividad, eficacia, los perfiles farmacocinético y toxicológico del compuesto y todos los agentes secundarios que estén siendo administrados, etcétera. El tratamiento de un paciente que padece una enfermedad o condición médica (tal como hipertensión) puede comenzar con una dosificación predeterminada o una dosificación determinada por el médico que lo atiende, y continuará durante un periodo de tiempo necesario para prevenir, mejorar, suprimir, o aliviar los síntomas de la enfermedad o condición médica. Los pacientes sometidos a dicho tratamiento típicamente serán controlados sobre una base rutinaria para determinar la efectividad de la terapia. Por ejemplo, para tratar la hipertensión, se pueden realizar mediciones de presión sanguínea para determinar la efectividad del tratamiento. Hay indicadores similares para otras enfermedades y condiciones descriptas aquí, que son bien conocidos y que son fácilmente accesibles para el médico que atiende al paciente. El monitoreo continuo por parte del médico asegurará la administración de la cantidad óptima del compuesto de la invención en cualquier momento dado, así como también facilitará la determinación de la duración del tratamiento. Esto es particularmente valioso cuando también estén siendo administrados agentes secundarios, ya que su selección, dosificación, y la duración de la terapia también puede requerir ajustes. De esta manera, se pueden ajustar el régimen de tratamiento y el calendario de dosificación durante el transcurso de la terapia de tal manera que se administre la menor cantidad de agente activo que posea la efectividad deseada y, también, que dicha administración se continúe solo mientras sea necesaria para tratar con éxito la enfermedad o condición médica.
Herramientas de investigación Debido a que los compuestos de la invención poseen actividad de inhibición de la enzima NEP, dichos compuestos son útiles como herramientas de investigación para la investigación o el estudio de sistemas o muestras biológicas que tengan una enzima NEP, por ejemplo para estudiar enfermedades en donde la enzima NEP o sus sustratos peptidicos tengan un rol. En dichos estudios se puede emplear cualquier sistema o muestra biológica adecuada que tenga una enzima NEP, los que se pueden llevar a cabo ya sea in vitro o bien in vivo. Los sistemas o muestras biológicos apropiados para dichos estudios que son representativos incluyen a, pero en un sentido no limitativo, células, extractos celulares, membranas plasmáticas, muestras de tejidos, órganos aislados, mamíferos (como por ejemplo ratones, ratas, cobayos, conejos, perros, cerdos, humanos, etc.) y semejantes, siendo los mamíferos de particular interés. En una forma de realización particular de la invención, se inhibe la actividad enzimática de NEP en un mamífero mediante la administración de una cantidad inhibidora de NEP de un compuesto de la invención. Los compuestos de la invención también se pueden usar como herramientas de investigación al conducir ensayos biológicos usando dichos compuestos.
Cuando se usa como herramienta para investigación, típicamente se pone en contacto un sistema o muestra biológica que comprende una enzima NEP con una cantidad inhibidora de enzima NEP de un compuesto de la invención. Después de exponer el sistema o la muestra biológica al compuesto, se determinan los efectos de inhibir la enzima NEP usando procedimientos y equipos convencionales, tal como medición de la unión al receptor en un ensayo de unión o medición de los cambios mediados por el ligando en un ensayo funcional. La exposición abarca poner en contacto células o tejidos con el compuesto, administrar el compuesto a un mamífero, por ejemplo por ruta i.p., p.o, i.v., s.c, o administración por inhalación, y semejantes. Este paso de determinación puede incluir la medición de una respuesta (un análisis cuantitativo) o puede incluir hacer una observación (un análisis cualitativo) . Medir una respuesta involucra, por ejemplo, determinar los efectos del compuesto sobre el sistema o muestra biológica usando procedimientos y equipamiento convencional, tal como ensayos de actividad enzimática y medir sustrato o producto enzimático mediante cambios en los ensayos funcionales. Los resultados del ensayo se pueden utilizar para determinar el nivel de actividad asi como la cantidad de compuesto necesario para conseguir el resultado deseado, es decir, una cantidad inhibidora de la enzima NEP. Típicamente, el paso de determinación involucrará determinar los efectos de la inhibición de la enzima NEP.
Además, los compuestos de la invención se pueden usar como herramientas de investigación para evaluar otros compuestos químicos, y por consiguiente también son de utilidad en ensayos de selección para descubrir, por ejemplo, nuevos compuestos con actividad inhibidora de NEP. De esta manera, un compuesto de la invención se usa como un estándar en un ensayo para permitir la comparación de los resultados obtenidos con un compuesto de prueba y con compuestos de la invención para identificar los compuestos de prueba que tienen una actividad aproximadamente igual o superior, si hubiere alguna. Por ejemplo, los datos de pKi para un compuesto de prueba o un grupo de compuestos de prueba se comparan con los datos de pKi para un compuesto de la invención con el fin de identificar aquellos compuestos de prueba que presentan las propiedades deseadas, por ejemplo, los compuestos de prueba que tienen un valor de pKi aproximadamente igual o superior a un compuesto de la invención, si existe alguna. Este aspecto de la invención incluye, como formas de realización separadas, tanto la generación de datos de comparación (usando los ensayos apropiados) asi como también el análisis de los datos de la prueba para identificar los compuestos de prueba que son de interés. Por lo tanto, un compuesto de prueba se puede evaluar en un ensayo biológico, mediante un método que comprende los pasos de: (a) realizar un ensayo biológico con un compuesto de prueba para proveer un primer valor del ensayo; (b) realizar el ensayo biológico con un compuesto de la invención para proveer un segundo valor del ensayo; donde el paso (a) se lleva a cabo ya sea antes del paso (b) , luego del mismo o en forma concurrente con él; y (c) comparar el primer valor del ensayo del paso (a) con el segundo valor del ensayo del paso (b) . Los ejemplos de ensayos biológicos incluyen a un ensayo de inhibición de enzima NEP.
COMPOSICIONES Y FORMULACIONES FARMACÉUTICAS Los compuestos de acuerdo con la invención típicamente se le administran a un paciente bajo la forma de una composición o formulación farmacéutica. Dichas composiciones farmacéuticas pueden administrársele al paciente a través de cualquier ruta de administración aceptable, incluyendo, sin limitaciones, rutas de administración oral, rectal, vaginal, nasal, por inhalación, tópica (incluyendo transdérmica) , ocular y parenteral. Además, los compuestos de acuerdo con la invención pueden administrarse, por ejemplo por via oral, en múltiples dosis por dia (por ejemplo, dos, tres o cuatro veces por dia) , en una sola dosis diaria o una sola dosis semanal. Se comprenderá que se podrá usar cualquier forma de los compuestos de acuerdo con la invención, (es decir, la base libre, el ácido libre, una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, etc.) que sea apropiada para el modo de administración particular, en las composiciones farmacéuticas, según se describe en la presente.
Por lo tanto, en una forma de realización, la invención se relaciona con una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y un compuesto de acuerdo con la invención. Si se desea, las composiciones pueden contener otros agentes terapéuticos y/o de formulación. Al hablar sobre las composiciones, el "compuesto de la invención" aquí también se puede denominar un "agente activo" para distinguirlo de otros componentes de la formulación, como por ejemplo el vehículo. Por consiguiente, se comprenderá que el término "agente activo" incluye a los compuestos de fórmula I, así como sales, solvatos y prodrogas farmacéuticamente aceptables de dicho compuesto.
Las composiciones farmacéuticas de la invención contienen típicamente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de acuerdo con la invención. Aquellos con experiencia en la técnica reconocerán, sin embargo, que una composición farmacéutica puede contener más de una cantidad terapéuticamente eficaz, como por ejemplo en composiciones volumétricas, o menos de una cantidad terapéuticamente eficaz, es decir, dosis unitarias individuales diseñadas para una administración múltiple para conseguir una cantidad terapéuticamente eficaz. Típicamente, la composición contendrá entre aproximadamente 0,01 y 95 % en peso de agente activo, que incluye, entre aproximadamente 0,01 y 30 % en peso, como por ejemplo entre aproximadamente 0,01 y 10 % en peso, donde la cantidad real depende de la formulación en sí misma, de la ruta de administración, de la frecuencia de la dosificación, etcétera. En una forma de realización, una composición apropiada para una forma de dosificación oral, por ejemplo, puede contener aproximadamente entre 5 y 70 % en peso, o entre aproximadamente 10 y 60 % en peso de agente activo .
En las composiciones farmacéuticas de la invención puede usarse cualquier vehículo o excipiente convencional. La selección de un vehículo o excipiente particular, o de combinaciones de vehículos o de excipientes, dependerá del modo de administración que se usa para tratar a un paciente, o del tipo de afección médica o estado de enfermedad particular. Respecto de esto, la preparación de una composición apropiada para un modo de administración particular ha de estar dentro del alcance de aquellos con experiencia en la técnica farmacéutica. Además, los vehículos o excipientes que se utilizan en dichas composiciones se pueden obtener comercialmente . A modo de ilustración adicional, se describen técnicas de formulación convencionales en Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 20a edición, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (2000); y H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7 a edición, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (1999) .
Los ejemplos representativos de materiales que pueden servir como vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen a, sin limitaciones, los siguientes: azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidonas, tales como almidón de maíz y almidón de papa; celulosa, como por ejemplo celulosa microcristalina, y su derivados, tales como carboximetil celulosa de sodio, etil celulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; aceites, tales como aceite de maní, aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja; glicoles, tales como propilenglicol ; pedióles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol ; ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; ágar; agentes amortiguadores, tales como hidróxido de magnesio y hidróxido de aluminio; ácido alginico; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico; soluciones amortiguadoras con fosfato; gases propelentes comprimidos, como por ejemplo clorofluorocarburos e hidrofluorocarburos ; y otras sustancias compatibles no tóxicas empleadas en composiciones farmacéuticas.
Las composiciones farmacéuticas típicamente se preparan mezclando o combinando exhaustiva e íntimamente el agente activo con un vehículo farmacéuticamente aceptable y con uno o más ingredientes opcionales. Luego, a la mezcla mezclada uniformemente que se obtiene como resultado se le puede dar forma tabletas, cápsulas, pildoras, latas, cartuchos, dispensadores etcétera o se puede cargar dentro de los mismos, usando procedimientos y equipos convencionales.
En una realización, las composiciones farmacéuticas son apropiadas para la administración oral. Las composiciones apropiadas para administración oral pueden estar en la forma de cápsulas, tabletas, pildoras, pastillas, sellos, grajeas, polvos, gránulos; soluciones o suspensiones en un líquido acuoso o no acuoso; emulsiones líquidas aceite en agua o agua en aceite; elixires o jarabes; etcétera; cada una de las cuales contiene una cantidad predeterminada del agente activo .
Cuando es para administración oral en una forma de dosificación sólida (cápsulas, tabletas, pildoras etcétera) , la composición típicamente comprenderá el agente activo y uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, como por ejemplo citrato de sodio o fosfato dicálcico. Las formas de dosificación sólidas también pueden comprender: rellenos o extensores, tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y/o ácido silícico; aglutinantes, tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y/o acacia; humectantes, tales como glicerol; agentes desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, determinados silicatos, y/o carbonato de sodio; agentes que demoran la solubilización, tales como parafina; aceleradores de la absorción, tales como compuestos de amonio cuaternario; agentes humectantes, tales como alcohol cetílico y/o monoestearato de glicerol; absorbentes, tales como caolín y/o arcilla bentonita; lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, lauril sulfato de sodio y/o mezclas de éstos; agentes colorantes; y agentes amortiguadores .
También puede haber agentes de liberación, agentes humectantes, agentes de recubrimiento, edulcorantes, agentes saborizantes y aromatizantes, conservantes y antioxidantes presentes en las composiciones farmacéuticas. Los agentes ej emplificativos de recubrimiento para las tabletas, para las cápsulas, para las pildoras y semejantes incluyen a aquellos usados para recubrimientos entéricos, tales como ftalato de acetato de celulosa, ftalato de acetato de polivinilo, ftalato de hidroxipropil metilcelulosa, copolimeros de éster de ácido metacrilico, trimetilato de acetato de celulosa, carboximetiletilcelulosa, succinato de acetato de hidroxipropil metil celulosa, y semejantes. Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen a: antioxidantes solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteina, bisulfato de sodio, metabisulfato de sodio, sulfito de sodio y semejantes; antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado, lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol y semejantes; y agentes quelantes de metales, tales como ácido cítrico, ácido etilendiaminotetraacético, sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, y semejantes.
Las composiciones también pueden formularse para obtener la liberación lenta o controlada del agente activo usando, a modo de ejemplo, hidroxipropil metil celulosa en proporciones variables; u otras matrices de polímeros, liposomas y/o microesferas . Además, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden contener agentes opacantes, y pueden ser formuladas de manera que liberen el agente activo solamente o con preferencia en una determinada porción del tracto gastrointestinal, opcionalmente de una manera demorada. Los ejemplos de composiciones de embebido que pueden usarse incluyen sustancias poliméricas y ceras. El agente activo también puede estar en una forma microencapsulada, opcionalmente con uno o más de los excipientes descriptos previamente .
Las formas de dosificación líquidas para la administración oral incluyen, a modo de ilustración, las emulsiones, las microemulsiones , las soluciones, las suspensiones, loa jarabes y los elíxires farmacéuticamente aceptables. Las formas de dosificación líquidas típicamente comprenden el agente activo y un diluyente inerte, tal como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsionantes, tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol , 1,3-butilenglicol , aceites (por ejemplo, aceite de semilla de algodón, maní, maíz, germen, oliva, castor y sésamo) , glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de éstos. Las suspensiones pueden contener agentes de suspensión, tales como, por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, polioxietilen sorbitol y ésteres de sorbitan, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos.
Cuando se desea una administración oral, las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden envasar en una forma de dosificación unitaria. El término "forma de dosificación individual" hace referencia a una unidad físicamente discreta, apropiada para administrarle una dosis a un paciente, es decir, una unidad que contiene una cantidad predeterminada del agente activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado, ya sea solo o en combinación con una o más unidades adicionales. Por ejemplo, estas formas de dosificación individuales pueden ser cápsulas, comprimidos, pildoras o semejantes.
En otra forma de realización, las composiciones de la invención son apropiadas para administrar por inhalación, y típicamente estarán en la forma de un aerosol o un polvo. Dichas composiciones generalmente se administran usando dispositivos de administración bien conocidos, como por ejemplo un nebulizador, un inhalador de polvo seco, o de dosis medida. Los dispositivos nebulizadores producen una corriente de aire de alta velocidad que hace que la composición sea nebulizada como una niebla que es llevada dentro del tracto respiratorio del paciente. Una formulación para nebulizar indicativa comprende el agente activo disuelto en un vehículo para formar una solución, o micronizado y combinado con un vehículo para formar una suspensión de partículas micronizadas de tamaño respirable. Con los inhaladores de polvos secos puede administrarse el agente activo como un polvo de flujo libre que se dispersa en el aire que ingresa en el paciente durante la inspiración. Una formulación de polvo seco indicativa comprende el agente activo mezclado en seco con un excipiente tal como lactosa, almidón, manitol, dextrosa, ácido poliláctico, polilactida-co-glicólido, y combinaciones de los mismos. Los inhaladores de dosis medida descargan una cantidad medida del agente activo usando gas propelente comprimido. Una formulación de dosis medida indicativa comprende una solución o suspensión del agente activo en un propelente licuado, como por ejemplo un clorofluorocarburo o hidrofluoroalcano . Los componentes opcionales de dichas formulaciones incluyen a co-solventes , como por ejemplo etanol o pentano, y tensioactivos , como por ejemplo trioleato de sorbitan, ácido oleico, lecitina, glicerina, y lauril sulfato de sodio. Dichas composiciones típicamente se preparan agregando un fluorohidroalcano enfriado o presurizado a un recipiente apropiado que contiene sal, etanol (si está presente) y agente tensioactivo (si está presente) . Para preparar una suspensión, la sal se microniza y luego se combina con el propelente. Como alternativa, puede prepararse una formulación en suspensión secando a chorro un recubrimiento de un agente tensioactivo sobre partículas micronizadas del agente activo. Luego se carga la formulación en un recipiente metálico de aerosol, que forma una porción del inhalador.
Los compuestos de acuerdo con la invención también se pueden administrar por vía parenteral (por ejemplo, mediante inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular o intraperitoneal) . Para dicha administración, el agente activo se provee en una solución, suspensión, o emulsión estéril. Los solventes indicativos que sirven para preparar dichas formulaciones incluyen agua, solución salina, alcoholes de bajo peso molecular tales como propilenglicol , polietilenglicol , aceites, gelatina, ésteres de ácido graso tales como oleato de etilo, etcétera. Las formulaciones parenterales también pueden contener uno o más agentes antioxidantes, solubilizantes , estabilizantes, conservantes, agentes humectantes, emulsionantes, y dispersantes. Los agentes tensioactivos , agentes estabilizantes adicionales o agentes para ajustar el pH (ácidos, bases o soluciones amortiguadoras) y antioxidantes son de particular utilidad para proveer estabilidad a la formulación, por ejemplo, para minimizar o evitar la hidrólisis de los enlaces éster y amida que pueden estar presentes en el compuesto. Estas formulaciones pueden esterilizarse usando un medio inyectable estérilo, un agente esterilizante, filtración, irradiación o calor. En una forma de realización en particular, la formulación parenteral comprende una solución acuosa de ciclodextrina como vehículo farmacéuticamente aceptable. Las ciclodextrinas apropiadas incluyen moléculas cíclicas que contienen seis o más unidades a-D-glucopiranosa unidas en las posiciones 1,4 por uniones a como en la amilasa, ß-ciclodextrina o cicloheptaamilosa . Las ciclodextrinas indicativa incluyen derivados de ciclodextrina tales como hidroxipropil y sulfobutil éter ciclodextrinas tales como hidroxipropil^-ciclodextrina y sulfobutil éter ß-ciclodextrina . Los amortiguadores de pH indicativos para dichas formulaciones incluyen amortiguadores de pH a base de ácido carboxílico tales como soluciones amortiguadoras de pH al citrato, lactato y maleato.
Los compuestos de acuerdo con la invención también pueden administrarse por vía transdérmica , usando sistemas de administración transdérmica y excipientes conocidos. Por ejemplo, el compuesto puede mezclarse con potenciadores de la permeabilidad, tales como propilenglicol , monolaurato de polietilenglicol, azacicloalcan-2-onas y semejantes, y puede incorporarse en un parche o en un sistema de administración similar. En dichas composiciones transdérmicas , pueden usarse excipientes adicionales, lo que abarca los agentes gelatinizantes, emulsionantes y amortiguadores, si se lo desea .
Agentes secundarios Los compuestos de la invención pueden ser útiles como tratamiento único de una enfermedad o se pueden combinar con uno o más agentes terapéuticos adicionales con el objetivo de obtener el efecto terapéutico que se desea. Por consiguiente, en una forma de realización, las composiciones farmacéuticas de la invención contienen otras drogas que se coadministran con un compuesto de la invención. Por ejemplo, la composición puede comprender además una o más drogas (también denominadas como "agentes (s) secundarios (s) ") . Dichos agentes terapéuticos son bien conocidos en el arte, e incluyen a antagonistas de receptores de adenosina, antagonistas de receptores a-adrenérgicos , antagonistas de receptores ß?-adrenérgicos, agonistas de receptores 2-adrenérgicos, antagonista de receptores ß-adrenérgicos / antagonistas de receptores al de doble acción, destructores de productos terminales de glicosilación avanzada, antagonistas de aldosterona, inhibidores de aldosterona sintasa, inhibidores de aminopeptidasa N, andrógenos, inhibidores de enzima convertidora de angiotensina e inhibidores de enzima convertidora de angiotensina /neprilisina de doble acción, activadores y estimuladores de enzima convertidora de angiotensina 2, vacunas de angiotensina II, anticoagulantes, agentes antidiabéticos, agentes antidiarreicos, agentes antiglaucoma, agentes antilipidicos , agentes antinociceptivos, agentes antitrombóticos, antagonistas de receptores ATI y antagonistas de receptores ATI / inhibidores de neprilisina de doble acción y bloqueadores de receptor multifuncional de angiotensina, antagonistas de receptores de bradiquinina, bloqueadores de canales de calcio, inhibidores de quimasa, digoxina, diuréticos, agonistas de dopamina, inhibidores de enzima convertidora de endotelina, antagonistas de receptores de endotelina, inhibidores de HMG-CoA reductasa, estrógenos, agonistas y/o antagonistas de receptores de estrógenos, inhibidores de recaptación de monoamina, relajantes musculares, péptidos natriuréticos y sus análogos, antagonistas de receptores de depuración de péptido natriurético, inhibidores de neprilisina, donantes de óxido nítrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, antagonistas de receptores N-metil d-aspartasa, agonistas de receptores opioides, inhibidores de fosfodiesterasa, análogos de prostaglandina, agonistas de receptores de prostaglandinas , inhibidores de reni a, inhibidores de recaptación selectiva de serotonina, bloqueador de canal de sodio, estimuladores y activadores de guanilato ciclasa soluble, antidepresivos triciclicos, antagonistas de receptores de vasopresina, y combinaciones de los mismos. Los ejemplos específicos de estos agentes se detallan en la presente .
Por lo tanto, en aun otro aspecto de la invención, una composición farmacéutica comprende un compuesto de acuerdo con la invención, un segundo agente activo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En la composición también se pueden incluir un tercero, cuarto etc. agentes activos. En una terapia combinada, la cantidad de compuesto de la invención que se administra, así como la cantidad de los agentes secundarios, puede ser menor que la cantidad administrada típicamente en una monoterapia.
Los compuestos de acuerdo con la invención se pueden mezclar físicamente con el segundo agente activo para formar una composición que contiene a ambos agentes; o cada agente puede estar en composiciones separadas y distintas que son administradas al paciente simultáneamente o en tiempos separados. Por ejemplo, un compuesto de acuerdo con la invención se puede combinar con un segundo agente activo usando procedimientos y equipos convencionales para formar una combinación de agentes activos que comprende un compuesto de acuerdo con la invención y un segundo agente activo. Adicionalmente, los agentes activos pueden combinarse con un vehículo farmacéuticamente aceptable para formar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la invención, un segundo agente activo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En esta realización, los componentes de la composición típicamente se mezclan o se combinan para crear una mezcla física. La mezcla física se administra posteriormente en una cantidad terapéuticamente eficaz, usando cualquiera de las rutas que se describen en la presente documentación.
Como alternativa, los agentes activos pueden permanecer separados y distinguibles antes de la administración al paciente. En esta realización, los agentes no se mezclan físicamente unos con otros antes de la administración, sino que se administran simultáneamente o en ocasiones diferentes como composiciones separadas. Dichas composiciones se pueden envasar por separado o se pueden envasar juntas en un conjunto de elementos. Cuando se administran en tiempos separados, el agente secundario típicamente se administrará menos de 24 horas después de la administración del compuesto de la invención, variando en un rango entre concurrente con la administración del compuesto de la invención y aproximadamente 24 horas después de la dosis. Esto también se denomina administración en secuencia. Por consiguiente, un compuesto de acuerdo con la invención se puede administrar por vía oral simultáneamente o sucesivamente con otro agente activo usando dos tabletas, con una tableta para cada agente activo, donde secuencial o sucesivo puede significar que está siendo administrado inmediatamente después de la administración del compuesto de la invención o en algún momento posterior predeterminado (por ejemplo, una hora más tarde o tres horas más tarde) . También se contempla que el agente secundario se puede administrar más de 24 horas después de la administración del compuesto de la invención. Como alternativa, la combinación se puede administrar por diferentes rutas de administración, es decir, una en forma oral y la otra por inhalación.
En una forma de realización, el conjunto de elementos comprende una primera forma de dosificación que comprende un compuesto de acuerdo con la invención y al menos una forma de dosificación adicional que comprende uno o más de los agentes secundarios indicados en la presente, en cantidades suficientes como para poder realizar los métodos de la invención. La primera forma de dosificación y la segunda (o tercera, etc.,) forma de dosificación comprenden combinadas una cantidad terapéuticamente eficaz de agentes activos para el tratamiento o la prevención de una enfermedad o condición médica en un paciente.
Cuando se incluyen uno o más agentes secundarios, estos están presentes en una cantidad terapéuticamente eficaz de modo tal que típicamente se administran en una cantidad que produce un efecto terapéuticamente beneficioso cuando se coadministran con un compuesto de acuerdo con la invención. El agente secundario puede estar en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable, solvato, estereoisómero ópticamente puro, etcétera. El agente secundario también puede estar en la forma de una prodroga, por ejemplo, un compuesto con un grupo ácido carboxílico que se ha esterificado . Por lo tanto, los agentes secundarios que se enumeran en la presente incluyen a todas dichas formas, y se pueden obtener comercialmente o se pueden preparar usando procedimientos y reactivos convencionales.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores de adenosina, ejemplos representativos de los cuales incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, naxifilina, rolofilina, SLV-320, teofilina, y tonapofilina .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores -adrenérgicos , ejemplos representativos de los cuales incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, doxazosina, prazosina, tamsulosina, y terazosina.
Los compuestos de la invención también se pueden administrar en combinación con un antagonista de receptores ß?-adrenérgicos ( "bloqueadores ß?")· Los bloqueadores de receptores ß? representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, acebutolol, alprenolol, amosulalol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaxolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, bucindolol, bucumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, bubridina, butofilolol, carazolol, carteolol, carvedilol, celiprolol, cetamolol, cloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetolol, levobunolol, mepindolol, metipranolol , metoprolol tal como metoprolol succinato y tartrato de metoprolol, moprolol, nadolol, nadoxolol, nebivalol, nipradilol, oxprenolol, penbutolol, perbutolol, pindolol, practolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sufinalol, talindol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol, xibenolol, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización particular, el antagonista ß? se elige de atenolol, bisoprolol, metoprolol, propranolol, sotalol, y combinaciones de los mismos.
Típicamente, el bloqueador adrenérgico ß? se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 2 y 900 mg por dosis.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un agonista de receptores 2-adrenérgicos , ejemplos representativos de los cuales incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, albuterol, bitolterol, fenoterol, formoterol, indacaterol, isoetarina, levalbuterol, metaproterenol, pirbuterol, salbutamol, salmefamol, salmeterol, terbutalina, vilanterol, y similares. Típicamente, el agonista de receptores ß2-adrenérgicos se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 0,05 y 500 µg por dosis.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un destructor de productos terminales de glicosilación avanzada (AGE) , ejemplos de los cuales incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, alagebrio (o ALT-711) , y TRC4149.
En otra forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un antagonista de aldosterona, de los cuales los ejemplos representativos incluyen, pero en un sentido no limitativo, eplerenona, espironolactona y combinaciones de los mismos. Típicamente, el antagonista de aldosterona se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 5 y 300 mg por día.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor de aminopeptidasa N o dipeptidil peptidasa III, ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, bestatina y PC18 ( 2-amino-4-metilsulfonil butano tiol, metionina tiol) .
Los compuestos de acuerdo con la invención también se pueden administrar en combinación con un inhibidor de la enzima convertidora de angiotensina (ACE) . Los inhibidores de la ACE representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, accupril, alaceprilo, benazepril, benazeprilat , captopril, ceranapril, cilazapril, delapril, enalapril, enalaprilato, fosinopril, fosinoprilato, imidapril, lisinopril, moexipril, monopril, moveltopril, pentopril, perindopril, quinapril, quinaprilato, ramipril, ramiprilato, saralasina acetato, espirapril, temocapril, trandolapril , zofenopril, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el inhibidor de ACE se selecciona de: captopril, benazepril, enalapril, lisinopril, ramipril, y combinaciones de los mismos. Típicamente, el inhibidor de ACE se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 1 y 150 mg por día.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor de enzima convertidora de angiotensina/neprilisina (ACE/NEP) de doble acción, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo: AVE-0848 (ácido (4S, 7S,12bR)-l- [3-metil-2 (S) -sulfanilbutiramido] -6-oxo-l, 2,3,4,6,7,8, 12b-octahidropirido [2, 1-a] [2] benzazepina-4- carboxílico) ; AVE-7688 (ilepatril) y su compuesto de origen; BMS-182657 (ácido 2- [2-oxo-3 (S) - [3-fenil-2 (S) -sulfanilpropionamido] -2,3,4,5-tetrahidro-lH-l-benzazepin-l-il] acético) ; CGS-35601 (N-[l-[4-metil-2 (S) -sulfanilpentanamido] ciclopentilcarbonil ] -L-triptofano) ; fasidotril; fasidotrilate; enalaprilat; ER-32935 (ácido (3R, 6S, 9aR) -6- [3 (S)metil-2 (S) -sulfanilpentanamido] -5-oxoperhidro tiazolo [3, 2-a] -azepina-3- carboxílico); gempatrilat; MDL-101264 (ácido (4S, 7S, 12bR) -7- [ 2 (S) - ( 2-morfolino acetiltio) -3-fenilpropionamido] -6-oxo- 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 12b-octahidro pirido [2 , 1-a] [2 ] benzazepina-4-carboxílico) ; MDL-101287 (ácido [4S- [4a, 7 (R*) , 12bp] ] -7- [2- (carboximetil) -3-fenilpropionamido] -6-oxo-l, 2,3,4,6,7,8, 12b-octahidropirido [2 , 1-a] [ 2 ] benzazepina-4-carboxílico) ; omapatrilat; RB-105 (N- [ 2 (S) - (mercaptometil ) -3 (R) -fenilbutil] -L-alanina) ; sampatrilat; SA-898 ( (2R,4R) -N- [2- (2-hidroxifenil) -3- (3-mercaptopropionil) tiazolidin-4-ilcarbonil] -L-fenilalanina) ; Sch-50690 (N- [ 1 (S) -carboxi-2- [N2- (metano sulfonil) -L-lisilamino] etil] -L-valil-L-tirosina ) ; y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el inhibidor de ACE/NEP se selecciona de: AVE-7688, enalaprilato, fasidotrilo, fasidotrilato, omapatrilat, sampatrilat, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un activador o estimulador de enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2).
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con una vacuna de angiotensina II, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo ATR12181 y CYTOO 6-AngQb .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un anticoagulante, ejemplos representativos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, cumarinas tales como warfarina; heparina; e inhibidores de trombina directa tales como argatroban, bivalirudina, dabigatran, y lepirudina.
En aun otra forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un agente anti-diabético. Los agentes antidiabéticos representativos incluyen a drogas inyectables como asi también a drogas oralmente eficaces, y combinaciones de los mismos. Los ejemplos de drogas inyectables incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, insulina y derivados de insulina. Los ejemplos de drogas oralmente eficaces incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo biguanidas tales como metformina; antagonistas de glucagón; inhibidores de -glucosidasa tales como acarbosa y miglitol; inhibidores de dipeptidil peptidasa IV (inhibidores de DPP-IV) tales como alogliptina, denagliptina, linagliptina, saxagliptina, sitagliptina, y vildagliptina; meglitinidas tales como repaglinida; oxadiazolidinedionas; sulfonilureas tales como clorpropamida, glimepirida, glipizida, gliburida, y tolazamida; tiazolidinedionas tales como pioglitazona y rosiglitazona; y combinaciones de los mismos.
En otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con tratamientos antidiarreicos . Las opciones representativas de tratamiento incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, soluciones para rehidratación oral (ORS) , loperamida, difenoxilato, y bismuto sabsalicilato.
En aun otra forma de realización, un compuesto de acuerdo con la invención se administra en combinación con un agente anti-glaucoma . Los agentes anti-glaucoma representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo: agonistas -adrenérgicos tales como brimonidina; antagonistas de receptores ß?-adrenérgico; ß?-bloquenates tópicos tales como betaxolol, levobunolol, y timolol; inhibidores de anhidrasa carbónica tales como acetazolamida, brinzolamida, o dorzolamida; agonistas colinérgicos tales como cevimelina y DMXB-anabaseina; compuestos de epinefrina; mióticos tales como pilocarpina; y análogos de prostaglandina .
En aun otra forma de realización, un compuesto de acuerdo con la invención se administra en combinación con un agente antilipidico . Los agentes antilipidicos representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo inhibidores de proteina transferidora de ésteres de colesterilo (CETP) tales como anacetrapib, dalcetrapib, y torcetrapib; estatinas tales como atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, rosuvastatina y simvastatina ; y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un agente antitrombótico. Los agentes antitrombóticos representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo aspirina; agentes antiplaquetarios tales como clopidogrel, prasugrel, y ticlopidina; heparina, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores ???, también como bloqueador de receptores de angiotensina II tipo 1 (ARB) . Los ARBs representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, abitesartan, azilsartan (por ejemplo, azilsartan medoxomil) , bencillosartan, candesartan, candesartan cilexetil, elisartan, embusartan, enoltasosartan, eprosartan, EXP3174, fonsartan, forasartan, glicillosartan, irbesartan, isoteolina, losartan, medoximil, milfasartan, olmesartan (por ejemplo, olmesartan medoxomil) , opomisartan, pratosartan, ripisartan, saprisartan, saralasin, sarmesin, TAK-591, tasosartan, telmisartan, valsartan, zolasartan, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización particular, el ARB se elige de azilsartan medoxomil, candesartan cilexetil, eprosartan, irbesartan, losartan, olmesartan medoxomil, irbesartan, saprisartan, tasosartan, telmisartan, valsartan, y combinaciones de los mismos. Los ejemplos de sales y/o prodrogas incluyen a candesartan cilexetil, eprosartan mesilato, sal de potasio losartan, y olmesartan medoxomil. Típicamente, el ARB se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 4 y 600 mg por dosis, con dosificaciones diarias indicativas dentro del rango entre 20 y 320 mg por día.
Los compuestos de la invención también se pueden administrar en combinación con un agente de doble acción, tal como un antagonista de receptores ATI/inhibidor de neprilisina (ARB/NEP) , ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, los compuestos que se describen en las Publicaciones de EE.UU. Nos 2008/0269305 y 2009/0023228, ambas de Allegretti et al. presentadas el 23 de abril de 2008, tal como el compuesto ácido ' -{2-etoxí-4-etil-5- [ ( (S) -2-mercapto-4-metilpentanoilamino) -metil] imidazol-l-ilmetil } -3 ' -fluorobifenil-2-carboxilico .
Los compuestos de la invención también se pueden administrar en combinación con bloqueadores multifuncionales de receptores de angiotensina como se describe en Kurtz & Klein (2009) Hypertension Research 32:826-834.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores de bradiquinina, por ejemplo, icatibant (HOE-140) . Se espera que esta terapia de combinación pueda presentar la ventaja de prevenir el angioedema u otras consecuencias no deseadas de niveles elevados de bradiquinina.
En una forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un bloqueador de canales de calcio. Los bloqueadores del canal de calcio representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, amlodipina, anipamilo, aranipina, barnidipina, benciclano, benidipina, bepridilo, clentiazem, cilnidipina, cinarizina, diltiazem, efonidipina, elgodipina, etafenona, felodipina, fendilina, flunarizina, galopamilo, isradipina, lacidipina, lercanidipina, lidoflazina, lomerizina, manidipina, mibefradilo, nicardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nilvadipina, nimodipina, nisoldipina, nitrendipina, nivaldipina, perhexilina, prenilamina, riosidin, semotiadil, terodilina, tiapamilo, verapamilo, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el bloqueador del canal de calcio se selecciona de amlodipina, bepridilo, diltiazem, felodipina, isradipina, lacidipina, nicardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nimodipina, nisoldipina, ryosidin, verapamilo, y combinaciones de los mismos. Típicamente, el bloqueador de canal de calcio se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 2 y 500 mg por dosis .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor de quimasa, tal como TPC-806 y 2- ( 5-formilamino-6-oxo-2-fenil-1, 6-dihidropirimidina-l-il ) -N- [ { 3, 4-dioxo-l-fenil-7- (2-piridiloxi) } -2-heptil] acetamida (NK3201) .
En una forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un diurético. Los diuréticos representativos incluyen a, pero en un sentido no limitativo: inhibidores de anhidrasa carbónica tales como acetazolamida y diclorfenamida; diuréticos de asa, que incluyen a derivados de sulfonamida tales como acetazolamida, ambusida, azosemida, bumetanida, butazolamida, cloraminofenamida, clofenamida, clopamida, clorexolona, disulfamida, etoxolamida, furosemida, mefrusida, metazolamida, piretanida, torsemida, tripamida, y xipamida, asi como también a diuréticos no sulfonamida tales como ácido etacrinico y otros compuestos de ácido fenoxiacético tales como ácido tienilico, indacrinona y quincarbato; diuréticos osmóticos tales como manitol; diuréticos ahorradores de potasio, que incluyen a los antagonistas de aldosterona tales como espironolactona, e inhibidores del canal de Na+ tales como amiloride y triamtereno; tiazida y diuréticos similares a la tiazida tales como altiazida, bendroflumetiazida, bencilhidroclorotiazida, benzotiazida, butiazida, clortalidona, clorotiazida, ciclopentiazida, ciclotiazida, epitiazida, etiazida, fenquizona, flumetiazida, hidroclorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilclotiazida, meticrane, metolazona, paraflutizida, politiazida, quinetazona, teclotiazida, y triclorometiazida; y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el diurético se selecciona de amilorida, bumetanida, clorotiazida, clortalidona, diclorfenamida, ácido etacrinico, furosemida, hidroclorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilclotiazida, metolazona, torsemida, triamtereno, y combinaciones de los mismos. El diurético se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 5 y 50 mg por día, más típicamente entre 6 y 25 mg por día, en donde las dosificaciones comunes son de 6,25 mg, 12,5 mg o 25 mg por día.
Los compuestos de acuerdo con la invención también se pueden administrar en combinación con un inhibidor de la enzima convertidora de endotelina (ECE) , cuyos ejemplos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, fosforamidon, CGS 26303, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización particular, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores de endotelina. Los antagonistas de receptores de endotelina representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo: antagonistas selectivos de receptores de endotelina que afectan los receptores de endotelina A, tales como avosentan, ambrisentan, atrasentan, BQ-123, clazosentan, darusentan, sitaxentan, y zibotentan; y antagonistas duales de receptores de endotelina que afectan tanto a receptores de endotelina A como B, tales como bosentan, macitentan, tezosenta .
En aun otra forma de realización, un compuesto de la invención se administra en combinación con uno o más inhibidores de HMG-CoA reductasa, que también son conocidos como estatinas. Las estátinas representativas incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pitavastatina, pravastatina, rosuvastatina y simvastatina .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor de recaptación de monoamina, ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, inhibidores de tales de recaptación de norepinefriña como atomoxetina, buproprion y el metabolito de buproprion hidroxibuproprion, maprotilina, reboxetina, y viloxazina; inhibidores de recaptación selectiva de serotonina (SSRIs) tales como citalopram y el metabolito de citalopram desmetilcitalopram, dapoxetina, escitalopram (por ejemplo, escitalopram oxalato) , fluoxetina y el metabolito demetilado de fluoxetina norfluoxetina, fluvoxamina (por ejemplo, fluvoxamina maleato) , paroxetina, sertralina y el metabolito de sertralina demetilsertralina; inhibidores duales de recaptación de serotonina y norepinefriña (SNRIs) tales como bicifadina, duloxetina, milnacipran, nefazodona, y venlafaxina; y combinaciones de los mismos.
En otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un relajante muscular, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo carisoprodol, clorzoxazona, ciclobenzaprina, diflunisal, metaxalona, metocarbamol, y combinaciones de los mismos .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un péptido natriurético o análogo, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, carperitida, CD-NP (Nile Therapeutics) , CU-NP, nesiritida, PL-3994 (Palatin Technologies, Inc.), ularitida, cenderitida, y compuestos que se describen en Ogawa et al (2004) J.Biol.Chem. 279:28625-31. Estos compuestos también se denominan como agonistas de receptores A de péptido natriurético (NPR-A) . En otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con antagonista de receptores de depuración de péptido natriurético (NPR-C) tal como SC-46542, cANF (4-23), y AP-811 (Véase (2000) Bioorg Med Chem Lett 10:1949-52). Por ejemplo, AP-811 ha demostrado sinergismo cuando se combina con el inhibidor de NEP, tiorfan (Wegner (1995) Clin.Exper.Hypert. 17:861-876).
En otra forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un inhibidor de neprilisina (NEP) . Los inhibidores de la NEP representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo: AHU-377; candoxatril; candoxatrilat ; dexecadotril (éster bencílico de ( +) -N- [2 (R) - (acetiltiometil) -3-fenilpropionil] glicina) ; CGS-24128 (ácido 3- [3- (bifenil-4-il) -2- (fosfonometilamino) propionamido] ropiónico) / CGS-24592 (ácido (S) -3- [3- (bifenil-4-il) -2- ( fosfonometilamino) propionamido] propiónico) ; CGS-25155 (éster bencílico de N- [ (R) - (acetiltiometil ) -10-oxo-l-azaciclodecan-2 (S) -ilcarbonil] -4 (R) -hidroxi-L-prolina) ; derivados de ácido 3- ( 1-carbamoilciclohexil ) propiónico descritos en WO 2006/027680 de Hepworth et al. (Pfizer Inc.); J V-390-1 (2 (R) -bencil-3- (N-hidroxicarbamoil) propionil-L-isoleucil-L-leucina) ; ecadotril; fosforamidon; retrotiorfano; RU-42827 (2- (mercaptometil ) -N- (4-piridinil) bencenopropionamida) ; RU-44004 (N- (4-morfolinil) -3-fenil-2- (sulfanilmetil) propionamida) ; SCH-32615 ( (S)-N- [N- (1-carboxi- 2-feniletil) -L-fenilalanil] -ß-alanina) y su prodroga SCH-34826 ( (S)-N-[m-ll-[ [ (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il)metoxi] carbonil] -2-feniletil] -L-fenilalanil ] -ß-alanina) ; sialorfina; SCH-42495 (éster etílico de N-[2(S)- (acetilsulfanilmetil ) -3- (2-metilfenil) propionil] -L-metionina) ; spinorphin; SQ-28132 (N- [2- (mercaptometil ) -1-oxo- 3-fenilpropil ] leucina) ; SQ-28603 (N- [2- (mercaptometil) -1-oxo-3-fenilpropil] -ß-alanina) ; SQ-29072 (ácido 7-[[2- (mercaptometil) -l-oxo-3-fenilpropil ] amino] heptanoico) ; tiorfan y su prodroga racecadotril; UK-69578 (ácido cis-4- [ [ [1- [2-carboxi-3- (2-metoxietoxi ) propil ] ciclopentil ] carbonil ] amino] ciclohexano carboxilico) ; UK-447.841 (ácido 2-{l-[3-(4-clorofenil) propilcarbamoil] ciclopentilmetil } -4-metoxibutirico) ; UK-505.749 (ácido (R) -2-metil-3- { 1- [3- (2-metilbenzotiazol-6-il) propilcarbamoil] ciclopentil }propiónico) ; ácido 5-bifenil-4-Í1-4- ( 3-carboxipropionilamino) -2-metilpentanoico y éster etílico del ácido 5-bifenil-4-il-4- ( 3-carboxipropionilamino) -2-metilpentanoico (WO 2007/056546) ; daglutril [ácido (3S,2'R) -3-{ 1- [2 ' - (etoxicarbonil) -4 ' -fenilbutil] ciclopentan-1-carbonilamino } -2 , 3, , 5-tetrahidro-2-oxo-lH-l-benzazepina-l-acético] descrito en WO 2007/106708 de Khder et al. (Novartis AG) / y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el inhibidor de la NEP se selecciona de AHU-377, candoxatrilo, candoxatrilat , CGS-24128, fosforamidona, SCH-32615, SCH-34826, SQ-28603, tiorfan, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización particular, el inhibidor de NEP es un compuesto tal como daglutril o CGS-26303 (ácido [N- [2- (bifenil-4-il) -1 (S) - (lH-tetrazol-5-il) etil] amino] metilfosfónico) , que también tiene actividad tanto como un inhibidor de la enzima convertidora de endotelina (ECE) como de NEP. También se pueden usar otros compuestos de doble acción ECE/NEP. El inhibidor de la NEP se administrará en una cantidad suficiente para proveer entre aproximadamente 20 y 800 mg por dia, con dosificaciones diarias típicas dentro del rango entre 50 y 700 mg por día, más comúnmente entre 100 y 600 o entre 100 y 300 mg por día.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un donante de óxido nítrico, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo nicorandil; nitratos orgánicos tales como pentaeritritol tetranitrato; y sidnoniminas tales como linsidomina y molsidomina.
En aun otra forma de realización, los compuestos de acuerdo con la invención se administran en combinación con un agente antiinflamatorio no esteroide (NSAID) . Los NSAID representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo: Los NSAID representativos incluyen, pero de manera no taxativa: acemetacina, ácido acetil salicílico, alclofenac, alminoprofeno, amfenac, amiprilosa, amoxiprina, anirolac, apazona, azapropazona, benorilato, benoxaprofeno, bezpiperilon, broperamol, ácido buclóxico, carprofeno, clidanac, diclofenac, diflunisal, diftalona, enolicam, etodolac, etoricoxib, fenbufen, fenclofenac, ácido fenclozico, fenoprofeno, fentiazac, feprazona, ácido flufenamico, flufenisal, fluprofeno, flurbiprofeno, furofenac, ibufenac, ibuprofeno, indometacina, indoprofeno, isoxepac, isoxicam, ketoprofeno, ketorolac, lofemizol, lornoxicam, meclofenaraato, ácido meclofenámico, ácido mefenámico, meloxicam, mesalamina, miroprofeno, mofebutazona, nabumetona, naproxeno, ácido niflumico, oxaprozina, oxpinac, oxifenbutazona, fenilbutazona, piroxicam, pirprofeno, pranoprofeno, salsalato, sudoxicam, sulfasalazina, sulindac, suprofeno, tenoxicam, tiopinac, ácido tiaprofénico, tioxaprofeno, ácido tolfenámico, tolmetina, triflumidato, zidometacina, zomepirac, y combinaciones de los mismos. En una forma de realización en particular, el NSAID se selecciona de etodolac, flurbiprofeno, ibuprofeno, indometacina, cetoprofeno, cetorolac, meloxicam, naproxeno, oxaprozina, piroxicam, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores N-metil d-aspartato (NMDA) , ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, amantadina, dextrometorfan, dextropropoxifeno, ketamina, cetobemidona, memantina, metadona, y semejantes.
En aun otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un agonista de receptor opioide (también denominados como analgésicos opioides) . Los agonistas de receptor opioide representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo buprenorfina, butorfanol, codeína, dihidrocodeina, fentanil, hidrocodona, hidromorfona, levallorfan, levorfanol, meperidina, metadona, morfina, nalbufina, nalmefeno, nalorfina, naloxona, naltrexona, nalorfina, oxicodona, oximorfona, pentazocina, propoxifeno, tramadol, y combinaciones de los mismos. En ciertas formas de realización, el agonista de receptores opioides se elige de codeina, dihidrocodeina, hidrocodona, hidromorfona, morfina, oxicodona, oximorfona, tramadol, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización particular, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor de fosfodiesterasa (PDE) , en particular un inhibidor de PDE-V. Los inhibidores representativos de PDE-V incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, avanafil, lodenafil, mirodenafil, sildenafil (Revatio®) , tadalafil (Adcirca®) , vardenafil (Levitra®) , y udenafil.
En otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un análogo de prostaglandina (también denominados como prostanoides o análogos de prostaciclina) . Los análogos representativos de prostaglandina incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, beraprost sódico, bimatoprost, epoprostenol, iloprost, latanoprost, tafluprost, travoprost, y treprostinil , con bimatoprost, latanoprost, y tafluprost siendo de particular interés .
En aun otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un agonista de receptores de prostaglandinas, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, bimatoprost, latanoprost, travoprost, y semejantes.
Los compuestos de acuerdo con la invención también se pueden administrar en combinación con un inhibidor de renina, cuyos ejemplos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo, aliskiren, enalkiren, remikiren, y combinaciones de los mismos .
En otra forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un inhibidor selectivo de recaptación de serotonina (SSRI) . Los SSRI representativos incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo citalopram y el metabolito de citalopram desmetilcitalopram, dapoxetina, escitalopram (por ejemplo, escitalopram oxalato) , fluoxetina y el desmetil metabolito de fluoxetina norfluoxetina, fluvoxamina (por ejemplo, fluvoxamina maleato) , paroxetina, sertralina y el metabolito de sertralina demetilsertralina, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un agonista de receptores de serotonina 5-HT1D, ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, triptanos tales como almotriptan, avitriptan, eletriptan, frovatriptan, naratriptan rizatriptan, sumatriptan, y zolmitriptan .
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un bloqueador de canal de sodio, ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, carbamazepina, fosfenitoina, lamotrignina, lidocaina, mexiletina, oxcarbazepina , fenitoina, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un activador y estimulador de guanilato ciclasa soluble, ejemplos del cual incluyen, a modo de ejemplo ilustrativo ataciguat, riociguat, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antidepresivo triciclico (TCA) , ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, amitriptilina, amitriptilinoxida, butriptilina, clomipramina , demexiptilina , desipramina, dibenzepina, dimetacrina, dosulepina, doxepina, imipramina, imipraminoxida, lofepramina, melitracen, metapramina, nitroxazepina, nortriptilina, noxiptilina, pipofezina, propizepina, protriptilina, quinupramina, y combinaciones de los mismos.
En una forma de realización, los compuestos de la invención se administran en combinación con un antagonista de receptores de vasopresina, ejemplos del cual incluyen, a modo de ilustración y no como limitación, conivaptan y tolvaptan.
Los agentes terapéuticos combinados secundarios también pueden ser útiles en terapias de combinación adicionales con los compuestos de acuerdo con la invención. Por ejemplo, los compuestos de la invención se pueden combinar con un diurético y un ARB, o un bloqueador de canal de calcio y un ARB, o un diurético y un inhibidor de ACE, o un bloqueador de canal de calcio y una estatina. Los ejemplos específicos incluyen a una combinación del inhibidor de ACE enalapril (en la forma de sal de maleato) y el diurético hidroclorotiazida, que se comercializa bajo la marca Vaseretic®, o una combinación del bloqueador de canales de calcio amlodipina (en la forma de sal besilato) y el ARB olmesartan (en forma de la prodroga medoxomil) , o una combinación de un bloqueador de canales de calcio y una estatina, se pueden utilizar también todos ellos con los compuestos de acuerdo con la invención. Otros agentes terapéuticos tales como agonistas del receptor 2~adrenérgico y antagonistas del receptor de vasopresina también pueden ser útiles en la terapia de combinación. Los agonistas del receptor a2-adrenérgico indicativos incluyen clonidina, dexmedetomidina, y guanfacina .
Las siguientes formulaciones ilustran composiciones farmacéuticas representativas de la invención.
Cápsulas de gelatina dura indicativas para administración oral Se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (50 g) , 440 g de lactosa secada por aspiración y 10 g de estearato de magnesio. La composición que se obtiene como resultado se carga luego dentro de cápsulas de gelatina dura (500 mg de composición por cápsula). Como alternativa, se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (20 mg) con almidón (89 mg) , celulosa microcristalina (89 mg) y estearato de magnesio (2 mg) . Luego, se hace pasar la mezcla a través de un tamiz No. 45 mesh U.S. y se usa para llenar cápsulas de gelatina dura (200 mg de composición por cápsula) .
Como alternativa, se mezclan exhaustivamente un compuesto de la invención (30 g) , un agente secundario (20 g) , 440 g de lactosa secada por aspiración y 10 g de estearato de magnesio, y se procesan como se describió previamente .
Formulación indicativa para cápsulas de gelatina para administración oral Se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (100 mg) con monooleato de polioxietilensorbitán (50 mg) y almidón en polvo (250 mg) . La mezcla se carga luego dentro de una cápsula de gelatina (400 mg de composición por cápsula) . Como alternativa, se mezclan exhaustivamente un compuesto de la invención (70 mg) y un agente secundario (30 mg) con polioxietileno sorbitán monooleato (50 mg) y almidón en polvo (250 mg) , y se carga la mezcla resultante en una cápsula de gelatina (400 mg de composición por cápsula) .
Como alternativa, se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (40 mg) con celulosa microcristalina (Avicel PH 103; 259,2 mg) y estearato de magnesio (0,8 mg) . La mezcla se carga luego dentro de una cápsula de gelatina (Tamaño #1, Blanca, Opaca) (300 mg de composición por cápsula) .
Formulación indicativa de tableta para administración oral Se hace pasar un compuesto de acuerdo con la invención (10 mg) , almidón (45 mg) y celulosa microcristalina (35 mg) a través de un tamiz N° 20 mesh U.S. y se mezclan exhaustivamente. Los gránulos que se producen de esa manera se secan a entre 50 y 60°C y se hacen pasar a través de un tamiz No.16 mesh U.S. Se mezcla una solución de polivinilpirrolidona (4 mg como una solución al 10 % en agua estéril) con carboximetil almidón sódico (4,5 mg) , estearato de magnesio (0,5 mg) , y talco (1 mg) , y luego esta mezcla se hace pasar a través de un tamiz No.16 mesh U.S. El carboximetil almidón sódico, estearato de magnesio y talco se agregan luego a los gránulos . Después de mezclar, se comprime la mezcla en una máquina formadora de tabletas para obtener una tableta con un peso de 100 mg.
Como alternativa, se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (250 mg) con celulosa microcristalina (400 mg) , humo de dióxido de silicona (10 mg) y ácido esteárico (5 mg) . La mezcla se comprime luego para formar tabletas (665 mg de composición por tableta).
Como alternativa, se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (400 mg) con almidón de maíz (50 mg) , croscarmelosa sódica (25 mg) , lactosa (120 mg) y estearato de magnesio (5 mg) . La mezcla se comprime luego para formar una tableta con una única ranura (600 mg de composición por tableta) .
Como alternativa, se mezcla exhaustivamente un compuesto de acuerdo con la invención (100 mg) con almidón de maíz (100 mg) con una solución acuosa de gelatina (20 mg) . Se seca la mezcla y se muele a un polvo fino. Luego se mezclan celulosa microcristalina (50 mg) y estearato de magnesio (5 mg) con la formulación de gelatina, se granulan y la mezcla resultante se comprime para formar tabletas (100 mg del compuesto de la invención por tableta) .
Ejemplo de una formulación en suspensión que puede administrarse por vía oral Los ingredientes se mezclaron para formar una suspensión que contiene 100 mg del compuesto de la invención por cada 10 mi de suspensión.
Formulación liquida indicativa para administración oral Una formulación liquida apropiada tiene una solución amortiguadora de pH a base de ácido carboxilico tal como las soluciones amortiguadoras de pH de citrato, lactato y maléate Por ejemplo, un compuesto de la invención (que se puede premezclar con DMSO) se mezcla con una solución amortiguadora de pH de citrato de amonio 100 mM y el pH se ajusta a pH 5, o que se mezcla con una solución 100 mM de ácido cítrico y el pH se ajusta a pH 2. Dichas soluciones también pueden incluir un excipiente solubilizante tal como una ciclodextrina, por ejemplo la solución puede incluir 10 % en peso hidroxipropil- -ciclodextrina.
Otras formulaciones apropiadas incluyen a una solución de NaHC03 al 5%, con ciclodextrina o sin ella.
Formulación inyectable indicativa para administrar por inyección Se mezcla un compuesto de acuerdo con la invención (0,2 g) con solución amortiguadora de acetato de sodio 0,4 M (2,0 mi) . El pH de la solución que se obtiene como resultado se ajusta a pH 4 usando ácido clorhídrico acuoso 0,5 N o hidróxido de sodio acuoso 0,5 N, según sea necesario, y luego se agrega suficiente agua para inyección como para dar un volumen total de 20 mi. Luego se filtra la mezcla a través de un filtro estéril (0,22 micrones) para dar una solución estéril apropiada para administrar por inyección.
Composiciones indicativas para administrar por inhalación Un compuesto de acuerdo con la invención (0,2 mg) se microniza y luego se combina con lactosa (25 mg) . Esta mezcla combinada se carga luego en un cartucho de inhalación de gelatina. Los contenidos del cartucho se administran usando un inhalador de polvo seco, por ejemplo.
Como alternativa, se dispersa un compuesto micronizado de la invención (10 g) en una solución preparada por disolución de lecitina (0,2 g) en agua desmineralizada (200 mi) . La suspensión que se obtiene como resultado se seca por aspersión y luego se microniza para formar una composición micronizada que comprende partículas con una medios del diámetro menor de aproximadamente l,5ym. Luego se carga la composición micronizada dentro de cartuchos para inhalador de dosis medida que contienen 1, 1, 1, 2-tetrafluoroetano presurizado en una cantidad suficiente como para proveer entre aproximadamente 10 pg y aproximadamente 500 µg del compuesto de la invención por dosis, cuando se lo administra mediante el inhalador.
Como alternativa, se disuelve un compuesto de acuerdo con la invención (25 mg) en solución amortiguada con citrato (pH 5) (125 mi) . La mezcla se agita y se sónica hasta que se disuelve el compuesto. El pH de la solución se controla y se ajusta, de ser necesario, a pH 5 agregando lentamente hidróxido de sodio (NaOH) acuoso 1 N. La solución se administra usando un dispositivo nebulizador que suministra entre aproximadamente 10 g y aproximadamente 500 µg del compuesto de la invención por dosis.
EJEMPLOS Las preparaciones y los ejemplos más adelante se proveen para ilustrar formas de realización especificas de la invención. Sin embargo, estas formas de realización especificas no constituyen una limitación para el alcance de la invención, a menos que se indique lo contrario.
Las siguientes abreviaturas tienen los siguientes significados, salvo que se indique lo contrario, y cualquier otra abreviatura utilizada en la presente y no definida tiene su significado convencional generalmente aceptado: AcOH ácido acético BOC t-butoxicarbonilo (-C (0) OC (CH3) 3) (B0C)20 bicarbonato de di-t-butilo Bn bencilo DCC diciclohexilcarbodiimida.
DC diclorometano o cloruro de metileno DIBAL hidruro de diisobutilaluminio DIPEA N, N-diisopropiletilamina DMAP 4-dimetilaminopiridina DMF N, N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido Dnp 2 , 4-dinitrofenilo EDC 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida Et3N trietilamina Et20 éter dietilico EtOAc acetato de etilo EtOH etanol HEPES ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetansulfónico HOBt 1-hidroxibenzotriazol LiHMDS hexametildisilazida de litio Mea (7-metoxicoumarin-4-il) acilo MeCN acetonitrilo MeOH metanol MTBE metil t-butil éter NaHMDS hexametildisilazida de sodio Pd(dppf)2Cl2 cloruro de 1,1' ~ bis (difenilfosfina) ferroceno paladio Pd(PPh3) tetrakis (trifenilfosfina) paladio (0) PE éter de petróleo SilicaCat®DPP-Pd catalizador de difenilfosfina-paladio (II) basado en sílice SilicaCat®Pd ( 0 ) catalizador de paladio (0) basado en sílice TFA ácido trifluoroacético THF tetrahidrofurano A menos que se especifique lo contrario, todos los materiales, tales como los reactivos, los materiales de partida y los solventes, se adquirieron de proveedores comerciales (tales como Sigma-Aldrich, Fluka Riedel-de Haén y semejantes) y se emplearon sin una purificación adicional.
Las reacciones se llevaron a cabo bajo una atmósfera de nitrógeno, a menos que se indique lo contrario. El progreso de las reacciones se monitoreó por cromatografía en capa delgada (TLC) , por cromatografía líquida de alto desempeño analítica (HPLC anal.), y espectrometría de masa, cuyos detalles se indican en ejemplos específicos. Los solventes usados en la HPLC analítica fueron: el solvente A fue 98% de H20/2% de MeCN /1,0 ml/1 de TFA; el solvente B fue 90% de MeCN/10% de H20 /1,0 ml/1 de TFA Las mezclas de reacción se sometieron a tratamiento posterior de aislamiento y purificación como se describe específicamente para cada preparación o ejemplo; comúnmente las mezclas de reacción se purificaron por extracción y otros métodos de purificación tales como cristalización dependiente de temperatura y solvente, y precipitación. Además, las mezclas de reacción se purificaron de manera rutinaria mediante HPLC preparativa, típicamente usando empaquetamientos de columna Microsorb C18 y Microsorb BDS y eluyentes convencionales. El progreso de las reacciones típicamente se midió mediante cromatografía líquida con espectrometría de masa (LCMS) . La caracterización de los isómeros se hizo mediante espectroscopia de efecto nuclear Overhauser (NOE) . La caracterización de los productos de reacción se llevó a cabo de manera convencional, por espectrometría de masa y 1H-RMN. Para la medición de RMN, las muestras se disolvieron en solvente deuterado (CD3OD, CDCI3 o DMS0-d6) y los espectros 1H-RMN se adquirieron con un instrumento Varían Gemini 2000 (400 MHz) bajo condiciones de observación convencionales. La identificación por espectrometría de masa de los compuestos se efectuó con un método de ionización por electroatomización (ESMS), con un instrumento de Applied Biosystems (Foster City, CA) modelo API 150 EX o con un instrumento Agilent (Palo Alto, CA) modelo 1200 LC/MSD.
Preparación 1 etiléster de ácido acetoxi (dietoxifosforil) acético Se agregó 2-oxoacetato de etilo (50%) (74 g, 724,8 mmol) por goteo con agitación a 0°C a una solución de fosfito ácido de dietilo (50 g, 362,1 mmol) en tolueno (100 mL) , bajo nitrógeno. Se agregó Et3N (110 g, 1,1 mol) por goteo con agitación a 0°C. La solución resultante se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. A la mezcla se agregó anhídrido acético (37 g, 362, 4 mmol) por goteo con agitación a 0°C. La solución resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El valor del pH de la solución se ajustó a 6 con HC1 2N. La solución resultante se extrajo con DCM (3x150 mL) y las fases orgánicas se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró bajo vacio. El residuo se cargó en una columna de gel de sílice con EtOAc : hexanos (1:2-1:5) para dar el compuesto del título (52 g) como un líquido color amarillo claro.
Preparación 2 etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2- hidroxipentanoico Una solución de etiléster de ácido acetoxi (dietoxifosforil) acético (15,6 g, 55,3 mmol, 1,2 equiv) en THF (seco) (150 mL) , bajo nitrógeno, se enfrió a -78°C. Se agregó LiHMDS (1M en THF) (55,3 mL) por goteo con agitación a -78 °C. Luego de agitar durante 30 minutos a esa temperatura, se agregó una solución de t-butiléster de ácido ( (R) -2-bifenil-4-il-l-formiletil) carbámico crudo (15,0 g, 1,0 eq.) en THF (seco) (30 mL) por goteo a lo largo de 15 minutos. La agitación se continuó durante 1,5 horas a -78 °C antes de volcar la mezcla sobre una solución fría con agua (200 mL) y EtOAc (200 mL) . La fase orgánica se separó repetidamente y la fase acuosa se extrajo nuevamente con EtOAc (2x100 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04, se filtró, y se evaporó, y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc/hexanos=0~l : 10) para dar el Compuesto 1 (10,5 g) como un sólido blanco.
Una solución agitada del Compuesto 1 (10,5 g, 23,2 mmol) en EtOH (anhidro) (100 mL) se combinó con paladio sobre carbono (1,0 g) , bajo nitrógeno. La mezcla se purgó cuatro veces con hidrógeno y luego se burbujeó hidrógeno a lo largo de 2 horas a temperatura ambiente. El paladio sobre carbono se filtró, y el material filtrado se concentró bajo vacío para dar el compuesto crudo 2 (10,0 g) como un aceite color amarillo pálido, que se usó sin purificación adicional.
El Compuesto 2 (10,0 g, 22,0 mmol) en EtOH (anhidro) (100 mL) se combinó con carbonato de potasio (6,1 g, 44,1 mmol) y la solución resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Los sólidos se filtraron y el material filtrado se concentró bajo vacio. El residuo se cargó en una columna de gel de sílice (EtOAc/hexanos=0~l : 5 ) para dar el Compuesto 3 (6,0 g) como un sólido blanco.
El Compuesto 3 (6,0 g, 14,5 mmol) se disolvió en DCM (seco) (120 mL) , y se burbujeó HCl en la mezcla a lo largo de 5~6 horas a temperatura ambiente. Se observó un precipitado sólido. La mezcla se concentró a la mitad del volumen, luego se filtró. Los sólidos se recogieron y se lavó con EtOAc frío, y se secó bajo presión reducida para dar el compuesto del título (4,2 g) como un sólido blanco opaco como sal de HCl. LC-MS (ES, m/z) : 314 [M-HC1+H]+.
XH RMN (300 MHz, DMSO) : d (ppm) =8,07 (s, 1,9H), 7,96 (s, 1,2H), 7,65-7, 69 (m, 4, OH), 7, 45-7, 5 0 (m, 2, OH), 7,33-7,39 (m, 3, OH), 6, 05-6, 07 (m, 0,63H), 5, 88-5, 90 (m, 0,88H), 4,32-4,38 (m, 0,80H), 4,18-4,31 (m, 0,51H), 4,05-4,11 (m, 2H) , 3,50 (s, 1H) , 2, 75-3, 05 (m, 2,8H), 1, 83-1, 94 (m, 1H) , 1,71-1,82 (m, 1H) , 1,10-1,20 (m, 3,3H) .
Preparación 3 t-butiléster de ácido (S) -2- (4-bromobencil) -5-oxopirrolidin- 1-carboxilico A una solución de ácido (R) -2-amino-3- ( 4-bromofenil ) propiónico (50 g, 0,2 mol) en MeCN (700 mL) se agregó una solución de NaOH (16,4 g, 0,4 mol) en agua (700 mL) a -5°C. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de (BOC)20 (44, 7 g, 0,2 mol) en MeCN (100 mL) . La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Después de la evaporación del MeCN, el residuo se diluyó con DCM (800 mL) y se acidificó con HCl 1 M hasta pH 2 a -5°C. La fase acuosa se extrajo con DCM (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (500 mL) , se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar el Compuesto 1 (66,5 g) como un sólido blanco. LC-MS: 366 (M+Na) , 709 (2M+Na) .
A una solución del Compuesto 1 (66,5 g, 193 µ????), ácido de Meldrum (33,4 g, 232 mmol) y DMAP (37,7 g, 309 mmol) en DCM anhidro (600 mL) , se agregó por goteo una solución de DCC (47,9 g, 232 mmol) en DCM anhidro (200 mL) durante 1 hora a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 8 horas, luego se refrigeró durante la noche. Se observaron cristales de diciclohexilurea. La mezcla se filtró, se lavó con KHSO4 5% (5x200 mL) y NaCl acuoso saturado (200 mL) , luego se secó sobre MgSÜ anhidro bajo refrigeración durante la noche. La solución luego se evaporó para dar el compuesto crudo 2 (91 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS : 492 (M+Na) , 961 (2M+Na) .
A una solución del compuesto crudo 2 (91 g, 193 mmol) en DCM anhidro (1 L) se agregó AcOH (127,5 g, 2,1 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 30 minutos, luego se agregó NaBH4 (18,3 g, 483 mmol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar durante otra 1 hora a -5°C, se agregó NaCl acuoso saturado (500 mL) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x300 mL) y agua (2x300 mL) , se secó sobre MgS0 , se filtró, y se concentró para dar el producto crudo, el cual se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el Compuesto 3 (68 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 478 (M+Na), 933 (2M+Na) .
Una solución del Compuesto 3 (68 g, 149 mmol) en tolueno anhidro (500 mL) se sometió a reflujo bajo nitrógeno durante 3 horas. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se purificó mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=10 : 1 ) para dar el compuesto del título (38 g) como un aceite color amarillo claro. LC-MS: 376 (M+Na) , 729 (2M+Na) .
Preparación 4 etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( -bromofenil) -2-hidroxipentanoico A una solución de t-butiléster de ácido (S)-2-(4-bromobencil ) -5-oxopirrolidin-l-carboxílico (38 g, 107 mmol) en DCM anhidro (250 mL) se agregó TFA (20 mL, 0,27 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se diluyó con EtOAc (300 mL) y se lavó con NaHCC>3 acuoso saturado (3x200 mL) , agua (200 mL) , NaCl acuoso saturado (250 mL) , se secó sobre a2S04 y se concentró para dar el compuesto crudo 1 (24 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 254 [M+H] .
A una solución de NaH (8,6 g, 250 mmol) en THF anhidro (200 mL) se agregó por goteo una solución del Compuesto 1 (24 g, 94 mmol) en THF anhidro (200 mL) a lo largo de 30 minutos a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. Luego de enfriar a 0°C, se agregó cloruro de pivaloilo (18 g, 150 mmol) por goteo a lo largo de 30 minutos. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (300 mL) y se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró y se concentró para dar el producto crudo, el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=25 : 1 ) para dar el Compuesto 2 (18 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 360 (M+Na) .
A una solución del Compuesto 2 (18 g, 53 mmol) en THF anhidro (250 mL) se agregó por goteo NaHMDS (47,7 mL, 96 mmol) a lo largo de 30 minutos a -78°C bajo nitrógeno. Luego de agitar a -78°C durante 90 minutos, se agregó una solución de (+ ) - (8, 8-diclorocanforilsulfonil) -oxaziridina (31,6 g, 106 mmol) por goteo a lo largo de 30 minutos. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, la reacción se detuvo con NHC1 acuoso saturado (400 mL) y se extrajo con EtOAc (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=15 : 1 ) para dar el Compuesto 3 (8,9 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 376 (M+Na ) .
Una solución del Compuesto 3 (8,9 g, 25 mmol) en HC1 concentrado (81 mL, 81 mmol) se calentó a 100°C durante 16 horas. La mezcla luego se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente lavando con Et2Ü para dar el compuesto 4 (7 g) como un sólido color amarillo claro como sal de HC1. LC-MS: 323 (M+ H) .
Una solución del compuesto 4 (7 g, 22 mmol) en EtOH (10 mL) se combinó con HC1 en EtOH 8M (120 mL, 960 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 50°C durante 16 horas, luego se concentró. El producto crudo se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el compuesto del título (6 g) como un sólido color amarillo claro como sal de HC1. LC-MS: 352 (M+ H) .
Preparación 5 (3R,5R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-ilmetil) -1- (2, 2-dimetilpropionil) -3-hidroxipirrolidin-2-ona A una solución de t-butiléster de ácido (S)-2-{4-bromobencil ) -5-oxopirrolidin-l-carboxílico (15 g, 43 mmol) en 1,4-dioxano (600 mL) se agregó ácido 3-clorofenilborónico (8 g, 51 mmol) y Pd(dppf)2Cl2 (3,1 g, 4,2 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de K2CO3 (11,7 g, 85 mmol) en agua (60 mL) . La mezcla se calentó a 60°C y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, se agregó agua (200 mL) y se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (400 mL) , se secó sobre Na2S04, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=6 : 1 ) para dar el Compuesto 1 (15 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 408 (M+Na) .
A una solución del Compuesto 1 (15 g, 0, 039 mol) en DCM anhidro (250 mL) se agregó TFA (20 mL, 270 mmol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se diluyó con EtOAc (300 mL) , luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (3x200 mL) , agua (200 mL) , y NaCl acuoso saturado (250 mL) , luego se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar el compuesto crudo 2 (11 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 286 [M+H] .
A una solución de NaH (2,3 g, 98 mmol) en THF anhidro (200 mL) se agregó por goteo una solución del Compuesto 2 (11 g, 39 mmol) en THF anhidro (100 mL) a lo largo de 30 minutos a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. Luego de enfriar a 0°C, se agregó cloruro de pivaloilo (6 g, 51 mmol) por goteo a lo largo de 30 minutos. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La reacción se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (200 mL) y se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04; se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=25 : 1 ) para dar el Compuesto 3 (10,5 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 391 (M+Na) .
A una solución del Compuesto 3 (10,5 g, 29 mmol) en THF anhidro (120 mL) se agregó por goteo NaHMDS (29 mL, 58 mmol) a lo largo de 30 minutos a -78°C bajo nitrógeno. Luego de agitar a -78 °C durante 90 minutos, se agregó una solución de ( + ) - (8, 8-diclorocanforilsulfonil) -oxaziridina (15,6 g, 52 mmol) por goteo a lo largo de 30 minutos. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, la reacción se detuvo con NH4CI saturado (400 mL) y se extrajo con EtOAc (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=15 : 1 ) para dar el compuesto del título (9,6 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 408 (M+Na) .
Preparación 6 etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico Una solución de (3R, 5R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-ilmetil) -1-(2, 2-dimetilpropionil) -3-hidroxipirrolidin-2-ona (9,6 g, 25 mmol) en HC1 concentrado (81 mL, 81 mmol) se calentó a 100°C durante 16 horas. La mezcla luego se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el Compuesto 1 (5,7 g) como un sólido color amarillo claro como sal de HC1. LC-MS: 320 (M+ H) .
A una solución del Compuesto 1 (5,7 g, 18 mmol) en EtOH (10 mL) se agregó HC1 en EtOH 8M (120 mL, 960 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 50 °C durante 16 horas. Después de la concentración, el producto crudo se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el compuesto del titulo (2,1 g) como un sólido color amarillo claro como sal de HC1. LC-MS: 348 (M+ H) .
Preparación 7 ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico Se agregó HC1 acuoso 1 M (2,0 mmol) a etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (31 -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (150,0 mg, 431 µ?t???) y la mezcla se agitó a 100°C durante 2 horas. La mezcla se concentró bajo vacio durante 3 horas y el residuo se purificó mediante fase reversa para dar el compuesto del titulo (117 mg) como un sólido blanco.
Preparación 8 isopropiléster de ácido cloro-oxo-acético Se agregó isopropanol (158 pL, 2,1 mmol, 1,0 eg. ) por goteo a lo largo de 5 minutos a cloruro de oxalilo (350 ]iL, 4,14 mmol, 2,0 eq.) a 0°C, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El exceso de cloruro de oxalilo se retiró por evaporación por rotación (40°C, 50 mmHg) y se usó sin purificación adicional.
Preparación 9 isobut iléster de ácido cloro-oxo-acético Se agregó isobutanol (191 µ??, 2,1 mmol, 1,0 eq. ) por goteo a lo largo de 5 minutos a cloruro de oxalilo (350 ]iL, 4,14 mmol, 2,0 eq.) a 0°C, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El exceso de cloruro de oxalilo se retiró por evaporación por rotación (40°C, 40 mmHg) y se usó sin purificación adicional.
Preparación 10 cloruro de t-butiloxalilo Se agregó cloruro de oxalilo (274 ]i , 3,2 mmol) a una solución de alcohol t-butilico (289 L, 3,0 mmol) en éter (2,0 mL, 19,0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente incoloro. Se preparó una solución solución de cloruro de t-butiloxalilo aproximadamente 1M disolviendo el líquido transparente incoloro resultante en DCM (-3,0 mL) .
Preparación 11 2-metoxietiléster de ácido cloro-oxo-acético Una solución de 2-metoxietanol (295 mg, 3,9 mmol) en DCM (volumen total: 0,5 mL) se agregó a una solución de cloruro de oxalilo (0,5 mL, 5,8 mmol) en DCM (volumen total 1,0 mL) a 0°C y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacio y el residuo resultante se disolvió en DCM (3,9 mL) para dar una solución en DCM 1,0M.
Preparación 12 3-etoxipropiléster de ácido cloro-oxo-acético Una solución de 3-etoxipropan-l-ol (404 mg, 3,9 mmol) en DCM (volumen total: 0,5 mL) se agregó a una solución de cloruro de oxalilo (0,5 mL, 5,8 mmol) en DCM (volumen total 1,0 mL) a 0°C y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacio y el residuo resultante se disolvió en DCM (3,9 mL) para dar una solución en DCM 1,0M.
Preparación 13 2-fenoxietiléster de ácido cloro-oxo-acético Una solución de 2-fenoxietanol (536 mg, 3,9 mmol) en DCM (volumen total: 0,5 mL) se agregó a una solución de cloruro de oxalilo (0,5 mL, 5,8 mmol) en DCM (volumen total 1,0 mL) a 0°C y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacio y el residuo resultante se disolvió en DCM (3,9 mL) para dar una solución en DCM 1,0M.
Preparación 14 ácido (2R, 4R) -4- t-butoxicarbonilamino-5- (3' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico Una solución de (3R, 5R) -5- ( 3 ' -clorobifenil-4-ilmetil ) -1- (2, 2-dimetilpropionil) -3-hidroxipirrolidin-2-ona (4,5 g, 11,7 mmol) en HC1 concentrado (30 mL) se agitó a 100°C durante 16 horas. La mezcla se concentró al vacio para dar el Compuesto 1 (4 g) como un sólido blanco como sal de HC1. LC-MS: 321 [M+H]+.
A una solución de NaOH (1,8 g, 45,2 mmol) en agua (100 mL) , se agregó el Compuesto 1 (4 g, 11,3 mmol) en MeCN (100 mL) por goteo. La mezcla se agitó durante 10 minutos a 0°C. Se agregó dicarbonato de di-t-butilo (7,17 g, 33,8 mmol) y la mezcla se agitó durante 15 horas a temperatura ambiente. La mezcla resultante se concentró al vacio para eliminar el MeCN, luego se diluyó con DCM (300 mL) , y el pH se ajustó a pH=5-6 con HC1 acuoso 1 . Luego la fase orgánica se recogió y el residuo se extrajo con DCM (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se concentraron y se lavó con hexanos (150 mL) para dar el compuesto del titulo (4 g) como un sólido blanco. LC-MS: 442 [M+Na]+.
Preparación 15 2, 2, 3, 3, 3-pentafluoropropiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico A una solución de ácido (2R, 4R) -4- t-Butoxicarbonilamino- 5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (0,9 g, 6 mmol) y 2, 2, 3, 3, 3-pentafluoropropan-l-ol (450 mg, 3 mmol) en DCM (30 mL) se agregó DCC (880 mg, 4,3 mmol) y DMAP (260 mg, 2,1 mmol) . La mezcla resultante se agitó durante 15 horas a temperatura ambiente, luego se concentró al vacio. El residuo se disolvió en EtOAc (100 mL) y se lavó con agua (30 mL) y NaCl acuoso saturado (30 mL) . La fase orgánica se recogió y se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (hexanos/EtOAc=5 : 1 ) para dar el Compuesto 3 (0,4 g) como un sólido blanco. LC-MS : 574 [M+Na]+.
Una solución del Compuesto 3 (0,4 g, 690 µp??? ) en HC1 en una solución en 1,4-dixoano 1,4 M (15 mL) se. agitó durante la noche, y luego se concentró al vacío. El residuo se dispersó en EtOAc (10 mL) , y el precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del título como un sólido blanco opaco como sal de HC1 (165 mg) . LC-MS: 452 [M+H] + . XH RMN: (DMSO-d6) 1, 95-1, 82 (m, 2H) , 2,99-2,98 (m, 2H), 3,56 (br, 1H) , 4,41-4,38 (m, 1H) , 4, 92-4, 82(m, 2H) , 6,35(s, 1H), 7,71-7,38 (m, 8H) , 8,09 (s, 3H) .
Preparación 16 5-metil-2-oxo [1, 3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (2R,4R)- - aroino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico Una suspensión de ácido (2R, 4R) -4-t-butoxicarbonilamino-5- ( 31 -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (740 mg, 1,8 mmol) , 4- (bromometil ) -5-metil-l, 3-dioxol-2-ona (340 mg, 1,8 mmol) , ioduro de potasio (58 mg, 350 µ?t???) , y K2C03 (486 mg, 3,5 mmol) en DMF (20 mL) se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con EtOAc (150 mL) y se lavó con agua (30 mL) . La fase orgánica se recogió y se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (hexanos/EtOAc=l : 1) para dar un sólido blanco (490 mg) . LC- MS: 554 [M+23] + . Una solución de este sólido (476 mg, 890 µ????) en HC1 3 N en 1,4-dioxano (20 mL) se agitó durante la noche, y luego se concentró al vacío. El residuo se dispersó en EtOAc (10 mL) , y el precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del título como un sólido blanco opaco (290 mg) . LC-MS: 432 [M+H]+. XH RMN: (DMSO-d6) 1,92-1,82 (m, 2H) , 2,16 (s, 3H) , 2,99 (br, 2H) , 3,56 (br, 1H) , 4, 35-4, 32 (m, 1H) , 5,017 (s, 2H) , 6,17 (s, 1H) , 7,39-7,36 (m, 4H) , 7,71-7,68 (m, 4H) , 8,05 (s, 3H) .
Preparación 17 butiriloximetiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico Una solución de ácido (2R, 4R) -4- t-butoxicarbonilamino-5- (3' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (900 mg, 2,1 mmol) , butirato de clorometilo (350 mg, 2,6 mmol) , ioduro de sodio (481 mg, 3,21 mmol) y DIPEA (828 mg, 6,42 mmol) en DMF (20 mL) se agitó durante 16 horas a 30°C. La mezcla se diluyó con EtOAc (150 mL) y se lavó con agua (50 mL) y NaCl acuoso saturado (50 mL) . La fase orgánica se recogió y se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna (hexanos/EtOAc=5 : 1 ) para dar un sólido blanco (240 mg) . LC-MS: 542 [M+Na]+. Una solución de este sólido (240 mg, 460 µp???) en HCl 1,4 M en 1,4-dixoano (15 mL) se agitó durante la noche, y luego se concentró al vacío. El residuo se dispersó en EtOAc (10 mL) , y el precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del título como un sólido blanco opaco como sal de HCl (140 mg) . LC-MS: 420 [M+H]+. XH RMN: (DMSO) 0,85 (t, J =7 , 5 Hz, 3H) , 1,61-1,52 (m, 2H) , 1,89- 1,86 (m, 2H), 2,30(t, J =7,5 Hz, 2H) , 2,98 (br, 2H) , 3,56 (br, 1H) , 4, 33-4, 30 (m, 1H) , 5, 74-5, 68 (m, 2H) , 6,21 (s, 1H) , 7,37-7,35 (m, 4H) , 7,70-7,767 (m, 4H) , 8,01 (brs, 3H) .
Preparación 18 etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (2 ' , 5 ' -diclorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico A una solución de t-butiléster de ácido (S)-2-(4-bromobencil ) -5-oxopirrolidin-l-carboxilico (33,5 g, 95 mmol) en 1,4-dioxano (1,2 L) se agregó ácido 2,5-diclorofenilborónico (21,7 g, 114 mmol) y Pd ( dppf ) 2C12 (3,5 g, 4,7 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de K2CO3 (26,1 g, 189 mmol) en agua (120 mL) . La mezcla se calentó a 60°C y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, se agregó agua (400 mL) y se extrajo con EtOAc (3x400 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (500 mL) , se secó sobre a2SÜ4 anhidro, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=6 : 1 ) para dar el Compuesto 1 (35,8 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 442 [M+Na] .
A una solución del Compuesto 1 (35,8 g, 85 mmol) en DCM anhidro (300 mL) se agregó TFA (30 mL, 405 mmol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se diluyó con EtOAc (500 mL) , luego se lavó con NaHCC-3 acuoso saturado (3x300 mL) , agua (200 mL) , y NaCl acuoso saturado (250 mL) , luego se secó sobre Na2SC>4 y se concentró para dar el compuesto crudo 2 (26 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 320 [M+H] .
A una solución del Compuesto 2 (26 g, 81 mmol) en THF anhidro (500 mL) se agregó por goteo n-BuLi en hexano (39 mL, 97 mmol) durante 1 hora a -78°C bajo nitrógeno. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, la reacción se detuvo agregando cloruro de pivaloilo (12,7 g, 105 mmol) por goteo a lo largo de 30 minutos. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, la reacción se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (200 mL) y se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=25 : 1 ) para dar el Compuesto 3 (33 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 426 [M+Na] .
A una solución del Compuesto 3 (10 g, 0,025 mol) en THF anhidro (120 mL) se agregó por goteo NaHMDS (18,6 mL, 37 mmol) a lo largo de 30 minutos a -78°C bajo nitrógeno. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, se agregó una solución de (+) - (8, 8-diclorocanforilsulfonil) -oxaziridina (11,1 g, 37 mmol) en THF (80 mL) por goteo a lo largo de 30 minutos. Luego de agitar a -78 °C durante 2 horas, la reacción se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (500 mL) y se extrajo con EtOAc (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgSO/j, se filtró y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=15 : 1 ) para dar el Compuesto 4 (4,2 g) como un aceite color amarillo claro. LC-MS: 442 [M+Na] .
Una solución del Compuesto 4 (4,2 g, 10 mmol) en HC1 concentrado (80 mL, 0,96 mol) se calentó a 100°C durante 16 horas. La mezcla luego se concentró para dar un producto crudo que se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el Compuesto 5 (3,8 g) como un sólido blanco. LC-MS: 354 [M+ H] .
A una solución del Compuesto 5 (3,8 g, 10 mmol) en EtOH (5 mL) se agregó HC1 en EtOH 4M (100-_mL, 0,4 mol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 50°C durante 16 horas. Después de la concentración, el producto crudo se purificó adicionalmente lavando con Et20 para dar el compuesto del titulo (3,3 g) como un sólido blanco. LC-MS: 382 [M+ H] .
Preparación 19 (3R,5R) -5-amino-6- (4-bromo-2-clorofenil) -2-etoxihex-l-en-3-ol (1 ) (2) A una suspensión de 4-bromo-2-clorobenzaldehido (50g, 22,8mmol) en MeOH (500 mL) se agregó NaBH (17,3 g, 45,6 mmol) en porciones a 0°C. La mezcla se agitó durante 30 minutos y luego se agregó NH4C1 acuoso para detener la reacción. La mezcla se concentró al vacio. El residuo se extrajo con EtOAc (2x200 mL) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SC>4 anhidro, y se concentró bajo vacio para dar el Compuesto 1 (48g) como un sólido blanco.
A una solución del Compuesto 1 (46,8 g, 21,1 mmol) en DCM seco (500 mL) se agregó tribromuro de fósforo (68,6 g, 25,3 mmol) por goteo a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó durante 2 horas y luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2x200 mL) y NaCl acuoso saturado (200 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, se concentró bajo vacio para dar el Compuesto 2 (36 g) como un aceite incoloro.
A una solución agitada de ácido (R) -pirrolidin-2-carboxilico (57,7 g, 0,5 mol) y KOH (84 g, 1,5 mol) en alcohol isopropílico (330 mL) se agregó cloruro de bencilo (70 mL, 0,6 mol) por goteo a 0°C a lo largo de 3 horas. La mezcla luego se agitó durante la noche a la misma temperatura. La mezcla resultante se neutralizó con HC1 concentrado hasta pH=6, y luego se agregó cloroformo (200 mL) . La mezcla se agitó durante 30 minutos, luego se filtró y el precipitado se lavó con cloroformo (3x100 mL) . Las soluciones en cloroformo combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro, y se concentró bajo vacio para dar el Compuesto 3 (52 g) como un sólido blanco. LC-MS: 206 [M+H]+.
A una solución del Compuesto 3 (10 g, 48,8 mmol) en DCM seco (50 mL) se agregó S02C12 (7,3 g, 61 mmol) a -20°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -20°C durante 3 horas y luego se agregó una solución de (2-aminofenil) (fenil)metanona (6 g, 30,5 mmol) en DCM seco (25 mL) y la mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Una solución de Na2C03 (10,3 g) en agua (40 mL) se agregó a 0 °C. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con DCM (50 mLx3) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro y se concentró bajo vacio. El residuo se lavó con MTBE (2x50 mL) para dar el Compuesto 4 (8,5 g) como un sólido color amarillo. LC-MS: 385 [M+H]+.
A una solución del Compuesto 4 (29,4 g, 76,5 mmol) , glicina (28,7 g, 382, 4 mmol) y Ni (N03) 2 · 6H20 (44, 5 g, 152,9 mmol) en eOH (280 mL) se agregó una solución de KOH (30 g, 535,3 mmol) en MeOH (100 mL) a 45°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a 60°C durante una hora. La solución resultante se neutralizó con AcOH (31 mL) y se volcó sobre agua helada (380 mL) . El sólido resultante se filtró y se disolvió en DCM (450 mL) , que se lavó con NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró. El residuo se lavó con EtOAc (2x50 mL) para dar el compuesto 5 (38 g) como un sólido color rojo. LC-MS: 498 [M+H]+.
El Compuesto 5 (14,3 g, 28,7 mmol) y NaOH (3,4 g, 81,6 mmol) se agregaron a un recipiente que se purgó con nitrógeno dos veces. Se agregó DMF anhidro (100 mL) y la mezcla se agitó durante 5 minutos a 0°C antes de agregar una solución del compuesto 2 (8,6 g, 30,1 mmol) en DMF (20 mL) . La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos hasta haberse consumido completamente el compuesto 4 (verificado por TLC) . La mezcla resultante se volcó sobre una solución acuosa de AcOH 5% (120 mL) que luego se extrajo con DCM (3x150 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre a2S04 anhidro y se concentró bajo vacio. El residuo se recristalizó con DCM/Et20 (1:1) para dar el Compuesto 6 (15,5 g) como un sólido color rojo. LC-MS: 702 [M+H]+.
A una solución del Compuesto 6 (46 g, 65,6 mmol) en MeOH (300 mL) se agregó HC1 3N (200 mL) . La mezcla se sometió a reflujo hasta que el color rojo se tornó verde. La solución resultante se concentró bajo vacio y se agregó ??3?2? concentrado (100 mL) , y luego se extrajo con DCM (2x200 mL) . La fase acuosa se concentró bajo vacio y se sometió a una resina de intercambio catiónico (eluyendo con NH3 · H^O/EtOH, 1:1) para dar el Compuesto 7 (15 g) como un sólido blanco. LC-MS: 280 [M+H]+.
A una suspensión del Compuesto 7 (15 g, 53,9 mmol) en MeCN (150 mL) se agregó una solución de NaOH (4,3 g, 107,7 mmol) en agua (150 mL) a 0 °C, y luego se agregó (BOC)20 (17,6 g, 80,8 mmol) . La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La solución resultante se concentró bajo vacio, luego se extrajo con DCM (2x150 mL) . La fase acuosa se acidificó con HC1 1N hasta pH=3 y se extrajo con EtOAc (3x150 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró bajo vacío para dar el Compuesto 8 (12,3 g, 60%) como un sólido blanco. LC-MS: 402 [M+Na]+.
A una suspensión del Compuesto 8 (18,4 g, 48,5 mmol) y ácido de Meldrum (8,4 g, 58,2 mmol) en DCM (400 mL) se agregó DMAP (9,5 g, 77,6 mmol) a -5 °C. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de DCC (12 g, 58,2 mmol) en DCM (100 mL) por goteo a -5 °C. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La solución resultante se enfrió a 0°C y se filtró. El material filtrado se lavó con acuoso ácido cítrico (3x200 mL) y NaCl acuoso saturado (200 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró bajo vacío. El residuo se lavó con Et20 (2x50 mL) para dar el Compuesto 9 (22 g) como un sólido color amarillo claro.
A una solución del Compuesto 9 (22 g, 43,6 mmol) en DCM (400 mL) se agregó AcOH (28,8 g, 479,4 mmol) a 0°C. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó NaRH4 (4,1 g, 109 mmol) en porciones. La mezcla se agitó durante una hora a 0°C. La solución resultante se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2x200 mL) y NaCl acuoso saturado (200 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró bajo vacío. El residuo se lavó con éter (2x100 mL) para dar el Compuesto 10 (18,6 g) como un sólido blanco opaco. LC-MS: 514 [M+Na]+.
Una solución del Compuesto 10 (18,6 g, 37,9 mmol) en tolueno (350 mL) se calentó bajo reflujo durante 2 horas. Luego de enfriar, la mezcla se evaporó hasta secar para dar el Compuesto 11 (14 g) como un jarabe color amarillo. LC-MS: 334 [M-tBu+H]+.
A una solución del Compuesto 11 (14 g, 36,0 mmol) en DCM (250 mL) se agregó TFA (20 mL) . La mezcla se agitó durante 4 horas a 0°C. La solución resultante se concentró bajo vacio para eliminar el TFA. El residuo se disolvió en DCM (400 mL) y se lavó con aHCÜ3 acuoso saturado (2x200 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 12 (10 g) como un sólido color amarillo. LC-MS: 290 [M+H]+.
A una solución del Compuesto 12 (10 g, 34,7 mmol) en THF seco (250 mL) se agregó NaH (2,4 g, 69,3 mmol, 70%) a 0 °C. La mezcla se agitó durante una hora a 0°C bajo nitrógeno. Luego se agregó cloruro de pivaloilo (5 g, 41,6 mmol). Luego de agitar durante otras 2 horas, se agregó NaHC03 acuoso saturado (100 mL) para detener la reacción. La mezcla resultante se concentró y se extrajo con EtOAc (3x100 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (100 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró bajo vacio. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (hexanos/EtOAc, 5:1) para dar el Compuesto 13 (11,8 g) como un sólido blanco. LC-MS: 37 [M+H] +.
A una solución del Compuesto 13 (11,8 g, 31,8 mmol) en THF seco (70 mL) se agregó NaHMDS (24 mL, 47,7 mmol, 2,0 M en THF) por goteo a -78 °C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 30 minutos, se agregó una solución de (+)-(8,8-diclorocanforilsulfonil ) oxaziridina (15,2 g, 50,8 mmol) en THF (70 mL) por goteo a -78 °C. La mezcla se agitó durante otra hora a la misma temperatura antes de agregar NH4C1 acuoso (70 mL) para detener la reacción. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3x150 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, se concentró bajo vacío y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (hexanos/EtOAc, 20:1-5:1) para dar el producto crudo (5 g) , que se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto 14 (4 g) como un sólido color amarillo. LC-MS: 390 [M+H]+. (15) Una solución del Compuesto 14 (4 g, 10,3 mmol) en HC1 concentrado (50 mL) se calentó bajo reflujo durante la noche. La mezcla se concentró bajo vacio y el sólido resultante se lavó con Et20 (2x50 mL) para dar el Compuesto 15 (3,1 g) como un sólido blanco como sal de HC1. LC-MS: 324 [M+H]+.
Una solución del Compuesto 15 (3,1 g, 8,6 mmol) en HCl/EtOH (6,7M, 40 mL) se agitó durante la noche a 50°C. La mezcla resultante se concentró bajo vacio y el residuo se lavó con éter (2x50 mL) para dar el compuesto del titulo (2,9 g) como un sólido blanco opaco como sal de HC1. LC-MS: 352 [M+H]+. 1H RMN: (CD3OD) 1,268 (t, J = 6,9 Hz, 3H) , 1, 862-1, 946 (m, 1H), 2, 068-2, 143 (m, 1H) , 3, 104-3, 199 (m, 2H) , 3,769-3, 809 (m, 1H), 4, 162-4,209 (m, 2H) , 4,274-4, 881 (m, 1H) , 7,325 (dd, J = 8,1, 2,1 Hz, 1H) , 7, 522 (dd, J = 8,3, 3,0 Hz, 1H) , 7,696 (d, J = 1,8 Hz, 1H) .
Preparación 20 t-butiléster de ácido [ (R) -1-bifenil-4-ilmetil-2- (2,2-dimetil-4, 6-dioxo- [1, 3] dioxan-5-il) -2-oxoetil] carbámico A una solución de ácido (R) -3-bifenil-4-il-2- t-butoxicarbonilamino-propiónico (50 g, 146 mmol), ácido de Meldrum (23,3 g, 161 mmol) y DMAP (27,8 g, 227 mmol) en DCM anhidro (500 mL) se agregó una solución de DCC (33,3 g, 161 mmol) en DCM anhidro (200 mL) durante 1 hora a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 8 horas, luego se refrigeró durante la noche, precipitando pequeños cristales de diciclohexilurea . Luego de la filtración, la mezcla se lavó con HSO4 5% (4x200 mL) y NaCl acuoso saturado (1x200 mL) , luego se secó bajo refrigeración con MgSC durante la noche. La solución se evaporó para dar el compuesto del titulo (68 g, sólido color amarillo claro), que se usó sin purificación adicional. LC-MS: 490 [M+Na] , 957 [2M+Na] .
Preparación 21 etiléster de ácido (2R,4S) -5-bifenil-4-il-4- t-butoxicarbonilamino-2-hidroximetilpentanoico (compuesto 6) y etiléster de ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- t-butoxicarbonilamino-2-hidroximetilpentanoico (compuesto 7) A una solución de t-butiléster de ácido [ (R) -1-bifenil-4-ilmetil-2- (2, 2-dimetil-4, 6-dioxo- [1, 3] dioxan-5-il) -2-oxoetil] carbámico crudo (68 g, 147 mmol) en DCM anhidro (1 L) se agregó AcOH (96,7 g, 1,6 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 0,5 hora, luego se agregó NaBH4 (13,9 g, 366 mmol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar durante otra hora a -5°C, se agregó NaCl acuoso saturado (300 mL) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x300 mL) y agua (2x300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se evaporó para dar el producto crudo, el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=5 : 1) para dar el Compuesto 1 (46 g, sólido color amarillo claro). LC-MS: 476 [M+Na] , 929 [2M+Na] .
Una solución del Compuesto 1 (46 g, 101 mmol) en tolueno anhidro (300 mL) se sometió a reflujo bajo nitrógeno durante 3 horas. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se purificó mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=10 : 1 ) para dar el Compuesto 2 (27 g, sólido color amarillo claro). LC-MS: 374 [M+Na] , 725 [2M+Na] . ?? RMN (300 MHz, CDC13): 67,64-7,62 (m, 4H) , 7,51-7,46 (m, 2H) , 7,42-7,39 (m, 1H) , 7,39-7,30 (m, 2H) , 4,50-4,43 (m, 1H) , 3,27-3,89 (m, 1H) , 2,88-2,80 (m, 1H) , 2,48-2,42 (m, 2H) , 2,09-1,88 (m,2H), 1,66 (s,9H).
Una mezcla del Compuesto 2 (27 g, 77 mmol) y t-butoxi- N, , N 1 , N ' -tetrametilmetandiamina ( 40,3 g, 231 mmol) se calentó a 80°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 3 horas a 80°C, la mezcla se diluyó con EtOAc (300 mL) , se lavó con agua (2x150 mL) y NaCl acuoso saturado (2x150 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se evaporó para dar el compuesto crudo 3 (29,7 g, aceite color amarillo claro) . LC- MS: 425 [M+H] , 835 [2M+H] .
A una solución del compuesto crudo 3 (29,7 g, 73 mmol) en THF (200 mL) se agregó HC1 1 M (81 mL) a 0°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 1 hora a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con EtOAc (100 mL) y se ajustó con NaHCC>3 acuoso saturado hasta pH 7. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x150 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x150 mL) y NaCl acuoso saturado (1x150 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se evaporó para dar el compuesto crudo 4 (29,4 g, aceite color amarillo). LC-MS: 402 [M+Na], 781 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 4 (29,4 g, 77 mmol) en THF anhidro (300 mL) se agregó EtOH anhidro (30 mL) y AcOH (92,5 g, 1,5 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 0,5 hora, luego se agregó NaBH3CN (19,4 g, 308 mmol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar durante otra hora a -5°C, la mezcla se ajustó con NaHC03 acuoso saturado hasta pH 7. La fase acuosas se extrajeron con EtOAc (2x200 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x150 mL) y NaCl acuoso saturado (1x150 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo, el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : Et0Ac=5 : 1 ) para dar el Compuesto 5 (11, g, sólido color amarillo claro). LC-MS: 404 [M+Na], 785 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 5 (11,2 g, 29 mmol) en EtOH anhidro (500 mL) se agregó K2C03 anhidro (8,0 g, 58 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 1 hora a 0°C, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. Luego de la filtración, el material filtrado se concentró y el residuo se diluyó con agua (150 mL) , DCM (200 mL) y NaCl acuoso saturado (50 mL) . Después de la separación, la fase acuosa se extrajo con DCM (2x150 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x200 mL) , se secó sobre MgS04, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=5 : 1 ) para dar los Compuestos 6 y 7 (8,3 g, sólido color amarillo claro).
Compuesto 6: LC-MS: 450 [M+Na] , 877 [2M+Na] . XH RMN (300 MHz, CDC13 ) : 57,58-7,23 (m, 9H) , 4,46-4,43 (d, 1H) , 4,20-4,13 (m, 2H) , 3,94 (s, 1H) , 3, 82-3, 70 (m, 2H) , 2,85-2,70 (m, 3H) , 2,25-2,22 (d, 1H) , 2,01-1,92 (m, 1H) , 1,47 (s, 9H) , 1,26-1,24 (m, 3H) .
Compuesto 7: LC-MS: 450 [M+Na], 877 [2M+Na] . a? RMN (300 MHz, CDC13 ) : 57,58-7,55 (m, 4H) , 7,50-7,43 (m, 2H) , 7,40-7,30 (m, 1H), 7,26-7,23 (m, 1H) , 4,46 (m, 1H) , 4,21-4,13 (m, 2H) , 3,94 (m, 1H) , 3,82-3,77 (m, 2H) , 2,83-2,81 (d, 2H) , 2,66-2,63 (m, 1H), 2,24 (m, 1H) , 1,83-1,81 (m, 2H) , 1,38 (s, 9H) , 1,30-1,25 (m, 3H) .
Preparación 22 ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- t-butoxicarbonilamino-2-hidroximetilpentanoico (R7= H; P2=BOC) y etiléster de ácido (2S,4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetilpentanoico (R7= -CH2CH3; P2 eliminado) Se saponificó etiléster de ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- t-butoxicarbonilamino-2-hidroximetil-pentanoico (210 mg) con LiOH para dar el ácido protegido con BOC (R7= H; P2=BOC) (120 mg) . Se sometió etiléster de ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- -butoxicarbonilamino-2-hidroximetil-pentanoico (-180 mg) a desprotección con HC1 para dar el éster de amina (R= -CH2CH3; P2 eliminado) como una sal de HC1 (120 mg) .
Preparación 23 etiléster de ácido (2S,4S) -4-amino-5- (2 ' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetilpentanoico A una solución de t-butiléster de ácido (S)-2-(4-bromobencil ) -5-oxopirrolidin-l-carboxílico (18,4 g, 52 mol) en 1,4-dioxano (500 mL) se agregó ácido 2-fluorofenilborónico (8,7 g, 63mmol) y Pd(dppf)2Cl2 (3,8 g, 5,2 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de K2CO3 (14,4 g, 104 mmol) en agua (50 mL) . La mezcla se calentó a 80°C y se agitó a esta temperatura durante 5 horas. Luego de la evaporación del solvente, se agregó agua (300 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (400 mL) , se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=8 : 1 ) para dar el Compuesto 1 (17,3 g) como un aceite color rojo. LC-MS : 392 [M+Na] .
Una mezcla del Compuesto 1 (17,3 g, 46, 7m mol) y t-butoxi-N, , N ' , N ' -tetrametilmetandiamina (24,4 g, 140 mmol) se calentó a 80°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 3 horas a 80°C, la mezcla se diluyó con EtOAc (300 mL) y se lavó con agua (2x150 mL) , NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre gSC , se filtró, y se evaporó para dar compuesto crudo 2 (20,6 g) como un aceite color rojo. LC-425 [M+H] , 849 (2M+H) .
A una solución del compuesto crudo 2 (20,6 g, 48,6 mmol) en THF (300 mL) , se agregó HC1 1 M (58 mL, 58 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 1 hora a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con EtOAc (100 mL) y se ajustó con NaHC03 acuoso saturado hasta un pH de 7. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2x150 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x150 mL) y NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se evaporó para dar el compuesto crudo 3 (18,9 g) como un aceite color rojo. LC-MS: 420 ( +Na) , 817 (2M+Na) .
A una solución del compuesto crudo 3 (18,9 g, 47,6 mmol) en THF anhidro (400 mL) se agregó EtOH anhidro (50 mL) y AcOH (57,2 g, 952 mmol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 30 minutos, luego se agregó NaBH3CN (15 g, 238 mmol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar durante 1 hora adicional a -5°C, la mezcla se ajustó con NaHCC>3 acuoso saturado hasta un pH de 7. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3x200 mL) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2x150 mL) y NaCl acuoso saturado (150 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=6 : 1 ) para dar el Compuesto 4 (7,1 g) como un sólido color amarillo claro. LC-MS: 422 (M+Na), 821 (2M+Na) .
A una solución del Compuesto 4 (7,1 g, 17,7 mmol) en EtOH anhidro (500 mL) se agregó K2C03 anhidro (9,8 g, 70,8 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 1 hora a 0°C, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. Luego de la filtración, el material filtrado se concentró y el residuo se diluyó con agua (150 mL) , DCM (200 mL) y NaCl acuoso saturado (50 mL) . Después de la separación, la fase acuosa se extrajo con DCM (2x150 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x200 mL) , se secó sobre MgS04, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=5 : 1 ) para dar el Compuesto 5 (2 g) como un sólido color amarillo claro. También se obtuvieron 2,1 g del isómero (R,S) como un sólido color amarillo claro.
El Compuesto 5 (400 mg, 0,9 mmol) se disolvió en MeCN (3 mL) y HCl 4 M en dioxano (0,5 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se concentró para dar el compuesto del titulo como una sal de HCl (340 mg) , que se formó como un aceite y solidificó durante la noche.
Preparación 24 t-butiléster de ácido [ (R) -2-bifenil-4-il-l- (2, 2, 5-trimetil-4 , 6-dioxo-l, 3-dioxinan-5-ilmetil) etil] carbámico Se agregó AcOH (8,6 mL) a una solución de t-butiléster de ácido [ (R) -1-bifenil-4-ilmetil-2- (2 , 2-dimetil-4 , 6-dioxo- [1, 3] dioxan-5-il) -2-oxo-etil] -carbámico crudo (6,4 g, 14 mmol) en MeCN anhidro (90 mL) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 30 minutos, luego se agregó borhidruro de sodio (1,3 g, 34,5 mmol) en porciones pequeñas durante 2 horas. Luego de agitar durante otra hora a -5°C, se agregó NaCl acuoso saturado y NaCl en agua 1,7 M (30 mL) . Las fases se separaron y la fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) y agua (2x30 mL) , se secó bajo gS04, se filtró y se evaporó. El producto resultante crudo se purificó adicionalmente mediante cromatografía (5:1 heptano : EtOAc) para dar t-butiléster de ácido [ (S) -2-bifenil-4-il-l- (2 , 2-dimetil- , 6-dioxo- [ 1 , 3] dioxan-5-ilmetil ) etil ] carbámico (1,1 g, pureza 98,4%) como un sólido color amarillo claro.
Se disolvió t-butiléster de ácido [ (S) -2-bifenil-4-il-l- (2 , 2-dimetil-4 , 6-dioxo- [1,3] dioxan-5-ilmetil ) -etil] carbámico (5,0 g, 11 mmol) y K2C03 (1,8 g, 13,2 mmol) en DMF (33,9 mL) y se enfrió a 0°C con agitación bajo nitrógeno. Se agregó ioduro de metilo (892 L) y la mezcla resultante se agitó a 0°C durante 1 hora. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente. Se agregaron NaCl acuoso saturado (35 mL) y EtOAc (35 mL) , y la mezcla resultante se agitó durante 2 minutos. Las fases se separaron y la fase orgánica se evaporó. El residuo se trituró con EtOAc (20 mL) . El sólido se retiró por filtración y se secó bajo vacío. El material filtrado se concentró y se trituró nuevamente con EtOAc para dar el compuesto del título (3,9 g) .
Preparación 25 ácido (2S, 4R) -5-bifeni1-4 -il-4- t-butoxicarbonilamino-2-hidroximetil-2-metilpentanoico (P2 =BOC) y ácido (2S,4R)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-2-metilpentanoico ( P2 eliminado) Se purgó agua destilada (140 mL) 30 minutos bajo nitrógeno, luego se agregó por medio de una cánula a un recipiente que contenia diioduro de samario en THF 0,1 M (800 mL) , cuidando de no permitir que la solución entrara en contacto con el aire. Manteniendo una atmósfera de nitrógeno, se agregó una solución desgasificada de t-butiléster de ácido [ (R) -2-bifenil-4-il-l- (2, 2 , 5-trimetil-4 , 6-dioxo-l , 3-dioxinan-5-ilmetil) etil] carbámico (3,7 g, 8,0 mol) y THF (100 mL) mediante una cánula. La mezcla resultante se agitó durante 15 minutos, luego se expuso al aire. Se agregó NaCl acuoso saturado (12 mL) , ácido cítrico 10% (6 mL) , y EtOAc (30 mL) . La mezcla se agitó durante 5 minutos, luego ambas fases se extrajeron. La fase orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía (columna Gold de 330g, gradiente de EtOAc con AcOH 0,5%/éter 50%) para dar el ácido protegido con BOC. (P2 =BOC) (1,4 g) . El ácido protegido con BOC se disolvió en MeCN (10 mL) , y luego se agregó HC1 en dioxano 4N (10 mL) . El solvente se evaporó y el producto se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (2x) para dar el ácido. (P2 eliminado) (1,0 g) .
Preparación 26 etiléster de ácido (2S, 4R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-2-metilpentanoico Se combinó ácido (2Sr 4R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-2-metilpentanoico (0,3 g, 957 pmol) con EtOH (6 mL) y HC1 en 1,4-dioxano 4 (718 pL) , y se agitó durante la noche. Los solventes se evaporaron y el producto se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (2x) para dar el compuesto del titulo (295 mg) , que se usó sin purificación adicional .
Preparación 27 t-butiléster de ácido [ (R) -1- (3 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) -2- (2,2, 5-t imetil-4 , 6-dioxo- [1,3] dioxan-5-il ) -etil ] carbámico A una solución de ácido (R) -2-amino-3- (4-bromofenil) propiónico (50 g, 0,2 mol) en eCN (700 mL) se agregó una solución de NaOH (16,4 g, 0,4 mol) en agua (700 mL) a -5°C. Luego de agitar durante 10 minutos, se agregó una solución de (BOC)20 (44,7 g, 0,2 mol) en MeCN (100 mL) . La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del MeCN, el residuo se diluyó con DCM (800 mL) y se acidificó con HC1 1 M hasta pH 2 a -5°C. La fase acuosa se extrajo con DCM (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (500 mL) , se secó sobre a2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 1 (64,2 g, sólido blanco). LC-MS: 366 [M+Na] , 709 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 1 (64,2 g, 187 mmol) en 1,4-dioxano (500 mL) se agregó ácido 3-fluorofenilborónico (31,3 g, 224 mmol) y Pd(dppf)2Cl2 (13,7 g, 19 mmol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 10 min, se agregó una solución de K2C03 (51,7 g, 374 mmol) en agua (250 mL) . La mezcla se calentó a 100°C y se agitó durante la noche. Luego de la evaporación del solvente, se agregó agua (200 mL) . La fase acuosa se acidificó con HC1 1 M hasta pH 2 y se extrajo con EtOAc (3x200 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (400 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna (hexanos : EtOAc=4 : 1 ) para dar el Compuesto 2 (45 g, aceite color amarillo claro). LC-MS: 382 [M+Na] , 741 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 2 (45 g, 125 mmol) , ácido de Meldrum (23,5 g, 163 mmol), y DMAP (26,0 g, 213 mmol) en DCM anhidro (500 mL) se agregó una solución de DCC (33,3 g, 163 mmol) en DCM anhidro (200 mL) durante 1 hora a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 8 horas, luego se refrigeró durante la noche, precipitando pequeños cristales de diciclohexilurea . Luego de la filtración, la mezcla se lavó con KHS04 5% (4x200 mL) y NaCl acuoso saturado (1x200 mL) , luego se secó bajo refrigeración con MgS04 anhidro durante la noche. La solución se evaporó para dar el compuesto crudo 3 (57,7 g, aceite color amarillo claro). LC- 508 [M+Na] , 993 [2 +Na] A una solución del compuesto crudo 3 (57,7 g, 119 mmol) en DCM anhidro (1 L) se agregó AcOH (78,4 g, 1,3 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 0,5 hora, luego se agregó NaBH4 (11,3 g, 0,3 mol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar durante a otra hora a -5°C, se agregó NaCl acuoso saturado (300 mL) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x300 mL) y agua (2x300 mL) , se secó sobre gS0 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto crudo, el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=6 : 1 ) para dar el Compuesto 4 (28 g, aceite color amarillo claro) . LC-MS: 494 [M+Na], 965 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 4 (28 g, 60 mmol) en DMF anhidro (250 mL) se agregó K2C03 (9,9 g, 72 mmol) y CH3I (25,6 g, 180 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego de agitar durante 1 hora a 0°C, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla se diluyó con agua (3 L) y se extrajo con EtOAc (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (500 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=5 : 1 ) para dar el compuesto del título (11,7 g, sólido color amarillo claro). LC-MS : 508 [M+Na] , 993 [2M+Na] . XH RMN (300 MHz, CD30D) : 57,52-7, 49 (m, 2H), 7,41-7,39 (m, 2H) , 7, 32-7,27 (m, 3H) , 7,07-7,01 (m, 1H) , 6,21-6,18 (d, 1H) , 3,79 (m, 1H) , 2,78-2,61 (m, 2H) , 2,35-2,20 (m, 2H), 1,76 (s, 6H) , 1,59 (s, 3H) , 2,21 (s, 1H) , l,28(s, 9H) .
Preparación 28 ácido (2S, 4R) -4- -Butoxicarbonilamino-5- (3 ' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil-2-metilpentanoico (P2 =BOC) y ácido (2S, 4R) -4-amino-5- (3 ' -fluorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-2-metilpentanoico (P2 eliminado) Se purgó agua destilada (181 mL) durante 1 hora bajo nitrógeno, luego se agregó por medio de una cánula a un recipiente que contenía diioduro de samario en THF 0,1 M (800 mL) . Manteniendo una atmósfera de nitrógeno, se agregó una solución desgasificada de manera similar de t-butiléster de ácido [ ('K -l-(3'-fluorobifenil-4-ilmetil)-2-(2,2,5-trimetil- 4, 6-dioxo- [1, 3] dioxan-5-il) -etil] -carbámico (4,9 g, 10,0 mmol) y THF (20 mL) mediante una cánula. La mezcla resultante se agitó durante 15 minutos, luego se expuso al aire. El solvente se evaporó, y se agregó EtOAc (200 mL) , NaCl acuoso saturado (50 mL) y ácido cítrico 10% (20 mL) . La mezcla se agitó durante 5 minutos, luego ambas fases se extrajeron. La fase orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró bajo vacío. El producto crudo se purificó mediante cromatografía (columna Gold de 330g, éter:EtOAc con AcOH 0,5% 1:1) para dar el ácido protegido con BOC. (P2 =BOC) (1,5 g) . Una porción del ácido protegido con BOC se disolvió en HC1 en dioxano 4M (6 mL) y MeCN (10 mL) . El solvente se evaporó bajo vacío para dar el ácido (P2 eliminado) .
Preparación 29 metiléster de ácido 3- (N-bifenil-4-ilmetil-N ' - 1- butoxicarbonilhidrazino) -2-hidroxi-2-metilpropiónico Se disolvió 4- (bromometil) bifenilo (2,00 g, 8,09 mmol) y DIPEA (1,4 mL, 8,1 mmol) en DMF (40,0 mL) , luego se agregó carbazato de t-butilo (2,1 g, 16,2 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Al completarse la reacción, la mezcla se concentró parcialmente, y el residuo se particionó entre EtOAc y NaHC03 acuoso saturado. La fase en EtOAc se secó sobre a2S04 y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc/hexanos con DIPEA 0,5% 0-60%) para dar el Compuesto 1 (1,3 g.) El compuesto 1 (460 mg, 1,5 mmol) se disolvió en alcohol isopropilico (10,0 mL) , luego se agregó 2-metilglicidato de metilo (180 L, 1,7 mmol) y la mezcla se calentó a 85°C durante la noche. Al completarse la reacción, la mezcla se particionó entre EtOAc y NaHCC>3 acuoso saturado. La fase en EtOAc luego se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar el compuesto del titulo (0,5 g) , que se usó sin purificación adicional .
Preparación 30 metiléster de ácido (R)-3- [N- ( -bromobencil) -N ' - t-butoxicarbonilhidrazino ] -2-hidroxipropiónico Se disolvió bromuro de 4-bromobencilo (5,0 g, 20 mmol) y DIPEA (3,48 mL, 20,0 mmol) en DMF (20 mL) . Se agregó carbazato de t-butilo (7,9 g, 60,0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción. La mezcla se concentró parcialmente, luego el residuo se particionó entre EtOAc y NaHCÜ3 acuoso saturado. La fase en EtOAc luego se secó sobre Na2S04 y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía flash para dar el Compuesto 1 (3,8 g) .
El compuesto 1 (1,9 g, 6,3 mmol) se disolvió en alcohol isopropílico (26,4 mL) . Se agregó (2R) -glicidato de metilo (1,1 mL, 12,6 mmol) y la mezcla se calentó a 90°C hasta completarse la reacción (~4 días) . La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para dar el compuesto del título (2,5 g) como un sólido blanco.
Preparación 31 etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 3 ' -clorobifenil ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Se combinó metiléster de ácido (R) -3- [N- ( 4-bromobencil) -N 1 - t-butoxicarbonilhidrazino] -2-hidroxipropiónico (600 mg, 1 mmol) , ácido 3-clorofenilborónico (419 mg, 2,7 mmol) , y K2C03 (617 mg, 4,5 mmol) en EtOH (5 mL) y agua (1 mL) , y luego se agregó SilicaCat®Pd ( 0 ) (0,09 mmol/g de carga, 1160 mg, 104 µ????) . La mezcla se calentó en un reactor de microondas a 120°C hasta completarse la reacción (-30 minutos). La mezcla se filtró y se concentró. El residuo se disolvió en MeCN/AcOH y se purificó mediante cromatografía en fase reversa (columna de 55 g; gradiente MeCN en agua con TFA 0,1% 30-95%). Las fracciones limpias se recogieron, se concentró y luego se disolvió en HC1 en dioxano 4M (6 mL) y EtOH (6 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, luego se concentró para dar el compuesto del título (250 mg) , que se usó sin purificación adicional.
Preparación 32 t-butiléster de ácido (S) -2- ( l-bifenil-4-il-l-metiletil) -5- oxo-pirrolidin-l-carboxílico A una solución de 2- (4-bromofenil) acetonitrilo (130,0 g, 0,7 mol) y iodometano (103,9 mL, 1,7 mol) en THF (1,0 L) se agregó NaH (dispersión al 60% en aceite mineral, 66,7 g, 1,7 mol) en pegueñas porciones a 10°C. Una vez completa la adición, la mezcla se agitó a 10°C durante otras 2 horas. La mezcla se volcó sobre agua helada (2,0 L) y se extrajo con EtOAc (1,5 L) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 1 (175 g, que contenia aceite mineral) como un aceite color amarillo, que se usó directamente sin purificación adicional. lH RMN (CDC13, 300 MHz) d 7,52 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 7,38 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 1,72 (s, 6H) .
A una solución del Compuesto 1 (175 g, que contenia aceite mineral) en DCM (1,0 L) se agregó DIBAL (solución en DCM 1,0 M, 700 mL, 0,70 mol) por goteo a -78°C. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 1,5 horas y luego se detuvo cuidadosamente con HC1 3,0 N (1,0 L) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche y la fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 2 (180 g) como un aceite color amarillo, que se usó directamente sin purificación adicional. lH RMN (CDC13, 300 MHz) d 9,48 (s, 1H) , 7,53 (d, J = 11,0 Hz, 2H) , 7,17 (d, J = 11,0 Hz, 2H) , 1,46 (s, 6H) .
A una solución acuosa de NaCN (32,7 g en 1,0 L de H20, 0,7 mol) se agregó (NH4)2C03 (380 g, 4,0 mol) y el Compuesto 2 (180 g) . La mezcla de reacción se sometió a reflujo durante la noche y luego se concentró bajo presión reducida a 75°C. Se agregó agua (350 mL) al residuo y la mezcla se concentró nuevamente. El residuo se suspendió en éter de petróleo (700 mL) y agua (250 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó para dar el Compuesto 3 (150 g) como un sólido blanco. 1H RMN (DMS0-d6, 300 MHz) d 10,39 (s, 1H) , 8,05 (s, 1H) , 7,48 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 7,28 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 4,17 (s, 1H) , 1,42 (s, 3H) , 1,34 (s, 3H) .
Una suspensión del Compuesto 3 (150 g, 0,51 mol) en NaOH 6,0 N (400 mL) y etan-1 , 2-diol (300 mL) se agitó a 120°C durante 38 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó con una solución de HC1. El precipitado se recogió mediante filtración y se secó para dar el Compuesto 4 (250 g, que contenia sal NaCl) como un sólido blanco. 1H RMN (DMSO-d6, 300 ???) d 7,35 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 7,17 (d, J = 9,0 Hz, 2H) , 3,22 (s, 1H) , 1,16 (s, 3H) , 1,15 (s, 3H) .
A una suspensión del Compuesto 4 (250 g, que contenia sal NaCl) en MeOH (1,0 L) se agregó cloruro de tionilo (72,0 mL, 1,0 mol) por goteo a 5°C. La mezcla se sometió a reflujo durante la noche y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se particiono entre DCM (1,0 L) y NaHC03 acuoso saturado (1,5 L) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el metiléster correspondiente (90,0 g) . Se agregó cloruro de 2-fenilacetilo (48,6 g, 0,32 mol) por goteo a una solución del éster (90,0 g) y Et3N (56,5 mL, 0,41 mol) en DCM (1,0 L) a 0°C y la mezcla se agitó a 0°C durante 30 minutos. La mezcla se lavó con HC1 1,0 N (500 mL) y NaCl acuoso saturado, respectivamente. La fase orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 5 (120 g) . XH RMN (CDC13, 300 Hz) d 7,32 (m, 5H) , 7,18 (m, 2H) , 6,95 (m, 2H), 5,68 (br s, 1H) , 4,76 (d, J = 9,0 Hz, 1H) , 3,57 (s, 3H) , 3,53 (d, J = 5,0 Hz, 2H) , 1,30 (s, 3H) , 1,25 (s, 3H) .
A una solución del Compuesto 5 (120 g, 0,30 mol) en MeOH (500 mL) se agregó NaOH 4,0 N (200 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas y luego el pH se ajustó a pH=l con HC1 3,0 N. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2x300 mL) . Los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre a2S04 anhidro, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se recristalizó a partir de EtOAc/hexanos para dar el Compuesto 6 (82,0 g) . XH R N (DMSO-d6, 300 MHz) d 7,41 (d, J = 6,0 Hz, 2H) , 7,22 (m, 5H) , 6,99 (d, J = 6,0 Hz, 2H) , 4,65 (d, J = 9,0 Hz, 1H) , 3,52 (d, J = 14,0 Hz, 1H) , 3,36 (d, J = 14,0 Hz, 1H) , 1,34 (s, 3H) , 1,30 (s, 3H) .
Una suspensión del Compuesto 6 (82,0 g, 0,21 mol) en agua destilada (3,0 L) se ajustó a pH=8,5 con LiOH 3,0 N y se formó una solución transparente. Se agregó penicilinasa inmovilizada (20,0 g) y la mezcla resultante se agitó a 37°C durante 60 horas. La mezcla se filtró y el material filtrado se ajustó a pH=l con HC1 3,0 N y se extrajo con EtOAc. Los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 7 (59,0 g, 80% ee, que contenia ácido 2-fenilacético) .
Una suspensión del Compuesto 7 (59,0 g, que contenia ácido 2-fenilacético) en HC1 6,0 N (500 mL) se sometió a reflujo durante la noche. La mezcla se lavó con EtOAc (300 mL) y la fase acuosa se concentró bajo presión reducida para dar el aminoácido correspondiente como su sal clorhidrato. La sal se disolvió en agua (300 mL) y la solución se ajustó a pH=ll. Se agregó una solución de (BOC)20 (33,0 g, 0,2 mol) en acetona (200 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se lavó con hexanos (200 mL) y la fase acuosa se ajustó a pH=2. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2x300 mL) . Los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 8 (37,0 g) como un sólido blanco. XH RMN (CDC13, 300 MHz) d 9,48 (br s, 1H) , 7,46 (d, J = 7,0 Hz, 2H) , 7,26 (d, J = 7,0 Hz, 2H) , 5,02 (br s, 1H) , 4,56 (d, J = 9,0 Hz, 1H) , 1,39 (s, 9H) .
Una mezcla del Compuesto 8 (37,0 g, 0,1 mol) en dioxano (200 mL) y K2C03 1,0 N (200 mL) se desgasificó durante 30 minutos con nitrógeno, y luego se agregó ácido fenilborónico (13,4 g, 0,1 mol) y Pd(PPh3)4 (1,6 g, 1,4 mmol) . La mezcla se calentó a 75°C durante 8 horas y luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla se lavó con EtOAc/hexanos (150 mL, 1:1) y la fase acuosa se ajustó a pH=2 y se extrajo con EtOAc (2x300 mL) . Los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2S04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 9 (31,0 g, 84% de rendimiento) como un sólido blanco.
Una solución del Compuesto 9 (31,0 g, 84 mmol), ácido de Meldrum (13,3 g, 92 mmol) y DMAP (15,4 g, 0,13 mol) en DCM (400 mL) se enfrió a -5°C y se agregó una solución de DCC (19,0 g, 92 mmol) en DCM (200 mL) durante 1 hora. La mezcla se agitó a -5°C durante la noche. El precipitado se retiró por filtración y el material filtrado se lavó con HC1 1,0 N (2x700 mL) y NaCl acuoso saturado, respectivamente. Después de secar la fase orgánica que contenia el Compuesto 10 sobre gS04 anhidro, se usó directamente para el siguiente paso sin concentración .
Una solución del Compuesto 10 en DCM (600 mL) se enfrió a -5°C y se agregó AcOH (45,0 mL) . Luego se agregó NaBH4 (7,0 g, 0,2 mol) en porciones pequeñas durante 30 minutos y la mezcla se agitó a -5°C durante 3 horas. Se agregó agua (50,0 mL) por goteo y luego se agregó NaCl acuoso saturado (450 mL) . La fase orgánica se lavó con agua (2x300 mL) y NaHC03 acuoso saturado (2x300 mL) , se secó sobre MgSC>4 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 11 (32,0 g, 75% ee) como un sólido blanco opaco. Después de la recristalización desde EtOH, se obtuvo el Compuesto 11 quiralmente puro (13,0 g) . lH RMN (CDC13, 300 MHz) d 7,61 (m, 10H) , 4,46 (br s, 1H) , 4,26 (m, 1H) , 3,72 (br s, 1H) , 2,23 (m, 1H) , 1,79 (s, 3H) , 1,76 (s, 3H) , 1,48 (s, 6H) , 1,39 (s, 9H) .
Una solución del Compuesto 11 (13,0 g, 27,0 mmol) en tolueno (100,0 mL) se sometió a reflujo durante 3 horas. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se recristalizó a partir de hexanos/EtOAc (3:1) para dar el compuesto del titulo (8,0 g) como un sólido blanco.
Preparación 33 etiléster de ácido (2R, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxi- 5-metilhexanoico Una mezcla de t-butiléster de ácido (S) -2- ( 1-bifenil-4- il-l-metiletil) -5-oxo-pirrolidin-l-carboxilico (14,0 g, 36,9 ramol, racémico) en una solución de HC1 3,0 N-EtOAc (150 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar el Compuesto 1 (10,0 g) como un sólido blanco.
A una solución del Compuesto 1 (10,0 g, 35,8 mmol) en THF (80,0 mL) se agregó BuLi (2,5 M en hexanos, 15,0 mL) por goteo a -78 °C. Después de agitar la mezcla durante 30 minutos se agregó cloruro de pivaloilo (4,8 mL, 39,4 mmol) por goteo. La mezcla se agitó a -78 °C durante 1 hora y luego se detuvo con NH4C1 acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc y los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía flash en columna sobre gel de sílice para dar el Compuesto 2 (9,0 g) como un sólido blanco.
A una solución del Compuesto 2 (9,0 g, 24,7 mmol) en THF (50,0 mL) se agregó bis ( trimetilsilil ) amida de sodio (2,0 M en THF, 18,5 mL, 37,0 mmol) por goteo a -78°C. La mezcla se agitó durante 20 minutos y se agregó una solución de derivado de oxaziridina (10,8 g, 37,0 mmol) en THF (30,0 mL) por goteo. La mezcla se agitó a -78°C durante 30 minutos y luego se detuvo con NH4CI acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (1,0 L) y el extracto se lavó con HC1 1,0 N y NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se evaporó para eliminar la mayor parte del solvente. El precipitado se retiró por filtración y el material filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía flash en columna sobre gel de sílice ( DCM: hexanos= 1:1 a DCM) para dar el Compuesto 3 (4,3 g, racémico) . Este racemato se sometió a cromatografía AD en columna quiral para dar el Compuesto 3 quiralmente puro (1,4 g) . ?? RMN (DMSO-d6, 300 MHz) d 7,63 (m, 4H) , 7,49 (m, 4H) , 4,83 (d, 1H) , 3,29 (m, 1H) , 2,31 (m, 2H) , 1,40 (s, 3H) , 1,36 (s, 3H) , 1,28 (s, 9H) . LC-MS (ESI): m/z 380,1 [M+H]+.
Una solución del Compuesto 3 (1,7 g, 160 mmol) en EtOH (15,0 mL) y HC1 12,0 N (15,0 mL) se calentó a 90~95°C durante 20 horas. El solvente se eliminó y el residuo se trató con una solución de HCl-EtOH 3,0 N (25,0 mL) bajo reflujo durante otras 3. horas. Luego de la eliminación del solvente, el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (0,6 g) como un sólido espumoso como sal de HC1. 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHz) d 7,88 (br s, 3H) , 7,68 (m, 4H), 7,49 (m, 4H) , 7,35 (m, 1H) , 6,11 (br s, 1H) , 4,11 (br s, 1H) , 4,05 (q, 2H) , 3,61 (br s, 1H) , 1,67 (m, 2H) , 1,40 (s, 3H), 1,36 (s, 3H), 1,09 (t, 3H) .* LC-MS (ESI): m/z 342,1 [M+H] + .
Preparación 34 etiléster de ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-5-metilhexanoico Una mezcla de t-butiléster de ácido (S) -2- ( 1-bifenil-4-il-l-metiletil) -5-oxo-pirrolidin-l-carboxilico (8,0 g, 21,2 mmol) y t-butoxi-N, ?,? ' , N 1 - tetrametilmetandiamina (10,0 g, 63,6 mmol) se calentó a 80°C durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc (200 mL) . La solución resultante se lavó con agua (2x100 mL) y NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgSC>4 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 1 (9,2 g, cuantitativo) como un aceite. XH R N (CDC13, 300 MHz) d 7,53 (m, 9H) , 6,95 (s, 1H) , 4,60 (br s, 1H) , 2,90 (s, 1H) , 2,62 (m, 2H) , 1,61 (s, 9H) , 1,39 (s, 3H) , 1,34 (s, 3H) .
A una solución del Compuesto 1 (9,2 g, 21,2 mmol) en THF (80,0 mL) se agregó HC1 1,0 N (25,0 mL) a 0°C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se diluyó con EtOAc (100 mL) . La mezcla resultante se neutralizó con NaHC03 acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (2x100 mL) . Los extractos combinados se lavaron con agua (2x100 mL) y NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 2 (8,6 g, cuantitativo) como un aceite. LC-MS (ESI): m/z 430,1 [M+Na]+.
A una solución del Compuesto 2 (8,6 g, 21,2 mmol) en THF (150 mL) y EtOH (15,0 mL) se agregó AcOH (24,3 mL, 0,4 mol) a -5°C. Después de agitar la mezcla a -5°C durante 30 minutos, se agregó NaBH3CN (5,3 g, 84,8 mmol) en pequeñas porciones durante 1 hora. La mezcla se agitó a -5°C durante 1 hora y se neutralizó con NaHC03 acuoso saturado. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2x100 mL) . Los extractos combinados se lavaron con agua (2x100 mL) y NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se concentró para dar el Compuesto 3 (8,67 g, cuantitativo) como un sólido espumoso.
A una solución del Compuesto 3 (3,5 g, 8,6 mmol) en EtOH (30,0 mL) se agregó K2C03 (2,4 g, 17,1 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó a 0°C durante 1 hora y luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla se filtró y el material filtrado se concentró. El residuo se trató con agua (20 mL) y la mezcla resultante se extrajo con DCM (3x25 mL) . Los extractos combinados se lavaron con NaCl acuoso saturado, se secó sobre MgS04 anhidro y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía flash en columna sobre gel de sílice (hexanos : EtOAc= 6:1) para dar el Compuesto 4 (2,2 g) como un sólido espumoso . 1H RMN (CDC13, 300 MHz) d 7,53 (m, 9H) , 4,35 (br s, 1H) , 4,15 (m, 2H) , 3,95 (br s, 1H) , 3,65 (m, 2H) , 2,61 (br s, 1H) , 1,79 (m, 1H) , 1,45 (s, 9H) , 1,35 (s, 3H) , 1,29 (s, 3H) , 1,25 (t, 3H) . LC-MS (ESI): m/z 478,2 [M+Na]+.
Una mezcla del Compuesto 4 (2,2 g, 4,8 mmol) en una solución de HCl-EtOH 2,0 N (30,0 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La eliminación del solvente bajo presión reducida dio el compuesto del título (1,6 g) como un sólido espumoso como sal de HC1. H RMN (DMSO-d6, 300 MHz) d 8,08 (br s, 3H) , 7,55 (m, 9H) , 4,95 (br s, 1H) , 3,95 (m, 2H) , 3,48 (m, 2H) , 2,75 (br s, 1H) , 1,79 (m, 2H) , 1,47 (s, 3H) , 1,40 (s, 3H), 1,09 (t, 3H) . LC-MS (ESI): m/z 356,1 [M+H]+. Preparación 35 etiléster de ácido 3- [N- ( 4-bromobencil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Una solución de metiléster de ácido (R) -3- [N- (4-bromobencil) -N ' - -butoxicarbonilhidrazino] -2-hidroxipropiónico (25 g, 62 mmol) en EtOH/HCl (310 mL, 1,0 M, 0,3 mol) se agitó durante la noche. La mezcla se concentró y el residuo se lavó con EtOAc (120 mL) y se filtró para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco como sal de HC1 (15 g) .
Preparación 36 (R) -2- [N- (4-bromobencil) -N ' -etoxioxalilhidrazino] -1-etoxicarboniletiléster etiléster de ácido oxálico agregó cloruro de etiloxalilo (70 µL, 630 µp???) por goteo a una solución de etiléster de ácido 3-[N-(4-bromobencil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (200 mg, 630 µ?t???) y Et3N (220 µ?, 1,6 mmol) en DCM (4,0 mL, 62,2 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agitó durante 15 minutos a 0°C y durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agregó agua (3 mL) , las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con DCM (2x2 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre MgS04, y se concentró para dar el compuesto del titulo (275 mg) .
Preparación 37 t-butiléster de ácido N' - (4-bromobencil) hidrazincarboxilico A una solución agitada de carbazato de t-butilo (50 g, 0,4 mol) en THF seco (400 mL) se agregó por goteo una solución de 4-bromobenzaldehído (70 g, 0,4 mol) en THF seco (200 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, y luego se concentró al vacio para dar el Compuesto 1 como un sólido color amarillo (113,8 g) . LC-MS : 243 [M-tBu+H] +.
A una solución del Compuesto 1 (113,8 g, 0,4 mol) en THF seco (1 L) se agregó NaCNBH3 (36 g, 0,6 mol) en porciones a 0°C. Se agregó AcOH (180 mL) por goteo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó agua (2 L) y EtOAc (1,5 L) y la fase acuosa se ajustó a pH = 7 con una solución acuosa saturada de NaaCC . La fase orgánica se separó, se lavó con NaCl acuoso saturado y agua (200 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró al vacio. El residuo se trató con MeOH (2 L) y NaOH 1N (1,5 L) , y luego se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas . Después de eliminar el solvente MeOH, el precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco (112 g) . LC-MS: 245 [M-tBu+H]+.
Preparación 38 metiléster de ácido (R) -3- [N ' - t-butoxicarbonil-N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico A una solución de t-butiléster de ácido N'-(4-bromobencil ) hidrazincarboxilico (60 g, 0,2 mol) en 1, 4-dioxano (1,5 mL) se agregó ácido 5-cloro-2-fluorofenilborónico (38 g, 0,2 mol) y Pd(dppf)Cl2 (7,3 g) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 10 minutos, y luego se agregó K2C03 (55,2 g, 0,4 mol) en agua (240 mL) . La mezcla resultante se agitó a 60°C durante 3 horas, y luego se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacio. El residuo se extrajo con EtOAc (3x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro y se concentró al vacio. El producto se purificó mediante cromatografía en columna (PE: EtOAc=10 : 1~5 : 1) para dar el Compuesto 1 como un sólido color rosado (56 g) . LC-MS: 701 [2?+?]+· A una solución del Compuesto 1 (20 g, 57 mmol) en alcohol isopropílico (250 mL) se agregó (2R) -glicidato de metilo (8,7 g, 86 mmol) bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a 85°C durante 3 días, luego se enfrió a temperatura ambiente. El sólido precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del título como un sólido blanco opaco (18,5 g) . LC-MS: 397 [M- tBu+H] + .
Preparación 39 etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4- ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Una solución de metiléster de ácido (R) -3- [N ' - t-butoxicarbonil-N- ( 5 ' -cloro-21 -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (20 g, 16 mmol) en HCl/EtOH (1,1 M, 200 mL) se agitó durante la noche y luego se concentró al vacio. El residuo se dispersó en EtOAc (2 x 40 mL) , y el precipitado se recogió mediante filtración para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco opaco como sal de HC1 (8,8 g) . LC-MS: 367 [M+H] + . ?? RMN (300 MHz, DMSO-d6) d 1,05 (t, J=7,2 Hz, 3 H) , 3,05-3,03 (q, <J=7,2 Hz, 2 H) , 4,06-3,95 (m, 4 H) , 4,42 (br, 1 H) , 6,46 (br, 1 H) , 7,62-7,40 (m, 7 H) , 9,42 (s, 3 H) .
Preparación 40 2-oxo-2-feniletiléster de ácido (' )-3-[N-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Se combinó etiléster de ácido 3-[N-(4-bromobencil ) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (3,1 g, 9,6 mmol) con dicarbonato de di-t-butilo (4,2 g, 19,2 mmol) y DCM (92,4 mL, 1,4 mol). Se agregó DIPEA (5,0 mL, 28,8 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en DCM y se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc en hexanos 10-95%). Las fracciones limpias se recogieron y se concentró para dar el Compuesto 1 como un polvo blanco (4,0 g) .
El compuesto 1 (3,5 g, 8,4 mmol) se combinó con ácido 5-cloro-2-fluorofenilborónico (1,8 g, 10,1 mmol) y K2CO3 (3,5 g, 25,2 mmol) en EtOH (29,4 mL, 503 mmol) y agua (7,6 mL, 419 mmol) . La mezcla resultante se colocó bajo nitrógeno y luego se agregó SilicaCat DPP-Pd (0,28 mmol/g de carga; 3,0 g, 839 µp???) . La mezcla se calentó por microondas a 120 °C durante 15 minutos. La mezcla luego se filtró y se evaporó bajo presión reducida. El residuo crudo se purificó usando cromatografía flash (EtOAc en hexanos 10-90%) para dar el Compuesto 2 (2,0 g) · El compuesto 2 (500 mg, 1 mmol) se combinó con 2C03 (315 mg, 2,3 mmol) en DMF (5,3 mL, 68,4 mmol) . Luego se agregó 2-bromoacetofenona (249 mg, 1,3 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla luego se purificó usando cromatografía flash (EtOAc en Hexanos 50-100%). Este material purificado (605 mg) luego se disolvió en MeCN (3,6 mL, 68,4 mmol) . Luego se agregó una solución de HC1 en 1,4-dioxano 4 M (1,4 mL, 5,7 mmol), y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora para dar el compuesto del título (245 mg) .
Preparación 41 ácido (R) -3- [N ' - -butoxioxalil-N- (5'-cloro-2' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Se preparó cloruro de t-butiloxalilo agregando cloruro de oxalilo (102 pL, 1,2 mmol) a una solución de alcohol t-butilico (35 pL, 361 µp???) en éter (632 pL, 6,0 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y luego se concentró al vacío para dar un líquido transparente incoloro.
Se disolvió 2-oxo-2-feniletiléster de ácido ^ -3-tN- ( 51 -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) hid azino] -2-hidroxipropiónico (55,0 mg, 120 pmol) en DCM (463 pL, 7,2 mmol) . Se agregó el cloruro de t-butiloxalilo, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, y luego se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió en AcOH (411 pL, 7,2 mmol). Se agregó zinc (394 mg, 6,0 mmol) a la mezcla, que luego se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se filtró y se purificó (columna en fase reversa Interchim) para dar el compuesto del título (25,0 mg) .
Preparación 42 5-metil-2-oxo- [1, 3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (R)-3-[H¡-(5' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico Se agregó hidrato de LiOH (3g, 73mmol) en agua (60 mL) a metiléster de ácido (R) -3- [N ' - -butoxicarbonil-N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (16,5 g, 36,5 mmol) en MeOH (300 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, y el MeOH se evaporó al vacio. La mezcla se ajustó a pH=5 con HC1 acuoso 1 M, y el residuo se extrajo con EtOAc (2x300 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro, y se concentró al vacio para dar el Compuesto 1 como un sólido blanco (18 g) . LC-MS: 383 [M-tBu+H] .
A una solución del Compuesto 1 (1,5 g, 3,42 mmol), K2C03 (0,95g, 6,84 mmol) y ioduro de potasio (20mg) en D F (40 mL) se agregó 4- (bromometil) -5-metil-l, 3-dioxol-2-ona (0,8 g, 4,1 mmol) en DMF (15 mL) . La mezcla resultante se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente. Se agregó NaCl acuoso saturado (30 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (2x50 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (hexanos/EtOAc=l : 1 ) para dar el Compuesto 2 como un sólido color amarillo (930 mg) . LC-MS: 495 [M-tBu+H]+.
El compuesto 2 (400 mg, 0,73mmol) se disolvió en MeCN (20 mL) , y se enfrió a 0°C. Se agregó N-trimetilsililimidazol (290 mg, l,46mmol) por goteo y la mezcla resultante se agitó durante 2 horas. Se agregó MeOH (50 mL) para detener la reacción. La mezcla se lavó con NaCl acuoso saturado (2x50 mL) y se extrajo con DCM (2x80 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro y se concentró al vacío. El producto se recogió para dar el compuesto del título como un sólido color amarillo (200 mg) . LC-MS: 451 [M+H]+.
Preparación 43 ácido (R) -3- [N ' - t-butoxioxalil-N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) -hidrazino] -2-hidroxipropiónico A una mezcla de 2-oxo-2-feniletiléster de ácido (R)-3- [N- (51 -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (2,0 g, 4,4 mmol) en DCM (10 mL) se agregó por goteo 2-cloro-2-oxoacetato de t-butilo (1,5 g, 8,8 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego se agregó DIPEA (1,15 g, 8,8 mmol) por goteo, y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos a 0°C. El solvente se eliminó mediante evaporación y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (PE:EtOAc=2 : 1) para dar el Compuesto 1 como un líquido color amarillo (2,0 g) . LC-MS : 585[M+H]+.
Una mezcla del Compuesto 1(2,0 g, 3,4 mmol) y Zn (15,5 g, 240 mmol) en AcOH (15 mL) se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente, luego se filtró. Se agregó agua (30 mL) 10 al filtrado, y la mezcla se extrajo con EtOAc (3x40 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x50 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró al vacio. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ( DCM/MeOH=10 : 1 ) para dar el ^j. compuesto del título como un líquido color amarillo (1,4 g) .
LC-MS: 467 [M+H]+.
EJEMPLO 1 ácido (R) -5-bifenil-4-il-2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4- il-2-hidroxipentanoico (sal de HC1; 47 mg, 0,2 mmol) y cloruro de etiloxalilo (18,4 L, 1,1 eq) con DI PEA (52,2 µ?,, 0,3 mmol) en DMF (0,3 mL) /DCM (0,3 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción. El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en EtOH (750 µ? y NaOH acuoso 1 M (750 pL) , y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se eliminó y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (28,2 mg, pureza 100%). MS m/z [ +H]+ calculado para Ci9Hi9N06, 358, 12; encontrado 358, 0.
EJEMPLO 2 A. ácido (2R,4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Una solución de cloruro de etiloxalilo (70, 7 \iL, 0,6 mmol) en DIPEA (165 µL, 0,9 mmol) se agregó a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 4-bromofenil ) -2-hidroxipentanoico (100 mg, 0,3 mmol) y DCM (0,7 mL) , y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, luego se evaporó el solvente bajo presión reducida.
Se agregó pinacoléster de ácido 3-clorofenilborónico (112 mg, 468 µ????), K2C03 (97 mg, 702 µp???), EtOH (2 mL) , y agua (0,6 mL) , y luego se agregó SilicaCat®Pd ( 0 ) (0,09 mmol/g de carga, 260 mg, 23,4 µp???) . La mezcla se calentó a 120°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se concentró y se agregó NaOH acuoso 10 M (316 µL) y THF (4,0 mL) con 1 gota de MeOH. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El residuo se disolvió en AcOH y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (9 mg, pureza 95%) . MS m/z [M+H]+ calculado para Ci9Hi8ClN06, 392, 08; encontrado 392,4.
B. etiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il ) -2- hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó cloruro de oxalilo (54,5 µL, 0,6 mmol) a una solución de alcohol t-butilico (56,0 L) en éter (1,0 mL) y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se concentró bajo vacio y se agregó una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (31 -clorobifenil-4-il) - 2-hidroxipentanoico (67,9 mg, 0,2 mmol) y DI PEA (102 µ??, 0,6 mraol, ) en DCM (1,0 mL) al residuo liquido transparente incoloro resultante. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se concentró bajo vacio para dar un liquido transparente color amarillo. Se agregó TFA/DCM 1:1 (1,6 mL) al liquido crudo y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se concentró bajo vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó mediante HPLC preparativa en fase reversa (MeCN/H20 40-90%) para dar el compuesto del titulo (25,0 mg, pureza 95%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H] + calculado para C2iH22ClN06, 420,11; encontrado 420,1.
C. etiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -4- (etoxioxalilamino) -2-hidroxipentanoico Una solución de cloruro de etiloxalilo (24,6 µL, 0,2 mmol) en DCM (0,4 mL) se agregó a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il ) -2- hidroxipentanoico (69,6 mg, 0,2 mmol) y Et3N (69,7 µL, 0,5 mmol) en DCM (1,0 mL) a 0°C durante un periodo de 10 minutos. La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 minutos, y luego durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agregó agua (2 mL) , las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con DCM (2x2 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó mediante cromatografía flash (columna de 4g, 16 mL/min, usando EtOAc/hexanos 35% (2 min) , 35-50% (1 min) , 50% (4 min) , 50-70% (1 min) y EtOAc/hexanos 70% (3 min) ) para dar el compuesto del título (63,9 mg, pureza 90%) como un líquido transparente incoloro que solidificó al dejarse en reposo para dar un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C23H26C1N06, 448, 14 ; encontrado 448, 2.
D. butiléster de ácido (2R, 4R) -4- (butoxioxalilamino) -5- ( 3 ' - clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico Se agregó ácido p-toluenosulfónico monohidratado (849 4 µ????) a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -5- -clorobifenil-4-il ) -4- (etoxioxalilamino) -2- hidroxipentanoico (20,0 mg, 45 µp???) en 1-butanol (0,5 mL) . La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante 14 horas, a 90°C durante 4 horas, y luego se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó NaHCC>3 acuoso saturado (2 mL) , y la fase acuosa se extrajo con DCM (3x2 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró bajo vacio para dar un liquido transparente incoloro. El liquido crudo se purificó mediante cromatografía flash (columna de 4 g, EtOAc/hexanos 40%) para dar el compuesto del título (18,1 mg, pureza 99%) como un líquido transparente incoloro. MS m/z [M+H]+ calculado para C27H34CINO6, 504,21; encontrado 504, 2.
E . 5-meti1-2-oxo- [1,3] dioxol-4 -ilmetiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- [ (5-metil-2- oxo- [1,3] dioxol-4-ilmetoxioxalil ) amino] pentanoico Se agregó cloruro de oxalilo (22,4 µL, 264 µ????) a una solución de 4-hidroximetil-5-metil- [1, 3] dioxol-2-ona (29,1 mg, 224 µ????) en éter (1,5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El éter se retiró bajo vacío y el residuo se disolvió en DMF (1,5 mL) . La solución resultante se agregó a una solución de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -cloro-bifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico (65,0 mg, 203 µp???) y NaHC03 (51,2 mg) a 0°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas, luego se concentró bajo vacio. El residuo luego se purificó por HPLC preparativa en fase reversa (MeCN/H20 30%-90%) para dar el compuesto 1 (19,1 mg) como un sólido blanco.
Se agregó 1-hidroxibenzotriazol (7,7 mg, 56,8 µ????) y clorhidrato de N- ( 3-dimetilaminopropil) -N 1 -etilcarbodiimida (10,9 mg, 56,8 µ?t???) a una solución del compuesto 1 (19,1 mg, 37,9 µp???) en DCM (1,0 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se agregó 4-hidroximetil-5-metil- [1, 3] dioxol-2-ona (14,8 mg, 114 µ????) y 4-metilmorfolina (7,7 mg, 75,8 µp???) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas . Se agregó agua y la mezcla se extrajo con DCM (3x1,5 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre a2S0 , y se concentró para dar un liquido color amarillo. El liquido crudo se purificó mediante HPLC preparativa en fase reversa para dar el compuesto del título como un sólido blanco (5,1 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C29H26CINO12, 616,11; encontrado 616,1.
F. ácido (2R,4R) - 5 - (3 ' -clorobifenil-4-il) -4- (etoxioxalilamino) -2-hidroxipentanoico Se agregó cloruro de etiloxalilo (46,1 \JL~L , 0,4 mmol) a una solución de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 31 -cloro-bifenil-4-il) -2-hidroxi-pentanoico (120 mg, 0,4 mmol) y Et3N (157 µ?,, 1,1 mmol) en DMF (2,0 mL, 25,8 mmol) a 0°C, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. Se agregó más cloruro de etiloxalilo (30 µ??) y la mezcla se agitó durante otros 10 minutos. Se agregó agua (2 mL) y la mezcla se extrajo con DCM (3x2 mL) . Los extractos se combinaron, se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar un líquido color amarillo. El líquido crudo se purificó mediante cromatografía en columna C-18 (20 g; MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (28,5 mg) como un sólido blanco. MS m/z [M+H] + calculado para C21H22C INO5 , 420,11; encontrado 420,2.
G. ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (isopropoxioxalilamino) pentanoico Se agregó isopropiléster de ácido cloro-oxo-acético (62,1 mg, 413 µp???; ~ 53 L) por goteo a una solución de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -cloro-bifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico (100 mg, 313 pmol) y Et3N (157 L, 1,1 mmol) en DMF (2,0 mL, 25,8 mmol) a 0°C, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se agregó más cloruro de etiloxalilo (50 µ?,) y la mezcla se agitó durante otros 10 minutos. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se extrajo con DCM (3x3 mL) , los extractos se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró para dar un liquido color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC preparativa en columna C-18, columna pequeña, usando MeCN en agua con TFA 0,05% 40-95%) para dar el compuesto del título (53,0 mg) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24C1 06, 434, 13; encontrado 434, 1.
H. ácido (-2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (isobutoxioxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 acuoso 1,0 M (2,5 mL, 2,5 mmol) a. etiléster de ácido (2R,4R) -4-amino-5- (31 -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (100 mg, 287 µp???) y la mezcla resultante se agitó a 100°C durante 1 hora. La mezcla se concentró para dar ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico .
Se agregó isobutiléster de ácido cloro-oxo-acético (99,4 mg, 604 µ?t???) por goteo a una solución de ácido (2R, 4R) -4 -amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico y Et3N (160 µ?,, 1,2 mmol) en DMF (2,0 mL, 25,8 mmol) a 0°C, y se agitó temperatura ambiente durante 10 minutos. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se extrajo con DCM (3x5 mL) , los extractos en DCM se combinaron, se lavó con NaCl acuoso saturado, se secó sobre Na2SC>4, y se concentró para dar un residuo sólido blanco. El sólido crudo se purificó por cromatografía HPLC preparativa en columna C18 (columna pequeña; MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (40,0 mg) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C23H26C1N06, 448, 14; encontrado 448, 1.
I . isobutiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il) - 2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (216 µ?,, 862 µp???) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (75,0 mg, 216 µp???) en alcohol isobutílico (0,5 mL, 5,4 mmol) , y la mezcla resultante se agitó a 60°C durante 2 horas. La mezcla luego se concentró al vacío para dar un sólido blanco. El sólido blanco se disolvió en DCM y luego se agregó DIPEA (113 L, 647 umol) a la mezcla seguido por -0,22 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacío para dar un líquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,3 mL, 7,7 mmol) al líquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (70,5 mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C23H26C1N06, 448, 14; encontrado 448, 1.
J. isopropiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il) - 2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (216 pL, 862 µp???) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (75,0 mg, 216 µ????) en alcohol isopropílico (0,5 mL, 6,5 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 60 °C durante la noche. La mezcla luego se concentró al vacío para dar un sólido blanco. El sólido blanco se disolvió en DCM y luego se agregó DIPEA (113 µL, 647 µp???) a la mezcla seguido por -0,22 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacío para dar un líquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,3 mL, 7,7 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (62,8 mg, pureza 98%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24CINO6, 434, 13; encontrado 434, 1.
K. heptiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2- hidroxi-4- ( oxalilamino ) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (216 L, 862 µp???) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (75,0 mg, 216 µp???) en l-heptanol (250 \xL, 1,8 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 60°C durante 2 horas. La mezcla luego se concentró al vacío para dar un sólido blanco, que se purificó (cromatografía en fase reversa en columna Interchim; gradiente de MeCN en agua con 0,5% TFA 30-90%). El sólido blanco purificado se disolvió en DCM y luego se agregó DIPEA (113 ]xL, 647 µp???) a la mezcla seguido por ~0,22 mL de una solución de cloruro de t- butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liguido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,3 mL, 7,7 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40- 90%) para dar el compuesto del título (43,3 mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C26H32C1 05, 490, 19; encontrado 490, 2.
L . 3 , 3, 3-trifluoropropiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' - clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (287 µL, 1,2 mmol) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 31 - clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 144 µ????) en 3, 3, 3-trifluoropropan-l-ol (492 mg, 4,3 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 80°C durante 12 horas. La mezcla luego se concentró al vacio para dar un sólido blanco, que se disolvió en DCM (1,0 mL) y ~0,2 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol). Luego se agregó DI PEA (75,1 µ??, 431 µ????) por goteo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,3 mL, 7,7 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (44,9 mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H] + calculado para C22H21CIF3NO6, 488, 10; encontrado 488, 1.
M. 2, 2, 2-trifluoroetiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' - clorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (287 µ??, 1,2 mmol) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-araino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 144 µp???) en 2 , 2 , 2-trifluoroetanol (0,5 mL, 6,9 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 110°C durante 12 horas. La mezcla luego se concentró al vacio para dar un sólido blanco, que se disolvió en DC (1,0 mL) y ~0,2 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol). Luego se agregó DIPEA (75,1 µL, 431 µp???) por goteo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,3 mL, 7,7 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del titulo (22,5 mg, pureza 98%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C2iH19ClF3N06, 474, 09; encontrado 474, 1.
N. ácido (2R, 4R)-5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- [ (3,3, 3-trifluoropropoxioxalil) -amino] pentanoico Se agregó alcohol bencílico (13,0 mL, 126 mmol) a etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) - 2-hidroxipentanoico (1,9 g, 5,3 mmol) seguido por HC1 en 1,4- dioxano 4,0 M (5,3 mL, 21,3 mmol), y la mezcla se agitó a 60°C durante 1 hora. La mezcla se purificó (cromatografía en fase reversa en columna Interchim; MeCN en agua con TFA 0,05% 30-90%) para dar benciléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' - clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico (2,2 g) como un sólido blanco, (evaporado al vacío con agua (4 x 300 mL) para eliminar el exceso de alcohol bencílico) .
Se preparó cloruro de 3, 3, 3-trifluoropropiloxalilo agregando cloruro de oxalilo (51,6 µL, 610 µp???) a una solución de 3 , 3 , 3-trifluoropropan-l-ol (62,6 mg, 549 pmol) en éter (500 µL, 4,8 mmol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y luego se concentró al vacío dando un líquido transparente incoloro. Se preparó una solución del cloruro de oxalilo ~1M disolviendo el líquido resultante en -0,61 mL de DCM.
La solución de cloruro de 3, 3, 3-trifluoropropiloxalilo (-140 µ??) se agregó a una solución de benciléster de ácido (2R,4R) -4-amino-5- (3' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 122 µp???) en DCM (1,0 mL) a 0 °C, y la mezcla se agitó a 0°C durante 15 minutos. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (1 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2x2 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró para dar un líquido transparente color amarillo. Se agregó Pd al 10%/C, 50% de humedad (0,45 mmol/g de carga; 13,6 mg, 6,1 µp???) a una solución del líquido amarillo en DCM y THF (1,0 mL) , y la mezcla se agitó bajo hidrógeno durante 30 minutos. La mezcla se filtró y el material filtrado se concentró para dar un líquido transparente color amarillo. El líquido crudo se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (16,5mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H2iClF3N06, 488, 10; encontrado 4880. 0. 2 , 2 , 3 , 3 , 3-pentafluoropropiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' - clorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó una solución de cloruro de t-butiloxalilo ~1M (-0,2 mL) a una solución de 2, 2, 3, 3, 3-pentafluoropropiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 111 µp???) en DCM (1,0 mL) a 0°C y luego se agregó por goteo a lo largo de 10 minutos DIPEA (21,2 µ?,, 122 µp???) . La mezcla se agitó a 0°C durante 15 minutos. Se agregó NaHCC>3 acuoso saturado (5 mL) y la mezcla se extrajo con DCM (3x5 mL) . Los extractos en DCM se combinaron, se secó sobre Na2S04, y se concentró para dar un liquido transparente incoloro. El liquido crudo se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc/hexanos 50 %) para dar un líquido transparente incoloro. Se agregó TFA/DCM 1:1 (1,0 mL) a una solución del líquido incoloro y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacío para dar un líquido transparente color amarillo. El líquido crudo se purificó HPLC preparativa (MeCN en agua con TFA 0,05% 40%-90%) para dar el compuesto del título (21,6 mg, pureza 98%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H] + calculado para C22H19CIF5NO6, 524, 08; encontrado 524, 0.
P. 5-metil-2-oxo- [1,3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4 (oxalilamino) pentanoico Una solución de cloruro de t-butiloxalilo ~1M (160 \i ) se agregó a una solución de 5-metil-2-oxo [1, 3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 116 µp???) en DCM (1,00 mL, 15,6 mmol) a 0°C y luego se agregó por goteo a lo largo de 10 minutos N, N-diisopropilamina (17,8 µL, 127 µp???) . La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos, luego se concentró al vacio. Se agregó TFA/DCM 1:1 (1,0 mL, 6,2 mmol) al residuo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía en columna C18 a escala preparativa, columna pequeña, usando MeCN en agua con TFA 0,05% 30-90%) para dar el compuesto del título como un sólido blanco (9,6 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C24H22C INO9 , 504,10; encontrado 504,0.
Q. butiriloximetiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3 ' -clorobifenil- 4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Una solución de cloruro de t-butiloxalilo ~1M (160 L) se agregó a una solución de butiriloximetiléster de ácido (2R,4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifeni1-4-i1 ) -2-hidroxipentanoico (48,6 mg, 116 µp???) en DCM (1,00 mL, 15,6 mmol) a 0°C y luego se agregó por goteo a lo largo de 10 minutos N,N-diisopropilamina (17,8 µL, 127 mol). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos, luego se concentró al vacio. Se agregó TFA/DCM 1:1 (1,0 mL, 6,2 mmol) al residuo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía en columna C18 a escala preparativa, columna pequeña, usando MeCN en agua con TFA 0,05% 30-90%) para dar el compuesto del título como un sólido blanco (10,2 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C2 H26C1N08, 492, 13; encontrado 492, 0.
R. acetoximetiléster de ácido (2R, R) -5- (3 ' -cloro-bifenil-4- il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico A una solución de ácido (2R, 4R) -4- ( t-butoxioxalilamino) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (200 mg, 450 µp???) y acetato de bromómetilo (97 mg, 0,9 mmol) en DMF (2 mL) se agregó 2, 6-lutidina (144 mg, 1,3 mmol) y Nal (67 mg, 450 µp???) . Luego de agitar a temperatura ambiente durante 24 horas, la mezcla se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con EtOAc (2x20 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x70 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente por TLC preparativa (PE:EtOAc =2:1) para dar el Compuesto 1 (100 mg) como un sólido color amarillo. LC-MS: 542[M+Na]+.
A una solución del Compuesto 1 (100 mg, 0,2 mmol) en DCM (5 mL) se agregó TFA (2 mL) a 0°C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, el solvente se eliminó, y el residuo se purificó adicionalmente por TLC preparativa (DCM:MeOH = 8:1) para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco (10 mg) . LC-MS: 464 [M+H]+ . XH RMN (400 MHz, MeOD) d 7,61 (s, 1H) , 7,55 (d, J=8,0 Hz, 3H) , 7,42 (t, J=7,8 Hz, 1H) , 7,34 (d, J=8,l Hz, 3H) , 5,78 (s, 2H) , 4,40 (s, 1H) , 4,31 (t, J=5,9 Hz, 1H) , 2,94 (ddd, J=22,0, 13,8, 7,2 Hz, 2H) , 2,09 (m, 5H) .
S . etoxicarboniloximetiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' - clorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico A una solución de ácido (2R, 4R) -4- ( -butoxioxalilamino) - 5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (100 mg, 220 µ????) y carbonato de clorometilo etilo (61 mg, 440 µp???) en DMF (3 mL) se agregó 2, 6-lutidina (72 mg, 660 µp???) y Nal (33 mg, 220 µp???) . Luego de agitar a temperatura ambiente durante 24 horas, la mezcla se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con EtOAc (2x20 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x70 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente por TLC preparativa (PE:EtOAc =2:1) para dar el Compuesto 1 (40 mg) como un sólido color amarillo. LC-MS: 572[M+Na]+.
A una solución del Compuesto 1 (40 mg, 70 µp???) en DCM (3 mL) se agregó TFA (1 mL) a 0°C. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, el solvente se eliminó, y el residuo se purificó adicionalmente por TLC preparativa (DCM:MeOH = 8:1) para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco (18 mg) . LC-MS: 494 [M+H]+. 2H RMN (400 MHz, MeOD) d 7,55 (m, 4H) , 7,38 (m, 4H) , 5,80 (d, J=18,6 Hz, 2H) , 4,34 (s, 2H) , 4,21 (dd, J=14,3, 7,1 Hz, 2H) , 2,95 (m, 2H) , 2,07 (d, J=28,0 Hz, 2H) , 1,29 (dd, J=12,6, 5,5 Hz, 3H) . MS m/z [M+H]+ calculado para C23H24CINO9, 494, 11; encontrado 494. T. ácido (2R, R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- [ (2- metoxietoxioxalil) amino] -pentanoico Se agregó DIPEA (64 µ??, 366 µp???) a una solución de benciléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 122 µ????) en DCM (3 mL) y luego se agregó por goteo una solución de 2-metoxietiléster de ácido cloro-oxo-acético (22 mg, 134 µp???) en DCM 1,0M. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía en columna C18 Interchim, 20g, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%). Se agregó THF (3 mL) al material purificado, y luego se agregó paladio sobre carbono (10% en peso sobre carbono, húmedo 50g, 12,9 mg, 12 µp???) y la mezcla se agitó bajo hidrógeno durante 30 minutos. La mezcla se filtró y se concentró al vacío, y el residuo se disolvió en AcOH (0,5 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (9,8 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24CINO7, 450,12; encontrado 450,2.
U. ácido (2R, 4R) -5- (3' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- [ (2- fenoxietoxioxalil ) amino] -pentanoico Se agregó DIPEA (64 µ??, 366 µp???) a una solución de benciléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 122 µp???) en DCM (3 mL) y luego se agregó por goteo una solución de 2-fenoxietiléster de ácido cloro-oxo-acético (31 mg, 134 µp???) en DCM 1,0M. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía en columna C18 Interchim, 20g, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%). Se agregó THF (3 mL) al material purificado, y luego se agregó paladio sobre carbono (10% en peso sobre carbono, húmedo 50g, 12,9 mg, 12 µp???) y la mezcla se agitó bajo hidrógeno durante 30 minutos. La mezcla se filtró y se concentró al vacio, y el residuo se disolvió en AcOH (0,5 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (3,5 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C27H26CINO7, 512,14; encontrado 512,2.
V. ácido (2R, 4R) -5- (3' -clorobifenil-4-il) -4- [ (3- etoxipropoxioxalil ) amino] -2-hidroxi-pentanoico Se agregó DIPEA (64 µL, 366 µ????) a una solución de benciléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 122 µ????) en DCM (3 mL) y luego se agregó por goteo una solución de 3-etoxipropiléster de ácido cloro-oxo-acético (26 g, 134 µ????) en DCM 1,0M. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía en columna C18 Interchim, 20g, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%). Se agregó THF (3 mL) al material purificado, y luego se agregó paladio sobre carbono (10% en peso sobre carbono, húmedo 50g, 12,9 mg, 12 µp?1) y la mezcla se agitó bajo hidrógeno durante 30 minutos. La mezcla se filtró y se concentró al vacío, y el residuo se disolvió en AcOH (0,5 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (10,5 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C24H28CINO7, 478,16; encontrado 478,2.
W. (S) -2-metoxicarbonilamino-3-metilbutiriloximetiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Siguiendo los métodos descritos en la presente, también se preparó el compuesto del título (12,6 mg) . MS m/z [M+H] + calculado para C27H31CI 2O10, 579, 17; encontrado 579,2 EJEMPLO 3 A. ácido (2R, 4R) -5- (2 ' , 5 ' -Diclorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Una solución de cloruro de etiloxalilo (42,4 µ?,, 0,4 mmol) en DCM (0,4 mL, 6 mmol) se agregó a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 4-bromofenil ) -2- hidroxipentanoico (80 mg, 0,2 mmol) y Et3N (0,1 mL, 0,8 mmol) en DCM (1 mL) , y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se evaporó bajo presión reducida. El producto luego se combinó con ácido 2,5- diclorofenilborónico (72,4 mg, 0,4 mmol), K2C03 (104,9 mg, 759 µp???) , EtOH (0,9 mL) , y agua (0,2 mL) . La mezcla se colocó bajo nitrógeno y se agregó SilicaCat®DPP-Pd (0,28 mmol/g de carga, 90,4 mg, 25,3µp??1). La mezcla se calentó por microondas a 120°C durante 20 minutos, luego se filtró. Se agregó LiOH acuoso 1 M (2,5 mL, 2,5 mmol) para dar el compuesto del título (11,9 mg, pureza 100%). MS m/z [M+H]+ calculado para Ci9Hi7Cl2N06, 426, 04; encontrado 426, 0.
B. isobutiléster de ácido (2R, 4R) -5- (2 ', 5 ' -Diclorobifenil-4- il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 (196 uL, 785 µ????) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (21 , 5 ' -diclorobifenil-4-il) -2-hidroxi-pentanoico (75,0 mg, 196 µp???) en alcohol isobutílico (0,5 mL, 5,4 mmol), y la mezcla resultante se agitó a 60°C durante 2 horas. La mezcla luego se concentró al vacío para dar un sólido blanco. El sólido blanco se disolvió en DCM (1 mL) y luego se agregó DIPEA (102 µL, 588 µp???) a la mezcla seguido por -0,2 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,1 mL, 7,0 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, eCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del título (80 mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C23H25CI2 O6, 482, 11; encontrado 482, 1. C . isopropiléster de ácido (2R, 4R) -5- (2 ' , 5 ' -diclorobifenil- 4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Se agregó HC1 en 1,4-dioxano 4,0 M (196 L, 785 pmol) a una suspensión de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (2 ' , 5 ' -diclorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico (75,0 mg, 196 µp???) en alcohol isopropílico (0,5 mL, 6,5 mmol), y la mezcla resultante se agitó a 60 °C durante la noche. La mezcla luego se concentró al vacío para dar un sólido blanco. El sólido blanco se disolvió en DCM (1 mL) y luego se agregó DIPEA (102 µ?,, 588 µp???) a la mezcla seguido por -0,2 mL de una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM 1M (0,2 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido color amarillo. Se agregó una solución de TFA/DCM (1:1, 1,1 mL, 7,0 mmol) al liquido amarillo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacio para dar un liquido transparente color amarillo. El liquido crudo se purificó (cromatografía HPLC a escala preparativa en columna C18, MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del titulo (60,6 mg, pureza 98%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C22H23CI2NO6, 468, 09; encontrado 468, 1. D. ácido (2R, 4R) -5- (2 ' , 5 ' -Diclorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- ( isobutoxioxalilamino ) -pentanoico Se agregó HC1 acuoso 1,0 M (3,5 mL, 3,5 mmol) a etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- (2 ', 5 ' -diclorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-pentanoico (155 mg, 405 µp???) y la mezcla se agitó a 100 °C durante 1 hora, luego se concentró. El producto se combinó con Et3N (226 µ?,, 1,6 mmol) en DMF (2,5 mL, 32,3 mmol) . Se agregó isobutiléster de ácido cloro-oxo-acético (140 mg, 851 µ????) por goteo a 0°C y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se extrajo con DCM (3x5 mL) , los extractos se combinaron, se lavó con a solución acuosa saturada de NaCl, se secó sobre Na2S04 y se concentró para dar un residuo sólido blanco. El sólido crudo se purificó por HPLC preparativa (columna C18; MeCN en agua con TFA 0,05% 40-90%) para dar el compuesto del titulo (98,0 mg, pureza 99%) como un sólido blanco. MS m/z [M+H]+ calculado para C23H25CI2 O6, 482, 11; encontrado 482, 1.
EJEMPLO 4 ácido (2R,4R)-5- ( 3-clorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico Una solución de cloruro de etiloxalilo (41 µL, 0,4 mmol) en DCM (0,5 mL) se agregó a una solución de (3R, 5R) -5-amino-6- ( 4-bromo-2-cloro-fenil) -2-etoxi-hex-l-en-3-ol (96 mg, 0,3 mmol) y Et3N (0,1192 mL, 0,8556 mmol) en DCM (1,4 mL) , y se agitó durante 20 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se evaporó bajo presión reducida y se combinó con ácido fenilborónico (52,2 mg, 0,4 mmol), K2C03 (100 mg, 0,9 mmol), agua (0,2 mL) , y EtOH (1 mL) . La mezcla resultante se colocó bajo nitrógeno, y se agregó SilicaCat®DPP-Pd (0,28 mmol/g de carga; 100 mg, 0,03 mmol). La mezcla se calentó a 120°C durante 20 minutos hasta completarse la reacción. La mezcla se filtró y se agregó una solución acuosa de LiOH 1 M (3 mL, 3 mmol) . El producto luego se purificó (cromatografía en fase reversa en columna Interchim) para dar el compuesto del título (12,6 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para Ci9H18ClN06, 392,08; encontrado 392,2.
EJEMPLO 5 Siguiendo los procedimientos descritos en los ejemplos de la presente, y utilizando los materiales de partida y reactivos apropiados, se prepararon los siguientes compuestos : 1. ácido C21¾ 42¾ -5-(5I-cloro-2l-metilbifenil-4-il)-2-hidroxi-4- (oxalilamino) -pentanoico 2. isopropiléster de ácido (2R, 4R) -5- (5 ' -cloro-2 ' -metilbifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) -pentanoico 3. etiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 5 ' -cloro-21 -metilbifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 4. isobutiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 5 ' -cloro-2 ' -metilbifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) entanoico 5. ácido (2R, 4R) -5- (5 '-cloro-2' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 6. etiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 7. isobutiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 8. isopropiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 9. ácido (2R,4R)-5- (3, 3 ' -Diclorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 10. ácido (2R,4R)-5- (3, 3 ' -Diclorobifenil-4-il ) -2-hidroxi-4- ( isobutoxioxalilamino) -pentanoico 11. isobutiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3, 3 ' -Diclorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 12. isopropiléster de ácido (2R, 4R) -5- ( 3, 3 ' -Diclorobifenil-4-il) -2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico 13. ácido (R) -3- [N- (3,5' -Dicloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) - ' -oxalil-hidrazino] -2-hidroxipropiónico i » 14. ácido C2J? 42¾ -5-(5,-cloro-2l-fluorobifenil-4-il)-4- • 1 , (etoxioxalilamino) -*2-hidr¾xi-,pentanoico 15. ácido , í»2i,4-j-5-(5,-cloro-2'-í:luorobifenil-4-il) -2- ? hidroxi-4- (isopropoxioxalil-amino) -pentanoico 16. ácido f2£,4#J-5-(5'-cloro-2'-fluorobifenil-4-il)-2 hidroxi-4- (isobutoxioxalilamino) -pentanoico 17. etiléster de ácido (2R, 4R) -5- (3, 3 ' -Diclorobifenil-4-il) 2-hidroxi-4- (oxalilamino) pentanoico EJEMPLO 6 A. ácido (2S, S) -5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-4 (oxalilamino) pentanoico Se agregó cloruro de etiloxalilo (27 µ?., 0,2 mmol, 1,1 eq) a una solución de etiléster de ácido (2S, 4S) -4-amino-5- bifenil-4-il-2-hidroximetil-pentanoico (sal de HC1; 80 mg, 0,22 mmol) en DMF (0,5 mL)/DCM (0,5 mL) , y se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en LiOH (monohidrato; 92,2 mg, 2,2 mmol), agua (1,0 mL) y EtOH (2,0 mL) , y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se detuvo con AcOH y el solvente se eliminó. El residuo se disolvió en AcOH/MeCN y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones limpias se combinaron y se liofilizó para dar el compuesto del titulo (37 mg, pureza 95%). MS m/z [ +H]+ calculado para C20H2iNO6, 372,14; encontrado 372,2.
B . etiléster de ácido (2Sr 4S) -5-bifenil-4-il-2-hidroximetil- 4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de oxalilo (232 pL, 2,8 mmol) y alcohol t-butilico (228 pL) en éter (6,7 mL) bajo nitrógeno a 0°C. La mezcla resultante se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo vacio para formar t-butiléster de ácido cloro-oxo-acético, que luego se disolvió en DCM (10 mL) y se combinó con etiléster de ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifeni1-4 -i1-2-hidroximetil-pentanoico (sal de HCl; 667 mg, 1,8 mmol), que se había disuelto en DCM con Et3N (2,6 mL) a 0°C. La mezcla resultante se agitó durante 5 minutos a temperatura ambiente. El producto crudo se concentró, se disolvió en DCM y se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc/hexanos 20-80%) . El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en DCM (5 mL) y TFA (1 mL) , y se agitó durante 1 hora. El producto se secó bajo vacío y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (135 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C22H25N06, 400, 17; encontrado 400,2.
EJEMPLO 7 A. butiléster de ácido (2S,4S) -5- (2 ' -Fluorobifenil-4-il) -2- hidroximetil-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de oxalilo (44,1 µL. 0,5 mmol) y alcohol t-butilico (46,5 \iL) en éter (1 mL) y se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo vacio para formar t-butiléster de ácido cloro- oxo-acético, que luego se disolvió en DCM (2 mL) . Se combinó etiléster de ácido (2S, 4S) -4-amino-5- (2 ' -fluorobifenil-4-il ) - 2-hidroximetilpentanoico (sal de HC1; 120 mg, 0,3 mmol) con 1-butanol (3 mL) y HC1 en 1,4-dioxano 4 M (3 mL) y se agitó a 60 °C durante 2 horas. El solvente se evaporó y se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (2x) y el producto se disolvió en Et3N (155 L) y DCM, luego se combinó con el t- butiléster de ácido cloro-oxo-acético . La mezcla resultante se agitó durante 20 minutos a temperatura ambiente. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió nuevamente en TFA : DCM 1:1, y se agitó durante 20 minutos a 40°C. Se agregó AcOH y el producto se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (30 mg, pureza 95%) . MS m/z [M+H]+ calculado para C24H28 N06, 446, 19; encontrado 446, 4.
B. ácido (2S,4S) -5- (2 ' -Fluorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de etiloxalilo (13,8 L, 0,1 mmol) y DI PEA (39,2 µ?,, 0,2 mmol) con etiléster de ácido (2S,4S)-4- amino-5- ( 2 ' -fluorobifenil-4-il ) -2-hidroximetilpentanoico (sal de HC1; 43 mg, 0,1 mmol) disuelto en DCM (0,9 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, luego se concentró bajo vacío. Se agregó LiOH acuoso 1 M (0,9 mL) y EtOH (0,9 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se detuvo con AcOH y el solvente se evaporó. El residuo se disolvió en AcOH/MeCN y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones limpias se combinaron y se liofilizó para dar el compuesto del título (32,7 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C2oH2oFN06, 390, 13; encontrado 390,2.
EJEMPLO 8 Siguiendo los procedimientos descritos en los ejemplos de la presente, y utilizando los materiales de partida y reactivos apropiados, se prepararon los siguientes compuestos : 1. etiléster de ácido (2S, 4S) -5- ( 3 ' -Fluorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-4- (oxalilamino) pentanoico . ácido (2S, 4S) -5- (31 -Fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil - (oxalilamino) pentanoico . ácido (2S,4S)-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-4 (oxalilamino) pentanoico 4. ácido (2S,4S)-5- (4 ' -Fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil 4- (oxalilamino) pentanoico 5. ácido (2S,4S)-5- ( 3-clorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-4- ( oxalilamino) pentanoico 6. ácido (2R,4S)- - ( 3-clorobifenil-4-il ) -2-hidroximetil-4- (oxalilamino) pentanoico EJEMPLO 9 A. ácido (2S, 4R) -5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-2-metil-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de etiloxalilo (13,1 L, 0,1 mmol) con etiléster de ácido (2S, 4R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2- hidroximetil-2-metilpentanoico (40 mg, 0,1 mmol) disuelto en DC (0,3 mL) y una pequeña cantidad de DMF. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos, luego se concentró bajo vacio. Se agregó NaOH acuoso 1 M (117 µL) y THF (1,5 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. El residuo se disolvió en AcOH y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (8 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C2iH23N06, 386, 15; encontrado 386, 0.
B . etiléster de ácido (2S, 4R) -5-bifenil-4-il-2-hidroximetil- 2-metil-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de oxalilo (12,4 µ?,. 0,1 mmol) y alcohol t-butilico (13,1 L) en éter (0,3 mL) bajo nitrógeno a 0°C. La mezcla resultante se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. El solvente se evaporó bajo vacio para formar t-butiléster de ácido cloro-oxo-acético, que luego se disolvió en DCM (0,7 mL) y se combinó con etiléster de ácido (2S,4R) -4-amino-5-bífenil-4-il-2-hidroximetil-2- metilpentanoico (33,4 mg, 98 µp???). Se agregó Et3N (43,6 xL, ) a 0°C y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en FA: DCM 1:1 y se agitó durante 1 hora. Se agregó AcOH y el producto se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (7 mg, pureza 95%). MS m/z [ +H]+ calculado para C23H27 O6, 414,18; encontrado 414,4.
EJEMPLO 10 ácido (2S, 4R)-5-{3' -Fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil-2- metil-4- (oxalilamino) pentanoico Se combinó cloruro de etiloxalilo (9,1 L, 0,1 mmol) con ácido (2S, 4#j-4-amino-5- (3' -fluorobifenil-4-il ) -2- hidroximetil-2-metilpentanoico (27 mg, 0,1 mmol) disuelto en DCM (0,2 mL) y una pequeña cantidad de DMF. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. El solvente se evaporó y se agregó NaOH acuoso 10 M (81,5 \xL) , y THF (1,0 mL) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. El residuo se disolvió en AcOH y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (6 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C2iH22FN06, 404, 14; encontrado 404, 4.
EJEMPLO 11 Siguiendo los procedimientos descritos en los ejemplos de la presente, y utilizando los materiales de partida y reactivos apropiados, se prepararon los siguientes compuestos : 1. ácido (2S,4R)- - (2 ' -Fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil-2-metil-4- (oxalilamino) pentanoico 2. ácido í'2J?,4S -5-(5,-cloro-2,-fluorobifenil-4-il)-2-hidroximetil-2-metil-4- (oxalil-amino) pentanoico ácido (2S,4R)-5- (4 ' -Fluorobifenil-4-il) -2-hidroximetil metil-4- (oxalilamino) pentanoico 4. ácido (2S, 4R) -5- (3'-clorobifenil-4-il) -2-hidroximetil-4-( isobutoxioxalil-amino) -2-metilpentanoico EJEMPLO 12 ácido 3- (N-bifenil-4-ilmetil- ' -oxalilhidrazino) -2-hidroxi-2-metilpropiónico Se disolvió metiléster de ácido 3- (N-bifenil-4-ilmetil- ' -t-butoxicarbonilhidrazino) -2-hidroxi-2-metilpropiónico (0,1 g, 241 µ????) en DCM (1,0 mL) , luego se agregó TFA (1,0 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en DMF (2,00 mL) . Se agregó DI PEA (126 µ?,, 724 pmol) seguido por cloruro de etiloxalilo (29,6 L, 265 µ?a??) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (~3 horas) . La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en THF (1,5 mL) , luego se agregó hidróxido de litio monohidrato (101 mg, 2,4 mmol) en agua (1,50 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se detuvo con AcOH y la solución se concentró. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN/H20 10-70%) para dar el compuesto del titulo (10,9 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para Ci9H2o 206, 373, 13; encontrado 373,2.
EJEMPLO 13 ácido (R) -3- [N- (3 ' -clorobifenil-4-ilmetil) -N ' - oxalilhidrazino] -2-hidroxipropiónico Se disolvió etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 3 ' - clorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxi-propiónico (70 mg, 0,2 mmol) en DCM (1,5 mL) , y luego se agregó cloruro de etiloxalilo (24,7 L, 221 µ????) y DIPEA (69,9 L, 401 µp???). La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (-10 minutos). La mezcla luego se concentró bajo vacio. Se agregó hidróxido de litio acuoso 1 M (1,6 mL, 1,6 mmol) y EtOH (1,5 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (~2 horas) . La reacción se detuvo con AcOH y el solvente se evaporó. El residuo se disolvió en AcOH/ eCN y se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones limpias se combinaron y se liofilizó para dar el compuesto del titulo (8,3 mg, pureza 95%) . MS m/z [M+H]+ calculado para Ci8Hi7ClN206, 393, 08; encontrado 393,2.
EJEMPLO 14 A. ácido (R)-3- [N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) -N' - oxalilhidrazino] -2-hidroxipropiónico Se combinó (R) -2- [N- ( 4-bromobencil ) - ' - etoxioxalilhidrazino] -1-etoxicarboniletiléster de etiléster de ácido oxálico (675 mg, 1,3 mmol) con ácido 5-cloro-2- fluorofenilborónico (273 mg, 1,6 mmol) y K2C03 (541 mg, 3,9 mmol) en EtOH (4,6 mL, 78,3 mmol) y agua (1,2 mL, 65,2 mmol) . La mezcla resultante se colocó bajo una atmósfera de nitrógeno y luego se agregó SilicaCat®DPP-Pd (0,28 mmol/g de carga; 466 mg, 130 µ????) . La mezcla se calentó por microondas a 120 °C durante 10 minutos, luego se filtró y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (40 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para CI8HI6C1FN205, 411, 07; encontrado 411,0. B. etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4- ilmetil) -N ' -oxalilhidrazino] -2-hidroxipropiónico Una solución de cloruro de t-butiloxalilo en DCM ~1M (136 µ? se agregó a una solución agitada de etiléster de ácido (R) -3- [N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (sal de HC1; 55,0 mg, 136 µ????) en DCM (1,3 mL, 20 mmol) a 0°C. Luego de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, una solución de DIPEA (11,9 µL, 68 µp???) en DCM (80 µL) se agregó por goteo. Después de un minuto, se agregó más DIPEA (10 µL) en DCM (80 µL) , y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía flash (4g de gel de sílice, EtOAc/hexanos 0-100%) . Las fracciones deseadas se combinaron y se concentró para dar un aceite incoloro (60mg) . Una porción de este aceite (20 mg) se trató con una mezcla 1:1 de DCM:TFA (0,2 mL) a temperatura ambiente durante 20 minutos. La mezcla se concentró, el residuo se disolvió en agua/AcOH 50% (1,5 mL), se filtró, y se purificó mediante fase reversa preparativa para dar el compuesto del titulo (10 mg) como una sal de TFA. MS m/z [ +H]+ calculado para C2oH2oClFN206, 439, 10; encontrado 439,4.
C. ácido (R)-3- [N- (5' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) - ' - isobutoxioxalilhidrazino] -2-hidroxipropiónico Se preparó isobutiléster de ácido cloro-oxo-acético agregando cloruro de oxalilo (21 µL, 252 µp???) a una solución de isobutanol (21 \i~L, 226 ymol) en éter (206 i , 2,0 mmol) . La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 min y luego se evapora.
El isobutil L ster de acido cloro-oxo-ac L tico luego se agrego a una solución de 2-oxo-2-feniletil L ster de acido (R)-3- [N- (5' -cloro-21 -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2- hidroxipropiónico (23,0 mg, 50 µp???) en DC (413 yL, 6,4 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos. Luego se agregó NaHC03 acuoso saturado y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM. Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre MgS04 y se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. Se agregó zinc (164 mg, 2,5 mmol) a una solución de este liquido amarillo en AcOH (172 µL, 3,0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se filtró usando AcOH y agua, los solventes se evaporaron al vacio, y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (9,0 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24CIFN2O6, 467,13; encontrado 467,1 D. ácido (R) -3- [N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) -N' - (2, 2-difluoropropoxioxalil ) -hidrazino] -2- hidroxipropiónico Se preparó cloruro de 2 , 2-difluoropropiloxalilo agregando cloruro de oxalilo (21 xL, 252 µ?a??) a una solución de 2 , 2-difluoropropanol (21,8 mg, 226 µp???) en éter (206 \iL, 2,0 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y luego se evaporó.
El cloruro de 2, 2-difluoropropiloxalilo luego se agregó a una solución de 2-oxo-2-feniletiléster de ácido (R)-3-[N-( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (23,0 mg, 50 µp???) en DCM (413 pL, 6,4 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos. Luego se agregó NaHCC>3 acuoso saturado y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM. Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre MgS04, y se concentró para dar un liquido transparente color amarillo. Se agregó zinc (164 mg, 2,5 mmol) a una solución de este liquido amarillo en AcOH (172 µL, 3,0 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se filtró usando AcOH Y agua, los solventes se evaporaron al vacio, y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (1,1 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C21H20CIF3 2O6, 489,10; encontrado 489,0.
E . 5-metil-2-oxo- [1, 3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (R)-3- [N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) - ' -oxalil- hidrazino] -2-hidroxipropiónico A una solución de 5-metil-2-oxo- [1, 3] dioxol-4-ilmetiléster de ácido (R) -3- [N- ( 51 -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (350 mg, 780 µp???) en DCM anhidro (15 mL) se agregó cloruro de t-butiloxalilo (193 mg, 1,2 mmol) y DIPEA (302 mg, 2,3 mmol) a 0°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla luego se lavó con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) y se extrajo con DCM (3x50 mL) . Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SC>4 anhidro, y se concentró al vacio para dar un sólido blanco (300 mg) . LC-MS: 523 [M-tBu+H]+.
Este sólido (100 mg, 170 µp???) se disolvió en TFA (5 mL) y DCM (15 mL) . La mezcla resultante se agitó durante la noche. La mezcla se evaporó al vacio, y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco (20 mg. LC-MS: 523,1 [M+H]+.
RMN: (DMSO-d6) : d 2,14 (s, 3H) , 3,17-3,16 (m, 2 H) , 4,11-4,08 (m, 2 H), 4,26 (br, 1 H) , 4,98 (br, 2 H) , 5,50 (br, 1 H) , 7,58-7,36 (m, 7 H) , 9,94 (s, 1 H) , 13,8 (br, 1 H) .
F. ácido (R) -3- [N- (51 -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) etoxioxalilhidrazino] -2-hidroxipropiónico Se agregó cloruro de etiloxalilo (12,4 µL, 111 ymol) a una solución de 2-oxo-2-feniletiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil ) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (23,0 mg, 50 µp???) en DCM (413 µL, 6,4 mmol) a 0°C y la mezcla resultante se agitó a 0°C durante 15 minutos. Luego se agregó NaHC03 acuoso saturado (1 mL) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM (2x2 mL) . Las fases en DCM se combinaron, se secó sobre MgS04, y se concentró. Se agregó zinc (164 mg, 2,5 mmol) a una solución de este residuo en AcOH (172 L, 3,0 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. La mezcla se filtró y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (10 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C2oH2oClF 206, 439, 10; encontrado 439,1.
G . 2 , 2-difluoropropiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-2 ' - fluoro-ifenil-4-ilmetil) -N ' -oxalilhidrazino] -2- hidroxipropiónico Se combinó ácido (R) -3- [ 1 - t-Butoxioxalil-N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] 2-hidroxi-propiónico (15,0 mg, 32 µp???) con HOBt (26,0 mg, 193 µp???) y EDC (34 µ?,, 0,2 mmol) en DCM (0,2 mL, 4 mmol) . La solución se agitó durante 10 minutos y se agregó 2 , 2-difluoropropanol (24,7 mg, 257 µp???) . La reacción se agitó a temperatura ambiente y se monitoreó su finalización. Luego de 2 horas, la mezcla se concentró por evaporación por rotación y el solvente se eliminó al vacio. El residuo resultante se disolvió en DCM (124 µL, 1,9 mmol). Se agregó TFA (124 µL, 1,6 mmol), y la mezcla resultante se agitó durante 2 horas. El solvente se eliminó al vacio y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del titulo (2,2 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C2iH2oClF3N206, 489, 10; encontrado 489, 1.
H . isobutiléster de ácido f.R,)-3-[N-(5'-cloro-2'- fluorobi.fenil-4-ilmetil) -N ' -oxalilhidrazino] -2- hidroxipropiónico A una mezcla de etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (sal de HC1; 500,0 mg, 1,3 mmol) en DCM (6,0 mL, 94 mmol) a temperatura ambiente se agregó dicarbonato de di-t-butilo (342 L, 1,5 mmol) y DIPEA (216 \i , 1,3 mmol). Luego de agitar a temperatura ambiente durante la noche, la mezcla se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (12g de gel de sílice, EtOAc/hexanos 0-50%). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentró para dar un aceite color amarillento claro. Este residuo oleoso se disolvió en MeOH (6,0 mL, 150 mmol) y agua (1,0 mL, 56 mmol), luego se trató con LiOH monohidrato (104 mg, 2,5 mmol) a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con agua (2,0 mL) y EtOAc (10,0 mL) , luego se acidificó con HC1 acuoso 1N hasta pH~2,0 con agitación vigorosa. La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x2,0 mL) , se secó sobre a2S04, se filtró, y se concentró para dar el Compuesto 1 como un sólido blanco (528, 6 mg) .
El compuesto 1 (65,0 mg, 148 µp???) se disolvió en alcohol isobutilico (684 L, 7,4 mmol) . Se agregó una solución de HCl en 1,4-dioxano 4,0 M (1,2 mL, 4,9 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, luego a 60°C durante otro par de horas, hasta completarse la reacción. El solvente se eliminó al vacio para dar el Compuesto 2, que se usó sin purificación adicional.
Se preparó cloruro de t-butiloxalilo agregando cloruro de oxalilo (63 µL, 741 µp???) a una solución de alcohol t-butilico (43 uL, 444 µp???) en éter (778 µ?,, 7,4 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos, luego se concentró al vacío. El Compuesto 2 (58,5 mg, 148 µp???) se disolvió en DCM (570 µL, 8,9 mmol) y se agregó cloruro de t-butiloxalilo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y luego se concentró al vacío. El residuo se disolvió en una solución de DCMrTFA 1:1 y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el compuesto del título (8,5 mg) . MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24C1FN206, 467,13; encontrado 467,0.
I . etiléster de ácido (R) -3- [N' - t-Butoxioxalil-N- (5 ' -cloro- 2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico A una solución de etiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro-21 -fluorobifenil-4-ilmetil ) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (200 mg, 0,5 mmol) en DCM (2,0 mL) se agregó por goteo una solución de cloruro de t-butiloxalilo (165 mg, 1,0 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla resultante se agitó durante 5 minutos y luego se agregó DIPEA (130 mg, 1,0 mmol) por goteo. El solvente se eliminó mediante evaporación, y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (éter de petróleo/EtOAc=4 : 1 ) para dar el compuesto del título como un líquido color amarillo (144 mg) . LC-MS: 495 [M+H]+. 1ti RMN (CDC13, 400 MHz) : d 1,30 (t, J= 7,1 Hz, 3H) , 1,56 (s, 9H) , 3, 37-3,24 (m, 2H) , 4,27- 4,16 (m, 4H) , 4, 38-4, 30 (m, 1H) , 7,14-7,09 (m, 1H) , 7, 30-7,28 (m, 1H) , 7,48-7,41 (m, 3H) , 7,56-7,50 (m, 2H) , 8,05 (s, 1H) .
J. etoxicarboniloximetiléster de ácido (R) -3- [N- ( 5 ' -cloro- 2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) - 1 -oxalilhidrazino] -2- hidroxi-propiónico Una mezcla de ácido (R) -3- [N ' - t-butoxioxalil-N- ( 5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2-hidroxipropiónico (270 mg, 580 µp???) , carbonato de clorometilo etilo (160 mg, 1,16 mmol) , Nal (174 mg, 1,2 mmol) y 2 , 6-dimetilpiridina (620 mg, 5,8 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se volcó sobre agua (30 mL) y la mezcla luego se extrajo con EtOAc (3x30 mL) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (2x30 mL) , se secó sobre a2S04 anhidro, y se concentró ál vacío. El compuesto crudo 1 (300 mg) se usó sin purificación. LC-MS: 569 [M+H]+.
Se agregó TFA (1,0 mL) por goteo a temperatura ambiente a una solución del Compuesto 1 (300 mg, 530 µp???) en DCM (5 mL) . La mezcla resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, y el solvente luego se eliminó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (DCM/MeOH, 10:1) para dar el compuesto del título como un líquido color amarillo (10 mg) . LC-MS: 512,9 [M+H] + . XH RMN (400 MHz , MeOD) d 1,28 (t, J=7,3 Hz, 3H) , 3,24-3,28 (m, 2H) , 4,18-4,20 (m, 4H) , 4,41 (br, 1H) , 5,80 (dd, J=ll,6, 5,8 Hz, 2H) , 7,22 (d, J=10,l Hz, 1H) , 7, 34-7, 40 (m, 1H) , 7,48-7,51 (m, 5H) .
K. (R) -3- [N- (5 ' -cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) -N ' - oxalilhidrazino] -2-hidroxipropioniloximetiléster de ácido butírico Una mezcla de ácido (R) -3- [ ' - t-butoxioxalil-N- ( 5 ' - cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2- hidroxipropiónico (300 rag, 430 µ?t???) , butirato de clorometilo (175 mg, 1,3 mmol), Nal (192 mg, 1,3 mmol) y 2,6- dimetilpiridina (680 mg, 6,4 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se volcó sobre agua (30 mL) y la mezcla luego se extrajo con EtOAc (3x20 mL) . La fase orgánica se separó, se lavó con NaCl acuoso saturado (30 mL) , se secó sobre a2S0 anhidro, y se concentró al vacío. El compuesto crudo 1 (300 mg) se usó sin purificación. LC-MS: 567[M+H]+.
Se agregó TFA (1,0 mL) por goteo a temperatura ambiente a una solución del Compuesto 1 (300 mg, 464 µ????) en DCM (5 mL) . La mezcla resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, y el solvente luego se eliminó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (DCM/MeOH, 10:1) para dar el compuesto del título como un aceite color amarillo (21 mg) . LC-MS: 511,1[M+H]+. 1H RMN (400 MHz, MeOD) d 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H) , 1,62 (dd, .7=14,8, 7,4 Hz, 2H) , 2,33 (t, J=7,3 Hz, 2H) , 3,28 (d, J=6,l Hz, 2H) , 4,14 (g, J=13,2 Hz, 2H) , 4,38 (dd, J=6,0, 4,2 Hz, 1H) , 5,80 (br, 2H), 7,16-7,26 (m, 1H) , 7,33-7,40 (m, 1H) , 7,47-7,52 (m, 5H) . L . acetoximetiléster de ácido (- )-3-[N-(5'-cloro-2l- fluorobifenil-4 -ilmetil) -N ' -oxalilhidrazino] -2- hidroxipropiónico Una mezcla de ácido (R) -3- [N ' - t-butoxioxalil-N- ( 5 ' - cloro-2 ' -fluorobifenil-4-ilmetil) hidrazino] -2- hidroxipropiónico (300 mg, 640 µp???) , acetato de bromometilo (196 mg, 1,3 mmol) , Nal (192 mg, 1,3 mmol) y 2,6- dimetilpiridina (680 mg, 6,4 mmol) en DMF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se volcó sobre agua (30 mL) y luego se extrajo con EtOAc (3x20 mL) . La fase orgánica se separó, se lavó con NaCl acuoso saturado (30 mL) , se secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró al vacio. El compuesto crudo 1 (300 mg) se usó sin purificación. LC-MS : 539 [ +H]\ Se agregó TFA (1,0 mL) por goteo a temperatura ambiente a una solución del Compuesto 1 (300 mg, 550 µp???) en DCM (5 mL) . La mezcla resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, y el solvente luego se eliminó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (DCM/MeOH, 10:1) para dar el compuesto del título como un aceite color amarillo (15 mg) . LC-MS: 482,9 [M+H] + . XH RMN (400 MHz, MeOD) d 2,07 (s, 3H) , 3, 25-3, 28 (m, 2H) , 4,14 (q, J=13,2 Hz, 2H) , 4,38 (t, J=5,9Hz, 1H) , 5,88-5,71 (m, 2H) , 7,25-7,17 (m, 1H) , 7,41-7,31 (m, 1H) , 7,70-7,46 (m, 5H) .
EJEMPLO 15 ácido (2R, 4S) -5-bifenil-4-il-2-hidroxi-5-metil-4- (oxalilamino) hexanoico Se disolvió etiléster de ácido (2R, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxi-5-metilhexanoico (70 mg, 0,2 mmol) en DCM (5 mL) y se agitó durante 2 minutos, y luego se agregó cloruro de etiloxalilo (23 µ?, 0,2 mmol) y DIPEA (79 mg, 0,6 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se evaporó bajo presión reducida. La mezcla luego se concentró bajo vacio. El residuo se disolvió en EtOH, y se agregaron suficientes equivalentes de NaOH ION para basificar la solución. La reacción se monitoreó durante 1 hora hasta completarse la desprotección final. La solución se acidificó con un volumen igual de AcOH y se evaporó bajo presión reducida. El producto luego se purificó usando cromatografía en fase reversa (gradiente de MeCN 10-70% para dar el compuesto del título (37 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H23 O6, 386, 15; encontrado 386, 4.
EJEMPLO 16 ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-5-metil-4- (oxalilamino ) hexanoico Se disolvió etiléster de ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-5-metilhexanoico (sal de HC1; 40 mg, 0,1 mmol) en DC y DMF (1 mL) , y luego se agregó cloruro de etiloxalilo (17 µ??, 0,2 mmol) y DIPEA (53,3 µ??, 0,3 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (~5 minutos) . La reacción se detuvo con agua. El producto se extrajo con EtOAc y la fase orgánica resultante se concentró. Se agregó hidróxido de litio acuoso 1 M (1,0 mL, 1,0 mmol) y EtOH (2,0 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (~2 horas) . La reacción se detuvo con AcOH y el producto se purificó mediante HPLC preparativa. Las fracciones limpias se combinaron y se liofilizó para dar el compuesto del titulo (19 mg, pureza 95%). MS m/z [M+H]+ calculado para C22H25NO6, 400,17; encontrado 400,2.
Otros compuestos de la invención pueden prepararse usando los siguientes materiales de partida: etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxi-2- metil-pentanoico A una solución de ácido (R) -3-bifenil-4-il-2-t-butoxicarbonilamino-propiónico (50 g, 0,1 mol), ácido de Meldrum (23,3 g, 0,2 mol) y DMAP (27,8 g, 0,2 mol) en DCM anhidro (500 mL) se agregó una solución de DCC (33,3 g, 0,2 mol) en DCM anhidro (200 mL) durante 1 hora a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 8 horas, luego se refrigeró durante la noche, precipitando pequeños cristales de diciclohexilurea . Luego de la filtración, la mezcla se lavó con KHS04 5% (4x200 mL) , NaCl acuoso saturado (200 mL) y se secó bajo refrigeración con MgS04 durante la noche. La solución resultante se evaporó para dar el compuesto crudo 1 como un sólido color amarillo claro (68 g) . LC-MS: 490 [M+Na] , 957 [2M+Na] .
A una solución del compuesto crudo 1 (68 g, 0,1 mol) en DCM anhidro (1 L) se agregó AcOH (96,8 g, 1,6 mol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -5°C durante 0,5 hora, luego se agregó NaBH4 (13,9 g, 0,4 mol) en pequeñas porciones durante 1 hora. Luego de agitar a -5°C durante otra hora, se agregó NaCl acuoso saturado (300 mL) . La fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x300 mL) y agua (2x300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=5 : 1 ) para dar el Compuesto 2 como un sólido color amarillo claro (46 g) . LC-MS: 476 [ +Na] , 929 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 2 (46 g, 0,1 mol) en alcohol butílico terciario (100 mL) se agregó ioduro de dimetilmetilenimonio (46,3 g, 0,3 mol) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a 65°C y se agitó a esta temperatura durante 16 horas. Luego de la filtración, el material filtrado se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=20 : 1~10 : 1) para dar el Compuesto 3 como un sólido color amarillo claro) (18 g) . LC-MS: 460 [M+Na], 897 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 3 (18 g, 44 mmol) en acetona (430 mL) y agua (22 mL) se agregó rojo de Sudan como indicador. Se introdujo una atmósfera de ozono en la mezcla a 0°C hasta haber desaparecido el color rojo del rojo de Sudan. Se agregó sulfuro de dimetilo (45 mL) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla luego se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=15 : 1~7 : 1 ) para dar el Compuesto 4 como un sólido color amarillo claro (9,5 g) . LC-MS: 434 [M+H] , 845 [2M+H] .
A una solución del Compuesto 4 (9,5 g, 23 mmol) en THF anhidro (120 mL) se agregó una solución de bromuro de metilmagnesio en THF (9,2 mL, 28 mmol) a -70°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -60°C durante 3 horas y la reacción luego se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (50 mL) . La fase orgánica se separó y se secó sobre MgS0 . La mezcla luego se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=10 : 1-5 : 1 ) para dar el Compuesto 5 como un aceite (7,9 g) . LC-MS: 450 [M+H], 877 [2M+H] .
En una solución del Compuesto 5 (7,9 g, 18,4 mmol) en DCM anhidro (300 mL) se introdujo una atmósfera de HC1 a 0°C durante 6 horas. La mezcla luego se concentró y el residuo se lavó con Et20 anhidro para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco como sal de HC1 (5,8 g) . LC-MS : 364 [M+H] , 727 [2M+H] . XH RMN (300 MHz, D SO) : 58,00-7,97 (d, 4H) , 7,67-7,62 (m, 6H) , 7,47-7,28 (m, 8H) , 6,32 (s, 1H) , 6,09 (s, 1H) , 4,13-4,06 (m, 2H) , 3, 95-3, 78 (m, 2H) , 3,60 (s, 1H) , 3,22-3,08 (m, 3H) , 2,95-2,65 (m, 2H) , 1,99-1,79 (m, 4H) , 1,30-0,87 (m, 9H) . etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2 , 2-dimetil-pentanoico Una solución de t-butiléster de ácido [ (S) -1-bifenil-4-ilmetil-2- (2, 2-dimetil-4, 6-dioxo- [1,3] dioxan-5-il) -etil] -carbámico (46 g, 0,1 mol) en tolueno anhidro (300 mL) se sometió a reflujo durante 3 horas bajo nitrógeno. Luego de la evaporación del solvente, el residuo se purificó mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=10 : 1 ) para dar el Compuesto 1 como un sólido color amarillo claro (27 g) . LC-MS: 374 [M+Na], 725 [2M+Na] .
A una solución del Compuesto 1 (6,2 g, 17,6 mmol) en THF anhidro (100 mL) se agregó una solución de LiHMDS en THF (39 mL, 39 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -78°C durante 2 horas, y luego se agregó ioduro de metilo (7,5 g, 53 mmol) . Luego de agitar durante 0,5 hora a -78°C, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de enfriar la mezcla a -10°C, la reacción se detuvo con NH4C1 acuoso saturado (100 mL) y se extrajo con EtOAc (100 mL>4) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaCl acuoso saturado (300 mL) , se secó sobre MgS04, se filtró, y se concentró para dar el producto crudo el cual se purificó adicionalmente mediante cromatografía (hexanos : EtOAc=10 : 1 ) para dar el Compuesto 2 como un sólido color amarillo claro (5,7 g) . LC-MS: 402 [M+Na] , 781 [2 +Na] .
A una solución del Compuesto 2 (5,7 g, 15 mmol) en acetona (120 mL) se agregó NaOH 1 M (60 mL, 60 mmol) a -5°C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla se concentró y el residuo se diluyó con agua (250 mL) y se lavó con EtOAc (150 mL) . El pH de la fase acuosa se ajustó a 2 con HC1 6 M a 0°C, y el sólido se filtró y se secó al vacio para dar el compuesto crudo 3 como un sólido blanco (5 g) . LC-MS: 420 [M+Na] , 817 [2M+Na] .
A una solución del compuesto crudo 3 (5 g, 12,7 mmol) en EtOH anhidro (300 mL) se agregó S0C12 (13,4 mL, 190 mmol) a -30 °C bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 20 horas a temperatura ambiente. La mezcla se concentró, y el residuo se lavó con Et20 anhidro para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco como sal de HC1 (3,7 g) . LC-MS: 326 [M+H] , 651 [2M+H] . XH RMN (300 MHz, DMSO) : 57, 86 (s, 3H) , 7, 67-7, 64 (m, 4H) , 7, 49-7, 33 (m, 5H) , 4, 09-3, 97 (ra, 2H) , 3,42 (m, 1H) , 2, 90-2, 80 (m, 2H) , 1, 88-1, 84 (m, 2H) , 1,17-1,12 (m, 9H) . ácido 1- ( (R) -2-amino-3-bifenil- 4-il-propil) -ciclopropancarboxilico En un recipiente que contenia BOC-D-4 , 4 ' -bifenilalanina (11,3 g, 33,1 mmol, 1,0 eq. ) , 4-dimetilaminopiridina (6,5 g, 53,0 mmol, 1,6 eq.), 2, 2-dimetil-l, 3-dioxano-4, 6-diona (5,3 g, 36,4 mmol, 1,1 eq. ) en DCM (100 mL) se agregó DCC en DCM 1 M (38,1 mL) a 0°C a lo largo de 30 minutos. La mezcla se mantuvo a 0°C durante 6 horas y el precipitado resultante se retiró por filtración. El material filtrado se lavó con KHS04 acuoso 10% (2x50 mL) luego se secó. La solución se acidificó con AcOH (20 mL) a 0 °C y se agregó borhidruro de sodio (3,1 g, 82,7 mmol, 2,5 eq. ) a lo largo de 30 minutos en 3 porciones. La mezcla se mantuvo a 0°C durante 3 horas, se lavó con agua y se secó, luego se concentró bajo vacio. El material crudo se purificó mediante cromatografía (gradiente de EtOAc/hexanos 0-40%). Se agregó sal de Eschenmoser (15,9 g, 86,0 mmol) en alcohol t-butílico (70 mL) y la mezcla resultante se agitó a 65°C durante la noche. La mezcla se concentró y se agregó Et2Ü (10 mL) . La solución orgánica luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado (10 mL) y KHS04 10% (10 mL) . La solución orgánica se secó sobre a2SC> y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía (gradiente de EtOAc/hexanos 0-40%) para dar . el Compuesto 1 (3,3 g) .
Se combinó ioduro de trimetilsufoxonio (2,0 g, 9,2 mmol, 1,0 eq. ) en dimetilsulfóxido (50 mL) con NaH (366 mg, 9,2 mmol, 1,1 eq.) y se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente. A esto se agregó el Compuesto 1 (3,6 g, 8,3 mmol, 1,0 eq) disuelto en dimetilsulfóxido (50 mL) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La solución se mezcló con NaCl acuoso saturado (50 mL) y se extrajo con EtOAc (3x10 mL) , y la fase orgánica se lavó con NaCl acuoso saturado (2x50 mL) y se secó sobre Na2SC>4 anhidro. Luego de la evaporación del solvente, la reacción cruda se purificó mediante cromatografía (gradiente de EtOAc/hexanos 0-40%) para dar el Compuesto 2, t-butiléster de ácido 1-( (R)-3-bifenil-4-il-2- -butoxicarbonilaminopropil ) -ciclopropancarboxílico. Se agregó TFA (200 \iL) y DCM (500 \iL) y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos. El solvente se evaporó bajo vacío y se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (2x) para obtener el compuesto del título .
ENSAYO 1 Ensayos in vitro para la cuantificación de potencias de inhibidor para NEP humana y de rata, y ACE humana Se determinaron las actividades inhibidoras de los compuestos para neprilisina humana y de rata (EC 3.4.24.11; NEP) y enzima convertidora de angiotensina humana (ACE) usando ensayos in vitro como se describe más adelante.
Extracción de actividad. NEP de ríñones de rata Se preparó NEP de rata a partir de ríñones de ratas Sprague Dawley adultas. Se lavaron los ríñones enteros en solución salina fría amortiguada con fosfato (PBS) y se llevó a volumen en solución amortiguada de lisis enfriada en hielo (1% Tritón X-114, NaCl 150 mM, tris (hidroximetil ) aminometano (Tris) 50 mM pH 7,5; Bordier (1981) J. Biol. Chem. 256 1604-1607) en una proporción de 5 mL de solución amortiguadora por cada gramo de riñon. Se homogeneizaron muestras usando un molino tísular manual Politron sobre hielo. Los homogenatos se centrifugaron a 1000 x g en un rotor con canasta de oscilación libre durante 5 minutos a 3°C. El pellet se resuspendió en 20 mi de solución amortiguadora de pH de lisis enfriada con hielo y se incubó sobre hielo durante 30 minutos. A continuación se colocaron capas de muestras (entre 15 y 20 mi) sobre 25 mi de fondo de solución amortiguadora helada (sacarosa 6% p/v, 50 mM, pH 7,5 Tris, NaCl 150 mM, 0,06%, Tritón X-114), se calentaron a 37°C entre 3 y 5 minutos y se centrifugaron a 1000 x g en un rotor de cubeta oscilante a temperatura ambiente durante 3 minutos. Las dos capas superiores se removieron por aspiración, dejando un precipitado oleoso viscoso que contiene a la fracción enriquecida en membranas. Se agregó glicerol a una concentración de 50% y se almacenaron las muestras a -20 °C. Se cuantificaron las concentraciones proteicas usando un sistema de detección de BCA con albúmina sérica bovina (BSA) como estándar.
Ensayos de inhibición enzimática Se obtuvo NEP recombinante humana y ACE recombinante humano comercialmente (R&D Systems, Minneapolis, MN, números de catálogo 1182-ZN y 929-ZN, respectivamente) . Se usaron los sustratos peptidicos fluorogénicos Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap- (Dnp)-OH ( edeiros et al. (1997) Braz. J. Med. Biol. Res. 30:1157-62; Anaspec, San José, CA) y Abz-Phe-Arg-Lys ( Dnp) -Pro-OH (Araujo et al. (2000) Biochemistry 39:8519-8525; Bachem, Torrance, CA) en los ensayos de NEP y ACE respectivamente . l°s ensayos se llevaron a cabo en placas blancas opacas de 384 pocilios a 37°C usando los sustratos peptidicos fluorogénicos a una concentración de 10 µ? en solución amortiguadora de ensayo (NEP HEPES 50 mM, pH 7,5, NaCl 100 mM, 0,01% de polietilenglicol sorbitán monolaurato (Tween- 20), ZnS04 10 µ?; ACE HEPES 50 mM, pH 7,5, NaCl 100 rtiM, 0,01% de Tween-20, ZnS04 1 µ?) . Las enzimas respectivas se usaron a concentraciones que resultaron en la proteólisis cuantitativa de 1 µ? de sustrato después de 20 minutos a 37 °C.
Los compuestos de prueba se ensayaron a lo largo de un rango de concentraciones de entre 10 µ? a 20 pM. Se agregaron los compuestos de prueba a las enzimas y se incubaron durante 30 minutos a 37 °C antes del inicio de la reacción mediante agregado del sustrato. Las reacciones se terminaron después de 20 minutos de incubación a 37 °C mediante agregado de ácido acético glacial a una concentración final de 3,6% (v/v) .
Las placas se leyeron en un fluorómetro con longitudes de onda de excitación y emisión definidas en 320 nm y 405 nm, respectivamente. Las constantes de inhibición se obtuvieron mediante una regresión no lineal de los datos usando la ecuación (programa de computación GraphPad, Inc., San Diego, CA) : v = v0 / [1 + (I / K') ] en donde v es la velocidad de reacción, v0 es la velocidad de reacción sin inhibir, I es la concentración de inhibidor y K' en la constante de inhibición aparente.
Los compuestos de la invención se probaron en este ensayo y se hallaron con valores de pKi para NEP humana como sigue. En general, o bien los compuestos de prodroga no inhibieron a la enzima en este ensayo in vitro, o las prodrogas no se ensayaron (n.d.) debido a que no se esperaba ninguna actividad. 10 15 20 10 15 20 n.d. no determinado ENSAYO 2 Ensayo farmacodinámico (PD) para la actividad de ACE y NEP en ratas anestesiadas Se anestesiaron ratas macho, Sprague Dawley, normotensas con inactina 120 mg/kg (i.p.). Una vez anestesiadas, se canulan los catéteres de la vena yugular, la arteria carótida (tubuladura PE 50) y vejiga (tubuladura PE 50 acampanada) y se lleva a cabo una traqueotomia (Aguja de Teflón, tamaño de calibre 14) para facilitar la respiración espontánea. A continuación, se deja que los animales se estabilicen por un periodo de 60 minutos y se mantienen con infusión continua con solución salina 5 ml/kg/h (0,9%) todo el tiempo, para mantenerlos hidratados y asegurar la producción de orina. La temperatura corporal se mantiene durante todo el experimento usando una almohadilla de calentamiento. Al final del periodo de 60 minutos de estabilización, los animales reciben dosis por via intravenosa (i.v.) con dos dosis de AngI (1,0 g/kg, para la actividad del inhibidor de ACE) separadas por 15 minutos. A los 15 minutos después de la segunda dosis de AngI, los animales son tratados con vehículo o compuesto de prueba. Cinco minutos después, los animales son tratados además con una inyección en bolo i.v. de péptido natriurético atrial (ANP; 30 µg/kg) . La recolección de orina (en tubos Eppendorf tarados) comienza inmediatamente después del tratamiento y continúa durante 60 minutos. A los 30 y 60 minutos de iniciada la recolección de orina, los animales son sometidos nuevamente a pruebas con AngI . Las mediciones de la presión sanguínea se efectúan usando el sistema Notocord (Kalamazoo, MI). Las muestras de orina se congelan a -20 °C hasta su uso en el ensayo de cGMP. Las concentraciones de cGMP en orina se determinan mediante un ensayo inmuno enzimático usando un conjunto de elementos comercial {Ensayo Designs, Ann Arbor, Michigan, Cat . N° 901-013). El volumen de orina de determina gravimétricamente . La salida de cGMP urinario se calcula como el producto de salida en orina y la concentración de cGMP en orina. La inhibición de ACE se evalúa mediante la cuantificación del % de inhibición de respuesta hipertensiva a AngI. La inhibición de NEP se evalúa cuantificando la potenciación de la elevación inducida por ANP en la salida de cGMP urinaria.
ENSAYO 3 Evaluación de los efectos antihipertensivos in vivo en el modelo de hipertensión en rata SHR consciente Se dejaron que ratas espontáneamente hipertensivas (SHR, entre 14 y 20 semanas de vida) se adaptaran por un mínimo de 48 horas luego de su llegada al sitio de la prueba con acceso libre a alimento y agua. Para el registro de la presión sanguínea, se les implanta quirúrgicamente a estos animales radiotransmisores pequeños para roedores (unidad de telemetría; DSI Modelos TA11PA-C40 o C50-PXT, Data Science Inc., EE.UU.). Se inserta la punta del catéter conectado al transmisor en la aorta descendente por arriba de la bifurcación iliaca y se asegura en su lugar con adhesivo para tejido. Se mantiene el transmisor intraperitonealmente y se asegura a la pared abdominal a la vez que se cierra la incisión abdominal con una sutura no absorbible. Se cierra la piel externa con sutura y grampas. Se dejó que los animales se recuperaran con los cuidados post-operatorios apropiados. En el día del experimento, los animales en sus cajas se colocan en la parte superior de las unidades receptoras de telemetría para aclimatarlos al ambiente de prueba y registrar la línea de base. Después de al menos 2 horas, se toma la medida de línea de base, y luego los animales se dosifican con vehículo o compuesto de prueba y se siguen hasta 24 horas después de la dosis con medida de presión sanguínea. Los datos se registran de forma continua por toda la duración del estudio usando el programa de computación Notocord (Kalamazoo, MI) y se guardan como señales digitales electrónicas. Los parámetros medidos son presión sanguínea (sistólica, diastólica y presión arterial promedio) y la frecuencia cardíaca.
ENSAYO 4 Evaluación de los efectos antihipertensivos in vivo en el modelo de hipertensión en rata DOCA-sal consciente Se dejó que se adaptaran ratas CD (machos, adultos, entre 200 y 300 gramos, Charles River Laboratory, EE.UU.) durante un mínimo de 48 horas a su llegada al sitio de la prueba antes de someterlas a una dieta rica en sales. Una semana después del inicio de la dieta con alto contenido de sal (8% en alimento o 1% de NaCl en agua de bebida), se implanta un pellet de acetato de deoxicorticosterona (DOCA) (100 mg, 90 días de tiempo de liberación, Innovative Research of America, Sarasota, FL) en forma subcutánea y se realiza una nefrectomía unilateral. En este tiempo, también se les implanta quirúrgicamente a los animales radiotransmisores pequeños para roedores para medida de presión sanguínea (véase el Ensayo 3 para detalles). Se dejó que los animales se recuperaran con los cuidados post-operatorios apropiados. El diseño de estudio, registro de datos, y los parámetros que se miden son similares a los que se describieron para el Ensayo 3.
ENSAYO 5 Evaluación de los efectos antihipertensivos in vivo en el modelo de hipertensión en rata Dahl/SS consciente Se dejó que se adaptaran ratas sensibles a sal Dahl macho (Dahl/SS, entre 6 y 7 semanas de edad de Charles River Laboratory, EE.UU.) al menos durante 48 de aclimatación a su llegada al sitio de la prueba antes de someterlas a una dieta de alto contenido de sal con 8% de NaCl (TD.92012, Harían, EE.UU.), luego se les implantaron quirúrgicamente radiotransmisores pequeños para roedores para medida de presión sanguínea (véase el Ensayo 3 para detalles) . Se dejó que los animales se recuperaran con los cuidados postoperatorios apropiados. A aproximadamente entre 4 y 5 semanas desde el inicio de la dieta con alto contenido de sal, se espera que estos animales se vuelvan hipertensos. Una vez confirmado el nivel de hipertensión, se usan estos animales para el estudio mientras que se continúa con la dieta de alto contenido de sal para mantener su nivel de hipertensión. El diseño de estudio, el registro de los datos, y los parámetros medidos son similares a los que se describieron en el Ensayo 3.
EJEMPLO COMPARATIVO 1 ácido (2R, 4S) -5-bifenil-4-il-2-metil-4- (oxalil-amino) - pentanoico (Compuesto Comparativo A; R = -C(O)-COOH) Se combinó etiléster de ácido (2R, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-metil-pentanoico (sal de HCl; 527 mg, 0,2 mitiol) y cloruro de etiloxalilo (18,4 µL, 1,1 eq) con DI PEA (52,2 µ??, 0,3 mmol) en DMF (0,3 mL) /DC (0,3 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción. El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en EtOH (750 µL) y NaOH acuoso 1 M (750 µ? , y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se eliminó y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo A (11,2 mg, 100% de pureza). MS m/z [ +H]+ calculado para C2oH2iN05, 356,14; encontrado 356,2. ácido (2R, 4S) -5-bifenil-4-il-4- (3-carboxi-propionilamino) -2-metil-pentanoico (Compuesto Comparativo B; R = -C (O) - (CH2) 2~ COOH) Se mezcló etiléster de ácido (2R, 4S) -5-bifenil-4-il-4- ( 3-carboxi-propionilamino) -2-metil-pentanoico (sal de Na; 400 mg, 923 µp???) con EtOH (7 mL, 0,1 mol), luego THF (6 mL, 0,1 mol) . Luego se agregó NaOH acuoso 1 M (2,8 mL, 2,8 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas y luego se concentró. El producto se purificó mediante HPLC preparativa (MeCN:agua con TFA 0,5% 10-60%) para dar el Compuesto Comparativo B (150 mg, 97% de pureza). S m/z [M+H]+ calculado para C22H25 O5, 384,17; encontrado 384,6.
Los Compuestos Comparativos A y B se evaluaron como se describe en el Ensayo 1 y resultaron tener los siguientes valores de pKi para NEP humano: Los datos muestran que los Compuestos Comparativos A y B tienen los mismos valores de pKi para la inhibición de NEP.
EJEMPLO COMPARATIVO 2 ácido (R) -5-bifenil-4-il-4- (2-carboxiacetilamino) -2-hidroxipentanoico (Compuesto Comparativo C; R = -C(0)-CH2~ C00H) Se combinó etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxipentanoico (sal de HC1; 60,3 mg, 0,2 mmol) y cloruro de metilmalonilo (21 µ?,, 0,2 mmol) con DIPEA (84 µL, 0,5 mmol) en DMF (5 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (1 hora) . El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en MeOH (3 mL) y NaOH ION (250 µL) , y se agitó a 60°C hasta completarse la reacción (1 hora). Se agregó ácido acético glacial (250 µL) y el producto se evaporó bajo presión reducida y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo C (6,3 mg, 98% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C2oH2iN06, 372, 14; encontrado 372,2. ácido (R) -5-bifenil-4-il-4- ( 3-carboxipropionilamino) -2-hidroxipentanoico (Compuesto Comparativo D; R - -C (O) - (CH2) 2~ COOH) Se combinó etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxipentanoico (sal de HC1; 60,3 mg, 0,2 mmol) y cloruro de 3- ( carbometoxi ) propionilo (24 µL, 0,2 mmol) con DIPEA (84 µ?, 0,5 mmol) en DMF (5 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (1 hora). El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en MeOH (3 mL) y NaOH ION (250 µL) , y se agitó a 60°C hasta completarse la reacción (1 hora). Se agregó ácido acético glacial (250 µL) y el producto se evaporó bajo presión reducida y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo D (8,0 mg, 100% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C21H23NO6, 386, 15; encontrado 386,2. ácido (R) -5-bifenil-4-il-4- ( 4-carboxibutirilamino) -2-hidroxipentanoico (Compuesto Comparativo E; R - -C (0) - (CH2) 3-COOH) Se combinó etiléster de ácido (R) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroxipentanoico (sal de HC1; 60,3 mg, 0,2 mmol) y 5-cloro-5-oxovalerato de metilo (31,7 mg, 0,2 mmol) con DIPEA (84 µ?,, 0,5 mmol) en DMF (5 mL) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (1 hora). El solvente se eliminó y el residuo se disolvió en MeOH (3 mL) y NaOH ION (250 L) , y se agitó a 60°C hasta completarse la reacción (1 hora) . Se agregó ácido acético glacial (250 L) y el producto se evaporó bajo presión reducida y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo E (8,7 mg, 100% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C22H25NO6, 400, 17; encontrado 400, 2.
El compuesto del Ejemplo 1 y los Compuestos Comparativos C, D, y E se evaluaron como se describe en el Ensayo 1 y resultaron tener los siguientes valores de pKi para NEP humano: Los datos muestran que el compuesto del Ejemplo 1 tenia una potencia mayor para NEP que los Compuestos Comparativos C, D, y E.
EJEMPLO COMPARATIVO 3 ácido (2S,4S) -5-bifenil-4-il-4- (2-carboxi-acetilamino) -2-hidroximetilpentanoico (Compuesto Comparativo F; R - -C(O)-CH2-COOH) Se disolvió ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-pentanoico (sal de HC1; (5 mg, 10 µp???) en NaOH acuoso 1 M (119 µL, 119 µ?t???) y se agregó lentamente a una solución de cloruro de metilmalonilo (1,9 µL, 18 µ????) y MeCN (0,5 mL, 10 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (durante la noche) y el producto se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo F (1,0 mg, 95% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C2iH23N06, 386,15; encontrado 386,1. ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- (3-carboxi-propionilamino) -2-hidroximetilpentanoico (Compuesto Comparativo G; R = -C(O)- (CH2)2-COOH) Se disolvió ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-pentanoico (sal de HC1; (5 mg, 10 µp???) en NaOH acuoso 1 M (119 L, 119 µp???) y se agregó lentamente a una solución de cloruro de 3- (carbometoxi) propionilo (2,2 µL, 18 µp???) y eCN (0,5 mL, 10 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (durante la noche) y el producto se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo G (3,4 mg, 95% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C22H25 06, 400,17; encontrado 400,3. ácido (2S, 4S) -5-bifenil-4-il-4- ( 4-carboxi-butirilamino) -2-hidroximetilpentanoico (Compuesto Comparativo H; R = -C(O)- (CH2)3-COOH) Se disolvió ácido (2S, 4S) -4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroximetil-pentanoico (sal de HC1; 5 mg, 10 µp???) en NaOH acuoso 1 M (119 µLf 119 µ????) y se agregó lentamente a una solución de 5-cloro-5-oxovalerato de metilo (2,5 µL, 18 µp???) y MeCN (0,5 mL, 10 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente hasta completarse la reacción (durante la noche) y el producto se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo H (3,0 mg, 95% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C23H27 06, 414,18; encontrado 414,7.
El compuesto del Ejemplo 5A y los Compuestos Comparativos F, G, y H se evaluaron como se describe en el Ensayo 1 y resultaron tener los siguientes valores de pKi para NEP humano: Los datos muestran que el compuesto del Ejemplo 5A tenia una potencia mayor para NEP que los Compuestos Comparativos F, G, y H.
EJEMPLO COMPARATIVO 4 ácido (2R, 4R) -4- (2-carboxi-acetilamino) -5- (3 ' -cloro-bifenil-4-11 ) -2-hidroxi-pentanoico (Compuesto Comparativo I; R = -C (O) -CH2-COOH) Se agregó cloruro de metilmalonilo (18,5 µ?a, 172 µp???) a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino-5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 144 µp???) y DIPEA (75,1 µ?,, 431 µp???) en DCM (1,5 mL, 23,4 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla luego se concentró para dar un liquido color amarillo. Se agregó LiOH acuoso 1 M (719 µ?,, 719 µp???) por goteo al aceite, y la mezcla se agitó a 60 °C durante 1 hora. La mezcla se concentró al vacio y el residuo resultante se disolvió en AcOH (1,0 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo I (2,0 mg, 100% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C2oH2oClN06, 406, 10; encontrado 406,1. ácido (2R, 4R) -4- ( 3-Carboxi-propionilamino) -5-(3'-cloro-bifenil-4-il) -2-hidroxi-pentanoico (Compuesto Comparativo J; R = -C (O) - (CH2) 2-COOH) Se agregó cloruro de 3- (carbometoxi) propionilo (21,2 pL, 172 µp???) a una solución de etiléster de ácido (2R,4R)- 4-amino-5- (3 ' -clorobifenil-4-il) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 144 µp???) y DIPEA (75,1 ]i , 431 µp???) en DC (1,5 mL, 23,4 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla luego se concentró para dar un liquido color amarillo. Se agregó LiOH acuoso 1 M (719 L, 719 µ?t???) por goteo al aceite, y la mezcla se agitó a 60°C durante 1 hora. La mezcla se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en AcOH (1,0 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo J (31,1 mg, 100% de pureza). MS m/z [M+H] + calculado para C21H22CINO6, 420, 11; encontrado 420,2. ácido (2R, 4R)-A- ( 4-Carboxi-butirilamino) -5- (3 ' -cloro-bifenil-4-il) -2-hidroxi-pentanoico (Compuesto Comparativo K; R = -C (O) - (CH2) 3-COOH) Se agregó 5-cloro-5-oxovalerato de metilo (23,8 µL, 172 mol) a una solución de etiléster de ácido (2R, 4R) -4-amino- 5- ( 3 ' -clorobifenil-4-il ) -2-hidroxipentanoico (50,0 mg, 144 mol) y DIPEA (75,1 ]iL, 431 µ????) en DCM (1,5 mL, 23,4 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla luego se concentró para dar un líquido color amarillo. Se agregó LiOH acuoso 1 M (719 µL, 719 µ????) por goteo al aceite, y la mezcla se agitó a 60°C durante 1 hora. La mezcla se concentró al vacío y el residuo resultante se disolvió en AcOH (1,0 mL) y se purificó mediante HPLC preparativa para dar el Compuesto Comparativo K (29,2 mg, 100% de pureza). MS m/z [M+H]+ calculado para C22H24C1N06, 434, 13; encontrado 434,2.
El compuesto del Ejemplo 2A y los Compuestos Comparativos I, J, y K se evaluaron como se describe en el Ensayo 1 y resultaron tener los siguientes valores de pKi para NEP humano: Compuesto R pKi Ejemplo 2A -C(O) -COOH 9,7 Compuesto -C(O) -CH2-COOH 8,4 Comparativo I Compuesto -C(O) - (CH2) 2-COOH 9,5 Comparativo J Compuesto -C(O) - (CH2) 3-COOH 9,3 Comparativo K Los datos muestran que el compuesto del Ejemplo 2A tenía una potencia mayor para NEP que los Compuestos Comparativos I, J, y K.
Aunque la presente invención ha sido descrita con referencia a formas de realización o aspectos específicos, aquellos versados en la técnica han de comprender que es posible efectuar diversos cambios o sustituciones equivalentes sin apartarse del espíritu y el alcance verdaderos de la invención. Además, hasta el grado permitido por las leyes y las normas aplicables a patentes, todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patente que se citan en la presente documentación se incorporan por completo a modo de referencia en la misma extensión que si cada documento se hubiera incorporado individualmente a modo de referencia en la presente documentación.

Claims (1)

  1. NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como prioridad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES compuesto de fórmula I: en donde : R1 se selecciona entre H, -Ci-salquilo, -Ci_3alquilen-C6-ioarilo, -Ci-3alquilen-Ci_9heteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 2O] 1-3CH3, -Ci_6alquilen-OC (0) R10, -Ci-6alquilen-NRuR12, -Ci-6alquilen-C (0) R13, -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-SC>2-Ci-6alquilo, R se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, -C3_7cicloalquilo, -0-C3_7cicloalquilo, fenilo, -0-fenilo, -NRnR12, -CH(R15)-NH2, -CH (R15) -NHC (O) 0-Ci-6alquilo, y -CH (NH2) CH2C00CH3; y R11 y R12 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R11 y R12 se toman juntos como -(CH2)3-6-, -C (O) - (CH2) 3-, o - (CH2) 20 (CH2) 2-; R13 se selecciona entre -0-Ci_6alquilo, -0-bencilo, y -NRUR12; y R14 es -Ci-6alquilo o -C0-6alquilen-C6-i0arilo; R15 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; R2 es -0R21 o -CH2OR21; y R3 es H o -CH3; donde R21 es H, -C(0)-Ci-6alquilo, -C (0) -CH (R22) -NH2, -C (0) -CH (R22) -NHC (0) 0-Ci-6alquilo, o -P (0) (OR23) 2; R22 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; R23 es H, -Ci-6alquilo, o fenilo; o R2 se toma junto con R1 para formar -OCR15R16- o -CH20-CR15R16-, y R3 se selecciona entre H y -CH3, donde R15 y R16 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y -0-C3-7cicloalquilo, o R15 y R16 se toman juntos para formar =0; o R2 se toma junto con R3 para formar -CH2-0-CH2- o -CH2-CH2-; o R2 y R3 son ambos -CH3; Z se selecciona entre -CH- y -N-; R4 se selecciona entre H, -Ci-ealquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci_8alquilo, -Ci_3alquilen-C6_ioarilo, -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, -Ci-3alquilen-Ci-9heteroarilo, -C3-7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci-galquilen-OC (0) R40, -Ci-6alquilen-NR1R42, -Ci_6alquilen- -Co-6alquilenmorfolinilo, -Ci-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, R se selecciona entre -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, -C3-7cicloalquilo, -0-C3-7cicloalquilo, fenilo, -O-fenilo, -NR41R42, -CH (R45) -NH2, -CH (R45) -NHC (0) 0-Ci-6alquilo, y -CH (NH2) CH2COOCH3; y R41 y R42 se seleccionan en forma independiente entre H, -Ci-6alquilo, y bencilo; o R41 y R42 se toman juntos como -(CH2)3-6-, -C (O) - (CH2) 3-, o - (CH2) 20 (CH2) 2- ; R43 se selecciona entre -0-Ci-6alquilo, -O-bencilo, y -NR41R42; y R44 es -Ci-6alquilo o -C0-6alquilen-C6-ioarilo; R45 es H, -CH3, -CH(CH3)2, fenilo, o bencilo; a es O o 1; R5 se selecciona entre halo, -CH3, -CF3, y -CN; b es O o un entero entre 1 y 3; cada R6 se selecciona en forma independiente entre halo, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, y -CF3; donde cada grupo alquilo en R1 y R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos -Ci-galquilo o ciclopropilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es H. 3. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 se selecciona entre -Ci-aalquilo, -Ci-3alquilen-C6-ioarilo, -Ci-3alquilen-Ci-9heteroarilo, -C3_7cicloalquilo, - [ (CH2) 2O] 1-3CH3, -Ci-6alquilen-OC (O) R10, -Ci-6alquilen-NR1;LR12, -Ci_6alquilen-C (O) R13, -C0-6alquilenmorfolinilo, -Ci_6alquilen-S02-Ci-6alquilo, o R1 se toma junto con R2 para formar -0CR15R16- o -CH20- CR15R16-. 4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 se selecciona entre H, -Ci-galquilo, -Ci-6alquilen-OC (O) R10, y donde RiU es -Ci-6alquilo, -0-Ci-6alquilo, o -CH [R ] -NHC (O) 0-Ci-6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo; R15 es -CH(CH3)2; y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor. 5. El compuesto de la reivindicación 4, en donde R1 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -(CH2)3CH3, - (CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(0)CH3 -CH2OC(0)CH2CH3, -CH2OC (0) (CH2) 2CH3, -CH2OC(0)OCH2CH3, -CH2OC(0)-CH[CH(CH3)2]-NHC(0)0-CH3, y donde R es -CH3. 6. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde R2 es -0R21, R3 es H, y R21 es H. 7. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde R2 es -0R21, R3 es -CH3, y R21 es H. 8. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde R2 es -CH2OR21, R3 es H, y R21 es H. 9. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde R2 es -CH2OR21, R3 es -CH3, y R21 es H. 10. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde R4 es H. 11. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde R4 se selecciona entre -Ci-ealquilo, -Ci_3alquilen-0-Ci-8alquilo, -Ci_3alquilen-C6-ioarilo, -Ci_3alquilen-0-C6-ioarilo, -Ci-3alquilen- Ci-g eteroarilo, -C3-7cicloalquilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, -Ci_6alquilen-OC (0) R40, -Ci_6alquilen-NR41R42, -Ci-6alquilen- C (0) R43, -C0-6alquilenmorfolinilo, -C1-6alquilen-S02-Ci-6alquilo, 12. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-0- Cg-ioarilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci-6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor. 13. El compuesto de la reivindicación 12, en donde R4 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, - (CH2) 3-0-CH2CH3, - (CH2) 2-0-fenilo, -(CH2)2OCH3, y donde R es -CH3. 14. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde a es 0, o a es 1 y R5 es halo. 15. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las 5 reivindicaciones 1 a 14, en donde b es 0, o b es 1 y R6 es halo, o b es 2 y cada R6 se selecciona en forma independiente entre halo y -CH3. 16. El compuesto de la reivindicación 1, en donde: a es 0 y b es 0; o 10 a es 0, b es 1, y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5'-cloro o 2'-metilo, 5 '-cloro o 2 ', 5 ' -dicloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o ]_5 a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3' -cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5'- cloro . 17. El compuesto de la reivindicación 6, en donde R1 se selecciona entre H, -Ci-ealquilo, -Ci-6alquilen-OC (O) R10, y donde R10 es -d-6alquilo, -0-Ci_6alquilo, o -CH [R15] -NHC (O) 0- Ci-6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo; R15 es -CH(CH3)2; y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y átomos de flúor; Z se selecciona entre -CH- y -N-; R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-Ci_8alquilo, -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, - [ (CH2) 2O] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci~6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R5 es halo; o a es 0, b es 2, y un R6 es halo y el otro R6 es halo o -CH3; o a es 1, R5 es halo, y b es 0; o a es 1, R5 es halo, b es 1, y R6 es halo; o a es 1, R5 es halo, b es 2, y cada R6 es halo; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3. 18. El compuesto de la reivindicación 17, en donde R1 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -(CH2)3CH3, - (CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC (O) CH3r -CH2OC (O) CH2CH3, -CH2OC(0) (CH2)2CH3, -CH2OC (O) OCH2CH3, -CH2OC(0)-CH[CH(CH3)2]-NHC(0)0-CH3, y donde R es -CH3; R4 se selecciona entre H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH (CH3) 2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, - (CH2) 3-0-CH2CH3, - (CH2) 2-0-fenilo, -(CH2)2OCH3, y donde R es -CH3; y a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3 '-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro o 2 '-metilo, 5 '-cloro o 2 ', 5 ' -dicloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3 '-cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5'-cloro. 19. El compuesto de la reivindicación 7, en donde R1 es H o -Ci-8alquilo; Z es -N-; R4 es H o -Ci-8alquilo ; y a y b son 0. 20 El compuesto de la reivindicación 19, en donde R1 y R4 son H . 21. El compuesto de la reivindicación 8, en donde R1 es H o -Ci-8alquilo; Z es -CH-; R4 es H o -C]__8alquilo ; a es 0 o a es 1 y R5 es halo; b es 0 o b es 1 o 2 y R6 es halo; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3. 22. El compuesto de la reivindicación 21, en donde R1 es H, -CH2CH3, o -(CH2)3CH3; R4 es H; a es 0 o a es 1 y R5 es 3-cloro; b es 0 o b es 1 y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro. 23. El compuesto de la reivindicación 9, en donde R1 es H o -Ci-ealquilo; Z es -CH-; R4 es H o -Ci-8alquilo; a es 0; y b es 0, o b es 1 y R6 es halo. 24. El compuesto de la reivindicación 23, en donde R1 es H o -CH2CH3; R4 es H o -CH2CH (CH3) 2; y b es 0, o b es 1 y R6 es 2 ' -fluoro, 3'-fluoro, 3 '-cloro, o 4'-flouro. 25. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 se selecciona entre H, -Ci-salquilo, -Ci-6alquilen-OC (O) R10, y donde R1U es -Ci-6alquilo, -0-Ci_6alquilo, o -CH [R ] -NHC (O) 0-Ci-6alquilo; R14 es -Ci-6alquilo; R15 es -CH(CH3)2; y cada grupo alquilo en R1 está opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; R4 se selecciona entre H, -Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-0-Ci-8alquilo, -Ci-3alquilen-0-C6-ioarilo, - [ (CH2) 20] 1-3CH3, y donde R44 es -Ci-6alquilo; y cada grupo alquilo en R4 está ^ opcionalmente sustituido con entre 1 y 8 átomos de flúor; a es 0 y b es 0; o a es 0, b es 1, y R6 es 2'-fluoro, 3'-fluoro, 3'-cloro, o 4'-flouro; o a es 0, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro o 2 '-metilo, 5 ' -cloro o 2 ', 5 ' -dicloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, y b es 0; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 1, y R6 es 3 '-cloro; o a es 1, R5 es 3-cloro, b es 2, y R6 es 2'-fluoro, 5 '-cloro; y donde el ligando metileno en el bifenilo está opcionalmente sustituido con dos grupos -CH3. 26. El compuesto de la reivindicación 25, en donde R2 es 5 -OR21 o -CH2OR21; y R3 es H o -CH3; donde R21 es H. 27. Un proceso para preparar un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, que comprende el paso de acoplar un compuesto de fórmula 1 con un compuesto de fórmula 2: 0 para dar un compuesto de fórmula I; donde R1-R6, a, y b son como se definen en la reivindicación 1, y P se selecciona entre H y un grupo protector de amino seleccionado entre t-butoxicarbonilo, trifilo, benciloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo, formilo, trimetilsililo, y t-butildimetilsililo; y donde el proceso comprende además desproteger el compuesto de fórmula 1 cuando P es un grupo protector de amino. 28. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26 y un vehículo farmacéuticamente aceptable . 29. La composición farmacéutica de la reivindicación 28, que además comprende un agente terapéutico que se selecciona de antagonistas de receptores de adenosina, antagonistas de receptores -adrenérgicos , antagonistas de receptores ß?-adrenérgicos, agonistas de receptores ß2-adrenérgicos , antagonista de receptores ß-adrenérgicos / antagonista de receptores al de doble acción, destructores de productos terminales de glicosilación avanzada, antagonista de aldosterona, inhibidores de aldosterona sintasa, inhibidores de aminopeptidasa N, andrógenos, inhibidores de enzima convertidora de angiotensina e inhibidores de doble acción de enzima convertidora de angiotensina/neprilisina, activadores y estimuladores de enzima convertidora de angiotensina 2, vacunas de angiotensina II, anticoagulantes, agentes antidiabéticos, agentes antidiarreicos , agentes antiglaucoma, agentes antilipidicos , agentes antinociceptivos, agentes antitrombóticos, antagonistas de receptores ATI y antagonista de receptor ATI / inhibidores de neprilisina de doble acción y bloqueadores multifuncionales de receptores de angiotensina, antagonistas de receptores de bradiquinina, bloqueadores de canales de calcio, inhibidores de quimasa, digoxina, diuréticos, agonistas de dopamina, inhibidores de enzima convertidora de endotelina, antagonistas de receptores de endotelina, inhibidores de HMG-CoA reductasa, estrógenos, agonistas y/o antagonistas de receptores de estrógenos, inhibidores de recaptación de monoamina, relajantes musculares, péptidos natriuréticos y sus análogos, antagonistas de receptores de depuración de péptido natriurético, inhibidores de neprilisina, donantes de óxido nítrico, agentes antiinflamatorios no esteroideos, antagonistas de receptores N-metil d-aspartato, agonistas de receptores opioides, inhibidores de fosfodiesterasa, análogos de prostaglandina, agonistas de receptores de prostaglandinas , inhibidores de renina, inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina, bloqueador de canales de sodio, estimuladores y activadores de guanilato ciclasa soluble, antidepresivos triciclicos, antagonistas de receptores de vasopresina, y combinaciones de los mismos. 30. La composición farmacéutica de la reivindicación 29, en donde el agente terapéutico es un antagonista del receptor de ???. 31. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, para usarlo en una terapia. 32. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 31, para usar en el tratamiento de hipertensión, insuficiencia cardiaca, o enfermedad renal. 33. El uso de un compuesto como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, para la fabricación de un medicamento para tratar hipertensión, insuficiencia cardiaca, o enfermedad renal.
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Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX354476B (es) 2010-12-15 2018-03-07 Theravance Inc Inhibidores de neprilisina.
SI2651896T1 (sl) 2010-12-15 2015-11-30 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Inhibitorji neprilizina
US8449890B2 (en) 2011-02-17 2013-05-28 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
MX342212B (es) 2011-02-17 2016-09-20 Theravance Inc Inhibidores de neprilisina.
CA2835216A1 (en) 2011-05-31 2012-12-06 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
CN202237001U (zh) * 2011-07-01 2012-05-30 龙泰兴业有限公司 具防护围网的跳床结构
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
US8905898B2 (en) * 2012-03-09 2014-12-09 Samuel Chen Trampoline enclosure net
CN104350052B (zh) 2012-05-31 2017-05-31 施万生物制药研发Ip有限责任公司 一氧化氮供体脑啡肽酶抑制剂
ME02698B (me) 2012-06-08 2017-10-20 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inhibitori neprilizina
US8871792B2 (en) 2012-06-08 2014-10-28 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
CN104520277B (zh) 2012-08-08 2018-01-19 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
ES2634218T3 (es) 2013-03-05 2017-09-27 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Inhibidores de neprilisina
JP2017507921A (ja) 2014-01-30 2017-03-23 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
US9585882B2 (en) * 2014-01-30 2017-03-07 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
WO2015154673A1 (en) * 2014-04-10 2015-10-15 Zhaoyin Wang Novel prodrugs and combinations for treatment of hypertension and cardiovascular diseases
WO2016029828A1 (zh) * 2014-08-27 2016-03-03 上海翰森生物医药科技有限公司 AHU-377结晶型游离酸、半钙盐、α﹣苯乙胺盐及其制备方法和应用
WO2016086798A1 (zh) * 2014-12-03 2016-06-09 上海翰森生物医药科技有限公司 Nep抑制剂结晶型游离酸、钙盐多晶型及其制备方法和应用
MY187899A (en) 2015-02-11 2021-10-27 Theravance Biopharma R&D Ip Llc (2s,4r)-5-(5'-chloro-2'-fluorobiphenyl-4-yl)-4-(ethoxyoxalylamino)-2-hydroxymethyl-2-methylpentanoic acid as neprilysin inhibitor
JP6714009B2 (ja) 2015-02-19 2020-06-24 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー （２ｒ，４ｒ）−５−（５’−クロロ−２’−フルオロビフェニル−４−イル）−２−ヒドロキシ−４−［（５−メチルオキサゾール−２−カルボニル）アミノ］ペンタン酸
CN105330569A (zh) * 2015-09-11 2016-02-17 天台宜生生化科技有限公司 一种(r)-2-(n-叔丁氧羰基氨基)联苯丙醇的制备方法
CN106310270A (zh) * 2015-12-18 2017-01-11 深圳奥萨制药有限公司 血管紧张素转化酶抑制剂与脑啡肽酶抑制剂的药物组合物
CN106310271A (zh) * 2016-01-27 2017-01-11 深圳奥萨制药有限公司 一种治疗慢性心力衰竭的药物组合物
CN113004273A (zh) * 2016-02-05 2021-06-22 益方生物科技(上海)股份有限公司 选择性雌激素受体降解物及其用途
KR20220035991A (ko) 2016-03-08 2022-03-22 세라밴스 바이오파마 알앤디 아이피, 엘엘씨 (2s,4r)-5-(5'-클로로-2'-플루오로-[1,1'-비페닐]-4-일)-2-(에톡시메틸)-4-(3-히드록시이속사졸-5-카르복사미도)-2-메틸펜탄산 결정 및 그 용도
UY38072A (es) 2018-02-07 2019-10-01 Novartis Ag Compuestos derivados de éster butanoico sustituido con bisfenilo como inhibidores de nep, composiciones y combinaciones de los mismos
CN111094289B (zh) * 2018-07-03 2022-11-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 吡啶并嘧啶类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN113166204A (zh) 2018-11-27 2021-07-23 诺华股份有限公司 作为治疗代谢障碍的蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型（PCSK9）抑制剂的环状肽
UY38485A (es) 2018-11-27 2020-06-30 Novartis Ag Compuestos tetrámeros cíclicos como inhibidores de proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (pcsk9), método de tratamiento, uso y su preparación
CN113166101A (zh) 2018-11-27 2021-07-23 诺华股份有限公司 作为治疗代谢障碍的蛋白质原转换酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型（PCSK9）抑制剂的环状五聚体化合物
CN112107568B (zh) * 2019-06-19 2022-03-25 北京龙嘉博创医药科技有限公司 二芳基酰胺类化合物及其应用
WO2022123592A1 (en) * 2020-12-08 2022-06-16 Alkem Laboratories Ltd Stable pharmaceutical composition of azilsartan medoxomil or pharmaceutical acceptable salt and processes for preparing thereof
WO2023084449A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Novartis Ag Diaminocyclopentylpyridine derivatives for the treatment of a disease or disorder
CN115340472B (zh) * 2022-09-19 2024-05-07 合肥工业大学 一种谷氨酸衍生物及其合成方法和应用

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4189604A (en) 1975-07-22 1980-02-19 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Bestatin
US4206232A (en) 1976-05-10 1980-06-03 E. R. Squibb & Sons, Inc. Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
IL58849A (en) 1978-12-11 1983-03-31 Merck & Co Inc Carboxyalkyl dipeptides and derivatives thereof,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2480747A1 (fr) 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique
US4906615A (en) 1980-12-18 1990-03-06 Schering Corporation Substituted dipeptides as inhibitors of enkephalinases
US4722810A (en) 1984-08-16 1988-02-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4939261A (en) 1984-06-08 1990-07-03 Ciba-Geigy Corporation N-substituted butyramide derivatives useful for treatment of conditions responsive to inhibition of enkephalinase
EP0225292A3 (en) 1985-12-06 1988-11-30 Ciba-Geigy Ag Certain n-substituted butyramide derivatives
US4929641B1 (en) 1988-05-11 1994-08-30 Schering Corp Mercapto-acylamino acid antihypertensives
KR880007441A (ko) 1986-12-11 1988-08-27 알렌 제이.스피겔 스피로-치환된 글루타르아미드 이뇨제
FR2623498B1 (fr) 1987-11-24 1990-04-06 Bioprojet Soc Civ Nouveaux composes enantiomeres derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques
GB8820844D0 (en) 1988-09-05 1988-10-05 Pfizer Ltd Therapeutic agents
US5599951A (en) 1989-09-15 1997-02-04 Societe Civile Bioprojet Amino acid derivatives, the process for their preparation and their applications to therapy
US5294632A (en) 1991-05-01 1994-03-15 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipetide derivatives
US5155100A (en) 1991-05-01 1992-10-13 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipeptide derivatives
US5217996A (en) 1992-01-22 1993-06-08 Ciba-Geigy Corporation Biaryl substituted 4-amino-butyric acid amides
US5508272A (en) 1993-06-15 1996-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Compounds containing a fused bicycle ring and processes therefor
DE19510566A1 (de) 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
CA2218716A1 (en) 1995-04-21 1996-10-24 Novartis Ag N-aroylamino acid amides as endothelin inhibitors
US6660756B2 (en) 2001-03-28 2003-12-09 Pfizer Inc. N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
GB0119305D0 (en) 2001-04-12 2001-10-03 Aventis Pharma Gmbh Mercaptoacetylamide derivatives,a process for their preparation and their use
WO2006027680A1 (en) 2004-09-10 2006-03-16 Pfizer Limited 3-(1-carbamoylcyclohexyl) propionic acid derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase enzyme
AR057882A1 (es) 2005-11-09 2007-12-26 Novartis Ag Compuestos de accion doble de bloqueadores del receptor de angiotensina e inhibidores de endopeptidasa neutra
WO2007106708A2 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Novartis Ag Combinations of the angiotensin ii antagonist valsartan and the nep inhibitor daglutril
AR064842A1 (es) 2007-01-12 2009-04-29 Mazzucco Gavieiro Maria Belen Pirrolidin-2-onas, y su uso en la preparacion de inhibidores de nep
TWI448284B (zh) 2007-04-24 2014-08-11 Theravance Inc 雙效抗高血壓劑
PE20091364A1 (es) * 2008-01-17 2009-10-13 Novartis Ag Proceso para la preparacion de inhibidores de nep
US20100247606A1 (en) 2009-03-25 2010-09-30 Allergan, Inc. Intraocular sustained release drug delivery systems and methods for treating ocular conditions
SG176010A1 (en) * 2009-05-28 2011-12-29 Novartis Ag Substituted aminobutyric derivatives as neprilysin inhibitors
AU2010251967B9 (en) * 2009-05-28 2014-04-03 Novartis Ag Substituted aminopropionic derivatives as neprilysin inhibitors
JO2967B1 (en) 2009-11-20 2016-03-15 نوفارتس ايه جي Acetic acid derivatives of carbamoyl methyl amino are substituted as new NEP inhibitors
RU2564024C2 (ru) 2010-01-22 2015-09-27 Новартис Аг Промежуточные продукты для получения ингибиторов нейтральной эндопептидазы и способ их получения
US8993631B2 (en) 2010-11-16 2015-03-31 Novartis Ag Method of treating contrast-induced nephropathy
US8673974B2 (en) 2010-11-16 2014-03-18 Novartis Ag Substituted amino bisphenyl pentanoic acid derivatives as NEP inhibitors
SI2651896T1 (sl) * 2010-12-15 2015-11-30 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Inhibitorji neprilizina
MX354476B (es) 2010-12-15 2018-03-07 Theravance Inc Inhibidores de neprilisina.
MX342212B (es) 2011-02-17 2016-09-20 Theravance Inc Inhibidores de neprilisina.
US8449890B2 (en) 2011-02-17 2013-05-28 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
WO2012166390A1 (en) 2011-05-31 2012-12-06 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
CA2835216A1 (en) 2011-05-31 2012-12-06 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
EP2714648B1 (en) 2011-05-31 2017-08-16 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Neprilysin inhibitors
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CN104350052B (zh) 2012-05-31 2017-05-31 施万生物制药研发Ip有限责任公司 一氧化氮供体脑啡肽酶抑制剂
ME02698B (me) 2012-06-08 2017-10-20 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inhibitori neprilizina
US8871792B2 (en) 2012-06-08 2014-10-28 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
CN104520277B (zh) 2012-08-08 2018-01-19 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂

Also Published As

Publication number Publication date
MX343753B (es) 2016-11-22
ME02726B (me) 2017-10-20
JP5944010B2 (ja) 2016-07-05
US20210059966A1 (en) 2021-03-04
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PL2773335T3 (pl) 2017-08-31

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