CN103896802A

CN103896802A - 预防和治疗肺纤维化的药物及其生产和质量检测方法

Info

Publication number: CN103896802A
Application number: CN201210574767.6A
Authority: CN
Inventors: 王飞; 程玉海; 仲志峰; 陈良梅; 吉木青; 闫睿; 王月然
Original assignee: JIANGSU BERKGEN BIOPHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: JIANGSU BERKGEN BIOPHARMACEUTICAL Co Ltd
Priority date: 2012-12-27
Filing date: 2012-12-27
Publication date: 2014-07-02

Abstract

本发明涉及预防和治疗肺纤维化的药物的应用及其生产和质量检测方法，该药物含有如下所示的结构，其中X为：氮原子、碳原子、羰基、肟基等基团；R为：二乙氨基甲基、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。

Description

预防和治疗肺纤维化的药物及其生产和质量检测方法

技术领域

本发明为预防和治疗肺纤维化的药物的应用及其生产和质量检测方法，涉及医药化工领域。

背景技术

肺纤维化是即肺脏间质组织由胶原蛋白、弹性素及蛋白醣类构成，当纤维母细胞受到化学性或物理性伤害时，会分泌胶原蛋白进行肺间质组织的修补，进而造成肺脏纤维化；即肺脏受到伤害后，人体修复产生的结果。

肺纤维化疾病包括特发性肺纤维化(IPF)、结节病、尘肺，过敏性肺炎、药物和放射线导致的纤维化，以及与胶原血管病有关的致纤维化肺泡炎等病因各异，范围广泛的疾病谱。纤维化是以大量的成纤维细胞聚集、细胞外基质沉积并伴有炎症和损伤所致组织结构破坏为特征。其病理特点包括肺组织问质细胞增殖、细胞外基质增生沉积及肺实质的重构，其发病率和死亡率各不相同，严重性各异，但共同特点是缺少特异性治疗。

各型肺纤维化皆以成纤维细胞增殖及大量细胞外基质聚集为特征。多种因素均可引起肺纤维化，如职业性粉尘(SiO₂等)、放射性损伤及某些药物等，此外还有一类不明病因的肺纤维化——特发性肺纤维化。虽然起因不同，但纤维化的发展与结局基本相似，即由下呼吸道炎症细胞浸润起始，逐步引起肺泡上皮细胞和血管内皮细胞损伤，并伴有肌成纤维细胞和II型肺泡上皮细胞增殖的细胞因子等的释放，致细胞外基质蛋白和胶原沉积，最终引起肺结构的损害，导致肺泡气体——交换单元持久性的丧失。

肺纤维化是一种进展性疾病，如得不到及早治疗，患者病情发展很快。有的1～2年就可由I期进展到III期，甚至终身致残或早逝，给患者家庭带来不幸。这种疾病给企业增加了沉重的经济负担，给社会经济造成了巨大损失。目前，国内外尚没有经批准生产上市的肺纤维化预防和治疗的药物。因此，迫切需要寻找一种高效、低毒、使用方便的抗肺纤维化新药。

发明内容

本发明涉及一种药物在预防和治疗肺纤维化中的应用及其生产和质量检测方法。

该药物为含有如下结构化合物作为药物活性成分：

其中X为：氮原子、碳原子、羰基、肟基等基团；R为：二乙氨基甲基、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。

本发明的药物组合物，其中的化合物可以是如下化合物：

a).所述结构式中X为：氮原子；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-010：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-011：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-012：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-013：2，7-二-(吡咯烷-乙氧基)-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-014：2，7-二-(吗啡啉-乙氧基)-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-015：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-016：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-咔唑·二盐酸盐、BKP-01-017：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-咔唑·二盐酸盐；

b).所述结构式中X为：碳原子；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-020：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-021：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-022：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-023：2，7-二-(吡咯烷-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-024：2，7-二-(吗啡啉-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-025：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-026：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-027：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-芴·二盐酸盐；

c).所述结构式中X为：羰基；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-030：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-031：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-032：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-033：2，7-二-(吡咯烷-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-034：2，7-二-(吗啡啉-乙氧基)-芴酮-9·-二盐酸盐、BKP-01-035：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-036：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-037：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐；

d).所述结构式中X为：肟基；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-040：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-041：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-042：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-043：2，7-二-(吡咯烷-乙氧基)-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-044：2，7-二-(吗啡啉-乙氧基)-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-045：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-046：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-芴肟-9·二盐酸盐、BKP-01-047：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-芴肟-9·二盐酸盐。

本发明药物组合物优选的化合物为：

最优选的化合物是BKP-01-041：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐

本发明提供结构式化合物或其药物可接受的盐在制备预防和治疗肺纤维化的药物中的应用。

本发明提供这些药物组合物的制备方法以及化合物BKP-01-041的质量检测方法。

本发明用于预防和治疗肺纤维化的药物组合物，含有一种或几种有效治疗量的上述化合物，还可含有药物可接受的载体。这些药物组合物可以包括各种药物剂型，这些药物剂型可以是缓释片剂、干粉吸入剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、喷雾剂、口服液、注射剂、混悬剂、栓剂、贴剂等。

本发明的药物其活性成分每剂药物有效量的范围为0.1mg-1000mg，优选的范围是1mg-500mg。

本发明药物组合物优选的是：含有150mg/片的2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐和药物可接受的载体。

本发明药物组合物优选的剂型为缓释片剂。制备2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐缓释片，减少用药次数，延长药物作用时间，维持平稳的有效治疗浓度。缓释制剂初步设计规格为150mg/片，一日两次给药，相比于普通片剂规格100mg/片，一日三次给药，缓释制剂的日给药剂量没有改变，但患者用药方便，依从性更好，同时能够减轻毒副作用，降低由于血药浓度迅速升高而带来的不良症状，并且达到较好的治疗效果。

本发明药物组合物预防和治疗肺纤维化的有关药学实验：

实验性肺纤维化动物模型，按国际公认的方法在乙醚麻醉下将石英尘40mg的生理盐水悬浊液1ml，从气管注入肺内，经气管染尘后，逐渐在肺内形成肺纤维化病变。疗效指标：全肺干重(g)，全肺胶原蛋白含量测定，常用T/C值表示全肺胶原或干重试验组与对照组的含量的比值。T/C值是国际公认的判断肺纤维化的疗效标准，凡T/C值在0.65以下者一般判断为有效。此外，根据研究目的，血清铜兰蛋白含量和病理形态学检查也作为重要的疗效指标。

表I对大鼠实验性肺纤维化的比较

注：每次剂量10mg/kg(PO)N＝10

从表I看出，化合物BKP-01-041，BKP-01-030，BKP-01-021全肺湿重T/C值与对照组比较有显著差别，病理分级为I级，化合物BKP-01-032和BKP-01-042也有一定效果。干扰素滴定度也较高。

按常规方法进行气管染尘建立实验性肺纤维化的动物模型。疗效指标的判断：全肺胶原蛋白含量的比值(T/C值)、肺纤维化病变的病理组织学检查、分级(I-IV级，I级肺纤维化病变最轻，IV级最重)及生化指标(铜兰蛋白含量等)。铜兰蛋白(CP)系含铜的二胺氧化酶，在肺纤维化过程中，它有促进胶原蛋白交联反应和胶纤维化形成的作用。肺纤维化患者血清铜兰蛋白含量升高是肺纤维化诊断及疗效评价的常用指标之一，在实践中有广泛应用。

本发明优选化合物BKP-01-041，不同剂量对动物实验性肺纤维化的药效研究：

Wistar大鼠气管染尘一个月后，在肺胀形成典型的肺纤维化病变后开始给药，治疗一个月，全部动物剖杀进行检测。结果列于表II。

表II不同剂量化合物BKP-01-041对大鼠实验性肺纤维化疗效的比较

从表II看出，剂量在2.5mg/Kg以上各治疗组动物的全肺胶原蛋白含量明显低于对照组，有显著的差异，呈现明显的量-效关系。该药的ED50为2.1mg/Kg(其可信限为1.7～2.5mg/Kg)，ED95为5.1mg/Kg(其可信限为4.30～6.15mg/Kg).量-效关系回归方程式为：Y＝3.6096+4.2603X。治疗指数：1927/2.1＝917.6。用这一指数衡量药物的疗效，表明该药用量底而疗效高。

Beagle狗气管染尘一个月后，形成典型的肺纤维化病变后开始给药，治疗3个月，全部动物剖杀进行检测。试验结果列于表III。

表III化合物BKP-01-041对Beagle狗试验性肺纤维化治疗的药效结果(N＝3)

试验结果表明：全肺胶原蛋白含量，高、中及低剂量治疗组均明显低于肺纤维化对照组，具有明显差异(P＜0.01-0.05)。病理分级为I-II级。

化合物BKP-01-041的毒性实验

大鼠(PO)LD₅₀为1927mg/Kg，大鼠(iV)LD₅₀为45mg/Kg，小鼠(PO)LD₅₀为1182mg/Kg.说明该药物毒性较低。

化合物BKP-01-041对Beagle狗长期毒性试验。高剂量组(96mg/Kg)、中剂量组(48mg/Kg)、低剂量组(12mg/Kg)及对照组四个剂量组连续给药9个月，恢复观察1.5个月。连续给药6个月，高剂量组动物AST、ALT开始升高。中剂量组动物连续给药9个月AST、ALT升高，低剂量组动物各项生化指标、各脏器未见明显异常。在停药恢复期，上述各组动物进食量与体重明显增加，AST、ALT恢复到正常水平。

特殊毒性试验：

Ames试验：剂量为1-2000μg/皿，结果表明，本品高剂量组无论加入或不加入S₉代谢活化剂的条件下，TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、TA₁₀₂四株菌科均无致突变作用。Ames试验为阴性。

啮齿类动物微核试验：

剂量为62.55mg/Kg，结果表明，本品各剂量组的骨髓细胞多染红细胞微核率均在正常值范围内，微核率为阴性；哺乳动物培养细胞染色体畸变试验结果表明，化合物BKP-01-041对CHL细胞染色体畸变作用。

本发明的药物具有预防肺纤维化的功效，可提高机体免疫力，增强肺通气功能，阻止延缓肺纤维化病变进展的作用。该药的优点还在于，临床反应很低，临床应用较安全，服药简便，易于推广使用。

本发明还要解决的技术问题是提供一种方法简单、成本低的生产化合物BKP-01-041的方法。为解决这方面的技术问题，本发明采用如下

技术方案：

预防和治疗肺纤维化化合物BKP-01-041的生产方法，其包括如下步骤：

a)将原料芴溶于二氯甲烷中，0℃下滴加卤素的二氯甲烷溶液，后升至室温，继续反应生成化合物2，7-二卤代芴；

b)将2，7-二卤代芴溶于冰醋酸中，加入氧化剂，回流反应生成2，7-二卤代芴酮；

c)将2，7-二卤代芴酮和乙二氨乙醇溶于甲苯中，经缩合反应，然后加入异丙醇氯化氢溶液成盐，生成2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐；

d)将2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐溶于异丙醇中，搅拌下加入盐酸羟胺，生成目标化合物BKP-01-041(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐)。

优选的，步骤a)的具体步骤包括：将芴溶于二氯甲烷中，冷却至0℃，将溴的二氯甲烷溶液滴入反应体系中，0℃下保温0.5小时，后升至25℃搅拌2小时。

优选的，步骤b)的具体步骤包括：将步骤a)得到的2，7-二溴芴溶于冰醋酸中，加入三氧化铬冰醋酸溶液，加热回流5小时，得到2，7-二溴芴酮。

优选的，步骤c)的具体步骤包括：将步骤b)得到的2，7-二溴芴酮溶于甲苯中，加入氢氧化钾溶液，分批加入乙二氨乙醇盐酸盐，最后加入四丁基溴化铵，回流30小时后。分层后，有机相蒸去溶剂后加入氯化氢异丙醇溶液成盐，过滤得到2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐。

优选的，步骤d)的具体步骤包括：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐溶于异丙醇中，搅拌下加入盐酸羟胺，搅拌3小时后得到目标化合物BKP-01-041(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐)。

上述技术方案具有如下有益效果：采用廉价的芴作为原料，经过卤化、氧化、缩合及肟化等步骤得到目标化合物BKP-01-041，工艺流程简单，利于放大生产，试剂价格相对较低，产率较高，是一条有效的生产BKP-01-041的方法。

附图说明

[图1]盐酸替络欧紫外光谱图。

[图2]BKP-01-041HPLC含量测定图。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明做进一步说明。

实施例1化合物BKP-01-041缓释片剂的制备

将缓释剂处方中的原、辅料充分混合均匀，粉碎，用8％的聚乙烯吡咯烷酮K90乙醇溶液作为粘合剂，制粒，烘干，整粒，然后加入硬脂酸镁混合均匀，压片机制成缓释片剂。

实施例2化合物BKP-01-041干粉吸入剂的制备

将化合物BKP-01-041、亮氨酸和α-乳糖以质量比为1∶0.5∶1的比例，溶解于10％的乙醇水溶液中，0.22μm微孔膜过滤，经过喷雾干燥即可得到含有BKP-01-041干粉吸入剂含药粉末。

实施例3化合物BKP-01-041普通片剂的制备

按常规方式制成片芯，用包衣法包隔离层，再用包衣法包糖衣，制成10000糖衣片

实施例4化合物BKP-01-041胶囊剂的制备

将上述处方中的原辅料，经粉碎、制粒、干燥、整粒、混合后，填充羟丙基甲基纤维素胶囊壳内即得。

实施例5.下面结合该发明各步骤的化学反应方程式对本发明的优选实施例BKP-01-041(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐)及BKP-01-021(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐)进行详细的介绍。

BKP-01-041(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐)的生产方法介绍

如下述化合物BKP-01-041合成路线所示，首先将芴(1.66Kg，10mol)溶于二氯甲烷(8L)中，冷却至0℃，将溴(3.28Kg，20.5mol)的二氯甲烷(3L)溶液滴入反应体系中，0℃下保温0.5小时，后升至25℃搅拌2小时。反应完全后加入饱和硫代硫酸钠溶液(3L)除去过量的溴，分层，有机相用3L饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥2小时，浓缩，得到2，7-二溴芴。(3.16Kg，收率：98％)

然后将2，7-二溴芴(3.16Kg，9.8mol)溶于15L冰醋酸中，滴入三氧化铬冰醋酸溶液(1.0Kg(10mol)溶于10L冰醋酸中)，加热回流5小时。反应完全冷却至室温后，将饱和Na₂CO₃溶液滴入反应液中，调节溶液pH值至为中性。过滤，将得到的黄色固体用5L水洗三次，烘干得到2，7-二溴芴酮。(3.13Kg，收率：95％)

将2，7-二溴芴酮(3.13Kg，9.32mol)溶于20L甲苯中，加入KOH溶液(2.6Kg(46.6mol)溶于10L水中)，搅拌下分批加入乙二氨乙醇盐酸盐(3.14Kg，20.5mol)，最后加入150g四丁基溴化铵，加热回流30小时。冷却至室温，分层，水相用甲苯(10L)萃取一次，合并有机相。有机相用水(20L)洗涤两次，饱和食盐水(20L)洗涤3次，无水硫酸钠干燥2小时，浓缩。剩余物加入20L异丙醇，滴入氯化氢异丙醇溶液调节pH值至3，过滤。所的固体用异丙醇/甲醇(15L，V/V＝2∶1)重结晶，过滤得到黄色固体2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐。(3.82Kg，收率：85％)

将2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐(3.82Kg，7.93mol)溶于16L异丙醇中，分批加入盐酸羟胺(550g，7.93mol)，加热回流，反应5小时后，冷却至室温。过滤，将所得固体用异丙醇(15L)重结晶两次，得到桔红色目标化合物BKP-01-041(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐)。(3.55Kg，收率：90％)

实施例6BKP-01-021(2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐)的生产方法介绍

如下述化合物BKP-01-021合成路线所示，首先将芴(1.66Kg，10mol)溶于二氯甲烷(8L)中，冷却至0℃，将溴(3.28Kg，20.5mol)的二氯甲烷(3L)溶液滴入反应体系中，0℃下保温0.5小时，后升至25℃搅拌2小时。反应完全后加入饱和硫代硫酸钠溶液(3L)除去过量的溴，分层，有机相用3L饱和食盐水洗涤3次，无水硫酸钠干燥2小时，浓缩，得到2，7-二溴芴。(3.16Kg，收率：98％)

然后将2，7-二溴芴(3.16Kg，9.8mol)溶于20L甲苯中，加入KOH溶液(2.74Kg(49.0mol)溶于10L水中)，搅拌下分批加入乙二氨乙醇盐酸盐(3.31Kg，21.6mol)，最后加入160g四丁基溴化铵，加热回流30小时。冷却至室温，分层，水相用甲苯(10L)萃取一次，合并有机相。有机相用水(20L)洗涤两次，饱和食盐水(20L)洗涤3次，无水硫酸钠干燥2小时，浓缩。剩余物加入20L异丙醇，滴入氯化氢异丙醇溶液调节pH值至3，过滤。所的固体用异丙醇/甲醇(15L，V/V＝2∶1)重结晶两次，过滤得到黄色固体2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐。(3.58Kg，收率：78％)

本发明工艺流程简单，利于放大生产，实际价格相对较低，产率较高，生产化合物BKP-01-041及BKP-01-021总产率分别达到：71.2％及76.4％，是一条有效的生产预防和治疗肺纤维化化合物BKP-01-041及系列化合物的方法。

化合物BKP-01-041合成路线

化合物BKP-01-021合成路线

实施例7.化合物BKP-01-041的质量检测

1.紫外吸收光谱

BKP-01-041结构中具有共轭体系，故测定其紫外吸收光谱及最大吸收波长以进行本品的鉴别。

取BKP-01-041配成每1mL中含8μg的水溶液，照分光光度法(中国药典2012年版二部附录IVA)用日本岛津UV-1750紫外分光光度仪在波长200～400nm范围内扫描。实验测得BKP-01-041溶液在263nm的波长处有最大吸收，其紫外扫描图谱见图1。

2.高效液相色谱法测定BKP-01-041的含量

依照高效液相色谱法测定(中国药典2012年版二部附录V D)

仪器：日本岛津SDP-15C高校液相色谱仪，

色谱条件：色谱柱Diamonsil C 18(250×4.6nm)，流动相：0.005mol/L己烷磺酸钠(pH 3.4±0.05)-甲醇(52∶48)，流速：1mL/min，检测波长：263nm，柱温：30℃。

系统适用性：在上述色谱条件下，配置适宜浓度的盐酸替络欧对照品(经HPLC归一化法检查，纯度为99.9％)的水溶液，过滤，进样，盐酸替络欧的保留时间为8.48，峰形良好，且理论塔板数不低于3000。色谱图见图2。

线性范围：精密称取105℃干燥至恒重的盐酸替络欧对照品，用水制成浓度为1，4，8，12，16μg/ml的溶液，各取20μL进样，记录峰面积，并以盐酸替络欧的峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归。结果表明：盐酸替络欧在1～16μg/ml范围内，线性关系良好。回归方程(n＝6)为：Y＝120183X-2571.3r＝0.9999。

精密度和稳定性：分别精密称取盐酸替络欧原料药适量，用水制成8μg/ml的供试溶液，精密量取20μL注入液相色谱仪，重复进样6次，记录峰面积，RSD＝0.45％；并于1，3，8，16，24h分别进样，记录峰面积，结果表明供试品在24h内稳定。

样品测定：精密称取对照品和样品用水制成8μg/ml的溶液分别精密量取20μL注入液相色谱仪，色谱图见图2，按外标法以峰面积计算。

以上是对本发明预防和治疗肺纤维化化合物BKP-01-041进行详细介绍，对于本领域的一般技术人员，依据本发明实施例的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本发明内容不应理解为对本发明的限制，凡依本发明设计思想所做的任何改变都在本发明的保护范围之内。

Claims

1.以下结构的化合物及其药物可接受的盐的制备以及含有它们的药物在预防和治疗肺纤维化的药物中的应用。

2.权利要求1的应用，其中肺纤维化疾病包括特发性肺纤维化、结节病、尘肺、过敏性肺炎、药物和放射线导致的纤维化，以及与胶原血管病有关的致纤维化肺泡炎等。

3.权利要求1的应用，其中的化合物是

b).所述结构式中X为：碳原子；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-020：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-021：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-022：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-芴·二盐酸盐、BKP-01-023：2，7-二-(吡咯烷-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-024：2，7-二(吗啡啉-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-025：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-026：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-芴·二盐酸盐、BKP-01-027：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-芴·二盐酸盐；

c).所述结构式中X为：羰基；R为：二乙氨基甲基；、二乙氨基乙基、二丙氨基乙基、吡咯烷基乙基、N-吗啡啉基乙基、4-甲基哌嗪基乙基、N-哌啶基乙基。此时，该结构式所示的化合物包括：BKP-01-030：2，7-二[2-(二乙氨基)-甲氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-031：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-032：2，7-二[2-(二丙氨基)-乙氧基]-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-033：2，7二-(吡咯烷-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-034：2，7-二-(吗啡啉-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-035：2，7-二-(哌嗪-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-036：2，7-二-(4-甲基哌嗪-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐、BKP-01-037：2，7-二-(哌啶-乙氧基)-芴酮-9·二盐酸盐；

4.权利要求3的应用，其中最优选的化合物是BKP-01-041：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐。

5.权利要求4的应用，2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐的生产方法，其特征在于，其包括如下步骤：

c)将2，7-二卤代芴酮和乙二氨乙醇盐酸盐溶于甲苯中，经缩合反应，然后加入氯化氢异丙醇溶液成盐，生成2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐；

d)将2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴酮·二盐酸盐溶于乙醇中，搅拌下加入盐酸羟胺，生成目标化合物2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐。

6.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(a)中卤素为：氯和溴。

7.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(b)中氧化剂为：三氧化铬、重铬酸钾、高锰酸钾。

8.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(c)中反应溶剂为N，N-二甲基甲酰胺、甲苯、二甲苯、二氧六环、乙腈。

9.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(c)中反应相转移催化剂为：四丁基溴化铵、四丁基氯化铵、三乙基苄基氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、聚乙二醇、1，4，7，10，13，16-六氧杂环十八烷。

10.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(c)缩合反应中使用去酸剂时，碱为NaOH、KOH、CsOH、Ba(OH)₂、Mg(OH)₂、Ca(OH)₂、K₂CO₃、Na₂CO₃、Cs₂CO₃、醇钠、三乙胺、三正丁胺、吡啶、三丙基胺、N，N-二异丙基乙胺。

11.根据权利要求5所述BKP-01-041的合成方法，其特征在于步骤(d)加入盐酸羟胺的温度为10～78℃，反应时间为1～40小时。

12.权利要求4的应用，其中BKP-01-041：2，7-二[2-(二乙氨基)-乙氧基]-芴肟-9·二盐酸盐的剂量是1mg-500mg。

13.权利要求4的应用，其中的化合物可制成任何药学上可接受的剂型。

14.权利要求13的应用，其中所述的剂型为缓释片剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、喷雾剂、口服液、注射剂、混悬剂、栓剂、贴剂。

15.权利要求14的应用，其中所述的剂型为缓释片剂、干粉吸入剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂。

16.权利要求15的应用，其中所述的剂型为缓释片剂。

17.权利要求15的应用，其中所述的剂型为干粉吸入剂。

18.权利要求15的应用，其中所述的剂型为片剂。

19.权利要求15的应用，其中所述的剂型为胶囊剂。

20.权利要求15的应用，其中所述的剂型为颗粒剂。