CN103893361A - 一种治疗糖尿病的药物组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种治疗糖尿病的药物组合物及其应用，所述药物组合物主要由以下重量份数配比的原料制得：黄连1份和鲜地黄0.1~20份，所述药物组合物通过将黄连采用包括乙醇回流提取，再将提取液浓缩干燥的步骤提取得黄连提取物；将鲜地黄采用包括乙醇提取，再提取液减压浓缩干燥的步骤提取得鲜地黄提取物，然后将黄连提取物和鲜地黄提取物混合而得；及所述药物组合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。本发明的药物组合物与传统工艺的千金黄连丸相比，在主要活性成分梓醇、水苏糖、小檗碱等的转移率方面具有显著优势；并且经药理试验证明，本发明药物具有显著调脂降糖的药理作用，且显著优于传统工艺产品。

Description

一种治疗糖尿病的药物组合物及其应用

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种药物组合物及其应用，尤其涉及一种治疗糖尿病的药物组合物及其应用。

背景技术

糖尿病一种慢性进行性疾患，近年来呈快速增长和日趋年轻化趋势，2010年我国糖尿病患者超过5000万人，平均年龄为45岁。糖尿病特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌及或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱。其中Ⅱ型糖尿病占全部糖尿病人的90%以上。

目前临床用于治疗糖尿病的药物主要为化学药物，如二甲双胍、血管紧张素转换酶抑制剂、胰岛素增敏剂等，但长期服用毒副作用较大，常引起严重的肝、肾等功能障碍及多种慢性并发症，且易发生耐药性。

糖尿病属中医“消渴病”范畴。中医临床证候可分为阴虚热盛证、湿热困脾证、气阴两虚证、阴阳两虚兼血瘀水停证、血瘀脉络证五种类型。其中以阴虚热盛证为多，以阴虚为本、燥热为标，在治法治则以清热滋阴为主，标本兼治。中药在治疗糖尿病方面，具有毒副作用小，不易产生耐药性，有效改体代谢系统等优势。

本发明处方来自唐代名医孙思邈《备急千金药方》，该方由黄连和鲜地黄组成，二药配对，不燥不腻，泻火而不伤阴，滋阴而不留邪，黄连清燥膈上之热，生地滋培下焦之阴，二药相须为用，攻补兼施，取其清上滋下之法，共奏滋阴清热之功效。治疗阴虚热盛型消渴病，效果显著。

本发明处方中黄连为毛茛科植物黄连Copis chines Franch.、三角叶黄连Copis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Copis teeta Wall.的干燥根茎。现代研究表明，黄连含多种异喹啉类生物碱，包括小檗碱、表小檗碱，巴马汀、黄连碱、甲基黄连碱等；鲜地黄主要含有环烯醚萜类和低聚糖类成分，其中环烯醚萜类包括梓醇、桃叶珊瑚苷、地黄苷、益母草苷等，低聚糖包括水苏糖，甘露三糖，毛蕊花糖等。药理研究发现，黄连生物碱对自发性糖尿病小鼠和四氧嘧啶致糖尿病小鼠均有降血糖作用，并能改善其糖耐量，能显著调节血脂作用，包括甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）等；鲜地黄环烯醚萜类成分对四氧嘧啶致糖尿病小鼠具有显著降血糖作用，增加正常老鼠对葡萄糖的利用率，也能显著刺激STZ糖尿病老鼠的肝糖的合成；提高HDL-C含量，降低血清中TC和TG；鲜地黄低聚糖节实验性糖尿病的糖代谢紊乱，降低四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖及调节肠道菌群功能的作用，对II型糖尿病大鼠的血糖有降低作用，并能降低TG；同时，千金黄连方显著降低型糖尿病大鼠体重及血脂,改善糖耐量及糖异生,还可提高空腹血清胰岛素,改善大鼠胰岛素抵抗；能有效改善大鼠的总胆固醇（TC）、TG、HDL-C、LDL-C等。这些研究结果为千金黄连方治疗糖尿病提供了科学实验依据。

千金黄连丸采用鲜地黄榨汁后浸渍黄连，暴晒后粉碎制成蜜丸的传统工艺。由于鲜地黄主要降糖活性成分梓醇、低聚糖易受温度和葡萄糖苷酶的影响，在传统工艺中其含量损失较为严重，在一定程度上限制了药效的发挥。

发明内容

因此，本发明的目的是为了克服“千金黄连丸”传统工艺的缺点，提供一种治疗糖尿病的药物组合物及其应用，该药物组合物安全有效、质量可控、服用方便。

除非另外指明，本文中所用的“乙醇的百分比浓度”均为“体积百分比浓度”。

针对上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一方面，本发明提供一种治疗糖尿病的药物组合物，所述药物组合物主要由以下重量份数配比的原料制得：黄连1份和鲜地黄0.1~20份，所述药物组合物通过将黄连采用包括乙醇回流提取，再将提取液浓缩干燥的步骤提取得黄连提取物；将鲜地黄采用包括乙醇提取，再将提取液减压浓缩干燥的步骤提取得鲜地黄提取物，然后将黄连提取物和鲜地黄提取物混合而得。

优选地，所述黄连为1份，鲜地黄为10份。

优选地，所述黄连具体通过包括以下步骤的方法提取：

取黄连，加乙醇溶液提取1~4次，每次0.5~12小时，再将提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用。

优选地，每千克黄连加5~20L的乙醇溶液。

优选地，所述鲜地黄可通过冷浸法、回流法、浸渍法、渗漉法或常温闪式提取进行乙醇提取。

优选地，当鲜地黄通过浸渍法进行乙醇提取时，所述鲜地黄具体通过包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温浸渍提取1~4次，每次3~12小时，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用。

优选地，。

优选地，当鲜地黄通过渗漉法进行乙醇提取时，所述鲜地黄具体通过包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温渗漉提取1~4次，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用。

优选地，每千克鲜地黄加5~40L乙醇溶液。

更优选地，所述渗漉提取的流速为0.1~10ml/(kg·h)。

优选地，当鲜地黄通过渗漉法进行乙醇提取时，所述鲜地黄具体通过包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温闪式提取1~4次，每次提取1~30min，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用。

优选地，每千克鲜地黄加5~40L的乙醇溶液。

优选地，所述乙醇溶液的体积百分比浓度为10%~95%。

优选地，所述药物组合物还含有药学上可接受的载体或辅料。

优选地，所述药物组合物的剂型可为颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、混悬剂、滴丸剂、微丸剂、口含片、口崩片、胶丸、软胶囊、分散片、溶液剂、气雾剂或喷雾剂。

优选地，所述药物组合物的剂型可为颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液或滴丸剂。

还一方面，本发明提供一种本发明上述所述的治疗糖尿病的药物组合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用。

优选地，所述糖尿病为II型糖尿病。

本发明的方法制得的药物组合物与传统工艺的千金黄连丸相比，在主要活性成分梓醇、水苏糖、小檗碱等的转移率方面具有显著优势；并且经药理试验证明，本发明药物具有显著调脂降糖的药理作用，且显著优于传统工艺产品。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，下述各实施例仅用于说明本发明而并非对本发明的限制。

除非特别指明，以下实施例中所用的链脉佐菌素购自美国sigma公司。

除非特别指明，以下实施例中所用的黄连和鲜地黄购自河北安国市长安中药材有限公司黄连批号为110507，鲜地黄批号为111012。

除非特别指明，以下实施例中所用的动物为SD大鼠，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。

除非特别指明，以下实施例中所用的苯乙双胍购自天津市安丰大药房。

除非特别指明，以下实施例中所用的试剂均为分析纯试剂，且可从常规渠道商购获得。

实施例1

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄20份。

（1）取黄连，加5倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的95%乙醇提取3次，每次3小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加5倍体积的95%乙醇，常温浸渍提取1次，每次12小时，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将上述干粉提取物，过80目筛，加适量糖粉，制粒，包装，即得本发明的药物颗粒剂。

实施例2

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄8份。

（1）取黄连，加20倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的70%乙醇提取2次，每次1小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加40倍体积的10%乙醇，常温浸渍提取2次，每次6小时，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将上述干粉提取物，加蔗糖、糊精适量，混匀，制成颗粒，干燥，然后按常规工艺制备胶囊。

实施例3

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄10份。

（1）取黄连，加20倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的70%乙醇提取2次，每次1小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加20倍体积的50%乙醇，常温浸渍提取4次，每次3小时，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将上述干粉提取物，加蔗糖、糊精适量，混匀，制成颗粒，干燥，，然后按常规工艺制备胶囊。

实施例4

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄5份

（1）取黄连，加10倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的50%乙醇提取4次，每次0.5小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加5倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的95%乙醇，常温渗漉提取4次，流速0.1ml/(kg·h)，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）合并将上述提取物，混匀，加适量辅料，制成颗粒，干燥，压片，得本发明的药物片剂。

实施例5

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄1份。

（1）取黄连，加15倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的30%乙醇提取2次，每次1.5小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加20倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的50%乙醇，常温渗漉提取2次，流速5ml/(kg·h)，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将以上混匀，加适量糖粉、香精，加水至规定量，静置，滤过，灌装，灭菌，即得本发明的口服液。

实施例6

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄0.5份。

（1）取黄连，加18倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的70%乙醇提取1次，每次3小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加40倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的10%乙醇，常温渗漉提取1次，流速10ml/(kg·h)，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）合并上述提取物，按药物：聚乙二醇60的＝1:1，加入聚乙二醇6000基质，在80℃下熔融后，滴入0℃下液体石蜡中，滴距为6cm，滴制成型，除去液体石蜡，干燥，即得本发明的滴丸剂。

实施例7

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄15份。

（1）取黄连，加8倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的20%乙醇提取4次，每次2小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加5倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的95%乙醇，常温闪式提取4次，每次提取1min，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）合并上述提取物，加适量PEG4000与甘油适量，混匀，压制或滴制成软胶囊。

实施例8

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄0.1份。

（1）取黄连，加12倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的10%乙醇提取3次，每次1小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加20倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的50%乙醇，常温闪式提取2次，每次提取10min，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将上述提取物混匀加交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素适量，制粒，加适量滑石粉，压片制成本发明的分散片。

实施例9

按下列配比称取原料药：黄连1份，鲜地黄10份。

（1）取黄连，加10倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的70%乙醇提取2次，每次1.2小时，提取液减压回收溶剂，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（2）取鲜地黄，加40倍体积（体积/重量，以L/Kg计）的20%乙醇，常温闪式提取1次，每次提取30min，合并提取液，滤过，浓缩，干燥，粉碎，得提取物，备用；

（3）将上述提取物混匀加植物油适量，用明胶作囊壳材料，压制成本发明的软胶囊。

具体试验实施例

试验实施例1本发明的药物组合物与传统方法制得的千金黄连丸有效成分的对比

传统工艺法千金黄连丸的制备：参照孙思邈《备急千斤要方》，按处方称取药材，鲜地黄绞汁，浸渍黄连，爆晒至干，粉碎，即得。

本发明提取工艺样品制备：按照实施例1所述的方法制得发明提取工艺样品。

测定提取物中梓醇含量的HPLC色谱条件为：Diomonsil C18反相色谱柱（200mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈：0.1%磷酸水（1:99），检测波长为210nm，流速1ml min^-1，柱温35℃。

测定提取物中水苏糖含量的HPLC色谱条件为：流动相为甲醇-水（90:10），Ultimate氨基色谱柱（200mm×4.6mm，5μm），流速1.0mL/min，蒸发温度85℃，漂移管温度45℃，载气流速2L/min，PL-ELS2100蒸发光检测器，柱温35℃。

测定提取物中小檗碱含量的HPLC色谱条件为：Diomonsil C18反相色谱柱（200mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.05%mol/L磷酸二氢钾溶液(50:50)为流动相，检测波长345nm，柱温35℃。

供试品溶液制备：分别取传统工艺样品和本发明提取工艺样品适量，用甲醇配成每mL含提取物2mg的供试品溶液。

测定方法：取对照品溶液和供试品溶液各10μL进样检测，检测结果如下表所示。

表1各提取方法主要活性成分比较

实验结果表明，本发明的提取方法与传统工艺相比，在主要活性成分梓醇、水苏糖、小檗碱等的转移率方面具有显著优势。

试验实施例2本发明的药物组合物与传统方法制得的千金黄连丸治疗效果对比

1、该药用组合物（按照黄连：鲜地黄1:10的比例），分别按照传统工艺（具体的制备方法同上述试验例1）制得样品1和按照本发明实施例9所述的方法制得药物组合物（样品2）。

试验选用SD大鼠50只，其中10只作为正常对照组（即空白组），其它进行造模，造模组全部给予高脂饲料喂养，3周后采用腹腔注射链脉佐菌素(STZ)，剂量为40mg/kg，3天后测空腹血糖(FBG)，FBG≥7.0mol/L为造模成功。将造模成功的大鼠按体重随机分组，每组10只，雌雄各半，分为模型组（不给药）、样品1组、样品2组和对照药(苯乙双胍)组。样品组给药剂量折合1g药物组合物/kg/天，对照药组给药剂量为50mg/kg/天，给药28天后，测量体重，并在大鼠禁食不禁水后，剪尾测尾静脉血糖，乙醚吸入性麻醉后，剖腹，取腹主动脉血约5mL，静置，离心后立刻测血脂，最后颈椎脱臼处死大鼠。

（1）治疗后各组空腹血糖的比较

结果如下述表2所示，表明治疗后，各药物组空腹血糖均明显低于模型组，但仍高于正常对照组，其中，样品2组显著低于样品1组(P＜0.01)，样品2组高于对照药组，但不具显著性差异。

表2不同样品组干预前后血糖变化

单位：mmol/L

2）治疗后各组血脂指标的比较

结果如下述表3所示，表明治疗后，所有药物干预组的血清胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)均显著低于模型组，其中样品2组显著低于样品1组(P＜0.01)。所有药物干预组的HDL-C和LDL-C均显著高于模型组，其中样品2组显著高于样品1组(P＜0.01)。

表3不同组别样品对血脂的影响

单位：mmol/L

^*P<0.05，^**P<0.01

以上研究结果表明，本发明优选工艺样品，在对II型糖尿病大鼠的调脂降糖药理作用方面均显著优于传统工艺样品，从而为本发明提供了较好的试验数据支持。

Claims (10)

1.一种治疗糖尿病的药物组合物，所述药物组合物主要由以下重量份数配比的原料制得：黄连1份和鲜地黄0.1~20份，所述药物组合物通过将黄连采用包括乙醇回流提取，再将提取液浓缩干燥的步骤提取得黄连提取物；将鲜地黄采用包括乙醇提取，再将提取液减压浓缩干燥的步骤提取得鲜地黄提取物，然后将黄连提取物和鲜地黄提取物混合而得。

2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，所述黄连为1份，鲜地黄为10份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，所述黄连具体通过包括以下步骤的方法提取：

取黄连，加乙醇溶液提取1~4次，每次0.5~12小时，滤过，合并提取液，减压回收溶剂，浓缩，减压干燥，粉碎，得黄连提取物，备用；优选地，每千克黄连加5~20L的乙醇溶液。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，所述鲜地黄通过冷浸法、回流法、浸渍法、渗漉法或常温闪式提取进行乙醇提取。

5.根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，当鲜地黄通过浸渍法进行乙醇提取时，所述鲜地黄具体通过包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温浸渍提取1~4次，每次3~12小时，滤过，合并提取液，浓缩，干燥，粉碎，得鲜地黄提取物，备用；优选地，每千克鲜地黄加5~40L的乙醇溶液提取。

6.根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，当鲜地黄通过渗漉法进行乙醇提取时，所述鲜地黄具体通过包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温渗漉提取1~4次，滤过，合并提取液，浓缩，干燥，粉碎，得鲜地黄提取物，备用；优选地，每千克鲜地黄加5~40L的乙醇溶液提取；更优选地，渗漉提取的流速为0.1~10ml/(kg·h)。

7.根据权利要求4所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，当鲜地黄通过渗漉法进行乙醇提取时，所述鲜地黄通过具体包括以下步骤提取：

取鲜地黄，加乙醇溶液，常温闪式提取，每次提取1~30min，滤过，合并提取液，浓缩，干燥，粉碎，得鲜地黄提取物，备用；优选地，每千克鲜地黄加5~40L的乙醇溶液提取。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，所述乙醇溶液的体积百分比浓度为10%~95%。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还含有药学上可接受的载体或辅料，优选地，所述药物组合物的剂型为颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液、丸剂、混悬剂、滴丸剂、微丸剂、口含片、口崩片、胶丸、软胶囊、分散片、溶液剂、气雾剂或喷雾剂，更优选地，所述药物组合物的剂型为颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液或滴丸剂。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的治疗糖尿病的药物组合物在制备用于治疗糖尿病的药物中的应用，优选地，所述糖尿病为II型糖尿病。