CN103877075B - 白杨素在制备抗缺氧药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，抗缺氧药物为预防和治疗缺氧性损伤疾病的药物，缺氧性损伤疾病为高原低压性缺氧导致的急性高原病、脑缺血缺氧性疾病或心肌缺血缺氧性疾病。本发明的有益效果为：通过实验证明，白杨素具有显著的抗缺氧作用，而且效果有优于乙酰唑胺的趋势，以其为活性成分制备的抗缺氧药物，用于防治缺氧性损伤或治疗因外界环境氧含量降低而引起的各种缺氧病理状态，也可用于预防或治疗因疾病等导致外界正常氧量不能充分到达机体内，造成心、脑和呼吸系统等缺氧病理状态；还可以用于预防或治疗因机体活动所需氧耗量超过了生理动员能力而造成相对氧供不足的病理状态。

Description

白杨素在制备抗缺氧药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及白杨素在制备抗缺氧药物中的应用。

背景技术

由于组织氧供应减少或是对氧的利用障碍，而引起机体代谢、机能、以至形态结构变化的病理过程称为缺氧。随着人们生活方式的改变和生活节奏加快，缺氧已经成为一类相当常见的病理过程，其产生的原因可以分为三类：一是大气中氧分压过低，二是呼吸、血液、循环等系统疾病时出现氧供给和氧利用障碍，三是机体所需耗氧量大于供给量。高原缺氧属于低压性缺氧，常常使初到高原的人极易出现头痛、心悸、胸闷、气短、乏力、睡眠障碍、恶心、呕吐等急性高原反应，严重时还会出现高原肺水肿、高原脑水肿等致命性疾病，长期缺氧还可引起慢性高原疾病，严重影响高原居民和旅居者健康。积极采取措施预防和治疗机体缺氧对包括高山病在内的诸多疾病的防治有举足轻重之作用。目前由于防治效果或经济成本等原因，适宜推广应用的抗缺氧损伤防护药物非常匮乏。因此，研究与开发高效经济的抗缺氧损伤药物具有十分重要的意义。

缺氧可导致机体活性氧（ROS）生成增加，ROS能够与细胞中的生物大分子发生反应，改变它们的生物化学或者物理状态，导致细胞功能障碍或者死亡，而黄酮类化合物可直接清除自由基，提高机体抗氧化能力，具有较好的抗氧化活性和清除自由基能力，从而对缺氧引起的机体氧化损伤具有保护作用。

白杨素（5,7-二羟基黄酮）是一种在自然基广泛存在的黄酮化合物，在蜂蜜和蜂胶中含量较高，具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗糖尿病、抗焦虑等广泛的药理活性。但是目前尚无抗缺氧活性研究的报道。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一种白杨素的新用途，即制备抗缺氧药物。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：白杨素在制备抗缺氧药物中的应用。

白杨素的结构式如式（I）所示：

式I

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述白杨素的纯度大于95%。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述抗缺氧药物为预防和治疗缺氧性损伤疾病的药物。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述缺氧性损伤疾病为高原低压性缺氧导致的急性高原病、脑缺血缺氧性疾病或心肌缺血缺氧性疾病。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述抗缺氧药物为白杨素与医药学上常用的辅料结合，按照常规方法制成的口服剂和注射剂，口服剂包括片剂、胶囊剂、分散剂或颗粒剂；注射剂包括注射液或注射液冻干粉针剂。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述白杨素片剂中，包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素50份，填充剂130份，崩解剂10份，黏合剂6份，润滑剂4份。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述白杨素胶囊剂中，包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素10份，填充剂27份，黏合剂1份，润滑剂2份。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述填充剂为淀粉，崩解剂为微晶纤维素，黏合剂为甲基纤维素，润滑剂为硬脂酸镁。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述白杨素分散片剂中，包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素5份，微晶纤维素13份，交联羧甲基纤维素钠2份。

进一步的，上述的白杨素在制备抗缺氧药物中的应用，所述白杨素颗粒剂中，包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素1份，糊精1份，蔗糖粉2份。

本发明通过小鼠密闭缺氧耐受力实验、小鼠急性减压耐受力实验和低压氧舱模拟小鼠高原缺氧实验证实白杨素具有明显的抗缺氧活性，结果如下：

实验一：小鼠密闭缺氧耐受力实验：

1、实验方法：取健康BALB/C小鼠50只，雄性，适应性饲养3d后随机分成5组：缺氧模型组、乙酰唑胺组（250mg.kg^-1）、白杨素低剂量组（125mg.kg^-1）、白杨素中剂量组（250mg.kg^-1）和白杨素高剂量组（500mg.kg^-1），每组10只。口服灌胃给药5d，给药体积为0.4mL·20g^-1，缺氧模型组给等体积的生理盐水。给药后50min，将小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250mL广口瓶内（每瓶只放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶口，密封，使之不漏气，立即计时，直至呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶内存活时间为指标，比较各药物组耐缺氧时间。灌服不同剂量白杨素对密闭缺氧小鼠存活时间的影响结果如表1所示。

表1

。

注：^# P﹤0.05，^## P﹤0.01，与缺氧模型组相比。

2、实验结果：如表1结果所示，与缺氧模型组相比，白杨素低、中、高三个剂量组均能延长小鼠在常压密闭缺氧环境中的存活时间，且呈剂量依赖性，其中白杨素高剂量组的存活时间延长率达到45.91％，与乙酰唑胺阳性对照组比较均具有显著性差异（P＜0.01）。实验二：小鼠急性减压缺氧耐受力实验：

1、实验方法：取健康小鼠60只，雄性，饲养性适应3d后随机分为3组：缺氧模型组、乙酰唑胺对照组（200mg.kg^-1）、白杨素高剂量组（500mg.kg^-1），每组20只。口服灌胃给药5d，给药体积为0.4mL·20g^-1，缺氧模型组给等体积的生理盐水。给药后20min，将动物放入低压舱，密闭舱门，以1000m/min的速度减压上升海拔高度至5000m和8000m时分别各停留5min，最终上升至海拔高度10000m，维持此高度1h后，调节进孔阀门，缓慢降至正常海拔高度，打开舱门，观察统计1h内动物死亡率，并对实验结果进行方差分析，白杨素对小鼠急性减压耐缺氧能力的影响结果如表2所示。

表2

。

注：^## P﹤0.01，与缺氧模型组相比。

2、实验结果：如表2结果所示，与缺氧模型组和乙酰唑胺组相比，白杨素高剂量组可延长小鼠减压密闭缺氧存活时间（P﹤0.01），1h内死亡率为60％，说明白杨素能有效降低小鼠在急性缺氧条件下的死亡率。

实验三：白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织损伤的保护作用：

1、实验方法：

取健康BABL/C小鼠40只，雄性，适应性饲养3d后随机分成4组：正常对照组、缺氧模型组、乙酰唑胺组(250mg/kg)和白杨素高剂量组(500mg/kg)，每组10只。口服灌胃给药5d，给药体积为0.4mL·20g^-1，缺氧模型组给等体积的生理盐水。正常组小鼠不缺氧，给药后20min，将其余各组小鼠放入低压低氧动物实验舱，密闭舱门，以10m/s速度减压上升海拔高度至8000m，维持此高度9h后，调节进气孔阀门，以20m/s速度降至与外界大气压相同海拔高度（相当于1450m海拔高度），打开舱门，迅速活杀小鼠，摘取大脑，生理盐水洗三次，滤纸吸干，-80℃冰箱冷藏备用。用于测定生化指标检测，均按照试剂盒说明书操作。

2、实验结果：

①白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织能量代谢的影响：

白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织LD和LDH的影响如表3所示，(±s，n=10)。

表3

。

注：^*P﹤0.05，^**P﹤0.01，与正常组相比；

^# P﹤0.05，^## P﹤0.01，与缺氧模型组相比。

如表3结果所示，与正常对照组相比，缺氧模型组小鼠脑组织LD含量和LDH活力显著升高（P﹤0.01）；与缺氧模型组相比，预先用白杨素处理的小鼠脑组织LD含量显著降低（P﹤0.01），LDH活力明显升高（P﹤0.05）。

白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织ATP和ATPase的影响如表4所示，(±s，n=10)。

表4

。

注：^* P﹤0.05，^** P﹤0.01，与正常组相比；

^# P﹤0.05，^## P﹤0.01，与缺氧模型组相比。

如表4结果所示，与正常对照组相比，缺氧模型组小鼠脑组织ATP含量、K⁺Na⁺-ATP和Ga²⁺Mg²⁺-ATP酶活力均有所下降，而白杨素高剂量组上述指标下降幅度均明显小于缺氧模型组，与正常对照组接近（P＞0.05）。

实验结果显示，低压氧舱模拟高原缺氧6h后，小鼠脑组织ATP含量、K⁺Na⁺-ATP和Ga²⁺Mg²⁺-ATP酶活性明显下降，LD含量升高，LDH下降，而7-羟乙基白杨素可以逆转这些变化趋势，并在一定程度上缓解糖酵解产生大量LD所致的细胞损伤。

②白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织抗氧化能力的影响：

白杨素对模拟高原缺氧小鼠脑组织SOD、MDA和T-AOC的影响如表5所示，(x±s，n=10)。

表5

。

注：^*P﹤0.05，^**P﹤0.01，与正常组相比；

^#P﹤0.05，^##P﹤0.01，与模型组相比。

如表5所示，与正常对照组相比，缺氧模型组小鼠脑组织MDA含量显著升高（P<0.01），T-AOC、SOD活力显著降低（P<0.01）；与缺氧模型组相比，预先用白杨素给药处理后，小鼠脑组织MDA含量显著降低（P<0.01），SOD、T-AOC活力明显升高（P<0.01）。

实验结果显示，白杨素可使缺氧小鼠脑组织SOD、CAT、GSH-px活力显著提高，T-AOC能力、OH清除能力显著提升，MDA、H2O2含量显著降低。表明白杨素可有效清除缺氧小鼠脑组织中产生的过多的自由基，提高抗氧化能力，减轻因缺氧而导致的损伤，具有良好的抗缺氧作用。

本发明的有益效果为：通过实验证明，白杨素具有显著的抗缺氧作用，而且效果有优于乙酰唑胺的趋势，以其为活性成分制备的抗缺氧药物，用于防治缺氧性损伤或治疗因外界环境氧含量降低而引起的各种缺氧病理状态，也可用于预防或治疗因疾病等导致外界正常氧量不能充分到达机体内，造成心、脑和呼吸系统等缺氧病理状态；还可以用于预防或治疗因机体活动所需氧耗量超过了生理动员能力而造成相对氧供不足的病理状态。

具体实施方式

以白杨素为活性成分，按药剂学上的常规工艺制备成各种剂型的抗缺氧药物。

所用到的药品制剂来源如下：

白杨素：纯度大于95%,陕西慈缘生物技术有限公司；

淀粉：填充剂，陕西奥克药用辅料有限公司；

微晶纤维素：MCC，崩解剂，陕西奥克药用辅料有限公司；

甲基纤维素：黏合剂，安徽山河药用辅料股份有限公司；

硬脂酸镁：润滑剂，陕西奥克药用辅料有限公司；

交联羧甲基纤维素钠：cCMC-Na，安徽山河药用辅料股份有限公司；

糊精：陕西奥克药用辅料有限公司；

蔗糖粉：陕西奥克药用辅料有限公司。

实施例1：

片剂：

白杨素（纯度大于95%,陕西慈缘生物技术有限公司）50.0g，

淀粉（填充剂，陕西奥克药用辅料有限公司）130.0g，

微晶纤维素（MCC，崩解剂，陕西奥克药用辅料有限公司）10.0g，

甲基纤维素（黏合剂，安徽山河药用辅料股份有限公司）6.0g，

硬脂酸镁（润滑剂，陕西奥克药用辅料有限公司）4.0g，

共计200.0g。

按片剂常规方法制备，共制成1000片，每片含白杨素50mg。

实施例2：

胶囊剂：

白杨素（纯度大于95%）50.0g，

淀粉（填充剂）135.0g，

甲基纤维素（黏合剂）5.0g，

硬脂酸镁（润滑剂）10.0g，

共计200.0g。

按胶囊剂常规方法制备，共制成1000粒，每粒胶囊含白杨素50mg。

实施例3：

分散片剂：

白杨素（纯度大于95%）50.0g，

微晶纤维素130.0g，

交联羧甲基纤维素钠(cCMC-Na，安徽山河药用辅料股份有限公司)20.0g，

共计200.0g。

按分散片剂常规方法制备，共制成1000片，每片含白杨素50mg。

实施例4：

颗粒剂：

白杨素（纯度大于95%）50.0g，

糊精（陕西奥克药用辅料有限公司）50.0g，

蔗糖粉（陕西奥克药用辅料有限公司）100.0g，

共计200.0g。

按颗粒剂常规方法制备，共制成1000袋，每袋含白杨素50mg。

本发明的药物剂型还可以制备成更多的剂型，如滴丸、软胶囊剂、缓控释制剂、注射剂等。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.白杨素在制备预防和治疗高原低压性缺氧导致的急性高原病的药物中的应用，其特征在于，所述白杨素的纯度大于95%；所述预防和治疗高原低压性缺氧导致的急性高原病的药物为白杨素与医药学上常用的辅料结合，按照常规方法制成的口服剂和注射剂，口服剂包括片剂、胶囊剂、分散剂或颗粒剂；注射剂包括注射液或注射液冻干粉针剂；所述片剂中包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素50份，填充剂130份，崩解剂10份，黏合剂6份，润滑剂4份；所述胶囊剂中包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素10份，填充剂27份，黏合剂1份，润滑剂2份；所述填充剂为淀粉，崩解剂为微晶纤维素，黏合剂为甲基纤维素，润滑剂为硬脂酸镁；所述分散剂中包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素5份，微晶纤维素13份，交联羧甲基纤维素钠2份；所述颗粒剂中包括有按重量份计的以下组分：纯度大于95%的白杨素1份，糊精1份，蔗糖粉2份。