CN103848840A - 喜树碱衍生物及其医药用途 - Google Patents
喜树碱衍生物及其医药用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103848840A CN103848840A CN201210505775.5A CN201210505775A CN103848840A CN 103848840 A CN103848840 A CN 103848840A CN 201210505775 A CN201210505775 A CN 201210505775A CN 103848840 A CN103848840 A CN 103848840A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- camptothecin
- acyl group
- ethyl
- oxygen acyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- KLHNFRRAKPYYNK-XBJLNXMASA-N CCC(C)C(C(O)=O)NC(Oc(cc1)cc(c(CC)c2CN34)c1nc2C3=CC([C@@](CC)(C(OC1)=O)O)=C1C4=O)=O Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(Oc(cc1)cc(c(CC)c2CN34)c1nc2C3=CC([C@@](CC)(C(OC1)=O)O)=C1C4=O)=O KLHNFRRAKPYYNK-XBJLNXMASA-N 0.000 description 1
- XZCLYOHQFWLZIT-NZVRHLSZSA-N CC[C@](C(C=C1N2Cc3c(CC)c(cc(cc4)OC(NC(CC(O)=O)C(O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O Chemical compound CC[C@](C(C=C1N2Cc3c(CC)c(cc(cc4)OC(NC(CC(O)=O)C(O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O XZCLYOHQFWLZIT-NZVRHLSZSA-N 0.000 description 1
- WNMHYGYMDZYJHW-PRTIIRGTSA-N CC[C@](C(C=C1N2Cc3c(CC)c(cc(cc4)OC(NCC(NC(CC(O)=O)C(O)=O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O Chemical compound CC[C@](C(C=C1N2Cc3c(CC)c(cc(cc4)OC(NCC(NC(CC(O)=O)C(O)=O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O WNMHYGYMDZYJHW-PRTIIRGTSA-N 0.000 description 1
- YGZVMTDSKRIQGE-GDJIYFAZSA-N CC[C@](C(C=C1N2Cc3cc(c(CN(C)C)c(cc4)OC(N[C@H](CC(O)=O)C(O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O Chemical compound CC[C@](C(C=C1N2Cc3cc(c(CN(C)C)c(cc4)OC(N[C@H](CC(O)=O)C(O)=O)=O)c4nc13)=C(CO1)C2=O)(C1=O)O YGZVMTDSKRIQGE-GDJIYFAZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
Abstract
本发明的目的是提供式I代表的喜树碱衍生物及其无毒性的药学上可接受的盐，水合物或溶剂合物：式I中，R1代表-OH，OR5，-OCH2C6H5，或-NHCH(COOH)R2’；R2和R2’分别代表L型或D型氨基酸的烷基侧链，包括H，-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOH，-(CH2)4NH2等，R2和R2’相同或不同；R3代表H或-CH2N(CH3)2；R4代表H或C1-C5的烷基；R5代表H或C1-C5的烷基。
Description
技术领域
本发明涉及新的水溶性喜树碱衍生物及其非毒性的药学上可接受的盐。所述衍生物及其非毒性的药学上可接受的盐可作为肿瘤和癌症治疗药物。
背景技术
喜树碱(Camptothecin，CPT)及10-羟基喜树碱是临床应用最广的，具有强效抗肿瘤作用的天然植物生物碱。喜树碱及其衍生物作用机制独特，以DNA拓扑异构酶I为作用靶标，抑制生物体内DNA的合成，而发挥抗肿瘤作用。喜树碱类药物对胃癌、肝癌、膀胱癌及白血病等恶性肿瘤有较好的疗效。但是天然的喜树碱类化合物水溶性极差，临床应用受到限制。
通过对喜树碱或10-羟基喜树碱进行结构改造，发现了一批水溶性的喜树碱药物，如拓扑替康、伊立替康等。
但是伊立替康(Irinotecan，CPT-11)存在两个不足之处。第一个不足是其具有较强的抑制乙酰胆碱酯酶的作用，进而导致腹泻等胆碱能综合征的副作用；第二个不足是伊立替康向活性形式SN-38的转化率低，且存在着较大的个体差异。
发明内容
为了克服上述不足，发现更好的抗肿瘤药物，本发明人通过大量研究发现式I所示喜树碱衍生物具有比伊立替康更强的抗肿瘤作用，而且对胆碱酯酶的抑制作用较弱。
式I中，R1代表-OH，OR5，-OCH2C6H5，或-NHCH(COOH)R2’；R2和R2’分别代表L型或D型氨基酸的烷基侧链，包括H，-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOH，-(CH2)4NH2等，R2和R2’相同或不同；R3代表H或-CH2N(CH3)2；R4代表H或C1-C5的烷基；R5代表H或C1-C5的烷基。
因此，本发明提供式I所示的喜树碱衍生物及其非毒性药学上可接受的盐作为抗肿瘤药物的用途。
本发明另一方面提供一种药物组合物，其包含式I所示的无环核苷酸类似物及其非毒性药学上可接受的盐作为活性成分及制药领域中常用的药用赋形剂。
具体实施方式
下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。
实施例1-12的目标化合物可以按照如下合成路线制备：
氨基酸分子中的氨基与三光气(BTC)反应转化成异氰酸酯，然后与喜树碱衍生物分子中C-10位的羟基反应，脱保护基得到目标化合物。
反应式中，R2代表L型或D型氨基酸的烷基侧链，包括H，-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOH，-(CH2)4NH2等；R3代表H或-CH2N(CH3)2；R4代表H或C1-C5的烷基。
实施例1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-D-天冬氨酸(I1)的制备
1.1D-天冬氨酸苄酯异氰酸酯(1-1)的制备
H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH(2.478g，5.10mmol)溶于100ml二氯甲烷中，加入等体积的饱和碳酸氢钠溶液，冰水浴搅拌5min。然后加入三光气(530mg，1.786mmol)，剧烈搅拌15min。二氯甲烷萃取四次，无水Na2SO4干燥1h，减压浓缩蒸干，得到D-天冬氨酸苄酯异氰酸酯(2-1)，备用。
1.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-D-天冬氨酸苄酯(4-1)的制备
将7-乙基-10-羟基喜树碱(500mg，1.28mmol)加入到100ml无水四氢呋喃中，加入三乙胺(386mg，3.83mmol)，室温搅拌30min，将上述制备的异氰酸酯(2-1)用2ml二氯甲烷溶解，加入到反应液中，升温至40℃，搅拌过夜。结束反应，直接加入硅胶蒸干，经硅胶柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体(4-1)810mg，收率86.8％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.91-0.95(t，J＝7.2Hz，3H)，1.30-1.34(t，J＝7.6Hz，3H)，1.90-1.94(m，2H)，3.00-3.02(q，1H)，3.08(q，1H)，3.20-3.22(q，J＝7.6Hz，2H)，4.71-4.74(m，1H)，5.19(s，2H)，5.23(s，2H)，5.37(s，2H)，5.47(s，2H)，6.61(s，1H)，7.37(s，1H)，7.42-7.44(m，10H)，7.54-7.58(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.96-7.97(d，J＝2.4Hz，1H)，8.21-8.23(d，J＝9.2Hz，1H)，8.68-8.70(d，J＝8.4Hz，1H).MS(ESI)m/z：732.5[M+H]+，754.7[M+Na]+.
1.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-D-天冬氨酸(I1)的制备
将4-1(800mg，1.09mmol)加于四氢呋喃和乙醇(V/V＝7∶4)的混合溶剂(110ml)，加入Pd/c(320mg)，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，用硅胶柱层析纯化，用二氯甲烷∶丙酮∶甲酸(400∶200∶1)混合溶剂洗脱，收集所需组分，减压蒸干，得到黄色固体I1422mg，收率70％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.89(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.30(t，J＝7.6Hz，3H)，1.84-1.90(m，2H)，2.71-2.73(q，1H)，2.80-2.82(q，1H)，3.16-3.18(q，J＝7.6Hz，2H)，4.44-4.47(m，1H)，5.31(s，2H)，5.43(s，2H)，6.54(s，1H)，7.31(s，1H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，12.80-12.83(s，2H).MS(ESI)m/z：552.3[M+H]+，574.5[M+Na]+.
实施例2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-天冬氨酸(I2)的制备
2.1L-天冬氨酸苄酯异氰酸酯(2-2)的制备
参照1-1的方法，用H-L-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-天冬氨酸苄酯异氰酸酯(2-2)，备用。
2.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-天冬氨酸苄酯(4-2)的制备
参照1-2的方法，用2-2代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-2，收率98.6％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25-1.29(t，J＝7.6Hz，3H)，1.85-1.89(m，2H)，2.95-2.97(q，1H)，3.03(q，1H)，3.16-3.17(q，J＝7.6Hz，2H)，4.65-4.67(m，1H)，5.14(s，2H)，5.17(s，2H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.33(s，1H)，7.36-7.40(m，10H)，7.49-7.51(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz)，7.92(d，J＝2.4Hz，1H)，8.17-8.19(d，J＝9.2Hz，1H)，8.64-8.66(dd，J＝8.4Hz，1H).MS(ESI)m/z：732.5[M+H]+，754.6[M+Na]+.
2.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-天冬氨酸(I2)的制备
参照1-3的方法，用4-2代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I2，收率75％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.81-1.92(m，2H)，2.65-2.72(q，J＝7.6Hz，16.8Hz，1H)，2.80-2.85(q，J＝5.8Hz，16.8Hz，1H)，3.16-3.22(q，J＝7.6Hz，2H)，4.40-4.44(m，1H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.36-7.40(m，10H)，7.61-7.63(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz)，7.96-7.97(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18-8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(dd，J＝8.4Hz，1H)，12.89(s，2H).MS(ESI)m/z：552.3[M+H]+，574.5[M+Na]+.
实施例3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-亮氨酸(I3)的制备
3.1L-1978亮氨酸苄酯异氰酸酯的(2-3)制备
参照1-1的方法，用H-Leu-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-亮氨酸苄酯异氰酸酯(2-3)，备用。
3.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-亮氨酸苄酯(4-3)的制备
参照1-2的方法，用2-3代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-3，收率73.6％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.95(m，9H)，1.26-1.30(t，J＝7.6Hz，3H)，1.59-1.62(m，1H)，1.69-1.75(m，2H)，1.85-1.89(m，2H)，3.14-3.18(q，J＝7.6Hz，2H)，4.21-4.22(m，1H)，5.19-5.20(d，J＝4.4Hz，2H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.38-7.41(m，5H)，7.53-7.56(dd，J＝9.2Hz，2.8Hz，1H)，7.93-7.94(d，J＝2.8Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.52-8.54(d，J＝8Hz，1H).MS(ESI)m/z：640.5[M+H]+.
3.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-亮氨酸(I3)的制备
参照1-3的方法，用4-3代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I3，收率19.9％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.94-1.02(m，9H)，1.33-1.36(t，J＝7.6Hz，3H)，1.63-1.66(m，1H)，1.69-1.73(m，2H)，1.89-1.96(m，2H)，3.23-3.27(q，J＝7.6Hz，2H)，4.12-4.14(m，1H)，5.38(s，2H)，5.50(s，2H)，6.61(s，1H)，7.37(s，1H)，7.65-7.68(dd，J＝9.2Hz，2.8Hz，1H)，8.00-8.01(d，J＝2.4Hz，1H)，8.22-8.25(d，J＝9.2Hz，1H)，8.38-8.40(d，J＝8Hz，1H)，12.81(s，1H).MS(ESI)m/z：550.4[M+H]+，572.4[M+Na]+.
实施例4N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-谷氨酸(I4)的制备
4.1L-谷氨酸苄酯异氰酸酯(2-4)的制备
参照1-1的方法，用H-Glu(OBzl)-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-谷氨酸苄酯异氰酸酯(2-4)，备用。
4.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-谷氨酸苄酯(4-4)的制备
参照1-2的方法，用2-4代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-4，收率54％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.88-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.26-1.29(t，J＝7.6Hz，3H)，1.85-1.92(m，2H)，2.01-2.18(m，2H)，2.57-2.60(m，2H)，3.12-3.16(q，J＝7.6Hz，2H)，4.29-4.31(m，J＝4，8Hz，1H)，5.12(s，2H)，5.20(s，2H)，5.30(s，2H)，5.44(s，2H)，6.55(s，1H)，7.33(s，1H)，7.36-7.41(m，10H)，7.54-7.57(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.92-7.93(d，J＝2.4Hz，1H)，8.15-8.17(d，J＝8.8Hz，1H)，8.53-8.55(d，J＝8.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：746.5[M+H]+.
4.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-谷氨酸(I4)的制备
参照1-3的方法，用4-4代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I4，收率51％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.28-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.86-1.91(m，2H)，2.09-2.12(m，2H)，2.48-2.51(m，2H)，3.18-3.20(q，J＝6.8Hz，2H)，4.12-4.13(m，1H)，5.32(s，2H)，5.43(s，2H)，6.54(s，1H)，7.32(s，1H)，7.62-7.64(d，J＝8.4Hz，1H)，7.96(s，1H)，8.15-8.17(d，J＝8.0Hz，1H)，8.32-8.34(d，J＝7.6Hz，1H)，12.58(s，2H).MS(ESI)m/z：566.4[M+H]+，588.4[M+Na]+.
实施例5N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸(I5)的制备
5.1L-丙氨酸苄酯异氰酸酯(2-5)的制备
参照1-1的方法，用H-Ala-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-丙氨酸苄酯异氰酸酯(2-5)，备用。
5.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸苄酯(4-5)的制备
参照1-2的方法，用2-5代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-5，收率94％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.25-1.29(t，J＝7.2Hz，3H)，1.41-1.43(d，J＝7.2Hz，3H)，1.81-1.90(m，2H)，3.13-3.15(d，J＝6.4Hz，2H)，4.28-4.31(m，1H)，5.17-5.19(d，J＝4.2Hz，2H)，5.27(s，2H)，5.43(s，2H)，6.55(s，1H)，7.31(s，1H)，7.35-7.39(m，5H)，7.53-7.56(d，J＝8.8Hz，1H)，7.90(s，1H)，8.13-8.15(d，J＝8.8Hz，1H)，8.52-8.54(d，J＝7.6Hz，1H).MS(ESI)m/z：598.4[M+H]+，620.5[M+Na]+.
5.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸(I5)的制备
参照1-3的方法，用4-5代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I5，收率85.4％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.38-1.41(d，J＝7.6Hz，3H)，1.82-1.91(m，2H)，3.15-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，4.12-4.15(m，1H)，5.31(s，2H)，5.44(s，2H)，6.55(s，1H)，7.31(s，1H)，7.58-7.63(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.35-8.37(t，J＝7.6Hz，1H)，12.79(s，1H).MS(ESI)m/z：508.4[M+H]+.
实施例6N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-异亮氨酸(I6)的制备
6.1L-异亮氨酸苄酯异氰酸酯(2-6)的制备
参照1-1的方法，用H-Ile-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-异亮氨酸苄酯异氰酸酯(2-6)，备用。
6.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-异亮氨酸苄酯(4-6)的制备
参照1-2的方法，用2-6代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-6，收率92.8％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.81-0.94(m，9H)，1.26-1.30(m，4H)，1.45-1.47(m，1H)，1.86-1.93(m，3H)，3.13-3.19(q，J＝7.2Hz，2H)，4.13-4.17(m，1H)，5.10-5.22(m，2H)，5.28(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.37-7.41(m，5H)，7.56-7.58(dd，J＝9.8Hz，2.8Hz，1H)，7.93(d，J＝2.8Hz，1H)，8.15-8.17(d，J＝9.2Hz，1H)，8.48-8.50(d，J＝8.4Hz，1H).MS(ESI)m/z：640.5[M+H]+，622.5[M+Na]+.
6.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-异亮氨酸(I6)的制备
参照1-3的方法，用4-6代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I6，收率15％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.97(m，9H)，1.27-1.33(m，4H)，1.47-1.51(m，1H)，1.83-1.93(m，3H)，3.16-3.22(q，J＝7.6Hz，2H)，4.00-4.02(m，1H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.55(s，1H)，7.32(s，1H)，7.61-7.64(dd，J＝8.8Hz，2.4Hz，1H)，7.95-7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.17-8.19(d，J＝8.8Hz，1H)，8.27-8.29(d，J＝8.4Hz，1H)，12.80(s，1H).MS(ESI)m/z：550.3[M+H]+，572.4[M+Na]+.
实施例7N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-缬氨酸(I7)的制备
7.1缬氨酸苄酯异氰酸酯(2-7)的制备
参照1-1的方法，用H-Val-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-缬氨酸苄酯异氰酸酯(2-7)，备用。
7.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-缬氨酸苄酯(4-7)的制备
参照1-2的方法，用2-7代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-7，收率100％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.83-0.92(m，J＝7.2Hz，12H)，0.99-1.02(q，J＝3.2Hz，6H)，1.32-1.34(t，J＝7.2Hz，3H)，1.89-1.93(m，2H)，2.04-2.24(m，1H)，3.16-3.20(q，2H)，4.13-4.16(m，1H)，5.1-5.3(m，7H)，5.30(s，2H)，5.45(s，2H)，6.59(s，1H)，7.35-7.44(m，13H)，7.58-7.61(dd，J＝2.4Hz，9.2Hz，1H)，7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18-8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，8.49-8.51(d，J＝8.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：626.6[M+H]+.
7.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-缬氨酸(I7)的制备
参照1-3的方法，用4-7代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I7，收率39.7％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，0.98-1.01(q，J＝3.2Hz，6H)，1.28-1.32(t，J＝7.6Hz，3H)，1.82-1.93(m，2H)，2.14-2.19(m，1H)，3.16-3.22(q，J＝7.6Hz，2H)，3.96-4.00(dd，J＝5.6Hz，8.4Hz，1H)，5.32(s，2H)，5.43(s，2H)，6.51(s，1H)，7.32(s，1H)，7.61-7.63(dd，J＝2.4Hz，9.2Hz，1H)，7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.17-8.19(d，J＝9.2Hz，1H)，8.22-8.44(d，J＝8.4Hz，1H)，12.72(s，1H).MS(ESI)m/z：536.6[M+H]+.
实施例8N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸(I8)的制备
8.1甘氨酸苄酯异氰酸酯(2-8)的制备
参照1-1的方法，用H-Gly-OBzl·TosOH代替H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH与三光气反应，得到L-甘氨酸苄酯异氰酸酯(2-8)，备用。
8.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸苄酯的制备
参照1-2的方法，用2-8代替2-1，与7-乙基-10-羟基喜树碱反应，反应产物经硅胶柱层析纯化，得4-8，收率54％。收率82.5％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.2Hz，3H)，1.82-1.94(m，2H)，3.16-3.18(q，J＝7.2Hz，2H)，4.00-4.02(d，J＝6.0Hz，2H)，5.20(s，2H)，5.31(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.32(s，1H)，7.36-7.41(m，5H)，7.58-7.61(dd，J＝8.8Hz，2Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝8.8Hz，1H)，8.42-8.45(t，J＝6.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：584.4[M+H]+，606.2[M+Na]+.
8.3N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸(I8)的制备
参照1-3的方法，用4-8代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I8，收率71.7％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.84-1.91(m，2H)，3.15-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，3.83-3.84(d，J＝6.0Hz，2H)，5.30(s，2H)，5.43(s，2H)，6.55(s，1H)，7.31(s，1H)，7.61-7.64(dd，J＝9.6Hz，2.4Hz，1H)，7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.6Hz，1H)，8.28-8.31(t，J＝6.0Hz，1H)，12.68(s，1H).MS(ESI)m/z：494.3[M+H]+，516.3[M+Na]+.
实施例9N-(10-氧酰基-喜树碱)-D-天冬氨酸(I9)的制备
参照实施例1，用10-羟基喜树碱代替7-乙基-10-羟基喜树碱，与2-1反应，得到N-(喜树碱-10-氧酰基)-D-天冬氨酸苄酯(4-9)；用4-9代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I9，收率57％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.89(t，J＝7.2Hz，3H)，1.84-1.90(m，2H)，3.16-3.18(q，J＝7.6Hz，2H)，4.44-4.47(m，1H)，5.31(s，2H)，5.43(s，2H)，6.54(s，1H)，7.31(s，1H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，12.80-12.83(s，2H).MS(ESI)m/z：524.3[M+H]+，546.5[M+Na]+.
实施例10N-(10-氧酰基-喜树碱)-L-天冬氨酸(I10)的制备
参照实施例2，用10-羟基喜树碱代替7-乙基-10-羟基喜树碱，与2-2反应，得到N-(喜树碱-10-氧酰基)-L-天冬氨酸苄酯(4-10)；用4-10代替4-2，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I10，收率47％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.81-1.92(m，2H)，3.16-3.22(q，J＝7.6Hz，2H)，4.40-4.44(m，1H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.36-7.40(m，10H)，7.61-7.63(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz)，7.96-7.97(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18-8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(dd，J＝8.4Hz，1H)，12.89(s，2H).MS(ESI)m/z：524.3[M+H]+，546.5[M+Na]+.
实施例11N-{10-氧酰基-11[(二甲氨基)甲基]-喜树碱}-D-天冬氨酸(I11)的制备
参照实施例1，用拓扑替康代替7-乙基-10-羟基喜树碱，与2-1反应，得到N-(11-二甲胺基甲基喜树碱-10-氧酰基)-D-天冬氨酸苄酯(4-11)；用4-11代替4-1，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I11，收率43％。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.89(t，J＝7.2Hz，3H)，1.84-1.90(m，2H)，2.13-2.16(s，6H)，3.16-3.18(q，J＝7.6Hz，2H)，4.32-4.34(m，2H)，4.44-4.47(m，1H)，5.31(s，2H)，5.43(s，2H)，6.54(s，1H)，7.31(s，1H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，12.80-12.83(s，2H).MS(ESI)m/z：581.2[M+H]+，603.5[M+Na]+.
实施例12N-{10-氧酰基-11[(二甲氨基)甲基]-喜树碱}-L-天冬氨酸(I12)的制备
参照实施例2，用拓扑替康代替7-乙基-10-羟基喜树碱，与2-2反应，得到N-(11-二甲胺基甲基喜树碱-10-氧酰基)-L-天冬氨酸苄酯(4-12)；用4-12代替4-2，催化氢化，反应产物经硅胶柱层析分离，得到I12，收率52％。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.89(t，J＝7.2Hz，3H)，1.84-1.90(m，2H)，2.12-2.15(s，6H)，3.16-3.18(q，J＝7.6Hz，2H)，4.31-4.33(m，2H)，4.44-4.47(m，1H)，5.31(s，2H)，5.43(s，2H)，6.54(s，1H)，7.31(s，1H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34-8.36(d，J＝8.4Hz，1H)，12.80-12.83(s，2H).MS(ESI)m/z：[M+H]+，603.5[M+Na]+.
实施例13-18的目标化合物可以按照如下合成路线制备：
目标化合物I1-12分子中的游离羧基在DCC作用下，与另一分子氨基酸的氨基缩合，脱保护得到喜树碱衍生物的二肽衍生物。
反应式中，R2和R2’分别代表L型或D型氨基酸的烷基侧链，包括H，-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOH，-(CH2)4NH2等，R2和R2’相同或不同；R3代表H或-CH2N(CH3)2；R4代表H或C1-C5的烷基。
实施例13N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-D-天冬氨酸(I13)的制备
9.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-D-天冬氨酸苄酯(5-1)的制备
冰浴下，在100ml四氢呋喃中加入I8(446mg，0.90mmol)，HOBt(224mg，1.80mmol)，DIEA(582mg，4.50mmol)，搅拌20min。然后加入H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH(485.6mg，0.99mmol)，DCC(206mg，0.99mmol)，搅拌24h。反应结束后，减压蒸干，将残留物以硅胶柱层析分离，以二氯甲烷∶丙酮(3∶1)混合溶剂洗脱，收集所需组分，减压蒸干得到5-1的黄色固体241mg，收率34％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.28-1.32(t，J＝7.6Hz，3H)，1.86-1.89(m，2H)，2.88-2.89(q，1H)，2.95-2.96(q，1H)，3.14-3.15(q，J＝7.6Hz，2H)，3.84-3.89(d，J＝5.6Hz，2H)，4.84-4.86(q，1H)，4.55-4.59(q，1H)，5.13(s，2H)，5.21(s，2H)，5.27(s，2H)，5.45(s，2H)，6.57(s，1H)，7.35(s，11H)，7.63-7.65(dd，J＝8.8Hz，2.0Hz，1H)，7.94(d，J＝2.0Hz，1H)，8.14-8.16(d，J＝8.4Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.66-8.68(d，J＝8.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：789.7[M+H]+，811.7[M+Na]+.
9.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-D-天冬氨酸(I13)的制备
将上步产物5-1(241mg，306mmol)用四氢呋喃∶乙醇(3∶2)的混合溶剂50ml溶解，加入Pd/c(96.4mg)，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，减压蒸干溶剂，将残留物用硅胶柱层析分离，用二氯甲烷∶丙酮∶甲酸(300∶200∶1.0)洗脱，得到I13的黄色固体95mg，收率51％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.28-1.32(t，J＝7.6Hz，3H)，1.86-1.89(m，2H)，2.64-2.66(q，1H)，2.70-2.73(q，1H)，3.18-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，3.78-3.80(d，J＝5.6Hz，2H)，4.59-4.62(q，1H)，5.33(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.33(s，1H)，7.64-7.66(dd，J＝8.8Hz，2.0Hz，1H)，7.96(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(s，1H)，8.17-8.19(d，J＝8.8Hz，1H)，8.32-8.34(d，J＝8.0Hz，1H)，12.64(s，2H).MS(ESI)m/z：609.4[M+H]+，631.4[M+Na]+.
实施例14N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-D-天冬氨酸(I14)的制备
14.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-D-天冬氨酸苄酯(5-2)的制备
冰浴下，用四氢呋喃120ml溶解I5(619mg，1.22mmol)，加入HOBt(300mg，2.44mmol)，DIEA(788mg，6.10mmol)，搅拌20min，溶液呈土红色混浊液。然后加入H-D-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH(652mg，1.34mmol)，DCC(276mg，1.34mmol)，冰水浴自然升至室温，搅拌24h。反应结束后，加入硅胶蒸干溶剂，然后柱层析纯化然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体5-2700mg，四步下来总体收率收率71.3％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.14-1.29(m，6H)，1.85-1.89(m，2H)，2.81-2.85(q，1H)，2.95-2.99(q，1H)，3.13-3.17(q，J＝7.6Hz，2H)，4.16-4.20(m，1H)，4.77-4.81(q，1H)，5.06(s，2H)，5.11(s，2H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.29-7.34(m，11H)，7.61-7.64(dd，J＝9.2Hz，2.8Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.8Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.21-8.23(t，J＝7.6Hz，1H)，8.60-8.62(d，J＝8.4Hz，1H).MS(ESI) m/z：803.5[M+H]+，825.5[M+Na]+.
14.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-D-天冬氨酸(I14)的制备
将上步产物5-2(290mg，0.36mmol)用四氢呋喃∶乙醇＝3∶2的混合溶液90ml溶解，加入116mg Pd/c，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝400∶200∶1.5～200∶200∶1)，得到黄色固体I1490mg，收率40％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.22-1.34(m，6H)，1.86(m，2H)，3.19-3.26(m，2H)，3.59(m，2H)，4.19(m，1H)，4.52-4.59(q，1H)，5.33(s，2H)，5.43(s，2H)，6.55(s，1H)，7.31(s，1H)，7.63(dd，J＝9.2Hz，2.8Hz，1H)，7.95(d，J＝2.8Hz，1H)，8.16-8.31(m，3H)，12.71(s，2H).MS(ESI)m/z：623.4[M+H]+，645.3[M+Na]+.
实施例15N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-谷氨酸(I15)的制备
15.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-谷氨酸苄酯(5-3)的制备
冰浴下，用四氢呋喃100ml溶解I8(471mg，0.96mmol)，加入HOBt(258mg，1.91mmol)，DIEA(617mg，4.78mmol)，搅拌20min，溶液呈土红色混浊液。然后加入H-L-Glu(OBzl)-OBzl·HCl(382mg，1.05mmol)，DCC(262mg，1.05mmol)，冰水浴自然升至室温，搅拌24h。反应结束后，加入硅胶蒸干溶剂，然后柱层析纯化然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体5-3，称重440mg，收率57.5％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.26-1.30(t，J＝7.6Hz，3H)，1.86-1.95(m，3H)，2.07-2.12(m，1H)，2.48-2.51(m，2H)，3.15-3.17(q，J＝7.6Hz，2H)，3.80-3.84(t，2H)，4.42-4.47(q，1H)，5.08(s，2H)，5.15(s，2H)，5.30(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.33-7.37(m，11H)，7.63-7.65(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.15(s，1H)，8.17-8.20(t，J＝6.0Hz，1H)，8.49-8.51(d，J＝8.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：803.7[M+H]+，825.7[M+Na]+.
15.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-谷氨酸(I15)的制备
将上步产物5-3(410mg，0.51mmol)用四氢呋喃∶乙醇＝3∶2的混合溶液80ml溶解，加入Pd/c(150mg)，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝400∶200∶1.5～200∶200∶1)，得到黄色固体I15，称重230mg，收率72.8％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.83-2.00(m，4H)，2.29-2.31(m，2H)，3.17-3.19(q，J＝7.6Hz，2H)，3.79-3.82(t，J＝5.6Hz，2H)，4.29-4.30(m，1H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.64-7.66(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.19(m，2H)，8.31(d，1H)，12.55(s，2H).MS(ESI)m/z：623.4[M+H]+，645.4[M+Na]+.
实施例16N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-天冬氨酸(I16)的制备
16.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-天冬氨酸苄酯(5-4)的制备
冰浴下，用四氢呋喃100m1溶解I8(311mg，0.63mmol)，加入HOBt(170mg，1.26mmol)，DIEA(407.14mg，3.15mmol)，搅拌20min，溶液呈土红色混浊液。然后加入H-L-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH(336.96mg，0.69mmol)，DCC(142mg，0.69mmol)，冰水浴自然升至室温，搅拌24h。反应结束后，加入硅胶蒸干溶剂，然后柱层析纯化然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体5-4，称重240mg，收率48.3％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.28-1.32(t，J＝7.6Hz，3H)，1.86-1.91(m，2H)，2.83-2.87(q，1H)，2.93-2.97(q，1H)，3.16-3.19(q，J＝7.6Hz，2H)，3.79-3.81(d，J＝6.0Hz，2H)，4.82-4.85(q，1H)，5.08(s，2H)，5.12(s，2H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.32(s，1H)，7.25-7.39(m，10H)，7.63-7.66(dd，J＝8.8Hz，2.4Hz，1H)，7.95-7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.16-8.18(d，J＝8.8Hz，1H)，8.20-8.23(t，J＝6.0Hz，1H)，8.61-8.63(d，J＝7.6Hz，1H).MS(ESI)m/z：789.7[M+H]+.
16.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-甘氨酸-L-天冬氨酸(I16)的制备
将上步产物5-4(208mg，0.26mmol)用四氢呋喃∶乙醇＝3∶2的混合溶液50ml溶解，加入Pd/c(75mg)，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝400∶200∶1.5～200∶200∶1)，得到黄色固体I16115mg，收率72.7％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.81-1.92(m，2H)，2.60-2.65(q，1H)，2.69-2.73(q，1H)，3.18-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，3.78-3.79(d，J＝6.0Hz，2H)，4.55-4.60(q，1H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，6.56(s，1H)，7.32(s，1H)，7.64-7.67(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.96-7.97(d，J＝2.4Hz，1H)，8.17-8.20(d，J＝9.2Hz，1H)，8.21-8.24(t，J＝6.0Hz，1H)，8.33-8.35(d，J＝7.6Hz，1H)，12.79(s，2H).MS(ESI)m/z：609.3[M+H]+，631.4[M+Na]+.
实施例17N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-天冬氨酸(I17)的制备
17.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-天冬氨酸苄酯(5-5)的制备
冰浴下，用四氢呋喃80ml溶解I5(392mg，0.77mmol)，加入HOBt(209mg，1.546mmol)，DIEA(500mg，3.86mmol)，搅拌20min，溶液呈土红色混浊液。然后加入H-L-Asp(OBzl)-OBzl·TosOH(392mg，0.773mmol)，DCC(175mg，0.85mmol)，冰水浴自然升至室温，搅拌24h。反应结束后，加入硅胶蒸干溶剂，然后柱层析纯化然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体5-5400mg，收率64.6％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.22-1.30(m，6H)，1.84-1.91(m，2H)，2.82-2.86(q，1H)，2.92-2.96(q，1H)，3.12-3.16(q，J＝7.6Hz，2H)，4.17-4.21(m，1H)，4.80-4.83(m，1H)，5.06(s，2H)，5.11(s，2H)，5.31(s，2H)，5.44(s，2H)，6.51(s，1H)，7.29-7.35(s，11H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.93(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.16(d，J＝9.2Hz，1H)，8.21-8.24(d，J＝7.6Hz，1H)，8.58-8.60(d，J＝8.0Hz，1H).MS(ESI)m/z：803.6[M+H]+，825.5[M+Na]+.
17.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-天冬氨酸(I17)的制备
将上步产物5-5(375mg，0.47mmol)用四氢呋喃∶乙醇＝3∶2的混合溶液50ml溶解，加入150mg Pd/c，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝400∶200∶1.5～200∶200∶1)，得到黄色固体I17，称重124mg，收率42.6％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.29-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.33-1.35(d，J＝7.6Hz，3H)，1.82-1.93(m，2H)，2.62-2.67(q，1H)，2.70-2.76(q，1H)，3.15-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，4.19-4.24(m，1H)，4.58-4.60(m，1H)，5.31(s，2H)，5.44(s，2H)，6.52(s，1H)，7.32(s，1H)，7.62-7.65(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94-7.95(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.20(m，2H)，8.27-8.29(d，J＝8.0Hz，1H)，12.64(s，2H).MS(ESI)m/z：623.4[M+H]+，645.5[M+Na]+.
实施例18N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-谷氨酸(I18)的制备
18.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-谷氨酸苄酯(5-6)的制备
冰浴下，加入I5(625mg，1.23mmol)，四氢呋喃120ml，加入HOBt(332mg，2.46mmol)，DIEA(795mg，6.15mmol)，搅拌20min，溶液呈土红色混浊液。然后加入H-L-Glu(OBzl)-OBzl·H Cl(493mg，1.36mmol)，DCC(279mg，1.36mmol)，冰水浴自然升至室温，搅拌24h。反应结束后，加入硅胶蒸干溶剂，然后柱层析纯化然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮＝3∶1)，得到黄色固体5-6，称重690mg，收率69％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.23-1.29(m，6H)，1.83-1.92(m，2H)，1.99-2.02(m，2H)，2.33-2.38(m，2H)，3.14-3.16(q，J＝7.6Hz，2H)，4.17-4.20(t，J＝7.2Hz，1H)，4.22-4.25(m，1H)，5.06(s，2H)，5.13(s，2H)，5.32(s，2H)，5.44(s，2H)，6.55(s，1H)，7.30-7.39(s，11H)，7.59-7.62(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.92-7.93(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.16(d，J＝9.2Hz，1H)，8.24-8.25(d，J＝7.6Hz，1H)，8.48-8.50(d，J＝7.6Hz，1H).MS(ESI)m/z：817.5[M+H]+.
18.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-丙氨酸-L-谷氨酸(I18)的制备
将上步产物5-6(663mg，0.81mmol)用四氢呋喃∶乙醇＝3∶2的混合溶液75ml溶解，加入Pd/c(250mg)，常压催化氢化，室温搅拌过夜。滤除Pd/c，加入硅胶，蒸干溶剂，然后经柱层析纯化(二氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝400∶200∶1.5～200∶200∶1)，得到黄色固体I18260mg，收率50.3％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.87-0.91(t，J＝7.2Hz，3H)，1.29-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.33-1.35(d，J＝7.2Hz，3H)，1.82-1.91(m，2H)，2.01-2.03(m，2H)，2.29-2.34(m，2H)，3.15-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，4.19-4.22(t，J＝7.2Hz，1H)，4.27-4.29(m，1H)，5.31(s，2H)，5.44(s，2H)，6.51(s，1H)，7.32(s，1H)，7.62-7.65(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，7.94(d，J＝2.4Hz，1H)，8.14-8.18(m，2H)，8.24-8.26(d，J＝8.0Hz，1H)，12.42(s，2H).MS(ESI)m/z：637.3[M+H]+，659.4[M+Na]+.
实施例19N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-赖氨酸盐酸盐(I19)的制备
19.1N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-叔丁氧羰基赖氨酸甲酯(7-1)的制备
将H-Lys(Boc)-OMe·HCl(605.5mg，2.04mmol)溶于40ml二氯甲烷中，加入40ml饱和碳酸氢钠溶液，冰水浴搅拌5min。然后加入三光气(212mg，0.71mmol)，剧烈搅拌15min。用二氯甲烷萃取四次，无水Na2SO4干燥1h，减压浓缩蒸干，得到异氰酸酯衍生物6-1，备用。将7-乙基-10-羟基喜树碱(200mg，0.51mmol)加入到40ml无水四氢呋喃中，加入三乙胺(144mg，1.43mmol)，室温搅拌30min；将上述制备的异氰酸酯6-1用2ml二氯甲烷溶解，加入到反应液中，升温至40℃，搅拌过夜。反应结束后，中压柱层析(25min梯度二氯甲烷∶丙酮＝0～3∶1)，得到7-1的黄色固体270mg，收率80％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.92-0.96(t，J＝7.2Hz，3H)，1.33-1.37(t，J＝7.2Hz，3H)，1.42-1.44(m，13H)，1.74-1.86(m，2H)，1.89-1.96(m，2H)，2.98-3.00(m，2H)，3.24-3.26(q，J＝7.2Hz，2H)，3.75(s，3H)，4.15-4.21(m，1H)，5.39(s，2H)，5.50(s，2H)，5.44(s，2H)，6.62(s，1H)，6.89-6.92(t，J＝6.0Hz，1H)，7.38(s，1H)，7.67-7.69(dd，J＝9.2Hz，1H)，8.02(s，1H)，8.22-8.25(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，8.52-8.54(d，J＝7.6Hz，1H).MS(ESI)m/z：623.5[M+H]+.
19.2N-(7-乙基喜树碱-10-氧酰基)-L-赖氨酸盐酸盐(I19)的制备
将上步产物7-1溶于二氯甲烷，然后滴加盐酸乙醚直到略微偏酸性，加塞搅拌5-10min，抽滤，乙醚冲洗，得到I19，收率92％。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.45-1.47(m，2H)，1.57-1.59(m，2H)，1.72-1.84(m，2H)，1.83-1.89(m，2H)，2.78-2.83(m，2H)，3.18-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，3.70(s，3H)，4.12-4.18(m，1H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，7.32(s，1H)，7.61-7.64(dd，J＝9.6Hz，2.4Hz，1H)，7.76(s，3H)，7.95-7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18-8.28(d，J＝9.6Hz，1H)，8.46-8.48(d，J＝7.6Hz，1H).加重水1HNMR(400MHz，DMSO-d6)：δ＝0.86-0.90(t，J＝7.2Hz，3H)，1.27-1.31(t，J＝7.6Hz，3H)，1.45-1.47(m，2H)，1.57-1.59(m，2H)，1.72-1.84(m，2H)，1.83-1.89(m，2H)，2.78-2.83(t，2H)，3.18-3.20(q，J＝7.6Hz，2H)，3.70(s，3H)，4.12-4.18(m，1H)，5.34(s，2H)，5.44(s，2H)，7.32(s，1H)，7.61-7.64(dd，J＝9.6Hz，2.4Hz，1H)，7.95-7.96(d，J＝2.4Hz，1H)，8.18-8.28(d，J＝9.6Hz，1H)，8.46-8.48(d，J＝7.6Hz，0.5H).
实施例20化合物体外释放评价
20.1仪器与试剂
高效液相色谱仪岛津LC-15C；C18柱(250×4.6mm)；流动相乙腈-超纯水-三氟乙酸(V/V/V＝300∶700∶1)；检测波长：370nm；进样量20μl；pH＝7.4缓冲液；生理盐水；人体血浆。
20.2目标化合物在人血浆中释放实验
取一定质量的化合物，加入1少量DMSO溶解，用0.9％生理盐水稀释成1500μM溶液(稀释后DMSO含量不超过5‰)。分装血浆每份360μl，然后每份中加入40μl上述样品溶液，样品终浓度为150μM，涡流混合，37℃孵育。在0h，1h，2h，6h，12h，24h，48h等时定时取样，加入等体积冷乙腈(含三氟乙酸1‰)沉淀蛋白，涡流混合10s，1500r/s低温离心15min，取上清液，过滤，HPLC进样。
表1化合物在血浆中的释放试验结果
实施例21体外乙酰胆碱酯酶抑制活性测试
21.1仪器与试剂
紫外分光光度计日本岛津UV-2550；检测波长：412mμ；比色皿容量1ml；自制0.01M PBS缓冲液、0.1M pH7.3磷酸盐缓冲液、0.1M pH7.0磷酸盐缓冲液；硫代乙酰胆碱阿法埃莎(天津)化学有限公司；5，5-二巯基-双-(2-硝基苯甲酸)阿法埃莎(天津)化学有限公司；电鳗乙酰胆碱酯酶西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司。
21.2测试方法
采用Ellman法测定化合物的乙酰胆碱酯酶抑制活性：分别将20μL各目标化合物溶液和20μL AChE(4U·mL-1)加入到2.5mL 0.1mol·L-1(pH 7.3)磷酸盐缓冲液中，37℃孵育1min，然后依次加入100μL 0.01mol·L-1DTNB，100μL 0.075mol·L-1ATch后反应开始，涡旋10s。在412nm下，用紫外分光光度计测试吸光度，间隔15s读取一个数据，共读取3min，求斜率。每个样品平行测3次，求平均值。
实验操作中，校正时另一比色皿中用含等量目标化合物、DTNB和ATch的溶液做空白对照，则已扣除药物本底颜色，所以计算中不需要再次扣除。
数据处理计算公式：
对照：具有酶、DTNB、ATch和缓冲液体系
空白1：具有DTNB、ATch和缓冲液体系
加药：具有酶、药品、DTNB、ATch和缓冲液体系
空白2：具有药品、DTNB、ATch和缓冲液体系
表3化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制作用测试结果IC50！！！
实施例21抗肿瘤活性评价
以MTT法测试了化合物对SGC-7901癌细胞和Hela癌细胞的毒性：制备浓度大约为2.5×104μg·mL-1的细胞悬液，接种于96孔培养板，100.0uL/孔，置37℃，5％CO2培养箱中孵育24小时；将不同浓度的受试物加到培养的肿瘤细胞的96孔板中，继续培养72小时；弃去培养液，每孔加入0.05％MTT应用液100.0μL，培养4小时；弃去培养液，每孔加入100μL DMSO，振荡5分钟使甲臢颗粒溶解，测定细胞在490nm处的吸光度。
实验数据处理方法如下：
对照：具有细胞、MTT溶液而没有药物的孔的吸光度
空白：具有培养基和MTT溶液而没有细胞的孔的吸光度
加药：具有细胞、MTT溶液和药物溶液的孔的吸光度
最后由相应处理软件计算各受试物对各种肿瘤细胞生长的半数抑制浓度(IC50)。
结果见表3：
表3抗肿瘤活性评价试验结果
Claims (3)
1.式I代表的喜树碱衍生物及其无毒性的药学上可接受的盐，水合物或溶剂合物：
式I中，R1代表-OH，OR5，-OCH2C6H5，或-NHCH(COOH)R2’；R2和R2’分别代表L型或D型氨基酸的烷基侧链，包括H，-CH3，-CH(CH3)2，-CH2CH(CH3)2，-CH(CH3)CH2CH3，-CH2COOH，-CH2CH2COOH，-(CH2)4NH2等，R2和R2’相同或不同；R3代表H或-CH2N(CH3)2；R4代表H或C1-C5的烷基；R5代表H或C1-C5的烷基。
2.含有权利要求1所述的化合物及其非毒性的药学上可接受的盐作为活性成分以及适宜的赋型剂形成的药物组合物。这些药物组合物可以是溶液剂、片剂、胶囊或注射剂；这些药物组合物可以通过注射途径给药或口服给药。
3.权利要求1所述的化合物及其非毒性的药学上可接受的盐，以及含有权利要求1所述的化合物及其非毒性的药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物，作为抗肿瘤药物的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210505775.5A CN103848840A (zh) | 2012-12-03 | 2012-12-03 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210505775.5A CN103848840A (zh) | 2012-12-03 | 2012-12-03 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103848840A true CN103848840A (zh) | 2014-06-11 |
Family
ID=50856995
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210505775.5A Pending CN103848840A (zh) | 2012-12-03 | 2012-12-03 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103848840A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104262352A (zh) * | 2014-09-01 | 2015-01-07 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
| CN104387401A (zh) * | 2014-11-28 | 2015-03-04 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 喜树碱衍生物及其制备方法 |
| WO2023150899A1 (en) * | 2022-02-08 | 2023-08-17 | Canwell Biotech Limited | Conjugates of chemotherapy agents and tissue-binding small molecules, compositions and methods thereof |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0137145A1 (en) * | 1983-07-14 | 1985-04-17 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | New camptothecin derivatives and process for preparing same |
| CN1673225A (zh) * | 2004-03-23 | 2005-09-28 | 中国科学院上海药物研究所 | 羟基喜树碱及其衍生物的碳酸酯前药、制备方法与应用 |
| CN1982313A (zh) * | 2005-12-13 | 2007-06-20 | 深圳市天和医药科技开发有限公司 | 10位取代基上含多个有机羧酸基团的喜树碱化合物及其制法与组合物 |
| CN101397301A (zh) * | 2008-09-10 | 2009-04-01 | 重庆医科大学医药研究所 | 含10-羟基喜树碱的水溶性衍生物及制备方法 |
| CN102718772A (zh) * | 2012-04-17 | 2012-10-10 | 肖文辉 | 一类羟喜树碱衍生物和其制剂的制备及临床应用 |
-
2012
- 2012-12-03 CN CN201210505775.5A patent/CN103848840A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0137145A1 (en) * | 1983-07-14 | 1985-04-17 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | New camptothecin derivatives and process for preparing same |
| CN1673225A (zh) * | 2004-03-23 | 2005-09-28 | 中国科学院上海药物研究所 | 羟基喜树碱及其衍生物的碳酸酯前药、制备方法与应用 |
| CN1982313A (zh) * | 2005-12-13 | 2007-06-20 | 深圳市天和医药科技开发有限公司 | 10位取代基上含多个有机羧酸基团的喜树碱化合物及其制法与组合物 |
| CN101397301A (zh) * | 2008-09-10 | 2009-04-01 | 重庆医科大学医药研究所 | 含10-羟基喜树碱的水溶性衍生物及制备方法 |
| CN102718772A (zh) * | 2012-04-17 | 2012-10-10 | 肖文辉 | 一类羟喜树碱衍生物和其制剂的制备及临床应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 代鲁平 等: "抗癌药物喜树碱类衍生物的研究进展", 《中国药学杂志》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104262352A (zh) * | 2014-09-01 | 2015-01-07 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
| CN104262352B (zh) * | 2014-09-01 | 2018-06-15 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 喜树碱衍生物及其医药用途 |
| CN104387401A (zh) * | 2014-11-28 | 2015-03-04 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 喜树碱衍生物及其制备方法 |
| WO2023150899A1 (en) * | 2022-02-08 | 2023-08-17 | Canwell Biotech Limited | Conjugates of chemotherapy agents and tissue-binding small molecules, compositions and methods thereof |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101772507B (zh) | 蛋白酶体抑制剂 | |
| CN108299532A (zh) | 一种抗病毒核苷类似物前药及其组合物、用途 | |
| CN103467565A (zh) | 硼酸酯化合物及其医药组合物 | |
| EP2316839A1 (en) | Antiviral compounds | |
| CN104497303B (zh) | 多臂聚乙二醇‑叠氮衍生物 | |
| CN106061483A (zh) | Sn‑38的缓释结合物 | |
| CN111848544B (zh) | 可荧光示踪的氨基酸衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN103857399A (zh) | 治疗癌症和其它疾病的新的自然和合成的化合物 | |
| KR20030096226A (ko) | 개선된 세포간 전달을 보이는 디옥소란 동족체 | |
| EP3541388A1 (en) | Use of sanglifehrin macrocyclic analogues as anticancer compounds | |
| CN103848840A (zh) | 喜树碱衍生物及其医药用途 | |
| CN109021058A (zh) | 具有肿瘤耐药逆转活性的ocotillol型皂苷元衍生物及其制备方法和用途 | |
| CA2979527A1 (en) | Conjugates of pyrrolobenzodiazepine (pbd) prodrugs for treating disease | |
| CN104292290A (zh) | 以氨基酸为连接子的胆汁酸-药物偶合物及其医药用途 | |
| JP2021178855A (ja) | ヒストンデアセチラーゼの阻害剤としての大環状分子のチオエステルプロドラッグ | |
| CN102365283B (zh) | 阿德福韦酯的新晶型及其制备方法 | |
| Stawikowski et al. | Depsipeptide synthesis | |
| CN114917345A (zh) | 靶向soat1蛋白的化合物在制备预防和/或治疗肝癌药物中的应用 | |
| CN116870187A (zh) | N-氧杂环烷基取代的喜树碱衍生物的抗体偶联药物 | |
| CN110522923A (zh) | 果糖和rgd肽共修饰的双重靶向三阴性乳腺癌的脂质材料 | |
| CN103183722B (zh) | 一种乙二醛酶i抑制剂及其制备方法和医药用途 | |
| CN102961387B (zh) | 蛋白酶体抑制剂 | |
| CN107137715B (zh) | 一种帕利哌酮聚乙二醇缀合前药及制备 | |
| CN106496542B (zh) | 谷胱甘肽敏感的两亲性聚乙二醇-羟基喜树碱偶联物 | |
| CN104788391B (zh) | 肉桂酰中性红酰胺(ca‑pz)及其制备与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20140611 |