CN103800690B

CN103800690B - 一种龙血树叶、石斛药物组合物及其制备方法、制剂和应用

Info

Publication number: CN103800690B
Application number: CN201410057752.1A
Authority: CN
Inventors: 刘宝
Original assignee: PU'ER SONGMAO PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: Six kinds of pharmaceutical Limited by Share Ltd
Priority date: 2014-02-20
Filing date: 2014-02-20
Publication date: 2017-03-08
Anticipated expiration: 2034-02-20
Also published as: CN103800690A

Abstract

本发明公开了一种龙血树叶、石斛药物组合物及其制备方法、制剂和应用，属于药物制备技术领域。所述药物组合物包括按重量计的龙血树叶超微细粉45~55份和石斛超微细粉45~55份。所述制备方法首先将龙血树叶、石斛中的杂物剔除，经净选、清洗、晾晒、干燥至含水率≤3%；将龙血树叶、石斛分别用粗粉碎机粉碎，过100~140目筛；再将龙血树叶粗粉用气流粉碎机粉碎成粒径10~15μm的超微细粉，将石斛粗粉用振动磨粉碎成粒径6~12μm的超微细粉；将按重量计的龙血树叶超微细粉45~55份与石斛超微细粉45~55份混匀即可。所述制剂由该药物组合物加入药学上可接受的辅料制成。所述药物组合物可用于制备治疗乳腺增生、糖尿病的药物，具有生物利用度高、活性成分溶出快，药物吸收效果好的特点。

Description

一种龙血树叶、石斛药物组合物及其制备方法、制剂和应用

技术领域

本发明属于药物制备技术领域，具体涉及一种龙血树叶、石斛药物组合物及其制备方法、制剂和应用。

背景技术

龙血树叶为百合科龙血树属植物的干燥叶，含有丰富的药物活性成分，主要包括烷烃类和芳香类，以及部分酸类和醇类化合物。传统中医理论认为，龙血树叶具有清内火、活血化瘀、消肿止痛的功能，对气血凝结、瘀血结聚、经脉阻塞引起的乳腺增生、疼痛等症有明显的疗效。石斛为兰科石斛属植物的新鲜或干燥茎，富含多糖类、生物碱类、芴酮类化学成分，现代药理学研究表明，石斛具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳的功效，还具有增强机体免疫力，抗血小板聚集等作用。

依据中药组方理论，将龙血树叶与石斛混配用于乳腺增生、糖尿病等症的治疗具有事半功倍的疗效。然而，传统的中药饮片不但煎煮麻烦，使用不便，而且质量稳定性差，不易储存和保管，由于生物利用度低，导致原药的使用量偏高，这些缺陷早已成为制约中药饮片发展的主要障碍。因此，开发一种生物利用度高、药物活性成分溶出快，药物吸收效果好，原药用量小，质量稳定的新型龙血树叶、石斛药物组合物及其制备方法和制剂是非常有必要的。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种龙血树叶、石斛药物组合物；第二目的在于提供所述药物组合物的制备方法；第三目的在于提供所述药物组合物制成的制剂；第四目的在于提供所述药物组合物在制备治疗乳腺增生、糖尿病的药物中的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述药物组合物包括按重量计的龙血树叶超微细粉45~55份和石斛超微细粉45~55份。

本发明的第二目的是这样实现的，包括预处理、粗粉碎、超微粉碎及混配工序，具体包括：

A、预处理：将龙血树叶、石斛中的杂物剔除，经净选、清洗、晾晒、干燥至含水率≤3%备用；

B、粗粉碎：将龙血树叶、石斛分别用粗粉碎机粉碎，过100~140目筛备用；

C、超微粉碎：将龙血树叶粗粉用气流粉碎机粉碎成粒径10~15μm的超微细粉，将石斛粗粉用振动磨粉碎成粒径6~12μm的超微细粉；

D、混配：将按重量计的龙血树叶超微细粉45~55份与石斛超微细粉45~55份混配均匀即可。

本发明的第三目的是这样实现的，所述制剂由龙血树叶、石斛药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、贴膜剂、干粉吸入剂、口服控释片或注射剂。

本发明的第四目的是这样实现的，所述药物组合物在制备治疗乳腺增生、糖尿病的药物中的应用。

本发明所述的龙血树叶、石斛药物组合物由龙血树叶及石斛的超微细粉按照精确设定的组方混配制成。根据原药物理、化学性质及所含活性成分的差异性，本发明所述制备方法对不同原药选择了不同的超微粉碎方法。

龙血树叶上、下表皮细胞排列紧密，均外被厚的角质层，表皮下有多数纤维束，木质化或微木质化，叶肉中散在木质化的纤维束，中脉部位韧皮部外侧有纤维束，纤维木质化增厚，在薄壁组织中既有针晶束，也有挥发油。针对龙血树叶组织细胞壁厚，质硬，刚性好，结合力强，又富含油脂的特点，本发明所述方法采用气流式粉碎机对其进行超微粉碎，具有粉碎效果好，细胞分离率高，破坏率低的特点，所设定的粉碎工艺仅在细胞壁表面形成丰富的损伤以及对壁层产生适度的削薄，而非将细胞壁完全破坏，有利于提高药物摄入后活性成分的释放速度和释放量，同时减少了粉碎过程中原药细胞内有效成分，特别是挥发油的损失。

石斛的肉质茎从外到里包括表皮、基本组织和维管束三部分，表皮较薄仅1~2层细胞，基本组织均由不规则的薄壁细胞构成，尽管胞壁较薄，但细胞内含物主要是一些颗粒状物质和针状晶体，维管束鞘则主要由厚壁细胞构成，散生。针对石斛组织细胞大多数胞壁较薄，细胞内含物质地偏硬，提取物中大分子多糖含量高的特点，本发明所述方法采用振动磨对其进行超微粉碎，所设定的工艺组合有效提高了细胞破壁率，使石斛中的药用组分尤其是生物活性较强的低分子量多糖的生物利用度明显提高。此外，由于多糖类物质是由多个单糖基链接成的大分子化合物，本发明采用的粉碎工艺还有利于加速多糖类物质多晶态结构的解体，所形成的无定形多糖的溶解性更好，改善了药物的吸收效果。

此外，由于不同的龙血树及石斛品种，其药用成分的含量并不相同，降血糖、通经脉、消肿止痛及抗氧化性等也有较大差异，本发明根据药物的目标用途有针对性的挑选龙血素种类较多的剑叶龙血树的叶片及能有效促进胰岛α、β细胞激素分泌水平的铁皮石斛作为原药，选择性利用进一步提高了药物的生物利用度，节省了中药材资源。由于加工成超微细粉，本发明所述药物组合物在混合均匀性，分剂量准确性、可压性及质量稳定性等方面均有较大改善，有利于加工成不同的剂型，从而精确控制药物的吸收速度，药效的保留时间等，满足不同患者的保健、治疗需求。

具体实施方式

下面对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述的龙血树叶、石斛药物组合物包括按重量计的龙血树叶超微细粉45~55份和石斛超微细粉45~55份。

所述药物组合物优选包括按重量计的龙血树叶超微细粉50份和石斛超微细粉50份。

所述龙血树叶超微细粉的粒径为10~15μm，所述石斛超微细粉的粒径为6~12μm。

所述龙血树叶超微细粉中粒径为10~15μm的细粉的比例为90~95%，所述石斛超微细粉中粒径为6~12μm的细粉的比例为90~95%。

所述药物组合物是按以下方法制备的：

本发明所述龙血树叶、石斛药物组合物的制备方法，包括预处理、粗粉碎、超微粉碎及混配工序，具体包括：

所述制备方法还可以包括灭菌步骤，将混配均匀的药物组合物进行灭菌处理。

所述灭菌处理可以为干热灭菌、微波灭菌、热风循环干燥灭菌、远红外灭菌和臭氧灭菌中的任一种。

步骤A所述的清洗指的是使用流水漂洗。

步骤A所述的晾晒指的是置于自然阳光下，让龙血树叶及石斛自然气干。

步骤A所述的干燥可以为微波干燥、远红外干燥、热风循环干燥、真空冷冻干燥或太阳能干燥中的任一种。

所述的龙血树叶可以为剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis（Lour.) S. C.Chen）或海南龙血树（Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep）中任一种的叶子。

所述的龙血树叶优选为剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis（Lour.) S. C.Chen）的叶子。

所述的石斛可以为铁皮石斛（Dendrobium candidum）、粉花石斛（Dendrobium loddigesii）、金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl）、流苏石斛（Dendrobium finbriatum Hook）或鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl.）中的任一种。

所述的石斛优选为鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl.）。

步骤B所述的粗粉碎机优选为Circoplex分级研磨机。

步骤B所述的将龙血树叶、石斛分别用粗粉碎机粉碎，龙血树叶粗粉优选过100~120目筛备用，石斛粗粉优选过120~140目筛备用。

步骤C所述的将龙血树叶粗粉用气流粉碎机粉碎，气流粉碎机为TC-20型流化床超音速气流粉碎机，工作条件设定：进料量为0.8~1.2kg，耗气量为1.0~1.2m³/min，进气压力为0.8~1.0MPa，分级机转速为反转2400~2800r/min；将石斛粗粉用振动磨粉碎，振动磨为ZM-2型高频振动磨，工作条件设定：磨介质为棒状或球状，磨介质直径为0.3~0.5mm，磨介质充填率为45~55%，磨介质物料比为4~5，粉碎时间为1.5~2.0h。

所述磨介质优选为棒状。

步骤D所述的混配优选将按重量计的龙血树叶超微细粉50份与石斛超微细粉50份混配均匀即可。

步骤D所述的混配均匀指的是将龙血树叶超微细粉及石斛超微细粉按配方比例混合后，置于介质搅拌磨中混合搅拌1.0~2.0min。

步骤D所述的混配均匀优选将龙血树叶超微细粉及石斛超微细粉按配方比例混合后，置于KDL-SPECIAL型介质搅拌磨中混合搅拌，工作条件设定：磨介质为棒状或球状，磨介质直径为0.5~1.0mm，磨介质充填率为70~80%，磨介质物料比为4~5，搅拌圆盘转速为1800~2200r/min，搅拌时间为1.0~2.0min。

所述磨介质优选为棒状。

步骤D所述的混配均匀后，药物组合物的粒径为4~12μm。

步骤D所述的混配均匀后，药物组合物中粒径为4~12μm的细粉的比例为92~96%。

本发明所述药物组合物的制剂由龙血树叶、石斛药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、贴膜剂、干粉吸入剂、口服控释片或注射剂。

所述药物组合物可用于制备治疗乳腺增生、糖尿病的药物。

实施例1

——所述药物组合物的制备

A、预处理：取剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis（Lour.) S. C. Chen）的叶子10kg、铁皮石斛（Dendrobium candidum）10kg，将其中的杂物剔除，经净选后用流水漂洗，再置于阳光下晾晒，自然气干至含水率不再变化，然后将剑叶龙血树叶及铁皮石斛置于RXH型热风循环干燥机中，干燥至含水率≤3%备用。

B、粗粉碎：将剑叶龙血树叶、铁皮石斛分别用Circoplex分级研磨机粉碎，剑叶龙血树叶粗粉过110目筛备用，铁皮石斛粗粉过130目筛备用。

C、超微粉碎：将剑叶龙血树叶粗粉用TC-20型流化床超音速气流粉碎机粉碎，工作条件设定：进料量为1.0kg，耗气量为1.1m³/min，进气压力为0.9MPa，分级机转速为反转2600r/min，粉碎后剑叶龙血树叶超微细粉中粒径为10~15μm的细粉的比例为94%。

将铁皮石斛粗粉用ZM-2型高频振动磨粉碎，工作条件设定为：磨介质为棒状，磨介质直径为0.5mm，磨介质充填率为50%，磨介质物料比为4.5，粉碎时间为1.8h，粉碎后铁皮石斛超微细粉中粒径为6~12μm的细粉的比例为90%.。

D、混配：将按重量计的剑叶龙血树叶超微细粉50份与铁皮石斛超微细粉50份混合，置于KDL-SPECIAL型介质搅拌磨中混合搅拌，工作条件设定：磨介质为球状，磨介质直径为0.5mm，磨介质充填率为75%，磨介质物料比为4.5，搅拌圆盘转速为2000r/min，搅拌时间为1.5min。混配均匀后，药物组合物中粒径为4~12μm的细粉的比例为93%。

实施例2

——抑制乳腺增生作用药理实验

实验材料：

（1）实验药品：实施例1制备的本发明所述药物组合物、龙血树叶粉、石斛粉、按重量比1:2、1:3、3:1、2:1混配而成的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物、乳癖散结胶囊、苯甲酸雌二醇注射液、黄体酮注射液、肝素钠、10%甲醛溶液、石蜡。其中，龙血树叶粉是按照《云南省中药饮片标准》（云YPBZ-0196-2013）所规定的质量标准进行制备和质检的，石斛粉是按照《中国药典》（2010年版）所规定的质量标准进行制备和质检的。乳癖散结胶囊购自江西德上制药有限公司、苯甲酸雌二醇注射液购自天津东大化工集团、黄体酮注射液购自上海通用药业、肝素钠购自武汉大华伟业医药化工有限公司。

（2）实验对象：成年雌性未孕Wistar豚鼠80只，体重190±10g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供（合格证书：医动字第3676494号）

（3）实验设备：ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析系统。

实验方法：

（1）分组及造模

实验豚鼠80只，随机分为10组，即正常对照组、模型对照组、乳癖散结胶囊组、龙血树叶粉组，石斛粉组，本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组。除正常对照组外，每只豚鼠后肢肌肉注射苯甲酸雌二醇注射液0.3 mg.kg^-1.d^-1，共30 d，改用黄体酮注射液4 mg.kg^-1.d ^-1肌肉注射，共5d。

（2）治疗

开始造模5d后，正常对照组和模型对照组给予0.9％氯化钠溶液5ml灌胃，乳癖散结胶囊组的给药剂量为0.53g.kg ^-1（相当于成人临床拟用剂量的5倍），龙血树叶粉组，石斛粉组，本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组的给药剂量为0.53 g.kg^-1 （分别相当于成人临床拟用剂量的5倍）。用药前取乳癖散结胶囊去除胶囊外壳，按用药剂量用0.9％氯化钠溶液5ml调匀灌胃给药，每天1次，共30 d。龙血树叶粉组，石斛粉组，本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组也是按用药剂量用0.9％氯化钠溶液5ml调匀灌胃给药，每天1次，共30d。

（3）检测指标

分别于末次给药24h后，断头处死受试豚鼠，通过腹主动脉取血约3ml，肝素钠抗凝，采用化学发光法测定血清雌二醇（E₂）及孕酮（P）含量。用游标卡尺测定各组豚鼠前第二对左乳头直径及乳头高度。同时取下第二对乳房组织，用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋切片，HE染色，做光镜观察。

（4）数据处理

实验数据用x±s表示，组间比较采用t检验。

实验结果：

（1）对乳腺增生豚鼠乳头直径及高度变化的影响

表1 不同药物对豚鼠乳头直径及乳头高度的变化（x±s）（n=8）

注：与模型对照组比较， *P<0.01

由表1的实验结果可知，造模后豚鼠乳腺直径及乳头高度均比正常对照组显著增大。乳癖散结胶囊组、龙血树叶粉组、石斛粉组、本发明所述药物组合物组及不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组，给药后豚鼠乳腺直径及乳头高度均比模型对照组显著减小，P<0.01。然而，本发明所述药物组合物组的效果最为明显，较其它给药组能显著减小乳腺直径及乳头高度。

（2）对乳腺增生豚鼠血清雌二醇（E₂）及孕酮（P）含量的影响

表2 不同药物对乳腺增生豚鼠血清性激素水平的影响（x±s）（n=8）

注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P <0.01

由表2的实验结果可知，模型对照组豚鼠的血清E₂、P水平比正常对照组显著增加。乳癖散结胶囊组、龙血树叶粉组，石斛粉组、本发明所述药物组合物组及不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组，在给药后豚鼠的血清E₂、P水平显著降低。其中，本发明所述药物组合物的效果最为显著，能充分抑制由苯甲酸雌二醇和黄体酮引起的乳腺增生豚鼠血清E₂、P水平的升高。

（3）病理组织学观察

空白对照组乳腺小叶散在分布，无腺泡增多、腺上皮层次增加、腺泡扩张、分泌等小叶增生现象；亦无导管上皮增生、组织变性坏死、炎细胞浸润等病理改变。模型对照组腺泡数量增多，小叶明显增多增大，导管数目增多，导管上皮增生，小叶间及导管周围纤维结缔组织增生。乳癖散结胶囊组、龙血树叶粉组、石斛粉组、本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组的小叶较模型对照组均明显缩小，腺泡腔和腺导管腔扩张不明显，接近空白对照组，其中，本发明所述药物组合物组的抗乳腺增生效果最为显著。

实施例3

——降血糖作用药理实验

实验材料：

（1）实验药品：实施例1制备的本发明所述药物组合物、龙血树叶粉、石斛粉、按重量比1:2、1:3、3:1、2:1混配而成的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物、链脲佐菌素、柠檬酸、柠檬酸钠、二甲双胍、高脂高糖饲料（10%蔗糖、10%猪油、10%蛋黄粉、0.5%胆固醇）、TC、TG测定试剂盒、LDLC、HDLC、MDA、SOD测定试剂盒、葡萄糖测定试剂盒、10%甲醛溶液、石蜡。其中，龙血树叶粉是按照《云南省中药饮片标准》（云YPBZ-0196-2013）所规定的质量标准进行制备和质检的，石斛粉是按照《中国药典》（2010年版）所规定的质量标准进行制备和质检的。链脲佐菌素购自北京天恩泽生物公司、柠檬酸、柠檬酸钠均为分析纯，分别购自昆明尚建公司和河南金海化工、二甲双胍购自湖南康宝泰精细化工。

（2）实验对象：动物及饲料健康清洁级雄性SD大鼠，体重200±20g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供（合格证号：01-3001）。

（3）实验设备：紫外可见分光光度计（Ultrospec 3300pro 型，Amersham 公司）、台式低速离心机（80－2B 型，上海安亭科学仪器厂）、半自动生化仪（738Plus 型，上海安泰分析仪器有限公司）。

实验方法：

（1）造模

实验性糖尿病大鼠模型的制备除正常组大鼠喂养普通饲料，其余大鼠喂养高脂高糖饲料1个月后，禁食不禁水12h，尾静脉注射链脲佐菌素40mg/kg，10天后测空腹血糖，血糖＞11.1mmol/L的纳入糖尿病大鼠。

（2）分组及处理

取未造模大鼠作为正常对照组，糖尿病造模成功大鼠按血糖、体重随机分为实验性糖尿病模型对照组、龙血树叶粉组，石斛粉组，本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组及二甲双胍组，每组10只大鼠。正常对照组及模型对照组给予等量生理盐水灌胃，龙血树叶粉组、石斛粉组、本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组的给药量为20g/kg，二甲双胍组的给药量为150mg/kg，每日给药1次，连续2周。

（3）空腹血糖测定

于给药前，给药第3天、第7天、第14天测血糖。测血糖当天禁食2h，给药，继续禁食1h 后剪尾取全血，以3500r/min的转速离心10min，取上清液检测血糖。具体操作按葡萄糖测定试剂盒说明书进行，用半自动生化仪测定。

（4）指标测定方法

于给药后第14天，禁食12h，眼眶取血，以3500r/min的转速离心10min，取血清按各试剂盒说明书进行测定。

（5）肝脏切片形态学观察

将大鼠处死，取新鲜肝脏，浸泡于10%甲醛溶液，石蜡包埋，切片染色观察。

（6）数据处理

实验数据用x±s表示，组间比较采用t检验。

实验结果：

（1）对实验性糖尿病大鼠空腹血糖的影响

表3 不同药物对实验性糖尿病大鼠空腹血糖的影响（n=10）

由表3的实验结果可知，与正常对照组比较，糖尿病模型大鼠空腹血糖均显著升高。连续给药3、7、14天后测定，与糖尿病模型对照组比较，龙血树叶粉组、石斛粉组、本发明所述药物组合物组、不同重量比的龙血树叶粉：石斛粉药物组合物（1：2、1：3、3:1、2:1）组的空腹血糖均有不同程度的下降。其中，连续给药7、14天后，本发明所述药物组合物组的血糖下降率达到最大值，效果最为显著。

（2）对实验性糖尿病大鼠血脂的影响

表4 不同药物对实验性糖尿病大鼠血清TC、TG、HDLC及LDLC的影响（n=10）

由表4的实验结果可知，与正常对照组比较，糖尿病模型大鼠血清TC、TG、LDLC含量均显著提高，HDLC显著下降。与糖尿病模型对照组比较，本发明所述药物组合物组能显著降低糖尿病模型大鼠的血清TC、TG、LDLC含量，同时提高血清HDLC含量，优于二甲双胍组的降脂效果。

（3）对实验性糖尿病大鼠血清MDA、SOD的影响

表5 不同药物对实验性糖尿病大鼠血清MDA、SOD的影响（n=10）

由表5的实验结果可知，与正常对照组比较，糖尿病模型大鼠血清MDA含量显著提高，血清SOD活力无显著性差异。与糖尿病模型对照组比较，本发明所述药物组合物组能明显降低糖尿病模型大鼠的血清MDA含量，并能显著增强糖尿病大鼠的血清SOD 活力。

Claims

1.一种龙血树叶、石斛药物组合物在制备降低血清中雌二醇和黄体酮含量的药物中的应用，其特征在于所述药物组合物由按重量计的粒径为10~15μm龙血树叶超微细粉45~55份和粒径为6~12μm石斛超微细粉45~55份制成。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于龙血树叶、石斛药物组合物制备方法包括预处理、粗粉碎、超微粉碎及混配工序，具体包括：

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的龙血树叶为剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis（Lour.) S. C. Chen）或海南龙血树（Dracaena cambodiana Pierre exGagnep）中任一种的叶子。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的石斛为铁皮石斛（Dendrobium candidum）、粉花石斛（Dendrobium loddigesii）、金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl）、流苏石斛（Dendrobium finbriatum Hook）或鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum Lindl.）中的任一种。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于步骤C所述的将龙血树叶粗粉用气流粉碎机粉碎，气流粉碎机为TC-20型流化床超音速气流粉碎机，工作条件设定：进料量为0.8~1.2kg，耗气量为1.0~1.2m³/min，进气压力为0.8~1.0MPa，分级机转速为反转2400~2800r/min；将石斛粗粉用振动磨粉碎，振动磨为ZM-2型高频振动磨，工作条件设定：磨介质为棒状或球状，磨介质直径为0.3~0.5mm，磨介质充填率为45~55%，磨介质物料体积比为4~5:1，粉碎时间为1.5~2.0h。

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于步骤D所述的混配均匀指的是将龙血树叶超微细粉及石斛超微细粉按配方比例混合后，置于介质搅拌磨中混合搅拌1.0~2.0min。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于龙血树叶、石斛药物组合物的制剂由龙血树叶、石斛药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、贴膜剂、干粉吸入剂或注射剂。