CN103750023A - 一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 - Google Patents
一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103750023A CN103750023A CN201310739811.9A CN201310739811A CN103750023A CN 103750023 A CN103750023 A CN 103750023A CN 201310739811 A CN201310739811 A CN 201310739811A CN 103750023 A CN103750023 A CN 103750023A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- beta
- parts
- glucanase
- enzyme
- temperature
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法,属于饲料酶制剂领域。所述乳仔猪专用复合酶由以下重量份数的组分组成:中草药粉剂5-20份,木聚糖酶800-1200份,纤维素酶80-120份,β-葡聚糖酶200-250份,甘露聚糖酶15-25,蛋白酶800-1200,中温α-淀粉酶50-100份。其中β-葡聚糖酶产自地衣芽孢杆菌(Βacillus licheniformis)β-10-25,保藏编号CCTCC NO:M2013538,采用低温培养基补入和分批接种相结合的发酵方法制备。所得复合酶能有效补充乳仔猪消化道蛋白酶、淀粉酶等内源酶的不足,提高乳仔猪对饲料的消化利用率,防止营养性腹泻的产生。
Description
技术领域
本发明属于酶制剂技术领域,具体涉及一种乳仔猪专用复合酶及其制备方法。
背景技术
在畜牧业中,乳仔猪饲养是所有阶段猪中最复杂的。营养供给不合理的后果是猪生长缓慢,腹泻率高,死亡率高,进而使中大猪阶段生长缓慢,延长出栏时间。
但是,为了切断母源疾病的垂直传播途径,同时缩短母猪繁殖周期,延长种用年限,人们将早期断奶技术广泛的应用于猪的大规模养殖工业中。然而由于新生仔猪缺乏先天免疫、消化系统发育尚不完善,消化酶分泌能力弱,直接供给以玉米等为主的饲料很容易引起猪仔对饲料的消化率低、采食量低、生长速度缓慢、腹泻率高等问题。
为了克服乳猪在断奶后所出现的种种问题,多数企业从断奶前补饲、诱食、日粮酸化、使用适口性好且易消化吸收的饲料原料、添加外源酶、降低日粮的抗原性、降低日粮的粗蛋白含量以及使用促进剂等多个方面进行了改善和优化,但实际效果参差不齐。
考虑到仔猪在断奶时,其自身的蛋白酶、淀粉酶等酶活应激而大幅下降到断奶时的三分之一,而这些酶类对于仔猪获取营养和能量起着至关重要的作用。同时,饲料用酶在畜禽生产中具有不俗的效果,比如前苏联科学家在早期断奶仔猪日粮中添加淀粉糊精酶,使得日增重提高14.6%,碳水化合物消化率提高77.2%。据美国有关资料报道,Collier在早期断奶仔猪日粮中补充酶制剂(含蛋白酶、淀粉酶、葡聚糖酶),结果实验组比对照组日增重提高了25%,饲料转化率提高了15.5%。
添加酶制剂能补充蛋白酶和淀粉酶,是辅助分解日粮中的蛋白和淀粉,降解日粮中的抗营养因子,并能有效分解玉米/豆粕型日粮中的植物细胞壁,使细胞内的营养物质如淀粉、蛋白质等释放出来。同时分解可溶性纤维,降低植物纤维物质的吸水能力和肠道内容物的粘度。另外,大量的生产实践和科学实验也证明了中草药具有很多营养成分和生物活性物质,兼有药性和营养性的双重作用,既可以防病又可以提高生产性能。因此,我们经过多次饲喂实验,研制出了一种乳仔猪专用复合酶,其能有效地提高饲料的利用率、降低腹泻率、促进动物生长,针对性强,效果好,经济效益显著。
发明内容
本发明的目的在于提供一种酶活力高、抗腹泻效果显著的乳仔猪专用复合酶及其制备方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现:
一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,由以下重量份数的组分组成:中草药粉剂5-20份,木聚糖酶800-1200份,纤维素酶80-120份,β-葡聚糖酶200-250份,甘露聚糖酶15-25,蛋白酶800-1200,中温α-淀粉酶50-100份。
所述木聚糖酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、蛋白酶和中温α-淀粉酶均为湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司或其他现有产品;
所述中草药粉剂的制备方法如下:
称取黄芪20-30份;党参10-18份;柴胡10-15份;麦冬10-15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃~90℃保持2~4h,然后降温至45-60℃,加入混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,110W功率下超声萃取0.5~1.5h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂;
所述混合酶添加量为混合物料总重量的5-10%;
所述混合酶的重量份数组成为:β-葡萄糖苷酶10-15份,木聚糖酶15-20份,戊聚糖酶15-20份,普鲁兰酶20-30份,β-淀粉酶10-15份,果胶酶10-15份,酸性蛋白酶10-15份,木瓜蛋白酶5-10份,葡萄糖氧化酶5-10份,酸性磷酸酶5-10份;
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1-1.5。
所述β-葡聚糖酶制备方法如下:
(1)种子培养
将地衣芽孢杆菌斜面菌种经三级摇瓶发酵及一级种子罐发酵;
所述种子培养的培养基为:酵母粉0.5%,蛋白胨1%,可溶性淀粉1%,NaCl1%,pH4.5-7.0,121-123℃灭菌30-40min。
(2)发酵罐发酵
将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中,培养温度35-45℃,搅拌速度200-300r/min,通风量(V/V)1:1-3,培养时间10-15h;然后将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养15-20h;此时,将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐,恒温培养10-15h;继续将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养10-15h;
所述发酵培养基组成为:麦麸75g,玉米粉55g,米糠25g,豆饼粉20g,β-葡聚糖2g,中草药剂粉40g,海藻糖35g,酵母粉6g,玉米浆3g,硫酸铵2g,磷酸氢二钾2g,磷酸二氢钾2g,柠檬酸钠3g,消泡剂0.5g,纯净水l000mL,pH值4.5-7.0,121℃灭菌20min;
所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料,将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中,调节PH值3-7,加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉),同时边搅拌边升温至70℃保温15-30min,然后缓慢升温至90℃保温15-30min进行液化,最后加入其它原料,搅拌均匀,调初始PH3-7,121-123℃灭菌30-40min备用。
溶解氧控制:通过调整搅拌转速及通风量,控制溶解氧15-30%;
PH控制:通过补氨水或稀磷酸,控制发酵过程中pH值保持在3-7;
补料控制:当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml时,开始添加补料培养基,补料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml-5mg/ml;
放罐标准:60-80%菌体衰老自溶,酶活力增长缓慢。
(3)发酵液经过滤、浓缩、精滤、干燥得β-葡聚糖酶。
所述地衣芽孢杆菌具体为地衣芽孢杆菌(Βacillus licheniformis)β-10-25。该菌株已于2013年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC,地址为:湖北省武汉市武昌区珞珈山武汉大学生命科学学院),保藏号为CCTCC NO:M2013538。
该菌株特点如下:
所述菌株在固体平板上菌落为白色,边缘不整齐,表面干燥不透明,镜检为革兰氏阳性细菌,细胞形态呈短杆状,芽孢中生,椭圆形,不膨大。
所述菌株生理生化特征:V-P试验(+),淀粉水解(+),酪素水解(+),明胶水解(+),硝酸盐还原(+),吲哚试验(-),利用柠檬酸盐(+),硝酸还原(+),甘露醇(+),木糖(+)。
优选的,一种乳仔猪专用复合酶按如下重量份数组成:中草药粉剂10份,木聚糖酶1000份,纤维素酶100份,β-葡聚糖酶220份,甘露聚糖酶20份,蛋白酶1000份,中温α-淀粉酶75份。
所述乳仔猪专用复合酶适用于饲料加工厂和养殖场自配饲料,使用时应与饲料中的其它原料混合均匀,可事先将本发明与少量饲料混合均匀,再混合到大批饲料中,直接饲喂。建议每吨全价料添加量为80-120g。
有益效果:
1、本发明根据乳仔猪消化生理特点,并经过动物实验筛选复合配方,设置复合酶酶谱,有效补充乳仔猪消化道蛋白酶、淀粉酶等内源酶的不足,有效提高乳仔猪对饲料的消化利用率,防止营养性腹泻的产生。
2、针对玉米、豆粕等植物性饲料原料抗营养因子的特点,合理添加非淀粉多糖类酶制剂,高效降解饲料中的抗营养因子。并且本发明所使用β-葡聚糖酶酶活力高、作用条件宽泛、热稳定性强、适于工业化生产。
3、采用专为饲用酶开发的微生物菌株生产的酶制剂,动物适应性好,生物学效价高,在动物体温(37-40℃)和消化道较宽的pH范围内能发挥较高活性。
4、本发明中添加了中草药粉剂,其具有天然抗菌和增强免疫力的作用,可以有效的提乳仔猪的抗应激能力、免疫功能以及抗病防御机能。另外,中草药粉剂中添加了具有抗热应激原作用的黄芩、柴胡,使得本发明产品具有更好的稳定性和保存活性,较没有添加中草药粉剂的产品在长时间高温条件下的保存活性提高了15%。
5、本发明所添加的β-葡聚糖酶酶活力高达8000-10000u/ml,是原始菌株的2.5倍;在50-70℃条件下具有较高酶活,最适反应温度为65℃;适用反应pH值范围为5.0;在室温下保存6个月后酶活损失小于25%,4℃保存12个月后酶活损失小于20%。比现有的β-葡聚糖酶酶活力高,酶作用最适pH值范围宽泛,热稳定性及储存稳定性均较高,特别适合应用于饲料酶制剂领域。
具体实施方式
实施例1中草药粉剂的制备方法
一种中草药粉剂的制备方法如下:
称取黄芪25份;党参15份;柴胡12份;麦冬12份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加5倍重量的水,控制温度80℃保持3h,然后降温至50℃,加入混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为6,酶解3h,最后添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物,11W超声萃取1h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂。
所述混合酶添加量为混合物料总重量的8%。
所述混合酶的重量份数组成为:β-葡萄糖苷酶12份,木聚糖酶18份,戊聚糖酶18份,普鲁兰酶25份,β-淀粉酶18份,果胶酶12份,酸性蛋白酶12份,木瓜蛋白酶8份,葡萄糖氧化酶8份,酸性磷酸酶8份。
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1.2。
实施例2一种β-葡聚糖酶的制备方法
一种β-葡聚糖酶的制备方法,包括如下步骤:
(1)液体种子扩大培养
①一级种子培养:将活化后的斜面菌种2环接入500毫升摇瓶中,培养基装量100毫升,旋转式摇床180转/分,培养温度40℃,培养时间10h;
②二级种子培养:将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,培养条件与一级种子相同;
③三级种子培养:将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,培养基装量1000毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度40℃,培养时间12h;
④一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度41℃,搅拌速度300rpm,通风量(V/V)1:1.5,罐压0.05Mpa,培养时间15h;
所述种子培养基重量组成为:酵母粉0.5%,蛋白胨1%,可溶性淀粉1%,NaCl1%,pH5.5,121℃灭菌35min。
(2)发酵罐发酵
将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中,培养温度37℃,搅拌速度250r/min,通风量(V/V)1:1-3,培养时间12h;然后将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至37℃时恒温培养18h;此时,将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐,恒温培养12h;继续将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至37℃时恒温培养12h;
所述发酵培养基组成为:麦麸75g,玉米粉55g,米糠25g,豆饼粉20g,β-葡聚糖2g,中草药剂粉40g,海藻糖35g,酵母粉6g,玉米浆3g,硫酸铵2g,磷酸氢二钾2g,磷酸二氢钾2g,柠檬酸钠3g,消泡剂0.5g,纯净水l000mL,pH值5.5,121℃灭菌20min;
所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料,将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中,调节PH值5.5,加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉),同时边搅拌边升温至70℃保温20min,然后缓慢升温至90℃保温20min进行液化,最后加入其它原料,搅拌均匀,调初始PH5.5,121℃灭菌35min备用。
所述中草药粉剂的制备方法如实施例1.
(3)发酵液经过滤、浓缩、精滤、干燥得β-葡聚糖酶。
经上述制备方法得到的β-葡聚糖酶液体酶活力为10000u/ml。
实施例3一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶的制备方法
一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,由以下重量份数的酶制剂组成:
中草药粉剂10份,木聚糖酶1000份,纤维素酶100份,β-葡聚糖酶220份,甘露聚糖酶20份,蛋白酶1000份,中温α-淀粉酶75份。
按上述重量份数取产自湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司的木聚糖酶,纤维素酶,甘露聚糖酶,中温α-淀粉酶,蛋白酶,以及实施例1所得的中草药粉剂,实施例2所得的β-葡聚糖酶于25℃条件下在混合机中搅拌均匀,搅拌时间为5分钟。搅拌均匀装箱后于常温或冷室中保存。
实施例4一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶的制备方法
一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,由以下重量份数的酶制剂组成:
中草药粉剂5份,木聚糖酶800份,纤维素酶80份,β-葡聚糖酶250份,甘露聚糖酶15份,蛋白酶800份,中温α-淀粉酶100份。
按上述重量份数取产自湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司的木聚糖酶,纤维素酶,甘露聚糖酶,中温α-淀粉酶,蛋白酶,以及实施例1所得的中草药粉剂,实施例2所提的β-葡聚糖酶于25℃条件下在混合机中搅拌均匀,搅拌时间为5分钟。搅拌均匀装箱后于常温或冷室中保存。
实施例5一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶的制备方法
一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,由以下重量份数的酶制剂组成:
中草药粉剂20份,木聚糖酶1200份,纤维素酶120份,β-葡聚糖酶200份,甘露聚糖酶25份,蛋白酶1200份,中温α-淀粉酶50份。
按上述重量份数取产自湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司的木聚糖酶,纤维素酶,甘露聚糖酶,中温α-淀粉酶,蛋白酶,以及实施例1所得的中草药粉剂,实施例2所提的β-葡聚糖酶于25℃条件下在混合机中搅拌均匀,搅拌时间为5分钟。搅拌均匀装箱后于常温或冷室中保存。
实施例6效果对比实验
选取120头断奶仔猪,按体重、血统及性别无差异分为实验组和对照组,每组3个重复,每个重复20头猪。实验期为28天,实验组每吨饲料添加本实施例2所述复合酶制剂120g,对照组不添加复合酶制剂,于试验期的始末日早晨空腹称重,计算日增重、料肉比、腹泻率和死淘率。实验结果如下表所示:
日增重 | 料肉比 | 腹泻率 | 死淘率 |
对照组 | 236.57g | 1.48 | 16.7% | 5% |
实验组 | 325.71g | 1.38 | 3.3% | 0 |
实施例7效果对比
选取120头断奶仔猪,按体重、血统及性别无差异分为实验组和对照组,每组3个重复,每个重复20头猪。实验期为28天,实验组和对照组每吨饲料均添加复合酶制剂120g,实验组所用复合酶制剂为实施例2所述复合酶制剂,对照组所用复合酶制剂是将实施例2中所添加的β-葡聚糖酶替换为市售β-葡聚糖酶,于试验期的始末日早晨空腹称重,计算日增重、料肉比腹泻率和死淘率。实验结果如下表所示:
日增重 | 料肉比 | 腹泻率 | 死淘率 | |
对照组 | 278.57g | 1.43 | 10% | 2.5% |
实验组 | 325.71g | 1.38 | 3.3% | 0 |
以上实验结果表明,使用本发明技术生产的乳仔猪专用复合酶能够有效的减少乳仔猪断奶后腹泻的发生率,提高乳仔猪的生长速度和饲料利用率,是一种理想的饲料复合酶。
实施例8中草药粉剂对酶保存活性的影响
以实施例2中所述的制备方法获得的乳仔猪专用复合酶为样品1,以去除实施例2中所有的中草药粉剂的制备方法获得的乳仔猪专用复合酶为样品2,比较两种样品的保存活性。在45℃下保存上述样品18h,之后测定酶活,结果表明:样品1的残余酶活在75%以上,样品2的残余酶活保持在60%左右。
Claims (8)
1.一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,由以下重量份数的组分组成:中草药粉剂5-20份,木聚糖酶800-1200份,纤维素酶80-120份,β-葡聚糖酶200-250份,甘露聚糖酶15-25,蛋白酶800-1200,中温α-淀粉酶50-100份;
所述β-葡聚糖酶由地衣芽孢杆菌(Βacillus licheniformis)β-10-25经生物发酵制的,所述菌株保藏编号为CCTCC NO:M2013538。
2.如权利要求1所述一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,其特征在于,所述中草药粉剂的制备方法如下:
称取黄芪20-30份;党参10-18份;柴胡10-15份;麦冬10-15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃~90℃保持2~4h,然后降温至45-60℃,加入混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,110W功率下超声萃取0.5~1.5h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂。
3.如权利要求2所述的一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,其特征在于,所述混合酶制剂组成如下:β-葡萄糖苷酶10-15份,木聚糖酶15-20份,戊聚糖酶15-20份,普鲁兰酶20-30份,β-淀粉酶10-15份,果胶酶10-15份,酸性蛋白酶10-15份,木瓜蛋白酶5-10份,葡萄糖氧化酶5-10份,酸性磷酸酶5-10份。
4.如权利要求1所述一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,其特征在于,β-葡聚糖酶的制备方法,包括如下步骤:
地衣芽孢杆菌β-10-25经斜面菌种活化培养后进行一、二、三级液体种子和种子罐培养;将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中,培养温度35-45℃,搅拌速度200-300r/min,通风量(V/V)1:1-3,培养时间10-15h;然后将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养15-20h;此时,将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐,恒温培养10-15h;继续将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养10-15h;
发酵液经过滤、浓缩、精滤、干燥得β-葡聚糖酶。
5.如权利要求4所述的一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,其特征在于,所述种子培养的培养基为:酵母粉0.5%,蛋白胨1%,可溶性淀粉1%,NaCl1%,pH4.5-7.0;
所述发酵培养基组成为:麦麸75g,玉米粉55g,米糠25g,豆饼粉20g,β-葡聚糖2g,中草药剂粉40g,海藻糖35g,酵母粉6g,玉米浆3g,硫酸铵2g,磷酸氢二钾2g,磷酸二氢钾2g,柠檬酸钠3g,消泡剂0.5g,纯净水l000mL,pH值4.5-7.0,121℃灭菌20min;
所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料,将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中,调节PH值3-7,加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉),同时边搅拌边升温至70℃保温15-30min,然后缓慢升温至90℃保温15-30min进行液化,最后加入其它原料,搅拌均匀,pH3-7。
6.一种制备如权利要求1所述的含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶的方法,包括如下步骤:
按照原料组成将中草药粉剂,木聚糖酶,纤维素酶,β-葡聚糖酶,甘露聚糖酶,蛋白酶,中温α-淀粉酶混合均匀即可;
所述木聚糖酶,纤维素酶,甘露聚糖酶,蛋白酶,中温α-淀粉酶为湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司或其他现有产品;
所述中草药粉剂的制备方法如下:
称取黄芪20-30份;党参10-18份;柴胡10-15份;麦冬10-15份;分别将上述中草药粉碎至粒径为2毫米以下,然后于容器中均匀混合并添加3-6倍重量的水,控制温度70℃~90℃保持2~4h,然后降温至45-60℃,加入混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5-6.8,酶解2-4h,最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物,110W功率下超声萃取0.5~1.5h,过滤;滤液真空浓缩后冷冻干燥获得中草药粉剂;
所述混合酶添加量为混合物料总重量的5-10%;
所述混合酶的重量份数组成为:β-葡萄糖苷酶10-15份,木聚糖酶15-20份,戊聚糖酶15-20份,普鲁兰酶20-30份,β-淀粉酶10-15份,果胶酶10-15份,酸性蛋白酶10-15份,木瓜蛋白酶5-10份,葡萄糖氧化酶5-10份,酸性磷酸酶5-10份;
所述乙醇和丙醇的质量比例为1:1-1.5;
所述β-葡聚糖酶制备方法如下:
(1)种子培养
将地衣芽孢杆菌β-10-25斜面菌种经三级摇瓶发酵及一级种子罐发酵;
所述种子培养的培养基为酵母粉0.5%,蛋白胨1%,可溶性淀粉1%,NaCl1%,pH4.5-7.0,121-123℃灭菌30-40min;
(2)发酵罐发酵
将一级种子罐发酵液以3%接种量接入含有3L发酵培养基的发酵罐中,培养温度35-45℃,搅拌速度200-300r/min,通风量(V/V)1:1-3,培养时间10-15h;然后将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养15-20h;此时,将一级种子罐发酵液以2%接种量追加接入发酵罐,恒温培养10-15h;继续将1L经过121℃灭菌20min,温度为10℃的发酵培养基补入发酵罐,待温度升至35-45℃时恒温培养10-15h;
所述发酵培养基组成为:麦麸75g,玉米粉55g,米糠25g,豆饼粉20g,β-葡聚糖2g,中草药剂粉40g,海藻糖35g,酵母粉6g,玉米浆3g,硫酸铵2g,磷酸氢二钾2g,磷酸二氢钾2g,柠檬酸钠3g,消泡剂0.5g,纯净水l000mL,pH值4.5-7.0,121℃灭菌20min;
所述发酵培养基的调配方法为:按比例准确称取原料,将原料中的纯净水、玉米粉、豆饼粉投入配料罐中,调节PH值3-7,加入中温淀粉酶(3u/g玉米粉)与高温淀粉酶(30u/g玉米粉),同时边搅拌边升温至70℃保温15-30min,然后缓慢升温至90℃保温15-30min进行液化,最后加入其它原料,搅拌均匀,调初始PH3-7,121-123℃灭菌30-40min备用;
溶解氧控制:通过调整搅拌转速及通风量,控制溶解氧15-30%;
PH控制:通过补氨水或稀磷酸,控制发酵过程中pH值保持在3-7;
补料控制:当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml时,开始添加补料培养基,补料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml-5mg/ml;
放罐标准:60-80%菌体衰老自溶,酶活力增长缓慢;
(3)发酵液经过滤、浓缩、精滤、干燥得β-葡聚糖酶。
7.如权利要求1所述的一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶,其特征在于:所述复合酶由以下重量份数的酶制剂组成:中草药粉剂10份,木聚糖酶1000份,纤维素酶100份,β-葡聚糖酶220份,甘露聚糖酶20份,蛋白酶1000份,中温α-淀粉酶75份。
8.如权利要求1所述的一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶在畜禽饲养中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310739811.9A CN103750023B (zh) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310739811.9A CN103750023B (zh) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103750023A true CN103750023A (zh) | 2014-04-30 |
CN103750023B CN103750023B (zh) | 2015-07-15 |
Family
ID=50517478
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310739811.9A Active CN103750023B (zh) | 2013-12-27 | 2013-12-27 | 一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103750023B (zh) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105053574A (zh) * | 2015-07-24 | 2015-11-18 | 河南仰韶生化工程有限公司 | 一种含有多种生物酶的混合饲料添加剂及其生产方法 |
CN110628747A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-31 | 广东溢多利生物科技股份有限公司 | 一种组合淀粉酶及其应用 |
CN111304185A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-19 | 江苏悠恒生物技术有限公司 | 一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法 |
CN114601058A (zh) * | 2022-04-09 | 2022-06-10 | 河南宏展生物科技有限公司 | 乳仔猪浓缩饲料、全价日粮及其制备方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101999560A (zh) * | 2010-12-28 | 2011-04-06 | 通威股份有限公司 | 一种低系酸力乳仔猪饲料及其制备方法 |
CN103053857A (zh) * | 2013-01-31 | 2013-04-24 | 福州正阳饲料有限公司 | 一种乳猪教槽料配合饲料及其制备方法 |
CN103141710A (zh) * | 2013-04-02 | 2013-06-12 | 山东新希望六和集团有限公司 | 一种断奶仔猪配合饲料及其制备方法 |
CN103229914A (zh) * | 2013-05-29 | 2013-08-07 | 河南牧鹤(集团)饲料有限公司 | 一种新型乳猪生物饲料及其制备方法 |
CN103404830A (zh) * | 2013-08-01 | 2013-11-27 | 宁夏红山河食品有限公司 | 一种火锅底料及其制备方法 |
CN103409347A (zh) * | 2013-07-25 | 2013-11-27 | 山东隆科特酶制剂有限公司 | 一种产碱性蛋白酶的菌株及其工业化液体发酵方法 |
-
2013
- 2013-12-27 CN CN201310739811.9A patent/CN103750023B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101999560A (zh) * | 2010-12-28 | 2011-04-06 | 通威股份有限公司 | 一种低系酸力乳仔猪饲料及其制备方法 |
CN103053857A (zh) * | 2013-01-31 | 2013-04-24 | 福州正阳饲料有限公司 | 一种乳猪教槽料配合饲料及其制备方法 |
CN103141710A (zh) * | 2013-04-02 | 2013-06-12 | 山东新希望六和集团有限公司 | 一种断奶仔猪配合饲料及其制备方法 |
CN103229914A (zh) * | 2013-05-29 | 2013-08-07 | 河南牧鹤(集团)饲料有限公司 | 一种新型乳猪生物饲料及其制备方法 |
CN103409347A (zh) * | 2013-07-25 | 2013-11-27 | 山东隆科特酶制剂有限公司 | 一种产碱性蛋白酶的菌株及其工业化液体发酵方法 |
CN103404830A (zh) * | 2013-08-01 | 2013-11-27 | 宁夏红山河食品有限公司 | 一种火锅底料及其制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
中国食品添加剂和配料协会: "《食品添加剂手册》", 30 September 2012, 中国轻工业出版社 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105053574A (zh) * | 2015-07-24 | 2015-11-18 | 河南仰韶生化工程有限公司 | 一种含有多种生物酶的混合饲料添加剂及其生产方法 |
CN110628747A (zh) * | 2019-08-30 | 2019-12-31 | 广东溢多利生物科技股份有限公司 | 一种组合淀粉酶及其应用 |
CN111304185A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-19 | 江苏悠恒生物技术有限公司 | 一种纯固态发酵的低温淀粉酶的生产方法 |
CN114601058A (zh) * | 2022-04-09 | 2022-06-10 | 河南宏展生物科技有限公司 | 乳仔猪浓缩饲料、全价日粮及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103750023B (zh) | 2015-07-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103667222B (zh) | 一种含饲用复合酶的生长猪专用酶及其制备方法 | |
CN103667221B (zh) | 一种含碱性木聚糖酶的乳仔猪专用酶及其制备方法 | |
CN103805582B (zh) | 一种含有β‑葡聚糖酶的生长猪专用酶及其制备方法 | |
CN103667220B (zh) | 一种含中性蛋白酶的生长猪专用酶及其制备方法 | |
CN103734481B (zh) | 一种含饲用复合酶的饲料复配酶及其制备方法 | |
CN103704486B (zh) | 一种含中性蛋白酶的禽用酶及其制备方法 | |
CN103766611B (zh) | 一种含中性蛋白酶的杂粮日粮酶及其制备方法 | |
CN103734480B (zh) | 一种可提高动物食欲的饲料复配酶及其制备方法 | |
CN105661008A (zh) | 苹果渣和棉粕混合发酵生产蛋白饲料的方法 | |
CN103750023B (zh) | 一种含有β-葡聚糖酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 | |
CN103749987B (zh) | 一种杂粮杂粕日粮酶制剂及其制备方法 | |
CN103859169A (zh) | 一种含中性蛋白酶的饲料复合酶及其制备方法 | |
CN103875935B (zh) | 一种含有益生菌的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 | |
CN103725661B (zh) | 一种含饲用复合酶的乳仔猪专用酶及其制备方法 | |
CN108029853A (zh) | 发酵菌液、包含其的应用于哺乳母猪的产品及产品的制备方法和应用 | |
CN103695396B (zh) | 一种高活力饲用复合酶 | |
CN103740683B (zh) | 一种含中性蛋白酶的小麦日粮酶及其制备方法 | |
CN103865904B (zh) | 一种含有益生菌的生长猪专用酶及其制备方法 | |
CN107897505B (zh) | 发酵菌液、包含其的用于保育猪的产品及产品的制备方法和应用 | |
CN103750011B (zh) | 一种含有纤维素酶的乳仔猪专用复合酶及其制备方法 | |
CN102010857A (zh) | 利用乳清粉生产酸性木聚糖酶的方法 | |
CN104054914A (zh) | 一种含有益生菌的小麦日粮酶及其制备方法 | |
CN103805583B (zh) | 一种含有β‑葡聚糖酶的小麦日粮酶及其制备方法 | |
CN103689241B (zh) | 一种高活力饲用复合酶的制备方法 | |
CN103725663B (zh) | 一种含碱性木聚糖酶的生长猪专用酶及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20200825 Address after: 044600 on the west side of Shanxi city of Yuncheng province Ruicheng County Yongle Road Development Zone (South Lido Hotel) Patentee after: SHANXI DAYU BIOENGINEERING Co.,Ltd. Address before: Jiashan Industrial District Tianjin city 415400 Hunan city of Changde Province Patentee before: HUNAN HONGYING BIOLOGICAL SCIENCE & TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
TR01 | Transfer of patent right |