CN103740604A - 一种葡萄有孢汉逊酵母菌及其应用 - Google Patents

一种葡萄有孢汉逊酵母菌及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum),菌株为Y68,保藏号为:CGMCC No.8042。本发明中的葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对桃、樱桃采后褐腐病菌、葡萄采后灰霉病菌、西红柿灰霉病、苹果采后灰霉病菌、苹果采后青霉病菌和梨采后青霉病菌具有抑制作用;对桃采后褐腐病、樱桃褐腐病、葡萄灰霉病、西红柿灰霉病、苹果采后灰霉病、梨采后青霉病、苹果采后青霉病具有抑制作用。葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68尤其对灰霉病菌的抑制作用非常明显,抑菌圈直径均在10mm以上。

Description

一种葡萄有孢汉逊酵母菌及其应用
技术领域
本发明涉及一种葡萄有孢汉逊酵母菌及其应用,属于微生物技术领域。
背景技术
植物真菌病害给农业生产带来了巨大的损失,而果实采后真菌病害是一类重要的病害,造成了果实的大量减产,严重影响了果实的食用价值和市场价值,导致了果农的经济收入降低。在发达国家,果实采后病害引起的损失量占果实总量的15%以上,在发展中国家由于缺少必要的防控技术和设备,果实采后病害引起的损失量占总量的30%甚至更高上。果实采后病害的发生已给现代农业生产尤其是高端果蔬产品生产与加工造成了严重影响。而目前,国内大多的研究多集中于果实的田间及园间防治,而对于果实采后病害的防治工作做的相对较少。
由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)病原菌引起的葡萄灰霉病目前在世界范围内都是葡萄的重要病害。在我国由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病是葡萄上的第一大病害,也是影响我国葡萄产业发展的重要因素。目前我国葡萄栽培面积已超过50万公顷,产量超过750万吨。在我国葡萄果树栽培面积位列世界前六,产量位居世界前五。葡萄灰霉病发于葡萄园间,但是引起果实减产和腐烂大多发生于果实采摘期间和采后贮藏期间。由于葡萄采后大多都需要远距离运输和长期贮藏,因此,对葡萄采后灰霉病的防控显得非常重要。而目前,国内对葡萄灰霉病能够有效防治的手段不多,即便是化学农药,有效的种类也不是很多。而葡萄作为人们桌上的经常食用的果实,对食品安全方面有着更高的要求。
由Monilinia spp.病原真菌引起的桃褐腐病目前在世界范围内都是桃子的第一大病害,也是影响桃产业发展的第一大问题。据统计,在发达国家如美国、以色列、意大利、法国等,采后褐腐病导致的损失量就占桃总产量的10%-30%;在发展中国家由于缺少必要的防治技术和相关设备其损失量达30%-50%,甚至更高;有些地区,桃褐腐病的大面积严重发生,几乎导致桃果实绝收。因此,对桃褐腐病的防治和控制显得迫切和重要。
目前生产中对葡萄灰霉病和桃褐腐病的防治仍然以化防为主,但由此带来的“3R”负面影响非常严重。化学农药的大量使用严重破坏了生态环境,导致果实中大量的农药残留,影响人们身体健康。生物防治,利用拮抗微生物防治病害,已成为病害综合防治的重要组成部分,是化学农药试剂应用最有前景的替代手段之一。
葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)在自然环境中普遍存在,主要存在于含糖量较为丰富的果实表面和花上。该菌生长速度快,营养简单,生长力强。在作为生防防治方面,它拥有自己独特的优势:1)该酵母菌对环境的污染较少,不产生毒素;2)该酵母菌不产生抗生素,对人类相对比较安全;3)相对于真菌而言,该酵母菌不产生致敏孢子;4)该酵母生长所需营养比较简单;5)该酵母适合商业化大规模生产;6)酵母菌细胞结构简单,基因组较小,比较容易在分子水平上进行操作。因此,它具有很好的应用前景。
葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)在自然界中分布十分广阔,而目前国内还未有防治葡萄灰霉病和桃褐腐病的葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum),菌株为Y68,保藏号为:CGMCC No.8042。
本发明的目的也在于提供一种病原菌抑制剂,其活性成分为上述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或上述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物。所述病原菌抑制剂对下述至少一种病原菌具有抑制作用:
A、桃采后褐腐病菌;
B、苹果采后灰霉病菌;
C、苹果采后青霉病菌;
D、葡萄采后灰霉病菌;
E、梨采后青霉病菌;
F、樱桃采后褐腐病菌;
G、西红柿灰霉病菌。
所述桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola或Monilinia laxa或Moniliniafructigena;所述苹果采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述苹果采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述葡萄采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述梨采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述西红柿灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述樱桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola。
本发明的目的还在于提供一种病害抑制剂,其活性成分为上述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或上述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物。
所述病害为下述至少一种:
A、桃褐腐病;
B、苹果采后灰霉病;
C、苹果采后青霉病;
D、葡萄灰霉病;
E、梨采后青霉病;
F、樱桃褐腐病;
G、西红柿灰霉病。
本发明的葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum),菌株号为Y68,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCCNo.8042。
所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68为从果实表面分离得到。
所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的5.8S rDNA基因及TS1/ITS2序列如SEQ ID No.1所示,26S rDNA基因序列如SEQ ID No.2所示。
所述所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的形态学特征:白色奶油样菌落,营养体细胞出芽生殖,两极出芽,柠檬状细胞,无假菌丝。25℃在5%Difco麦芽糖琼脂培养基上通过细胞与芽接合形成子囊孢子,每个子囊包含1-2个盔甲状的子囊孢子。
所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的生理生化特征:可进行葡萄糖发酵,不可进行棉子糖和乳糖发酵;碳源同化方面:山梨糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖、D-甘露醇为阳性,半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、核糖醇、赤藓糖醇为阴性。所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68于含有5%(质量含量)氯化钠的培养基中均可正常生长,于pH4.0-5.5的培养基中均可正常生长,在环境温度为4℃下生长势弱,在40℃以上不可生长;最佳适宜生长温度为25-30℃。所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68产具有抑菌作用较强的物质。
本发明的目的还在于提供上述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68和/或其代谢物在抑制病原菌、制备病原菌抑制剂、抑制病害、制备病害抑制剂中的应用。
上述所述病原菌为下述至少一种:
A、桃采后褐腐病菌;
B、苹果采后灰霉病菌;
C、苹果采后青霉病菌;
D、葡萄采后灰霉病菌;
E、梨采后青霉病菌;
F、樱桃采后褐腐病菌;
G、西红柿灰霉病菌;
所述病害为下述至少一种:
A、桃褐腐病;
B、苹果采后灰霉病;
C、苹果采后青霉病;
D、葡萄灰霉病;
E、梨采后青霉病;
F、樱桃褐腐病;
G、西红柿灰霉病。
所述桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola或Monilinia laxa或Moniliniafructigena;所述苹果采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述苹果采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述葡萄采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述梨采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述西红柿灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述樱桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola。
所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的代谢物可从所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的发酵液中获得。所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的代谢物具体可按照如下方法制备:在液体培养基(包括YPD、PD等能使酵母菌生长的液体培养基)中培养葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68,除去液体培养物(发酵液)中的葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68即得到所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)的代谢物。
本发明中的葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对桃、樱桃采后褐腐病菌、葡萄采后灰霉病菌、西红柿灰霉病、苹果采后灰霉病菌、苹果采后青霉病菌和梨采后青霉病菌具有抑制作用;对桃采后褐腐病、樱桃褐腐病、葡萄灰霉病、西红柿灰霉病、苹果采后灰霉病、梨采后青霉病、苹果采后青霉病具有抑制作用。葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68尤其对灰霉病菌的抑制作用非常明显,抑菌圈直径均在10mm以上。
生物材料保藏说明
分类命名:葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)
菌株编号:Y68
保藏机构:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
保藏机构简称:CGMCC
地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏日期:2013年8月16日
保藏中心登记入册编号:CGMCC No.8042。
附图说明
图1为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68显微镜下细胞形态,Y68生长于YNBD培养基上,28℃,48h,“—”代表10μm。
图2为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在桃子上对桃褐腐病菌(Monilinia fructicola)引起的病斑的抑制效果。
图3为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在樱桃上对褐腐病菌(Monilinia fructicola)引起的病斑的抑制效果。
图4为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在PDA培养基上对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)的抑制效果。
图5为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在西红柿上对灰霉病菌(Botrytis cinerea)引起的病斑的抑制效果。
图6为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在苹果上对青霉病菌(Penicillium expansum)引起的病斑的抑制效果。
图7为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在苹果上对苹果灰霉病菌(Botrytis cinerea)引起的病斑的抑制效果。
图8为所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在梨上对青霉病菌(Penicillium expansum)引起的病斑的抑制效果。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
桃褐腐病菌——链核盘菌(Monilinia fructicola(wint.)Rehm)(王菲等.桃褐腐病的发生与防治.果树花卉.2012年第5期p58);
樱桃褐腐病菌——链核盘菌(Monilinia fructicola(wint.)Honey)(张涛等.西安市樱桃褐腐病发生特点及综合防治措施.中国植保导刊.2011年第1期p20);
苹果采后灰霉病——半知菌亚门真菌,灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.exFr);(郭小芳等.6株放线菌定殖能力及对苹果灰霉病防治效果.西北农业学报.2009年第5期p116)
苹果采后青霉病——扩展青霉(Penicillium expansum Link,1809);(赵文亚等.拮抗酵母菌对苹果青霉病的防治效果.安徽农业科学.2011年第5期p2676)
葡萄灰霉病——半知菌亚门真菌,灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.ex Fr);(谢长荣等.葡萄灰霉病的发生及综合防治技术.现代农业科技.2010年第18期p155)
梨采后青霉病——扩展青霉(Penicillium expansum Link,1809);(齐东梅等.枯草芽孢杆菌H11O对苹果梨采后青霉病和黑斑病的防治效果.应用与环境生物学报.2005年第11期)
西红柿灰霉病——半知菌亚门真菌,灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.ex Fr);(徐明等.番茄灰霉病病原菌生物学特性的研究.贵州农业科学.2009年第3期p68)
实施例1
本发明葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的分离与菌株鉴定
1、样品采集
从有中国有机葡萄园,采集葡萄。
2、菌株的分离筛选及拮抗筛选
从有机水果上分离菌株,采用常规梯度稀释涂布分离,用PDA(含有硫酸链霉素)和YPD琼脂(含有硫酸链霉素)共2种培养基分别在28℃条件下培养,挑取菌落形态差异较大并可纯培养的细菌,在YPD琼脂培养基上纯化保存,并以葡萄灰霉病菌为靶标病原菌进行拮抗菌的初筛和多次复筛,最终得到一株抑菌活性强的酵母菌菌株,命名其为Y68。
3、菌株的鉴定
对菌株Y68进行形态学、生理生化特性和部分保守序列的分析。参考《The Yeasts,a Taxonomic Study》(Kurtzman,C.P.(1998a).Williopsis Zender.InThe Yeasts,a Taxonomic Study,4th edn,pp.529-920.Edited by C.P.Kurtzman&J.W.Fell.Amsterdam:Elsevier.)中描述方法进行生理生化测定和分子生物学鉴定。结果表明,Y68的形态学特征:白色奶油样菌落,营养体细胞出芽生殖,两极出芽,柠檬状细胞,无假菌丝。25℃在5%Difco麦芽糖琼脂培养基上通过细胞与芽接合形成子囊孢子,每个子囊包含1-2个盔甲状的子囊孢子。葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的生理生化特征:可进行葡萄糖发酵,不可进行棉子糖和乳糖发酵;碳源同化方面:山梨糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖、D-甘露醇为阳性,半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、核糖醇、赤藓糖醇为阴性。
葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68于含有5%(质量含量)氯化钠的培养基中均可正常生长,于pH4.0-5.5的培养基中均可正常生长,在环境温度为4℃下生长势弱,在40℃以上不可生长;最佳适宜生长温度为25-30℃。所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68产具有抑菌作用较强的物质。菌株Y68的5.8S rDNA基因及ITS1/ITS2核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其26S rDNA基因D1/D2区域核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68显微镜下细胞形态,如图1所示,Y68生长于YNBD培养基上,28℃,48h,“—”代表10μm。
实施例2
本发明所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68抑菌谱的测定
供试病原菌:
桃褐腐病菌--链核盘菌(Monilinia fructicola(wint.)Rehm);
樱桃褐腐病菌--链核盘菌(Monilinia fructicola(wint.)Rehm);
苹果采后灰霉病菌--灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.ex Fr);
苹果采后青霉病菌--展青霉菌(Penicillium expansum Link,1809);
梨采后青霉病菌--展青霉菌(Penicillium expansum Link,1809);
葡萄灰霉病菌--灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.ex Fr);
西红柿灰霉病菌--灰葡萄孢(Botrytis cinerea Per.ex Fr);
对葡萄灰霉病菌的抑制效果测定,采用体外平板对峙法进行:选择葡萄灰霉病菌为指示真菌:采用平板对峙培养法。具体操作如下:葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68菌株在PDA培养基上28℃恒温培养48h。葡萄灰霉病菌在PDA平板上25℃恒温培养3-4天,自菌落边缘用直径0.7cm无菌不锈钢打孔器打制带菌琼脂片;用无菌接种针挑取病原菌菌片,菌丝面朝下接种于PDA平板中心处,同时在距病原真菌菌片两侧均约3.00cm处用无菌接种环划线葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68,以仅接病原菌的平板为对照,每个处理三次重复,25℃恒温培养5-7天,测量病原真菌边缘与葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68的菌落带宽中心之间的抑菌带宽度。葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对灰霉病菌的抑制作用非常明显,抑菌圈直径均在10mm以上,如图4。图4说明葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68具有稳定、高效、的抗菌性能。
对桃、樱桃采后褐腐病病菌、苹果采后灰霉病菌、苹果采后青霉病菌、梨采后青霉病、西红柿灰霉病菌的病原菌抑菌效果测定,采用果实体内人为打孔接种法进行。具体操作(以防治苹果采后灰霉病为例进行说明)如下:
将葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68菌株在YPD液体培养基上28℃恒温培养48h,用蒸馏水调至菌液浓度为5×108cfu/ml。苹果灰霉病菌B.cinerea在PDA平板上25℃恒温培养5-7天,收集灰霉菌孢子,用蒸馏水制成5×108cfu/ml的孢子悬浮液;成熟的苹果,先用0.5%次氯酸钠消毒之后,用灭过菌的移液器枪头,沿着苹果腰部插孔,每个果子扎孔3个,每个孔为30mm×30mm。每孔接种30ul Y68菌液,室温晾干,然后再接种30μl的病原菌孢子悬浮液。最后,处理的果子放置于25℃下,5-7天后,测定果实腐烂斑大小。腐烂斑小于10mm被视为不发病。根据腐烂病斑的占总接种孔数的多少,计算发病率,未发病的病斑数占总接种孔数的多少,计算病斑抑制率。
实验结果表明葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对桃、樱桃采后褐腐病病菌、西红柿灰霉病菌、苹果采后青霉病菌、苹果采后灰霉病菌等引起的果实病斑有较好的抑制效果。见图2-3,图5-8及表1.
表1.葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对不同果蔬上病原菌的抑制效果
实施例3
葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对采后病害防治效果
贮藏条件下,所述葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68对桃、苹果、梨、葡萄采后病害防治效果实验:
1、桃子采摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为2-4℃,相对湿度为90-95%条件下,黑暗贮藏。贮藏21天后,与对照组相比,计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为80%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为50%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为40%.其应用有效浓度为108cfu/ml。
2、苹果采摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为1-2℃,相对湿度为90-95%条件下,黑暗贮藏。贮藏10个月后,与对照组相比,其防效达70%以上。计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为70%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为50%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为42%.其应用有效浓度为108cfu/ml。
3、葡萄采摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为2-4℃,相对湿度为90-95%条件下,黑暗贮藏。贮藏30天后,与对照组相比,计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为50%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为40%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为30%.其应用有效浓度为108cfu/ml。
4、梨采摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为1-2℃,相对湿度为90-95%条件下,黑暗贮藏。贮藏10个月后,与对照组相比,计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为70%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为50%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为40%.其应用有效浓度为108cfu/ml。
5、西红柿摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为10-12℃,相对湿度为80-85%条件下,黑暗贮藏。贮藏15天后,与对照组相比,计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为60%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为40%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为30%以下.其应用有效浓度为108cfu/ml。
6、樱桃采摘后,经Y68菌液浸泡处理45-60秒,然后室温条件下,风干,然后于温度为4-5℃,相对湿度为90-95%条件下,黑暗贮藏。贮藏21天后,与对照组相比,计算防治效果。当细胞浓度为≥108cfu/ml时,防效为60%以上;当细胞浓度为107cfu/ml时,防效为45%;当细胞浓度为106cfu/ml时,防效为40%以下.其应用有效浓度为108cfu/ml。
实施例4
一种葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68菌剂的制备方法
将葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum)Y68在YPD及其它发酵液培养基中培养48-96小时后,取出。加20-30%的玉米淀粉及助剂(脱脂奶粉及绿化钙等),然后,30℃下烘干,烘干后,经粉碎机粉碎,封装于瓶或袋中。
Figure IDA0000462128650000011
Figure IDA0000462128650000021

Claims (9)

1.一种葡萄有孢汉逊酵母菌(Hanseniaspora uvarum),菌株为Y68,保藏号为:CGMCC No.8042。
2.一种病原菌抑制剂,其活性成分为权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物。
3.根据权利要求2所述的病原菌抑制剂,其特征在于,所述病原菌抑制剂对下述至少一种病原菌具有抑制作用:
A、桃采后褐腐病菌;
B、苹果采后灰霉病菌;
C、苹果采后青霉病菌;
D、葡萄采后灰霉病菌;
E、梨采后青霉病菌;
F、樱桃采后褐腐病菌;
G、西红柿灰霉病菌。
4.根据权利要求3所述的病原菌抑制剂,其特征在于,所述桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola或Monilinia laxa或Monilinia fructigena;所述苹果采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述苹果采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述葡萄采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述梨采后青霉病菌为Penicilliumexpansum;所述西红柿灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述樱桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola。
5.一种病害抑制剂,其活性成分为权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物。
6.根据权利要求5所述的病害抑制剂,其特征在于,所述病害为下述至少一种:
A、桃褐腐病;
B、苹果采后灰霉病;
C、苹果采后青霉病;
D、葡萄灰霉病;
E、梨采后青霉病;
F、樱桃褐腐病;
G、西红柿灰霉病。
7.权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物的下述任一应用:
1)权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物在抑制病原菌中的应用;
2)权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物在制备病原菌抑制剂中的应用;
3)权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物在抑制病害中的应用;
4)权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌和/或权利要求1所述葡萄有孢汉逊酵母菌的代谢物在制备病害抑制剂中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述病原菌为下述至少一种:
A、桃采后褐腐病菌;
B、苹果采后灰霉病菌;
C、苹果采后青霉病菌;
D、葡萄采后灰霉病菌;
E、梨采后青霉病菌;
F、樱桃采后褐腐病菌;
G、西红柿灰霉病菌;
所述病害为下述至少一种:
A、桃褐腐病;
B、苹果采后灰霉病;
C、苹果采后青霉病;
D、葡萄灰霉病;
E、梨采后青霉病;
F、樱桃褐腐病;
G、西红柿灰霉病。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述桃采后褐腐病菌为Moniliniafructicola或Monilinia laxa或Monilinia fructigena;所述苹果采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述苹果采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述葡萄采后灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述梨采后青霉病菌为Penicillium expansum;所述西红柿灰霉病菌为Botrytis cinerea;所述樱桃采后褐腐病菌为Monilinia fructicola。
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Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105002100A (zh) * 2015-07-14 2015-10-28 烟台绿云生物科技有限公司 生防酵母菌及其干粉制剂与应用
CN105543116A (zh) * 2016-02-03 2016-05-04 北京市农林科学院 一株酵母菌及其在鲜果采后病害防治中的应用
CN105875292A (zh) * 2016-04-12 2016-08-24 江苏大学 卵磷脂结合葡萄汁有孢汉逊酵母防治柑橘采后病害的方法
CN107523509A (zh) * 2017-08-29 2017-12-29 江苏大学 一株控制苹果采后青霉病的酵母菌及其应用
CN107868759A (zh) * 2017-12-15 2018-04-03 北京工商大学 一株可有效防治果蔬采后病害的葡萄酒有孢汉生酵母及其制备与使用方法
CN111867363A (zh) * 2018-02-12 2020-10-30 博思特生物群落公司 用于预防或减少真菌病原体在植物上生长的微生物组合物
CN112481141A (zh) * 2020-10-26 2021-03-12 南京农业大学 一株汉逊德巴利酵母菌株及其在制备水果保鲜剂中的应用
CN113403211A (zh) * 2021-06-16 2021-09-17 青岛农业大学 一株具有抑菌作用的葡萄汁有孢汉逊酵母mp1861及其应用
CN114451450A (zh) * 2022-02-24 2022-05-10 兰州大学 一种可拮抗灰葡萄孢菌的葡萄汁有孢汉逊酵母菌及其应用
CN114921350A (zh) * 2022-01-18 2022-08-19 吉林大学 一株具有抗菌特性的絮凝酵母及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103392792A (zh) * 2013-07-29 2013-11-20 南京农业大学 一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103392792A (zh) * 2013-07-29 2013-11-20 南京农业大学 一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘普等: "生防酵母菌防治果品采后病害机理的研究进展", 《华中农业大学学报》, vol. 32, no. 2, 31 March 2013 (2013-03-31), pages 134 - 140 *
王玉霞等: "一株野生酵母β-葡萄糖苷酶的分离纯化", 《酿酒科技》, 31 December 2013 (2013-12-31), pages 42 - 45 *
许皎姣: "拮抗酵母菌的筛选_鉴定及对葡萄冷藏品质的影响", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》, 15 January 2014 (2014-01-15) *
马荣山等: "树莓果实上产酯酵母菌的筛选和鉴定", 《食品研究与开发》, vol. 33, no. 1, 31 January 2012 (2012-01-31), pages 147 - 150 *

Cited By (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105002100B (zh) * 2015-07-14 2019-01-29 烟台绿云生物科技有限公司 生防酵母菌及其干粉制剂与应用
CN105002100A (zh) * 2015-07-14 2015-10-28 烟台绿云生物科技有限公司 生防酵母菌及其干粉制剂与应用
CN105543116B (zh) * 2016-02-03 2021-06-04 北京市农林科学院 一株酵母菌及其在鲜果采后病害防治中的应用
CN105543116A (zh) * 2016-02-03 2016-05-04 北京市农林科学院 一株酵母菌及其在鲜果采后病害防治中的应用
CN105875292A (zh) * 2016-04-12 2016-08-24 江苏大学 卵磷脂结合葡萄汁有孢汉逊酵母防治柑橘采后病害的方法
CN107523509B (zh) * 2017-08-29 2019-12-31 江苏大学 一株控制苹果采后青霉病的酵母菌及其应用
CN107523509A (zh) * 2017-08-29 2017-12-29 江苏大学 一株控制苹果采后青霉病的酵母菌及其应用
CN107868759A (zh) * 2017-12-15 2018-04-03 北京工商大学 一株可有效防治果蔬采后病害的葡萄酒有孢汉生酵母及其制备与使用方法
CN107868759B (zh) * 2017-12-15 2021-03-05 北京工商大学 一株葡萄酒有孢汉生酵母在水果采后病害防治的应用
CN114794150A (zh) * 2018-02-12 2022-07-29 博思特生物群落公司 用于预防或减少真菌病原体在植物上生长的微生物组合物
CN111867363A (zh) * 2018-02-12 2020-10-30 博思特生物群落公司 用于预防或减少真菌病原体在植物上生长的微生物组合物
US11771029B2 (en) 2018-02-12 2023-10-03 Boost Biomes, Inc. Microbial compositions for the prevention or reduction of growth of fungal pathogens on plants
CN111867363B (zh) * 2018-02-12 2022-05-06 博思特生物群落公司 用于预防或减少真菌病原体在植物上生长的微生物组合物
CN112481141A (zh) * 2020-10-26 2021-03-12 南京农业大学 一株汉逊德巴利酵母菌株及其在制备水果保鲜剂中的应用
CN112481141B (zh) * 2020-10-26 2022-03-08 南京农业大学 一株汉逊德巴利酵母菌株及其在制备水果保鲜剂中的应用
CN113403211A (zh) * 2021-06-16 2021-09-17 青岛农业大学 一株具有抑菌作用的葡萄汁有孢汉逊酵母mp1861及其应用
CN113403211B (zh) * 2021-06-16 2022-02-01 青岛农业大学 一株具有抑菌作用的葡萄汁有孢汉逊酵母mp1861及其应用
CN114921350A (zh) * 2022-01-18 2022-08-19 吉林大学 一株具有抗菌特性的絮凝酵母及其应用
CN114921350B (zh) * 2022-01-18 2024-03-22 吉林大学 一株具有抗菌特性的絮凝酵母及其应用
CN114451450A (zh) * 2022-02-24 2022-05-10 兰州大学 一种可拮抗灰葡萄孢菌的葡萄汁有孢汉逊酵母菌及其应用

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