CN103392792A - 一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法。分别配制105～108CFU/mL葡萄有孢汉逊酵母菌悬液及季也蒙毕赤酵母菌悬液，按等浓度等体积复配成105—108CFU/mL复合拮抗酵母菌悬液；用复合拮抗酵母菌悬液分别对草莓果实在采摘前1-7天进行喷施处理；采摘后进行贮藏，条件为2℃，90%-95%RH；或常温销售。该方法对人体无毒副作用、延长草莓贮藏期及货架期的生物防治方法，利用复合拮抗酵母菌对草莓进行田间喷施处理，能使贮藏期内的草莓保持较好品质，同时显著提高草莓商品率和相关抗病防御酶活性，降低腐烂率。

Description

一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法
技术领域
本发明属于农产品贮藏保鲜技术领域，涉及一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法。
背景技术
草莓果实柔软多汁，色泽艳丽，营养价值极高，深受消费者喜爱，在我省种植面积大、产量高，经济价值极高。由于其含水量高，组织娇嫩，在采摘和运输过程中极易受到机械损伤及微生物侵染而腐烂变质。其中灰霉病(Botrytis cinerea)、软腐病(Rhizopus stolonifer)、炭疽病(Colletotrichum acutatum)、疫病(Phytophthora cactorum)、白粉病(Oidium sp.)是草莓果实腐烂变质的主要病害。目前控制腐烂最有效的措施是低温贮藏结合化学防腐剂、热、辐射、气调等。尽管化学药剂防治草莓采后病害效果明显，但长期的使用化学药剂导致病菌产生的抗药性会降低化学药剂的防腐效果，同时化学防腐剂对人体健康和环境会产生不良影响。另一方面，低温处理需要较大的投资并且容易造成草莓贮藏中的冷害问题。因此，必须加强对草莓保鲜技术的研究，延长其保鲜期，满足市场需求。
近年来，利用拮抗微生物防治果蔬采后病害已成为一种新的途径。其中酵母菌因其具有生长繁殖能力强、遗传稳定、光谱抗菌性、可与化学杀菌剂相容，不产生对人体有害的代谢物质等优点而成为拮抗微生物中最受关注的拮抗菌。由于草莓在田间生长时很容易被病原菌感染，因此，若能将生物防治的方法应用于草莓果实田间生长阶段，则既能减轻有害微生物对果实的侵染，又能保护环境，是生产安全性食品的有效方法。此外，造成许多果蔬采后病害的另一个重要原因是病原微生物通过在采摘及运输过程中造成的伤口浸染果实，若在果蔬采摘之前使用拮抗微生物则可以使拮抗菌在采摘前在果蔬表面定殖、生长，并布满果蔬表面的空间，从而有效防止在采摘及运输过程中病原微生物的入侵。近年来拮抗酵母菌在草莓防腐保鲜中的研究主要偏于采后应用，对采前应用的研究较少。因此，研究拮抗微生物采前应用有助于人们从果蔬生产的源头控制病害，既能减轻有害微生物对果蔬的侵染，又能保护环境和人体健康，也有助于实现对果蔬类产品“从田间对餐桌”的安全性保障，是生产安全性食品的有效方法。
拮抗酵母菌葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniasporauvarum)、季也蒙毕赤酵母(Pichia guilliermondii)均安全，无毒，能有效防治草莓采后病害。由于单独一种拮抗酵母菌其抗菌谱较窄，而草莓果实的致病菌却有多种，故一种拮抗菌不可能有效地防治果实上所有的病原菌。
发明内容
为解决上述草莓保鲜问题上所存在的不足，本发明提供一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法。
本发明可通过如下技术方案实现：
(1)复合拮抗酵母菌菌悬液制备
分别配制105-108CFU/mL葡萄有孢汉逊酵母菌悬液(H.uvarum)及季也蒙毕赤酵母菌悬液(P.guilliermondii)，复配成105-108CFU/mL复合拮抗酵母菌悬液；
(2)采前喷施处理方法
用复合拮抗酵母菌悬液分别对草莓果实在采摘前1-7天进行喷施处理；
(3)采摘后进行贮藏，条件为2℃，90％-95％RH；或常温销售(条
件为25℃，90％-95％RH)。
有益效果：
1)本发明的复合拮抗酵母菌比单一拮抗酵母菌能够更好的在草莓果实表皮定殖，占据空间防治病害菌的侵入，除了营养与空间的竞争，还能在病源菌表面吸附，两者相结合增强了与病原菌的竞争，抑制了病源菌生长。
2)提高草莓贮藏期间抗病性防御酶活性
果蔬自身抗病性的诱导是拮抗微生物发挥生物防治功效的作用机理之一，通过使用本发明，有效地提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化氢酶(CAT)等自由基防御酶活性，诱导几丁质酶、β-1，3-葡聚糖酶等植物病害抗性酶，从而提高果实的抗病性。
3)保持品质，提高草莓商品率，延长贮藏期
使用本发明方法，可以提高贮藏期内草莓的硬度及商品率：常温贮藏5天时，商品率80％，而未处理草莓商品率＜20％；低温贮藏15天时商品率为85％，显著高于未处理组的25％。使用本发明方法，降低腐烂率，且维持可溶性固形物、维生素C含量，稳定pH，保持草莓果实的品质，延长保鲜期。
4)显著降低酵母菌的使用浓度
使用本发明方法，显著缩减了酵母菌的使用浓度，106CFU/mL复合拮抗酵母菌菌悬液采前处理的果实商品率显著高于108CFU/mL单一拮抗酵母菌处理的果实商品率，产生了协同增效作用。
附图说明
图中所表示复合拮抗酵母处理的最佳组别与单一拮抗酵母菌处理及对照组比较
表1拮抗酵母菌采前喷施对采后草莓果实自然病害及商品率的影响
图1拮抗酵母菌采前喷施处理对冷藏草莓果实自然病害的防治效果
图2拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实硬度的影响
图3拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实可溶性固形物含量(TSS)的影响
图4拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实维生素C含量的影响
图5拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实可滴定酸含量的影响
图6拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实MDA含量的影响
图7拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实SOD酶活性的影响
图8拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实POD酶活性的影响
图9拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实PPO酶活性的影响
图10拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实CAT酶活性的影响
图11拮抗酵母菌采前喷施对冷藏草莓果实β-1，3-葡聚糖(glucanase)酶活性的影响
具体实施方案
1.实验材料
草莓果实(Fragaria ananassa Duch)，商品名“红颜”。
拮抗酵母菌：葡萄有孢汉逊酵母(H.uvarum)，菌种保藏编号为CGMCC2.3970；季也蒙毕赤酵母(P. guilliermondii)，菌种保藏编号为CGMCC2.3943均由中国普通微生物菌种保藏中心购买获得。
2.实验仪器
冷库(南京吉良制冷设备有限公司)；紫外可见光分光光度计UV-2802PCS(北京莱伯泰科有限公司)；便携式色差仪(上海汉谱光电科技有限公司)；手持糖量仪WYT-4型(泉州光学仪器厂)；TA.XT2i质构分析仪(英国Stable Micro Systems公司)；TGL20M台式高速冷冻离心机(湘仪离心机仪器有限公司)；光学显微镜Nikon102(JapanNikon Co.，Ltd.)；全温振荡培养箱(太仓市实验设备厂)
3.实验步骤
1)复合拮抗酵母菌菌悬液制备
常规方法制备葡萄有孢汉逊酵母菌悬液(H.uvarum)和季也蒙毕赤酵母菌悬液(P. guilliermondii)，浓度为1×106CFU/mL，然后等体积配制成1×106CFU/mL的复合拮抗菌悬液，待用。
2)采前处理方法
草莓果实商业成熟采摘之前3天，用1×106CFU/mL的复合拮抗酵母菌菌悬液对草莓进行喷洒(PJ组)；用1×108CFU/mL的葡萄有孢汉逊酵母菌菌悬液对草莓进行喷洒(P组)；用1×108CFU/mL的季也蒙毕赤酵母菌菌悬液对草莓进行喷洒(J组)；草莓果实商业成熟采摘之前不做任何处理，作为对照(CK)。商业成熟后采摘，采摘时轻拿轻放以避免可能造成的果实机械损伤。采摘完毕后于3h内置2℃，25℃RH90％-95％条件下贮藏。
3)测定病害腐烂指数及腐烂率
4)测定品质及理化指标
硬度、可溶性固形物(TSS)、维生素C、可滴定酸(TA)品质指标及MDA、POD、SOD、PPO、CAT、β-1，3-葡聚糖酶理化指标。
5)结果判定
在低温贮藏15天后，对照组草莓果实的腐烂指数(Decay index)为0.73，商品率达25％；PJ拮抗酵母菌复配处理组腐烂指数为0.35，显著低于对照组(P＜0.05)及单独拮抗酵母菌处理组，商品率达85％。贮藏期间，复合拮抗酵母菌处理组的草莓果实能够保持较高的硬度，尤其在第9，15天时，处理组果实的硬度显著高于对照组(P＜0.05)；可溶性固形物含量及维生素C含量均显著高于对照组(P＜0.05)。MDA含量的多少以及其积累程度常被作为衡量膜脂过氧化程度的指标。复合拮抗酵母菌处理组的草莓果实MDA含量明显低于对照组(P＜0.05)。在整个贮藏过程中，处理组的果实SOD，POD，PPO，CAT，β-1，3-葡聚糖酶活性均显著高于对照组(P＜0.05)，更加充分地说明了复合拮抗酵母菌能提高草莓贮藏的抗病性防御酶，延长了草莓的贮藏期。
在常温贮藏条件下，对照组草莓果实的腐烂指数(Decay index)为0.62，商品率达15％；PJ拮抗酵母菌复配处理组腐烂指数为0.26，显著低于对照组(P＜0.05)及单独拮抗酵母菌处理组，商品率达80％。
表1
Figure BDA0000358593790000071

Claims (2)

1.一种提高草莓采后贮藏性的生物防治方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)复合拮抗酵母菌菌悬液制备:分别配制105～108CFU/mL的葡萄有孢汉逊酵母菌悬液（H.uvarum）及105～108CFU/mL的季也蒙毕赤酵母菌悬液（P.guilliermondii），二者混合，复配成105～108CFU/mL复合拮抗酵母菌悬液；
(2)采前喷施处理方法：用复合拮抗酵母菌悬液分别对草莓果实在采摘前1-7天进行喷施处理；
(3)采摘后进行贮藏：条件为1～4℃，90%～95%RH；或常温销售，条件为20～28℃，90%～95%RH。
2.根据权利要求1所述的提高草莓采后贮藏性的生物防治方法，其特征在于所述的葡萄有孢汉逊酵母菌悬液及季也蒙毕赤酵母菌悬液按等体积混合复配成105～108CFU/mL复合拮抗酵母菌悬液。
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