CN103733990A - 一种马鞭石斛的组织培育方法 - Google Patents

一种马鞭石斛的组织培育方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103733990A
CN103733990A CN201310689162.6A CN201310689162A CN103733990A CN 103733990 A CN103733990 A CN 103733990A CN 201310689162 A CN201310689162 A CN 201310689162A CN 103733990 A CN103733990 A CN 103733990A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medium
stem
bottle
sterilization
blake bottle
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201310689162.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103733990B (zh
Inventor
莫文油
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhengzhou Normal University
Original Assignee
莫文油
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 莫文油 filed Critical 莫文油
Priority to CN201310689162.6A priority Critical patent/CN103733990B/zh
Publication of CN103733990A publication Critical patent/CN103733990A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103733990B publication Critical patent/CN103733990B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明提供了一种马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：培育瓶的消毒；培养基的制备；外植体的培养和培育。本发明提供的方法通过对培养瓶的重复消毒杀菌，培养基的养分调配以及添加链霉菌和好力克的溶液中浸泡马鞭石斛根茎，达到了根茎防腐防虫害的效果，营养成分高，缩短了马鞭石斛的生长周期，提高了马鞭石斛的存活率，增加了产量。

Description

一种马鞭石斛的组织培育方法
技术领域
本发明涉及一种中药材的培育方法，尤其涉及一种马鞭石斛的组织培育方法。
背景技术
马鞭石斛为兰科石斛，是传统的名贵中药材。《神农本草经》中有记载，其具有益胃生津、滋阴生津、清热止咳润肺等功效。现代药理研究表明，石斛还有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的作用。由于石斛的自然繁殖能力低，需要依附在树木、岩石或者苔藓上进行繁殖跟生存，由于生存能力低，生产周期长，加上人类的大量采掘，造成此种名贵中药材难以满足市场的药物需求。
发明内容
本发明为了满足市场上对中药材马鞭石斛的需要，提供了一种生产周期短，成活率高，产量高的马鞭石斛的组织培育方法，其中，包括以下步骤：
1)培育瓶的消毒：培养瓶先采用臭氧进行间断消毒后用无菌水在常温下浸泡20-30分钟，晾干后采用150-200℃热水进行高温喷淋灭菌，对培育瓶进行臭氧、无菌水以及高温反复消毒杀菌是为了保证培育瓶的干净无菌，不会携带任何对外植体培育有害的细菌，安全的无菌环境给马鞭石斛种苗的培育提供了一个良好的生长条件；
2)培养基的制备：在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.1-1.2mg／L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼，搅拌均匀，室内静置1-2小时，在基础的培养基的基础上添加一定比例的生长调节剂能够更好地促进马鞭石斛的快速生长，使其生长周期缩短，添加白糖是为了增加培养基中的碳源，增加了马鞭石斛的繁殖量，添加天然提取物马铃薯汁以及茶子饼一个是促进马鞭石斛外植体生根壮苗，使其根系繁茂，另一个茶子饼中含有茶皂素能够很好地防止根茎着受病虫害的侵蚀；
3)外植体的培养：选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3-4遍，放在用水稀释了3500-4000倍的链霉菌和好力克的溶液中浸泡3-5小时，浸泡是为了防止马鞭石斛根茎腐烂；
4)培育：将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为20-25℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为70-80％，光照时间为12-14小时，光照强度为1200-20001x。
优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤1)中的臭氧间断消毒是采用浓度为2-3ppm的臭氧在间隔15-20分钟消毒2-3次。
优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤2)中培养基的优选用量为NAA0.1-1.2mg／L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼的重量组分别为20-30、12-20和5-10。
优选的是，所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤4)中外植体接种至培养基的培养时间为1-2月，间隔10天往培养瓶中添加步骤2)中同样比例配比的培养基，间隔20天往培养瓶中添加含有N、P、K、Mg、Zn、Na的复合营养液，间隔喷施营养液可以促进马鞭石斛生长速度快。
本发明提供的方法通过对培养瓶的重复消毒杀菌，培养基的养分调配以及添加链霉菌和好力克的溶液中浸泡马鞭石斛根茎，达到了根茎防腐防虫害的效果，营养成分高，缩短了马鞭石斛的生长周期，提高了马鞭石斛的存活率，增加了产量。
具体实施方式
下面结合具体的实施方法对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
实施例1
采用浓度为2ppm的臭氧间隔20分钟对培育瓶进行消毒，总共消毒2次后用无菌水在常温下浸泡20分钟，晾干后采用150℃热水进行高温喷淋灭菌；在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.1mg／L、6-BA1.0mg／L、白糖4克、马铃薯汁8克和茶子饼4克，搅拌均匀，室内静置1小时；选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3遍，放在用水稀释了3500倍的链霉菌和好力克的溶液中浸泡3小时，浸泡是为了防止马鞭石斛根茎腐烂；将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为20℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为80％，光照时间为12小时，光照强度为12001x，2-3个月培育出来的种苗已经适合移栽，移栽后的种苗6-7个月可以采收，成活率97％。
实施例2
采用浓度为3ppm的臭氧间隔20分钟对培育瓶进行消毒，总共消毒2次后用无菌水在常温下浸泡25分钟，晾干后采用200℃热水进行高温喷淋灭菌；在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.5mg／L、6-BA1.2mg／L、白糖6克、马铃薯汁10克和茶子饼6克，搅拌均匀，室内静置1小时；选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3遍，没有经过稀释链霉菌和好力克的溶液中浸泡，将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为25℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为80％，光照时间为14小时，光照强度为18001x，3个月以后培育出来的种苗才适合移栽，移栽后的种苗8-12个月可以采收，成活率86％。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施方式。

Claims (4)

1.一种马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)培育瓶的消毒：培养瓶先采用臭氧进行间断消毒后用无菌水在常温下浸泡20-30分钟，晾干后采用150-200℃热水进行高温喷淋灭菌；
2)培养基的制备：在培育瓶中加入MS基础培养基、NAA0.1-1.2mg／L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼，搅拌均匀，室内静置1-2小时；
3)外植体的培养：选取优质的马鞭石斛的根茎部位，用无菌水反复清洗3-4遍，放在用水稀释了3500-4000倍的链霉菌和好力克的溶液中浸泡3-5小时；
4)培育：将静置好的培养基灌入培养瓶中，至培养瓶容量的三分之二处，将消毒好的外植体接种至培养基中，置于温度为20-25℃大棚培养室中进行培养，保持空气湿度为70-80％，光照时间为12-14小时，光照强度为1200-20001x。
2.根据权利要求1中所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤1)中的臭氧间断消毒是采用浓度为2-3ppm的臭氧在间隔15-20分钟消毒2-3次。
3.根据权利要求1中所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤2)中培养基的优选用量为NAA0.1-1.2mg/L、6-BA1.0-1.2mg／L、白糖、马铃薯汁和茶子饼的重量组分别为20-30、12-20和5-10。
4.根据权利要求1中所述的马鞭石斛的组织培育方法，其特征在于，所述的步骤4)中外植体接种至培养基的培养时间为1-2月，间隔10天往培养瓶中添加步骤2)中同样比例配比的培养基，间隔20天往培养瓶中添加含有N、P、K、Mg、Zn、Na的复合营养液。
CN201310689162.6A 2013-12-16 2013-12-16 一种马鞭石斛的组织培育方法 Expired - Fee Related CN103733990B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310689162.6A CN103733990B (zh) 2013-12-16 2013-12-16 一种马鞭石斛的组织培育方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310689162.6A CN103733990B (zh) 2013-12-16 2013-12-16 一种马鞭石斛的组织培育方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103733990A true CN103733990A (zh) 2014-04-23
CN103733990B CN103733990B (zh) 2017-01-18

Family

ID=50491130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310689162.6A Expired - Fee Related CN103733990B (zh) 2013-12-16 2013-12-16 一种马鞭石斛的组织培育方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103733990B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104303977A (zh) * 2014-11-11 2015-01-28 覃永红 一种马鞭石斛栽培方法
CN105075831A (zh) * 2015-09-18 2015-11-25 德化县湖心岛种养专业合作社 铁皮石斛的活树附生栽培方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5401655A (en) * 1991-09-10 1995-03-28 Tochigi Prefecture Process for biologically preventing dicotyledonous plant diseases using symbiotical bacteria
CN101810140A (zh) * 2009-09-03 2010-08-25 四川万安石斛产业开发有限公司 一种繁殖铁皮石斛试管苗的方法
CN101138317B (zh) * 2006-09-06 2011-01-12 天津农学院 组织内带菌外植体消毒的处理方法
CN102613082A (zh) * 2012-03-31 2012-08-01 南京农业大学 促进铁皮石斛茎段增殖扩繁的改良培养基及增殖扩繁方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5401655A (en) * 1991-09-10 1995-03-28 Tochigi Prefecture Process for biologically preventing dicotyledonous plant diseases using symbiotical bacteria
CN101138317B (zh) * 2006-09-06 2011-01-12 天津农学院 组织内带菌外植体消毒的处理方法
CN101810140A (zh) * 2009-09-03 2010-08-25 四川万安石斛产业开发有限公司 一种繁殖铁皮石斛试管苗的方法
CN102613082A (zh) * 2012-03-31 2012-08-01 南京农业大学 促进铁皮石斛茎段增殖扩繁的改良培养基及增殖扩繁方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
卢文芸等: "五种药用石斛快速繁殖的研究", 《种子》 *
李翠等: "药用植物马鞭石斛组织培养与快速繁殖", 《北方园艺》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104303977A (zh) * 2014-11-11 2015-01-28 覃永红 一种马鞭石斛栽培方法
CN105075831A (zh) * 2015-09-18 2015-11-25 德化县湖心岛种养专业合作社 铁皮石斛的活树附生栽培方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN103733990B (zh) 2017-01-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104335903B (zh) 一种促进白及快速繁殖的方法
CN103416305B (zh) 金线莲种苗的无激素组织培养及快速繁殖方法
CN103814821A (zh) 一种高效快速生产白芨种苗的方法
CN103250645B (zh) 艾纳香的快速繁殖与移栽方法
CN104082138B (zh) 一种通城虎的组织培养快繁方法
CN103314855A (zh) 白芨的种子组培繁殖方法
CN102845313A (zh) 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法
CN109258460A (zh) 微茎尖培养结合热处理获得增城蜜菊脱毒苗的培育方法
CN103270952B (zh) 新疆药桑组培快繁培养基
CN103688854A (zh) 峨眉金线莲的组培快繁方法
CN103125396B (zh) 一种山药苗离体繁殖方法
CN102884982A (zh) 金线莲无激素种苗快繁有机生产方法
CN105993956A (zh) 一种茅苍术快速繁殖方法
CN103798144A (zh) 红椿组织培养培养基
CN104126506A (zh) 一种美国红火箭紫薇的组织培养方法
CN103688865A (zh) 诱导培养基、及提高蝴蝶兰花梗成活率的方法
CN102835317A (zh) 一种硒化霍山石斛培养物的生产方法
CN101180950B (zh) 春石斛组织培养快繁方法
CN106718733A (zh) 一种在石头上种植铁皮石斛的方法
CN103004595A (zh) 一种人参果的嫩枝扦插繁育方法
CN103371103A (zh) 一种马缨杜鹃组织培养快速繁殖方法
CN102893872A (zh) 一种香根鸢尾驯化苗的组培方法
CN105210884A (zh) 白及种子无菌萌发平衡培养基
CN105432470B (zh) 铜皮石斛的组织培养方法
CN103733990B (zh) 一种马鞭石斛的组织培育方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Zhang Yunxia

Inventor before: Mo Wenyou

COR Change of bibliographic data
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20160603

Address after: 450044 Henan city of Zhengzhou province Huiji District Yingcai Street No. 6

Applicant after: Zhengzhou Normal University

Address before: Xingning District of Nanning city the Guangxi Zhuang Autonomous Region 530001 Wang Zhou Lu Bei Yi Li

Applicant before: Mo Wenyou

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20170118

Termination date: 20171216

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee