CN103724347B

CN103724347B - 从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法

Info

Publication number: CN103724347B
Application number: CN201410024298.XA
Authority: CN
Inventors: 钟庆林; 唐小林
Original assignee: Sichuan Xieli Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sichuan Xieli Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2014-01-20
Filing date: 2014-01-20
Publication date: 2015-07-22
Anticipated expiration: 2034-01-20
Also published as: CN103724347A

Abstract

本发明从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法，包括1）披针叶黄花种籽经过粉碎，经溶剂提取；2）提取液浓缩得到含金雀花碱的总生物碱混合物，加入水稀释，调节pH值至中性或者酸性，再用有机溶剂萃取杂质；3）经萃取杂质的总生物碱混合物水相调节pH值至中性或者碱性，然后加入二叔丁基二碳酸酯，搅拌反应把金雀花碱转化成N—叔丁氧羰基金雀花碱，4）水相用有机溶剂萃取，有机相浓缩得到N—叔丁氧羰基金雀花碱； 5）N—叔丁氧羰基金雀花碱用酸脱去叔丁氧羰基保护，然后用碱中和酸，得到金雀花碱，本发明溶剂回收率高，利于环保、提取的金雀花碱纯度高。

Description

从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法

技术领域：

本发明涉及从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法。

背景技术：

披针叶黄花（T.lanceolata R.Br.）又名牧马豆、野决明，系豆科（Leguminoseae）野决明属（Thermopsis）多年生草本植物，药用其成熟的种籽，分布于中国东北、华北及西北广大地区，资源丰富。该植物中含有多种生物碱，其中金雀花碱（Cytisine）含量相对最高，约占总生物碱含量一半。金雀花碱对呼吸系统的作用类似烟碱，能反射性地兴奋呼吸，其兴奋作用强于同剂量的山梗碱，临床上用0.15%水溶液肌肉或者静脉注射，抢救手术创伤及窒息性毒剂、氰类毒剂、麻醉剂等引起中毒性的反射性呼吸暂停，或者传染性疾病使得呼吸、心血管活动的衰竭以及休克、虚脱状态和新生儿窒息等等。最近几年，金雀花碱作为疗效明显的戒烟药物引起国际医药界的关注。

目前关于从披针叶黄花种籽中提取制备金雀花碱的文献报道比较少，其中吴勇在2004年6月发表文献报道了如下两种方法。方法一：披针叶黄花种籽经过粉碎，用甲醇、乙醇等有机溶剂提取，提取液浓缩得到含金雀花碱的总生物碱混合物，然后调节pH值至酸性，再用氯仿或者二氯甲烷萃取杂质，水相调节pH值至碱性，然后用大量氯仿或者二氯甲烷多次萃取，浓缩后得到金雀花碱粗品，再用丙酮等有机溶剂反复重结晶，得到最后的金雀花碱。方法二：披针叶黄花种籽经过粉碎，用氨水或者其他碱浸泡，用大量氯仿或者二氯甲烷多次萃取，再用酸水洗涤有机相，把生物碱洗涤回水相，水相调节pH值至碱性，然后用大量氯仿或者二氯甲烷多次萃取，浓缩后得到金雀花碱粗品，再用丙酮等有机溶剂反复重结晶，得到最后的金雀花碱。

CN200910023485报道了从披针叶黄花中提取金雀花碱和黄花碱的方法，其中提取金雀花碱的方法和吴勇报道的方法一是完全类似：披针叶黄花种籽经过粉碎，用甲醇、乙醇等有机溶剂提取，提取液浓缩得到含金雀花碱的总生物碱混合物，然后调节pH值至酸性，再用苯或者甲苯萃取杂质，苯或者甲苯相可以提取黄花碱，水相调节pH值至碱性，然后用大量氯仿等有机溶剂多次萃取，浓缩后得到金雀花碱粗品，再用丙酮等有机溶剂反复重结晶，得到最后的金雀花碱。

以上方法，因为金雀花碱水溶性很强，有一个最大的缺陷就是，要从水相中把金雀花碱萃取出来，需要用大量的氯仿或者二氯甲烷来萃取，氯仿或者二氯甲烷沸点很低，挥发性大，溶剂回收率相对比较低，而且氯仿和二氯甲烷毒性很大，对员工身体和环保都很不利。另外，萃取过程中极易乳化，造成萃取非常困难。金雀花碱纯度只能在95%以下，单一杂质一般在0.2%以上。

发明内容：

本发明的目的是为了提供一种溶剂回收率高，利于环保、提取的金雀花碱纯度高的从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法。

本发明的目的是这样来实现的：

本发明从披针叶黄花中提取金雀花碱的方法，包括以下步骤：

1）披针叶黄花种籽经过粉碎，经溶剂提取，溶剂用量为披针叶黄花种籽重量的2—20倍，提取温度是室温至回流状态，提取次数在1～5次，每次提取时间至少为30分钟，溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、水中的至少一种；

2）提取液浓缩得到含金雀花碱的总生物碱混合物，加入水稀释，然后调节pH值至中性或者酸性，再用有机溶剂萃取杂质，其中有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、苯、甲苯、二甲苯中的至少一种，优先选择二氯甲烷、氯仿；

3）经萃取杂质的总生物碱混合物水相调节pH值至中性或者碱性，然后加入二叔丁基二碳酸酯，搅拌反应把金雀花碱转化成极性更小、水溶性更小的N—叔丁氧羰基金雀花碱，以利于后面的萃取过程，其中二叔丁基二碳酸酯的量是披针叶黄花种籽中金雀花碱含量的0.8—2倍，反应温度为100℃以下，反应时间至少为30分钟；

4）水相用有机溶剂萃取，有机相浓缩得到N—叔丁氧羰基金雀花碱，其中有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醚、苯、甲苯、二甲苯中的至少一种，优先选择乙酸乙酯；

5）N—叔丁氧羰基金雀花碱用酸脱去叔丁氧羰基保护，然后用碱中和酸，得到金雀花碱，其中脱去叔丁氧羰基保护的酸为盐酸、硫酸、三氟乙酸中的至少一种溶剂为甲醇、乙酸乙酯、乙醇中的至少一种，碱是无机碱或者有机碱。

上述的步骤5）中无机碱为氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氨水，有机碱为三乙胺。

上述的步骤3）中反应温度为0℃～100℃。

本发明提供了一种巧妙的方法，提取浓缩后，用有机溶剂把杂质萃取掉，然后把金雀花碱在线衍生成低极性产品N—叔丁氧羰基二碳酸酯，将金雀花碱这样就可以很方便的用更少量有机溶剂就可以从水相中提取出来，避免了使用大量的氯仿或者二氯甲烷。溶剂回收率高，利于环保，而且最终产品金雀花碱纯度高，超过99%，单一杂质例如其它生物碱低于0.1%。

附图说明：

图1为金雀花碱的HPLC图谱。

具体实施方式：

实施例1：

经过粉碎的披针叶黄花种籽20kg，加入100kg的甲醇，回流提取3小时，过滤，滤渣继续加入100kg的甲醇，回流提取2小时，过滤，合并所有甲醇，减压浓缩至浸膏状含金雀花碱的总生物碱混合物，加入20kg水稀释，然后用盐酸调节pH值至3—4，用二氯甲烷萃取2次，每次用10kg二氯甲烷，水相用氢氧化钠调节pH值至8—9，加入380 g二叔丁基二碳酸酯，室温下搅拌2小时，得到N—叔丁氧羰基金雀花碱，然后水相用乙酸乙酯萃取2次，每次5kg，合并所有乙酸乙酯相，然后浓缩至2L左右，通入氯化氢气体，过滤收集析出的固体，得到金雀花碱盐酸盐315g。

金雀花碱盐酸盐315g中加入3L甲醇，加热溶解，然后滴加甲醇钠甲醇溶液至中性，过滤除去氯化钠，浓缩干得到260g金雀花碱。

实施例2：

经过粉碎的披针叶黄花种籽20kg，加入100kg的40%的甲醇，回流提取4小时，过滤，滤渣继续加入100kg的40%的甲醇，回流提取4小时，过滤，合并所有甲醇，减压浓缩至浸膏状含金雀花碱的总生物碱混合物，加入10kg水稀释，然后用硫酸调节pH值至3—4，用氯仿萃取2次，每次用10kg氯仿，水相用碳酸钠调节pH值至8—9，加入380g二叔丁基二碳酸酯，室温下搅拌30分钟，然后用乙醚萃取2次，每次10kg，合并所有乙醚相，然后浓缩至4L左右，通入2mol/L的硫酸甲醇溶液，过滤收集析出的固体，得到金雀花碱硫酸盐340g。

金雀花碱盐酸盐340g中加入3L乙醇，加热溶解，然后滴加三乙胺液至中性，过滤除去三乙胺硫酸盐，浓缩干得到220g金雀花碱。

实施例3：

经过粉碎的披针叶黄花种籽20kg，加入100kg的乙醇，回流提取30分钟，过滤，滤渣继续加入50kg的乙醇，回流提取1小时，过滤，合并所有乙醇，减压浓缩至浸膏状含金雀花碱的总生物碱混合物，加入10kg水稀释，然后用盐酸调节pH值至3—4，用二氯甲烷萃取2次，每次用10kg二氯甲烷，水相用氢氧化钠调节pH值至8—9，加入380g二叔丁基二碳酸酯，室温下搅拌20小时，然后用乙酸乙酯和甲苯2：1的混合溶剂萃取2次，每次5kg，合并所有有机相，然后浓缩至干，然后加入2L乙酸乙酯溶解，通入氯化氢气体，过滤收集析出的固体，得到金雀花碱盐酸盐310g。

金雀花碱盐酸盐310g中加入3L甲醇，加热溶解，然后滴加甲醇钠甲醇溶液至中性，过滤除去氯化钠，浓缩干得到250g金雀花碱。

实施例4：

经过粉碎的披针叶黄花种籽20kg，加入50kg的70%的乙醇，室温提取10小时，过滤，滤渣继续加入50kg的70%的乙醇，室温提取10小时，过滤，合并所有甲醇，减压浓缩至浸膏状含金雀花碱的总生物碱混合物，加入10kg水稀释，然后用硫酸调节pH值至5—6，用乙酸乙酯和甲苯的1：1混合溶剂萃取2次，每次用10kg乙酸乙酯和甲苯1：1混合溶剂，水相用氢氧化钠调节pH值至8—9，加入380g二叔丁基二碳酸酯，80℃下搅拌30分钟，然后用乙酸乙酯萃取2次，每次5kg，合并所有乙酸乙酯相，然后浓缩至2L左右，通入氯化氢气体，过滤收集析出的固体，得到金雀花碱盐酸盐315g。

图1为金雀花碱的HPLC图谱。同时得到面积百分比报告（见表1）。

表1：

从图1和面积百分比报告中可得知最终产品金雀花碱纯度高，达到了99.9910%。

上述实施例是对本发明的上述内容作进一步的说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于上述实施例。凡基于上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

Claims

1.从披针叶黄花种籽中提取金雀花碱的方法，包括以下步骤：

1）披针叶黄花种籽经过粉碎，经溶剂提取，溶剂用量为披针叶黄花种籽重量的2—20倍，提取温度是室温至回流状态，提取次数在1～5次，每次提取时间至少为30分钟，溶剂为甲醇、乙醇、水中的至少一种；

2）提取液浓缩得到含金雀花碱的总生物碱混合物，加入水稀释，然后调节pH值至中性或者酸性，再用有机溶剂萃取杂质，其中有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯中的至少一种；

4）水相用有机溶剂萃取，有机相浓缩得到N—叔丁氧羰基金雀花碱，其中有机溶剂为乙酸乙酯、乙醚中的至少一种；

5）N—叔丁氧羰基金雀花碱用酸脱去叔丁氧羰基保护，然后用碱中和酸，得到金雀花碱，其中脱去叔丁氧羰基保护的酸为盐酸、硫酸、三氟乙酸中的至少一种，溶剂为甲醇、乙酸乙酯、乙醇中的至少一种，碱是无机碱或者有机碱。

2.如权利要求1所述的从披针叶黄花种籽中提取金雀花碱的方法，其特征在于步骤5）中无机碱为氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氨水，有机碱为三乙胺。

3.如权利要求1或2所述的从披针叶黄花种籽中提取金雀花碱的方法，其特征在于步骤3）中反应温度为0℃～100℃。