CN103698281A

CN103698281A - 补骨脂及其衍生产品的近红外漫反射测定方法

Info

Publication number: CN103698281A
Application number: CN201310753066.3A
Authority: CN
Inventors: 周厚成; 胡昌江; 张秀环; 冯健
Original assignee: Sichuan New-Green Pharmaceutical Technology Development Co Ltd
Current assignee: Sichuan New-Green Pharmaceutical Technology Development Co Ltd
Priority date: 2013-12-31
Filing date: 2013-12-31
Publication date: 2014-04-02

Abstract

本发明属药物检测领域，涉及补骨脂及其衍生产品的近红外漫反射测定方法，目的是提供一种快速检测含补骨脂检品的方法，步骤如下：A、检品制备：以补骨脂药材、盐补骨脂、盐补骨脂浸膏粉、盐补骨脂配方颗粒为检品时，处理至需求粒径；B、将步骤A准备的检品按要求剂量分装至旋转石英杯中，摇匀；C、作光谱采集，采集条件为：环境温度为28℃，相对湿度50%～75%；测样方式：积分球漫反射，分辨率8cm^-1，扫描波长范围10000～4000cm^-1，扫描次数为64次；每个样品重复3次，计算平均光谱。采用本方法，可以快速测定检品含量，而且与高效液相色谱法结果相当，适用于从补骨脂到盐补骨脂配方颗粒成品一系列生产过程的在线监测，及大批量检品的检测，具有高效、快速、准确的优点。

Description

补骨脂及其衍生产品的近红外漫反射测定方法

技术领域

本发明属于药物检测领域，具体涉及补骨脂及其衍生产品的近红外漫反射测定方法。

背景技术

补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实。味辛、苦，温。归肾、脾经。主要温肾助阳，纳气平喘，温脾止泻；外用消风祛斑。用于肾阳不足，阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治白癜风，斑秃。盐补骨脂为补骨脂的炮制加工品，盐炙入肾，功效同补骨脂。

以往是采用高效液相色谱法测定检品的含量，以补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品作对照，对补骨脂药材，盐补骨脂，盐补骨脂浸膏粉，盐补骨脂配方颗粒等检品进行含量测定。

检测条件如下：

供试品溶液的制备取检品粉末(过三号筛)约0.5g精密称定，置索氏提取器中，加甲醇适量，加热回流提取2小时，放冷，转移至100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

对照品溶液的制备取补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，精密称定，分别加甲醇制成每1ml各含补骨脂素31.5μg和异补骨脂素23.5μg的溶液，即得。

色谱条件色谱柱：Penomenex Luna5u C₁₈(250mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇-水(55：45)；洗脱时间：15min；流速：1ml/min；柱温：30℃；进样量：5μl；检测波长：246nm。

但是高效液相测定方法的不足之处在于检测时间较长，从准备试样到得到测定结果需要2-3小时，针对大批量检品时，费时费力，也相当不经济，故申请人欲提供一种全新的补骨脂检品的检测方法，可针对补骨脂药材、盐补骨脂，盐补骨脂浸膏粉等含补骨脂的相关检品，快速得到准确结果的方法。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种快速检测以补骨脂药材、盐补骨脂为检品，或以盐补骨脂浸膏粉，盐补骨脂配方颗粒等以补骨脂为原料的检品的方法，具体为近红外漫反射测定方法。

本发明测定方法的步骤如下：

A、检品制备：

以补骨脂药材、盐补骨脂为检品时，粉碎样品至可过2号筛；以盐补骨脂浸膏粉、盐补骨脂配方颗粒为检品时，无需处理，直接采用；

B、将步骤A准备的检品按要求剂量分装至旋转石英杯中，摇匀；

C、光谱采集，采集条件为：环境温度为20～35℃，相对湿度50%～75%；测样方式：积分球漫反射，分辨率8cm^-1，扫描波长范围4000～10000cm^-1，扫描次数为32～96次；每个样品重复多次，计算平均光谱。

优选，环境温度为28℃，相对湿度50%～75%；测样方式：积分球漫反射，分辨率8cm^-1，扫描波长范围4000～10000cm^-1，扫描次数为64次；每个样品重复3次，计算平均光谱。

其中，为取得较大的相关系数和较低的标准偏差，采用方法：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法。

步骤B所述要求剂量为6g。

其中，步骤A所述的检品如下：

补骨脂：照《中国药典》2010版制补骨脂项下炮制方法进行炮制。

盐补骨脂：照《中国药典》2010版制盐补骨脂项下炮制方法进行炮制。

盐补骨脂浸膏粉：以盐补骨脂为原料，采用常规方法提取后，收集提取液浓缩干燥所得浸膏粉。

盐补骨脂配方颗粒：以盐补骨脂为原料，采用常规方法提取后，收集提取液浓缩干燥所得浸膏粉，加入药用辅料混合制粒所得颗粒剂。

采用上述检测方法，可以快速得到检品含量测定结果，而且与高效液相色谱法的结果相当，适用于从补骨脂到盐补骨脂配方颗粒成品一系列生产过程的在线监测，及大批量检品的检测，具有高效、快速、准确的优点，尤其对中药配方颗粒的大生产发展具有突破性的作用。附图说明

图1盐补骨脂浸膏粉和盐补骨脂配方颗粒的制备工艺流程图

图2补骨脂药材样品叠加图

图3盐补骨脂药材样品叠加图

图4盐补骨脂浸膏粉样品叠加图

图5盐补骨脂配方颗粒样品叠加图

图6补骨脂原药材含量测定模型图谱

图7盐补骨脂原药材含量测定模型图谱

图8盐补骨脂浸膏粉含量测定模型图谱

图9盐补骨脂配方颗粒含量测定模型图谱

图10补骨脂药材水分测定模型图谱

图11盐补骨脂药材水分测定模型图谱

图12盐补骨脂配方颗粒水分测定模型图谱

具体实施方式

本发明检测方法检测步骤如下：

A、检品制备：

C、光谱采集，采集条件为：环境温度为20～35℃，相对湿度50%～75%；测样方式：积分球漫反射，分辨率8cm^-1，扫描波长范围4000～10000cm^-1，扫描次数为32～96次；每个样品重复3次，计算平均光谱。

其中，进一步优选步骤B所述要求剂量为6g。

步骤C所述采集条件优选：环境温度为28℃，相对湿度50%～75%；测样方式：积分球漫反射，分辨率8cm^-1，扫描波长范围4000～10000cm^-1，扫描次数为64次；每个样品重复3次，计算平均光谱。

为取得较大的相关系数和较低的标准偏差，采用方法：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法。

以下为本发明检测方法的确立过程，由此证明本发明检测方法的有益效果，下述试验所针对检品来源如下：

盐补骨脂浸膏粉和盐补骨脂配方颗粒的制备工艺流程图如图1。

1、含量校正模型建立

1.1补骨脂药材补骨脂素与异补骨脂素含量测定模型建立

1.1.1光谱预处理方法的选择

近红外模型建立过程中，对光谱进行预处理可以消除图谱的干扰因素，对光谱图进行进一步优化，由于光谱预处理方式对所建模型的预测能力影响较大，故需要选择最佳光谱处理方法。发明人将142份补骨脂药材样品作为建模校正集，136份补骨脂药材样品作为验证集，进行模型比较，各模型参数如表1所示。

由表1有关参数可知，用校正集标准偏差（RMSECV）和相关系数（R）、验证集标准偏差（RMSEPV）和相关系数（R）作为衡量指标，补骨脂药材中补骨脂素和异补骨脂素均是方法3的预处理方法，可得到较大的相关系数和较低的标准偏差，故都采用采用方法3：Firstderivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法。

1.1.2模型建立

运用TQ8.0定量分析软件中PLS法建立定量分析模型。输入与每张图谱相对应的HPLC含量测定数值，计算得出模型。

2盐补骨脂原药材补骨脂素与异补骨脂素含量测定模型建立

2.1光谱预处理方法的选择：

补骨脂经过炮制增强其入肾作用，温肾助阳作用强于生品。故本实验选取了127份制盐补骨脂药材样品，建立了100个预测集，27个校正集盐补骨脂模型，模型参数如表2所示。

由表2有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

3模型建立：同2

3.1盐补骨脂浸膏粉补骨脂素与异补骨脂素含量测定模型建立

3.1.2光谱预处理方法的选择：

盐补骨脂浸膏粉由盐补骨脂通过实验室小试制备得来，故选取了66份盐补骨脂浸膏粉样品建立50个预测集，16个验证集盐补骨脂浸膏粉模型，各模型参数如表3所示。

由表3有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

4模型建立：同2

4.1盐补骨脂配方颗粒补骨脂素与异补骨脂素含量测定型建立

4.1.1光谱预处理方法的选择：

盐补骨脂配方颗粒有四川新绿色药业科技发展股份有限公司提供，本实验选取了1个批次80份盐补骨脂配方颗粒样品建立了建立60个预测集，20个验证集的盐补骨脂配方颗粒模型。模型各参数如表4所示。

由表4有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

5模型建立：同2

5.1水分校正模型建立

5.1.1补骨脂药材水分含量测定模型建立

光谱预处理方法的选择

《中国药典》一部补骨脂项下【检查】水分不得过9.0％。本文将87份补骨脂药材样品作为建模校正集，22份补骨脂药材样品作为验证集，进行模型比较，各模型参数如表5所示。

由表5有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

6模型建立：同2

6.1盐补骨脂药材水分含量测定模型建立

6.1.1光谱预处理方法的选择

《中国药典》一部补骨脂项下盐补骨脂【检查】水分不得过9.0％。本文将115份盐补骨脂样品作为建模校正集，20份盐补骨脂样品作为验证集，进行模型比较，各模型参数如表6所示。

由表6有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

7模型建立：同2

7.1盐补骨脂药材配方颗粒水分含量测定模型建立

7.1.1光谱预处理方法的选择

本文将60份盐补骨脂药材配方颗粒样品作为建模校正集，20份盐补骨脂药材配方颗粒样品作为验证集，进行模型比较，各模型参数如表7所示。

由表7有关参数可知采用方法3：First derivstive（一阶导数光谱）+MSC（多元信号修正）+Norris derivative光谱预处理方法可得到较大的相关系数和较低的标准偏差。

表1补骨脂药材光谱预处理方法选择

表2盐补骨脂药材光谱预处理方法选择

表3盐补骨脂浸膏粉光谱预处理方法选择

表4盐补骨脂配方颗粒光谱预处理方法选择

表5补骨脂水分光谱预处理方法选择

表6盐补骨脂水分光谱预处理方法选择

表7盐补骨脂配方颗粒水分光谱预处理方法选择

8实验结果

8.1各样品NIR图谱采集

每一品种虽各份样品图不完全相同，但基本保持一致，结果见图2、图3、图4、图5。

8.2NIR定量分析模型图谱

所建7个模型中，校正集标准偏差（RMSECV）最大0.8750，最小0.0250；相关系数（R）最大0.9701，最小0.8279。验证集标准偏差（RMSEPV）最大1.0400，最小0.0255和相关系数（R）最大0.9602，最小0.8314。结果如图6、图7、图8、图9、图10、图11、图12。

8.3模型验证

每个模型选取十个未知样品进行验证，NIR预测值可以较准确的逼近HPLC测定值,建立的PLS定量校正模型具有较好的预测效果,模型可以准确预测其覆盖范围内的补骨脂素和异补骨脂素含量。与HPLC相比,本法操作简便、快速无损、准确高效，可以做为实施在线控制的手段，对实际生产中关键环节的样品做质量控制，为中药配方颗粒生产及质量控制提供了一种新思路。结果见表8、表9、表10、表11、表12、表13、表14。

表8补骨脂药材含量测定验证样品预测结果

表9盐补骨脂药材含量测定验证样品预测结果

表10盐补骨脂浸膏粉含量测定验证样品预测结果

表11盐补骨脂配方颗粒含量测定验证样品预测结果

表12补骨脂药材水分测定验证样品预测结果

表13盐补骨脂药材水分测定验证样品预测结果

表14盐补骨脂配方颗粒水分测定验证样品预测结果

采用本发明检测方法测定后，与采用高效液相色谱法测定结果相当，误差值在可控范围内，为快速有效检测补骨脂药材，盐补骨脂，盐补骨脂浸膏粉，盐补骨脂配方颗粒等检品提供一种全新的选择。