CN103622947A - 淫羊藿苷元在制备治疗哮喘药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明请求保护淫羊藿苷元用于制备治疗哮喘药物中的用途,属于医药领域。本发明所述淫羊藿苷元为从传统中药淫羊藿中提取得到的中药单体,其用于哮喘治疗时可以显著降低哮喘患者的血清总IgE含量,并可以显著降低患者肺泡中的IL-4和IFN-r以及嗜酸粒细胞比率,其对哮喘患者的治疗作用优于淫羊藿提取物和淫羊藿苷。淫羊藿苷元用于哮喘治疗时作用全面、副作用低,具有广阔的临床应用前景。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,涉及淫羊藿苷元的新的医药用途,具体涉及淫羊藿苷元在制备治疗哮喘药物中的用途。
背景技术
支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见多发病,目前全球哮喘患者约3亿人,中国哮喘患者约3000万。哮喘是一种对患者及其家庭和社会都有明显影响的慢性疾病,治疗不及时不规范,极有可能危及生命。哮喘发病的危险因素包括宿主因素和环境因素两个方面,但其具体发病机制目前还不完全清楚,可能的发病机制包括变态反应、气道慢性炎症、气道高反应性、气道神经调节失常、遗传机制、呼吸道病毒感染、神经信号转导机制和气道重构及其相互作用等。气道炎症几乎是所有类型哮喘的共同特征,也是临床症状和气道高反应性的基础。气道炎症存在于哮喘的所有时段,以抑制炎症为主的治疗仍是治疗哮喘最主要的手段,验证治疗能够控制哮喘临床症状。
目前治疗哮喘的药物可以分为控制药物和缓解药物。控制药物是指需要长期每天使用的药物,这些药物主要通过抗炎作用使哮喘维持临床控制,其中包括激素、白三烯调节剂、长效β2-受体激动剂、缓释茶碱、抗IgE抗体及其他有助于减少全身激素剂量的药物等;缓解药物是指按需使用的药物,这些药物通过迅速解除支气管痉挛从而缓解哮喘症状,其中包括速效吸入β2-受体激动剂、全身用激素、吸入性抗胆碱能药物、短效茶碱及短效口服β2-受体激动剂等。但是这些控制哮喘的药物花费很高,并且长期使用激素会导致严重的不良反应,患者依从性差,付出的代价高。因此,寻找一种疗效好,毒副作用少,价格低廉的治疗哮喘的药物具有很重要的意义。
药用淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.)、箭叶淫羊藿(Epimedium sagittatumMaxim.)、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)、或朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)的干燥茎叶。临床上主要用于肾阳虚,阳痿尿频,不孕;风湿痹痛,肢体麻木拘挛,筋骨痿软,步履艰难;肾阳虚,喘咳短气。有研究证明,淫羊藿提取物有一定的镇咳祛痰作用,但对豚鼠支气管哮喘的平喘作用不够理想。专利号CN00110647.3公开了一种从淫羊藿中提取淫羊藿苷的方法。专利CN101637467A公开了淫羊藿苷元在制备治疗骨质疏松药物中的应用。专利US6399579公开了淫羊藿苷元在治疗性 功能障碍方面的用途。徐长青在《淫羊藿苷对卵蛋白和内毒素诱导炎症反应的影响及机制研究》一文中报道了淫羊藿苷具有改善哮喘大鼠肺组织炎症的作用。杜文静等在《淫羊藿苷对哮喘小鼠肺内嗜酸性粒细胞凋亡和Bcl-2、Bax基因蛋白表达的影响》(《中国中西医结合杂志》2011年09期)的研究中发现淫羊藿苷可调节抑凋亡基因蛋白Bcl-2和促凋亡基因蛋白Bax的表达,促进肺内EOS凋亡,减少EOS浸润。目前尚无淫羊藿苷元治疗哮喘方面的报道。
发明内容
淫羊藿苷元是从淫羊藿中提取获得的有效治疗成分,现已有证据证明淫羊藿苷元具有广泛的药理活性,本发明涉及淫羊藿苷元的一种新的医药用途,即淫羊藿苷元用于制备治疗哮喘的药物中的应用。
本发明的实施例11实验结果说明本发明所述的淫羊藿苷元对于哮喘大鼠具有突出的治疗效果。在血清总IgE测定试验中,与模型组相比,淫羊藿苷元治疗组能使哮喘大鼠升高的血清总IgE降低,效果优于淫羊藿苷治疗组,并且淫羊藿苷元各剂量组与正常对照组比较无显著差异(p>0.05);在EOS测定试验中,与模型组相比,本发明能显著降低哮喘大鼠EOS的值,效果优于淫羊藿苷,并且淫羊藿苷元各剂量组与淫羊藿苷组有显著性差异,与正常对照组比较无显著差异(p>0.05);淫羊藿苷元能够抑制哮喘大鼠血清细胞因子的表达,其中淫羊藿苷元高、中剂量组对哮喘大鼠血清IL-4的水平抑制明显,具有显著性差异,效果优于淫羊藿苷;淫羊藿苷元各剂量组能够增加哮喘模型大鼠血清IFN-r的表达水平,具有显著性差异,效果优于淫羊藿苷。
上述所述的淫羊藿苷元的治疗用途中,淫羊藿苷元可以根据常规制剂技术制备成外用制剂、口服制剂或注射剂,其中所述的淫羊藿苷元外用制剂优选为喷雾剂或气雾剂,口服剂型优选片剂、胶囊剂、颗粒剂或缓释片剂。上述含有淫羊藿苷元的药物制剂中,每一制剂单位中淫羊藿苷元的含量为0.1mg-100mg。
本发明所提供的含淫羊藿苷元局部外用制剂赋形剂选自乳糖、滑石粉、丙三醇、氯化钠和尿素中的一种或多种,还可以含有常用的推进剂,例如氯氟烃和/或挥发性非取代烃,挥发性非取代烃优选丁烷和丙烷可以按照常规制备方法进行制备。本发明所提供的含淫羊藿苷元局部外用制剂的赋形剂中还可以包含一种或多种防腐剂,外用制剂可在无菌条件下将淫羊藿苷元与赋形剂混合,优选地,它还含有推进剂。
本发明所提供的含淫羊藿苷元口服制剂中的赋形剂可以选自稀释剂、润湿剂、粘合剂、 崩解剂和润滑剂中的一种或多种;其中稀释剂选自淀粉、糊精、乳糖和微晶纤维素中的一种或多种;润湿剂和粘合剂选自水、乙醇、羟丙基甲纤维素、乙基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种;崩解剂选自羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠和交联聚维酮中的一种或多种;润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌和微粉硅胶中的一种或多种。上述口服制剂均按照常规制剂技术进行制备,比如干法制粒、湿法制粒等。
本发明所提供的含淫羊藿苷元的注射剂,由淫羊藿苷元、助溶剂和适量0.9%氯化钠溶液或注射用水组成,其中所述的助溶剂选自吐温-80、丙二醇、甘油、乙醇和PEG-400中的一种或几种。优选地,上述所述含淫羊藿苷元的注射剂中含有如下重量份各组分:淫羊藿苷元5-50份、助溶剂2-5份,适量0.9%氯化钠溶液或注射用水。
本发明所述淫羊藿苷元的医药用途中,其适用对象可以为人或动物,当使用对象为人时,淫羊藿苷元的用量为0.01mg/kg·d~100mg/kg·d,进一步优选淫羊藿苷元的用量为0.1mg/kg·d~10mg/kg·d。其他动物的给药量可以按照体表面积折算或者体重折算得到,这对于本领域技术人员来说是容易得到的。本发明所述的淫羊藿苷元用于哮喘治疗时,可适用于多种给药途径,如口服给药、喷雾给药或注射给药,注射给药可以为皮内、皮下、肌内、腹腔、局部或静脉内给药。上述给药途径可以依据患者的病情和制剂特性进行合理选择。
本发明所述淫羊藿苷元用于治疗哮喘时,具有以下突出的治疗优势:
1、淫羊藿苷元是在传统中药淫羊藿中提取得到的天然中药单体,其对人体毒副作用低,可以显著提高患者的用药安全性和用药依从性。
2、淫羊藿苷元可以显著降低血清中总IgE含量和EOS细胞率,并且可以降低肺泡中的IL-4含量和IFN-r含量,其对哮喘的治疗效果显著优于淫羊藿苷组和淫羊藿提取物组。
3、淫羊藿苷元为天然药物提取产物,其制备工艺简单,价格低廉,可以大幅度降低哮喘患者的治疗费用。
具体实施方式
以下通过具体实施例进一步描述本发明,本发明不仅仅限于以下实施例。
实施例1淫羊藿苷元注射剂
制备工艺:
将处方量的丙二醇和乙醇混合均匀,加入淫羊藿苷元,搅拌溶解,加入处方量的0.9%氯化钠溶液,搅拌均匀,加入0.5%针用活性炭,搅拌,脱炭,即得。
实施例2淫羊藿苷元片剂
制备工艺:淫羊藿苷元过100目筛,微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛,称取处方量的淫羊藿苷元与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀,加入8%羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒,60℃干燥,16目筛整粒,干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀,压片即得。
实施例3淫羊藿苷元肠溶片剂
制备工艺:按常规片剂工艺制作成所需规格的片剂(丸芯),再用肠溶包衣粉包衣即可。
实施例4淫羊藿苷元胶囊剂
制备工艺:将处方中的淫羊藿苷元、预胶化淀粉、甘露醇、乳糖和微粉硅胶分别过100目筛,混匀,加6%PVP的95%乙醇溶液适量制粒,60℃烘干,18目筛整粒,胶囊充填即可。
实施例5淫羊藿苷元泡腾片
制备工艺:按常规泡腾片的制备工艺制备成所需的泡腾片即可。
实施例6淫羊藿苷元缓释片剂
制备工艺:按缓释片的制备工艺制备成缓释片即可。
实施例7淫羊藿苷元注射剂
处方:
淫羊藿苷元 10mg
PEG-400 2ml
0.9%氯化钠溶液 加至10ml
制备工艺:
将处方量的PEG-400加入淫羊藿苷元,搅拌溶解,加入0.9%氯化钠溶液至10ml,搅拌均匀,加入0.5%针用活性炭,搅拌,脱炭,即得。
实施例8淫羊藿苷元注射剂
处方:
制备工艺:
将处方量的乙醇和吐温-80混合均匀,加入淫羊藿苷元,搅拌溶解,加入注射用水至10ml,搅拌均匀,加入0.5%针用活性炭,搅拌,脱炭,即得。
实施例9淫羊藿苷元喷雾剂
制备方法:在常温常压下,称量淫羊藿苷元20mg,溶于适量的蒸馏水中,再按照处方中各组分的配比分别加入其中,即丙三醇400mg,苯扎溴铵2mg,最后加蒸馏水至10ml,充分混匀,罐装,封口,检验得成品。
实施例10淫羊藿苷元的气雾剂
制备工艺:将处方量的淫羊藿苷元、尿素溶于无菌蒸馏水中,加入乙醇后砂芯漏斗过滤,用无菌蒸馏水加至1000ml,分剂量罐装,封接剂量阀门系统,分别再加压注入二氯二氟甲烷,即得。
实施例11淫羊藿苷元对哮喘大鼠的影响实验研究
1材料与方法
1.1动物分组
选取健康雄性SD大鼠(由山东新时代药业有限公司实验动物中心提供)70只,体重100~120g,正常喂养一周后,按照体重随机分为7组,正常组、模型组、淫羊藿提取物组、淫羊藿苷组、淫羊藿苷元低剂量组、淫羊藿苷元中剂量组、淫羊藿苷元高剂量组。
1.2主要试剂
淫羊蕾苷(纯度:99.06%):参照CN00110647.3的工艺制备
淫羊藿提取物:参照CN1460684A中的水提、树脂洗脱工艺制备
卵白蛋白(OvA,A级,美国Sigma公司);
氢氧化铝(AL(OH)3,美国Sigma公司);
IL-4、IgE和IFN-r酶联免疫吸附(ELISA)测定试剂盒(上海西塘生物医药公司)。
1.3哮喘模型的制备
除正常组外,其它各治疗组大鼠均按照下述方法制作哮喘模型:第1天腹腔含10%卵白蛋白的AL(OH)3佐剂致敏,第8天、15天,再分别重复一次,第21天开始用1%卵白蛋白雾化激发,30min/天,共激发12周,雾化前30min各组给予相应的药物。各治疗组每天给药一次,给药方式均为皮下注射,给药剂量及浓度如下表所示。
1.4给药方法及给药剂量
表1各给药组给予药物和给药剂量
1.5标本采集与检测
(1)血清总IgE含量测定:
各组大鼠在末次雾化吸入后2h后,3%戊巴比妥钠45mg/kg腹腔注射麻醉,腹主静脉取血,经3000r/min离心后分离血清,采用ELISA法测量IgE浓度,按试剂盒说明书操作。
(2)大鼠肺泡灌洗液(BALF)收集与保存
各组大鼠在末次雾化吸入后2h后,用3%戊巴比妥钠(45mg/kg)腹腔注射麻醉,然后消毒无菌分离气管,夹闭右主支气管,剪开气管用相应导管插入左主气管内从导管注入4ml生理盐水灌洗左肺,反复3次,回收率为60%-70%。将BALF在0℃,3000r/min,离心10min,取上清液1~2ml,采用瑞氏姬姆沙染色,镜下计数100个白细胞中的嗜酸粒细胞,计算其占白细胞的百分率。其余上清液保存于-80℃,用于细胞因子的测定。
应用统计软件进行统计学处理,组间两两比较采用t检验,p<0.05为差异有统计学意义。
2.试验结果
2.1各组血清总IgE含量比较见表2。
由表2可以看出,模型组的IgE含量与正常对照组比较具有极显著性差异(p<0.01);淫羊藿提取物组、淫羊藿苷组以及淫羊藿苷元各剂量组的IgE含量与哮喘模型组比较具有显著性或极显著差异(P<0.05、p<0.01),这表明淫羊藿提取物、淫羊藿苷和淫羊藿苷元均能降低血清中IgE含量;淫羊藿苷元各剂量组IgE含量与淫羊藿提取物组以及淫羊藿苷组相比具有显著性差异(P<0.05),这表明淫羊藿苷元在降低血清IgE含量方面要优于淫羊藿提取物组或淫羊藿苷组,且随着淫羊藿苷元剂量增加,血清总IgE水平呈下降趋势。
表2各给药组血清总IgE含量测定
与正常对照组比较.**p<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01;
与淫羊藿提取物组相比,&P<0.05;与淫羊藿苷组比较,▲P<0.05。
2.2各组肺泡灌洗液中EOS比较见表3。
由表3可见.淫羊藿苷元模型组与正常对照组比较有极显著差异(p<0.01);淫羊藿提取物组、淫羊藿苷组以及淫羊藿苷元各剂量组的EOS与哮喘模型组比较有显著差异或极显著性差异(P<0.05,P<0.01),这表明各治疗组均可以降低EOS;淫羊藿苷元各剂量组与淫羊藿提取物组或淫羊藿苷组比较有显著性差异(P<0.05),且随着淫羊藿苷元剂量增加,肺泡灌洗液中EOS逐渐减少。
表3各组肺泡灌洗液中EOS比较(X士s)
与正常对照组比较.**p<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01;
与淫羊藿提取物组相比,&P<0.05;与淫羊藿苷组比较,▲P<0.05。
2.3淫羊藿苷元对哮喘模型大鼠肺泡灌洗液中IL-4和IFN-r表达的影响
取制备好的大鼠肺泡灌洗液(BALF),用于IL-4和IFN-r的检测。实验结果如表4显示,哮喘模型组大鼠肺泡灌洗液中IL-4表达明显高于正常对照组;淫羊藿提取物组和淫羊藿苷治疗组与哮喘模型组相比较,IL-4表达降低,但是没有显著性差异(p>0.05);淫羊藿苷元中、 高剂量组与哮喘模型组相比较,大鼠肺泡灌洗液中IL-4表达明显降低,差异有显著性(P<0.05);哮喘模型组大鼠肺泡灌洗液中IFN-r表达明显低于正常对照组;淫羊藿提取物组和淫羊藿苷组治疗组与哮喘模型组相比较,IFN-r表达升高,但没有显著性差异(p>0.05);淫羊藿苷元各治疗组与哮喘模型组相比较,大鼠肺泡灌洗液中IFN-r表达有所升高,有显著性差异(p<0.05)。
表4各组大鼠肺泡灌洗液中IL-4和IFN-r表达情况(X士s)
与正常对照组比较.**p<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##p<0.01;
与淫羊藿提取物组相比,&P<0.05;与淫羊藿苷组比较,▲P<0.05。
在血清总IgE测定试验中,与模型组相比,淫羊藿苷元能显著降低哮喘大鼠血清总IgE含量,其效果优于淫羊藿苷和淫羊藿提取物组。并且淫羊藿苷元各剂量组与正常对照组比较无显著差异(p>0.05);在EOS测定试验中,与模型组相比,本发明能显著降低哮喘大鼠EOS的值,效果优于淫羊藿苷,并且淫羊藿苷元各剂量组与淫羊藿苷组有显著性差异,与正常对照组比较无显著差异(p>0.05);淫羊藿苷元能够抑制哮喘大鼠肺泡灌洗液细胞因子的表达,其中淫羊藿苷元高、中剂量组对哮喘大鼠肺泡灌洗液IL-4的水平抑制明显,具有显著性差异,效果优于淫羊藿苷;淫羊藿苷元各剂量组能够增加哮喘模型大鼠肺泡灌洗液IFN-r的表达水平,具有显著性差异,效果优于淫羊藿苷,说明本发明的药物对于哮喘大鼠具有突出的治疗效果。
将实施例2-10制备的淫羊藿苷元制剂替代实施例11中使用的实施例1的淫羊藿苷元注射剂,重复实施例11,结果发现实施例2-10制备的淫羊藿苷元各剂型对系哮喘大鼠仍有显著的治疗作用。
以上通过具体实施方式进一步描述了本发明,任何等同替换对于本领域的技术人员来 说都是显而易见的且包含在本发明之中。
Claims (10)
1.淫羊藿苷元在制备治疗哮喘药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途,其特征在于所述淫羊藿苷元为外用制剂、口服制剂或注射制剂。
3.如权利要求2所述的用途,其特征在于所述制剂中每一单位制剂中含有0.1mg-100mg淫羊藿苷元。
4.如权利要求2所述的用途,其特征在于所述外用制剂为喷雾剂或气雾剂。
5.如权利要求2所述的用途,其特征在于所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂。
6.如权利要求2所述的用途,其特征在于所述注射制剂由淫羊藿苷元、助溶剂和0.9%氯化钠溶液或注射用水组成,其中所述助溶剂选自吐温-80、丙二醇、甘油、乙醇或PEG-400中的一种或几种。
7.如权利要求2所述的用途,其特征在于所述注射制剂含有如下重量份的组分:
淫羊藿苷元 5-50份
助溶剂 2-5份
0.9%氯化钠溶液或注射用水 适量。
8.如权利要求1所述的用途,其特征在于所述药物适用对象为动物或人。
9.如权利要求8所述的用途,其特征在于所述药物中淫羊藿苷元的人用给药量为0.01mg/kg·d~100mg/kg·d。
10.如权利要求9所述的用途,其特征在于所述药物中淫羊藿苷元的人用给药量为0.1mg/kg·d~10mg/kg·d。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140312 |