CN103614453A - 医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法。现有的试验方法不能明确的对肠道杆菌进行区别和分类。本发明包括如下步骤：取实验材料，首先，分别接种于肠道选择培养基伊红美兰琼脂平板
EMB
培养基和
S.S
琼指平板培养基中，放入培养箱中进行分离培养；其次，经过
37
℃培养
26
小时后取可疑菌落，无色，半透明细菌菌落分别接种在双糖琼脂斜面培养基中分离培养、鉴别；再次，进行肠道杆菌生化反应实验，最后，进行
W.C.D.J.A.
染色实验，进行血清学方法做进一步检查。本发明的目的在于提供一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法。
Description
技术领域：
本发明涉及一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法。
背景技术：
现有的试验方法不能明确的对肠道杆菌进行区别和分类。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法。
本发明的目的是这样实现的：
一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，该方法包括如下步骤：取实验材料，首先，分别接种于肠道选择培养基伊红美兰琼脂平板EMB培养基和S.S琼指平板培养基中，放入培养箱中进行分离培养；其次，经过37℃培养26小时后取可疑菌落，无色，半透明细菌菌落分别接种在双糖琼脂斜面培养基中分离培养、鉴别；再次，进行肠道杆菌生化反应实验，最后，进行W.C.D.J.A.染色实验，进行血清学方法做进一步检查。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的伊红美兰琼脂平板EMB培养基的制备方法：将pH7.6的普通琼脂培养基灭菌溶化，冷至60℃左右时，每100ml培养基中加入灭菌20%乳糖溶液5ml，灭菌2%伊红水溶液2ml，灭菌0.5%亚甲兰水溶液2ml，充分混匀，倾入灭菌平板即可；S.S琼指平板培养基的制备方法：取普通琼脂培养基100ml、乳糖1gm、枸椽酸钠0.85gm、硫代硫酸钠0.85gm、10%枸椽酸铁溶液1ml、1%中性红水溶液0.25ml、1%煌绿水溶液0.033ml、3号胆盐0.85gm，取高压灭菌15磅30分钟灭菌溶化的琼脂培养基加入乳糖、枸椽酸钠、硫代硫酸钠、枸椽酸铁溶液和3号胆盐，混匀，调pH为7.0，用纱布过滤，高压灭菌8磅20分钟，待冷至65℃左右加入中性红及煌绿水溶液，倾注于无菌平皿。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的胃肠道细菌分离培养鉴定实验， W.C.D.J.A.六区平板划线法：左手将接种环按无菌操作法沾取少取标本或培养物，左手拿平板略开盖，将标本涂于平板表面之一侧边缘，运用腕力作连续划线要密但不要重叠，不要划破琼脂，占平板面积的1/4，旋转平板70-90°，将接种环火焰灭菌，冷后通过第一次划线区2-3次，再作同样的连续划线又占平板面积约，重复上述操作五次，划完整个平板，将平板倒放于37℃温箱内，18-24小时，观察各区菌落情况：所述的S.S琼脂平板培养基中，埃希氏大肠杆菌会产生粉红色菌落，菌落特点为边缘整齐、光滑型菌落；志贺氏菌属会形成具有无色透明，光滑湿润凸起的中等大小菌落；所述的伊红美兰EMB琼脂平板培养基中，大肠杆菌会生长为紫黑色有金属光泽，大而凸起，不透明的菌落；志贺氏菌属会形成无色半透明小菌落；沙门氏菌属会生长成为无色半透明较小菌落。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的W.C.D.J.A.染色实验：取无菌玻片一张加盐水一滴，取接种环按无菌操作方法挑取待检细菌培养物放到盐水中，混匀并涂成一薄层，接种环于火焰上烧灼灭菌，待涂片自然干燥，将标本片在酒精上火焰上来回通过火焰3次，杀死细菌并使细菌固定在玻片上，初染：将已制备好的涂片标本，冷后滴加结晶紫染液、盖满涂膜，约1分钟、轻轻水洗；媒染：滴加卢戈碘液，约1分钟，轻轻水洗；脱色：加95%酒精2-3滴，并立即频频摇动玻片数秒后，斜持玻片使酒精流去，立即水洗；复染：加石炭酸复红稀释液，复染1分钟，水洗；染色完毕，待标本片干后或用吸水纸吸干后，即可镜检，实验结果：埃希氏大肠杆菌：A染色阴性A
-
短小杆菌球杆状；沙门氏菌属：A染色阴性A
-
较细长的杆菌，散在排列；志贺氏菌属：A染色阴性A
-
较细长的杆菌，散在排列。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的肠道杆菌生化反应实验中：制备单糖发酵管培养基：在已灭菌的100ml蛋白胨水培养基中，加入体积比为1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂0.1ml，再加入葡萄糖1g或乳糖1g，混合后培养液呈鲜艳紫色；然后分装于内置有玻璃小倒置管的小试管中，每管约3ml，使小倒置管完全浸没，塞好试管塞，包装后置高压蒸汽灭菌器内15到25分钟灭菌，置温度为4℃冰箱中备用；挑取可疑菌落接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖培养基中，然后接种于克氏双糖铁琼脂斜面培养基中，然后接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时；
表1 肠道杆菌的生化反应鉴别表
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；
表示产酸和产气。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的生化反应试验中，将可疑菌落接种到葡萄糖蛋白胨水培养基，VP试验和甲基红试验，枸椽酸盐培养基、尿素培养基等生化培养基中，37℃培养24小时，根据生化反应进行鉴定，常见细菌的生化反应特点，见表2：
表2 常见肠道杆菌的生化反应鉴别表
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；
表示产酸和产气；
在所述的吲哚实验中，取大肠埃希菌接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时，加入柯氏试剂2滴，摇匀，可见粉红色环状物为吲哚实验阳性，乙型付伤寒杆菌在双糖培养基中产生黑色沉淀物，硫化氢H
2
S实验阳性；细菌在培养箱中经过37℃培养26小时培养增加2小时使其效果更好。
所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的血清学鉴定实验中，玻片凝集反应：实验方法为：取玻片一张，先加上一滴相应多价诊断血清，判断用沙门菌或志贺菌多价血清，同时滴一滴生理盐水做对照，以接种环挑少许待检菌于血清中研磨均匀，边搅动边看结果，出现明显凝集者为阳性；同样，以接种环挑少许待检菌于生理盐水中，生理盐水对照应不凝集；试管凝集——肥达反应：实验方法为：用小试管五排，每排七支，标明记号，每个试管中分别加入生理盐水0.5ml；取中号试管一支，加入生理盐水2.7ml及被检血清0.3ml，吸吹三次充分混匀，即为1：10稀释血清；吸取1：10稀释的血清0.5ml分别加入每排的第一个支试管中吸吹三次充分混匀，再从第一个试管吸出0.5ml到第二个试管做倍比稀释，混匀后，再从第二个试管吸出0.5ml到第三个试管并依次类推直至第六管为止，再从第六管吸0.5ml弃去，每排试管稀释方法相同；每排各管的血清稀释度分别为1：20，1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每排第七个试管不加血清，作为抗原对照，分别加入抗原，第一排各管加伤寒沙门菌O抗原0.5ml，第二排各管加伤寒沙门菌H抗原0.5ml，第三排各管加甲型（A）伤寒沙门菌抗原0.5ml，此时各管的病人血清稀释度又增加一倍，依次为1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每管总量1.0ml，振荡混匀，置37℃温箱中18-24小时，取出观察并记录结果；观察结果：先观察对照管，应无凝集现象；再从各排第六管开始向前依次观察，能见到明显凝集现象的血清最高稀释度即为该血清对某种抗原的凝集效价，H抗原呈絮状凝集，O抗原呈颗粒状凝集，分别记录结果，并进行分析，一般认为，伤寒沙门菌O抗体凝集效价在1：80以上，H抗体在1：160以上，甲、乙、丙型副伤寒沙门菌凝集效价在1：80以上才有诊断意义。
有益效果：
1. 本发明通过检测程序可以快速、准确区别和鉴定胃肠道细菌。
．本发明通过对肠道细菌的准确区别和鉴定，及时收集传染病信息，能够及时的对疾病的治疗提供参考。优点和效果记载在相应的实施例中。
本发明可以用于检测环境中的病原微生物。
具体实施方式：
实施例1：
一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，该方法包括如下步骤：取实验材料，首先，分别接种于肠道选择培养基伊红美兰琼脂平板EMB培养基和S.S琼指平板培养基中，放入培养箱中进行分离培养；其次，经过37℃培养26小时后取可疑菌落，无色，半透明细菌菌落分别接种在双糖琼脂斜面培养基中分离培养、鉴别；再次，进行肠道杆菌生化反应实验，最后，进行W.C.D.J.A.染色实验，进行血清学方法做进一步检查。
实施例2：
根据实施例1所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，伊红美兰琼脂平板EMB培养基的制备方法：将pH7.6的普通琼脂培养基灭菌溶化，冷至60℃左右时，每100ml培养基中加入灭菌20%乳糖溶液5ml，灭菌2%伊红水溶液2ml，灭菌0.5%亚甲兰水溶液2ml，充分混匀，倾入灭菌平板即可；S.S琼指平板培养基的制备方法：取普通琼脂培养基100ml、乳糖1gm、枸椽酸钠0.85gm、硫代硫酸钠0.85gm、10%枸椽酸铁溶液1ml、1%中性红水溶液0.25ml、1%粕绿水溶液0.033ml、3号胆盐0.85gm，取高压灭菌15磅30分钟灭菌溶化的琼脂培养基加入乳糖、枸椽酸钠、硫代硫酸钠、枸椽酸铁溶液和3号胆盐，混匀，调pH为7.0，用纱布过滤，高压灭菌8磅20分钟，待冷至65℃左右加入中性红及煌绿水溶液，倾注于无菌平皿。
实施例3：
根据实施例1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，胃肠道细菌分离培养鉴定实验，W.C.D.J.A.六区平板划线法：左手将接种环按无菌操作法沾取少取标本或培养物，左手拿平板略开盖，将标本涂于平板表面之一侧边缘，运用腕力作连续划线要密但不要重叠，不要划破琼脂，占平板面积的1/4，旋转平板70-90°，将接种环火焰灭菌，冷后通过第一次划线区2-3次，再作同样的连续划线又占平板面积约，重复上述操作，划完整个平板，将平板倒放于37℃温箱内，18-24小时，观察各区菌落情况：所述的S.S琼脂平板培养基中，埃希氏大肠杆菌会产生粉红色菌落，菌落特点为边缘整齐、光滑型菌落；志贺氏菌属会形成具有无色透明，光滑湿润凸起的中等大小菌落；所述的伊红美兰EMB琼脂平板培养基中，大肠杆菌会生长为紫黑色有金属光泽，大而凸起，不透明的菌落；志贺氏菌属会形成无色半透明小菌落；沙门氏菌属会生长成为无色半透明较小菌落。
实施例4：
根据实施例1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，所述的W.C.D.J.A.染色实验：取无菌玻片一张加盐水一滴，取接种环按无菌操作方法挑取待检细菌培养物放到盐水中，混匀并涂成一薄层，接种环于火焰上烧灼灭菌，待涂片自然干燥，将标本片在酒精上火焰上来回通过火焰3次，杀死细菌并使细菌固定在玻片上，初染：将已制备好的涂片标本，冷后滴加结晶紫染液、盖满涂膜，约1分钟、轻轻水洗；媒染：滴加卢戈碘液，约1分钟，轻轻水洗；脱色：加95%酒精2-3滴，并立即频频摇动玻片数秒后，斜持玻片使酒精流去，立即水洗；复染：加石炭酸复红稀释液，复染1分钟，水洗；染色完毕，待标本片干后或用吸水纸吸干后，即可镜检，实验结果：埃希氏大肠杆菌：A染色阴性A
-
短小杆菌球杆状；沙门氏菌属：A染色阴性A
-
较细长的杆菌，散在排列；志贺氏菌属：A染色阴性A
-
较细长的杆菌，散在排列。
实施例5：
根据实施例1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，在所述的肠道杆菌生化反应实验中：制备单糖发酵管培养基：在已灭菌的100ml蛋白胨水培养基中，加入体积比为1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂0.1ml，再加入葡萄糖1g或乳糖1g，混合后培养液呈鲜艳紫色；然后分装于内置有玻璃小倒置管的小试管中，每管约3ml，使小倒置管完全浸没，塞好试管塞，包装后置高压蒸汽灭菌器内15到25分钟灭菌，置温度为4℃冰箱中备用；挑取可疑菌落接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖培养基中，然后接种于克氏双糖铁琼脂斜面培养基中，然后接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时；
肠道杆菌的生化反应鉴别表：
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；表示产酸和产气。
实施例6：
根据实施例1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，在生化反应中，将可疑菌落接种到葡萄糖蛋白胨水培养基，VP试验和甲基红试验，枸椽酸盐培养基、尿素培养基等生化培养基中，37℃培养24小时，根据生化反应进行鉴定，常见细菌的生化反应特点，见表2：
表2：常见肠道杆菌的生化反应鉴别表：
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；
表示产酸和产气。
在吲哚实验中，取大肠埃希菌接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时，加入柯氏试剂2滴，摇匀，可见粉红色环状物为吲哚实验阳性，乙型付伤寒杆菌在双糖培养基中产生黑色沉淀物，硫化氢H
2
S实验阳性；细菌在培养箱中经过37℃培养26小时培养增加2小时使其效果更好。
实施例7：
根据实施例1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，在所述的血清学鉴定实验中，玻片凝集反应：实验方法为：取玻片一张，先加上一滴相应多价诊断血清，判断用沙门菌或志贺菌多价血清，同时滴一滴生理盐水做对照，以接种环挑少许待检菌于血清中研磨均匀，边搅动边看结果，出现明显凝集者为阳性；同样，以接种环挑少许待检菌于生理盐水中，生理盐水对照应不凝集；试管凝集——肥达反应：实验方法为：用小试管五排，每排七支，标明记号，每个试管中分别加入生理盐水0.5ml；取中号试管一支，加入生理盐水2.7ml及被检血清0.3ml，吸吹三次充分混匀，即为1：10稀释血清；吸取1：10稀释的血清0.5ml分别加入每排的第一个支试管中吸吹三次充分混匀，再从第一个试管吸出0.5ml到第二个试管做倍比稀释，混匀后，再从第二个试管吸出0.5ml到第三个试管并依次类推直至第六管为止，再从第六管吸0.5ml弃去，每排试管稀释方法相同；每排各管的血清稀释度分别为1：20，1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每排第七个试管不加血清，作为抗原对照，分别加入抗原，第一排各管加伤寒沙门菌O抗原0.5ml，第二排各管加伤寒沙门菌H抗原0.5ml，第三排各管加甲型（A）伤寒沙门菌抗原0.5ml，此时各管的病人血清稀释度又增加一倍，依次为1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每管总量1.0ml，振荡混匀，置37℃温箱中18-24小时，取出观察并记录结果；观察结果：先观察对照管，应无凝集现象；再从各排第六管开始向前依次观察，能见到明显凝集现象的血清最高稀释度即为该血清对某种抗原的凝集效价，H抗原呈絮状凝集，O抗原呈颗粒状凝集，分别记录结果，并进行分析，一般认为，伤寒沙门菌O抗体凝集效价在1：80以上，H抗体在1：160以上，甲、乙、丙型副伤寒沙门菌凝集效价在1：80以上才有诊断意义。
Claims (7)
1.一种医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法 ，其特征是：该方法包括如下步骤：取实验材料，首先，分别接种于肠道选择培养基伊红美兰琼脂平板EMB培养基和S.S琼指平板培养基中，放入培养箱中进行分离培养；其次，经过37℃培养26小时后取可疑菌落，无色，半透明细菌菌落分别接种在双糖琼脂斜面培养基中分离培养、鉴别；再次，进行肠道杆菌生化反应实验，最后，进行W.C.D.J.A.染色实验，进行血清学方法做进一步检查。
2.根据权利要求1所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的伊红美兰琼脂平板EMB培养基的制备方法：将pH7.6的普通琼脂培养基灭菌溶化，冷至60℃左右时，每100ml培养基中加入灭菌20%乳糖溶液5ml，灭菌2%伊红水溶液2ml，灭菌0.5%亚甲兰水溶液2ml，充分混匀，倾入灭菌平板即可；S.S琼指平板培养基的制备方法：取普通琼脂培养基100ml、乳糖1gm、枸椽酸钠0.85gm、硫代硫酸钠0.85gm、10%枸椽酸铁溶液1ml、1%中性红水溶液0.25ml、1%煌绿水溶液0.033ml、3号胆盐0.85gm，取高压灭菌15磅30分钟灭菌溶化的琼脂培养基加入乳糖、枸椽酸钠、硫代硫酸钠、枸椽酸铁溶液和3号胆盐，混匀，调pH为7.0，用纱布过滤，高压灭菌8磅20分钟，待冷至65℃左右加入中性红及煌绿水溶液，倾注于无菌平皿。
3.根据权利要求1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的胃肠道细菌分离培养鉴定实验， W.C.D.J.A.六区平板划线法：左手将接种环按无菌操作法沾取少取标本或培养物，左手拿平板略开盖，将标本涂于平板表面之一侧边缘，运用腕力作连续划线要密但不要重叠，不要划破琼脂，占平板面积的1/4，旋转平板70-90°，将接种环火焰灭菌，冷后通过第一次划线区2-3次，再作同样的连续划线又占平板面积约，重复上述操作五次，划完整个平板，将平板倒放于37℃温箱内，18-24小时，观察各区菌落情况：所述的S.S琼脂平板培养基中，埃希氏大肠杆菌会产生粉红色菌落，菌落特点为边缘整齐、光滑型菌落；志贺氏菌属会形成具有无色透明，光滑湿润凸起的中等大小菌落；所述的伊红美兰EMB琼脂平板培养基中，大肠杆菌会生长为紫黑色有金属光泽，大而凸起，不透明的菌落；志贺氏菌属会形成无色半透明小菌落；沙门氏菌属会生长成为无色半透明较小菌落。
4.根据权利要求1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的W.C.D.J.A.染色实验：取无菌玻片一张加盐水一滴，取接种环按无菌操作方法挑取待检细菌培养物放到盐水中，混匀并涂成一薄层，接种环于火焰上烧灼灭菌，待涂片自然干燥，将标本片在酒精上火焰上来回通过火焰3次，杀死细菌并使细菌固定在玻片上，初染：将已制备好的涂片标本，冷后滴加结晶紫染液、盖满涂膜，约1分钟、轻轻水洗；媒染：滴加卢戈碘液，约1分钟，轻轻水洗；脱色：加95%酒精2-3滴，并立即频频摇动玻片数秒后，斜持玻片使酒精流去，立即水洗；复染：加石炭酸复红稀释液，复染1分钟，水洗；染色完毕，待标本片干后或用吸水纸吸干后，即可镜检，实验结果：埃希氏大肠杆菌：A染色阴性A-短小杆菌球杆状；沙门氏菌属：A染色阴性A-较细长的杆菌，散在排列；志贺氏菌属：A染色阴性A-较细长的杆菌，散在排列。
5.根据权利要求1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的肠道杆菌生化反应实验中：制备单糖发酵管培养基：在已灭菌的100ml蛋白胨水培养基中，加入体积比为1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示剂0.1ml，再加入葡萄糖1g或乳糖1g，混合后培养液呈鲜艳紫色；然后分装于内置有玻璃小倒置管的小试管中，每管约3ml，使小倒置管完全浸没，塞好试管塞，包装后置高压蒸汽灭菌器内15到25分钟灭菌，置温度为4℃冰箱中备用； 挑取可疑菌落接种于葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖培养基中，然后接种于克氏双糖铁琼脂斜面培养基中，然后接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时；
表1 肠道杆菌的生化反应鉴别表
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；
表示产酸和产气。
6.根据权利要求书1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的生化反应试验中，将可疑菌落接种到葡萄糖蛋白胨水培养基，VP试验和甲基红试验，枸椽酸盐培养基、尿素培养基等生化培养基中，37℃培养24小时，根据生化反应进行鉴定，常见细菌的生化反应特点，见表2：
表2 常见肠道杆菌的生化反应鉴别表
注：+表示产酸或阳性；-表示阴性；
表示产酸和产气；
在所述的吲哚实验中，取大肠埃希菌接种于蛋白胨水培养基中，37℃培养26小时，加入柯氏试剂2滴，摇匀，可见粉红色环状物为吲哚实验阳性，乙型付伤寒杆菌在双糖培养基中产生黑色沉淀物，硫化氢H2S实验阳性；细菌在培养箱中经过37℃培养26小时培养增加2小时使其效果更好。
7.根据权利要求书1或2所述的医学微生物学实验胃肠道细菌检测方法，其特征是：所述的血清学鉴定实验中，玻片凝集反应：实验方法为：取玻片一张，先加上一滴相应多价诊断血清，判断用沙门菌或志贺菌多价血清，同时滴一滴生理盐水做对照，以接种环挑少许待检菌于血清中研磨均匀，边搅动边看结果，出现明显凝集者为阳性；同样，以接种环挑少许待检菌于生理盐水中，生理盐水对照应不凝集；试管凝集——肥达反应：实验方法为：用小试管五排，每排七支，标明记号，每个试管中分别加入生理盐水0.5ml；取中号试管一支，加入生理盐水2.7ml及被检血清0.3ml，吸吹三次充分混匀，即为1：10稀释血清；吸取1：10稀释的血清0.5ml分别加入每排的第一个支试管中吸吹三次充分混匀，再从第一个试管吸出0.5ml到第二个试管做倍比稀释，混匀后，再从第二个试管吸出0.5ml到第三个试管并依次类推直至第六管为止，再从第六管吸0.5ml弃去，每排试管稀释方法相同；每排各管的血清稀释度分别为1：20，1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每排第七个试管不加血清，作为抗原对照，分别加入抗原，第一排各管加伤寒沙门菌O抗原0.5ml，第二排各管加伤寒沙门菌H抗原0.5ml，第三排各管加甲型（A）伤寒沙门菌抗原0.5ml，此时各管的病人血清稀释度又增加一倍，依次为1：40，1：80，1：160，1：320，1：640，每管总量1.0ml，振荡混匀，置37℃温箱中18-24小时，取出观察并记录结果；观察结果：先观察对照管，应无凝集现象；再从各排第六管开始向前依次观察，能见到明显凝集现象的血清最高稀释度即为该血清对某种抗原的凝集效价，H抗原呈絮状凝集，O抗原呈颗粒状凝集，分别记录结果，并进行分析，一般认为，伤寒沙门菌O抗体凝集效价在1：80以上，H抗体在1：160以上，甲、乙、丙型副伤寒沙门菌凝集效价在1：80以上才有诊断意义。
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