CN103602590B - 液态发酵制取功能性红曲菌丝体和发酵液的方法及制品 - Google Patents

液态发酵制取功能性红曲菌丝体和发酵液的方法及制品 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种红曲诱变菌株CGMCC8167,以及采用该菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其特征在于,其包括步骤:(1)制备发酵培养基;(2)制取菌株;(3)生产种培养基的制备;(4)发酵处理;(5)发酵后处理;(7)收集菌丝体;(8)收集红曲发酵液。该方法采用液态发酵,其生产工艺先进无污染,取代传统的手工操作模式,操作步骤简单,劳动强度小,周期短,质量稳定性高,适宜规模化生产,而且生物量可定量检测,可达到国际卫生标准。本发明还提供了实施上述方法制备的菌丝体及红曲发酵液制品,其富含多种功能性活性物质,如蛋白质、氨基酸、β-葡聚糖、麦角固醇、莫纳克琳-K、γ-氨基丁酸等成分。

Description

液态发酵制取功能性红曲菌丝体和发酵液的方法及制品
技术领域
本发明涉及微生物及其发酵技术领域,具体涉及红曲诱变菌株、采用诱变菌株、谷类原料液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法及制品。
背景技术
我国红曲菌种资源丰富,无论作为食用还是药用,红曲都起着重要的作用。红曲的潜在价值很大,为了更好的服务于人类,我们应积极利用红曲的药理研发新产品,尤其是洛伐他汀类在降低胆固醇方面的应用,减少动脉粥样硬化发生,防治冠心病等心血管病。同时,做好对桔霉素的检测工作,保证功能性红曲的安全问题。
红曲菌属曲霉科真菌紫色红曲霉,又称红曲菌,传统上红曲菌只在大米中培养发酵中生产,并广泛存在传统的黄酒、食醋等食品领域。近代医学研究报告认为,红曲具有清血、降血压、降血脂、抗氧化及抗骨质疏松等功效,于此,市场中陆续推出了不少的功能性红曲及其产品。
目前,作为原料药(或保健食品、药品等辅料),功能性红曲主要由中国提供,而大部分厂家基本上均采用三角瓶或浅盘培养生产,生产方式落后,并且这种生产方式仍属于传统的固态培养,不仅培养周期长,而且易污染而导致生产失败。不仅如此,固态发酵培养中的谷类淀粉只能少数被红曲菌利用,现有的红曲菌种的发酵速度较慢,并且难以像液态发酵一样发酵完全、彻底,因此,培育一种新的菌种以适应谷类原料的液态发酵,进而生产出具有多功能生物活性的红曲菌丝体,就变得非常关键。
固态发酵生产功能性红曲除了以上存在的不足以外,其还存在的问题就是,工艺复杂,其主要采用手工操作为主,操作步骤繁琐,劳动强度大,周期长,并且质量稳定性不高,不适宜规模化生产,难以实现自动化,标准化,而且生物量检测难以进行,产品中卫生标准难以达到国际标准。
发明内容
本发明针对目前生产红曲工艺方法方面存在的不足,提供一种适用于谷类原料液态发酵的红曲诱变菌株,提供一种高效的液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,同时还提供采用上述菌种及方法制得的菌丝体、红曲发酵液制品。
本发明为实现上述目的而采用的技术方案是:
一种诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus Zheng YZ101),其生物保藏编号为:CGMCC8167,于2013年09月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,该中心地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;分类命名为丛毛红曲,(Monascus pilosus)。
采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)制备发酵培养基:将谷类淀粉原料配制成发酵培养基;
(2)制取菌株:制取诱变菌株丛毛红曲菌(MonascuspilosusZhengYZ101)作为发酵菌种;
(3)生产种培养基的制备:
将步骤2所制取的菌株分别用下列培养基培养:斜面培养基、斜面特制培养基、液态摇瓶培养基;
其中斜面培养基的制备为:取麦芽汁10~20Be作为通用培养基,煮沸,按重量比分别按40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,与步骤1中制取的菌株接种,并进行斜面培养基的培养6~8天;
其中斜面特制培养基的制备为:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉8~15%,麦芽糖1~5%,蛋白胨0.1~0.5%,琼脂2~3%与剩余量的水进行混合,煮沸,与步骤1中培养的斜面培养基,分别按重量比40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,接种并进行斜面特制培养基的培养;
其中液态摇瓶培养基的制备为:制取淀粉8~15%、硝酸钠0.1~0.3%、酵母膏0.1~0.5%、玉米浆0.2~0.5%与剩余量的水进行混合、搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,煮沸,制成液态摇瓶培养基,分别按重量40~70%的量装入三角瓶,灭菌,冷却、接种并进行液态摇瓶培养。
(4)发酵处理:
将谷类发酵培养基,搅拌均匀后泵入生产发酵罐,加入自来水至罐体有效体积的60~80%,加入乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,高温灭菌后冷却至常温,将步骤3中生产的液态摇瓶种接入此发酵液培养基,进行液态发酵培养,使菌株生长出红曲菌丝体,生产出红曲发酵液;所述的高温灭菌时间为20~30min,温度为121~125℃,压力为0.1~0.15Mpa;
液态发酵培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间为80~130H;
(5)发酵后处理:将步骤4中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液,经过压榨、膜过滤后,分离出固体部分和液体部分;
(6)收集菌丝体:将分离出的固体部分(即红曲菌丝体),在温度40~90℃下经真空干燥、粉碎,得到功能性红曲菌丝体粉末;
(7)收集红曲发酵液:将分离出的滤液(即红曲发酵液),收集存储,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料。
(8)将收集的红曲发酵液再通过膜浓缩或采用低温40~70℃条件下进行 浓缩,制成红曲菌发酵的浓缩液,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料;再根据具体配方,配制成多种功能性红曲饮料。
所述步骤(1)中的谷类淀粉原料,为大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米中的一种或几种混合物制得的淀粉。
采用前述方法制备的功能性红曲菌丝体,其特征在于,由诱变菌株丛毛红曲菌(MonascuspilosusZhengYZ101)作为菌种,进行液态发酵制成;其中富含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、β-葡聚糖、麦角固醇、洛伐他汀类、γ-氨基丁酸、膳食纤维素、不饱和脂肪酸及多种微量元素,其蛋白质含量非常丰富,高达干重28~38%以上,具有一定的降血脂、降血压功效。经过适当的处理后添加到食品中在改善其色泽的同时,还可以增加食品的保健功能,可用于功能性保健品及药品的制造。
采用前述方法制备的功能性红曲菌丝体及红曲发酵液,其特征在于,由诱变菌株丛毛红曲菌(MonascuspilosusZhengYZ101)作为菌种,进行液态发酵制成;其中含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、水溶性多糖、洛伐他汀类等可溶性物质及多种微量元素,可用于功能性食品饮料的配制。
本发明提供的诱变红曲菌株丛毛红曲菌(MonascuspilosusZhengYZ101),是经过特别培育而获得的微生物品种,能较好的适应谷类原料的液态发酵工艺,其生命力强、繁殖速度快、生产效率高、代谢过程中不产生桔霉素。
本发明提供的制备方法,采用发酵罐进行液态发酵,不产生污染,其生产工艺先进,取代传统的手工操作模式,操作步骤简单,劳动强度小,周期短,质量稳定性高,适宜规模化生产,而且生物量可定量检测,达到国际卫生标准。
本发明以液态发酵谷类原料所生产的红曲菌丝体和红曲发酵液作为最终 产物,该红曲菌丝体和发酵液具有多功能活性物质:蛋白质、多种氨基酸、β-葡聚糖、膳食纤维素、不饱和脂肪酸等;本发明可以充分利用红曲菌的不同代谢产物,通过发酵同时生产出红曲的菌丝体和发酵液,所产生的红曲菌丝体及发酵液具有多功能的生理活性物质,天然健康、应用广泛,也大幅提升了原材料利用率和产品产出率,可大幅提升经济效益、减少废弃物。
具体实施方式:
实施例1:
一种诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus Zheng YZ101),其生物保藏编号为:CGMCC8167,于2013年09月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,该中心地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;分类命名为丛毛红曲,(Monascus pilosus)。
在其他实施例中,也可以选取其他诱变培育的红曲菌株,如紫色红曲菌(MonascuspurpureusYangYZ202)、红曲红曲菌(MonascusankaYangYZ201)、红色红曲菌(MonascusruberYangYZ102)等菌种。
一种采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,包括以下步骤:
(1)制备发酵培养基:将谷类淀粉原料配制成发酵培养基;
(2)制取菌种:制取诱变菌株丛毛红曲菌(MonascuspilosusZhengYZ101)作为发酵菌种;
(3)生产种培养基的制备:
将步骤2所制取的菌株分别用下列培养基培养:斜面培养基、斜面特制培养基、液态摇瓶培养基;
其中斜面培养基的制备为:取麦芽汁10~20Be作为通用培养基,煮沸,按重量比分别按40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,与步骤1中制取的菌株接种,并进行斜面培养基的培养6~8天;
其中斜面特制培养基的制备为:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉8~15%,硝酸钠0.1~0.3%,麦芽糖1~5%,蛋白胨0.1~0.5%,琼脂2~3%,余量为水,将各组分与水进行混合,煮沸,与步骤1中培养的斜面培养基,分别按重量比40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,接种并进行斜面特制培养基的培养;
其中液态摇瓶培养基的制备为:制取淀粉8~15%、硝酸钠0.1~0.3%、酵母膏0.1~0.5%、玉米浆0.2~0.5%,余量为水,将各原料与水进行混合、搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,煮沸,制成液态摇瓶培养基,分别按重量40~70%的量装入三角瓶,灭菌,冷却、接种并进行液态摇瓶培养。
(4)发酵处理:
将谷类发酵培养基按照重量百分比计算的谷类淀粉8~20%、硝酸钠0.1~0.3%、玉米浆0.2~0.5%,余量为水,将各原料与水进行混合,搅拌均匀后泵入生产发酵罐,加入自来水至罐体有效体积的60~80%,用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,高温灭菌后冷却至常温,将步骤3中生产的液态摇瓶种接入此发酵液培养基,进行液态发酵培养,使菌株生长出红曲菌丝体,生产出红曲发酵液;所述的高温灭菌时间为20~30min,温度为121~125℃,压力为0.1~0.15Mpa;
液态发酵培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间为80~130H;
(5)发酵后处理:将步骤4中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液,经过压榨、膜过滤后,分离出固体部分和液体部分;
(6)收集菌丝体:将分离出的固体部分,即红曲菌丝体,在温度40~90℃下经真空干燥、粉碎,得到功能性红曲菌丝体粉末;
(7)收集红曲发酵液:将分离出的滤液,即红曲发酵液,收集存储,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料;
(8)将收集的红曲发酵液再通过膜浓缩或采用真空低温40~70℃条件下进行浓缩,制成红曲发酵液的浓缩液,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料。
所述步骤(1)中的谷类淀粉原料,为大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米中的一种或几种混合物制得的淀粉。
采用前述方法制备的功能性红曲菌丝体,其由诱变菌株丛毛红曲菌MonascuspilosusZhengYZ101作为菌种,进行液态发酵制成;其富含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、β-葡聚糖、麦角固醇、洛伐他汀类、γ-氨基丁酸、膳食纤维素、不饱和脂肪酸及多种微量元素,其蛋白质干重含量为28~38%,具有降血脂、降血压功效,经过处理后添加到食品中在改善其色泽的同时,还可以增加食品的保健功能,可作为制造三高血治疗、抗氧化、防老年痴呆、抗骨质疏松及减肥功能性保健品或药品的原料。
采用前述方法制备的功能性红曲发酵液,其由诱变菌株丛毛红曲菌MonascuspilosusZhengYZ101作为菌种,进行液态发酵制成;其含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、水溶性多糖、洛伐他汀类等可溶性物质及多种微量元素,可作为功能性食品饮料的原料。
实施例2:
本实施例提供的红曲诱变菌株、采用该诱变菌株及谷类原料,液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法及制品,均与实施例1基本相同,其不同之处在于:
采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其包括如下步骤:
(1)制取丛毛红曲菌MonascuspilosusZhengYZ101作为发酵菌种;
(2)生产培养基的制备:
a、斜面培养基的制备:取麦芽汁10Be作为通用培养基,煮沸,分别按重量的40%装入试管,灭菌,冷却,制成斜面培养基,接入与步骤1中制取的紫色红曲菌株进行斜面培养基的培养。
b、斜面特制培养基的制备:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉8%,麦芽糖1%,蛋白胨0.1%,琼脂2%,余量为水,将各原料与水进行混合,煮沸,制成斜面培养基培养液,分别按重量比40%的量装入试管,灭菌,冷却,与步骤1中制取的菌株接种,进行斜面特制培养基的培养;
c、液态摇瓶培养基的制备:制取淀粉8%、硝酸钠0.1%、酵母膏0.2%、玉米浆0.2%,余量为水,将各原料与水进行混合、搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为3.5,煮沸,制成液态摇瓶培养基,分别按重量40%的量装入三角瓶,灭菌,冷却,与步骤2中培养的斜面特制培养基,进行液态摇瓶培养。培养温度:25~35℃,培养时间:20~48H。
(3)发酵处理:
将谷类淀粉原料配制而成的发酵培养液,搅拌均匀后泵入发酵罐,加入水定容、使用乳酸或醋酸调节pH值为3.5,进行高温灭菌,灭菌时间为20min,所述温度为121~125℃,压力为0.1~0.15Mpa,冷却至常温,将步骤2中生产的液态摇瓶种接入发酵培养基,进行液态发酵培养生成红曲菌丝体和红曲发酵液;此处谷类淀粉原料为优质食物类富淀粉谷类淀粉,如大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米等,也可以为这些谷类的任意组合所生产的淀粉;其中发酵培养液为:按照重量百分比计算的谷类淀粉10%、硝酸钠0.1%、酵母膏0.2%、玉米浆0.2%,余量为水,将各原料与水进行混合制成。液态发酵过程培荞的条 件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间为80~130H。
在发酵培养过程中,还应定期取样分析其理化指标并及时进行补充营养液。营养液配方:谷类淀粉5~10%、酵母膏0.1~0.5%(或蛋白胨0.1~0.5%),与用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0的酸水进行混合制成,酸水为余量。
(4)发酵后处理:将步骤3中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液经过压榨、过滤,再将功能性红曲菌丝体经真空干燥、粉碎,其中干燥温度为40~90℃,再经过80~200目筛网过筛、包装得到功能性红曲菌丝体粉末。将滤液(即红曲发酵液)收集制成功能性红曲饮料,也可通过膜浓缩或采用低温40~70℃下浓缩,制成功能性红曲发酵的浓缩液,再根据客户要求配成功能性红曲饮料。
再经喷雾干燥、粉碎,得到所述功能性红曲菌丝体,再经过80~200目筛网过筛、包装得到功能性红曲菌丝体粉末。
本实施例还可以选取红曲菌株为诱变紫色红曲菌(Monascuspurpureus YangYZ202)作为发酵菌种。
实施例3:
本实施例提供的红曲诱变菌株,采用该诱变菌株及谷类原料,液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法及制品,均与实施例1、2基本相同,其不同之处在于:
采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其包括如下步骤:
(2)生产培养基的制备:
a、斜面培养基的培养:取麦芽汁15Be作为通用培养基,煮沸,制成斜面 培养基培养液,分别按重量比45%的量装入茄子瓶,灭菌,冷却,接入与步骤1中制取的红色红曲菌进行斜面培养基的培养。
b、斜面特制培养基的培养:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉10%,麦芽糖5%,蛋白胨0.5%,琼脂3%进行与剩余量的水进行混合,煮沸,制成斜面培养基培养液,分别按重量比45%的量装入茄子瓶,灭菌,冷却,接种,进行斜面特制培养基的培养;
c、液态摇瓶培养基的培养:制取淀粉10%、硝酸钠0.2%、酵母膏0.3%、玉米浆0.5%与剩余量的水进行混合搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为4.5,煮沸,制成液态摇瓶培养基,分别按重量45%的量装入三角瓶,灭菌,冷却,与步骤2中培养的斜面特制培养基,进行液态摇瓶培养。培养温度:25~35℃,培养时间:20~48H。
(3)发酵处理:
将谷类淀粉原料配制而成的发酵培养液,搅拌均匀后泵入发酵罐,加入水定容、使用乳酸调节pH值为4.5,进行高温灭菌,灭菌时间为30min,温度为121~125℃,压力为0.1~0.12Mpa,高温灭菌后冷却至常温制成发酵培养基,将步骤2中生产的液态摇瓶种接入进行液态发酵培养;此处谷类淀粉原料为优质食物类富淀粉谷类淀粉,如大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米等,也可以为这些谷类的任意组合所生产的淀粉。发酵此处的发酵培养基为:按照重量百分比计算的谷类淀粉12%、硝酸钠0.2%、酵母膏0.3%、玉米浆0.5%与剩余量的水进行混合制成;液态发酵过程的培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间80~130H。
在发酵培养过程中,应定期取样分析其理化指标并及时进行补充营养液。营养液配方:谷类淀粉5~10%、酵母膏0.1~0.5%(或蛋白胨0.1~0.5%),余 量为酸水,将各原料与用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0的酸水进行混合制成。
(4)发酵后处理:将步骤3中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液经过压榨、过滤,再将功能性红曲菌丝体经真空干燥、粉碎,其中干燥温度为40~90℃,再经过80~200目筛网过筛、包装得到功能性红曲菌丝体粉末。将滤液(即红曲发酵液)收集制成功能性红曲饮料,也可通过膜浓缩或采用低温40~70℃下浓缩,制成功能性红曲发酵的浓缩液,再根据客户要求配成功能性红曲饮料。
实施例4
实施例提供的红曲诱变菌株,采用该诱变菌株及谷类原料,液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法及制品,均与实施例1、2、3均基本相同,其不同之处在于:
采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其包括如下步骤:
(2)生产培养基的制备:
a、斜面培养基的培养:取麦芽汁18Be作为通用培养基,煮沸,制成斜面培养基培养液,分别按重量比60%的量装入茄子瓶,灭菌,冷却,接入与步骤1中制取的紫色红曲菌菌株,进行斜面培养基的培养。
b、斜面特制培养基的培养:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉12%,麦芽糖3%,蛋白胨2.5%,琼脂2.5%进行与剩余量的水进行混合,煮沸,制成斜面培养基培养液,分别按重量比60%的量装入试管,灭菌,冷却,接入与步骤1中制取的紫色红曲菌菌株,进行斜面特制培养基的培养;
c、液态摇瓶培养基的培养:制取淀粉12%、硝酸钠0.2%、酵母膏0.2%、 玉米浆0.4%与剩余量的水进行混合、搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为4.0,煮沸,制成液态摇瓶培养基培养液,分别按重量比60%的量装入三角瓶,灭菌,冷却,接入与步骤b中制取的紫色红曲菌菌株,进行液态摇瓶培养。培养温度:25~35℃,培养时间:20~48H。
(3)发酵处理:
将谷类淀粉原料配制而成的发酵培养液,搅拌均匀后泵入发酵罐,加入水定容、使用乳酸调节pH值为4.0,进行高温灭菌,灭菌时间为20~30min,所述温度为121~125℃,压力为0.1~0.15Mpa,将步骤2中生产的液态摇瓶种接入,进行液态发酵培养;此处谷类淀粉原料为优质食物类富淀粉谷类淀粉,本实施例为大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米的任意比例组合所生产的淀粉。发酵此处的发酵培养基为:按照重量百分比计算的谷类淀粉15%、硝酸钠0.3%、酵母膏0.4%、玉米浆0.4%与水进行混合制成;液态发酵培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间80~130H。
在发酵培养过程中,应定期取样分析其理化指标并及时进行补充营养液。营养液配方:谷类淀粉5~10%、酵母膏0.1~0.5%(或蛋白胨0.1~0.5%),与用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0的酸水进行混合制成,剩余量即为酸水。
(4)发酵后处理:将步骤3中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液经过压榨、过滤,再将功能性红曲菌丝体经真空干燥、粉碎,其中干燥温度为40~90℃,再经过80~200目筛网过筛、包装得到功能性红曲菌丝体粉末。将滤液(红曲发酵液)收集制成红曲饮料,也可通过膜浓缩或采用低温40~70℃条件下浓缩,制成功能性红曲发酵的浓缩液,再根据客户要求配成功能性红曲饮料。
本实施例还可以选取诱变菌株红曲红曲菌(MonascusankaYangYZ201)作 为发酵菌种。
实施例5
实施例提供的红曲诱变菌株,采用该诱变菌株及谷类原料,液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法及制品,均与实施例1、2、3、4均基本相同,其不同之处在于:
采用前述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其包括如下步骤:
(2)生产培养基的制备:
将步骤1所制取的菌株逐次进行下列培养基培养:
a、斜面培养基的培养:取麦芽汁18Be作为通用培养基,煮沸,制成斜面培养基培养液,与步骤1中制取的紫色红曲菌菌株按重量比分别按70%的量装入茄子瓶,进行斜面培养基的培养。
b、斜面特制培养基的培养:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉10%,麦芽糖3%,蛋白胨2.5%,琼脂2.5%进行与水进行混合,煮沸,制成斜面培养基培养液,分别按重量比70%的量装入试管,灭菌,冷却,接入与步骤a中培养的斜面培养基,进行斜面特制培养基的培养;
c、液态摇瓶培养基的培养:制取淀粉10%、硝酸钠0.2%、酵母膏0.3%、玉米浆0.3%,与剩余量的水进行混合搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为5.0,煮沸,制成液态摇瓶培养基培养液,分别按重量70%的量装入三角瓶,与步骤2中培养的斜面特制培养基进行液态摇瓶培养。培养温度:25~35℃,培养时间:20~40H。
(3)发酵处理:
将谷类淀粉原料配制而成的发酵培养液,进行高温灭菌,灭菌时间为 25min,温度为121~124℃℃,压力为0.1~0.15Mpa,高温灭菌后冷却至常温制成发酵培养基,使用乳酸或醋酸调节pH值为5.0,将步骤2中生产的液态摇瓶种接入发酵培养基,进行液态发酵培养生成红曲菌丝体。
此处谷类淀粉原料为优质食物类富淀粉谷类淀粉,为大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米、高粱、小米中的任意组合物所生产的淀粉。
发酵此处的发酵培养液为:按照重量百分比计算的谷类淀粉18%、硝酸钠0.3%、酵母膏0.5%、玉米浆0.5%与剩余量的水进行混合制成;液态发酵培养的培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间80~130H。
(4)发酵后处理:将步骤3中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液经过压榨、过滤,再将功能性红曲菌丝体经真空干燥、粉碎,其中干燥温度为40~90℃,再经过80~200目筛网过筛、包装得到功能性红曲菌丝体粉末。将滤液(即红曲发酵液)收集制成功能性红曲饮料,也可通过膜浓缩或采用低温40~70℃下浓缩,制成功能性红曲发酵的浓缩液,再根据客户要求配成功能性红曲饮料。
本实施例的菌种还可以选取诱变菌株红色红曲菌(MonascusruberYang YZ102),或者诱变红曲红曲菌(MonascusankaYangYZ201),作为发酵菌种。
本发明制得的红曲菌丝体粉体及红曲发酵液,是具备基本生物药效功能的原材料或作为办成品直接供应市场,根据需要还可以制成所需的食品配料或功能食品,如将本发明的红曲菌丝体粉末可作为食品添加辅料、赋形剂等制成具有相应保健功能的药片。本发明提供的红曲发酵液可以做成功能性红曲饮料。
以上所述实施例,只是本发明的较佳实例,并非来限制本发明实施范围,故采用与本发明文件所述记载的组分、比例、步骤、制品等相同或相近的技术 方案,均包括于本发明保护范围内。

Claims (8)

1.一种诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus)Zheng YZ101,其生物保藏编号为:CGMCC 8167。
2.一种采用权利要求1所述诱变菌株液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)制备发酵培养基:将谷类淀粉原料配制成发酵培养基;
(2)制取菌种:制取诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus)Zheng YZ101作为发酵菌种;
(3)生产种培养基的制备:
将步骤(2)所制取的菌株分别用下列培养基培养:斜面培养基、斜面特制培养基、液态摇瓶培养基;
其中斜面培养基的制备为:取麦芽汁10~20Be作为通用培养基,煮沸,按重量比分别按40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,与步骤(1)中制取的菌株接种,并进行斜面培养基的培养6~8天;
其中斜面特制培养基的制备为:取按照重量百分比计算的可溶性淀粉8~15%,硝酸钠0.1~0.3%,麦芽糖1~5%,蛋白胨0.1~0.5%,琼脂2~3%与剩余量的水进行混合,煮沸,与步骤1中培养的斜面培养基,分别按重量比40~70%的量装入试管或茄子瓶,灭菌,冷却,接种并进行斜面特制培养基的培养;
其中液态摇瓶培养基的制备为:制取淀粉8~15%、硝酸钠0.1~0.3%、酵母膏0.1~0.5%、玉米浆0.2~0.5%与剩余量的水进行混合、搅拌均匀,再用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,煮沸,制成液态摇瓶培养基,分别按重量40~70%的量装入三角瓶,灭菌,冷却、接种并进行液态摇瓶培养;
(4)发酵处理:
将谷类发酵培养基按照重量百分比计算的谷类淀粉8~20%、硝酸钠0.1~0.3%、玉米浆0.2~0.5%与剩余量的水进行混合,搅拌均匀后泵入生产发酵罐,加入自来水至罐体有效体积的60~80%,用乳酸或醋酸调节pH值为3.0~5.0,高温灭菌后冷却至常温,将步骤(3)中生产的液态摇瓶种接入此发酵液培养基,进行液态发酵培养,使菌株生长出红曲菌丝体,生产出红曲发酵液;所述的高温灭菌时间为20~30min,温度为121~125℃,压力为0.1~0.15Mpa;
液态发酵培养条件为:温度为25~35℃,通风比为1:0.3~1.5;发酵罐内压力为0.03~0.08MPa,时间为80~130H;
(5)发酵后处理:将步骤(4)中已培养好的红曲菌丝体和红曲发酵液,经过压榨、膜过滤后,分离出固体部分和液体部分;
(6)收集菌丝体:将分离出的固体部分,即红曲菌丝体,在温度40~90℃下经真空干燥、粉碎,得到功能性红曲菌丝体粉末;
(7)收集红曲发酵液:将分离出的滤液,即红曲发酵液,收集存储,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料。
3.根据权利要求2所述液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其特征在于,还包括以下步骤:
(8)将收集的红曲发酵液再通过膜浓缩或采用真空低温40~70℃条件下进行浓缩,制成红曲发酵液的浓缩液,作为进一步制成功能性红曲饮料的原料。
4.根据权利要求2所述液态发酵制取功能性红曲菌丝体和红曲发酵液的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的谷类淀粉原料,为大米、大麦、小麦、燕麦、荞麦、玉米中的一种或几种混合物制得的淀粉。
5.根据权利要求2~4之一所述方法制备的功能性红曲菌丝体,其特征在于,其由诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus)ZhengYZ101作为菌种,进行液态发酵制成。
6.根据权利要求5所述的功能性红曲菌丝体,其特征在于,其富含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、β-葡聚糖、麦角固醇、洛伐他汀类、γ-氨基丁酸、膳食纤维素、不饱和脂肪酸及多种微量元素,其蛋白质干重含量为28~38%,具有降血脂、降血压功效,经过处理后添加到食品中在改善其色泽的同时,还可以增加食品的保健功能,可作为制造三高血治疗、抗氧化、防老年痴呆、抗骨质疏松及减肥功能性保健品或药品的原料。
7.根据权利要求2~4之一所述方法制备的功能性红曲发酵液,其特征在于,其由诱变菌株丛毛红曲菌(Monascus pilosus)ZhengYZ101作为菌种,进行液态发酵制成。
8.根据权利要求7所述的功能性红曲发酵液,其特征在于,其含有功能性生理活性物质蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、水溶性多糖、洛伐他汀类可溶性物质及多种微量元素,可作为功能性食品饮料的原料。
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