CN103585226B - 一种毛莲菜提取物的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种毛莲菜提取物的制备方法及其应用。其制备方法是将毛莲菜提取后，通过高速逆流色谱法、聚酰胺等色谱纯化技术，得到毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C，将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C按一定比例混合，即为毛莲菜提取物。该毛莲菜提取物，可与药学上可接受的载体或其他适宜辅料相结合，按照常规方法制成口服给药的剂型，可用于制备预防和治疗糖尿病的药物。

Description

一种毛莲菜提取物的制备方法及其应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种中药材提取物的制备方法及应用，具体是涉及一种毛莲菜提取物的制备方法及其在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用。

背景技术

随着世界人口的老龄化，糖尿病已经成为一种常见病、多发病，在工业发达国家其发病率呈上升趋势。据统计，全世界约有1.5亿糖尿病患者，80%为非胰岛素依赖型糖尿病（2型），其中我国约有3000万。由糖尿病并发症引起的死亡人数在发达国家已是继心脑血管疾病、癌症之后列第三位，引起了世界各国的高度重视，纷纷对糖尿病的发病机制、药物防治等进行研究。由于1型糖尿病病因已基本明确，只需补充胰岛素即可，而2型糖尿病则较复杂，目前我国医学界对其采取的是包括饮食疗法、药物治疗与其它辅助疗法的综合治疗措施。西药虽然层出不穷，但不能从根本上解决问题，而且西药治疗具有一定的副作用及“治疗失效”。中医药治疗糖尿病历史悠久，临床经验丰富，疗效显著，已成为近年来国内外研究热点。中医学对糖尿病的认识与西医不同，中医强调整体观，以阴、阳二者的变化反映疾病的本质。正常机体是“阴平阳秘”，阴阳平衡，即机体内环境维持稳态，糖代谢也维持稳定；并且中药的毒副作用相对较小，病人可长期服用，这是西药所不能比拟的独特的优势。

毛莲菜：本品为菊科植物毛莲菜（Picris japonica T hunb.）的干燥地上部分。夏、秋二季花开时采收，除去杂质，晒干。收载于1998年《中华人民共和国卫生部药品标准 蒙药分册》。性凉、糙，味苦。杀“粘”，止痛，清热，消肿，解毒。用于瘟疫，结喉，乳腺炎，胸刺痛，腮腺炎，阵刺痛。为我国藏蒙等少数民族地区的常用药物。但有关毛莲菜的基础研究尚十分有限，使该药材的后续推广和应用受到限制。现代研究表明，毛莲菜含有毛连菜苷（picriside）A、B、C，山莴苣素（lactucin），11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin），假还阳参甙（caepidiaside）A及苦荬菜内酯（ixerin）F等，还含有多糖和黄酮类化合物，其他化学成分不详；药理作用研究表明，毛莲菜水提取，过D101大孔树脂，水洗脱部分具有降血糖，调节血脂作用。详见文献：席啸虎，葛睿，高建平。日本毛连菜水洗部位降血糖、调血脂作用研究，中国医药导报，2011,8（13）:34-36。其他药理作用未见报道。

国内专利检索结果，未见毛莲菜相关专利。

上述文献及专利等，尚未见采用高速逆流色谱法、聚酰胺等色谱纯化技术制备毛莲菜提取物的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种毛莲菜提取物的制备方法及其在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用。

本发明所用毛莲菜为菊科植物毛莲菜（Picris japonica T hunb.）的干燥地上部分。

一种毛莲菜提取物的制备方法及其应用，所述毛莲菜提取物的制备方法为：

（1）毛莲菜，用浓度65%乙醇作为溶剂，在10℃-35℃温浸提取，提取次数为1-5次，每次提取时间为12-48小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的21-25倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加5-20倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得到毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度10%-70%的乙醇溶液进行洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得到毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C按一定比例混匀，即得本发明的毛莲菜提取物。

毛莲菜提取物的制备方法为：

（1）毛莲菜，用浓度65%乙醇作为溶剂，在25℃温浸提取，提取次数为3次，每次提取时间为24小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的23倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加15倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得到毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度60%的乙醇溶液进行洗脱，收集60%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得到毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C混匀，即得本发明的毛莲菜提取物。

本发明的毛莲菜提取物的制备方法，其特征在于：所述的毛莲菜提取物B在毛莲菜提取物中的含量为质量分数10%-90%。

本发明的毛莲菜提取物的制备方法，其特征在于：所述的毛莲菜提取物B主要含有：中美菊素 C （Zaluzanin C）；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷（9α-Hydroxy-11β,13-dihydrozaluzanin C 3-O-β-allopyranoside）；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A（picriside A)；毛连菜苷B（picriside B)；毛连菜苷C（picriside C)；山莴苣素（lactucin)；11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin)等成分。

本发明的毛莲菜提取物的制备方法，其特征在于：所述的毛莲菜提取物C在毛莲菜提取物中的含量为质量分数10%-90%。

本发明的毛莲菜提取物的制备方法，其特征在于：所述的毛莲菜提取物C主要含有：木犀草素（luteolin），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素（hypericin），金丝桃苷（hyperoside）等成分。

本发明的毛莲菜提取物，可通过加入药剂学允许的各种辅料,制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊等口服剂型。

本发明的毛莲菜提取物的制备方法应用为毛莲菜提取物在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用。

本发明的毛莲菜提取物、以及毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C，可用于制备预防和治疗糖尿病药物。

本发明的毛莲菜提取物、毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C与化学药或中药或天然药物组成预防和治疗糖尿病药物。

本发明的毛莲菜提取物与化学药或中药或天然药物组成预防和治疗糖尿病药物。

本发明首次对毛莲菜采用高速逆流色谱、聚酰胺色谱技术进行降糖提取物制备研究，分离得到了具有降糖活性的提取物，包括毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C，二者按一定比例混合即得本发明的毛莲菜提取物。制备工艺操作简便，生产成本低，适于工业化大生产。

本发明提供的毛莲菜提取物，通过观察对链脲霉素性大鼠糖尿病的治疗作用，结果表明，毛莲菜提取对STZ-DM大鼠糖代谢有明显的改善作用，对葡萄糖引起的血糖升高有明显的拮抗作用；对STZ-DM大鼠血脂代谢障碍有明显的改善作用，表现在血CHO，TG，LDL水平的降低，HDL水平的升高；对STZ-DM大鼠血MDA水平有显著的降低作用，表明本品有一定的抗氧化作用；对链脲霉素造成胰岛细胞损伤有一定的修复作用。毛莲菜提取等对正常大鼠的空腹血糖和血清胰岛素没有明显的影响，对正常大鼠的血脂代谢亦没有显著的影响。

具体实施方式

下面通过具体实验例和实施例对一种毛莲菜提取物的制备方法及其应用做进一步说明但不限于本发明。

实施例1：毛莲菜提取物及单体化合物制备

（1）毛莲菜30kg，用浓度65%乙醇作为溶剂，在25℃温浸提取，提取次数为3次，每次提取时间为24小时，每次溶剂用量为药材重量的23倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加15倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法(HSCCC)，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，即得到毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度60%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C混匀，即得本发明的毛莲菜提取物，其中毛莲菜提取物B占65%和毛莲菜提取物C占35%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物B，再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱（10:0.5-5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，丙酮-乙烷（1:2）重结晶，分别得到中美菊素 C （Zaluzanin C）；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷（9α-Hydroxy-11β,13-dihydrozaluzanin C 3-O-β-allopyranoside）；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A（picriside A)；毛连菜苷B（picriside B)；毛连菜苷C（picriside C)；山莴苣素（lactucin)；11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin)等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98.5%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物C，再经200-300目硅胶柱层析，以三氯甲烷-甲醇梯度洗脱（100:1-2.5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，甲醇重结晶，分别得到木犀草素（luteolin），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素（hypericin），金丝桃苷（hyperoside）等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。

实施例2：毛莲菜提取物及单体化合物制备

（1）毛莲菜10kg，用浓度65%乙醇作为溶剂，在10℃温浸提取，提取次数为5次，每次提取时间为48小时，每次溶剂用量为药材重量的25倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加20倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法(HSCCC)，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，即得到毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度10%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集10%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C按一定比例混匀，即得本发明的毛莲菜提取物，其中毛莲菜提取物B占90%和毛莲菜提取物C占10%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物B，再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱（10:0.5-5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，丙酮-乙烷（1:2）重结晶，分别得到中美菊素 C （Zaluzanin C）；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷（9α-Hydroxy-11β,13-dihydrozaluzanin C 3-O-β-allopyranoside）；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A（picriside A)；毛连菜苷B（picriside B)；毛连菜苷C（picriside C)；山莴苣素（lactucin)；11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin)等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98.5%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物C，再经200-300目硅胶柱层析，以三氯甲烷-甲醇梯度洗脱（100:1-2.5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，甲醇重结晶，分别得到木犀草素（luteolin），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素（hypericin），金丝桃苷（hyperoside）等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。

实施例3：毛莲菜提取物及单体化合物制备

（1）毛莲菜10kg，用浓度65%乙醇作为溶剂，在35℃温浸提取，提取次数为1次，每次提取时间为12小时，每次溶剂用量为药材重量的21倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加5倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法(HSCCC)，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，即得到毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度70%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C按一定比例混匀，即得本发明的毛莲菜提取物，其中毛莲菜提取物B占10%和毛莲菜提取物C占90%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物B，再经200-300目硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱（10:0.5-5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，丙酮-乙烷（1:2）重结晶，分别得到中美菊素 C （Zaluzanin C）；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷（9α-Hydroxy-11β,13-dihydrozaluzanin C 3-O-β-allopyranoside）；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A（picriside A)；毛连菜苷B（picriside B)；毛连菜苷C（picriside C)；山莴苣素（lactucin)；11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin)等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98.5%。

如上所述方法制备毛莲菜提取物C，再经200-300目硅胶柱层析，以三氯甲烷-甲醇梯度洗脱（100:1-2.5:1），薄层跟踪检测，合并相同流份，静置析晶，抽滤，甲醇重结晶，分别得到木犀草素（luteolin），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素（hypericin），金丝桃苷（hyperoside）等成分，以上各化合物的化学结构均经质谱和核磁共振等波谱手段确证，纯度经高效液相色谱检测均大于98%。

实施例4:毛莲菜提取物片的制备

取实施例1毛莲菜提取物155g，加入淀粉60g，混匀，制粒，干燥，过筛，加15g微晶纤维素，0.5g硬脂酸镁，混匀，压制成1000片, 即得毛莲菜提取物片。

实施例5：毛莲菜提取物颗粒的制备

取实施例2毛莲菜提取物155g，加入糊精100g，混匀，制粒，干燥，整粒，，即得毛莲菜提取物颗粒。

实施例6：毛莲菜提取物胶囊的制备

取实施例3毛莲菜提取物155g，加入淀粉80g，混匀，制粒，干燥，过筛，装胶囊1000粒，即得毛莲菜提取物胶囊。

实验例1：毛莲菜提取物对链脲霉素糖尿病大鼠的治疗作用

链脲霉素糖尿病动物模型造模：将链脲霉素（STZ）溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH4.5)中，临用前配制。大鼠常用量为60-80mg/kg (ip或iv)。一次足量给予动物链脲霉素，造成β细胞大量损伤，胰岛素合成和分泌减少，引起糖代谢紊乱，导致糖尿病。将STZ溶液用0.1mol/L 无菌枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液新鲜配制成2%溶液，调节pH至4.5，滤菌器过滤除菌。大鼠禁食10h按50-65 mg/kg 体重腹腔内或尾静脉一次性注射STZ溶液，24h内随机血糖≥16.7 mmol/L，稳定5d即可作为成功模型。

药物：毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C、毛莲菜提取物（实施例1方法制备得到，批号分别为：20120203、20120204、20120205、20120206）。药物配制：分别取粉末200mg溶于40ml蒸馏水中，制成混悬液。

阳性药：降糖灵，山东省医药工业研究所制药厂出品，批号120115。优降糖，山东省医药工业研究所制药厂出品，批号120136。链脲霉素(STREPTOZOCIN，STZ)， 规格：1g/瓶，批号：015K1279，SIGMA公司。

仪器：日本京都II型GLUCOCARO血糖仪，全自动生化测定仪，美国产12孔γ-放免测定仪。

试剂：京都血糖仪所用血糖电极片、全自动生化仪所用血脂试剂，天津德普公司 (DPC) 提供的胰岛素放免试剂盒。

动物：Wistar大鼠，购于山东省实验动物中心。合格证号：鲁动质130101。

链脲霉素糖尿病大鼠的试验：取上述Wistar大鼠280只，雌雄各半，体重160-200g。稳定饲料1w，期间取血测空腹血糖2次，以3.6-5.4mmol/L为入选动物标准。其中40只作为正常对照备用。其余240只用链脲霉素 (STZ)造模，造模后7-10d复测空腹血糖，以大于13.8mmol/L作为模型成功大鼠。

将链脲霉素性糖尿病(STZ--DM)大鼠60只随机分为造模，毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C、毛莲菜提取物、降糖灵共6组，每组各10只，并设正常对照组10只。毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C、毛莲菜提取物，均按生药量0.5g/kg给药，降糖灵9 mg/kg给药，连续口服葡萄糖耐量试验(1.5 g/kg)，尾静脉取血分别测空腹、口服葡萄糖后30min，60min，90min，120min的血糖水平，计算空腹血糖及葡萄糖灌胃后60min血糖区线面积(AUC)。

另取STZ-DM大鼠60只，分组、给药剂量和方法同前。试验前禁食8h，末次给药后12h,空腹眶静脉取血检测胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平。

另取STZ-DM大鼠60只，分组、给药剂量和方法同前。试验前禁食8h，末次给药后12h,空腹眶静脉取血，按文献TCA-TBA法，于波长535nm检测样品吸收值，以反映MDA水平。

另取STZ-DM大鼠60只，分组、给药剂量和方法同前。试验前禁食8h，末次给药后12h，按口服葡萄糖耐量试验(1.5 g/kg)方法进行，尾静脉取血分别测空腹、口服葡萄糖后30min，60min， 120min的胰岛素水平，之后将动物处死，迅速取胰腺固定，进行病理学检查。

正常大鼠的试验：取上述Wistar大鼠120只，雌雄各半，体重160-200g。稳定饲料1w，期间取血测空腹血糖2次，以3.6-5.4mmol/L为入选动物标准。然后随机分为正常，毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C、毛莲菜提取物，降糖灵共6组。毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C、毛莲菜提取物，均按生药量0.5g/kg给药，降糖灵组1.35mg/kg给药，连续给药20d。正常对照组给等体积水灌胃。试验前禁食8h，末次给药后12h，空腹每组各10只尾静脉取血测血糖、胰岛素水平；每组各10只眶静脉取血测血脂水平。

试验结果：

(1) 毛莲菜提取物对STZ-DM大鼠糖代谢的影响  表1结果可见，毛莲菜提取物对STZ-DM大鼠空腹血糖升高有明显的降低作用，与造模组比较均有极显著差异。表1结果表明，毛莲菜提取物等对STZ-DM大鼠糖代谢有显著的改善作用，对葡萄糖引起的血糖升高有显著的降低作用，明显降低血糖区线面积，与造模组比较均有极显著差异。其对STZ-DM大鼠葡萄糖耐量的影响见表2；

表1  毛莲菜提取物等对STZ-DM大鼠空腹血糖的影响  (mmol/L)

（注明：x±s；②n=10；③与正常组比较1) P<0.05, 2) P<0.01，3）P<0.001；④与造模组比较4）P<0.05，5) P<0.01，6) P<0.001。下表2-表4注明同表1）

表2  毛莲菜提取物对STZ-DM 大鼠葡萄糖耐量的影响。

(2) 毛莲菜提取物对STZ-DM大鼠脂代谢的影响  结果表明，毛莲菜提取对STZ-DM大鼠脂代谢障碍有明显的改善作用，表现在血CHO，TG，LDL水平的降低，HDL水平的升高。

 (3) 毛莲菜提取对STZ-DM大鼠血MDA含量的影响  结果表明，毛莲菜提取、毛莲菜提取物A、毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C对STZ-DM大鼠血MDA水平有明显的降低作用，与造模组比较，均有显著性差异。表明毛莲菜提取有一定的抗氧化作用。

(4) 毛莲菜提取物对STZ-DM大鼠胰岛β-细胞功能的影响

结果表明，给糖负荷前造模组血清胰岛素水平明显低于正常组，说明链脲霉素对胰岛β-细胞造成一定损伤；毛莲菜提取组血清胰岛素水平明显高于造模组，说明毛莲菜提取对STZ-DM大鼠胰岛β-细胞损伤有一定的修复作用。正常大鼠给糖负荷后30min血清胰岛素分泌增多，60min出现胰岛素分泌高峰，其后逐渐下降；毛莲菜提取组在给糖负荷30min血清胰岛素水平迅速升高，且明显高于造模组，对于改善STZ-DM的糖代谢有一定的作用。

表3 毛莲菜提取物对STZ-DM大鼠血清胰岛素水平的影响。

(5) 毛莲菜提取对正常大鼠空腹血糖和血清胰岛素水平及血脂代谢的影响

结果表明，毛莲菜提取物对正常大鼠的空腹血糖没有明显的降低作用，对正常大鼠的空腹血清胰岛素没有明显的影响；而优降糖组的空腹血糖与正常组(P<0.001)和自身(P<0.01)比较则明显升高，空腹血清胰岛素与自身比较明显提高(P<0.05)。毛莲菜提取物对正常大鼠的血脂代谢没有显著的影响。

Claims (2)

1.一种毛莲菜提取物的制备方法，其特征在于具体方法为：

（1）毛莲菜，用浓度65%乙醇作为溶剂，在10℃-35℃温浸提取，提取次数为1-5次，每次提取时间为12-48小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的21-25倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加5-20倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以份数比2：2：1：1的石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得到含有中美菊素 C ；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A；毛连菜苷B；毛连菜苷C；山莴苣素；11β-13-二氢山莴苣素的毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱，用水洗脱，再用浓度60%的乙醇溶液进行洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得到含有木犀草素，木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素，金丝桃苷的毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C混匀，即得毛莲菜提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的毛莲菜提取物，通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的片剂、颗粒剂、胶囊。