CN103565941A - 一种大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种减少大黄蒽醌毒副作用的口服结肠靶向给药组合物及其用途。该组合物是由冷冻干燥处理大黄蒽醌和辅料组成的，其辅料选自结肠特异性酶降解材料、在pH≥6.8介质中溶解的材料、填充剂与粘合剂。本发明的组合物在结肠定位给药后既不会减弱大黄的泻下作用，又可以有效防止大黄毒性的发挥，而且长期服用基本无毒，由此解决了大黄的药源毒性问题。

Description

一种大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物及其用途

【技术领域】

本发明属于中药制剂技术领域。更具体地，本发明涉及一种减少大黄蒽醌毒副作用的口服结肠靶向给药组合物，还涉及所述组合物的用途。

【背景技术】

大黄作为常用中药，具有泻热通肠，凉血解毒，逐瘀通经的功效。大量中药制剂都含有大黄，其中主要是利用大黄的泻火通便作用。本技术领域的技术人员知道，大黄起泻火通便作用的基本成分是蒽醌类物质，然而，王青秀，“大黄及其主要成份的毒性毒理研究”，《军事医学科学院博士学位论文》，05：26-48（2007）；Ming Yan，等人，“Nephrotoxicity study of totalrhubarb anthraquinones on Sprague Dawley rats using DNA microarrays”，《JournalofEthnopharmacology》，107，308-311（2006）描述了大黄中的蒽醌类成分具有一定的毒性，其中包括大黄可增加大鼠肾小管水样变性的发生率，可严重增加大鼠和小鼠肾小管的色素沉着；增加小鼠肾病的发生率，长期给药会使大鼠和小鼠出现一定的肾毒性。连续两年给予雄性大鼠喂食大黄蒽醌类成分，可以增加雄性大鼠肾小管腺瘤、肾脏和膀胱迁移性上皮细胞乳头瘤的发生率，使雌性大鼠出现肝细胞腺瘤；可以增加小鼠肝癌的发生率，还可能使小鼠产生甲状腺滤泡细胞瘤。实验还表明蒽醌对大、小鼠具有致癌性。连续给予蒽醌两年，可增加大鼠肾、肝、脾、骨髓非肿瘤性损害，可引起小鼠肝、膀胱和脾非肿瘤性损害，及雄性小鼠甲状腺和肾脏的非肿瘤性损害等。由于大黄蒽醌具有上述这些毒性，大黄的应用在一些国家受到争议。

另据其它文献资料记载，目前一些国家的用药人群因长期服用含有蒽醌类成分植物（如芦荟、大黄、番泻叶等）制成的泻剂而出现“黑便”，经检查发现这些人群中有人出现癌症病变，经流行病学调查，可能与长期服用泻剂有关。因此，一些国家如德国、加拿大、西班牙、美国，为防止这种药源性疾病，已经对这些药用植物做出明确的使用规定。这些事实提示我们在应用含大黄的制剂时，应考虑大黄的毒副作用问题。

因此，本发明人在总结现有技术的基础上，通过大量实验研究与分析总结，终于完成了本发明。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种结肠靶向给药组合物，该组合物既不会减弱大黄的泻下作用，又可以防止大黄毒性发挥。

本发明的另一个目的是提供上述结肠靶向给药组合物在药学中的用途。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物。所述结肠靶向给药组合物是由5～25重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和40～105重量份辅料组成的；

所述的冷冻干燥处理大黄蒽醌是采用下述方法得到的：

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计70～95%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:1～6；在室温下搅拌混匀后，让其大黄蒽醌自然沉淀析出，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-5～-40℃下预冷冻，然后在真空1.3～80帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌；

所述的辅料是一种或多种选自结肠特异性酶降解材料、在pH≥6.8介质中溶解的材料、填充剂与粘合剂的辅料，它们的量分别是0～100重量份、0～100重量份、0～100重量份与0～5重量份。

根据本发明的一个优选实施方式，所述结肠靶向给药组合物是由10～20重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和60～85重量份辅料组成的。

根据本发明的另一个优选实施方式，所述结肠特异性酶降解材料选自壳聚糖、果胶、瓜耳豆胶、魔芋胶或偶氮聚合物的材料。

所述在pH≥6.8介质中溶解的材料选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100-55、L30D、L100或S100。

所述的填充剂选自羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、聚乙二醇-6000、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉或低取代羟丙基纤维素。

所述的粘合剂选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、Eudragit S100、壳聚糖、羟丙基甲基纤维素、淀粉、乙醇或水。

根据本发明的另一个优选实施方式，所述结肠靶向给药组合物剂型是散剂、颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂。

根据本发明的另一个优选实施方式，所述的颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂有一层或多层使用选自Eudragit L100、S100、壳聚糖、魔芋胶、羟丙基甲基纤维素、偶氮聚合物及在药学上可接受的抗粘剂、增塑剂、着色剂或避光剂的包覆材料制成的涂覆层。

所述的抗粘剂选自硬脂酸镁、滑石粉、单硬脂酸甘油酯、十八醇及其混合物；所述的着色剂是食用色素；所述的增塑剂选自甘油、丙二醇、聚乙二醇、蓖麻油或邻苯二甲酸二丁酯；所述的避光剂是二氧化钛。

本发明还涉及所述的结肠靶向给药组合物的用途，将所述结肠靶向给药组合物应用于含大黄成分的中药单方或复方制剂中，以同等剂量代替原来的大黄成分。

下面将更详细地描述本发明。

本发明的基本依据是从大黄的作用机理入手解决大黄蒽醌的毒副作用问题，从根源上防治这些药源性疾病。本领域的技术人员知道，大黄蒽醌类成分以游离蒽醌和结合蒽醌两种形式存在，在游离蒽醌上连接有β-糖苷键结合糖的蒽醌称之结合蒽醌。一些研究表明蒽醌类成分的泻下机理是两种:一是结合蒽醌经肠道转运到达大肠，被结肠内的β-葡萄糖苷酶水解成游离蒽醌，刺激大肠或粘膜下神经使其蠕动增加，同时抑制水分的再吸收，起到泻下作用；二是结合蒽醌经胃肠道吸收后，经肝脏转化为游离蒽醌，经血液转运至大肠刺激神经丛增加蠕动作用致泻，蒽醌经吸收后会有部分经肝脏代谢破坏。起泻下作用的最终物质是到达大肠后起作用的游离蒽醌，但游离蒽醌口服后易被上消化道吸收或破坏，不能直接到达大肠发挥药效，或药效很弱；结合蒽醌有β-糖苷键结合糖，口服之后不被上消化道的酶水解，当其进入大肠后被肠内β-糖苷键酶水解，释放出游离蒽醌而发挥作用。

由此可见，大黄产生泻下作用的两个机理，一是结合蒽醌在胃肠道吸收后经过肝脏代谢，通过血液转运至大肠部位，刺激大肠神经丛产生泻下效果，这是造成蒽醌在胃肠道内吸收入血液后经过肾脏排泄而导致毒性的根本原因。而另一个主要泻下机理则是蒽醌不被吸收，直接经胃肠道到达大肠可直接刺激肠壁发挥泻下作用，这一作用机理则基本无毒性表现，这为我们研究减少大黄的毒性提供了理论依据。

本发明的着眼点在于由于大黄蒽醌的毒性是吸收后经体内肾脏排泄而引起，因此如果不被吸收就可能不会产生毒性。这样，将大黄蒽醌采用现代制剂手段——口服结肠定位释药系统（OCCDS）制备一种微粒形式，使其在结肠释放，而不产生吸收的过程，由此则可以避免肾毒性的产生，以及避免了经过吸收后进入血液循环对其它脏器产生的毒性。

本发明人研究发现，大黄提取后的游离蒽醌口服几乎无泻下作用，但用OCDDS手段使其在结肠定位释放，则产生了相应的通便作用。这就提示我们将大黄提取后得到的游离蒽醌，采用OCDDS手段制备新剂型，既不会减弱大黄的泻下作用，又可以防止大黄中蒽醌类成分的毒性。由此找到了解决大黄药源毒性问题的途径。并通过科学实验，证明了这种新剂型的有益效果。

本发明的设计构想是选择适当的辅料，将大黄游离蒽醌制备成口服结肠定位给药系统，即OCDDS，再将OCDDS作为原料代替药材投料，应用于含大黄中药单方或复方中，与随方中的其它药物一起制备成合适的剂型。具体来说，将大黄蒽醌加辅料采用固体分散技术制备固体分散体，或者加结肠特异酶降解材料和/或在pH≥6.8介质中溶解的材料采用制粒方法得到颗粒，也可以采用将大黄蒽醌和结肠特异酶降解材料和/或在pH≥6.8介质中溶解的材料一起制备微丸、凝胶小球、微片、微海绵或微球，进而可将得到的固体分散体、颗粒、微丸、凝胶小球、微片、微海绵或微球等包衣或不包衣剂型。所述剂型的制备方法是本技术领域的技术人员熟知的技术。

本发明涉及一种大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物。

所述的结肠靶向给药组合物是由5～25重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和40～105重量份辅料组成的；

所述的冷冻干燥处理大黄蒽醌是采用下述方法得到的：

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计70～95%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:1～6；在室温下搅拌混匀后，让大黄蒽醌自然沉降，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-5～-40℃下预冷冻，然后在真空1.3～80帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌；

所述的辅料是一种或多种选自结肠特异性酶降解材料、在pH≥6.8介质中溶解的材料、填充剂与粘合剂的辅料，它们的量分别是0～100重量份、0～100重量份、0～100重量份与0～5重量份。

所述的大黄蒽醌靶向给药组合物既不会减弱大黄的泻下作用，又可以有效防止大黄毒性的发挥，长期服用基本无毒。

在本发明中，所述的大黄蒽醌是中药材大黄的有效成分，它主要包括大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚及其苷等有效成分。

本发明使用的大黄蒽醌是一种在目前药品市场上广泛销售的产品，也可以是采用本发明人的CN1169772C专利技术制备得到大黄蒽醌。

通常，所述结肠靶向给药组合物微粒尺寸是5～2000μm，优选地10～1000μm，更优选地20～500μm。实际上，本发明所述结肠靶向给药组合物微粒尺寸是根据该结肠靶向给药组合物的用途进行确定的。

在本发明的意义上，所述的结肠靶向给药应该理解是其药物经口服后能够在上消化道不释放，通过药物传递技术将药物运送到人体回盲部后才开始崩解或降解其包裹材料,释放出药物,从而使药物在结肠局部发挥治疗作用。实现结肠定位释药的主要依据是人结肠含有特异性酶，或结肠部位的pH与人体其他部位pH的不同，或药物经小肠到达结肠的转运时间等，因此可以利用特异性酶或不同的pH，使材料在结肠降解或溶解，从而释放出药物。

优选地，所述结肠靶向给药组合物是由10～20重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和60～85重量份辅料组成的。

更优选地，所述结肠靶向给药组合物是由12～16重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和68～75重量份辅料组成的。

在本发明结肠靶向给药组合物辅料中，所述的结肠特异性酶降解材料是一种选自壳聚糖、果胶、瓜耳豆胶、魔芋胶或偶氮聚合物的材料。

在本发明中，所述的壳聚糖、果胶、瓜耳豆胶、魔芋胶或偶氮聚合物是目前市场上销售的产品，例如山东济南海得贝公司生产的壳聚糖。偶氮聚合物作为结肠靶向给药载体的具体情况见文献，陈清元等人，“偶氮聚合物作为结肠靶向给药载体的研究进展”，《功能高分子学报》，14（2），252-256（2001）。

优选地，所述的结肠特异性酶降解材料是一种选自壳聚糖、果胶或魔芋胶的材料。

更优选地，所述的结肠特异性酶降解材料是壳聚糖或魔芋胶。

在本发明结肠靶向给药组合物辅料中，所述在pH≥6.8介质中溶解的材料选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100-55、L30D、L100或S100。

在pH≥6.8介质中溶解的材料包括但不限于聚丙烯酸树脂类。该聚丙烯酸树脂类例如是德国Rhom公司生产的EudragitL30D、L100或S100。

所述的聚丙烯酸树脂类II是由甲基丙烯酸与甲基丙烯酸甲酯按照重量比50:50进行共聚得到的，它可用作片剂、丸剂药物的肠溶性包衣材料，也可用于缓释制剂中的骨架材料，使用这种材料制成的包衣膜能被pH6-6.5的回肠和空肠液溶解释放。在本发明中，例如可以使用上海沪峰化工有限公司以Q1570型号销售的聚丙烯酸树脂类II。

所述的聚丙烯酸树脂类Ⅲ是由甲基丙烯酸与甲基丙烯酸甲酯按照重量比35∶65进行共聚得到的，它可用作片剂、丸剂药物的肠溶性包衣材料，也可用于缓释制剂中的骨架材料，使用这种材料制成的包衣膜能被pH6.5-7.5的结肠液溶解释放。在本发明中，例如可以使用上海沪峰化工有限公司以Q1571型号销售的聚丙烯酸树脂类Ⅲ。

还可以使用德国Rhom公司生产的Eudragit S100或Eudragit L100。

优选地，所述在pH≥6.8介质中溶解的材料选自Eudragit L30D、L100或S100。

更优选地，所述在pH≥6.8介质中溶解的材料选自Eudragit L100或S100。

所述的填充剂选自羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、聚乙二醇-6000、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉或低取代羟丙基纤维素。

在本发明结肠靶向给药组合物的辅料中，所述的填充剂包括但不限于羟丙基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素（MCC）、聚乙二醇类（如PEG-4000、PEG-6000）、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉或低取代羟丙基纤维素（L-HPC）。本发明使用的填充剂是目前市场上销售的产品，例如湖州展望化学药业有限公司生产的微晶纤维素（MCC）、羧甲基淀粉钠、淀粉或低取代羟丙基纤维素（L-HPC）。

优选地，所述的填充剂选自微晶纤维素、PEG-6000、乳糖、羧甲基淀粉钠或低取代羟丙基纤维素。

更优选地，所述的填充剂选自微晶纤维素、PEG-6000、乳糖或低取代羟丙基纤维素。

在本发明结肠靶向给药组合物的辅料中，所述的粘合剂选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、Eudragit S100、壳聚糖、羟丙基甲基纤维素、淀粉、乙醇或水。

所述的粘合剂包括但不限于聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、Eudragit S100、HPMC、壳聚糖、淀粉、乙醇或水等。

优选地，所述的粘合材料选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、Eudragit S100、HPMC、壳聚糖、乙醇或水。

更优选地，所述的粘合材料选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、S100、HPMC、壳聚糖或水。

根据本发明，所述结肠靶向给药组合物剂型是散剂、颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂。

所述结肠靶向给药组合物为散剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述的辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再采用研磨法制备成固体分散体。

所述结肠靶向给药组合物为颗粒剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述的辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再用本技术领域中通常使用的流化床造粒机或普通制粒机进行制粒。

所述结肠靶向给药组合物为凝胶小球剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述的辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再采用本技术领域中通常使用的滴制胶凝方法制备成凝胶小球。所述辅料是一种具有凝胶性质的材料。具有凝胶性质的材料是指该材料在溶液中遇到金属离子等物质会形成凝胶，变成半固体，干燥后成为固体，例如像魔芋胶。

所述结肠靶向给药组合物为微球剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再采用本技术领域中通常使用的乳化-交联法或界面缩聚法制备成微球，所述辅料例如是壳聚糖或白蛋白。

所述结肠靶向给药组合物为微丸剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再采用本技术领域中通常使用的挤出-滚圆法制备成微丸剂型。

所述结肠靶向给药组合物为微片剂型时，其制备方法是将大黄蒽醌与所述辅料按照上述质量比进行混合，混合均匀后再采用本技术领域中通常使用的压片法制备成微片剂型。

采用上述这些方法制得所述剂型后，可以进行包衣膜处理，即所述的颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂有一层或多层使用选自Eudragit L100、S100、壳聚糖、魔芋胶、羟丙基甲基纤维素、偶氮聚合物及在药学上可接受的抗粘剂、增塑剂、着色剂或避光剂的包覆材料制成的涂覆层。

包衣膜处理的方法都是本技术领域的技术人员熟知的方法，例如锅包衣法、滴制法、流化床包衣法等。

包衣膜处理时所使用的包衣膜材料选自Eudragit L100、S100、壳聚糖、魔芋胶、HPMC及在药学上可接受的抗粘剂、增塑剂、着色剂和/或避光剂。

Eudragit L100、S100、壳聚糖、魔芋胶、HPMC、偶氮聚合物包衣膜材料等都是目前市场上销售的产品

优选地，该包衣膜材料选自Eudragit L100、S100、壳聚糖、HPMC及在药学上可接受的抗粘剂、增塑剂和/或避光剂。

更优选地，该包衣膜材料选自Eudragit L100、S100、壳聚糖及在药学上可接受的抗粘剂和/或增塑剂。

其中，所述的抗粘剂选自在药物制备中通常使用的硬脂酸镁、滑石粉、二氧化钛、单硬脂酸甘油酯、十八醇或它们的混合物。

所述的增塑剂选自在药物制备中通常使用的甘油、丙二醇、聚乙二醇、蓖麻油或邻苯二甲酸二丁酯。

所述的着色剂选自在药物制备中通常使用的食用色素。

所述的避光剂选自在药物制备中通常使用的二氧化钛。

在本发明中，所述抗粘剂、增塑剂、着色剂或避光剂的量都是以该包衣膜材料溶液总重量计0.0-2.0重量%，优选地0.2-1.8重量％，更优选地0.4-1.0重量%。

在本发明中，使用所述包衣膜材料制成膜的量是以包衣结肠靶向给药组合物总重量计2.0-20.0重量%，优选地5.0-18.0重量%，更优选地10.0-16.0重量%。

本发明还涉及所述结肠靶向给药组合物的用途。将所述结肠靶向给药组合物应用于含大黄成分的中药单方或复方制剂中，以同等剂量代替原来的大黄成分，即将制备得到的组合物按照大黄在原来中药单方或复方制剂中的剂量，相应地换算成有效成分的含量后，投入相当于原药材的有效成分量，进行制剂。

因此，本发明的结肠靶向给药组合物用药方式与用药剂量可以根据大黄在原来中药单方或复方制剂中的剂量和用药方式进行。

[有益效果]

本发明的有益效果是：与现有技术相比，本发明提供的大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物，由于采用OCDDS技术手段制得，因而药物口服后在结肠定位给药。试验结果表明，这种制剂在结肠定位给药后既不会减弱大黄的泻下作用，又可以有效防止大黄毒性的发挥，而且长期服用基本无毒，由此解决了大黄的药源毒性问题。

【附图说明】

图1是给药40天时大黄药材各剂量组及空白对照组大鼠肾脏切片。

图2是给药40天时大黄OCDDS各剂量组及空白对照组大鼠肾脏切片。

【具体实施方式】

通过下述实施例将能够更好地理解本发明。

实施例1：散剂型结肠靶向给药组合物的制备

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计70%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:1；在室温下搅拌混匀后，让大黄蒽醌自然沉降，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-25℃下预冷冻，然后在真空1.3帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌。

准确称取90g聚乙二醇-6000进行加热熔融。再称取5g冷冻干燥处理大黄蒽醌，研细并加入到熔融聚乙二醇-6000中，搅拌均匀，迅速冷却，研磨成细粉，该粉末采用流化床包衣法包覆10克Eudragit S100衣膜，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计0.5重量%滑石粉抗粘剂、0.6重量%甘油增塑剂，得到本发明的散剂型结肠靶向给药组合物。

实施例2：散剂型结肠靶向给药组合物的制备

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计80%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:6；在室温下搅拌混匀后，让大黄蒽醌自然沉降，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-40℃下预冷冻，然后在真空80帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌。

准确称取25g冷冻干燥处理大黄蒽醌和100g Eudragit S100，将二者溶解于乙醇和二甲基亚砜混合物（体积比1∶1）中，加入100ml水，迅速搅拌，析出沉淀，过滤，在温度40℃的条件下进行干燥，研磨成细粉，得到本发明的固体散剂型结肠靶向给药组合物。

实施例3：微片剂型结肠靶向给药组合物的制备

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计95%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:3；在室温下搅拌混匀后，让大黄蒽醌自然沉降，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-5℃下预冷冻，然后在真空40帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌。

准确称取5g冷冻干燥处理大黄蒽醌、50g微晶纤维素和50g淀粉，混合均匀。将5g Eudragit S100分散于70%乙醇中作粘合剂，制粒，将颗粒置于压片机中，压制出直径2mm的微片剂，所述的微片剂用16克Eudragit S100进行包衣，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.5重量%聚乙二醇增塑剂，得到本发明的微片剂型结肠靶向给药组合物。

实施例4：颗粒剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取20g实施例1制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌、100g壳聚糖和5g HPMC（羟丙基甲基纤维素）。将HPMC分散于水中，将冷冻干燥处理大黄蒽醌和壳聚糖加入到流化床制粒机中，同时加入5克HPMC为粘合剂，制粒，得到的颗粒用11.0g Eudragit S100进行包衣，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.8重量%蓖麻油增塑剂，得到本发明的颗粒剂型结肠靶向给药组合物。

实施例5：颗粒剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取10g实施例1制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌、50g魔芋胶、5g乙基纤维素和5g Eudragit S100。将5g Eudragit S100分散于以重量计70%乙醇水溶液中，然后将冷冻干燥处理大黄蒽醌、魔芋胶和聚丙烯酸树脂Ⅱ加入其中混合均匀，再加到流化床制粒机中，同时加入5克EudragitS100用作粘合剂，制粒，得到本发明的颗粒剂型结肠靶向给药组合物。

实施例6：微丸剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取15g实施例3制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌、60g微晶纤维素和5g PEG-6000，加入含有以重量计2%HPMC水溶液（其HPMC为3g）作粘合剂加入挤出-滚圆机中，制备直径0.5mm的微丸，在温度40℃下进行干燥，得到的微丸用以重量计1.5%壳聚糖水溶液进行内层包衣，其壳聚糖量为4克，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0%盐酸、0.3%甘油与0.5%吐温-80，在温度40℃下干燥后，再用以重量计5%EudragitS 100水溶液进行外包衣，其Eudragit S100的量为8克，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计3.0%滑石粉抗粘剂、1.0%邻苯二甲酸二乙酯增塑剂，这样得到本发明的微丸剂型结肠靶向给药组合物。

实施例7：微丸剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取25g实施例2制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌、50g壳聚糖和30g Eudragit L100-55。将淀粉制成以重量计20%淀粉浆，其淀粉的量为5g。将冷冻干燥处理大黄蒽醌和壳聚糖混合均匀，以淀粉浆为粘合剂，加入挤出-滚圆机中，制备直径0.5mm的微丸，得到的微丸用Eudragit L100和Eudragit S100按照重量比1:1混合包衣，Eudragit L100和Eudragit S100的量为22克，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.8重量%蓖麻油增塑剂、0.1重量%二氧化钛避光剂，这样得到本发明的微丸剂型结肠靶向给药组合物。

实施例8：微丸剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取10g实施例1制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌、80g魔芋胶和10g HPMC。将HPMC制成以重量计3%水溶液，以HPMC为粘合剂，将冷冻干燥处理大黄蒽醌和魔芋胶加入其中混合均匀，加入挤出-滚圆机中，制备直径0.5mm的微丸，得到的微丸用8.4克Eudragit S100进行包衣，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.8重量%蓖麻油增塑剂，得到本发明的微丸剂型结肠靶向给药组合物。

实施例9：微球剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取10g实施例1制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌和100g壳聚糖，采用乳化-交联方法制备微球。将壳聚糖溶解于0.5%的醋酸溶液中，得到浓度以重量计2%的壳聚糖溶液，将冷冻干燥处理大黄蒽醌加入该溶液中混合均匀，再加入以重量计1%吐温-80作为水相，油相是由液体石蜡与二氯甲烷按照重量比1:2混合的溶液，其中还加入以油相重量计2%司盘-80，在搅拌下，将所述的水相滴入所述的油相中，进行乳化30分钟，然后加入以油相重量计0.5%交联剂戊二醛，进行交联90分钟，过滤，洗涤，得到一种微球，得到的微球用Eudragit S100进行包衣，其Eudragit S100的量是12.5克，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.8重量%蓖麻油增塑剂，得到本发明的微球剂型结肠靶向给药组合物。

实施例10：凝胶小球剂型结肠靶向给药组合物的制备

准确称取10g实施例1制备的冷冻干燥处理大黄蒽醌和40g魔芋胶，采用醚化方法以NaOH和一氯乙酸为醚化剂，以乙醇溶液为反应介质条件下对魔芋胶进行羧甲基化处理，得到41克羧甲基魔芋胶，将羧甲基魔芋胶溶解于水中，得到浓度以重量计1%的溶液，然后往其中加入冷冻干燥处理冷大黄蒽醌，混合均匀得到溶液A，再采用滴制法将其溶液A制成冷冻干燥处理大黄蒽醌结肠释放凝胶小球。另外，制备含有以重量计0.2%壳聚糖与0.5%Fe³⁺的溶液B，在搅拌下将溶液A滴入溶液B中，继续搅拌2h，过滤，于温度50℃烘箱中干燥7小时。得到羧甲基魔芋胶凝胶小球用5克Eudragit S100进行包衣，其中该衣膜还含有以所述衣膜总重量计1.0重量%滑石粉抗粘剂、0.8重量%蓖麻油增塑剂，得到本发明凝胶小球剂型的结肠靶向给药组合物。

试验实施例1

下面描述大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物对大鼠长期毒性试验的方法：

SD大鼠70只，随机分为7组，分为空白对照组、大黄药材组（高、中、低剂量组）、大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物组（简称大黄OCDDS组，高、中、低剂量组），ig给药，每天给药1次，连续给药40d，根据体重变化调整给药量，在给药第20d，40d及停药20d分别处死1/3大鼠（雌雄各半）。进行尿生化学、尿常规、血液生化学指标检查，系统尸检和病理学检查，并对数据进行统计分析，试验结果列于表1-6。在实验期间观察大鼠的一般状态。

A、血液生化学指标

表1：大黄药材组

注：﹡与同期各组、20d及恢复期比较P<0.01；▲与同期对照组、低剂量组及20d比较P<0.01；#与恢复期比较P<0.05；◆与同期对照组比较P<0.05；★与同期对照组及恢复期比较P<0.05

表2：大黄OCDDS组

由表1与表2的结果可以看出，大黄药材高剂量组血清UREA、Crea含量均显著高于对照组，ALT、ALP等指标与对照组比较也异常，大黄OCDDS组各剂量组与对照组比较无差异。

B：尿生化学指标

表3：大黄药材组

注：﹡与对照组比较P<001

表4：大黄OCDDS组

由表3与表4的结果可以看出大黄药材高、中剂量组尿β₂-MG显著升高，大黄OCDDS组各剂量组与对照组比较无差异。

C：尿常规指标

表5：大黄药材组

注：﹡与对照组比较P<0.01

表6：大黄OCDDS组

注：﹡与对照组比较P<0.01

URO代表尿胆原、BIL代表胆红素、KET代表酮体、BLD代表潜血、PRO代表蛋白质、LEU代表白细胞、GLU代表葡萄糖、NIT代表亚硝酸盐。

由表5与表6的结果可以看出大黄药材组URO、BIL、PRO、KET、LEU、GLU、NIT等指标与对照组比较显著升高。停药20d后，高、中剂量组各项指标均有所恢复，而低剂量组URO、BIL、LEU、NIT仍显著高于对照组。大黄OCDDS组URO、BIL、PRO、KET、LEU、GLU、NIT等指标与对照组比较显著升高。与药材组比较无差异，可见对尿常规的影响，二者相当。

一般状态观察（1）大黄药材组：高剂量组大鼠精神不佳，体重增长缓慢，与对照组状态有明显差异，给药期间高剂量组1只雌性大鼠濒临死亡，毛色差。（2）大黄OCDDS组：灌胃后观察各给药组与对照组状态无明显差异，各给药组大鼠精神状态良好，皮毛光滑整洁，无颜色变化。

D：肾脏切片

肾脏切片观察结果见附图1与附图2。由附图1可以看出，大黄药材高剂量组大鼠肾近曲小管上皮细胞不同程度肿胀变性，有的甚至坏死脱落到管腔内；中剂量组大鼠肾近曲小管肿胀变性致使管腔狭窄；低剂量组及对照组无明显异常。

由附图2可以看出，本发明的大黄OCDDS各剂量组与空白对照组肾近曲小管上皮细胞无明显异常。

上述附图和表1-6清楚地表明：

（1）大黄药材组：给药40d时，高剂量组血清UREA、Crea含量均显著高于对照组，尿β₂-MG、BIL、PRO、KET、LEU、GLU、NIT等也显著升高。低剂量组ALT、URO与对照组有明显差异，高剂量组大鼠肾脏切片可见肾近曲小管上皮细胞不同程度肿胀变性，有的甚至坏死脱落到管腔内见图1。

（2）大黄OCDDS组给药20d，40d及停药20d后，病理切片显示肝脏与肾脏正常，见图2，脏器系数与对照组无显著差异。血液生化指标检查各项指标与对照组无显著差异，各组β₂-MG无显著性差异。可见大黄OCDDS对SD大鼠的毒性作用不明显，因此其可降低大黄蒽醌的毒性。

同时参照文献（王青秀，“大黄及其主要成份的毒性毒理研究”，《军事医学科学院博士学位论文》，05：26-48（2007））大黄药材提取物（未经制备结肠定位颗粒，相当于药材）病理检查显示大黄提取物大剂量长期使用会引起在大鼠肾小管上皮细胞内色素沉积和肾小管上皮细胞水样变性。

由以上试验结果可以认为，本发明的大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物长期应用是基本无毒的。同时在进行泻下药效试验时，相同剂量的大黄药材与大黄OCDDS的泻下效果相当。

Claims (10)

1.一种大黄蒽醌口服结肠靶向给药组合物，其特征在于所述结肠靶向给药组合物是由5～25重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和40～105重量份辅料组成的；

所述的冷冻干燥处理大黄蒽醌是采用下述方法得到的：

将目前市场上销售的大黄蒽醌加到以重量计70～95%乙醇水溶液中，所述大黄蒽醌与所述乙醇水溶液的体积比是1:1～6；在室温下搅拌混匀后，让大黄蒽醌自然沉降，然后过滤分离，其沉淀物用水洗涤除去乙醇，接着在温度-5～-40℃下预冷冻，然后在真空1.3～80帕下使其沉淀物脱水，于是得到一种冷冻干燥处理大黄蒽醌。

所述的辅料是一种或多种选自结肠特异性酶降解材料、在pH≥6.8介质中溶解的材料、填充剂与粘合剂的辅料，它们的量分别是0～100重量份、0～100重量份、0～100重量份与0～5重量份。

2.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述结肠靶向给药组合物是由10～20重量份冷冻干燥处理大黄蒽醌和60～85重量份辅料组成的。

3.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述结肠特异性酶降解材料选自壳聚糖、果胶、瓜耳豆胶、魔芋胶或偶氮聚合物的材料。

4.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述在pH≥6.8介质中溶解的材料选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、EudragitL100-55、L30D、L100或S100。

5.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述的填充剂选自羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素、聚乙二醇-6000、乳糖、羧甲基淀粉钠、淀粉或低取代羟丙基纤维素。

6.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述的粘合剂选自聚丙烯酸树脂Ⅱ、聚丙烯酸树脂Ⅲ、Eudragit L100、EudragitS100、壳聚糖、羟丙基甲基纤维素、淀粉、乙醇或水。

7.根据权利要求6所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述结肠靶向给药组合物剂型是散剂、颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂。

8.根据权利要求7所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述的颗粒剂、微丸剂、凝胶小球、微片剂、微海绵剂或微球剂有一层或多层使用选自Eudragit L100、S100、壳聚糖、魔芋胶、羟丙基甲基纤维素、偶氮聚合物及在药学上可接受的抗粘剂、增塑剂、着色剂或避光剂的包覆材料制成的涂覆层。

9.根据权利要求1所述的结肠靶向给药组合物，其特征在于所述的抗粘剂选自硬脂酸镁、滑石粉、单硬脂酸甘油酯、十八醇及其混合物；所述的着色剂是食用色素；所述的增塑剂选自甘油、丙二醇、聚乙二醇、蓖麻油或邻苯二甲酸二丁酯；所述的避光剂是二氧化钛。

10.根据权利要求1-9中任一项权利要求所述的结肠靶向给药组合物的用途，其特征在于将所述结肠靶向给药组合物应用于含大黄成分的中药单方或复方制剂中，以同等剂量代替原来的大黄成分。

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