CN103549141B - 一种猪用中草药复合益生菌饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种猪用中草药复合益生菌饲料添加剂及其制备方法，所述猪用中草药复合益生菌饲料添加剂由复合中药发酵料、芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌组成。复合中药发酵料包含黄芪5-6份、金银花2-3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)：(4-3)：(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。本发明以中草药为发酵底物，加入三种益生菌进行发酵，使得产品中既含有中草药的有效成分，又强化了益生菌。本产品调节猪的肠道微生态平衡，减少肠道疾病，促进生长，提高猪的抗应激能力和免疫力，降低料肉比，提高了肉的品质，减少粪便臭味，改善养殖环境，提高了养猪的经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及饲料添加剂领域和生物制药技术领域，具体涉及一种含有中草药、复合益生菌的猪用饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
随着抗生素在饲料添加剂中的广泛使用，它的弊端正日益凸现，如导致动物胃肠道菌群失调，产生耐药性和药物残留等，引发了一系列公共安全，环境保护和畜禽产品质量方面的问题。鉴于此，反对在饲料中添加抗生素的呼声越来越高。瑞典和瑞士分别于1986年和1999年全面禁止在饲料中使用抗生素；日本等也对饲用抗生素的种类、使用方法、剂量和配伍等作了严格限制：欧盟也已于2006年将此前允许在饲料中使用的最后4种抗生素(莫能霉素、盐霉素、阿维霉素、黄霉素)予以禁用，意味着欧盟全面禁止了在饲料中投放任何抗生素。同时，一些国家还把抗生素在动物产品中的残留作为产品的进出口贸易壁垒。在这种情况下，寻求一种无毒、无残留、应用效果好的饲料添加剂显得尤为必要，抗生素替代物的研究开发便随之引起各国的重视。
目前，对病原微生物引起的腹泻主要用抗生素、化学药物来治疗。但随着抗生素的广泛使用，其弊端也日益明显，如引起内源感染和二重感染、耐药菌的产生、机体免疫力下降以及药物的残留等，使抗生素的应用受到限制。人们为寻找一种能克服抗生素种种弊端，无毒、无残留、无耐药性的替代品，研制开发了益生菌、益生元、酸化剂、酶制剂、中草药制剂等。其中，益生菌作为一种新型的饲料添加剂，能促进动物胃肠道正常微生物区系的建立，保持和恢复肠绒毛的正常结构，增强畜禽免疫力，减少疾病的发生，促进生长，提高畜禽日增重，改善畜禽产品质量，具有显著的经济效益和社会效益。
黄芪或其提取物黄芪多糖，作为饲料添加剂可以有效的增强动物机体非特异性免疫和体液免疫，显著提高机体的免疫能力，还具有抗病毒、抗细菌、保护肠道等功能。但同时也面临着成分复杂，有益组分利用率低等问题，使其很多功能无法在动能机体内完全发挥。金银花或其提取物清热解毒，凉散风热。其药用功效：一是抗菌及抗病毒。即对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾、伤寒、肺炎双球菌、绿脓以及流感病毒等都有明显抑制作用；二是有增强免疫的功能。金银花能促进淋巴细胞转化，增强白细胞的吞噬功能；三是抗炎、解热。金银花能促进肾上腺皮质激素的释放，对炎症有明显抑制作用。
发明内容
本发明结合生物发酵技术，炮制中药，促使中药有效成分充分溶解，中草药强化菌体，提供一种绿色健康，无毒副作用且安全有效的猪用中草药复合益生菌饲料添加剂。
本发明的还提供了一种猪用中草药复合益生菌饲料添加剂的制备方法。
本发明是通过以下技术方案来实现的：
一种猪用中草药复合益生菌饲料添加剂的制备方法包括如下步骤：
1.筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为3的酸性环境的芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌。
2.将筛选出的三株菌株，进行抑制致病菌筛选实验。抑制的致病菌有大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。筛选出的三株菌对致病菌有较强的抑制性。
3.制备种子液：
芽孢杆菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到LB培养基中，120～200rpm，30～37℃培养16～24h。
乳酸菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到MRS培养基中，30～37℃密封培养24～72h。
酵母菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到YPD培养基中，25～30℃密封培养24～72h。
4.按重量份数：芽孢杆菌5-6份、乳酸菌2-3份、酵母菌1-2份，把菌液混合均匀。
5.按重量比例称重发酵料，黄芪5-6份、金银花2-3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。将发酵料搅拌均匀，115～125℃下高压蒸汽灭菌20～30min后，降温至50～60℃。
6.将上述步骤(5)灭菌降温后的发酵料和(4)液体培养的混合菌液混合均匀。然后放入发酵室中密封发酵，控制温度在25～40℃，湿度在40～80％发酵48～72h。
7.发酵后，取出低温干燥，粉碎过筛，制得成品。
具体实施方式
通过下列实施例将更具体的说明本发明，使本发明的技术工艺和使用方法更易于理解。
实施例1
1.筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为3的酸性环境的芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌。
2.将筛选出的三株菌株，进行抑制致病菌筛选实验。抑制的致病菌有大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。筛选出的三株菌对致病菌有较强的抑制性。
3.制备种子液：
芽孢杆菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到LB培养基中，160rpm，37℃培养16h。
乳酸菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到MRS培养基中，37℃密封培养24h。
酵母菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到YPD培养基中，30℃密封培养24h。
4.按重量份数：芽孢杆菌5份、乳酸菌3份、酵母菌2份，把菌液混合均匀。
5.按重量比例称重发酵料，黄芪5份、金银花2份、豆粕1份、麸皮2份。将发酵料搅拌均匀，121℃下高压蒸汽灭菌20min后，降温至50℃。
6.将上述步骤(5)灭菌降温后的发酵料和(4)液体培养的混合菌液混合均匀。然后放入发酵室中密封发酵，控制温度在35℃，湿度在70％发酵48h。
7.发酵后，取出低温干燥，粉碎过筛，制得成品。
实施例2
1.筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为3的酸性环境的芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌。
2.将筛选出的三株菌株，进行抑制致病菌筛选实验。抑制的致病菌有大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。筛选出的三株菌对致病菌有较强的抑制性。
3.制备种子液：
芽孢杆菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到LB培养基中，180rpm，37℃培养16h。
乳酸菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到MRS培养基中，35℃密封培养36h。
酵母菌菌液制备：从试管斜面中挑取一环，接种到YPD培养基中，28℃密封培养36h。
4.按重量份数：芽孢杆菌6份、乳酸菌2份、酵母菌1份，把菌液混合均匀。
5.按重量比例称重发酵料，黄芪6份、金银花3份、豆粕2份、麸皮2份。将发酵料搅拌均匀，121℃下高压蒸汽灭菌30min后，降温至55℃。
6.将上述步骤(5)灭菌降温后的发酵料和(4)液体培养的混合菌液混合均匀。然后放入发酵室中密封发酵，控制温度在37℃，湿度在65％发酵60h。
7.发酵后，取出低温干燥，粉碎过筛，制得成品。
对比试验情况：
将猪用中草药复合益生菌饲料添加剂按0.05％的比例均匀拌入饲料中，猪自由采食，观察生长效果。
试验分组如下：
对照组：只喂基础饲料
试验组1：基础饲料加黄芪6份、金银花2份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组2：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组3：基础饲料加黄芪4份、金银花4份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组4：基础饲料加黄芪3份、金银花5份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组5：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌未经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组6：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×106以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组7：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×107以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组8：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×108以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组9：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到4.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组10：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到8.0×109以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
试验组11：基础饲料加黄芪5份、金银花3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌三种益生菌活菌数量比为(6-5)∶(4-3)∶(2-1)，且每克产品的活菌总数达到2.0×1010以上。芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌经过耐猪胆盐、耐酸筛选。
动物试验：将1200头7-10kg的断奶仔猪，按体重、性别分为对照组和11组试验组，每组100头，进行40天饲养试验。11组试验组按重量比0.05％的比例向饲料中添加猪用中草药复合益生菌饲料添加剂。试验效果用日增重和料肉比来评价。试验结果如下：
(单位；kg)
试验结果是所有试验组的日增重比对照组要高，料肉比较对照组低。试验1和2组日增重和料肉比相当(P＞0.05)，试验1组和试验2组日增重和料肉比优于试验3组和4组(配比变化)(P＜0.05)，也优于试验5组(菌未经筛选)(P＜0.05)；试验6-8组的日增重逐渐升高，料肉比逐渐降低，与试验组1和试验组2相比，差异显著(P＜0.05)，试验9-11组日增重和料肉比效果略好于试验组1和试验组2，但效果提升不明显(P＞0.05)。
以上试验证明，黄芪和金银花的配比、菌株及活菌数均经过了筛选，且效果明显。
应当理解的是，本领域普通技术人员可根据本说明进行改进或转换，而这些改进和转换都应该属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (2)
1.一种猪用中草药复合益生菌饲料添加剂，其特征在于，由益生菌组合物和中药发酵料组成，该益生菌组合物由芽孢杆菌5-6份、乳酸菌2-3份、酵母菌1-2份组成；每克产品的活菌总数达到2.0×109个以上；所选用的三株菌株是经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及pH为3.0的酸性环境，并且对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用；该所述饲料添加剂的制备方法包括如下步骤：
(1)按重量比例称重发酵料：黄芪5-6份、金银花2-3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份；将发酵料搅拌均匀，115～125℃下高压蒸汽灭菌20～30min后，降温至50～60℃；
(2)芽孢杆菌进行液体培养16～24h，乳酸菌、酵母菌分别进行液体培养24～72h，然后按重量份数：芽孢杆菌5-6份、乳酸菌2-3份、酵母菌1-2份混合均匀；
(3)将上述步骤(1)灭菌降温后的发酵料和(2)液体培养的混合菌液混合均匀；然后放入发酵室中密封发酵，控制温度在25～40℃，湿度在40～80％发酵48～72h；
(4)发酵后，取出低温干燥，粉碎过筛，制得成品。
2.根据权利要求1所述的猪用中草药复合益生菌饲料添加剂的制备方法，其特征在于：
(1)按重量比例称重发酵料：黄芪5-6份、金银花2-3份、豆粕1-2份、麸皮1-2份；将发酵料搅拌均匀，115～125℃下高压蒸汽灭菌20～30min后，降温至50～60℃；
(2)芽孢杆菌进行液体培养16～24h，乳酸菌、酵母菌分别进行液体培养24～72h，然后按重量份数：芽孢杆菌5-6份、乳酸菌2-3份、酵母菌1-2份混合均匀；
(3)将上述步骤(1)灭菌降温后的发酵料和(2)液体培养的混合菌液混合均匀；然后放入发酵室中密封发酵，控制温度在25～40℃，湿度在40～80％发酵48～72h；
(4)发酵后，取出低温干燥，粉碎过筛，制得成品；
所选用的三株菌株都是经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，并能有效抑制大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。
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