CN103548689A - 金银花组培苗生根培养基及生根培养方法 - Google Patents

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陈泽雄
刘奕清
娄娟
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Abstract

本发明公开了一种金银花组培苗生根培养基及生根培养方法；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸0.5mg/L和活性炭0.05mg/L；培养条件为：培养温度为25±2℃，先散光培养1天后，转入光照强度为1500～2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养。本发明鉴于金银花组培苗生根率低的现状，通过实验研究不同激素及其浓度、培养条件以及添加物等因素对金银花组培苗生根的影响，找到了最佳激素及浓度和最佳的外界培养条件，金银花生根苗根长可达到1.2cm、平均根数3.6条、生根率100%、无愈伤组织、有根毛形成。

Description

金银花组培苗生根培养基及生根培养方法
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种金银花组培苗生根培养基及生根培养方法。
背景技术
金银花为忍冬科冬属(Lonicera Japanica Thunb)植物及同属多种植物的干燥花蕾，为多年生半常绿藤本植物，集保健、药用、观赏及生态功能于一体，是国务院确定的名贵中药材之一。它具有清热解毒、消炎退肿、抑菌、抗病毒、增强免疫力等功效，广泛应用于制药、香料、化妆品、食品等领域。在抗菌及抗病毒中对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾、伤寒、脑膜炎双球菌、肺炎双球菌、绿脓以及流感病毒等都有明显抑制作用，具有增强免疫的功能；金银花能促进淋巴细胞转化，增强白细胞的吞噬功能，能抗炎、解热；金银花能促进肾上腺皮质激素的释放，对炎症有明显抑制作用。
金银花的繁殖方式包括扦插繁殖、组培繁殖、嫁接繁殖，组培或扦插是其主要的繁殖方式。常规的扦插繁殖，由于繁殖速度慢、受季节、母株限制、占地面积大等原因，大大地限制了其推广速度。相对于扦插苗，金银花组培苗不受季节限制，更适宜于工厂化育苗，但金银花组培苗存在生根数少，生根率低，根系活力低，在工厂化生产应用等方面的研究较少等问题。
因此，对金银花组培苗生根技术研究，提高其生根率，提高根活力，降低苗木成本，进一步完善金银花组培快繁及工厂化育苗技术体系，对促进金银花组培苗的推广应用具有重要的现实意义。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种金银花组培苗生根培养基及生根培养方法，通过实验研究不同激素及其浓度、培养条件以及添加物等因素对金银花组培苗生根的影响，找到最佳激素及浓度和最佳的外界培养条件，提高其生根率，提高根活力，降低苗木成本，为金银花的工厂化生产提供更可靠、操作性更强的技术依据，加快其繁殖与推广，以满足市场的需求。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明公开了一种金银花组培苗生根培养基，所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸0.5mg/L和活性炭0.05mg/L。
进一步，所述生根培养基的pH为5.8。
本发明还公开了一种使用上述金银花组培苗生根培养基进行金银花组培苗生根培养的方法，将金银花组培苗接种至所述生根培养基中进行生根培养，培养条件为：培养温度为25±2℃，先散光培养1天后，转入光照强度为1500～2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养。
本发明中所述的1/2MS培养基为植物组织培养中常用的基本培养基，其具体配方如下表所示：
Figure BDA0000407001680000021
Figure BDA0000407001680000031
本发明的有益效果在于：本发明鉴于金银花组培苗生根率低的现状，通过实验研究不同激素及其浓度、培养条件以及添加物等因素对金银花组培苗生根的影响，找到了最佳激素及浓度和最佳的外界培养条件为：1/2MS为基本培养基，IBA0.5mg/L+活性碳0.05mg/L为最佳激素组合，光照强度1500～2000lx、光照时间12h/d的光照条件为最佳外界培养条件，金银花生根苗根长可达到1.2cm、平均根数3.6条、生根率100%、无愈伤组织、有根毛形成。本发明为金银花的工厂化生产提供了更可靠、操作性更强的技术依据，加快了其繁殖与推广。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1为本发明的培养条件下根长势较好的金银花组培苗；
图2为散光培养条件下根长势较差的金银花组培苗。
具体实施方式
下面将结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。
本发明实施例以重庆文理学院花卉研究所组培车间健康无菌的金银花组培继代苗为试验材料。
切取1.5～2cm的金银花组培苗(切取的组培苗生长状况应一致)，接种到不同的生根培养基中。生根培养基以1/2MS为基本培养基，分别添加IBA0.5mg/L、IBA1.0mg/L、IBA2.0mg/L、IBA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、NAA1.0mg/L、NAA2.0mg/L、NAA3.0mg/L，8个不同浓度的激素，每个浓度处理又分别设置添加活性炭和无活性炭两种处理，pH设为5.8；每个处理接种15株，试验重复3次；对于处理1～16，将接种好的材料置于温度为25±2℃的培养室，散光培养1天后，转入光照强度为1500～2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养，25d后统计生根率及生根数；对于处理17，一直采用散光培养。
表1不同条件对金银花生根的影响
Figure BDA0000407001680000041
试验统计结果见表1，从表1可以得出如下结论：
1.不同激素种类对金银花生根的影响
由表1可以看出NAA和IBA的处理成显著差异，在相同浓度的IAB和NAA的处理中可以看出IBA处理的金银花组培苗生根率普遍高于NAA的处理，如在激素浓度为1.0mg/L都加有相同活性碳的处理中可看出，IBA1.0mg/L的处理生根率为96.3%、根长2.9cm、无愈伤组织，NAA1.0mg/L的处理生根率为29.2%、根长2.2cm、愈伤组织较小。从表1中可以看出IBA的处理比NAA的处理的效果更好，NAA处理中生根率最高为48.9%，IBA处理中生根率最低为84.4%，NAA处理中都有愈伤形成，IBA处理中几乎无愈伤。由此可得出IBA比NAA能更好的促进金银花组培苗的生根。
2.不同激素浓度对金银花生根的影响
由表1可得出各IBA不同浓度之间的生根率成不显著差异，但在处理13、14、15、16中，生根率分别为100.0%、96.3%、95.3%、89.0%，平均根数分别为3.6条、2.9条、2.8条、2.5条，根长分别为1.2cm、1.0cm、0.5cm、0.4cm。在NAA的处理中生根率最高的为处理11，生根率为48.9%，生根率最低的为处理1和处理2生根率为11.1%，但从表1中可看出随着NAA浓度的增加愈伤组织逐渐增大。由此可出随着IBA浓度的增加，生根率、平均根数、平均根长逐渐降低，而NAA处理中生根率、平均根数、平均根长没有随着NAA浓度的变化出现递增或递减现象只有愈伤组织的大小随着NAA的增加而增大。
3.活性碳对金银花生根的影响
由表1可得出在相同浓度IBA处理中加有0.05mg/L活性碳处理的金银花生根率较高、平均根数较多，平均根长较长，如处理15和处理5比较，处理15生根率为100.0%、平均根长为1.2cm、每根根数为3.6条，处理5生根率为93.3%、平均根长为0.9cm、每根根数位2.6条。在相同浓度NAA处理中加有0.05mg/L活性碳处理的金银花生根率较高、平均根数较多，平均根长较长，如处理11和处理3比较，处理11生根率为48.9%、平均根长为0.5cm、每根根数为1.9条，在处理3中生根率为33.3%、平均根长为0.3cm、每根根数位2.条。可得出结论活性碳有促进金银花组培苗的生根。
4.光照对金银花生根的影响
可以从处理17中和图2中可看出在光照比较弱的条件下金银花叶片出现卷曲现象，生根较慢；而在光照强度为1500～2000lx，光照时间为12h/d的条件下培养金银花6天可以长根。处理13和处理17进行比较，在处理13中生根率可达100%、根长1.2cm、平均根数为2.6根，图1中可以看出根的活性较高；处理17中生根率可达95.0%、根长0.8cm、平均根数为2.4根，从图2中可看出根的活性较差，叶片叶出现卷曲现象。可得出结论光照可促进金银花组培苗的生根。
综上所述，本发明对于金银花组培苗生根得到的最佳生根培养基配方为：1/2MS+IBA0.5mg/L+活性碳0.05mg/L，即以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸0.5mg/L和活性炭0.05mg/L；适宜的生根培养条件为：培养温度为25±2℃，先散光培养1天后，转入光照强度为1500～2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养；金银花生根苗根长可达到1.2cm、平均根数3.6条、生根率100%、无愈伤组织、有根毛形成。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (3)

1.金银花组培苗生根培养基，其特征在于：所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸0.5mg/L和活性炭0.05mg/L。
2.根据权利要求1所述的金银花组培苗生根培养基，其特征在于：所述生根培养基的pH为5.8。
3.使用权利要求1或2所述的金银花组培苗生根培养基进行金银花组培苗生根培养的方法，其特征在于：将金银花组培苗接种至所述生根培养基中进行生根培养，培养条件为：培养温度为25±2℃，先散光培养1天后，转入光照强度为1500～2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养。
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