CN103348916A

CN103348916A - 一种星花粉条儿菜快速繁殖方法

Info

Publication number: CN103348916A
Application number: CN2013103016670A
Authority: CN
Inventors: 郭凤领; 吴金平; 丁自立; 邓晓辉; 陈磊夫; 邱正明
Original assignee: Hubei So Good Seed Technology Co ltd; Institute of Economic Crop of Hubei Academy of Agricultural Science
Current assignee: Hubei So Good Seed Technology Co ltd; Institute of Economic Crop of Hubei Academy of Agricultural Science
Priority date: 2013-07-18
Filing date: 2013-07-18
Publication date: 2013-10-16
Anticipated expiration: 2033-07-18
Also published as: CN103348916B

Abstract

本发明公开了一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，步骤：A、选取星花粉条儿菜种子为外植体；B、外植体用酒精、升汞消毒，无菌水冲洗；C、接种到MS培养基中萌发；D、无菌条件下切取萌发的下胚轴为外植体进行丛芽诱导；E、光照恒温培养，长出丛芽；F、将丛芽切割成数个小丛芽，进行继代增殖培养；G、继代培养过程中的健壮小苗转生根培养基，待长出根时开瓶炼苗，清洗后移栽到基质中，保温保湿，组培苗成活后移栽。获得的星花粉条儿菜遗传稳定性好，繁殖占用空间小，繁殖速度快，一年一粒种子可繁殖上万棵星花粉条儿菜。有效解决星花粉条儿菜种植中优质星花粉条儿菜种苗的供应问题。所建立的生产体系稳定、周期较短，能满足规模化种植种苗需求。

Description

一种星花粉条儿菜快速繁殖方法

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，更具体涉及一种星花粉条儿菜的快速繁殖方法，是利用基本培养基和附加不同成份对星花粉条儿菜的快速繁殖方法。

背景技术

星花粉条儿菜（Aletris stelliflora Hand.-Mzt）百合科粉条儿菜属草本植物，又叫牛尾巴，因其嫩茎食指粗，长约尺许，形似“牛尾巴”，以其嫩茎作蔬菜。其嫩茎含有丰富的维生素、蛋白质及钾、铁、钙、磷等多种微量元素和膳食纤维，具有清热、解毒、消炎、生津止渴开胃作用。其根或全草也可供药用，有清热利湿、润肺、活血功效。星花粉条儿菜据目前资料记载仅发现于云南西北部高黎贡山地区和四川西部雅安地区海拔2500～3900m的高山草甸，高山沼泽地，林中，山坡灌丛草甸，石边，沼泽地，针叶林中。以地下茎越冬，春季萌发新芽，花茎5～7月抽生，但结实率低，且不易发芽。由于种苗制约，目前还无人工大规模种植的相关报道。利用组织培养技术，不但可以快速繁殖，而且可以提供大量优质无病种苗。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，方法易行，操作方便，繁殖速度快，可加快星花粉条儿菜快速繁殖。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术措施：

一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，其步骤是：

A、取星花粉条儿菜健康、饱满种子，先用1%质量比洗衣粉水浸泡4～6min，再用自来水冲洗，后在超净工作台上用75%体积比的酒精溶液浸泡10～30s，无菌水冲洗3～5次；再用0.1%重量比升汞溶液消毒10～15min，无菌水冲3～5次，接种到MS培养基中；

B、光照培养，温度为25～28℃，光强1500～3000Lx，每天光照10～16h，培养30～60d，种子萌发出高度为0.2～0.5cm小苗；

C、在无菌条件下，用灭菌的手术刀切取下胚轴，接种于配制好的丛芽诱导培养基中，诱导培养基的配方为：MS+6-BA1.0～3.0mg/L+NAA0.3～0.5mg/L+琼脂4000～6000mg/L+白糖20000～30000mg/L；

D、光照培养，温度为25～28℃，光强1500～3000Lx，每天光照10～16h，培养30～60d，长出丛芽；

E、将丛芽切割成0.4cm～0.6cm小丛芽转入C步骤中的丛芽诱导培养基中进行芽的继代增殖培养，以后每隔25～35d继代1次，继代培养过程中将苗高3～7cm的小苗转生根培养基中，生根培养基的配方为：1/2MS+IBA0.1～0.3mg/L+琼脂4000～6000mg/L+白糖30000～60000mg/L+活性炭0.1%～0.3%（质量比）；

F、星花粉条儿菜试管苗接种于生根培养基中30～40d，待长5条以上根时开瓶炼苗5～7d，将瓶内苗取出，用0.003%～0.005%重量比NAA溶液浸苗根基部10～15min，将组培苗移栽到基质（草炭/珍珠岩/蛭石=2/1/1，体积比）中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15～20℃，湿度80～90%，7～15d后揭膜，逐步延长揭膜时间直至不覆膜，每隔2～3周浇施0.1%～0.3%重量比尿素和0.1%～0.3%重量比KH₂PO₄或稀薄粪水，注意进行病虫害防治，组培苗成活率达95%以上。

所述的MS培养基的成份(单位：mg/L)：

本发明与常规种植技术相比，具有以下优点和效果：

星花粉条儿菜快速繁殖体系的建立，为星花粉条儿菜的大规模种植提供一种遗传稳定性好、繁殖占用空间小、周期短、繁殖率高、成本低廉的育苗方法。可以有效解决星花粉条儿菜种植中的优质星花粉条儿菜种苗供应问题。该方法培养基中用白糖代替蔗糖、用自来水代替蒸馏水，使成本有效降低，不受季节限制，30～50d的增殖倍数达到4～6倍，一年一粒种子可繁殖上万棵以上星花粉条儿菜，繁殖速度快。以一粒种子40d萌发，下胚轴诱导40d继代一次，每次的繁殖倍数为5计算。

天数（d）	40	80	120	160	200	240	280	320
									苗数(棵)	1	5	25	125	625	3125	15625	78125

具体实施方式

本发明实施例所使用的试剂，如未特别说明，市售的均为实现本发明。

实施例1：

一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，其步骤是：

1.取星花粉条儿菜健康、饱满种子，先用1%质量比洗衣粉水浸泡4min或5min或6min，再用自来水冲洗干净，在超净工作台上用75%（体积比）的酒精溶液表面浸泡约10s或15s或20s或25s或30s，无菌水冲洗3次或4次或5次，再用0.1%（重量比）升汞溶液消毒10min或11min或12min或13min或14min或15min，无菌水冲3次或4次或5次，接种到MS培养基中。

2.光照培养，温度为25℃或26℃或27℃或28℃，光强1500Lx或2000Lx或2500Lx或3000Lx，每天光照10h或12h或14h或16h，培养30d或40d或50d或60d，种子萌发出高度为0.2cm或0.3cm或0.4cm或0.5cm小苗；

3.在无菌条件下，用灭菌的手术刀切取下胚轴，接种于配制好的丛芽诱导培养基中，诱导培养基的配方为：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.4mg/L+琼脂5000mg/L+白糖30000mg/L；

4.光照培养，温度为25℃或26℃或27℃或28℃，光强1500Lx或2000Lx或2500Lx或3000Lx，每天光照10h或12h或14h或16h，培养30d或40d或50d或60d，长出丛芽；

5.将丛芽切割成0.4cm或0.5cm或0.6cm小丛芽转入步骤3中的丛芽诱导培养基中进行芽的继代增殖培养，以后每隔25d或30d或35d继代1次，继代培养过程中将苗高3cm或4cm或5cm或6cm或7cm的小苗转生根培养基中，生根培养基的配方为：1/2MS+IBA0.2mg/L+琼脂5000mg/L+白糖30000mg/L+活性炭0.2%（质量比）；

6.星花粉条儿菜试管苗接种于生根培养基中30d或35d或40d，待长5条以上根时开瓶炼苗5d或6d或7d，将瓶内苗取出，用0.004%重量比NAA溶液浸苗根基部10min或12min或15min，将组培苗移栽到基质（草炭/珍珠岩/蛭石=2/1/1，体积比）中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15℃或16℃或17℃或18℃或19℃或20℃，湿度80%或85%或90%以上，7d或9d或11d或13d或15d后揭膜，第一天中午揭膜时间为1h或2h，后逐渐延长揭膜时间，直至不覆膜，揭膜期间平均温度保持15℃～25℃，湿度保持80%～95%，每隔2～3周浇施0.2%尿素和0.1%KH₂PO₄或稀薄粪水，保证棚内生长期肥水管理条件相一致，注意进行病虫害防治，组培苗成活率达95%以上。

实施例2：

一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，其步骤是：

1.取星花粉条儿菜健康、饱满种子，先用1%质量比洗衣粉水浸泡5min，再用自来水冲洗干净，在超净工作台上用75%（体积比）的酒精溶液表面浸泡30s，无菌水冲洗5次，再用0.1%（重量比）升汞溶液消毒15min，无菌水冲5次，接种到MS培养基中。

2.光照培养，温度为25℃，光强2000Lx，每天光照14h，培养50d，种子萌发出高度为0.3cm小苗；

4.光照培养，温度为25℃，光强2000Lx，每天光照14h，培养40d，长出丛芽；

5.将丛芽切割成0.5cm小丛芽转入步骤3中的丛芽诱导培养基中进行芽的继代增殖培养，以后每隔30d继代1次，继代培养过程中将苗高6cm的小苗转生根培养基中，生根培养基的配方为：1/2MS+IBA0.2mg/L+琼脂5000mg/L+白糖30000mg/L+活性炭0.2%（质量比）；

6.星花粉条儿菜试管苗接种于生根培养基中30d，待长5条以上根时开瓶炼苗5d，将瓶内苗取出，用0.004%重量比NAA溶液浸苗根基部12min，将组培苗移栽到基质（草炭/珍珠岩/蛭石=2/1/1，体积比）中，浇足定根水，用量以湿遍苗床基质为度，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在18℃，湿度85%，7d后揭膜，第一天中午揭膜时间为2h，后逐渐延长揭膜时间，直至不覆膜。在整个揭膜过程中，苗床湿度保持在85%，平均温度保持18℃～20℃。每隔2～3周浇施0.2%尿素和0.1%KH₂PO₄，保证棚内生长期肥水管理条件相一致，注意进行病虫害防治，组培苗成活率达98%。

Claims

1.一种星花粉条儿菜快速繁殖方法，其步骤是：

A、取星花粉条儿菜健康、饱满种子，先用1 %质量比洗衣粉水浸泡4~6 min，再用自来水冲洗，后在超净工作台上用75 %体积比的酒精溶液浸泡10~30 s，无菌水冲3~5次，再用0.1 %重量比升汞溶液消毒10~15 min，无菌水冲3~5次，接种到MS培养基中；

B、光照培养，温度为25~28 ℃，光强1500~3000 Lx，每天光照10~16 h，培养30~60 d，种子萌发出高度为0.2~0.5 cm小苗；

C、在无菌条件下，用灭菌的手术刀切取下胚轴，接种于配制好的丛芽诱导培养基中，诱导培养基的配方为：MS+6-BA1.0~3.0 mg/L+NAA 0.3~0.5 mg/L+琼脂4000~ 6000 mg/L+白糖 20000~30000 mg/L；

D、光照培养，温度为25~28 ℃，光强1500~3000 Lx，每天光照10~16 h，培养30~60 d，长出丛芽；

E、将丛芽切割成0.4cm~0.6cm小丛芽转入C步骤中的丛芽培养基中进行芽的继代增殖培养，以后每隔25~35 d 继代1 次，继代培养过程中将苗高3~7 cm的小苗转生根培养基中，生根培养基的配方为：1/2MS+IBA 0.1~0.3 mg/L +琼脂4000~6000 mg/L+白糖 30000~60000 mg/L+活性炭0.1 %~0.3 %，质量比；

F、星花粉条儿菜试管苗接种于生根培养基中30~40 d，待长5条以上根时开瓶炼苗5~7 d，将瓶内苗取出，用0.003 %~0.005 %重量比NAA溶液浸苗根基部10~15 min，将组培苗移栽到基质中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15~20 ℃，湿度80~90 %，7~15 d后揭膜，逐步延长揭膜时间，直至不覆膜，每隔2~3周浇施 0.1 %~0.3 %重量比尿素和0.1 %~0.3 %重量比KH₂PO₄或稀薄粪水，将成活苗移栽；

所述的基质为：草炭/珍珠岩/蛭石=2/1/1，体积比。

2.根据权利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，揭膜期间平均温度保持15 ℃~25 ℃，湿度保持80%~95%。