CN103536622B - 羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药品及保健品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药物及保健品中的应用，本发明还提供一种抗衰老药物和抗衰老保健品，所述的抗衰老药物和抗衰老保健品是由羊栖菜硫酸多糖和药学上可接受的载体组成，本发明制备了抗衰老药物和抗衰老保健品的片剂和口服液制剂。其优点在于：证实了羊栖菜硫酸多糖在抗衰老和延长寿命中的作用，为研制以羊栖菜硫酸多糖为活性成分的抗衰老药物和抗衰老保健品提供了依据，并研制成功羊栖菜硫酸多糖的片剂和口服液制剂。

Description

羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药品及保健品中的应用

技术领域

本发明涉及羊栖菜硫酸多糖的新用途，具体地说，是羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药品及保健品中的应用。

背景技术

目前抗衰老保健食品和药物研究是一个热点，各种抗衰老保健产品种类繁多。多糖类化合物在自然界中分布广泛，是生命物质的重要组成成分。研究表明，多糖类化合物不仅能够调节免疫细胞间信息的传递与感受，还具有控制细胞的分化、分裂，调节细胞的生长和维持生命有机体的正常代谢等多种功能。海洋生物由于具有特殊的生存环境，常含有一些具有结构的多糖，研究发现多种海洋生物的多糖类化合物具有多种生物学功能，其中一些多糖在抗衰老方面也有独特的效果，刘玉兰等研究了螺旋藻多糖的抗衰老作用，孙国光等报道了褐藻多糖硫酸酯对老龄小鼠过氧化酶和脂褐素的影响。

羊栖菜，属褐藻门（Phaeophuta）墨角藻目（Fucales）马尾藻科（Sargassaceae），是北太平洋西部特有的暖温带植物，在我国广泛分布于浙江、辽宁、山东福建等省的沿海，其中以浙江温州地区尤为丰富。羊栖菜含有丰富的多糖、膳食纤维、维生素和矿物质，含有人体所需的14种微量元素，铅含量远远低于其他海藻。据报道，羊栖菜具有抗菌、抗病毒、防癌抗癌、抗氧化、抗诱变、抗凝血、降血压、降血脂、免疫调节等生物活性功能与其含有的多糖密切相关。国内对羊栖菜，尤其是羊栖菜中的多糖研究比较多，主要是抗氧化和抗凝血活性等。

羊栖菜硫酸多糖（SPS）是羊栖菜提取物，目前研究表明其具有抗凝血和抗氧化的作用。如中国期刊《中国海洋药物杂志》2006年6月第25卷第3期，刊出的文章“三种藻类硫酸多糖的提取及其清除自由基活性研究”，从羊栖菜中提取到羊栖菜硫酸多糖，并通过DPPH法证明了羊栖菜硫酸多糖具备较强的抗氧化活性，是有效的自由基清除剂。

对衰老机制的长期研究形成了多种衰老学说，包括程序衰老说、体细胞突变说、错误成灾说、自由基说、神经内分泌说、免疫衰老说、细胞之学说等。自由基说认为衰老过程源于自由基对细胞及组织的毒害，在生物代谢过程中自由基不断产生，其性质十分活跃，在体内很不稳定，易与体内蛋白质、脂肪等发生反应，生成蛋白质，脂质等物质的氧化物或过氧化物，从而失去原来的作用，对自身产生损害作用，导致衰老。而由上述众多学说可见，衰老是一个十分复杂的过程，因此，即使现有技术已经披露了羊栖菜硫酸多糖具备清除自由基的抗氧化活性，但是并不能证实羊栖菜硫酸多糖具备抗衰老效果，尤其是延长寿命的效果，而目前关于羊栖菜硫酸多糖的抗衰老活性还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种羊栖菜硫酸多糖的用途。

本发明的再一的目的是，提供一种抗衰老药物或保健品。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药物或抗衰老保健品中的应用；

所述的羊栖菜硫酸多糖是利用以下方法提取的：

（1）将羊栖菜在80%乙醇溶液中搅拌浸提24h，浸提两次后，将残渣以料水质量比1∶10的比例混合，0.1% HCl溶液调pH至4，在30℃水浴中浸提3h，用200目纱布将浸提后的溶液过滤，再经真空浓缩、真空冷冻干燥24h，得到羊栖菜粗多糖；

（2）将步骤（1）提取的羊栖菜粗多糖的水提液浓缩后加入乙醇至乙醇质量浓度为30%，离心沉淀取上清，再加入乙醇至乙醇浓度为60%，离心，所得沉淀即为硫酸多糖。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

一种抗衰老药物或保健品，它由羊栖菜硫酸多糖和药学上可接受的载体组成；

所述的抗衰老药物或保健品是片剂或口服液制剂。

本发明优点在于：证实了羊栖菜硫酸多糖具有抗衰老作用，可延长果蝇寿命，说明羊栖菜硫酸多糖在制备抗衰老药物及保健品中具有广阔的应用前景。

具体实施方式

下面对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1  羊栖菜硫酸多糖的提取

采取水提法提取羊栖菜硫酸多糖，具体方法如下：

（1）羊栖菜粗多糖的提取

羊栖菜原料在80%乙醇溶液中搅拌浸提24h，浸提两次，去除色素等，分别得到乙醇提取物和藻渣。将残渣用热水浸提，以料水比质量比1∶10的比例混合，0.1% HCl溶液调pH至4，在30℃水浴中浸提3h，用200目纱布将浸提后的溶液过滤，再经真空浓缩、真空冷冻干燥24h，得到残渣水提物，即为羊栖菜粗多糖。

（2）羊栖菜硫酸多糖的提取

将羊栖菜粗多糖的水提液用旋转蒸发器旋转蒸发浓缩，条件为：旋转蒸发器50r/min，水浴锅浴温55℃，油泵真空度0.1Mpa，将水提液浓缩至原体积的1/5左右。其中主要杂质是海藻酸，而海藻酸在质量分数30%乙醇溶液中的溶解度最小，利用这个性质，在浓缩的羊栖菜多糖水提液中加入乙醇至乙醇浓度达到30%。为使反应充分，乙醇加入速度要缓慢（加入时间不少于30min），搅拌要充分。将30%的乙醇溶液离心（5000r/min）30min，使海藻酸沉淀，得沉淀和上清液。用30%的乙醇将沉淀洗涤，再次离心（5000r/min）30min，得沉淀和上清液。将两次上清液合并，得一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液，在一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液中加入乙醇，使乙醇浓度达到60%，加乙醇过程中要充分搅拌，并且加入时间不少于30min。将60%的乙醇溶液离心（5000r/min）30min，得沉淀和上清液，其中沉淀为羊栖菜硫酸多糖。将沉淀进行真空冷冻干燥，干燥样品剪碎储存于干燥器中备用。

经测定，羊栖菜硫酸多糖粗品的产率为3.78%。

实施例2  羊栖菜硫酸多糖的抗衰老试验

采用果蝇寿命实验研究海藻活性多糖的抗衰老效果，以抗衰老研究及应用较成熟的黄芪多糖为对照，以计算平均寿命（每组果蝇全部寿命的算术平均数）和最高寿命（每组最后死亡的10只果蝇的寿命的算术平均数）以及半数死亡时间（前半数果蝇寿命的算术平均数）为评价指标。

1 实验方法

1.1果蝇寿命实验前处理

①基础培养基配方：培养基各成分见表1，以上各成分用自来水溶解，自然pH值。

表1  基础培养基配方

名称	玉米粉	乳糖	琼脂	丙酸	干酵母粉
						含量	10%	5%	1.50%	0.15%	1%

②基础培养基配置方法：将10g玉米粉倒入250ml烧杯中，加自来水50ml，在煤气灯上加热调成糊状。将琼脂1.5g放入100ml烧杯中，加自来水50ml，在煤气灯上煮沸使充分溶解，加乳糖5g、丙酸1ml，煮沸溶解。将上述两者混合煮沸后，立即加入干酵母粉1.0g，充分调匀。

③受试物处理：受试物即提取的多糖提取液在加入饲料之前，必须用水充分调匀，受试物浓度为1%左右。

1.2果蝇的处理和衰老指标统计

卵、幼虫、蛹及成虫均培养在25℃，65%相对湿度的暗箱中。将常用基础饲料煮成粥后分装于无菌培养指管（3cm×13cm）中，每支培养管内基础饲料厚度为0.5-1.0cm，用双层无菌白棉布封口，成虫基础饲料每3天更换一次，将培养管平放在恒温箱内培养。把蘸有乙醚的脱脂棉球放入带有内径1mm针头的10ml注射器内，来回抽动，将乙醚蒸汽用注射器打入盛有果蝇的指管中，严防液态乙醚打入，待果蝇完全麻醉后倒出分组，每管40只左右，每组各1管。

在成虫期把多糖提取液加入到基础饲料中，并保持各组pH一致。每天定时3次统计果蝇存活数、死亡数，直到全部死亡。每组最后死亡的10只果蝇成虫存活天数的平均数为该组的最高寿命。实验结束，计算平均寿命（每组果蝇全部寿命的算术平均数）和最高寿命（每组最后死亡的10只果蝇的寿命的算术平均数）以及半数死亡时间（前半数果蝇寿命的算术平均数）。

2 实验结果

多糖对果蝇半数死亡时间、平均寿命、最高寿命的影响分别列入表2、表3和表4。

表2 多糖对果蝇半数死亡时间的影响（                                                ±SD）

组别	果蝇数	半数死亡期/d	延长幅度（%）
				对照（空白）	25	24.5±10.3	-
羊栖菜多糖	24	28.6±9.8	16.70
				黄芪多糖	26	29.1±10.1	18.80

表3 多糖对果蝇平均寿命的影响（±SD）

组别	果蝇数	平均寿命/d	延长幅度（%）
				对照（空白）	50	34.1±12.6	-
羊栖菜多糖	48	39.9±12.9	17.00
				黄芪多糖	52	41.4±13.5	21.40

表4 多糖对果蝇最高寿命的影响（±SD）

组别	果蝇数	最高寿命/d	延长幅度（%）
				对照（空白）	50	48.5±3.7	-
羊栖菜多糖	52	55.9±4.2	15.30
				黄芪多糖	49	57.1±3.5	17.70

以上研究表明：羊栖菜多糖与黄芪多糖相同，对果蝇的寿命具有显著的延长作用，可知羊栖菜多糖具备抗衰老活性，可用作抗衰老药物或保健品的活性成分。

实施例3  羊栖菜硫酸多糖制成的抗衰老药物及保健品

1、片剂

（1）制剂处方如下：

（2）制备工艺是：

①提取：按实施例1所述的提取方法从羊栖菜中提取羊栖菜粗多糖，将所得到的提取液浓缩，备用；

②精制：上述羊栖菜粗多糖经浓缩至一定浓度的稠膏，加入等量95%乙醇，充分混合均匀，静置冷藏12h以上，滤过，滤液回收乙醇后，再继续浓缩至稠膏状；

③制粒：取上述稠膏状羊栖菜硫酸多糖10g，加适量适当浓度的乙醇、淀粉和糊精制软材，过一号筛（12-14目）制成颗粒；

④干燥：将上述制得的湿颗粒放在干燥箱中迅速干燥，在60℃下干燥24h；

⑤压片：加入滑石粉、硬脂酸镁，混匀，压制成1000片，用蔗糖包糖衣或薄膜衣，即得；

⑥包装：选用复合铝塑料袋分装，该复合铝塑料袋不易透湿、透气，贮存期内不会出现吸潮、软化等现象。

2、口服液剂

（1）制剂处方如下：

羊栖菜硫酸多糖	10g
		蔗糖	70g
柠檬酸	2g
		苯甲酸钠	1.5g
蒸馏水	加至总量1000ml

（2）制备方法：

①在羊栖菜硫酸多糖加入少量蒸馏水，稍加热，不断搅拌使之溶解；

②将柠檬酸和苯甲酸钠溶解于少量蒸馏水中；

③合并两种液体，搅拌混匀；

④加入蔗糖，加蒸馏水至1000ml，搅拌使之溶解成透明溶液；

⑤将液体过滤除去不溶性杂质，得到透明均一的液体制剂；

⑥在无菌条件下分装于消过毒的安培瓶中密封保存。

本发明考虑到提取出来的羊栖菜硫酸多糖本身具有比较特殊的味道，可能会影响其被接受的程度，因此在口服液制剂中加入了一定量的矫味剂以改善其口味，并对本发明的口服液制剂做了口感调试，同时考虑到经济因素，最终选定蔗糖和柠檬酸作为矫味剂。此外，由于水溶性液体制剂容易霉变，所以必须加入防腐剂，本发明选用了苯甲酸钠作为防腐剂。

口服液剂具有下列优点：分散度大，吸收快，能迅速地发挥药效；易于分剂量，服用方便，特别适用于老年患者和吞咽有困难的人；口感好，易于被受众所接受等。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.羊栖菜硫酸多糖粗品在制备抗衰老药物或抗衰老保健品中的应用，其特征在于，所述的羊栖菜硫酸多糖粗品是利用以下方法提取的：

（1）将羊栖菜在80%乙醇溶液中搅拌浸提24h，浸提两次后，将残渣以料水质量比1∶10的比例混合，0.1% HCl溶液调pH至4，在30℃水浴中浸提3h，用200目纱布将浸提后的溶液过滤，再经真空浓缩、真空冷冻干燥24h，得到羊栖菜粗多糖；

（2）将步骤（1）制备的羊栖菜粗多糖的水提液用旋转蒸发器旋转蒸发浓缩，条件为：旋转蒸发器50r/min，水浴锅浴温55℃，油泵真空度0.1Mpa，将水提液浓缩至原体积的1/5左右，在浓缩的羊栖菜多糖水提液中加入乙醇至乙醇浓度达到30%，且乙醇的加入时间不少于30min，将30%的乙醇溶液5000r/min离心30min，使海藻酸沉淀，得沉淀和上清液，用30%的乙醇将沉淀洗涤，再次5000r/min离心30min，得沉淀和上清液，将两次上清液合并，得一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液；在一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液中加入乙醇，使乙醇浓度达到60%，并且加入时间不少于30min，将60%的乙醇溶液5000r/min离心30min，得沉淀和上清液，其中沉淀为羊栖菜硫酸多糖粗品。

2.一种抗衰老药物或保健品，其特征在于，它由羊栖菜硫酸多糖粗品和药学上可接受的载体组成，所述的羊栖菜硫酸多糖粗品是利用以下方法提取的：

（1）将羊栖菜在80%乙醇溶液中搅拌浸提24h，浸提两次后，将残渣以料水质量比1∶10的比例混合，0.1% HCl溶液调pH至4，在30℃水浴中浸提3h，用200目纱布将浸提后的溶液过滤，再经真空浓缩、真空冷冻干燥24h，得到羊栖菜粗多糖；

（2）将步骤（1）制备的羊栖菜粗多糖的水提液用旋转蒸发器旋转蒸发浓缩，条件为：旋转蒸发器50r/min，水浴锅浴温55℃，油泵真空度0.1Mpa，将水提液浓缩至原体积的1/5左右，在浓缩的羊栖菜多糖水提液中加入乙醇至乙醇浓度达到30%，且乙醇的加入时间不少于30min，将30%的乙醇溶液5000r/min离心30min，使海藻酸沉淀，得沉淀和上清液，用30%的乙醇将沉淀洗涤，再次5000r/min离心30min，得沉淀和上清液，将两次上清液合并，得一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液；在一次纯化的羊栖菜硫酸多糖的乙醇溶液中加入乙醇，使乙醇浓度达到60%，并且加入时间不少于30min，将60%的乙醇溶液5000r/min离心30min，得沉淀和上清液，其中沉淀为羊栖菜硫酸多糖粗品。

3.根据权利要求2所述的抗衰老药物或保健品，其特征在于，所述的抗衰老药物或保健品是片剂或口服液制剂。