CN103535276B - 一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法，主要步骤包括以幼嫩的块茎茎尖为外植体，经消毒处理后，在立式显微镜下剥取0.1-0.3mm大小的生长点，接种到不定芽诱导培养基，再将不定芽转入壮苗培养，然后将健壮试管苗转入生根培养基，最后将试管苗进行炼苗和移栽。本发明不仅能达到蘘荷苗组织培养与脱毒快繁的效果，且提高了增值效率，缩短了生产周期，为蘘荷的规模化育苗提共了一条有效途径。
Description
技术领域
本发明涉及药用植物组织培养快繁领域，确切地说是一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法。
背景技术
蘘荷（ZingiberMiogaRosc）别名阳藿、蘘草、野姜、名荷等，为姜科姜属多年生草本植物，主要食用部分为花轴。具有活血调经、镇咳祛痰、消肿解毒消积健胃等药用功效，蘘荷富含多种维生素和铁、锌、硒等多种微量元素及纤维素、芳香酯等，且清香可口，是一种营养价值很高的食药同源的膳食纤维蔬菜。主要取食蘘荷的嫩芽和花穗，包括花穗外面的肉质鳞片。襄荷中富含膳食纤维，可通过糖渍工艺将襄荷制成即食高纤维果脯，营养成分分析还发现襄荷富含矿物质、氨基酸、有机酸等，还含有药用成分α-蒎烯、β-蒎烯等，据此可通过热水浸提法提取襄荷中的营养成分和药用保健成分作为饮料的原液配制成保健型饮料。另外，糖渍工艺的副产品糖渍液也可作为饮料生产的原液配制饮料。
蘘荷虽开花结实，但种子发芽率低，生长缓慢。而采用地下茎繁殖生长快，定植当年即可有少量收获，所以生产上的常规繁殖方式为块茎分蔸繁殖，但这种无性繁殖方式会随着种植代数的增加而造成病毒的积累，从而导致品种劣化和产量降低，此外，在进行大规模种植时，需要消耗大量的种块茎，增加了种植成本，而组织培养快繁技术则成为了解决这些问题的有效途径，因此，蘘荷的组织培养快繁技术的应用，可为其大规模生产提供技术保障。
发明内容
本发明的目的一种高效的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，通过试管组培快繁可以不受季节和时间场地限制，快速、高效的繁殖，提供充足的种源和保证品种的纯度
上述目的通过以下方案实现：
一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：具体步骤为，以蘘荷幼嫩块茎茎尖为外植体，经消毒处理后，在立式显微镜下剥取0.1-0.3mm大小的生长点，转入不定芽诱导培养基进行培养，待不定芽长至1-2cm转入壮苗培养基中，待试管苗长至3-5cm转入生根培养基中，当根长为3-5cm将健壮的生根苗进行炼苗和移栽。
所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：所述不定芽诱导培养基是以MS为基本培养基，添加1.0-1.5mg/L6-BA和0.3-0.5mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂。
所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：所述壮苗培养基以MS为基本培养基，添加0.3-0.5mg/L6-BA和0.1-0.3mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂。
所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加0.3-0.5mg/LIBA,15g/L糖,3g/L琼脂。
所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：试管苗的培养条件：温度25±1℃，光照1500-2000Lx/12h.d，pH为5.8-6.0。
所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：所述的炼苗和移栽指的是：将生根苗移下培养架，放置于室温、自然光照，适应自然环境，锻炼3d-5d，然后打开瓶盖清洗根部琼脂，移栽入蛭石基质中，浇透定根水，覆膜保湿3-4d，7-15d可长出新根，待蘘荷幼苗成活后除去遮盖物，进行常规管理，加强光照，保持通风和温度在20-25℃之间，湿度保持在80-90%，当苗长至15-20cm时既可移栽到田间。
本发明的有益效果为：
(1)可以不受自然条件和地区差异的限制：常规繁殖方法受所在地区气候及地理条件的限制，本发明可以在室内提前进行繁育，相当于缩短了蘘荷在户外的生长时间，同时试管苗可以通过转接而长期保存，一旦需要可以再次进入新一轮的培养；
（2)利用茎尖组织培养与试管苗快繁，解决了长期无性繁殖病毒积累而导致种性退化问题。侵染蘘荷病毒的病毒原为黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒（TMV)，病毒长期在蘘荷体内累积，是蘘荷种性退化的重要原因。主要表现症状为叶面出现淡黄色线条斑，引起系统花叶、退绿、皱缩等。严重时，植株萎缩、矮化。本发明可以快速、高效的繁殖无病毒植株，尤其是对蘘荷新引进的品种和珍惜品种的繁衍极为有利，可以用很少的材料在短时间内实现该品种的大量扩繁，确保了种苗纯度，提高了蘘荷的产量和品质，有利于推进蘘荷产业化生产。
（3）其中的不定芽诱导培养基，是以MS为基本培养基，添加1.0-1.5mg/L6-BA和0.3-0.5mg/LIBA，诱导出不定芽数，且无愈伤组织及玻璃化问题，获得的健壮苗长势旺，可直接转入生根培养基中，生根率达100%，试管苗移栽成活率在95%以上。本发明不仅能达到蘘荷苗组培脱毒快繁的效果，且提高了增值效率，缩短了生产周期，为蘘荷的规模化育苗提共了一条有效途径。
具体实施方式
一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法，具体步骤为：
以蘘荷幼嫩块茎茎尖为外植体，经消毒处理后，在立式显微镜下剥取0.2mm大小的生长点，转入不定芽诱导培养基进行培养，待不定芽长至1.5cm转入壮苗培养基中,试管苗的培养条件为，温度25℃，光照1500Lx/12h.d，pH为6.0；
待试管苗长至3cm转入生根培养基中，当根长为5cm将健壮的生根苗进行炼苗，将生根瓶苗移下培养架，放置于室温、自然光照，以适应自然环境，锻炼5d，再打开瓶盖清洗根部琼脂，移栽入蛭石基质中，浇透定根水，覆膜保湿4d，12d长出新根，待蘘荷幼苗成活后除去遮盖物，进行常规管理，加强光照，保持通风和温度在20-30℃之间，湿度保持在80-90%，当苗长至20cm时既可移栽到田间。
所述不定芽诱导培养基是以MS为基本培养基，添加1.5mg/L6-BA和0.3mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂。
所述壮苗培养基以MS培养基为基本培养基，添加0.3mg/L6-BA和0.3mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂。
生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加0.5mg/LIBA,15g/L糖,3g/L琼脂。
本实施例试管苗生根率达100%，移栽成活率在95%以上，不仅能达到蘘荷苗组织培养与脱毒快繁的效果，且提高了增值效率，缩短了生产周期，为蘘荷的规模化育苗提共了一条有效途径。
Claims (3)
1.一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：具体步骤为，以蘘荷幼嫩块茎茎尖为外植体，经消毒处理后，在立式显微镜下剥取0.1-0.3mm大小的生长点，转入不定芽诱导培养基进行培养，待不定芽长至1-2cm转入壮苗培养基中，待试管苗长至3-5cm转入生根培养基中，当根长为3-5cm将健壮的生根苗进行炼苗和移栽；所述不定芽诱导培养基是以MS为基本培养基，添加1.0-1.5mg/L6-BA和0.3-0.5mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂；所述壮苗培养基以MS为基本培养基，添加0.3-0.5mg/L6-BA和0.1-0.3mg/LIBA,30g/L糖,3g/L琼脂；生根培养基以1/2MS为基本培养基，添加0.3-0.5mg/LIBA,15g/L糖,3g/L琼脂。
2.根据权利要求1所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：试管苗的培养条件：温度25±1℃，光照1500-2000Lx/12h ·d，pH为5.8-6.0。
3.根据权利要求1所述的蘘荷组织培养快速繁殖的方法，其特征在于：所述的炼苗和移栽指的是：将生根苗移下培养架，放置于室温、自然光照，适应自然环境，锻炼3d-5d，然后打开瓶盖清洗根部琼脂，移栽入蛭石基质中，浇透定根水，覆膜保湿3-4d，7-15d长出新根，待蘘荷幼苗成活后除去遮盖物，进行常规管理，加强光照，保持通风和温度在20-25℃之间，湿度保持在80-90%，当苗长至15-20cm时移栽到田间。
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