CN103524590A

CN103524590A - 甘草酸二乙酯及其制备方法

Info

Publication number: CN103524590A
Application number: CN201210228701.1A
Authority: CN
Inventors: 袁继文; 杨永安; 钟慧; 易铭; 金显友; 魏元刚; 黄全书; 季浩
Original assignee: Jiangsu Tiansheng Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Tiansheng Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-07-04
Filing date: 2012-07-04
Publication date: 2014-01-22

Abstract

本发明提供了一种甘草酸二乙酯的制备方法，属于有机化学领域。采用科学可行的方法以甘草酸单铵盐为原料经过酯化，柱层析，浓缩等步骤，制成了脂溶性好、纯度高的甘草酸二乙酯。以本发明所制备的甘草酸二乙酯为原料，加入药学上可接受的辅料，可以进一步将本品制成各种适合于临床应用的制剂，用于肝脏疾病的临床治疗。本发明提供的甘草酸二乙酯及其制备方法的工艺简单，稳定性好，适合工业化生产，具有很强的实用性。

Description

甘草酸二乙酯及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种新的化合物甘草酸二乙酯，以及该化合物的制备及药用用途，属于有机化学领域。

背景技术

众所周知，肝病具有用药周期较长，难以彻底治愈的特点。随着人们对这一疾病认知度的提高，肝病系列药物有了快速的发展，已形成了以化学药物、植物提取药和中成药三大系列为主的市场结构。其中的肝病辅助用药正以很快的速度增长，纵观国内医药市场，肝病辅助用药、治疗肝昏迷药物较多，而且市场用量较大。甘草酸系列产品是其主要品种之一。肝病辅助治疗药物对细胞膜结构及细胞代谢有着较好的稳定作用，能抵抗肝细胞的坏死，减轻脂肪肝变性，促进蛋白合成，抑制丙氨酸氨基转移酶的升高，通过利胆、解毒、抑制体内自由基的产生和过氧化脂质的形成，从而修复损伤的肝细胞、保护肝脏。

由于甘草酸及其盐都存在口服生物利用度较低的问题，不能达到较好的疗效，因而制备出溶解性好、生物利用度高、疗效确切的甘草酸衍生物，具有很好的现实意义。

在专利申请号为CN200610040050.8的名为《18A-甘草酸衍生物及其制剂》的发明专利中，公开了制备18A-甘草酸烷基酯的制备方法，其工艺为：将18α甘草酸溶解于低浓度醇中，在室温下，缓慢滴加乙酰氯(约0.5～1小时)，加毕继续搅拌0.5～1小时，得18α-甘草酸烷基酯。虽然该专利中也有18α-甘草酸二乙酯的制备，但其制备工艺路线与本发明提供的制备方法完全不同，最终产物18α-甘草酸二乙酯与本发明中所制备的目标产物也不相同。

本发明的优势在于从提高产品生物利用度、扩大产品应用范围的角度出发，利用化学合成方法，制备出甘草酸二乙酯，用于肝脏疾病的临床治疗。本发明提供的甘草酸二乙酯具有很好的治疗肝脏疾病的作用，可以口服给药。其制备方法重复性好，可适用于生产放大，易于推广，具有很强的实用性。

在已经公开的专利和文献中，未见相关甘草酸二乙酯及其制备方法的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种高纯度的甘草酸二乙酯。

本发明的另一目的在于提供一种甘草酸二乙酯的制备方法。采用化学合成的方法，利用甘草酸与乙醇的硫酸溶液反应，并通过适当的分离纯化技术，提供了一种具有很好治疗肝脏疾病的甘草酸二乙酯。本化合物可以加入适量的辅料制成各种剂型，临床用于肝脏疾病的治疗。

其分子结构如下：

根据本发明的比较优选的实施方案，甘草酸二乙酯的制备方法包括如下步骤：

(1)取甘草酸单铵盐，加入含一定浓度硫酸的乙醇溶液，加热搅拌一段时间；

(2)向反应溶液中加入一定浓度的氢氧化钠乙醇溶液，使溶液呈中性，浓缩干溶液，加水，乙酸乙酯萃取，有机相干燥，硅胶拌样，蒸干；

(3)将拌样的硅胶上硅胶柱，上柱完成后，用一定比例的乙酸乙酯和甲醇混合液冲洗后，再用甲醇浓度更高的乙酸乙酯和甲醇混合液洗脱，浓缩，得到甘草酸二乙酯。

上述步骤(1)中所述的“含一定量浓度硫酸的乙醇溶液”是指硫酸重量百分比为0.1％～3％的乙醇溶液；甘草酸单铵盐含量为70％～85％；加热温度可以为20～60℃，优选50℃。在本步骤中，运用羧酸和醇在硫酸催化的条件下酯化的原理可以将甘草酸生成甘草酸二乙酯。步骤所述的“加热搅拌一段时间”是指2.5～4小时，实验表明反应时间低于2.5小时甘草酸反应不完全，影响反应的产率，当反应时间高于4小时时又有甘草酸三乙酯生成，优选的反应时间为3小时。

步骤(2)中“一定浓度的氢氧化钠乙醇溶液”是指氢氧化钠重量百分比为2～8％的乙醇溶液，加入氢氧化钠溶液的目的是中和反应溶液中的硫酸，因为在酸性条件下浓缩乙醇，甘草酸二乙酯可以继续反应生成甘草酸三乙酯。如氢氧化钠的浓度太低，需要乙醇氢氧化钠溶液的量较大；如氢氧化钠的浓度过高加入溶液中会放热，使甘草酸二乙酯分解成甘草酸或甘草酸单乙酯，因此优选的氢氧化钠的浓度为5％。

步骤(3)中层析柱中的硅胶为200～300目，目数低于200流速快，分离效果差；目数高于300目，分离效果好但流速慢，不利于大量生产，因此优选的硅胶为200～300目。步骤中“一定比例的乙酸乙酯甲醇混合液”是指V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝20∶1，目的是先冲洗极性小的杂质，然后增加甲醇的浓度，用V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝15∶1洗脱甘草酸二乙酯。

根据上述技术方案，采用科学可行的方法以甘草酸单铵盐为原料经过酯化，过层析柱，浓缩等一系列步骤，制成了脂溶性好、纯度高的甘草酸二乙酯，含量范围为93～99.5％。以本发明所制备的甘草酸二乙酯为原料，可以进一步加入药学上可接受的辅料，将本品制成各种适合于临床应用的制剂，包括片剂、胶囊、软胶囊，临床用于肝脏疾病的治疗。

本发明提供的技术方案经多批工业化生产验证，工艺稳定性、重复性好，质量可控，具有很强的实用性。

以下通过本发明提供的甘草酸二乙酯抗CCl₄肝损伤的实验研究，并与甘草酸单铵盐进行对比，来进一步说明本发明的实用性。

1.实验材料

小鼠：雄性ICR 40只，3～4周龄，体重18+2g。在23～25℃，湿度55～65％环境中饲养，自由摄食、饮水。

2.试剂和配制

试剂：四氯化碳(分析纯)、橄榄油。

配制1％四氯化碳配制：取四氯化碳1ml，加橄榄油稀释至100ml，混匀。

3.小鼠四氯化碳模型实验方案

实验步骤：

试验分为4组，分别为正常组、模型组、甘草酸单铵盐注射液和甘草酸单铵盐口服阳性对照组、甘草酸二乙酯口服用药组。取小鼠40只。肝损伤小鼠模型的制备：小鼠40只，用0.2％四氯化碳油溶液腹腔注射，每10g体重用量为0.1ml，每3天一次，连续2次。所有小鼠随机分为4组，每组10只，肝损伤同时分别给予模型组：用生理盐水0.02ml/kg灌胃，连续6天；阳性对照组：用甘草酸单铵盐注射液以50mg/kg剂量腹腔注射或灌胃，连续6天；用药组：用甘草酸二乙酯以50mg/kg剂量灌胃，连续6天。测定方法：给药后第7天，将小白鼠断头取血，采用贝克曼CX9全自动生化分析仪测定血清ALT(谷丙转氨酶)及AST(谷草转氨酶)。

表1甘草酸单铵盐注射、甘草酸单铵盐口服、甘草酸二乙酯口服对小鼠四氯化碳肝损伤生化指标的影响

组别	动物数	ALT(1UL)	AST(1UL)
				空白组	10	85±19	287±44

模型组	10	4580±1801	8700±2154
				用药组(甘草酸单铵盐)	10	2100±1145*	4329±1867**
用药组(甘草酸二乙酯)	10	1467±727*	3505±1777**

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

从小鼠肝功能变化比较可知：模型组的ALT和AST明显比正常组高，说明四氯化碳灌胃可以造成小鼠化学性肝损伤；本专利制剂甘草酸二乙酯与甘草酸单铵盐用药组比较，ALT和AST明显降低，说明甘草酸二乙酯效果优于甘草酸单铵盐，药理作用得到提高。

结论：动物药效学试验研究提示，甘草酸二乙酯具有显著的抗肝损伤作用，其效果优于甘草酸单铵盐，这可能与甘草酸单铵盐脂溶性很小，口服吸收利用较差有关。

具体实施方式

以下实施例中所用的甘草酸单铵盐由江苏天晟药业有限公司研发中心提供，含量为75.4％。下面结合具体实施例对本发明进一步描述，但本发明的保护绝不局限于此。

实施例1

取甘草酸单铵盐500克，向其加入2000ml 2％的硫酸乙醇溶液，50℃温度下搅拌3小时。向反应液中加入5％的氢氧化钠乙醇溶液299ml至溶液为中性，浓缩，加水，乙酸乙酯萃取，分离，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶拌样，蒸干。过硅胶柱，硅胶为200～300目，用1000ml V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝20∶1冲洗后再用V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝15∶1冲洗，收集组分，浓缩干即可得到白色粉末状固体，产率82％，熔点206～207℃；ESI-MS：878.7(理论值879.04)；元素分析：C：62.7％(理论62.85％)，H：8％(理论8.03％)，O：29.3％(理论29.12％)。

实施例2

取甘草酸单铵盐1000克，向其加入4000ml 1％的硫酸乙醇溶液，30℃温度下搅拌2小时。向反应液中加入5％的氢氧化钠乙醇溶液253ml至溶液为中性，浓缩，加水，乙酸乙酯萃取，分离，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶拌样，蒸干。过硅胶柱，硅胶为200～300目，用1000ml V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝20∶1冲洗后再用V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝15∶1冲洗，收集组分，浓缩干即可得到白色粉固体，产率79.8％。

实施例3

取实施例1中的甘草酸二乙酯25g，淀粉30g，β-环糊精210g，硬脂酸镁1.5g，混匀，制粒，过80目筛，干燥后装成1000粒胶囊(每粒含甘草酸二乙酯25mg)，即得。用法用量为：口服，每次1粒，每日3次。

实施例4

取实施例1中的甘草酸二乙酯25g，乳糖80g，硬脂酸镁3.0g，羟丙基纤维素4g，微粉硅胶1.0g，糊精180g，混匀，制粒，过80目筛，干燥后，压成1000片(每粒含甘草酸二乙酯25mg)，即得。用法用量为：口服，每次1片，每日3次。

Claims

1.一种化合物，其特征在于这种化合物为甘草酸二乙酯，其结构为：

2.根据权利要求1所述的化合物甘草酸二乙酯的制备方法由以下步骤组成：

3.根据权利要求1所述的化合物甘草酸二乙酯，其特征在于可以加入药学上可以接受的载体，制备成适合临床使用的剂型，如片剂、胶囊剂等，临床用于治疗肝脏疾病。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述的“含一定量浓度硫酸的乙醇溶液”是指硫酸重量百分比为0.1～3％的乙醇溶液；加热温度可以为20～60℃，优选50℃；“加热搅拌一段时间”是指2.5～4小时，优选的反应时间为3小时。

5.根据权利要求2所述的制备方法：其特征在于步骤(2)中“一定浓度的氢氧化钠乙醇溶液”是指氢氧化钠重量百分比为2～8％的乙醇溶液，优选的氢氧化钠的浓度为5％。

6.根据权利要求2所述的制备方法：其特征在于步骤(3)中层析柱中的硅胶为200～300目；一定比例的乙酸乙酯甲醇混合液是指V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝20∶1，增加甲醇的浓度，用V(乙酸乙酯)∶V(甲醇)＝15∶1洗脱甘草酸二乙酯。