CN103505717A - 一种含有香菇菌丝体多糖的组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含有香菇菌丝体多糖的组合物及其应用。采用的技术方案是：按重量百分比组成如下：香菇菌丝体多糖60%-80%，黑米多肽10%-20%，稠李花色苷10%-20%。本发明的含有香菇菌丝体多糖的组合物可用于制备抗疲劳药物、抗疲劳保健品和饲料。

Description

一种含有香菇菌丝体多糖的组合物及其应用

技术领域

本发明属于制药和饲料生产技术领域，具体地涉及一种含有香菇菌丝体多糖的组合物及其在制备抗疲劳药物、抗疲劳保健品和饲料中的应用。

背景技术

随着社会进步和经济的快速发展，社会竞争日益激烈。人们生活节奏不断加快，生活方式也正发生着巨大的变化，工作压力越来越大，越来越多的城市居民备受疲劳和压力之苦，各种疾病相继产生，已经引起世界卫生组织和各国专家学者的关注。因此，有效的抗疲劳药品、保健品的研发意义重大。

另外，近年来，由于滥用化学饲料添加剂、抗生素和违禁促生长素生产的禽肉，以及一些人畜共患病原感染的禽肉现象屡见不鲜，给消费者健康和生命安全带来了威胁。因此，抗生素所带来的药残、抗药性、环境污染等危害越来越引起人们的重视。对现代畜禽饲养业而言，不仅要提高畜禽的生产性能和肉质，而且要生产安全产品，确保消费者的健康。随着消费者对食品的安全、卫生、健康等问题日益关注，对畜产品品质的要求越来越高。无污染、无残留和无公害的安全绿色食品已成为人们追求的目标。

发明内容

本发明的目的是以香菇菌丝体出发，提取生物活性多糖，和其他活性物质混合，提供一种健康、绿色、天然的保健品、药品或者饲料添加剂，可提高人体和动物机体抗疲劳功能。

本发明采用的技术方案是：一种含有香菇菌丝体多糖的组合物，按重量百分比组成如下：香菇菌丝体多糖60%-80%，黑米多肽10%-20%，稠李花色苷10%-20%。

上述的含有香菇菌丝体多糖的组合物在制备抗疲劳药物、抗疲劳保健品和饲料中的应用。

上述的含有香菇菌丝体多糖的组合物作为禽畜饲料添加剂，应用于禽畜饲料时，禽畜饲料添加剂与禽畜饲料的重量份配比为：禽畜饲料添加剂1-50份，禽畜饲料100000份。

本发明涉及的香菇菌丝体多糖是由香菇菌丝体提取的真菌多糖，以酸性多糖为主。可以采用超声波-微波-复合酶酶解分步法的工艺组合提取香菇菌丝体多糖。

本发明具开创性的技术是将香菇菌丝体多糖作为抗疲劳核心功能性原料，根据现代营养学模型合理搭配、科学组合应用，形成具有显著抗疲劳功效的多糖型混合药品及保健品。

本发明具开创性的技术是将香菇菌丝体多糖作为禽畜饲料添加剂的核心功能性原料，形成具有提高禽畜机体功能的多糖型混合饲料添加剂。本发明的含有香菇菌丝体多糖的禽畜饲料添加剂，在现有家禽、牲畜的饲养中，可以与现有的任意的禽畜饲料混合，都可以达到增强禽畜免疫力，提高抗病能力，促进禽畜生长的目的。

本发明和现有技术相比有如下优点：以真菌菌丝体多糖为出发点，进行食药用真菌资源多元化开发与利用关键技术研究。通过生物发酵技术生产真菌菌丝体，利用多种生物技术手段提取食药用真菌菌丝体多糖，避免真菌子实体，栽培周期长，受环境影响大，产量及质量不稳定，多糖提取利用率低的问题。

附图说明

图1 香菇菌丝体多糖Sephadex G-200层析图。

图2 香菇菌丝体多糖DEAE-32层析图。

图3 香菇菌丝体多糖纯度高效液相色谱图。

图4 香菇菌丝体多糖的组分分析图。

具体实施方式

实施例1  一种含有香菇菌丝体多糖的组合物

按重量百分比组成如下：香菇菌丝体多糖70%，黑米多肽15%，稠李花色苷15%。

香菇菌丝体多糖的制备：本实施例采用超声波-微波-混合酶酶解分步法的工艺组合提取香菇菌丝体多糖，步骤如下：

1）  超声浸提：将香菇菌丝体干粉溶于水中，料液比按质量比1:20，控制温度为50-90℃，pH值7.0，超声波功率为300W，超声时间为40min；

2）微波辅助提取：微波功率400W，微波时间为40min；

3）混合酶酶解提取：加入料液总重量3.0%的混合酶，控制温度为50℃，pH 7.0，酶解时间为70min；100℃灭酶，抽滤，滤液旋转蒸发浓缩至1/5体积，加入浓缩液4倍体积的95%乙醇沉淀多糖，sevag法去蛋白，2000rmp离心后去除上清液，冷冻干燥，得香菇菌丝体多糖粗品。所述的混合酶是纤维素酶、蛋白酶、果胶酶按质量比2: 1: 1的混合。

为了进一步得到高纯度的香菇菌丝体多糖，可以继续采用分离纯化步骤。纯化的香菇菌丝体多糖可用于制备抗疲劳药物，而粗制品可以用于亚健康人群缓解疲劳的保健品或者用于禽畜动物的饲料添加剂。

4）粗多糖分离纯化：将冷冻干燥的香菇菌丝体的粗多糖加入适量蒸馏水重新溶解，Sephadex G-200层析进行分离纯化，用蒸馏水洗脱，流速为1ml/min，每2ml收集一试管，用硫酸- 蒽酮法跟踪检测至无糖，结果如图1所示，收集含量最多的多糖组分，（即，合并图中峰Ⅰ和峰Ⅲ对应的试管的收集物，备用）。将收集的组分在蒸馏水中透析24h，冷冻干燥，进行后续实验。用DEAE-32进一步纯化，磷酸盐缓冲液-水作为流动相，梯度模式进行洗脱，流速为0.8 ml/min，每2ml收集一试管，用硫酸- 蒽酮法跟踪检测至无糖，结果如图2所示，收集含量最多的多糖组分（图2中LMP1峰值所对应的试管的收集物）。将收集物经过高效液相色谱检测，结果如图3所示，从结果为单一对称峰，证明该多糖为纯品。

5）对香菇菌丝体多糖组分分析：20mg多糖样品用2M三氟乙酸2.0ml溶解于10ml安瓿中，110℃孵育4h。冷却到室温。1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生。C18高效液相色谱分析结果如图4所示，从图4确定，香菇菌丝体多糖中：含有甘露糖（Man），树胶醛糖（Ara），半乳糖（Gal），木糖（Xyl）和鼠李糖（Rha），其相对摩尔比是1: 0.74: 3.23: 1.18: 10.98。

本发明的香菇菌丝体多糖的成分及组成与现有文献报道有所不同，是具有显著抗疲劳作用的天然药物、保健品或饲料添加剂。

稠李花色苷和黑米多肽采用市购产品。

应用例1  含有香菇菌丝体多糖的组合物的抗疲劳试验

实验方法：取实施例1制备的含有香菇菌丝体多糖的组合物。选择体重22±2 g昆明种小鼠，将小鼠适应饲养一周后，依体重将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10 只，雌雄各半；实验组每日每只鼠分别灌胃香菇菌丝体多糖组合物一次，低、中、高剂量分别为25、50、100 mg/kg·d ，对照组蒸馏水灌胃，灌胃量为0.1mL/10 g。实验期为30 d，进行抗疲劳指标测定，结果如表1。

注：与对照组比较，^a差异显著，P<0.05, ^b差异极显著，P<0.01

由表1可见，与对照组比较，香菇菌丝体多糖各剂量组明显延长小鼠的游泳时间。低、中、高剂量组比空白对照组的小鼠游泳时间分别增加了2.09、6.36和11.75 min，且中、高剂量组与对照组相比呈显著差异(p<0.01)。说明香菇菌丝体多糖组合物具有不同程度地延长了小鼠游泳时间的作用，其中以高剂量组的效果最佳。香菇菌丝体多糖组合物对小鼠肝糖原含量的影响结果表明：与对照组相比，中、高剂量组小鼠口服香菇菌丝体多糖组合物后，小鼠肝糖原储备呈极显著增加(p<0.01)，表明香菇菌丝体多糖组合物能增加受试动物肝糖原储备，为肌体提供更多能源物质，从而延缓疲劳产生。香菇菌丝体多糖组合物对小鼠血清尿素氮结果表明：与对照组相比，香菇菌丝体多糖组合物各剂量组的血尿素氮含量浓度都有所降低，低剂量组与对照组相比呈显著差异(p<0.05)，中、高剂量组与对照组相比呈极显著差异(p<0.01)，表明香菇菌丝体多糖组合物具有清除小鼠运动中产生的血尿素氮含量，降低血尿素氮含量的作用，其中以高剂量组降低效果最好。

依据试验结果可见，含有香菇菌丝体多糖的组合物可提高受试动物运动耐力与良好影响疲劳有关生理生化指标，从而表现出抗疲劳作用，且具有明显的剂量-效应关系。因此，本发明具有良好的抗疲劳作用。

应用例2    含有香菇菌丝体多糖的组合物用于饲料添加剂

选取7日肉鸡36只，按体重、性别均等的原则随机分为2组，每组18只肉鸡，设3个重复组，每组重复6只。对照组，饲喂正常肉鸡饲料，B组为试验组，将香菇菌丝体多糖组合物按质量比5:100000的比例与动物日粮混合均匀，再按常规工艺制备饲料，直接饲喂。饲养期共21天，每天记录采食量。在试验开始时7d，14d、21d和28d分别空腹称重，并处死鸡，剥取胸腺、脾脏和法氏囊，并将周围组织剥离干净后分析天平称重，按下式计算免疫脏器指数，显微镜观察鸡内脏器官有无异常和病变。研究香菇菌丝体多糖对肉鸡生长及免疫功能的影响，试验结果见表2和表3。

试验组与对照组相比，含有香菇菌丝体多糖的饲料对肉鸡体重明显增加。

 

肉鸡食用了含有香菇菌丝体多糖组合物的饲料后，脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数都有所增加，说明香菇菌丝体多糖组合物可显著提高肉鸡免疫器官指数。

Claims (2)

1.一种含有香菇菌丝体多糖的组合物，其特征在于：按重量百分比组成如下：香菇菌丝体多糖60%-80%，黑米多肽10%-20%，稠李花色苷10%-20%。

2.权利要求1所述的含有香菇菌丝体多糖的组合物在制备抗疲劳药物、抗疲劳保健品和饲料中的应用。

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