CN103505526B - 具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物及方法 - Google Patents
具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物及方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物及方法。所述药物组合物由大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参、三七组成，具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用，可以用于缺氧、疲劳和肾虚等疾病的治疗，并且毒性较低。所述药物组合物，按照常规方法，加入常规辅料，可制备成酒剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂、滴丸剂等。本发明还提供了该药物组合制剂在制备、治疗缺氧、疲劳、肾虚等疾病药物中的用途。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物及方法，属于中医制药技术和保健品领域。
背景技术
随着经济的发展、竞争的加剧、生活节奏的加快，人们经常面对繁忙的工作和巨大的心理或生理压力，长期处于应激状态，以致不明原因地出现严重的全身倦怠感，并常常伴有低热、头痛、肌肉痛、食欲不振、消瘦、失眠或嗜睡、抑郁、注意力不集中等症状，有时淋巴结肿大而影响正常生活的一张综合表现，西医中称之为“慢性疲劳综合症”。1982年在美国进行的第五届国际运动生化学术会议上将疲劳定义为:由机体运动本身所引起的“机体生理过程不能续持其功能在特定水平和/或不能维持预定的运动强度”的机体运动能力下降的现象。长期的疲劳引起神经系统紊乱，进而引起心脑血管、消化系统、循环系统和运动系统等多方面的不适，出现失眠、消化不良、高血压等疾病。目前疲劳已经成为一种普遍的社会现象，严重影响着人们的工作、学习和生活。据世界卫生组织统计，处于“亚健康”疾病状态的人口在许多国家和地区目前呈上升趋势。有专家预言，疲劳是21世纪人类健康的头号大敌。
缺氧是当人体组织得不到充足的氧供应，或不能充分利用氧时，细胞、组织、器官的代谢、机能、甚至形态结构都可能发生异常变化的病理过程。缺氧可以分为病理性缺氧、生理性缺氧、运动性缺氧和环境性缺氧。众所周知，氧参与人体新陈代谢，是正常生命活动不可缺少的物质。但人体内氧储量极少，必需依赖于外界环境氧的供给和通过呼吸、血液、血液循环不断地完成氧的摄取和运输，以保证细胞的需要。一旦发生缺氧，将会是对机体的一种恶劣刺激，影响机体的各种代谢，尤其是当心脑、呼吸系统、肝、肾等出现缺氧时，会引发多种疾病。因此，科学家认为缺氧是万病之源，是造成许多疾病的主因之一。调查显示，约90%的人存在不同程度的缺氧。
此外，肾亏也是困扰当今处于疲劳状态下的人们的一大问题。肾亏是肾虚、肾气虚的俗称。肾藏精，肾虚以肾精不足为主要症状，一般症状有精神疲乏、头昏、耳鸣、健忘、腰膝酸软、遗精、性欲减退、阳痿、早泄、滑精、等，临床表现可偏于肾阴虚，或肾阳虚。
为此，耐缺氧、抗疲劳、补肾壮阳药物的研究和开发日益受到人们的重视。随着医学工作者对耐缺氧、抗疲劳及补肾壮阳研究的不断深入，中医药的使用以其作用多靶点、几乎不含违禁成分的特点日益显示出其独特的优势，成为了研究的热点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物及其制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物，该组合物的原料药组成为：
大枣 1-30重量份 红景天 1-30重量份 黑蚂蚁 1-30重量份
杜仲 1-25重量份 党参 1-25重量份 黄芪 1-25重量份
当归 1-20重量份 人参 1-20重量份 三七 1-20重量份。
一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物，该组合物的原料药组成为：
大枣 5重量份 红景天 5重量份 黑蚂蚁 5重量份
杜仲 4重量份 党参 4重量份 黄芪 4重量份
当归 3重量份 人参 1.5重量份 三七 1.5重量份；
或
大枣 9重量份 红景天 7重量份 黑蚂蚁 8重量份
杜仲 6重量份 党参 4重量份 黄芪 4重量份
当归 4重量份 人参 1.5重量份 三七 2重量份；
或
大枣 20重量份 红景天 18重量份 黑蚂蚁 15重量份
杜仲 12重量份 党参 10重量份 黄芪 15重量份
当归 8重量份 人参 8重量份 三七 6重量份。
所述药物组合物制成临床上可接受的酒剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
一种所述药物组合物的制备方法，包括如下步骤：按照选定的重量份取各所述原料药组分，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床上可接受的酒剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
一种所述药物组合物的制备方法，包括如下步骤：按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加乙醇回流提取，滤过得到醇提液及醇提残渣；将所述醇提残渣加水进行回流提取，滤过得到水提液；合并所述醇提液及水提液浓缩得到浓缩液，并加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
一种所述药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加入8～10体积份的70～90%乙醇，浸泡10-15h后回流提取1～2小时，过滤并合并滤液得到醇提液及醇提残渣，将所述醇提液回收乙醇；
（2）取醇提残渣加8～10体积份的水，100℃煎煮提取1～2小时，合并滤液得到水提液；
（3）合并所述醇提液和水提液，加热浓缩得到浓缩液，加入常规辅料，按照常规方法制备成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂；
所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系。
一种所述药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加入9体积份的75%乙醇，浸泡12h后回流提取1.5小时，过滤并合并滤液得到醇提液及醇提残渣，将所述醇提液回收乙醇；
（2）取醇提残渣加9体积份的水，100℃煎煮提取2小时，合并滤液得到水提液；
（3）合并所述醇提液和水提液，加热浓缩得到浓缩液，加入常规辅料，按照常规方法制备成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂；
所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系。
一种所述药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；所得药渣按1kg原药材再次加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取的浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.1～1.2，得药液A；将药液A加入乙醇使其含醇量50%以上，搅拌均匀，静置20～24h，过滤，去沉淀物，得药液B；取药液B回收乙醇，使药液适当浓缩，挥发残留的少量乙醇，得药液C；取药液C，加入1/4药液重量份的80%含糖量的糖浆，混匀，灌装，灭菌，即得口服液制剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣再加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取上述醇提取后的药渣加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；所得药渣再加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并所得滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分别加入1%药粉重量份的硬脂醇镁、滑石粉，混匀，压片，包糖衣或薄膜衣，得到片剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按原药材重量每1kg再次加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分装于胶囊内，得到胶囊剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣按1kg原药材重量加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材重量每1kg加入蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入2/3清膏重量份的蔗糖粉，混合均匀，制粒，干燥，分装，得成品颗粒剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，加入药材总量10体积份50%含醇量的食用白酒，进行回流提取；第一次加入占白酒总量的50%，浸泡12h后回流提取2h，过滤；第二次加入白酒总量的30%，回流提取1.5h，过滤；第三次加入白酒总量的20%，回流提取1h，过滤，合并各次滤液，置贮罐中加盖静置24h，取上清液过滤澄明，分装即得酒剂。
一种根据所述的制备方法得到的药物组合物。
本发明还公开了上述药物组合物在制备具有耐缺氧、抗疲劳、补肾壮阳功能的药物及保健品中的应用。
本发明所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系。
本发明的上述技术方案具有以下优点：
（1）本发明所述的耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳药物组合物中，所述人参、党参、当归、三七、红景天等能增加血红蛋白含量，促进红细胞生成，达到耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳的作用；
（2）本发明所述的耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳药物组合物中，所述人参、黄芪能提高每搏输出量和射血效率，降低外周阻力，增强心血管系统功能，进而增强机体耐受力而抗疲劳；同时改善细胞组织的生化基础，提高生理代谢能力和抗自由基能力，发挥抗疲劳和补肾壮阳作用；
（3）本发明所述的一种耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳药物组合物中，所述人参、黄芪、杜仲、当归等能提高人体免疫调节能力和抗病能力，起到减缓和消除疲劳的作用；
（4）本发明所述的一种耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳药物组合物中，所述人参、黄芪等能改善脑代谢状态，提高脑的供血、供氧，缓解大脑疲劳状态；同时能调节下丘脑—垂体—肾上腺（或性腺）轴的功能，增强机体运动能力和机能状态，提高机体应激能力，发挥抗疲劳作用；
（5）本发明所述的一种耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳药物组合物中，所述黑蚂蚁具有益气泽颜、活血化瘀、补肾养阴、消食健脾、延年益寿等功效，在补益肝肾、调理经络等方面的作用尤为突出；含有数十种营养成分和生物活性物质，具有双向调节人体免疫功能的作用。
一、所述药物组合物的药效学作用
以小鼠常压耐缺氧存活时间及耗氧量及小鼠急性脑缺血性缺氧呼吸次数为指标，观察所述药物组合物对小鼠耐缺氧的影响；以测定小鼠负重游泳时间为指标，观察所述药物组合物对小鼠耐疲劳能力的影响；以阴茎勃起潜伏期、勃起持续时间，包皮腺、精囊腺和前列腺、提肛肌等脏器指数，和血清睾酮为指标，观察所述药物组合物对肾虚和阳虚大鼠的补肾壮阳作用；以测定小鼠扑捉潜伏期、射精潜伏期、20min雄鼠扑捉雌鼠的次数及射精次数为指标，观察所述药物组合物对小鼠交配实验的影响；以小鼠低温游泳存活时间，小鼠前列腺与精囊等脏器指数为指标，观察所述药物组合物对阳虚小鼠阳虚症状表现的保护作用。
1材料
1.1动物
健康SD大鼠，雄性，体重90-110g，SPF级；昆明小鼠，雌雄兼用，体重18-22g，SPF级，均由广西医科大学实验动物中心提供，试验动物使用许可证：SCXK桂2009-0002。饲养条件：室温25±2℃，湿度60±20%。
1.2受试药物
按照下述实施例3所述的处方及方法制备所述药物组合物。
1.3试剂与仪器
海狗人参丸（源生堂），批号：599001206；氢化可的松注射液（丹东医创药业有限责任公司），批号：12061133；戊巴比妥钠（德国Solarbio公司），批号：6900183；YLS-9A生理药理电子刺激仪（济南益延科技有限公司）；全自动化学发光免疫分析仪（德国西门子）。
1.4所述药物组合物用量和方法
所述药物组合物用于人的拟用量：人每日拟用量33g生药材（33g生药材/60kg体重=0.55g生药材/kg体重/日）。
大鼠、小鼠实验用量：所述药物组合物低、中、高剂量组剂量分别为：5.5g、11g、22g生药材/kg/日（相当于人拟用量的10、20、40倍）。
给药方法：灌胃（i.g.）。
2试验方法
2.1所述药物组合物对小鼠耐缺氧能力的影响
2.1.1小鼠常压耐缺氧存活时间及耗氧量试验
在前期处理末次灌胃1h后，将小鼠放入盛有15g钠石灰的150ml广口瓶内，每瓶只放1只小鼠。广口瓶用管道与滴定管上端连接，滴定管下端放置装有水的烧杯，滴定管口插入水液面下适当位置；广口瓶内放置钠石灰15g，上置滤纸；广口瓶塞插入通气管道，通气管道配置弹簧夹。调整烧杯内液面至滴定管“0”刻度。打开广口瓶通气管弹簧夹和瓶塞，将小鼠放入广口瓶内，塞好瓶塞，关闭通气管，使装置密闭，立刻记录实验开始时间。小鼠吸入O2，呼出CO2，CO2被钠石灰吸收，装置内气体压力降低，烧杯内的水在滴定管内上升。根据实验设计需要，可随时读取滴定管液面上升高度，即为小鼠在不同时间的耗氧量，以ml为单位。立即开始计时，以受试小鼠呼吸停止为终点。观察小鼠因缺氧而死亡的时间，并观察量筒中减少的水的体积，以确定小鼠总的耗氧量，记录实验数据。
2.1.2小鼠急性脑缺血性缺氧呼吸次数实验
各组小鼠于末次灌胃1h后，在乙醚浅麻醉下，用剪刀从受试小鼠双耳连线处快速断头，小鼠断头后开始张口喘气时，立即用“正”字计数，遂只记录受试小鼠断头后开始张口喘气直至停止喘气的呼吸数，记录实验数据。
2.2所述药物组合物对小鼠耐疲劳能力的影响
选取40只健康昆明小鼠，体重18-22g，雌雄各半。适应性饲养7天后，分为空白对照组、所述药物组合物组（5.5、11、22g/kg）。空白对照组给予等体积的生理盐水溶液。连续i.g.给药7d，每天1次。末次给药1h后，开始试验。
向游泳槽注入清水，水深25cm，调整并保持水温在25±0.5℃。每小鼠尾部系以体质量10%的负荷，将小鼠放入水槽中强迫其游泳，用秒表测定动物入水至头部全部入水持续10s不能浮出水面为止的时间。
2.3所述药物组合物补肾壮阳作用
2.3.1对肾虚（去势）大鼠的补肾壮阳实验
取60只离乳一个月的雄性大鼠，体重90-110g，随机分组：正常对照组（生理盐水NS，10ml/kg）、模型对照组（NS，10ml/kg）、海狗丸组（3丸/kg/d，相当于人临床日用量0.15丸/kg的20倍）、所述药物组合物高、中、低剂量组。除正常对照组外，其余各组在戊巴比妥钠（45mg/kg）麻醉下，消毒阴囊皮肤，摘除双侧睾丸。术后肌注青霉素2万U/kg/d，共3天。术后第三天各组开始给所述药物组合物或海狗丸，连续14天。第15天给药1小时后，将药理生理实验多用仪的刺激电极置于大鼠阴茎部位，给予局部电刺激，电流强度为4mA。记录勃起潜伏期（刺激开始至阴茎勃起时间）和勃起持续时间。末次给药24小时后，处死动物，取血清，用放射免疫法测定血清睾丸酮水平，取包皮腺、精囊腺和前列腺、提肛肌，精确称重，计算脏器指标。
2.3.2对氢化可的松阳虚大鼠的补肾壮阳实验
取60只离乳一个月的雄性大鼠，体重90-110g，随机分组：正常对照组（生理盐水NS，10ml/kg）、模型对照组（NS，10ml/kg）、海狗丸组（3丸/kg/d）、所述药物组合物高、中、低剂量组。除正常对照组外，各组在给药的同时均肌注氢化可的松25mg/kg/d，连续14天。第15天给药1小时后，将药理生理实验多用仪的刺激电极置于大鼠阴茎部位，给予局部电刺激，电流强度为4mA。记录勃起潜伏期（刺激开始至阴茎勃起时间）和勃起持续时间。末次给药24小时后，处死动物，取血清，用放射免疫法测定血清睾丸酮的水平，取包皮腺、精囊腺和前列腺、睾丸、提肛肌，精确称重，计算脏器指标。
2.3.3小鼠交配实验
体重18-22g的雄性小鼠50只，随机分为5组：正常对照组（生理盐水10ml/kg）、海狗丸组（3丸/kg/d）、所述药物组合物高、中、低剂量组。分组后各组分别给予相应的给药，连续25天。
雌性小鼠准备：40只体重18-22g的雌性小鼠，在戊巴比妥钠（45mg/kg）麻醉下，进行双侧卵巢摘除术，术后肌注青霉素2万U/kg3天。卵巢摘除2周后方可进行实验。实验前48小时皮下注射雌二醇20μg/只，4小时前再注射黄体酮500μg/只。
交配实验观察方法：将雄性小鼠单独放入笼中使其适应环境5min，然后放入1只雌鼠，开始记录下列时间：扑捉潜伏期（自雌鼠投入至雄鼠第1次扑捉雌鼠的时间）、射精潜伏期（自雌鼠投入至雄鼠第1次射精的时间）、20min内雄鼠扑捉雌鼠的次数及射精次数。
2.3.4对阳虚小鼠阳虚症状表现的保护作用
选健康雄性昆明种小鼠60只，动物房适应3天后，随机分为6组：正常对照组、模型对照组、海狗丸组（3丸/kg/d）、所述药物组合物高、中、低剂量组。除第一组作为正常对照组，余5组腹腔注射氢化可的松注射液，剂量25mg/kg/d；同时空白对照组与模型组给予蒸馏水灌胃0.1mL/10g，余组分别给予等容积受试药灌胃，连续给药10天。末次给药1h后，称体重。观测指标有：
（1）对小鼠低温游泳存活时间的影响：测小鼠自主活动次数后，将小鼠放入水温为8±1℃，水深20cm的50cm*30cm*30cm水池内，每次1只。记录其入水至溺死的游泳存活时间，即为其入水至沉入水底，腹部呼吸停止所需时间。
（2）对小鼠前列腺与精囊湿重的影响：记录完小鼠的游泳存活时间后，即刻将小鼠取出行解剖术，取其前列腺与精囊，用分析天平称其湿重。
2.5统计学处理
采用统计学软件SPSS13.0对所有数据进行分析，结果以均数±标准差（）表示。组间分析采用One-Way ANOVA两两比较得到相应的P值，P<0.05或P<0.01显著差异，有统计学意义。
3结果
3.1所述药物组合物对小鼠耐缺氧能力的影响
3.1.1药物对受试小鼠常压耐缺氧存活时间的影响
与空白组比较，普萘洛尔组和所述药物组合物中、高剂量组能延长小鼠的存活时间（P<0.05）。与普萘洛尔组相比，所述药物组合物给药组小鼠的存活时间无统计学差异，结果见表1。
表1药物对受试小鼠耐缺氧存活时间的影响（n=10，）
注：所述药物组合物组与空白对照组比较，*P＜0.05；与普萘洛尔比较，#P＜0.05。
3.1.2药物对受试小鼠常压耐缺氧总耗氧量的影响
与空白组比较，普萘洛尔组和所述药物组合物中、高剂量组能提高小鼠的总耗氧量（P＜0.05）。结果见表2。
表2药物对受试小鼠常压耐缺氧总耗氧量的影响（n=10，）
注：所述药物组合物组与空白对照组比较，*P＜0.05；与普萘洛尔比较，#P＜0.05。
3.1.3药物对小鼠急性脑缺血性缺氧呼吸次数的影响
与空白组比较，普萘洛尔组和所述药物组合物中、高剂量组能提高小鼠的呼吸次数（P＜0.05）。结果见表3。
表3药物对受试小鼠急性脑缺血性缺氧呼吸次数的影响（n=10，）
注：所述药物组合物组与空白对照组比较，*P＜0.05；与普萘洛尔比较，#P＜0.05。
3.2所述药物组合物对小鼠耐疲劳能力的影响
与空白组比较，所述药物组合物可延长小鼠游泳存活时间。结果见表4。
表4所述药物组合物对小鼠负重游泳时间的影响（n=10，）
注：所述药物组合物组与空白对照组比较，*P＜0.05；与人参水提物比较，#P＜0.05。
3.3所述药物组合物补肾壮阳作用
3.3.1对肾虚（去势）大鼠的补肾壮阳作用
与模型对照组比较，所述药物组合物高剂量组肾虚大鼠阴茎勃起潜伏期缩短，勃起持续时间延长（P＜0.05）；与模型对照组比较，所述药物组合物高剂量组包皮腺脏器指数明显升高（P＜0.05），其精囊腺-前列腺、提肛肌的脏器指数均数升高，尽管比较没有统计学意义；与正常对照组比较，肾虚模型对照组大鼠血清睾酮含量急剧下降（P＜0.05），与肾虚模型对照组比较，海狗丸组和所述药物组合物高、中、低剂量组大鼠血清睾酮含量呈不同程度的提高，尽管与模型对照组比较没有统计学意义。见表5-7。
表5所述药物组合物对肾虚（去势）大鼠阴茎勃起功能的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
表6所述药物组合物对肾虚（去势）大鼠生殖器官脏器指数的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
表7所述药物组合物对肾虚（去势）大鼠血清性激素水平的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
3.3.2对阳虚大鼠的补肾壮阳作用
与模型对照组比较，所述药物组合物高、中剂量组阳虚大鼠阴茎勃起潜伏期缩短（P＜0.05），所述药物组合物高、中、低剂量组阳虚大鼠阴茎勃起持续时间延长（P＜0.05）；与模型对照组比较，所述药物组合物高剂量组包皮腺、精囊腺-前列腺、提肛肌、睾丸的脏器指数明显升高（P＜0.05），所述药物组合物中剂量组精囊腺-前列腺脏器指数明显升高（P＜0.05）；与正常对照组比较，阳虚模型对照组大鼠血清睾酮含量明显下降（P＜0.05），与阳虚模型对照组比较，海狗丸组和所述药物组合物高剂量组大鼠血清睾酮含量升高（P＜0.05）。见表8-10。
表8所述药物组合物对阳虚大鼠阴茎勃起功能的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
表9所述药物组合物对阳虚大鼠生殖器官脏器指数的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
表10所述药物组合物对阳虚大鼠血清性激素水平的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
3.3.3小鼠交配实验
与正常对照组比较，所述药物组合物高、中剂量组雄性小鼠扑捉雌鼠的潜伏期明显缩短（P＜0.05），射精潜伏期减少，但比较没有统计学意义；与正常对照组比较，所述药物组合物高、中剂量组雄性小鼠20分钟内扑捉雌鼠的次数及射精次数增加，但没有统计学意义。见表11。
表11所述药物组合物对雄性小鼠交配能力的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
3.3.4对阳虚小鼠阳虚症状表现的保护作用
与正常对照组比较，阳虚模型组小鼠低温游泳存活时间明显缩短（P＜0.05）；与阳虚模型对照组比较，海狗丸组小鼠低温游泳存活时间明显延长（P＜0.05），所述药物组合物高、中剂量组小鼠低温游泳存活时间虽有延长，但无统计学差异。游泳时间结果见表12.
与正常对照组比较，阳虚模型组小鼠精囊腺-前列腺、睾丸的脏器指数明显减少（P＜0.05），与模型对照组比较，所述药物组合物高剂量组精囊腺-前列腺、睾丸的脏器指数明显升高（P＜0.05）。结果见表13。
表12所述药物组合物对阳虚大鼠血清性激素水平的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05；与模型对照组比较，ΔP＜0.05。
表13所述药物组合物对阳虚大鼠生殖器官脏器指数的影响（n=10）
注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01。
4实验结论
适宜剂量的所述药物组合物能延长小鼠的存活时间、提高小鼠的总耗氧量、提高小鼠的呼吸次数；可延长小鼠负重游泳存活时间；可缩短肾虚和阳虚大鼠阴茎勃起的潜伏期并延长阴茎勃起的持续时间；所述药物组合物一定程度上能提高肾虚（去势）大鼠和阳虚大鼠的包皮腺、精囊腺-前列腺和提肛肌的脏器指数；对于正常小鼠，所述药物组合物增强其交配能力，表现为合笼后扑捉雌鼠的潜伏期及射精潜伏期缩短，20min内扑捉雌鼠的次数及射精次数也明显增加；高剂量的所述药物组合物能提高阳虚小鼠的精囊腺-前列腺、睾丸的脏器指数，以上实验结果说明所述药物组合物能提高小鼠耐缺氧能力和抗疲劳能力，并有较好的补肾、壮阳作用。
二、所述药物组合物急性毒性试验
目的：测定所述药物组合物物最大耐受量，以了解其毒性大小和药物的安全性。
方法：以昆明种小鼠为研究对象，观察灌胃（i.g.）给予受试药物的最大耐受量。
结果：小鼠最大耐受量为120g·kg-1·d-1，未见明显的毒性反应。
1材料
1.1受试药物的制备：
按照下述实施例3所述的处方及方法制备所述药物组合物。
1.2实验动物
SPF级KM小鼠，雌雄各半，体重20±2g，由广西医科大学实验动物中心提供。动物饲养于符合医学实验动物环境设施要求的饲养环境中。饲养条件：室温25±2℃，湿度60±20%。试验动物使用许可证：SCXK桂2009-0002.
2方法与结果
取20只小鼠，雌雄各半，随机分为所述药物组合物和空白对照组，每组10只。用受试药物i.g.给药，每次给药剂量为30g·kg-1，每日4次，每日给药总剂量120g·kg-1，每次给药容积均为30ml·kg-1。空白对照组给予等容量的生理盐水（NS）。给药后连续观察14天，记录动物毒性反应情况及有无动物死亡。结果为：给药后第2-14天动物精神、活动、大小便等未见异常，体重增长，与空表对照组无明显差异，实验动物无死亡。小鼠的最大耐受量为120g·kg-1·d-1，小鼠体重变化见表1。
表1所述药物组合物对小鼠体重的影响（g）
注：所述药物组合物组与空白对照组比较，P值均大于0.05.
3.结论
小鼠最大耐受量为120g·kg-1·d-1。试验中未见毒性反应，因而认为本品毒性较低。
具体实施方式
实施例1：酒剂的制备
大枣 1500g 红景天 1500g 黑蚂蚁 1500g
杜仲 1200g 党参 1200g 黄芪 1200g
当归 900g 人参 450g 三七 450g
上述九味，分别粉碎成粗粉后混合或混合后粉碎，加入占药材总量10倍体积份的50%含醇量的食用白酒，进行回流提取，具体操作为：第一次加入白酒总量的50%，浸泡12h后回流提取2h，过滤；第二次加入白酒总量的30%，回流提取1.5h，过滤；第三次加入白酒总量的20%，回流提取1h，过滤，合并各次滤液，置贮罐中加盖静置24h，取上清液过滤澄明，分装250ml/瓶，得成品酒剂300瓶。每ml含原药材0.132g。
实施例2：合剂的制备
大枣 9kg 红景天 7kg 黑蚂蚁 8kg
杜仲 6kg 党参 4kg 黄芪 4kg
当归 4kg 人参 1.5kg 三七 2kg
以上九味，分别粉碎成粒径50-100目的粗粉，按如下方法制成口服液：
（1）醇提取，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2h，过滤；药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）水提取，醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.1～1.2，得药液A；将药液A加入乙醇使其含醇量50%以上，搅拌均匀，静置24h，过滤，去沉淀物，得药液B；滤液回收乙醇，药液适当浓缩，挥发残留的少量乙醇，得药液C；取药液C，加入1/4药液重量份的80%含糖量的糖浆，混匀，灌装，灭菌，即得。其制得成口服液（10ml/支）4550支，每支含原药材10g。
实施例3：片剂的制备
大枣 600g 红景天 540g 黑蚂蚁 450g
杜仲 360g 党参 300g 黄芪 450g
当归 240g 人参 240g 三七 180g
以上九味，粉碎成粗粉，按如下方法制成片剂：
（1）醇提取，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2h，过滤；药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）水提取，醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分别加入1%药粉重量份的硬脂醇镁、滑石粉，混匀，压片，包糖衣或薄膜衣，得成品片剂1000片，每片含原药材3.36g。
实施例4：颗粒剂的制备
大枣 2.7kg 红景天 2.1kg 黑蚂蚁 2.4kg
杜仲 1.8kg 党参 1.2kg 黄芪 1.2kg
当归 1.2kg 人参 0.45kg 三七 0.6kg
以上九味，粉碎成粗粉，按如下方法制成颗粒剂：
（1）醇提取，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2h，过滤；药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）水提取，醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入2/3清膏重量份的蔗糖粉，混合均匀，制粒，干燥，分装，得成品颗粒剂1300袋，每袋10g，每g含原药材1g。
实施例5：胶囊剂的制备
大枣 1.5kg 红景天 1.5kg 黑蚂蚁 1.5kg
杜仲 1.8kg 党参 1.2kg 黄芪 1.2kg
当归 0.9kg 人参 0.45kg 三七 0.45kg
以上九味，粉碎成粗粉，按如下方法制成胶囊剂：
（1）醇提取，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2h，过滤；药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）水提取，醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入占1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分装于胶囊内，得到胶囊剂2000粒，每粒含原药材4.95g。
实施例6：酒剂的制备
大枣 1kg 红景天 30kg 黑蚂蚁 1kg
杜仲 25kg 党参 1kg 黄芪 25kg
当归 1kg 人参 20kg 三七 1kg
上述九味，粉碎成粗粉，加入药材总量10倍量50%含醇量的食用白酒，进行回流提取：第一次加入白酒总量的50%，浸泡12h后回流提取2h，过滤；第二次加入白酒总量的30%，回流提取1.5h，过滤；第三次加入白酒总量的20%，回流提取1h，过滤，合并滤液，置贮罐中加盖静置24h，取上清液过滤澄明，分装250ml/瓶，得成品酒剂300瓶。每ml含原药材0.132g。
实施例7：合剂的制备
大枣 30kg 红景天 1kg 黑蚂蚁 30kg
杜仲 1kg 党参 25kg 黄芪 1kg
当归 20kg 人参 1kg 三七 20kg
以上九味，粉碎成粗粉，按如下方法制成口服液：
（1）醇提取，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2h，过滤；药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）水提取，醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.1～1.2，得药液A；将药液A加入乙醇使其含醇量50%以上，搅拌均匀，静置24h，过滤，去沉淀物，得药液B；滤液回收乙醇，药液适当浓缩，挥发残留的少量乙醇，得药液C；取药液C，加入1/4药液重量份的80%含糖量的糖浆，混匀，灌装，灭菌，即得。其制得成口服液（10ml/支）4550支，每支含原药材10g。
实施例8
本实施例所述药物组合物处方与实施例1相同。按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎后粉碎后混合，按照常规工艺加入常规辅料制成丸剂。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种具有耐缺氧、抗疲劳和补肾壮阳作用的药物组合物，其特征在于，该组合物的原料药组成为：
大枣 1-30重量份 红景天 1-30重量份 黑蚂蚁 1-30重量份
杜仲 1-25重量份 党参 1-25重量份 黄芪 1-25重量份
当归 1-20重量份 人参 1-20重量份 三七 1-20重量份。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，该组合物的原料药组成为：
大枣 5重量份 红景天 5重量份 黑蚂蚁 5重量份
杜仲 4重量份 党参 4重量份 黄芪 4重量份
当归 3重量份 人参 1.5重量份 三七 1.5重量份；
或
大枣 9重量份 红景天 7重量份 黑蚂蚁 8重量份
杜仲 6重量份 党参 4重量份 黄芪 4重量份
当归 4重量份 人参 1.5重量份 三七 2重量份；
或
大枣 20重量份 红景天 18重量份 黑蚂蚁 15重量份
杜仲 12重量份 党参 10重量份 黄芪 15重量份
当归 8重量份 人参 8重量份 三七 6重量份。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物制成临床上可接受的酒剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
4.一种如权利要求1-3任一所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，按照选定的重量份取各所述原料药组分，加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床上可接受的酒剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
5.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加乙醇回流提取，滤过得到醇提液及醇提残渣；将所述醇提残渣加水进行回流提取，滤过得到水提液；合并所述醇提液及水提液浓缩得到浓缩液，并加入常规辅料，按照常规工艺，制成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂。
6.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加入8～10体积份的70～90%乙醇，浸泡10-15h后回流提取1～2小时，过滤并合并滤液得到醇提液及醇提残渣，将所述醇提液回收乙醇；
（2）取醇提残渣加8～10体积份的水，100℃煎煮提取1～2小时，合并滤液得到水提液；
（3）合并所述醇提液和水提液，加热浓缩得到浓缩液，加入常规辅料，按照常规方法制备成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂；
所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系。
7.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，加入9体积份的75%乙醇，浸泡12h后回流提取1.5小时，过滤并合并滤液得到醇提液及醇提残渣，将所述醇提液回收乙醇；
（2）取醇提残渣加9体积份的水，100℃煎煮提取2小时，合并滤液得到水提液；
（3）合并所述醇提液和水提液，加热浓缩得到浓缩液，加入常规辅料，按照常规方法制备成临床可接受的散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、合剂、丸剂、注射剂或滴丸剂；
所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系。
8.根据权利要求4所述的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣按1kg原药材加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；所得药渣按1kg原药材再次加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取的浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.1～1.2，得药液A；将药液A加入乙醇使其含醇量50%以上，搅拌均匀，静置20～24h，过滤，去沉淀物，得药液B；取药液B回收乙醇，使药液适当浓缩，挥发残留的少量乙醇，得药液C；取药液C，加入1/4药液重量份的80%含糖量的糖浆，混匀，灌装，灭菌，即得口服液制剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣再加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取上述醇提取后的药渣加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；所得药渣再加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并所得滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分别加入1%药粉重量份的硬脂醇镁、滑石粉，混匀，压片，包糖衣或薄膜衣，得到片剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按原药材重量每1kg再次加蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入1/3清膏重量份的淀粉，混合均匀，干燥，粉碎，分装于胶囊内，得到胶囊剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，按1kg原药材加入75%乙醇10L，浸泡12h后回流提取2小时，过滤；所得药渣按1kg原药材加75%乙醇8L，回流提取1小时，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（2）取醇提取后的药渣按1kg原药材重量加蒸馏水10L，水煮2h，过滤；药渣按1kg原药材重量每1kg加入蒸馏水8L，水煮1h，过滤，合并滤液，旋转蒸发仪浓缩至每ml含1g原药材；
（3）合并上述醇提取和水提取浓缩液，继续浓缩至70℃时溶液相对密度为1.3～1.35的清膏，加入2/3清膏重量份的蔗糖粉，混合均匀，制粒，干燥，分装，得成品颗粒剂；或者
（1）按照选定的重量份取所述大枣、红景天、黑蚂蚁、杜仲、党参、黄芪、当归、人参和三七，混合后粉碎或粉碎后混合，，加入药材总量10体积份50%含醇量的食用白酒，进行回流提取；第一次加入占白酒总量的50%，浸泡12h后回流提取2h，过滤；第二次加入白酒总量的30%，回流提取1.5h，过滤；第三次加入白酒总量的20%，回流提取1h，过滤，合并各次滤液，置贮罐中加盖静置24h，取上清液过滤澄明，分装即得酒剂。
9.根据权利要求4-8任一所述的制备方法得到的药物组合物。
10.一种权利要求1或2或3或9所述的药物组合物在制备具有耐缺氧、抗疲劳、补肾壮阳功能药物中的应用。
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