CN103483400A

CN103483400A - 一种马先蒿甙a的提纯工艺

Info

Publication number: CN103483400A
Application number: CN201310423571.1A
Authority: CN
Inventors: 杨存
Original assignee: Nanjing Tongze Agricultural Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Tongze Agricultural Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2013-09-17
Filing date: 2013-09-17
Publication date: 2014-01-01

Abstract

本发明公开了一种马先蒿甙A的提纯工艺，方法是以穗花马先蒿为原料，加入乙醇溶液，微波提取，提取液回收乙醇，浸膏加热水分散，加入极性大孔树脂柱吸附，洗脱，洗脱液通过超滤膜超滤，纳滤膜浓缩，干燥得到粗品，用乙醇回流溶解，放置沉淀，过滤得到马先蒿甙A。本发明所述方法的先进性和实用价值在于，应用本方法所制备的马先蒿甙A纯度高，方法简便实用，成本低，易于工业化。

Description

一种马先蒿甙A的提纯工艺

技术领域

本发明涉及一种马先蒿甙A的提纯工艺，属于医药领域。

背景技术

马先蒿甙A（Pedicularioside A）为苯丙素苷类化合物，分子式为C₃₄H₄₄O₁₉，分子量756.71，易溶于热水、甲醇，难溶于冷水，结构式为：

马先蒿甙A来源于玄参科(Scrophulariaceae) 穗花马先蒿 Pedicularis spicata Pall.全植物。现代药理研究表明马先蒿甙A具有多种生活性。马先蒿甙A具有抗氧作用，能抑制红细胞的氧化溶血作用，其作用与抗氧剂没食子酸丙酯相当，浓度为32.5μM时，对微粒体脂质过氧化的抑制率为15.6%，超氧化物抑制率为56.8%；具有抗肿瘤作用，其IC50(μg/mL)为94.8±2.0(肝癌SMMC-7721)，97.6±15.0(肺腺癌L342)，101.6±2.8(胃腺癌MGc-803)。

目前尚未见马先蒿甙A工业分离制备方法的相关报道。

发明内容

本发明目的是提供一种简单、提率较高的马先蒿甙A提纯工艺。

本发明是通过以下技术方案实现的：

1）用醇类溶液对穗花马先蒿进行微波提取，得到提取液；

2）上述提取液减压回收乙醇至浸膏状，加热水溶解，滤出不溶物，滤液加入大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液；

3）上述洗脱液加入超滤膜超滤，透过液再加入纳滤膜浓缩，浓缩液干燥得到粗品；

4）上述粗品用乙醇回流溶解，放冷沉淀，过滤得到马先蒿甙A。

所述步骤1）中对穗花马先蒿进行粉碎处理，控制粒径为20-60目。

所述步骤1）中醇类溶液为40-60%乙醇水溶液，优选45%乙醇水溶液。

所述步骤1）中固液体积比为1:8-1:13，优选1:10。

所述步骤1）中微波功率为1-10kw，提取2-3次，每次10-30min。

所述步骤2）中大孔树脂可选AB-8、D101、SPD100、HPD100和HZ830中一种。

所述步骤2）中洗脱剂为3-5BV水→5-7BV50-70%乙醇。

所述步骤3）中超滤膜为截留分子量3000-10000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量100的中空复合膜，进口压力控制0.4-0.9Mpa。

所述步骤4）中乙醇用量为粗品重量的8倍量（V/W）。

本发明采用大孔树脂吸附，富集量大，除杂质效果好；洗脱液用生物膜截留浓缩，能耗低，并且避免温度过高发生物质变化；根据马先蒿甙A易溶于热乙醇，在冷乙醇中溶解度下降的性质采用自然放冷沉淀的方法，步骤简单，无能耗，节省成本；整个工艺操作简单，不使用挥发毒性溶剂，废液可回收再利用，安全环保。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式：

实施例1：

将穗花马先蒿粉碎至20目，取5kg投入微波提取罐，加入50L45%乙醇溶液微波提取10min，微波提取功率为10kW，提取3次，合并提取液，减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L D101大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用20L60%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量3000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.8Mpa得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的乙醇回流溶解，回流至粗品全部溶解，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得马先蒿甙A，含量为85.5%。

实施例2：

将穗花马先蒿粉碎至60目，取5kg投入微波提取罐，加入50L45%乙醇溶液微波提取20min，微波提取功率为1kW，提取2次，合并提取液，减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L AB-8大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用35L50%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量10000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.5Mpa得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的乙醇回流溶解，回流至粗品全部溶解，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得马先蒿甙A，含量为76.5%。

实施例3：

将穗花马先蒿粉碎至80目，取5kg投入微波提取罐，加入50L45%乙醇溶液微波提取20min，微波提取功率为5kW，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L SPD100大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用28L70%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量6000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.6Mpa得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的乙醇回流溶解，回流至粗品全部溶解，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得马先蒿甙A，含量为75.8%。

实施例4：

将穗花马先蒿粉碎至60目，取5kg投入微波提取罐，加入50L45%乙醇溶液微波提取30min，微波提取功率为4kW，提取3次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L HPD100大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用30L60%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量3000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.4Mpa得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的乙醇回流溶解，回流至粗品全部溶解，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得马先蒿甙A，含量为85.2%。

实施例5：

将穗花马先蒿粉碎至40目，取5kg投入微波提取罐，加入50L45%乙醇溶液微波提取1h，微波提取功率为8kW，提取2次，合并提取液减压回收乙醇至浸膏状加水溶解，滤出不溶物，滤液加入5L HZ830大孔树脂柱吸附，先水洗至糖反应呈阴性，再用25L50%乙醇溶液洗脱有效成分，收集洗脱液，洗脱液加入截留分子量6000的中空复合膜超滤膜超滤，透过液再加入截留分子量100的中空复合纳滤膜浓缩，进口压力控制0.9Mpa得浓缩液，浓缩液干燥得到粗品，用粗品重量的8倍量（V/W）的乙醇回流溶解，回流至粗品全部溶解，放冷沉淀，过滤、冷冻干燥即得马先蒿甙A，含量为85.6%。

Claims

1.一种马先蒿甙A的提纯工艺，其特征在于包含以下步骤：

1）用醇类溶液对穗花马先蒿进行微波提取，得到提取液；

2.如权利要求1所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤1）中对穗花马先蒿进行粉碎处理，控制粒径为20-60目。

3.如权利要求1所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤1）中醇类溶液为40-60%乙醇水溶液，优选45%乙醇水溶液。

4.如权利要求1至3中任一项所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤1）中固液体积比为1:8-1:13，优选1:10。

5.如权利要求1至3中任一项所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤1）中微波功率为1-10kw，提取2-3次，每次10-30min。

6.如权利要求1至3中任一项所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤2）中大孔树脂可选AB-8、D101、SPD100、HPD100和HZ830中一种。

7.如权利要求1至3中任一项所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤2）中洗脱剂为3-5BV水→5-7BV50-70%乙醇。

8.如权利要求1至3中任一项所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤3）中超滤膜为截留分子量3000-10000的中空复合膜，纳滤膜为截留分子量100的中空复合膜，进口压力控制0.4-0.9Mpa。

9.根据权利要求1所述的马先蒿甙A提纯工艺，其特征在于：所述步骤4）中乙醇用量为粗品重量的8倍量（V/W）。