CN115105518B - 马先蒿苷a在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用 - Google Patents

马先蒿苷a在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用。相对于传统技术，本发明具备如下有益效果：本发明的发明人发现马先蒿苷A对鸡球虫病具有明显防治作用，针对马先蒿苷A的这一新的作用的发现，为抗鸡球虫病药物的开发提供了新的方案，为临床鸡球虫病的控制提供有效手段，拓宽了马先蒿苷A的应用领域。

Description

马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用
技术领域
本发明涉及动物疾病防控技术领域，特别涉及马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用。
背景技术
鸡球虫病是一种肠道寄生虫病，由一种或多种艾美耳球虫感染引起，所述病原属顶复门、孢子虫纲、真球虫目、艾美耳科、艾美耳属的原虫。艾美耳球虫有7个种，分别为柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)以及早熟艾美耳球虫(E.praecox)。鸡只感染球虫后，生产性能严重下降，料肉比升高，严重时引起死亡，给养鸡业带来严重的经济损失。其中，柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)是危害最为严重的虫种之一，寄生于盲肠，引起血便，食欲减退，增重降低等临床症状。
目前，国内外对鸡球虫病的防治主要依靠药物。从1936年首次研制出抗球虫药以来，已报道的抗球虫药达40余种，现今广泛使用的有20种。传统的预防药物有氯苯胍、氨丙啉、二硝托胺、莫能霉素、盐霉素、地克珠利、马杜拉霉素、氯羟吡啶以及尼卡巴嗪等。传统的治疗药物有妥曲珠利以及磺胺类药(例如磺胺喹恶啉、磺胺氯吡嗪钠)等。
然而，随着临床野毒虫株对传统抗球虫药物抗药性的产生，导致原有抗球虫药物的作用效果明显降低，使得临床上缺乏具有明确治疗效果的抗球虫药物。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
基于此，本发明实施例的目的包括提供马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用，以马先蒿苷A来抗鸡球虫病，为临床有效防治鸡球虫病提供新方案。
本发明实施例的目的可以通过以下技术方案实现：
马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述鸡球虫病的病原虫为艾美耳球虫。
在本发明的一些实施方式中，所述艾美耳球虫为柔嫩艾美耳球虫。
在本发明的一些实施方式中，所述药物包括有效量的马先蒿苷A和载体。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为散剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为水溶性粉剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为溶液剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为微囊剂。
在本发明的一些实施方式中，所述鸡饲料包括马先蒿苷A和基础饲料。
在本发明的一些实施方式中于，所述基础饲料为全价配合饲料、浓缩饲料、预混料饲料、精料混合料或者混合饲料。
相对于传统技术，本发明具备如下有益效果：
本发明的发明人发现马先蒿苷A对鸡球虫病具有明显防治作用，针对马先蒿苷A的这一新的作用的发现，为抗鸡球虫病药物的开发提供了新的方案，为临床鸡球虫病的控制提供有效手段，拓宽了马先蒿苷A的应用领域。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案、更完整地理解本申请及其有益效果，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对本领域技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明一个实施例中马先蒿苷A对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的影响；图中，横坐标是马先蒿苷A的浓度，纵坐标是马先蒿苷A对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的抑制率；
图2为本发明一个实施例中阳性对照药物磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的影响；图中，横坐标是磺胺氯吡嗪钠浓度，纵坐标是磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的抑制率。
具体实施方式
下面结合附图、实施方式和实施例，对本发明作进一步详细的说明。应理解，这些实施方式和实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，提供这些实施方式和实施例的目的是使对本发明公开内容理解更加透彻全面。还应理解，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式和实施例，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下作各种改动或修改，得到的等价形式同样落于本申请的保护范围。此外，在下文的描述中，给出了大量具体的细节以便提供对本发明更为充分地理解，应理解，本发明可以无需一个或多个这些细节而得以实施。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述实施方式和实施例的目的，不是旨在于限制本发明。
术语
除非另外说明或存在矛盾之处，本文中使用的术语或短语具有以下含义：
本文所使用的术语“和/或”、“或/和”、“及/或”的选择范围包括两个或两个以上相关所列项目中任一个项目，也包括相关所列项目的任意的和所有的组合，所述任意的和所有的组合包括任意的两个相关所列项目、任意的更多个相关所列项目、或者全部相关所列项目的组合。需要说明的是，当用至少两个选自“和/或”、“或/和”、“及/或”的连词组合连接至少三个项目时，应当理解，在本申请中，该技术方案毫无疑问地包括均用“逻辑与”连接的技术方案，还毫无疑问地包括均用“逻辑或”连接的技术方案。比如，“A及/或B”包括A、B和A+B三种并列方案。又比如，“A，及/或，B，及/或，C，及/或，D”的技术方案，包括A、B、C、D中任一项(也即均用“逻辑或”连接的技术方案)，也包括A、B、C、D的任意的和所有的组合，也即包括A、B、C、D中任两项或任三项的组合，还包括A、B、C、D的四项组合(也即均用“逻辑与”连接的技术方案)。
本发明中涉及“多个”、“多种”、“多次”、“多元”等，如无特别限定，指在数量上大于2或等于2。例如，“一种或多种”表示一种或大于等于两种。
本文中所使用的“其组合”、“其任意组合”、“其任意组合方式”等中包括所列项目中任两个或任两个以上项目的所有合适的组合方式。
本文中，“合适的组合方式”、“合适的方式”、“任意合适的方式”等中所述“合适”，以能够实施本发明的技术方案、解决本发明的技术问题、实现本发明预期的技术效果为准。
本文中，“优选”、“更好”、“更佳”、“为宜”仅为描述效果更好的实施方式或实施例，应当理解，并不构成对本发明保护范围的限制。
本发明中，“进一步”、“更进一步”、“特别”等用于描述目的，表示内容上的差异，但并不应理解为对本发明保护范围的限制。
本发明中，“可选地”、“可选的”、“可选”，指可有可无，也即指选自“有”或“无”两种并列方案中的任一种。如果一个技术方案中出现多处“可选”，如无特别说明，且无矛盾之处或相互制约关系，则每项“可选”各自独立。
本发明中，“第一方面”、“第二方面”、“第三方面”、“第四方面”等中，术语“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等仅用于描述目的，不能理解为指示或暗示相对重要性或数量，也不能理解为隐含指明所指示的技术特征的重要性或数量。而且“第一”、“第二”、“第三”、“第四”等仅起到非穷举式的列举描述目的，应当理解并不构成对数量的封闭式限定。
本发明中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
本发明中，涉及到数值区间(也即数值范围)，如无特别说明，可选的数值分布在上述数值区间内视为连续，且包括该数值范围的两个数值端点(即最小值及最大值)，以及这两个数值端点之间的每一个数值。如无特别说明，当数值区间仅仅指向该数值区间内的整数时，包括该数值范围的两个端点整数，以及两个端点之间的每一个整数，在本文中，相当于直接列举了每一个整数，比如t为选自1～10的整数，表示t为选自由1、2、3、4、5、6、7、8、9和10构成的整数组的任一个整数。此外，当提供多个范围描述特征或特性时，可以合并这些范围。换言之，除非另有指明，否则本文中所公开之范围应理解为包括其中所归入的任何及所有的子范围。
本发明中的温度参数，如无特别限定，既允许为恒温处理，也允许在一定温度区间内存在变动。应当理解的是，所述的恒温处理允许温度在仪器控制的精度范围内进行波动。允许在如±5℃、±4℃、±3℃、±2℃、±1℃的范围内波动。
本发明中，％(w/w)与wt％均表示重量百分比，％(v/v)指体积百分比，％(w/v)指质量体积百分数。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。除非和本申请的发明目的和/或技术方案相冲突，否则，本发明涉及的引用文献以全部内容、全部目的被引用。本发明中涉及引用文献时，相关技术特征、术语、名词、短语等在引用文献中的定义也一并被引用。本发明中涉及引用文献时，被引用的相关技术特征的举例、优选方式也可作为参考纳入本申请中，但以能够实施本发明为限。应当理解，当引用内容与本申请中的描述相冲突时，以本申请为准或者适应性地根据本申请的描述进行修正。
马先蒿苷A(Pedicularioside A)，是一种提取自穗花马先蒿(Pedicularisspicata)等马先蒿属的天然化合物，分子式是C34H44O19，分子量为756.7，CAS号为135010-61-6，化学结构如下式所示：
现有研究表明，马先蒿苷A具有抗氧化、抗肿瘤、DNA修复、保肝、降压利尿等作用。
本发明的发明人发现了马先蒿苷A的新作用，即马先蒿苷A对鸡球虫病具有明显防治作用，且明显优于对照药物磺胺氯吡嗪钠。该发现为抗鸡球虫病药物的开发提供了新的方案，为临床鸡球虫病的控制提供有效手段，拓宽了马先蒿苷A的应用领域。
本发明的第一方面
马先蒿苷A在制备鸡饲料或者抗鸡球虫病的药物中的应用。
可以理解的是，本发明实施例所述的“药物”为兽药，本发明实施例所述的“兽药(Veterinary Drugs)”：是指用于预防、治疗、诊断动物疾病或者有目的地调节动物生理机能的物质(含药物饲料添加剂)。
本发明实施例所述的“抗鸡球虫病”可以是对鸡球虫病具有明显的治疗作用，也可以是对球虫病具有明显的预防作用。该治疗作用、预防作用包括但不限于通过抑制艾美耳球虫的繁殖实现的。
在本发明的一些实施方式中，所述鸡球虫病的病原虫为艾美耳球虫。
在本发明的一些实施方式中，所述艾美耳球虫为柔嫩艾美耳球虫。
在本发明的一些实施方式中，所述药物包括有效量的马先蒿苷A和载体。
在本发明中，“有效量”是指该术语所对应的组分在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解特定疾病、病症和/或症状的剂量，本发明中，如无特别限定，指实现治疗、预防、减轻和/或缓解鸡球虫病疾病、病症和/或症状的剂量。
可以理解的是，本发明的，所述药物的给药方式可以为群体给药，也可以为个体给药。
可以理解的是，本发明实施例所述药物的给药方式为群体给药或者个体给药。当然，也可以采用群体给药和个体给药结合的方式。
可以理解的是，本发明实施例所述的“群体给药”的方式包括但不限于：
①混水给药：首先要了解药物在水中溶解度；其次要根据饮水量计算药物用量，若因药物在水中稳定性差时可考虑“口渴服药法”；
②混料给药法：将药物混入饲料供自由采食，但药物和饲料必须混合均匀，可采用递加稀释法；
③气雾给药。
可以理解的是，本发明实施例所述的“个体给药”的方式包括但不限于：
①口服给药：该方式的优点是安全、方便、经济；
②注射给药：优点是药物吸收快而完全，剂量准确，作用效果好；注射给药有皮下注射、肌肉注射、静脉注射、鞘内注射、嗉囊注射、动脉注射、关节囊注射等；
③局部给药：涂擦、撒粉、湿敷、滴入、灌肠、吸入、植入等。
可以理解的是，根据药物的剂型的不同，所选择的载体的种类、辅料的用量等也不同。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为散剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为水溶性粉剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为溶液剂。
在本发明的一些实施方式中，所述药物的剂型为微囊剂。
可以理解的是，马先蒿苷A可以与合适种类的载体结合，制备成不同形态的药物(例如液态、气态、半固体、固体)，相应形成不同的剂型，这些剂型包括但不限于：散剂(包括预混剂)、水溶性粉剂(包括水扩散性粉剂及水溶性颗粒剂)、溶液剂(主要是水溶液，也有混悬液、乳浊液等)、微囊剂或。
水溶性粉剂(包括水扩散性粉、水溶性颗粒剂)，是由药物与助溶剂、助悬剂等辅料组成的可溶性粉末。投入饮水中使药物溶解，均匀分散，供动物饮用。该剂型的优点包括：①混合较均匀。②对群体疾病防治效果较好，特别是患病畜禽往往吃料少(甚至不吃料)而多喝水，这对保证病畜禽能够摄食足够药物很有好处。
溶液剂(包括口服液，混悬液，乳浊液)，是将药物溶在水中而成的药物，可供内服或外用。该剂型的优点包括：投入饮水中使药物溶解，均匀分散，供动物饮用。该剂型的优点包括：①混合较均匀。②对群体疾病防治效果较好，特别是患病畜禽往往吃料少(甚至不吃料)而多喝水，这对保证病畜禽能够摄食足够药物很有好处。
散剂，是广泛使用的一种药物剂型，药物经过研磨成粉末状，可掺合在饲料或溶于水中喂给动物。该剂型的优点包括：①大多作为添加剂添加于饲料中，作为防治用药。省工省时，除可以作为临床用药混于饲料外，也可以直接用于饲料生产过程中。②方便贮藏。③品质相对稳定。
微型胶囊(microcapsule)简称微囊，系利用天然的或合成的高分子材料(囊材)，将药物(囊芯物)包裹成直径1-500/微米的微型胶囊。药物微囊可根据需要制成散剂、片剂、注射剂及软膏剂等。该剂型的优点包括：微囊可延长药效、提高药物的稳定性或掩盖药物的不良气味。
在本发明的一些实施方式中，所述鸡饲料包括马先蒿苷A和基础饲料。
本发明实施例对基础饲料的具体种类不做特别限定，可以为全价配合饲料、浓缩饲料、预混料/预混合饲料、精料混合料、混合饲料。全价配合饲料、浓缩饲料、预混料/预混合饲料、精料混合料属于配合饲料，即指根据动物的不同生长阶段、不同生理要求、不同生产用途的营养需求以及饲料营养价值评定的实验和研究为基础，按科学配方把不同来源的饲料，以一定比例均匀混合，并按固定的工艺流程生产以满足各种实际需求的混合饲料。
全价配合饲料，是由能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素、氨基酸以及微量元素添加剂等，按规定的饲养标准配比而成的、营养全面而平衡的饲料，这类饲料可直接喂养。
浓缩饲料，是指由蛋白质饲料、矿物质饲料(钙、磷、食盐)、添加剂预混料按一定比例混合而成。不能直接喂养，需要加入玉米或者其他能量饲料后方可喂养。
预混料/预混合饲料，是一种或多种微量的添加剂原料和载体以及稀释剂一起拌和均匀的混合料，其微量成分经预混合后，有利于在大量饲料中均匀分布。该饲料属于半成品，不能直接喂养。
精料混合料，是用于营养不足的一种补充精料，主要由能量饲料、蛋白质饲料和矿物质饲料组成，可直接喂养。
混合饲料，由某些饲料原料经过简单加工混合而成，俄日初级配合饲料，主要考虑能量、蛋白质、钙、磷等营养指标。
本发明的第二方面
本发明提供一种鸡球虫病的防治方法，包括给予患病鸡有效量的马先蒿苷A。
马先蒿苷A可以单独地，或着和其他活性成分组合，给予患病鸡。
“防治”、“有效量”、给予的形式(饲料、药物)、给药方式，药物、鸡饲料的定义可参考本发明第一方面。
具体实施例
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，优先参考本发明中给出的指引，还可以按照本领域的实验手册或常规条件，还可以按照制造厂商所建议的条件，或者参考本领域已知的实验方法。
下述的具体实施例中，涉及原料组分的量度参数，如无特别说明，可能存在称量精度范围内的细微偏差。涉及温度和时间参数，允许仪器测试精度或操作精度导致的可接受的偏差。
实施例1
一、实验材料
(1)马先蒿苷A购自河南科锐化工有限公司，磺胺氯吡嗪钠购自Merck公司，均为原药。
(2)球虫卵囊：柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)广东株孢子化卵囊，由广东省农业科学院动物卫生研究所保存，使用前在无球虫雏鸡体内复壮。
(3)细胞：MDBK细胞(即牛肾细胞)，由广东省农业科学院动物卫生研究所保存。
二、实验方法
以E.tenella MDBK细胞培养模型评价抗球虫效果，具体评价步骤包括：
(1)用0.25wt％的胰蛋白酶消化液消化生长至融合状态达到80％以上的MDBK细胞，以4×105个/孔的细胞浓度铺板12孔细胞培养板，置于37℃含5％(v/v)CO2的培养箱中培养24h。
(2)待12孔培养板的细胞生长至融合状态达80％及以上时，每孔接种10×104个子孢子/ml，4h后弃去培养基，以PBS洗涤3次，洗掉悬浮的子孢子，每孔加入5wt％胎牛血清的MEM培养基。
(3)试验分组：
马先蒿苷A组，设5个药物浓度(终浓度)梯度，具体为0.01μM、0.1μM、1μM、10μM、100μM，每个浓度梯度设3个重复；
阳性对照(磺胺氯吡嗪钠)组，设5个药物浓度(终浓度)梯度，具体为0.01μM、0.1μM、1μM、10μM、100μM，每个浓度梯度设3个重复；
空白对照组：参照待测药物组(即马先蒿苷A组)和阳性对照组加入待测药物和阳性对照药物的体积，添加等体积的培养基，该培养基为5％胎牛血清的MEM培养基，设3个重复。
(4)置于37℃含5％CO2的培养箱中继续培养，培养48h后弃去培养基，PBS洗涤3次，提取各孔样品的总RNA。以RT-PCR检测各试验药物对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的影响。
Real-time PCR引物如下。
特异性扩增柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)actin引物，
EtActin-F:5’-CACCACCGCCGAGAAAGA-3’(SEQ ID NO.1)，
EtActin-R:5’-GAACAACATTG-CCGTAGAGG-3’(SEQ ID NO.2)；
特异性扩增宿主细胞actin引物，
Bactin-F:5’-GGATGAGGCTCAGAGCAAGAGA-3’(SEQ ID NO.3)，
Bactin-R:5’-TCGTCCCAGTTGGTG-ACGAT-3’(SEQ ID NO.4)。
以ΔΔCT方法计算各试验药物对细胞培养水平上柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)生长发育的效果。
Real-time PCR反应体系如表1和表2。
表1、Real-time RT-PCR反应体系
组分 体积(μL)
2×One Step SYBR Green Mix 10
One Step SYBR Green Enzyme Mix 1
PCR Forward Primer(10μM) 1
PCR Reverse Primer(10μM) 1
Total RNA 2
无RNA酶的ddH2O 补足至20
表2、Real-time PCR反应程序如下：
Stage1： 逆转录 reps:1 42℃ 5min
Stage2： 预变性 reps:1 95℃ 5min
Stage3： 循环反应 reps:40 95℃ 10sec
60℃ 20s
Stage4： 融解曲线 reps:1 default
评价指标：通过Real-time RT-PCR获得实验组和对照组的ΔCT＝CT[Et actin]-CT[H actin]，ΔΔCT＝ΔCT[exp]-ΔCT[ref]，最终获得待筛选药物的抗球虫作用效果：
三、实验结果
结果见图1和图2，图1为马先蒿苷A对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的影响；图中，横坐标是马先蒿苷A的浓度，纵坐标是马先蒿苷A对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的抑制率；图2为阳性对照药物磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的影响；图中，横坐标是磺胺氯吡嗪钠浓度，纵坐标是磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的抑制率。
分别计算各组药物对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的抑制作用，马先蒿苷A对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)的繁殖具有明显的抑制效果，其MIC50值为48.90μM；阳性对照药物磺胺氯吡嗪钠对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)具有抑制效果，其MIC50值为58.19μM。
以上结果表明，马先蒿苷A具有良好的抗柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作用，且明显优于阳性对照药物磺胺氯吡嗪钠。
根据图1和图2可知，随着马先蒿苷A浓度的增加，其抑制柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)繁殖的作用增强，马先蒿苷A的作用具有浓度依赖性，具有良好的抗柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作用。
实施例2
一、实验材料
(1)散剂型的制备：取5g马先蒿苷A原药(含量不低于80wt％)和95g淀粉混匀，制备马先蒿苷A散剂型；
(2)对照药物：常规抗球虫药物三字球虫粉(30wt％磺胺氯吡嗪钠)，由上海诺华动物保健有限公司生产。
(3)球虫卵囊：柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)广东株孢子化卵囊，由广东省农业科学院动物卫生研究所保存，使用前在无球虫雏鸡体内复壮。
(4)雏鸡：岭南黄肉鸡，由广东省农业科学院动物科学研究所提供，饲养于已消毒的专用动物房内；鸡笼和所用器皿均严格消毒，自由采食和饮用纯净水；试验前观察雏鸡有无临床症状及连续2天检查粪便有无球虫卵囊，备用。
(5)饲料：由广东省新南都饲料科技有限公司定制育雏料，不含任何抗球虫药物。
二、实验方法
(1)分组：按试验分组及处理将150只岭南黄肉鸡饲养至14日龄，逐只称重，淘汰弱雏和体重过大者，将剩余雏鸡随机分成4组，每组30只，并适当调整使每组雏鸡总体重大致相等。
(2)处理：除第1组(空白对照)外，第2～4组雏鸡一次性经口灌服柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊l×105个/羽；攻虫当天，第3～4组分别饲喂含抗球虫药物的饲料7天，试验鸡的分组情况及药物的用法用量见表3。
表3、实验分组情况
组别 鸡只 卵囊接种量(个/羽) 药物 用法 用量(g/kg)
1 30 0 - - -
2 30 1×105 - - -
3 30 1×105 三字球虫粉 拌料 2
4 30 1×105 马先蒿苷A 拌料 0.1
备注：表中“g/kg”指每1kg饲料含有的药物重量。
每天观察并记录鸡群的精神状况、采食量、粪便情况等；对死亡雏鸡称重，剖检，若为柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染引起死亡则病变记分为+4分；所有雏鸡于感染后第7天逐只称重，剖检，进行盲肠病变记分；最后计算各组雏鸡的增重和饲料报酬。
药效判定方法及标准抗球虫指数(ACI)按美国默克公司推荐的公式计算：
ACI＝(相对增重率+存活率)－(卵囊值+病变值)；
相对增重率(％)＝(试验组增重÷空白对照组增重)×100％；
存活率(％)＝(各组存活雏鸡数÷各组雏鸡总数)×100％。
病变按五级记分：
①无卵囊，盲肠正常，为0分；
②有卵囊，盲肠黏膜稍增厚，有少量散在出血或少量血样肠内容物，为+1分；
③有卵囊，盲肠黏膜增厚，有明显出血或明显血样肠内容物，为+2分；
④有卵囊，盲肠黏膜增厚，有大量凝血块或血样肠芯，为+3分；
⑤雏鸡因球虫病死亡或有大量卵囊，盲肠外观呈酱油色(或小肠中部有点状坏死灶，黏膜面呈绯红色)，肠管明显肿大，内容物形成明显的血样肠芯，为+4分；
病变值＝每组平均病变记分×10；
卵囊值由盲肠内容物克粪便卵囊数(OPG)换算而来。
药效判定标准是ACI<120为无效，120～160为弱效，160～180为中效，180以上为强效。
三、实验结果
临床症状观察：接种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊的对照组(第2组)第2天，病鸡出现精神沉郁，采食量下降；对照组(第2组)第5天出现明显血便，并出现死亡，随后血便逐渐减少。
分别计算各组的抗球虫指数，结果见表4。第4组的抗球虫指数(ACI)为176.2，高于对照药物第3组，具有良好的抗柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)作用，且优于常规抗球虫药物三字球虫粉。
表4、各组抗球虫指数
组别 存活率(％) 相对增重率(％) 病变值 卵囊值 抗球虫指数
1 100 100 0 0 200
2 90 78.1 32 20 116.1
3 100 86.3 13 10 163.3
4 100 91.2 10 5 176.2
以上所述实施方式和实施例的各技术特征可以进行任意合适方式的组合，为使描述简洁，未对上述实施方式和实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为在本说明书记载的范围中。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，得到的等价形式同样落于本申请的保护范围。还应当理解，本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或者有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书及附图可以用于解释权利要求的内容。

Claims (6)

1.马先蒿苷A在制备抗鸡球虫病的药物中的应用；所述鸡球虫病的病原虫为艾美耳球虫；所述艾美耳球虫为柔嫩艾美耳球虫。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括马先蒿苷A和载体。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为散剂。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为水溶性粉剂。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为溶液剂。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为微囊剂。
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