CN103461140A - 菲油果的茎尖离体快速培养方法 - Google Patents

菲油果的茎尖离体快速培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103461140A
CN103461140A CN2013104501832A CN201310450183A CN103461140A CN 103461140 A CN103461140 A CN 103461140A CN 2013104501832 A CN2013104501832 A CN 2013104501832A CN 201310450183 A CN201310450183 A CN 201310450183A CN 103461140 A CN103461140 A CN 103461140A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medium
concentration
stem
cut
culture method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013104501832A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103461140B (zh
Inventor
姚德彪
顾建平
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANGHAI XUDONG GARDENING Co Ltd
Original Assignee
SHANGHAI XUDONG GARDENING Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANGHAI XUDONG GARDENING Co Ltd filed Critical SHANGHAI XUDONG GARDENING Co Ltd
Priority to CN201310450183.2A priority Critical patent/CN103461140B/zh
Publication of CN103461140A publication Critical patent/CN103461140A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103461140B publication Critical patent/CN103461140B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Cultivation Of Plants (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，依次用洗衣粉、自来水冲洗，然后在无菌室超净台上将枝条消毒；在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段进行新芽培养，进行丛生芽诱导从而培育成无菌系；将丛生芽切成单芽，进行生根培养；第四步：将生根的试管苗移入泥炭和珍珠岩混合基质中进行炼苗，30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。采用本发明提供的培养方法繁殖菲油果，具有繁殖速度快、繁殖率高、脱病毒及提纯复壮等优点，可在短时间内工厂化生产优质种苗。

Description

菲油果的茎尖离体快速培养方法
技术领域
本发明涉及一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，属于菲油果培养方法技术领域。
背景技术
菲油果是一种多用途经济树木，可作绿化、盆花，四季常绿，观赏性强花色粉红，4-5月开花，适应性强，耐零下10度低温。花谢后结椭圆形果实，重约75-100g，营养丰富，甜中带酸，且可加工成果酱、果汁等。其种苗主要靠扦插等常规方法繁殖，但周期长且生根率低，无法满足生产用种苗之需。
发明内容
本发明所要解决的是现有菲油果繁殖方法周期长、生根率低，无法满足生产需要的技术问题。
为了解决上述问题，本发明的技术方案是提供一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，具体步骤为：
第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份；
第二步：在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段接种于第一培养基上进行新芽培养，所述第一培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素(ZT)和吲哚丁酸(IBA)；待茎尖伸长至0.5cm以上时，将茎尖新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，所述第二培养基是在WP培养基(木本培养基)的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；
第三步：将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭；
第四步：将生根的试管苗移栽至由重量比为3：1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3-5次，15天后施肥料液；30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。
优选地，所述第二步中第一培养基的pH值为5.6，其中玉米素的浓度为3mg/L，吲哚丁酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为6.5g/L，蔗糖浓度为30g/L。
优选地，所述第二步中第二培养基中细胞分裂素的浓度为2mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L。
优选地，所述第三步中第三培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L。
优选地，所述第二步中生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
优选地，所述第二步中丛生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
优选地，所述第三步中生根培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
优选地，所述第四步中肥料液含有以重量百分比计的0.1wt％硝酸铵、0.1wt％磷酸二氢钾、0.1wt％硫酸镁。
采用本发明提供的培养方法繁殖菲油果，具有繁殖速度快、繁殖率高、脱病毒及提纯复壮等优点，可在短时间内工厂化生产优质种苗。
具体实施方式
为使本发明更明显易懂，兹以优选实施例，作详细说明如下。
实施例
一、材料准备
1、洗衣粉溶液
2、第一培养基：在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素(ZT)和吲哚丁酸(IBA)；其中玉米素的浓度为3mg/L，吲哚丁酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为6.5g/L，蔗糖浓度为30g/L；将第一培养基的pH调节至5.6。
3、第二培养基：在WP培养基(木本培养基)的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；其中细胞分裂素的浓度为2mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L。
4、第三培养基：在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭；其中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L。
5、肥料液：其中硝酸铵的含量为0.1wt％、磷酸二氢钾的含量为0.1wt％、氯化镁的含量为0.1wt％。
二、具体步骤
第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份。
第二步：在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段接种于第一培养基上进行新芽培养；待茎尖伸长至0.5cm以上时，将茎尖新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，生芽培养与丛生芽均是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行；经过连续继代增殖不断扩大繁殖系数，每40-45天增殖一次，增殖率为1：3-5。
第三步：将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，生根培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照为时间12小时的条件下进行。
第四步：将生根的试管苗移栽至由重量比为3：1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3-5次，15天后施肥料液。
第五步：30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中，存活率可达100％且缓苗期短生长快。
三、试验结果
由上述试验可知，本发明提供的菲油果的茎尖立体快速培养方法生根培养时间只需20天，生根率达96％，试管苗炼苗成活率达98％，一段茎段一年内可繁育10000株种苗；而常规扦插生根时间长达100天以上，生根成活率只有30％。相较于常规培养方法，本发明具有繁殖速度快、繁殖率高的优点。

Claims (8)

1.一种菲油果的茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，具体步骤为：
第一步：选取当年萌发的半木质化的新枝，剪去已展平的叶片，用洗衣粉溶液冲洗三遍，置自来水龙头下冲洗3h，在无菌室超净台上将枝条消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的洁尔敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸钠溶液消毒15min，用无菌水冲洗三遍后无菌滤纸吸干水份；
第二步：在超净台上剥取长度0.5mm以下的茎尖，切下茎尖连同0.5cm长度的茎段接种于第一培养基上进行新芽培养，所述第一培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了玉米素和吲哚丁酸；待茎尖伸长至0.5cm以上时，将茎尖新芽切下接种至第二培养基上诱导丛生芽，所述第二培养基是在WP培养基的基础上添加了细胞分裂素、荼乙酸；
第三步：将丛生芽切成单芽，接种至第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了吲哚丁酸和活性炭，第三培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L；
第四步：将生根的试管苗移栽至由重量比为3：1的泥炭和珍珠岩混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿防失水萎蔫，7天后揭开薄膜炼苗，每天叶面喷水3-5次，15天后施肥料液；30天后移栽至灌满纯泥炭的塑料穴盘中，经3个月培养后直接移栽至土壤或大的容器中。
2.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第二步中第一培养基的pH值为5.6，其中玉米素的浓度为3mg/L，吲哚丁酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为6.5g/L，蔗糖浓度为30g/L。
3.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第二步中第二培养基中细胞分裂素的浓度为2mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L。
4.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第三步中第三培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5mg/L，活性炭的浓度为2mg/L。
5.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第二步中生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
6.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第二步中丛生芽培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
7.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第三步中生根培养是在温度24℃、光照强度为3000LX及每天光照时间为12小时的条件下进行。
8.如权利要求1所述的菲油果茎尖离体快速培养方法，其特佂在于，所述第四步中肥料液含有以重量百分比计的0.1wt％硝酸铵、0.1wt％磷酸二氢钾、0.1wt％硫酸镁。
CN201310450183.2A 2013-09-27 2013-09-27 菲油果的茎尖离体快速培养方法 Expired - Fee Related CN103461140B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310450183.2A CN103461140B (zh) 2013-09-27 2013-09-27 菲油果的茎尖离体快速培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310450183.2A CN103461140B (zh) 2013-09-27 2013-09-27 菲油果的茎尖离体快速培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103461140A true CN103461140A (zh) 2013-12-25
CN103461140B CN103461140B (zh) 2015-05-06

Family

ID=49786385

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310450183.2A Expired - Fee Related CN103461140B (zh) 2013-09-27 2013-09-27 菲油果的茎尖离体快速培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103461140B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110679374A (zh) * 2019-10-30 2020-01-14 杭州树联园艺科技有限公司 一种菲油果幼苗培育方法
CN112997882A (zh) * 2021-03-05 2021-06-22 美尚生态景观股份有限公司 一种抑制菲油果外植体褐变和污染的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101331853A (zh) * 2008-08-05 2008-12-31 山东省林业科学研究院 邓恩桉组培快繁的生根方法
CN102499090A (zh) * 2011-11-07 2012-06-20 上海旭东园艺有限公司 十二卷类多肉植物的离体培养方法
WO2013027223A2 (en) * 2011-08-23 2013-02-28 Evogene Ltd. Isolated polynucleotides and polypeptides, and methods of using same for increasing plant yield and/or agricultural characteristics

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101331853A (zh) * 2008-08-05 2008-12-31 山东省林业科学研究院 邓恩桉组培快繁的生根方法
WO2013027223A2 (en) * 2011-08-23 2013-02-28 Evogene Ltd. Isolated polynucleotides and polypeptides, and methods of using same for increasing plant yield and/or agricultural characteristics
CN102499090A (zh) * 2011-11-07 2012-06-20 上海旭东园艺有限公司 十二卷类多肉植物的离体培养方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GIL S. CRUZ ETAL: "SOMATIC EMBRYOGENESIS AND PLANT REGENERATION FROM ZYGOTIC EMBRYOS OF FEIJOA SELLOWIANA BERG", 《PLANT SAENCE》, vol. 66, 31 December 1990 (1990-12-31), pages 263 - 270 *
曾艳玲等: "菲油果离体快繁再生无菌植株研究", 《经济林研究》, vol. 30, no. 4, 31 December 2012 (2012-12-31) *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110679374A (zh) * 2019-10-30 2020-01-14 杭州树联园艺科技有限公司 一种菲油果幼苗培育方法
CN112997882A (zh) * 2021-03-05 2021-06-22 美尚生态景观股份有限公司 一种抑制菲油果外植体褐变和污染的方法
CN112997882B (zh) * 2021-03-05 2023-02-14 美尚生态景观股份有限公司 一种抑制菲油果外植体褐变和污染的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN103461140B (zh) 2015-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103348920B (zh) 一种奇楠沉香优质种苗快速繁殖方法
CN104041273A (zh) 一种中药材甜叶菊的盆栽驯化方法
CN104186190A (zh) 果树杂交种子快速成苗方法
CN104885773A (zh) 一种快速培育蓝莓早期定型组培商品苗的方法
CN103931497A (zh) 一种提高火龙果组培苗成苗率的方法
CN103704130A (zh) 一种春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法
CN102823502A (zh) 毛葡萄离体快速繁殖培养方法
CN104823860A (zh) 一种藤本月季的组培快繁方法
CN106332716A (zh) 香樟树的扦插方法
CN105532400A (zh) 一种梨树扦插育苗方法
CN103385118A (zh) 一种星油藤的嫁接繁育方法
CN107079817A (zh) 兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法
CN103703997B (zh) 一种提高桉树扦插生根率及穂条利用率的繁殖方法
CN103583360A (zh) 一种定向诱导提高六道木苗木耐盐性的方法
CN103229651A (zh) 光皮桦嫩枝扦插繁殖方法
Singh et al. Identification of the suitable hardening protocol and hardening medium in micropropagation of gerbera (Gerbera jamesonii Bolus)
CN104429486A (zh) 加工番茄未成熟种子培养成苗的方法
CN104604518A (zh) 一种菜用枸杞的日光温室栽培方法
CN104351000A (zh) 一种柚类杂种的培育方法
CN105660391A (zh) 一种苹果树苗组织培养繁育方法
CN103461140B (zh) 菲油果的茎尖离体快速培养方法
CN103703998B (zh) 一种提高相思扦插生根率及穂条利用率的繁殖方法
CN103039362A (zh) 油茶组培苗繁殖用继代培养基及其繁殖方法
CN103039363A (zh) 油茶组培苗繁殖用生根培养基及其繁殖方法
CN101836559B (zh) 蔬菜作物茎尖移接方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150506

Termination date: 20160927