CN104186190A - 果树杂交种子快速成苗方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种育苗方法，特别是涉及一种果树杂交种子快速成苗方法。果树杂交种子快速成苗方法，果实采收后，去除果肉取出无壳种子，置于培养皿内，倒入20℃至25℃的无菌水，浸泡时间为24～36小时；然后去除种皮，去除种皮后的种子使用0.08-0.12%高锰酸钾溶液消毒25-35秒，经过无菌水清洗后，得破休眠的种子，将破休眠的种子置于盛有无菌水的容器内待播种；将破休眠的种子播入浇透水的基质中，置于人工气候室内进行培养；待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，进行控水处理，之后移栽至营养钵或田间进行生长。本发明缩短了种子发育时期和提高了杂交种子出苗率。

Description

果树杂交种子快速成苗方法

技术领域

本发明涉及一种育苗方法，特别是涉及一种果树杂交种子快速成苗方法，它是一种高效成苗方法。

背景技术

目前，在果树的杂交育种过程中，杂交种子因存在不同程度的休眠而不能立即播种，通常采用传统的埋土沙藏技术使其度过休眠，于笠年春季进行播种使其萌发，导致杂交种子从采收到播种需要等待6-10个月的时间，对于有3至7年童期的果树，这6-10个月对于落叶果树而言相当于一个生长季，如能缩短1/3至1/7的时间，提前进入结果状态，这对加速果树新品种选育进程具有重要意义。利用传统的沙藏技术，种子受到外部坚硬壳及致密种皮以及收藏过程中因湿度过大、透气性不佳和种子受污腐烂等多因素影响，导致杂交种子萌发率和出苗率低，出苗不整齐，沙藏技术虽能打破种子的休眠，但仍无法缩短休眠时间，且耗时耗力。过去许多科研工作人员曾使用外源植物激素，例如采用赤霉素对果树杂交种子进行处理，希望通过激素处理杂交种子，打破种子休眠进而实现缩短育种时间，提高育种效率。但由于果树种类繁多，并且同一类果树的杂交种子个体差异大、感受外源激素的能力存在差异，所以施用外源植物激素的浓度、剂量、处理时间不容易把握，效果欠佳，并且破除休眠后的种子因受到外源过多或过少的外源激素影响，种子萌发过程中常出现早衰、畸形等问题，导致出苗率低、成苗率差、幼苗质量不佳等结果。综上，缩短童期和提高杂交种子出苗率成为果树育种工作需要克服的难题，所以，对于果树育种事业而言，找到一种破除休眠，加快种子生长发育和提高杂交种子出苗率的实用方法刻不容缓。

发明内容

本发明就是为了解决上述技术问题，而提供了一种果树杂交种子快速成苗方法，本发明解决了果树杂交种子需等待6-10个月才可以萌发的现状，大大缩短了果树杂交种子自收获起到种子萌芽之间的时间，而且能提高果树杂交种子的萌发率和出苗率。

为了解决上述技术问题，本发明是通过下述技术方案实现的：

果树杂交种子快速成苗方法，其步骤如下：果实采收后，去除果肉取出无壳种子，置于培养皿内，倒入20℃至25℃无菌水至覆盖种子90%体积处，浸泡时间为24～36小时；然后去除种皮，去除种皮后的种子使用0.08-0.12%高锰酸钾溶液消毒25-35秒，经过无菌水清洗后，得破休眠的种子，播种。

上述的果实采收后，去除果肉取出无壳种子，具体是核果类果树杂交果实夏季采收后，经去除果肉，清洗，取出种核，去除导致种子休眠的外部物理屏障，采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，取出的无壳种子。

上述的倒入20℃至25℃无菌水至覆盖种子90%体积处，浸泡时间为30小时。

上述的去除种皮后的种子使用0.1%高锰酸钾溶液消毒30秒。

 上述的播种是将破休眠的种子置于盛有无菌水的容器内待播种；将破休眠的种子播入浇透水的基质中，置于人工气候室内进行培养；待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，进行控水处理，之后移栽至营养钵或田间进行生长。

 上述的基质为苔藓、草炭、营养土或Jiffy-7育苗块。

上述的浇透水的基质是于播种前30分钟用无菌水浇透苔藓、草炭、营养土或浸泡育苗块至膨胀。

上述的人工气候室参数设置为核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度。

上述的人工气候室参数设置为仁果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为30℃；黑暗8小时，温度设置为20℃，两段温度处理均保持75%湿度。

上述的幼苗移栽标准为待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，温度大于15℃，营养钵或田间的营养土各原料及质量比为田间土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

采用上述技术方案，核果类果树种子从播种到发芽的培养时间5-15天，种子出苗整齐并且均发育正常，可实现杂交种子当年采收当年播种并获得杂交苗。该技术能大大缩短核果类果树杂交种子自收获至发芽之间的时间，明显提高核果类果树杂交种子的萌发率和成苗率；仁果类果树种子的培养时间20-26天，种子出苗整齐并且均发育正常，可实现杂交种子当年采收当年播种并获得杂交苗。该技术能大大缩短核果类果树杂交种子自收获至发芽之间的时间，明显提高核果类果树杂交种子的萌发率和成苗率。

由于采用上述技术方案，使得本发明具有如下优点及效果：

1.快速、彻底打破休眠：本发明方法不使用任何化学药品及植物外源激素处理，仅采用物理方式将长达4-5个月休眠期缩短到数小时，杜绝了传统方式（如沙藏）处理过程中因细菌、湿度、空气等因素造成的种子腐烂、失去生活力。本发明确保了种子自身安全，并且不受种子内外部不良因素的影响；

2.有效提高杂交种子成苗率：由于种子在无菌培养基质和最适宜的温度、湿度、光照条件下培养，种子处于最佳生长状态，可以避免外界不良环境因素的干扰，从而极大提高了种子成苗率；

3.可对果树未成熟果实种子提前培养：对于核果类果树晚熟品种及仁果类果树而言，果实发育期较长，果实成熟时外部气候环境已不适合幼苗生长，采用本发明方法科提前1-3个月取未成熟果实的种子加以培养，延长幼苗生长期。 

本发明不施用任何外源植物激素对杂交种子进行处理，采用破除物理屏障办法，解决果树杂交种子休眠问题。适用成熟和未成熟果实的种子，尤其对成熟期较晚的果树，例如李、苹果和梨。在果实成熟前1-3个月取出种子进行培养，实现最大程度延长幼苗生长时间，确保在冬季落叶之前达到最大的生长量，实现当年采种当年萌芽生长。配合温度、光照和湿度科学控制，促进果树杂交种子在最适条件下生长，实现快速成苗目的。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。以下实施例仅为本发明的具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。

实施例1

桃：本试验于2013年-2014年进行，设3个处理，即本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素（GA3）浸种5分钟，对核果类果树和仁果类果树不同树种的种子进行发芽及幼苗培养试验，试验过程及结果如下：

采用‘山桃’为供试品种，共计300粒‘山桃’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于7月17日同期进行，7月18日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。

一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子： 山桃果实7月17日采收，经去除果肉，清洗步骤，取出种核；

采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，采用这种办法可以确保种核内种子无任何损伤，取出的无壳种子，置于培养皿内，倒入23℃无菌水至覆盖种子90%体积处，浸泡时间为24小时，确保种子可以吸饱水，去除种皮（用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮）；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.1%高锰酸钾溶液消毒30秒，经过无菌水反复清洗5次，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

   播种：播种所采用的材料为普通基质草炭，于播种前30分钟用无菌水浇透草炭，将破休眠的种子播入基质草炭中，置于人工气候室内进行培养；

   人工气候室参数设置：核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗（无光照）8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度；经7-9天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在第8至第9天，发芽整齐， 100粒种子中有91粒出苗，出苗率为91%，此后继续培养，经13天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为0株，得苗率91%；

幼苗移栽标准：待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

   播种后在人工气候室培养，种子从7月17日采收至发芽时间约10天。

二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后于室温下（25℃±5℃，湿度30%-70%）在育苗营养土上培养，育苗营养土所用原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5，播种约9-12天种子发芽，但发芽时间参差不齐，从第9天至第12天陆续出苗，100粒种子中有69粒种子出苗，出苗率为69%，此后继续培养，经12-16天幼苗高度达到5cm，原发芽的69棵幼苗在培养过程中有13棵受细菌感染或其他原因而死亡，31棵叶片或生长点畸形，最终剩25棵正常生长，得苗率25%。种子7月17日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约13天。

三、采用沙藏技术处理后于室温下（25℃±5℃，湿度30%-70%）在育苗营养土上培养，育苗营养土所用原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5，播种后月6-9天出苗，种子发芽时间多集中在第8至第9天，100粒种子中有49粒出苗，出苗率为49%，此后继续培养，经17天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为7株，得苗率42%。 种子7月17日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于240天。

实施例2

   李：本试验采用欧洲李品种‘斯坦雷’为供试品种。共计300粒‘斯坦雷’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于9月2日同期进行，9月3日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。试验过程及结果如下：

一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘斯坦雷’果实9月2日采收，经去除果肉，清洗步骤，取出种核；

采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，采用这种办法可以确保种核内种子无任何损伤，取出的无壳种子，置于培养皿内，倒入25℃无菌水至覆盖种子95%体积处，浸泡时间为28小时，确保种子可以吸饱水，去除种皮（用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮）；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.08%高锰酸钾溶液消毒35秒，经过无菌水反复清洗7次，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料Jiffy-7育苗块，挪威进口，于播种前30分钟用无菌水浸泡营养块至膨胀，将破休眠的种子播入育苗块中，置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗（无光照）8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度；经11-13天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在第10至第11天，发芽整齐， 100颗种子中有98颗出苗，出苗率为98%，此后继续培养，经20天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡1株，得苗率97%；

幼苗移栽标准：待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

播种后在人工气候室培养，种子9月2日采收，采收至发芽时间约14天。

二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约12-14天种子发芽，但发芽时间参差不齐，从第12天至第14天陆续出苗，100颗种子中有41颗种子出苗，出苗率为41%，此后继续培养，经13-16天幼苗高度达到5cm，原发芽的41株幼苗在培养过程中有8棵受细菌感染或其他原因而死亡，7棵叶片或生长点畸形，最终剩26棵正常生长，得苗率26%。种子9月2日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约15天。

三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月6-9天出苗，种子发芽时间多集中在第8至第9天，100颗种子中有7颗出苗，出苗率为7%，此后继续培养，经16天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为2株，得苗率5%。 种子9月2日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于190天。

实施例3

杏：本试验采用采用‘露仁杏’（种壳发育不完全，沙藏过程中种子极易腐烂）为供试品种。共计300粒‘露仁杏’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于7月7日同期进行，7月8日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。试验过程及结果如下：

一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘露仁杏’果实7月7日采收，经去除果肉，清洗步骤，取出种核；

采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，采用这种办法可以确保种核内种子无任何损伤，取出的无壳种子，置于培养皿内，倒入22℃无菌水至覆盖种子85%体积处，浸泡时间为36小时，确保种子可以吸饱水，去除种皮（用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮）；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.12高锰酸钾溶液消毒25秒，经过无菌水反复清洗6次，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料为普通基质营养土，于播种前25分钟用无菌水浇透营养土，将破休眠的种子播入基质营养土中，置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗（无光照）8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度；经7-9天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在第8至第9天，发芽整齐， 100颗种子中有99颗出苗，出苗率为99%，此后继续培养，经12天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡0株，得苗率99%；

幼苗移栽标准：待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

播种后在人工气候室培养，种子7月7日采收，采收至发芽时间约10天。

二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约8-10天种子发芽，但发芽时间参差不齐，从第8天至第10天陆续出苗，100粒种子中有78颗种子出苗，出苗率为78%，此后继续培养，经13-15天幼苗高度达到5cm，原发芽的78株幼苗在培养过程中有13株在后期培养中因受细菌感染或其他原因而死亡，23棵叶片或生长点畸形，最终剩42棵正常生长，得苗率42%。种子7月7日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约11天。

三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月7-9天出苗，种子发芽时间多集中在第8至第9天，100粒种子中有3颗出苗，出苗率为3%，此后继续培养，经16天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为1株，得苗率2%。种子7月7日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于270天。

实施例4

李杏杂交种  采用‘红梅杏’为供试品种。共计300粒‘红梅杏’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于8月3日同期进行，8月4日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。试验过程及结果如下：

一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘红梅杏’果实8月3日采收，经去除果肉，清洗步骤，取出种核；

采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，采用这种办法可以确保种核内种子无任何损伤，取出的无壳种子，置于培养皿内，倒入20℃无菌水至覆盖种子91%体积处，浸泡时间为32小时，确保种子可以吸饱水，去除种皮（用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮）；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.11高锰酸钾溶液消毒28秒，经过无菌水反复清洗3次，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料为普通基质苔藓、于播种前25分钟用无菌浇透基质苔藓将破休眠的种子播入基质中置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗（无光照）8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度；经15-18天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在13天以后，发芽整齐度一般， 100颗种子中有71颗出苗，出苗率为71%，此后继续培养，经11天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡0株，得苗率71%；

幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

播种后在人工气候室培养，种子8月3日采收，采收至发芽时间约19天。

二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约15-20天种子发芽，发芽时间参差不齐，从第11天至第20天陆续出苗，100粒种子中有29颗种子出苗，出苗率为7%，此后继续培养，经13天幼苗高度达到5cm，原发芽的29株幼苗在培养过程中有5株在后期培养中因受细菌感染或其他原因而死亡，11棵叶片或生长点畸形，最终剩13棵正常生长，得苗率13%。种子8月3日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约21天。

三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月13-16天出苗，种子发芽时间多集中在13天以后，100粒种子中有8颗出苗，出苗率为8%，此后继续培养，经16天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为7株，得苗率1%。种子8月3日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于250天。

实施例5

   樱桃  采用‘欧洲酸樱桃’为供试品种。共计300粒‘欧洲酸樱桃’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于6月27日同期进行，6月28日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。试验过程及结果如下：     

      一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘欧洲酸樱桃’果实6月27日采收，经去除果肉，清洗步骤，取出种核；

采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，采用这种办法可以确保种核内种子无任何损伤，取出的无壳种子，置于培养皿内，倒入21℃无菌水至覆盖种子88%体积处，浸泡时间为29小时，确保种子可以吸饱水，去除种皮（用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮）；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.09高锰酸钾溶液消毒33秒，经过无菌水反复清洗8次，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料为苔藓，于播种前32分钟用无菌水浇透苔藓，将破休眠的种子播入苔藓中，置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗（无光照）8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度，经10-12天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在第11至第12天，发芽整齐度一般， 100颗种子中有53颗出苗，出苗率为53%，此后继续培养，经14天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡1株，得苗率52%； 

待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

播种后在人工气候室培养，种子6月28日采收，采收至发芽时间约13天。

二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约10-14天种子发芽，发芽时间参差不齐，从第11天至第14天陆续出苗，100粒种子中有35颗种子出苗，出苗率为35%，此后继续培养，经17天幼苗高度达到5cm，原发芽的35株幼苗在培养过程中有1株在后期培养中因受细菌感染或其他原因而死亡，17棵叶片或生长点畸形，最终剩17棵正常生长，得苗率17%。种子6月28日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约15天。

三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月10-14天出苗，种子发芽时间多集中在12天以后，100粒种子中有28颗出苗，出苗率为28%，此后继续培养，经15天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为8株，得苗率20%。种子6月28日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于280天。

   实施例6

  苹果：采用‘富士’为供试品种（未成熟果实的种子）。共计300粒‘富士’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于7月30日同期进行，8月1日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。

      试验过程及结果如下：

一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘富士’果实7月30日采收，经去除果肉，取出种子；

种子置于培养皿内，倒入20℃至25℃无菌水至覆盖种子90%体积处，浸泡时间为24～36小时，确保种子可以吸饱水；

去除种皮：用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.1%高锰酸钾溶液消毒30秒，经过无菌水反复清洗，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料为营养土，于播种前30分钟用无菌水浇透营养土，将破休眠的种子播入营养土内，置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：仁果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为30℃；黑暗8小时，温度设置为20℃，两段温度处理均保持75%湿度；经18-22天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在20天以后，发芽整齐， 100颗种子中有91颗出苗，出苗率为91%，此后继续培养，经30天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡6株，得苗率85%；

待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

   播种后在人工气候室培养，种子7月30日采收，采收至发芽时间约23天。

   二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约20-26天种子发芽，发芽时间参差不齐，从第20天至第26天陆续出苗，100粒种子中有83颗种子出苗，出苗率为83%，此后继续培养，经35天幼苗高度达到5cm，原发芽的83株幼苗在培养过程中有12株在后期培养中因受细菌感染或其他原因而死亡，47棵叶片或生长点畸形，最终剩24棵正常生长，得苗率24%。种子7月30日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约27-30天。

   三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月17-22天出苗，种子发芽时间多集中在18天以后，100粒种子中有57颗出苗，出苗率为37%，此后继续培养，经27天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为19株，得苗率16%。种子7月30日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于250天。

   实施例7

   梨：用‘花盖梨’为供试品种（未成熟果实的种子）。共计300粒‘花盖梨’种子分成3组，每100粒种子分别采用本发明方法、沙藏技术和0.1%赤霉素浸种方法进行处理，其中本发明方法和沙藏技术处理于7月26日同期进行，7月27日播种，沙藏处理于2013年11月进行，2014年4月14日播种。

      试验过程及结果如下： 

      一、本发明快速成苗方法如下：

获得种子：‘花盖梨’果实7月26日采收，经去除果肉，取出种子；

种子置于培养皿内，倒入23℃无菌水至覆盖种子93%体积处，浸泡时间为33小时，确保种子可以吸饱水；

去除种皮：用小镊子或指甲从种子基部着手，逐渐剥去全部种皮；

种子消毒处理：将去除种皮的种子使用0.1%高锰酸钾溶液消毒29秒，经过无菌水反复清洗，得破休眠的种子，置于盛有无菌水的容器内待播种；

播种：播种所采用的材料为营养土，于播种前28分钟用无菌水浇透营养土，将破休眠的种子播入营养土内，置于人工气候室内进行培养；

人工气候室参数设置：仁果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为30℃；黑暗8小时，温度设置为20℃，两段温度处理均保持75%湿度经20-24天种子发芽，子叶露出培养基质，种子发芽时间多集中在21天以后，发芽不整齐， 100颗种子中有83颗出苗，出苗率为83%，此后继续培养，经35天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡11株，得苗率72%；

   待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，营养钵或田间的营养土的原料及质量比为土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。

   播种后在人工气候室培养，种子7月26日采收，采收至发芽时间约25天。

   二、采用0.1%赤霉素浸种5分钟后播种（播种条件同桃），播种约23-28天种子发芽，发芽时间参差不齐，从第23天至第29天陆续出苗，100粒种子中有71颗种子出苗，出苗率为71%，此后继续培养，经37天幼苗高度达到5cm，原发芽的71株幼苗在培养过程中有8株在后期培养中因受细菌感染或其他原因而死亡，46棵叶片或生长点畸形，最终剩16棵正常生长，得苗率16%。种子7月26日采收，之后立即处理，所以采收至发芽时间约30天。

   三、采用沙藏技术处理播种（播种条件同桃），播种后月22-26天出苗，种子发芽时间多集中在23天以后，100粒种子中有37颗出苗，出苗率为37%，此后继续培养，经35天后幼苗高度达到5cm，培养期间死亡率为14株，得苗率23%。种子7月26日采收，之后4℃冷藏保鲜，11月沙藏，次年4月播种，所以从采收至发芽时间大于255天。

   以上试验结果表明：

   （1）在采用同一批种子作为试材的情况下，从核果类果树种子的发芽时间、出苗率以及得苗率来看，发明技术远好于常规沙藏技术和赤霉素浸泡处理，将核果类果树的发芽时间（从种子采收到发芽所需时间）由190天-280天缩短为7-18天，发芽的时间最短为桃和杏，仅7-9天，李杏杂种的发芽时间相对较长，为15-18天，而仁果类果树的发芽时间由255天缩短至20-22天，结果表明本发明方法极大地缩短了果树种子发芽时间，能实现种子当年采收当年播种当年发芽和生长。赤霉素处理虽也能打破种子休眠，实现种子当年播种当年生长，但出苗率不及本发明方法，且种子易受药剂影响而出现高比例的畸形苗。

   （2） 在采用同一批种子作为试材的情况下， 核果类果树的最终得苗率由1%增加至97%，仁果类果树的最终得苗率由57%增加至85%，结果表明本发明方法能大大提高果树种子的出苗率，尤其对于欧洲李（六倍体李，种壳致密、厚度大，种子破壳出苗阻力大，不易出苗）、露仁杏（种壳发育不完全，种仁在沙藏过程中极易腐烂，出苗率低）和李杏杂交种（受远缘杂交不亲和的影响，种子发育不完全或不饱满，不易出苗）等用常规沙藏技术处理很难出苗或出苗率极低的树种，能有效解决出苗率问题。

   （3）采用本发明方法培养果树种子，培养过程中幼苗死亡率低于与常规沙藏技术和赤霉素处理后在室温下培养的死亡率，明显提高幼苗成活率。

   （4）从仁果类果树种子的发芽试验可知，本试验技术可以实现未成熟果实中的种子正常发芽。 

Claims (10)

1.果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于步骤如下：果实采收后，去除果肉取出无壳种子，置于培养皿内，倒入20℃至25℃的无菌水，浸泡时间为24～36小时；然后去除种皮，去除种皮后的种子使用0.08-0.12%高锰酸钾溶液消毒25-35秒，经过无菌水清洗后，得破休眠的种子，播种。

2.根据权利要求1所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的果实采收后，去除果肉取出无壳种子步骤具体是核果类果树杂交果实夏季采收后，经去除果肉，清洗，取出种核，去除导致种子休眠的外部物理屏障，采用机械旋转挤压方式将核果类果树杂交种子外壳挤压至开裂，取出的无壳种子。

3.根据权利要求1所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的倒入20℃至25℃无菌水至覆盖种子90%体积处，浸泡时间为30小时。

4.根据权利要求1所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的去除种皮后的种子使用0.1%高锰酸钾溶液消毒30秒。

5.根据权利要求1所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的播种是将破休眠的种子置于盛有无菌水的容器内待播种；将破休眠的种子播入浇透水的基质中，置于人工气候室内进行培养；待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，进行控水处理，之后移栽至营养钵或田间进行生长。

6.根据权利要求5所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的基质为苔藓、草炭、营养土或Jiffy-7育苗块。

7.根据权利要求5所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的浇透水的基质是于播种前30分钟用无菌水浇透苔藓、草炭、营养土或浸泡育苗块至膨胀。

8.根据权利要求5所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的人工气候室参数设置为核果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照的具体参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为25℃；黑暗8小时，温度设置为15℃，两段温度处理均保持75%湿度。

9.根据权利要求5所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的人工气候室参数设置为仁果类果树杂交种子最适合萌发的温度、湿度、光照参数设置如下：光强7级，光照16小时，温度设置为30℃；黑暗8小时，温度设置为20℃，两段温度处理均保持75%湿度。

10.根据权利要求5所述的果树杂交种子快速成苗方法，其特征在于所述的幼苗移栽标准为待幼苗长出第5-6片真叶后，移出人工气候室，在室温下培养2-3天，适当控水处理，之后可移栽至营养钵或田间进行生长，温度大于15℃，营养钵或田间的营养土各原料及质量比为田间土：草炭：鸡粪=5:2:0.5。