CN103421092A - 一种阿托西班的纯化方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种阿托西班的纯化方法，其特征包括以下步骤：步骤1，将阿托西班粗品用水溶解，调节pH到酸性；步骤2，按体积分数设置梯度，使用流动相A冲洗交换柱；步骤3，将步骤1溶液载入交换柱中；步骤4，按体积分数设置梯度，流动相由100％A，转换至100％B，收集全部洗脱馏分；步骤5，将洗脱馏分经过干燥得到纯品阿托西班。

Description

一种阿托西班的纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种多肽类药物的纯化方法，特别涉及一种催产素竞争性拮抗剂阿托西班的纯化方法。
背景技术：
阿托西班，英名为：Atosiban，为一种环状多肽，结构式如下：
Figure BDA0000377953460000011
化学式如下：
c[Mpa-D-Tyr(OEt)-Ile-Thr-Asn-Cys]-Pro-Orn-Gly-NH2，
阿托西班是子宫内及蜕膜、胎膜上受体的环状肽催产素竞争性拮抗剂，用于推迟不足月分娩。阿托西班可剂量相关性地抑制宫缩，并使环状肽催产素介导的前列腺素分泌减少，达到保胎的目的，在中国，年出生率为2000万，按目前临床统计数字，约5-15％的孕妇需要进行保胎治疗，按平均10％计，病人数量约为200万。
阿托西班的制备方法很多，如固相合成法是用氨基树脂与氨基酸羧基形成氨基酸的树脂复合物，然后依次将下一个氨基酸连接到前一个氨基酸上，制备成线性多肽，再通过环化，裂解，纯化得到阿托西班。有关阿托西班的纯化方法也很多，专利文献有：US20060148699A1，WO2006098707A，WO2011018745A1，CN102584953A，
现有技术中的纯化方法主要采用色谱柱分离纯化，如反相高效液相色谱法，HPLC色谱和离子交换色谱结合的方法等，中国专利(申请号：201210028890)公开了以三价铁离子盐作为还原剂对阿托西班粗肽溶液进行处理，除去其中的未氧化完全的杂质，之后利用高效液相色谱法纯化阿托西班粗肽溶液，然后利用反相高效液相色谱将纯化制得的阿托西班高氯酸盐转盐制得阿托西班纯品。
现有阿托西班的固相合成过程中，由于合成步骤较多，加入的原料数量较多，造成产物杂质种类比较多，已知的杂质包括：[Gly9-OH]-阿托西班、[Asp5-OH]-阿托西班、[D-Asn5]-阿托西班等，未知杂质还有很多。有关杂质中[Gly9-OH]-阿托西班，结构如下：
Figure BDA0000377953460000021
该杂质为毒性最大的杂质之一，而且极其不稳定，易变色，该杂质的存在严重影响阿托西班的色泽，含量以及使用安全。因此需要找到有效的方法将其去除并使其达到优质标准级别0.1%以下。本发明人研究发现，该杂质用现有技术的手段很难除去，有些方法虽可以去除部分，但去除效果不理想，难以达到优质标准级别同时容易造成阿托西班本身收率降低。为此，本发明人重点研究如何去除杂质[Gly9-OH]-阿托西班而不影响阿托西班的收率问题。
本发明人用现有的纯化方法，对用固相合成法制备的阿托西班进行了纯化，发现杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量均无法达到预订目标0.1%。为此，本发明人对阿托西班的纯化方法进行了研究，从而得到了本发明的技术方案。
发明内容：
本发明的目的是提供一种高收率、高纯度以及低杂质的阿托西班的纯化方法。本发明需要解决的技术问题是：选择一种阿托西班的纯化方法，解决(1)阿托西班成品纯度不高，(2)阿托西班成品收率不高，(3)阿托西班与杂质[Gly9-OH]-阿托西班不能有效分离的问题。
本发明中一些常用的缩写及术语具有以下含义；
Fmoc：芴甲氧羰基
Fmoc-AA：芴甲氧羰基保护的氨基酸
tBu：叔丁基
HoBt：1-羟基苯骈三唑
DIC：N，N′-二异丙基碳化二亚胺
MPa：巯基丙酸
D-Tyr(Et)：D-型的酪氨酸链用乙基保护
Ile：异亮氨酸
Thr：苏氨酸
Asn：天门冬酰胺
Cys：半胱氨酸
Pro：脯氨酸
Orn：鸟氨酸
Gly：甘氨酸
Trt：三苯甲基
Et：乙基
Boc：叔丁氧羰基
DMF：N，N′-二甲基甲酰胺
Piperidine：六氢吡啶
Fmoc-Rink Amide Am resin：用Fmoc保护的Rink氨甲基树脂
TFA：三氟醋酸
TIS：三异丙基硅烷
MeOH：甲醇
DCM：二氯甲烷
PEG8000：聚乙二醇8000
Tris–HCl：三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐
HEPES：4-羟乙基哌嗪乙磺酸
Kniser test检测试剂为：茚三酮
本发明的技术方案为：
使用阳离子交换色谱法可以使阿托西班与杂质[Gly9-OH]-阿托西班得到有效分离。
为此本发明提供一种阿托西班的纯化方法，其特征在于，步骤如下：
步骤1，将阿托西班粗品用水溶解，调节pH到酸性。
步骤2，按体积分数设置梯度，使用流动相A冲洗交换柱；
步骤3，将步骤1溶液载入交换柱中；
步骤4，按体积分数设置梯度，流动相由100％A，转换至100％B，收集35-45min洗脱馏分。
步骤5，将洗脱馏分经过干燥得到纯品阿托西班。
其中的分离条件如下：
阳离子交换柱(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；
流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;
流动相B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；
梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
优选的操作步骤如下：
步骤1，样品处理：
将2g阿托西班粗肽溶解于1000ml纯净水中，使用醋酸调节pH为3.4。
步骤2，平衡
按体积分数设置梯度，使用100%的流动相A冲洗交换柱10min；
步骤3，上样
将样品溶液载入交换柱中；
步骤4，洗脱
按体积分数设置梯度，流动相由100％A，60min内转换至100％B，分部收集洗脱馏分。
步骤5，冻干
将洗脱馏分经过冻干得到纯品阿托西班。
以下通过实验数据进一步说明本发明的有益效果：
采用中国专利102584953A的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.23%
采用中国专利102146121A的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.25%
采用中国专利101696236B的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.24%
采用中国专利101981048A的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.27%
采用本发明的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.02%
本发明的方法是经过筛选获得的，筛选过程如下：
1、阳离子交换树脂的选择：
UniSP-10；UniCM-10
2、流动相的选择：
醋酸铵水/乙腈；磷酸二氢铵/乙腈
3、梯度洗脱程序的选择：
梯度程序为:100％A，40min内至100％B;梯度程序为:100％A，60min内至100％B
为此提出了6种实验条件：
实验条件1：阳离子交换柱(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
实验条件2：阳离子交换柱(UniCM-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L醋酸铵溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L醋酸铵溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
实验条件3：阳离子交换柱(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L磷酸二氢铵溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L磷酸二氢铵溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
实验条件4：阳离子交换柱(UniCM-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L磷酸二氢铵溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L磷酸二氢铵溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
实验条件5：阳离子交换柱(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，40min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
实验条件6：阳离子交换柱(UniCM-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L醋酸铵溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L醋酸铵溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，40min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm；
采用实验条件1的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.02%
采用实验条件2的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.06%
采用实验条件3的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.03%
采用实验条件4的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.04%
采用实验条件5的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.05%
采用实验条件6的方法纯化粗品阿托西班，测定杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量如下：0.03%
以上结果表明，实验条件1的纯化效果最优。
本发明方法得到的阿托西班40℃恒温箱放置，观察外观及性状，检测有关物质，试验结果如下
时间，天 外观、性状 有关物质
0 为白色粉末 未见杂质斑点
10 为白色粉末 未见杂质斑点
30 为白色粉末 未见杂质斑点
60 为白色粉末 未见杂质斑点
90 为白色粉末 未见杂质斑点
现有技术得到的阿托西班40℃恒温箱放置，观察外观及性状，检测有关物质，试验结果如下
时间，天 外观、性状 有关物质
0 为白色粉末 未见杂质斑点
10 为白色粉末 未见杂质斑点
30 为白色粉末 未见杂质斑点
60 为白色粉末 未见杂质斑点
90 为浅黄色粉末 可见杂质斑点
本发明的有益效果是：提供了一种高纯度（99.5%）、高收率（70%—80%）以及低杂质（[Gly9-OH]-阿托西班含量小于0.1%）的阿托西班纯化方法。
附图说明
图1纯化前的阿托西班峰
色谱柱：用Inertsil ODS-2,(5μm)(250×4.6mm)或相当柱；
流动相A为乙腈－甲醇－溶液I（15：10：75），流动相B为乙腈－甲醇（60：40）；流速为1.2ml/min；检测波长为220nm；柱温60℃。洗脱梯度的初始状态为100％的流动相A，保持15分钟，然后在10分钟内将流动相B增至18％，再在5分钟内将流动相B增至38％，保持5分钟。
图2纯化后的阿托西班峰
色谱柱：用Inertsil ODS-2,(5μm)(250×4.6mm)或相当柱；
流动相A为乙腈－甲醇－溶液I（15：10：75），流动相B为乙腈－甲醇（60：40）；流速为1.2ml/min；检测波长为220nm；柱温60℃。洗脱梯度的初始状态为100％的流动相A，保持15分钟，然后在10分钟内将流动相B增至18％，再在5分钟内将流动相B增至38％，保持5分钟。
图3阿托西班对照品峰
色谱柱：用Inertsil ODS-2,(5μm)(250×4.6mm)或相当柱；
流动相A为乙腈－甲醇－溶液I（15：10：75），流动相B为乙腈－甲醇（60：40）；流速为1.2ml/min；检测波长为220nm；柱温60℃。洗脱梯度的初始状态为100％的流动相A，保持15分钟，然后在10分钟内将流动相B增至18％，再在5分钟内将流动相B增至38％，保持5分钟。
具体实施方式：
实施例1：
阿托西班的固相合成：
规模为10mmol的阿托西班合成：
（1）肽树脂反应：将13.89g的Rink amide AM树脂（取代度为0.72mmol/g）用DCM溶胀后，抽去DCM，DMF洗涤3次。加入60-80ml的VPiperidine:VDMF=20:80混合溶液，搅拌反应后抽去，再次加入上述溶液，搅拌反应后抽去，如此进行2次脱保护，去除Fmoc保护基，然后用DMF洗涤5次。将8.92g Fmoc-Gly-OH和4.05g HOBt用溶剂DMF溶解，冰浴冷却温度为0～10℃，加入5ml DIC，激活5分钟后加入到反应柱中与脱完保护的树脂进行反应，25-35℃下反应2小时，取少量树脂使用Kniser test检测为阴性，抽除液体，DMF洗涤3次完成肽树脂反应。
（2）去保护：加入V Piperidine:VDMF=20:80混合溶液，搅拌反应后抽去，再次加入上述混合溶液，搅拌反应后抽去，如此进行2次脱保护，然后用DMF洗涤后，去除Fmoc保护基。
（3）偶联：重复接肽反应步骤及去除Fmoc保护基的操作，按照阿托西班氨基酸序列，依次偶联（Fmoc-Orn(Boc)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-D-Tyr(Et)-OH，Mpa(Trt)-OH。
（4）去除Cys(Trt)保护基：往上述肽树脂加入80-100ml的VTFA:VDCM=0.1:100混合溶液，搅拌反应2小时后抽去，DMF洗涤6次。
（5）氧化：将氧化试剂（3.8g的过氧化尿素加入100ml的DMSO溶解溶液）加入上述肽树脂中，搅拌反应2小时后抽去，DMF洗涤6次。
（6）裂解：将上述肽树脂用100ml DCM溶液洗涤，抽去，再重复一次DCM洗涤；用100ml甲醇溶液洗涤，抽去，再重复一次甲醇洗涤;用100ml DCM溶液洗涤，抽去，再重复一次DCM洗涤；用100ml甲醇溶液洗涤，抽去，再重复一次甲醇洗涤。转出树脂，真空干燥。干燥所得的阿托西班环肽树脂，用V PhSMe:VTFA=5:95裂解液裂解2小时左右后过滤除去树脂，滤液加入到乙醚中，沉降后离心，离心洗涤5次后，真空干燥制得：阿托西班10.12g，纯度：94.22%（图1），合成收率：80.12%。
上述方法得到的阿托西班粗品用以下方法进行纯化。
（1）样品处理：
将固相合成得到的2g阿托西班粗品溶解于1000ml纯净水中，使用醋酸调节pH为3.4。
（2）平衡
使用100%的流动相A冲洗交换柱10min；
（3）上样
使用流动相A管道上样，将样品溶液载入交换柱中；
（4）洗脱
流动相由100％A，60min内转换至100％B，分部收集35-45min洗脱馏分。冻干后得到1.63g，纯度：99.97%（图2）。纯化收率：74.41%。纯化的实验条件：阳离子交换柱(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为230nm；
阿托西班的含量测定方法：
阿托西班的含量=阿托西班对照品含量×阿托西班精肽峰面积/阿托西班对照品峰面积×100%=92.25%×97.307/98.907=90.76%
注：阿托西班对照品和阿托西班精肽的检测条件和进样量一致，都为：25μl。
阿托西班对照品浓度：0.5mg/ml
阿托西班对照品峰面积：98.907mAU*min（图3）
阿托西班对照品含量：92.25%
阿托西班精肽配置浓度：0.5mg/ml
阿托西班精肽峰面积：97.307mAU*min
杂质[Gly9-OH]-阿托西班的含量测定方法：
纯化前[Gly9-OH]-阿托西班的含量=阿托西班对照品含量×[Gly9-OH]-阿托西班峰面积×校正因子/托西班对照品峰面积×100%=92.25%×1.404×1.04/98.907=1.36%
注：阿托西班对照品和阿托西班精肽的检测条件和进样量一致，都为：25μl。校正因子[Gly9-OH]-阿托西班的校正因子＝1.04。
阿托西班对照品浓度：0.5mg/ml
阿托西班对照品峰面积：98.907mAU*min（图3）
阿托西班对照品含量：92.25%
阿托西班精肽配置浓度：0.5mg/ml
[Gly9-OH]-阿托西班峰面积：1.404mAU*min
纯化后[Gly9-OH]-阿托西班的含量=阿托西班对照品含量×[Gly9-OH]-阿托西班峰面积×校正因子/托西班对照品峰面积×100%=92.25%×0.019×1.04/98.907=0.02%
注：阿托西班对照品和阿托西班精肽的检测条件和进样量一致，都为：25μl。校正因子[Gly9-OH]-阿托西班的校正因子＝1.04。
阿托西班对照品浓度：0.5mg/ml
阿托西班对照品峰面积：98.907mAU*min（图3）
阿托西班对照品含量：92.25%
阿托西班精肽配置浓度：0.5mg/ml
[Gly9-OH]-阿托西班峰面积：0.019mAU*min
纯化前和后的阿托西班HPLC杂质分析图谱详见图1和2。（图1为杂质[Gly9-OH]-阿托西班含量大于0.5%的HPLC杂质分析图谱，图2为杂质[Gly9-OH]-阿托西班含量小于0.1%的HPLC杂质分析图谱。）

Claims (2)

1.一种纯化阿托西班的方法，该方法采用阳离子交换色谱法，可使成品阿托西班中的杂质[Gly9-OH]-阿托西班含量降低到0.1%以下，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
步骤1，将阿托西班粗品用水溶解，调节pH到酸性；
步骤2，按体积分数设置梯度，使用流动相A冲洗交换柱；
步骤3，将步骤1溶液载入阳离子交换柱中；
步骤4，按体积分数设置梯度，流动相由100％A，转换至100％B，收集全部洗脱馏分；
步骤5，将洗脱馏分经过干燥得到纯品阿托西班；
其中，
阳离子交换柱为(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；
流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;
流动相B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；
梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：包括以下步骤：
步骤1，样品处理：
将2g结晶后的阿托西班溶解于1000ml纯净水中，使用醋酸调节pH为3.4；
步骤2，平衡
按体积分数设置梯度，使用100%的流动相A冲洗交换柱10min；
步骤3，上样
将样品溶液载入交换柱中；
步骤4，洗脱
按体积分数设置梯度，流动相由100％A，60min内转换至100％B，分部收集洗脱馏分；
步骤5，冻干
将洗脱馏分经过冻干得到纯品阿托西班；
其中，
阳离子交换柱为(UniSP-10，10μm，50mm×250mm)；
流动相：A为10mmol／L醋酸铵水溶液(pH：3.4，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10;
流动相B为100mmol／L醋酸铵水溶液(pH：4.5，醋酸调节其pH值)：乙腈=90：10；
梯度程序为:100％A，60min内至100％B。流速为：80mL／min，检测波长为220nm。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105949283A (zh) * 2016-06-07 2016-09-21 海南合瑞制药股份有限公司 醋酸阿托西班杂质、制备及检测方法
CN106279367A (zh) * 2016-08-15 2017-01-04 海南合瑞制药股份有限公司 一种醋酸阿托西班晶体及其制备方法
WO2020114002A1 (zh) * 2018-12-04 2020-06-11 深圳翰宇药业股份有限公司 一种glp-1类似多肽的纯化方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101696959A (zh) * 2009-02-11 2010-04-21 海南中和药业有限公司 一种醋酸阿托西班及其制剂的含量测定和有关物质测定的方法
CN101981048A (zh) * 2008-02-06 2011-02-23 拜康有限公司 纯化肽的方法
CN102584953A (zh) * 2012-02-09 2012-07-18 深圳翰宇药业股份有限公司 一种阿托西班的纯化方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101981048A (zh) * 2008-02-06 2011-02-23 拜康有限公司 纯化肽的方法
CN101696959A (zh) * 2009-02-11 2010-04-21 海南中和药业有限公司 一种醋酸阿托西班及其制剂的含量测定和有关物质测定的方法
CN102584953A (zh) * 2012-02-09 2012-07-18 深圳翰宇药业股份有限公司 一种阿托西班的纯化方法

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105949283A (zh) * 2016-06-07 2016-09-21 海南合瑞制药股份有限公司 醋酸阿托西班杂质、制备及检测方法
CN106279367A (zh) * 2016-08-15 2017-01-04 海南合瑞制药股份有限公司 一种醋酸阿托西班晶体及其制备方法
CN106279367B (zh) * 2016-08-15 2019-06-04 海南合瑞制药股份有限公司 一种醋酸阿托西班晶体及其制备方法
WO2020114002A1 (zh) * 2018-12-04 2020-06-11 深圳翰宇药业股份有限公司 一种glp-1类似多肽的纯化方法

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