CN103417476A - 兽用孟布酮注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种兽用孟布酮注射液，每100mL由以下组分组成：孟布酮10g，二乙醇胺5.5g，氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠或亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，余量为注射用水；其制备方法是取注射用水45-55mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠或亚硫酸钠，以及依地酸，搅拌使溶解，再加入氯甲酚，50±5℃搅拌使溶解，冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，充氮灌封，灭菌，即得；该注射液处方先进，工艺简便，重复性好，产品质量稳定有效，pH值适宜，可肌内或静脉注射给药，填补了我国兽用利胆药的空白，有助于提高我国兽医用药水平。

Description

兽用孟布酮注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域，涉及一种兽用药物制剂及其制备方法。

背景技术

畜牧业是我国国民经济中的重要产业，是农业的重要组成部分。文献显示，在兽医临床上，猪、羊、牛等动物的消化系统疾病约占临床总发病量的30%，而食欲不振、消化不良、便秘腹胀、胃肠弛缓、瘤胃积食等胃肠功能障碍，几乎在动物的大部分疾病中伴发或继发。动物消化不良可使动物生长发育受阻，生产性能下降甚至死亡，往往造成较大经济损失，妨碍畜牧业发展。目前，对于该类病症，临床上常选用氨甲酰胆碱、氨甲酰甲胆碱、毛果芸香碱、新斯的明等拟胆碱类药物进行治疗，但该类药物存在毒性大、作用强烈、剂量难以把握、选择性差等缺点。

利胆药，是作用于动物消化系统的药物，但在我国出版的兽药方面的权威书籍如中国兽药典（2010年版）、中国兽药典兽药使用指南（化学药品卷）（2010年版）、兽医药理学（陈杖榴主编，第二版）等中，还没有利胆药这一类别，仅在硫酸镁和人工盐中提及“利胆”作用。因此，兽用利胆药在我国还处于空白。

孟布酮（Menbutone），化学名为3-(4'-甲氧基萘甲酰基)丙酸，为白色或类白色结晶性粉末，易溶于丙酮，溶解于三氯甲烷，微溶于甲醇和乙醇，在乙醚中极微溶解，几乎不溶于水，易溶于氢氧化钠溶液。孟布酮是一种动物专用的利胆剂，能够刺激胆汁、胰液和胃液的分泌，增加胆酸盐、胰酶和胃蛋白酶等的分泌量，促进胃肠内食物的消化与吸收，改善和恢复肝脏功能代谢；其作用温和、安全，对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统、泌尿系统、消化系统和生殖系统无明显不良影响，对雌性动物的子宫平滑肌基本无作用，不会引起生殖不利和流产，可用于怀孕动物，在兽医临床上有着广泛的应用前景。目前在欧洲等区域，孟布酮已经用于马、牛、绵羊、山羊、猪和犬的消化不良，食欲不振，厌食症，产后不食，霉变饲料中毒，绞痛，便秘，酮症，毒血症（包括妊娠毒血症），肝脏和胰腺疾病所致消化功能障碍等，但在我国却鲜见报道，也未见进口及有关专利信息。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种适于兽医临床治疗和应用的孟布酮注射液，处方先进，产品质量稳定有效，以填补我国兽用利胆药的空白，提高我国兽医用药水平；目的之二在于提供该孟布酮注射液的制备方法，工艺简便，重复性好，产品质量稳定有效。

为达到上述目的，经研究，本发明提供如下技术方案：

1.兽用孟布酮注射液，每100mL注射液由以下组分组成：孟布酮10g，二乙醇胺5.5g，氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠或亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，余量为注射用水。

优选的，每100mL注射液由以下组分组成：孟布酮10g，二乙醇胺5.5g，氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，余量为注射用水。

上述注射液处方中，孟布酮为主药，二乙醇胺为助溶剂，氯甲酚为抑菌剂，焦亚硫酸钠或亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸为螯合剂。

研究发现，影响兽用孟布酮注射液质量的关键因素是pH值。由于孟布酮不溶于水，处方中需加入碱性助溶剂助溶，从而导致药液pH值大于9。注射剂的pH值要求与血液相等或接近（血液pH7.4），一般控制在4～9范围内以利于临床治疗；且有关资料表明，氯甲酚的抑菌效果受pH值影响较大，溶液pH值在9以上时，氯甲酚就失去抑菌效力。因此，兽用孟布酮注射液的pH值应控制在9以下。进一步试验结果显示，当兽用孟布酮注射液的pH值低于8时，注射液在放置过程中出现浑浊。因此，兽用孟布酮注射液的pH值应控制在8～9范围内。上述注射液处方中二乙醇胺的用量能够保证处方量的孟布酮在较低加热温度、较短加热时间内完全溶解，进而利用处方中螯合剂依地酸的酸性，可直接控制注射液pH值在8～9范围内并维持pH值的稳定，不需额外使用pH调节剂来调节注射液的pH值，处方先进，产品质量稳定有效。

2.兽用孟布酮注射液的制备方法，包括以下步骤：取注射用水45-55mL，加入二乙醇胺5.5g，搅拌混匀，再加入孟布酮10g，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠或亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，搅拌使溶解，再加入氯甲酚0.2g，50±5℃搅拌使溶解，冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，充氮灌封，灭菌，即得。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种适于兽医临床治疗和应用的孟布酮注射液及其制备方法，处方先进，工艺简便，重复性好，产品质量稳定有效，pH值适宜，可肌内或静脉注射给药，填补了我国兽用利胆药的空白，有助于提高我国兽医用药水平。

本发明为“重庆市兽药工程技术研究中心”与“重庆药物过程与质量控制工程技术研究中心”研究项目。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。

实施例中，兽用孟布酮注射液的含量测定方法如下：采用高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以5g/L磷酸溶液与乙腈按体积比1:2组成的混合液为流动相，检测波长为235nm。理论塔板数以孟布酮峰计算不低于2000，孟布酮峰与相邻杂质峰的分离度大于1.5；精密量取兽用孟布酮注射液0.2mL（相当于孟布酮20±2mg），用流动相稀释至100mL，摇匀，精密量取5mL，用流动相稀释至25mL，摇匀，作为供试品溶液；另取孟布酮对照品，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含40±4μg的溶液，作为对照品溶液；精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含孟布酮应为标示量的95.0%～105.0%。

兽用孟布酮注射液的有关物质检查方法如下：采用高效液相色谱法检查，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以5g/L磷酸溶液与乙腈按体积比1:2组成的混合液为流动相，检测波长为235nm；理论塔板数以孟布酮峰计算不低于2000，孟布酮峰与相邻杂质峰的分离度大于1.5；精密量取兽用孟布酮注射液0.5mL（相当于孟布酮50±5mg），用流动相稀释至25mL，摇匀，精密量取5mL，用流动相稀释至50mL，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液2.0mL，用流动相稀释至100mL，摇匀，作为对照溶液；精密量取对照溶液20μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20%～25%；再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（即单个杂质含量不得大于孟布酮含量的1.0%），各杂质峰面积之和不得大于对照溶液的主峰面积（即总杂质含量不得大于孟布酮含量的2.0%），供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.02倍的峰忽略不计。

实施例1、兽用孟布酮注射液的制备

处方：孟布酮10g、二乙醇胺5.5g、氯甲酚0.2g、亚硫酸钠0.2g、依地酸0.2g、注射用水加至100mL。

制备工艺：取注射用水50mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入亚硫酸钠和依地酸，搅拌使溶解，再加入氯甲酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于100mL钠钙玻璃模制注射剂瓶（压入卤化丁基橡胶塞，轧上铝盖）或10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

质量检验：所得兽用孟布酮注射液为微黄色澄明液体；pH值为8.86；孟布酮含量为标示量的99.82%；单个最大杂质含量为0.56%，总杂质含量为0.70%；可见异物和不溶性微粒符合中国兽药典（2010年版）有关规定。

上述处方中，二乙醇胺为助溶剂，氯甲酚为抑菌剂，亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸为螯合剂。试验结果显示，注射用水50mL加入二乙醇胺5.5g，再加入孟布酮10g，50±5℃加热搅拌15分钟，孟布酮即可完全溶解，后续利用螯合剂依地酸的酸性可直接控制注射液的pH在8～9范围内，不需额外加入pH调节剂进行调节。

实施例2、兽用孟布酮注射液的制备

处方：孟布酮10g、二乙醇胺5.5g、氯甲酚0.2g、焦亚硫酸钠0.2g、依地酸0.2g、注射用水加至100mL。

制备工艺：取注射用水50mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠和依地酸，搅拌使溶解，再加入氯甲酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于100mL钠钙玻璃模制注射剂瓶（压入卤化丁基橡胶塞，轧上铝盖）或10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

质量检验：所得兽用孟布酮注射液为微黄色澄明液体；pH值为8.40；孟布酮含量为标示量的99.80%；单个最大杂质含量为0.56%，总杂质含量为0.69%；可见异物和不溶性微粒符合中国兽药典（2010年版）有关规定。

上述处方中，二乙醇胺为助溶剂，氯甲酚为抑菌剂，焦亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸为螯合剂。与实施例1相比，实施例2制得的兽用孟布酮注射液的色泽略浅，相对来说质量更好。与实施例2相比，实施例1处方中使用的抗氧剂亚硫酸钠的价格低于焦亚硫酸钠，相对来说成本更低。

对比实施例1、兽用孟布酮注射液的制备

处方：孟布酮10g、乙醇胺5.5g、氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠0.2g、依地酸二钠0.2g、注射用水加至100mL。

制备工艺：取注射用水50mL，加入乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠和依地酸二钠，搅拌使溶解，再加入氯甲酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于100mL钠钙玻璃模制注射剂瓶（压入卤化丁基橡胶塞，轧上铝盖）或10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

质量检验：所得兽用孟布酮注射液为微黄色澄明液体；pH值为11.34；孟布酮含量为标示量的100.05%；单个最大杂质含量为0.56%，总杂质含量为0.69%；可见异物和不溶性微粒符合中国兽药典（2010年版）有关规定。

上述处方中，乙醇胺为助溶剂，氯甲酚为抑菌剂，焦亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸二钠为螯合剂。试验结果显示，每100mL注射液中加入乙醇胺5.5g，再加入孟布酮10g，孟布酮的溶解非常好，但所得注射液的pH值在11左右，此时氯甲酚已失去抑菌效力。研究中曾尝试逐步递减乙醇胺的用量来控制溶液pH值，通过升高加热温度、延长加热时间的方式使孟布酮完全溶解，但采用该方法将溶液pH值降至9左右时，所得注射液出现浑浊。研究中也曾尝试先用乙醇胺促进孟布酮溶解，再用不同酸回调溶液pH值至8～9，但所得注射液仍然出现浑浊。

对比实施例2、孟布酮注射液的制备

处方：孟布酮10g、二乙醇胺5.5g、苯酚0.2g、亚硫酸钠0.2g、依地酸二钠0.2g、注射用水加至100mL。

制备工艺：取注射用水50mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入亚硫酸钠和依地酸二钠，搅拌使溶解，再加入苯酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于100mL钠钙玻璃模制注射剂瓶（压入卤化丁基橡胶塞，轧上铝盖）或10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

质量检验：所得兽用孟布酮注射液为微黄色澄明液体；pH值为9.24；孟布酮含量为标示量的100.14%；单个最大杂质含量为0.56%，总杂质含量为0.70%；可见异物和不溶性微粒符合中国兽药典（2010年版）有关规定。

上述处方中，二乙醇胺为助溶剂，苯酚为抑菌剂，亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸二钠为螯合剂。试验结果显示，注射用水50mL中加入二乙醇胺后，溶液pH值约为11，加入偏酸性的孟布酮后，溶液pH值下降至9.3左右，再加入pH值为4～5的依地酸二钠，pH值继续下降，但下降幅度很小，最终注射液的pH值为9.24，不符合注射剂的pH值一般应控制在4～9范围内的规定。

对比实施例3、兽用孟布酮注射液的制备

处方：孟布酮10g、二乙醇胺5.5g、苯酚0.2g、焦亚硫酸钠0.2g、依地酸0.2g、注射用水加至100mL。

制备工艺：取注射用水50mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠和依地酸，搅拌使溶解，再加入苯酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于100mL钠钙玻璃模制注射剂瓶（压入卤化丁基橡胶塞，轧上铝盖）或10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

质量检验：所得兽用孟布酮注射液为微黄色澄明液体；pH值为8.36；孟布酮含量为标示量的100.25%；单个最大杂质含量为0.55%，总杂质含量为0.69%；可见异物和不溶性微粒符合中国兽药典（2010年版）有关规定。

上述处方中，二乙醇胺为助溶剂，苯酚为抑菌剂，焦亚硫酸钠为抗氧剂，依地酸为螯合剂，同时利用依地酸的酸性来调节注射液的pH值并维持注射液pH值的稳定。试验结果显示，所得注射液的各项指标均符合规定。但有关资料表明，苯酚的毒性大于氯甲酚。

比较实施例1-2与对比实施例1-3的试验结果，可以看出，实施例1和2的两组处方为本发明优选处方，其中更优选实施例2所述处方。

实施例3、pH值对兽用孟布酮注射液的影响

处方：孟布酮50g、二乙醇胺27.5g、氯甲酚1.0g、焦亚硫酸钠1.0g、依地酸1.0g、注射用水加至500mL（实施例2所述处方放大5倍）。

制备工艺：取注射用水250mL，加入二乙醇胺，搅拌混匀，再加入孟布酮，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠和依地酸，搅拌使溶解，再加入氯甲酚，50±5℃搅拌使溶解，所得药液冷却至室温，用注射用水定容至500mL，混匀，平均分成4份，编号1、2、3、4，1号不调节pH值，2、3、4号分别用稀盐酸调节pH值至7、6、5，再依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤液在通氮气状态下灌封于10mL安瓿中，115℃灭菌30分钟，即得。

将制得的不同pH值的兽用孟布酮注射液分别在室温（20℃）条件下和冷藏（4℃）条件下放置24小时，观察注射液的性状。结果见表1。

表1不同pH值对兽用孟布酮注射液的影响

上述试验结果显示，当兽用孟布酮注射液的pH值低于8时，注射液在放置过程中会出现浑浊。因此，兽用孟布酮注射液的pH值应控制在8～9范围内。按照实施例2所述处方制备兽用孟布酮注射液，利用螯合剂依地酸的酸性可直接控制注射液的pH在8～9范围内，不需额外加入pH调节剂进行调节。

实施例4、兽用孟布酮注射液处方中关键辅料用量优化

二乙醇胺是兽用孟布酮注射液处方中的关键辅料。

取注射用水60mL，按表2加入不同量的二乙醇胺，搅拌混匀，再加入处方量的孟布酮，加热搅拌，冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，观察孟布酮原料的溶解情况，对关键辅料二乙醇胺的用量进行筛选，结果见表2。

表2关键辅料二乙醇胺的用量优化

孟布酮（g）	二乙醇胺（g）	加热搅拌	孟布酮溶解情况
				10	3.6	80℃搅拌1小时	约1/3的孟布酮原料没有溶解
10	4.8	80℃搅拌1小时	约1/5的孟布酮原料没有溶解
				10	5.5	50℃搅拌15分钟	孟布酮原料全部溶解
10	6.0	50℃搅拌15分钟	孟布酮原料全部溶解

由表2可知，每100mL注射液中优选添加二乙醇胺5.5g。

实施例5、兽用孟布酮注射液优选处方的放大试验

将实施例1和2的两组兽用孟布酮注射液优选处方进行100倍放大试验，以评价两组优选处方的工业实用性。放大试验设计见表3，放大试验结果见表4。

表3放大试验设计

组成	放大试验处方1	放大试验处方2
			孟布酮（g）	1000	1000
二乙醇胺（g）	550	550
			氯甲酚（g）	20	20
焦亚硫酸钠（g）	-	20
			亚硫酸钠（g）	20	-
依地酸（g）	20	20
			注射用水（mL）	余量	余量
总体积（mL）	10000	10000

表4放大试验结果

由表4可知，两组优选处方放大后制得的兽用孟布酮注射液，各项指标均符合兽用孟布酮注射液临床研究用质量标准（草案）的规定，表明两组优选处方具有工业实用性，适用于工业化大规模生产。

实施例6、兽用孟布酮注射液优选处方的稳定性试验

按照中国兽药典2010年一部附录“兽药稳定性试验指导原则”，将实施例5两组优选处方放大试验制得的兽用孟布酮注射液（每批样品分2个装量规格：10mL:1g；100mL:10g）进行高温试验、高湿度试验和强光照射试验，考察影响兽用孟布酮注射液稳定性的因素。结果见表5-8。

表5两组优选处方制得注射液试验0天的质量评价结果

表6两组优选处方制得注射液的高温试验结果

表7两组优选处方制得注射液的高湿度试验结果

表8两组优选处方制得注射液的强光照射试验结果

以上试验结果表明，两组优选处方放大试验制备的2个不同装量规格的兽用孟布酮注射液，其性状、pH值、可见异物、不溶性微粒均符合兽用孟布酮注射液临床研究用质量标准（草案）的规定，说明这两组优选处方组成合理，所得注射液质量稳定。另外，注射液包装中使用的卤化丁基橡胶塞与本发明的兽用孟布酮注射液也有很好的相容性。

实施例7、兽用孟布酮注射液对胆汁、胆汁成分的影响

取体重250～300g的健康雄性SD大鼠50只，随机分为5组：高、中、低剂量组（给予实施例5以放大试验处方2制得的兽用孟布酮注射液），阴性对照组（给予生理盐水）和阳性对照组（给予硫辛酸注射液），每组10只。各组给药剂量见表9。实验前12h禁食不禁水，大鼠尾静脉注射给药，给药30min后，用3%戊巴比妥钠按1mL/kg麻醉大鼠，仰位固定于手术台上，沿腹正中线切开约2cm，打开腹腔，找到胃幽门部，翻转十二指肠，在十二指肠降部肠系膜中找到白色有韧性的胆管，在其下穿2根丝线，结扎乳头部，向肝脏方向作“V”形切口，用外径1mm的塑料管作胆管插管，有淡黄绿色胆汁流出。实验过程中用止血钳夹闭腹壁，以浸生理盐水的纱布覆盖。从给药后1h开始，连续收集3个30min胆汁样品，记录各时间段的胆汁流量，并测定给药前后胆汁中总胆红素（TBIL）、总胆汁酸（TBA）和胆固醇（TC）的含量。

结果见表9和表10，本发明的兽用孟布酮注射液具有促进胆汁分泌、增加胆汁中总胆红素和总胆汁酸分泌量的作用，利胆作用显著。

表9兽用孟布酮注射液对大鼠胆汁分泌量的影响

表10兽用孟布酮注射液对大鼠胆汁成分的影响

组别	剂量（mL/kg）	TBIL(μmol/L)	TBA(μmol/L)	TC(μmol/L)
					高剂量组	0.8	8.03±1.12	15.88±2.23	14.87±3.28
中剂量组	0.4	7.74±1.54	14.51±2.49	13.59±2.75
					低剂量组	0.1	7.11±1.37	13.23±3.28	12.74±3.37
阳性对照组	0.4	7.04±1.20	10.74±2.64	13.58±4.29
					阴性对照组	等体积	5.77±0.98	10.51±2.73	11.99±3.58

实施例8、兽用孟布酮注射液对胰液、胰酶的影响

取体重250～300g的健康SD大鼠20只，雌雄各半，随机分为2组：试验组（给予实施例5以放大试验处方2制备的兽用孟布酮注射液）和对照组（给予生理盐水），每组10只。实验前12h禁食不禁水，用3%戊巴比妥钠按1mL/kg麻醉大鼠，仰位固定于手术台上，行腹正中线切口，寻找和辨认胆胰管，在其进入十二指肠端结扎进行插管，然后分离距肝门5mm处的肝总胆管，双重结扎以阻断胆汁，在结扎线近端向肝门方向插管并结扎固定，该管的另一端置于十二指肠第二部使胆汁改道再通，最后在十二指肠第一部插管，荷包缝合固定。胰主导管与十二指肠插管都经皮下自背部引出，两管以金属管连接，使胰液返回十二指肠，术后大鼠分笼饲养。术后第3天，收集胰液前禁食不禁水12小时，将大鼠驱入圆形铁丝笼内，拨开金属接管，经胆胰管插管自然流出的胰液直接滴入离心管底。30min稳定期后，收集1份基础期胰液标本。30min之后，试验组大鼠尾静脉注射兽用孟布酮注射液0.4mL/kg，对照组注入等体积生理盐水。从给药后1h开始，连续收集3个30min胰液标本，测定胰液分泌量和胰液蛋白浓度（间接反映胰酶分泌量）。

结果见表11和表12，给予兽用孟布酮注射液后0.5～2h内，大鼠的胰液分泌量和胰液蛋白浓度均明显增加，说明本发明的兽用孟布酮注射液具有促进胰液分泌，增加胰酶分泌量的作用。

表11兽用孟布酮注射液对大鼠胰液分泌量的影响

表12兽用孟布酮注射液对大鼠胰液蛋白浓度的影响

实施例9、兽用孟布酮注射液对胃液、胃蛋白酶的影响

取体重250～300g的健康SD大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组：高、中、低剂量组（给予实施例5以放大试验处方2制得的兽用孟布酮注射液），阴性对照组（给予生理盐水）和阳性对照组（给予硫辛酸注射液），每组10只。各组给药剂量设置见表13。实验前12h禁食不禁水，大鼠尾静脉注射给药，给药3h后，用3%戊巴比妥钠按1mL/kg麻醉大鼠，仰位固定于固定板上，打开腹腔，结扎幽门，收集胃液于有刻度离心管中，3000r/min离心20min，所得上清液即为胃液总量，用胃蛋白酶定量免疫试剂盒测定其中胃蛋白酶含量。

结果见表13，给予兽用孟布酮注射液3h后，大鼠的胃液分泌量和胃蛋白酶含量均明显增加，说明本发明的兽用孟布酮注射液具有促进胃液分泌，增加胃蛋白酶含量的作用。

表13兽用孟布酮注射液对大鼠总胃液量、胃蛋白酶量的影响

组别	剂量（mL/kg）	胃液总量(mL)	胃蛋白酶(μg/L)
				高剂量组	0.8	8.03±1.12	47.88±4.23
中剂量组	0.4	7.74±1.54	42.51±8.46
				低剂量组	0.1	7.11±1.37	37.23±6.28
阳性对照组	0.4	7.04±1.20	42.74±3.60
				阴性对照组	等体积	5.77±0.98	30.51±5.73

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (3)

1.兽用孟布酮注射液，其特征在于，每100mL注射液由以下组分组成：孟布酮10g，二乙醇胺5.5g，氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠或亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，余量为注射用水。

2.根据权利要求1所述的兽用孟布酮注射液，其特征在于，每100mL注射液由以下组分组成：孟布酮10g，二乙醇胺5.5g，氯甲酚0.2g，焦亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，余量为注射用水。

3.权利要求1所述兽用孟布酮注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取注射用水45-55mL，加入二乙醇胺5.5g，搅拌混匀，再加入孟布酮10g，50±5℃搅拌至完全溶解，再加入焦亚硫酸钠或亚硫酸钠0.2g，依地酸0.2g，搅拌使溶解，再加入氯甲酚0.2g，50±5℃搅拌使溶解，冷却至室温，用注射用水定容至100mL，混匀，依次用孔径为0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，充氮灌封，灭菌，即得。