CN1034138A - 由旋复花制备抗癌药物的方法 - Google Patents

Abstract

由旋复花制备抗癌药物的方法。本发明涉及一 种以植物为原料。制取抗癌药的方法。本发明是以 廉价的中草药旋复花为原料，制取旋复花水提液或醇 提液，或提取旋复花内酯，再将这些所述的抗癌有效 成份制成各类用药。本方法工艺简单、成本低、制得 的抗癌药物毒性低无副作用，疗效显著，比常用抗癌 药5-Fu抗癌效价大10～100倍，是一种有效而低毒 的抗癌新药。

Description

本发明是关于一种制备抗癌药的方法，特别是以植物旋复花制抗癌药的方法。

现有的抗癌药物有多种，有的药治疗效果不明显，有的成本较高，有的药虽有较强的杀灭癌细胞作用，但同时存在着副作用，会抑制人体的免疫系统，因而患者由于感染而死亡，并非死于癌症本身。大日本药株式会社申请的专利（专利公开号：昭60-89427）公开了一种抗癌药的制取方法，它是从植物桔梗中提取一种类似旋复花粉样物质。该提取物的化学分子式为C₆H₁₀O₅·12H₂O，不溶于水，不溶于醇。由于它属于大分子结构的物质，因此人体难于吸收，疗效也必然降低;另外它不溶于水及醇，故要制成疗效较好的注射液，较为困难。

本发明的目的是提供一种由植物制备抗癌药的方法，该方法成本低、工艺简单、所制成的药副作用小，分子结构小，毒性低、不抑制机体的免疫功能，同时对癌细胞有较强的杀伤力和较强的抑制作用。

本发明的实现方案如下：

一、旋复花内酯药物的制备：先将植物旋复花（Inula    helianthusaquatica    C·Y·Wu）在有机溶剂中浸泡3～48小时，然后进行蒸馏回流处理，再对提取液蒸馏，蒸馏后所得的浅黄色油状物经硅胶柱层析，再用有机溶剂洗脱，除去油脂、叶绿素及黄酮等，提出旋复花内脂结晶，按常规方法，将旋复花内酯制成各种口服或注射药剂。浸泡旋复花所用的有机溶剂本发明采用石油醚、氯仿或汽油;洗脱经硅胶柱层析后的提取物采用的有机溶剂为氯仿、汽油，石油醚或酒精;最终提出的旋复花内酯结晶的主要成份分子式为C₁₉H₂₈O₄。

二、旋复花水提液药物的制备：将植物旋复花（Inula    helianthusaquatica    C·Y·Wt），浸泡于水中3小时以上，然后，煎熬2～5小时，得到旋复花水提液，按常规制药的方法，将其制成各种口服或注射用药。

三、旋复花醇提液药的制备：用50%以上的酒精浸泡旋复花（Inula    helianthusaquatica    C·Y·Wu）2小时以上，蒸馏处理该浸泡液，制得旋复花醇提液，按常规制药的方法，将其配制成各种口服或注射用药。

实例1    旋复花水提液药的制备

取干旋复花粉末100克，浸泡于10立升水中3小时，然后沸水浴3小时，过滤、灭菌、装入安瓿，制成旋复花水提液注射剂。

实例2    旋复花醇提液药的制备

将100毫克于旋复花粉末浸泡于20毫升75%的酒精中3小时，然后对该浸泡液进行蒸馏，得到膏状旋复花醇提液，再加入蒸馏水，加至10毫升，经过过滤、灭菌处理，装入安瓿，制成旋复花醇提液注射剂。

实例3    旋复花内酯药的制备

1.旋复花内酯的提取：

称取洁净的干旋复花粉末1公斤，在2000～6000毫升的石油醚中浸泡12小时，蒸馏回流提取四次，合并全部提取液作蒸馏浓缩处理，得到浅黄色油状物。该浓缩物经硅胶柱层析后，用氯仿洗脱叶绿素，油脂及黄酮，得到约850毫克旋复花内酯结晶。

2.以提取的旋复花内酯制各种药剂：

a.取旋复花内酯结晶100毫克，溶解于1毫升纯酒精中，再加入10毫升蒸馏水，作灭菌处理后装入安瓿，制成旋复花内酯水溶液注射剂。

b.取旋复花内酯结晶100毫克，加入5滴助溶剂，如吐温80、DMSO、植物油等，最好采用吐温80，进行研磨，直至其颗粒直径小于或等于1微米，再加入10毫升蒸馏水，灭菌处理后装入安瓿、制成旋复花内酯混悬液注射剂。

c.取旋复花内酯结晶10克，淀粉2克，乳糖2克，加水调和，压制成旋复花内酯口服片剂。

本发明抗癌作用实验如下：

实验1·旋复花内酯对三种人癌细胞（2×10⁵/ml）的杀伤效应及浓度依赖关系，见表1（作用时间48小时）。

由表1可见，药物浓度越大，对癌细胞的杀伤率越大。本抗癌药的效价比常用抗癌药5-Fu大10～100倍。

实验2 旋复花内酯（1μg/ml）对人白血病细胞（K₅₆₂）杀伤效应的时间依赖关系，见表2。

从表2可见，癌细胞随药物作用的延长而减少，旋复花内酯的抗癌效价与疗效较好的抗癌新药长春新碱相当。

实验3·在软琼脂培养基上、旋复花水提液（最终浓度100μg/ml）对肺腺癌细胞集落生长的抑制作用，见表3。每培养皿种植10000个癌细胞，加药后12日在低倍镜下计集落数。

由表3可见，旋复花水提液对肺腺癌细胞的集落生长有明显的抑制作用。

实验4·旋复花醇提液对肺腺癌细胞核内DNA合成的抑制作用，见表4。用DNA前体，经同位素标记的脱氧胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）1微居里/毫升，加入已被旋复花醇提液（10μg/ml）作用48小时后的肺腺癌细胞培养液中，10小时后，洗去3H-TdR，作放射自显影观察，油镜下计癌细胞核内的DNA的3H-TdR掺入率，与对照组加以比较。

表4显示了旋复花醇提液对癌细胞DNA的合成具有明显抑制作用。

实验5·旋复花内酯对实体型小鼠胰腺癌的疗效，见表5。由左胰皮下移植0.2毫升含100万个以上癌细胞的小鼠胰腺癌混悬液，次日给药，每日一次共九次，第10日处死动物称瘤重，取内脏制作切片观察毒性。

由表5可见，旋复花内酯不论经腹腔、肌肉、静脉或口服给药，均不同程度地能抑制小鼠实体型胰腺癌生长。实验结束时，小鼠死亡数未超过10%，体重下降未超过15%，内脏器官在光学显微镜下未发现可见的毒性反应，故毒性低。

实验6·旋复花内酯对小鼠LeWis肺癌的疗效，见表6。其实验方法同实验5。

表6显示出本药对小鼠肺癌亦有明显疗效。

实验7·旋复花内酯对艾氏水癌（EAC）的疗效，见表7。实验方法同实验5，但癌细胞种植于腹腔，以生命延长率为判断疗效的指标。

在对照组，小鼠因癌性腹水逐日急剧增加，一般到10～16天小鼠即死亡。而治疗组则不出现癌性腹水或很少出现，小鼠未死亡。直到半个月后，绝大多数小鼠仍存活，处死小鼠，计生命延长率为484～519%，疗效非常显著，体重增加，无毒性反应。

从以上七个实验疗效实例来看，旋复花不论是水提液及醇提液，或旋复兰内酯的水溶液或混悬液，不论是经腹腔、静脉、肌肉或口服给药，不论是体外人癌细胞试验或体内动物肿瘤试验，均有肯定的，较显著的疗效，而且没有明显的毒性，其副作用较小。

从本发明的实现方案及其实施例来看，本发明工艺简单，成本较低，药的毒性小、主要抗癌成份旋复花内酯的分子结构属于小分子结构，且溶于醇，因此制成的各种药剂易被机体吸收，从而将有较好的疗效。

表4

组别	3H－TdR掺入率
		旋复花生药醇提物	0％
生理盐水对照组	64％

Claims (5)

1、一种抗癌药物的制备方法，其特征是以植物旋复花(Inulahelianthusaquatica C·Y·Wu)为原料，在有机溶剂中浸泡3～48小时，进行蒸馏回流处理，对蒸馏回流处理后的提取液再蒸馏，制得浅黄色油状物，经硅胶柱层析，再用有机溶剂洗脱，除去油脂、叶绿素及黄酮等，制得旋复花内酯结晶。

2、按权利要求1所述的抗癌药的制备方法，其特征是浸泡旋复花时用的有机溶剂为石油醚、氯仿或汽油，而洗脱过程采用的有机溶剂为氯仿、汽油、石油醚或酒精，所制得的旋复花内酯结晶的主要成分子式为C₁₉H₂₈O₄。

3、按权利要求2所述的抗癌药的制备方法，其特征是浸泡旋复花的溶剂最好用石油醚，蒸馏回流处理最好四次、洗脱过程中所用的溶剂最好用氯仿。

4、一种抗癌药物的制备方法，其特征是以植物旋复花（Inulahelianthusaquatica  C·Y·Wu）为原料，在水中浸泡3小时以上，再煎熬2～5小时，制得旋复花水提液，再将该水提液制成口服或注射用药。

5、一种抗癌药物的制备方法，其特征是以植物旋复花（Inulahelianthusaquatica  C·Y·Wu）为原料，用50%以上的酒精浸泡2小时以上，蒸馏处理该浸泡液，最后得到旋复花醇提液，以该醇提液配制成口服或注射用药。