CN103402536A - 用gip和glp-1受体活性的基于胰高血糖素的肽来治疗代谢异常和肥胖的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供通过对有需要的患者施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来减少所述患者的体重增加、诱导体重减轻、治疗高血糖、降低血糖水平或使血糖水平正常化的方法。

Description

用GIP和GLP-1受体活性的基于胰高血糖素的肽来治疗代谢异常和肥胖的方法

优先权声明

本申请要求2011年6月23日提交的美国临时申请第61/500,229号和2010年12月22日提交的美国临时申请第61/426,338号的优先权。

以引用方式并入电子递交的材料

以引用方式全部并入的是与本申请同时递交的计算机可读的核苷酸/氨基酸序列表，并且辨认如下该序列表：2011年12月22日创建的一个名称为“45708A_SeqListing.txt”的285,688字节ASCII（文本）文件。

背景技术

本公开案的领域

本公开案一般来说涉及施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的方法。更具体地说，本公开案涉及经由施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来减少体重增加或诱导体重减轻的方法，以及经由施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来治疗高血糖、降低血糖水平或使血糖水平正常化的方法。

相关技术简述

在美国，II型糖尿病（即，2型糖尿病）是占糖尿病中大约90%的一组异质性病状。2型糖尿病是由胰岛素抵抗和胰岛素分泌减少组合引起。肥胖患者的体重减轻与胰岛素抵抗的好转和糖尿病症状的减轻有关。

已被普遍认定的五类口服抗糖尿病剂是：磺酰脲类、双胍类、氯茴苯酸类（meglitinide）、噻唑烷二酮类和α-葡萄糖苷酶抑制剂。2型糖尿病的治疗通常涉及选择这些口服药剂中的一种或多种作为初始治疗剂（参见，例如，Charpentier G.Diabetes Metab.Res.Rev.18(增刊3):S70-S76(2002)）。然而，尽管使用了多种药物，仍不足以全面控制糖尿病。仅有49.8%的患有糖尿病的人达到美国国家糖尿病协会（National Diabetes Association）的目标HbA_1c，即小于7%的HbA_1c。相反，29.7%的患有糖尿病的人的HbA_1c大于8%（参见，例如，Resnick等，Diabetes Care29:531-537(2006)）。

肠促胰岛素激素，即胰高血糖素样肽-1（GLP-1）和葡萄糖依赖性促胰岛素肽（GIP），是天然的肽激素。GLP-1和GIP都以葡萄糖依赖性方式来刺激胰岛素的合成和分泌而不会产生低血糖（参见，例如，Nauck等，J.Clin.Endocrinol.Metab.76:912-917(1993)和Irwin等，Regul.Pept.153:70-76(2009)）。

已经证明GLP-1可有效作为糖尿病辅助治疗剂。尽管GLP-1治疗剂与体重减轻有关，但是它也与恶心有关，在用GLP-1类似物治疗的患者中20%以上会出现恶心。

发明内容

本发明的一个方面提供通过对有需要的成人（例如，患有体重过重、II型糖尿病、胰岛素抵抗、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝病（NAFLD）或代谢综合症的成人）施用总的周剂量为约1mg至约40mg，或约4mg至约30mg，或约4至约20mg，或约10至约20mg，或约2至约10mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来减少所述成人的体重增加或诱导所述成人的体重减轻的方法。

本发明的另一个方面提供通过对有需要的成人（例如，患有I型糖尿病、II型糖尿病或妊娠期糖尿病的成人）施用总的周剂量为约1mg至约40mg，或约4mg至约30mg，或约4至约20mg，或约10至约20mg，或约2至约10mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来治疗所述成人的高血糖、降低所述成人的血糖水平或使所述成人的血糖水平正常化的方法。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽通常具有至少1%的GIP效价百分比，或至少1%的GLP-1效价百分比。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的GLP-1效价百分比是在GIP效价百分比的约10倍以内。或者，在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的GLP-1受体的EC₅₀是在GIP受体的EC₅₀的约10倍以内。在任何的这些实施方案中，例如，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的半衰期是约4至约10天，或约4至约7天。在任何的这些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用可引起胰岛素水平的升高、葡萄糖水平的降低、C-肽水平的升高、HbA_1c水平的降低或果糖胺水平的降低，或其任何组合。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可单独施用或与第二治疗剂（例如，抗糖尿病剂和/或抗肥胖剂）组合施用，并且可以产生所述总的周剂量的任何频率来施用（例如，每周施用一次，每周施用两次）。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽包括一个或多个集体分子量为约30,000道尔顿至约60,000道尔顿（例如，约40,000道尔顿）的亲水聚合物部分。半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的非限制性实例包括SEQ ID NO:5-94、99-169、173-413中任何一个，相对于SEQ ID NO:5-94、99-169、173-413具有最多1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸修饰的保留（例如）至少10%的GIP或GLP-1活性的氨基酸序列，或SEQ ID NO:5-94、99-169、173-413的聚乙二醇化衍生物。例如，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可包括SEQ ID NO:75、99-103、140、153、166和261中任何一个。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以无菌药物组合物来施用，诸如经由皮下注射、静脉内注射或肌肉内注射来施用。

附图简单说明

图1描绘在健康男性和女性受试者中进行的评定一定范围的剂量对于β细胞对葡萄糖负荷应答的作用的I期、随机、安慰剂对照、阳性对照的双组研究的结果。对人受试者施用安慰剂或4mg、8mg或16mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，并且测量胰岛素分泌速率。与安慰剂相比，用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽治疗后，观察到胰岛素分泌速率（ISR）的剂量依赖性、与剂量成比例的增大。

图2描绘在健康男性和女性受试者中进行的评定一定范围的剂量对于β细胞对葡萄糖负荷应答的作用的I期、随机、安慰剂对照、阳性对照的双组研究的结果。对人受试者施用安慰剂或4mg（图2A）或8mg（图2B）半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽以及速率介于0与12mg/kg/min之间的葡萄糖输注，并且测量血浆葡萄糖水平。

图3说明对施用了4mg、8mg或16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽以及0与12mg/kg/min之间的葡萄糖输注的受试者的C-肽水平进行比较的实验结果。

图4对施用了BYETTA，或4mg、8mg或16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的受试者在4小时时间周期范围内的血浆醋氨酚质貌进行比较。

具体实施方式

已发现半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽（如在此以引用方式全部并入本文的PCT专利申请公布第WO2010/011439号所述）适用于治疗高血糖（包括糖尿病）以及减少体重增加或诱导体重减轻。与单独的GLP-1相比，这些肽提供更大的体重减轻作用。半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽（例如）由于在循环中延长的半衰期（例如，约5至6天）而具有延长的作用持续时间，这允许更长时间间隔的用药（例如，每周用药一次，或甚至每两周用药一次）。

不希望受任何特定理论的限制，与目前的GLP-1治疗剂相比，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示出相似或更优越的葡萄糖降低和体重减轻作用，还降低了诸如恶心或呕吐的胃肠道耐受性问题的发生率。

半衰期延长的GLP-1GIP协同激动肽在各种动物模型中都显示出葡萄糖正常化和减轻体重的性质。在瘦小鼠和大鼠中，此类肽提供对葡萄糖负荷改善的耐受性。在饮食诱导的肥胖小鼠中，此类肽使食物摄入和体重增加都减少。

在半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的I期、随机、安慰剂对照、连续、单一递增剂量的研究中（参见实施例1），通过皮下（SC）注射，以0.1mg开始并且范围变动最多至32mg，对健康男性志愿者施用单一剂量的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。各剂量均被良好地耐受并且与不良事件、临床重要性实验结果或ECG结果无关。

在I期、随机、安慰剂对照、阳性对照、双组研究中（参见实施例2），所述研究的第1组中的健康男性和女性受试者接受安慰剂的皮下（SC）注射和（Amylin Pharmaceuticals）的SC注射以作为阳性对照。所述研究的第2组中的受试者接受安慰剂的SC注射和半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的SC注射。在梯度葡萄糖输注期间，剂量为4mg、8mg和16mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽以剂量依赖性方式增加胰岛素分泌而对胃排空没有作用。

定义

本文中使用的术语“肽”涵盖具有3个或多个氨基酸并且通常小于100个或小于50个氨基酸的序列，其中所述氨基酸是天然氨基酸或非天然氨基酸。非天然氨基酸指的是并不在活体内天然存在的氨基酸，但其仍可并入本文中描述的肽结构中。

本文中使用的术语“GLP-1/GIP协同激动肽”指的是在GLP-1和GIP受体都显示活性的肽。此肽可任选具有不可检测的或相对低的胰高血糖素活性（例如，与GLP-1或GIP受体相比，在胰高血糖素受体的效价百分比低至少10倍，或效价低至少100倍）。

本文中使用的术语“半衰期延长的”指的是具有延长的作用持续时间和/或减小的清除率的肽。例如，延长的作用持续时间可能是由于对二肽酶IV裂解的抵抗和/或与在循环中延长半衰期的异源部分（例如，聚乙二醇（PEG）、白蛋白或Fc区或其片段）的共轭。

本文中使用的一般术语“聚乙二醇”或“PEG”指的是环氧乙烷和水的缩合聚合物的混合物，呈支链或直链，由通式H(OCH₂CH₂)_nOH表示，其中n至少是9。

本文中使用的术语“聚乙二醇化（pegylated）”和类似术语指的是已通过将一个或多个聚乙二醇部分与化合物连接来修饰其原生状态的化合物。“聚乙二醇化的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽”是具有一个或多个与所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽共价结合的PEG链的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，例如，PEG的集体分子量是约30,000道尔顿至约60,000道尔顿。

本文中使用的氨基酸“修饰”指的是氨基酸的取代、添加或删除，并且包括用人类蛋白质中常见的20种氨基酸中任何氨基酸以及非典型或非天然氨基酸来进行的取代或添加。贯穿本申请中，通过编号对特定氨基酸位置的所有引用（例如位置28）指的是原生胰高血糖素（SEQ ID NO:1）中的那个位置处或其任何类似物中的相应氨基酸位置处的氨基酸。例如，本文对“位置28”的引用意思是SEQ ID NO:1的第一个氨基酸已被删除的肽的相应位置27。类似地，本文对“位置28”的引用意思是在SEQ ID NO:1的N-末端之前已添加一个氨基酸的肽的相应位置29。非典型氨基酸的商业来源包括Sigma-Aldrich（Milwaukee，WI）、ChemPep Inc.（Miami，FL）和Genzyme Pharmaceuticals（Cambridge，MA）。非典型氨基酸可从商业供应商购买、重新合成或从其它氨基酸化学修饰或衍生。

本文中使用的氨基酸“取代”指的是由不同氨基酸残基替换一个氨基酸残基。

本文中使用的术语“保守氨基酸取代”在本文中被定义为用具有类似性质（例如，大小、电荷、疏水性、亲水性和/或芳香性）的另一个氨基酸替换一个氨基酸，并且包括以下五个群组中的一个群组内的互换：

I.小的脂肪族、非极性或弱极性残基：

Ala、Ser、Thr、Pro、Gly；

II.极性、带负电荷残基和其酰胺和酯：

Asp、Asn、Glu、Gln、半胱氨酸和同型半胱氨酸；

III.极性、带正电荷残基：

His、Arg、Lys；鸟氨酸（Orn）

IV.大的、脂肪族、非极性残基：

Met，Leu、Ile、Val、Cys、正亮氨酸(Nle)、同型半胱氨酸

V.大的、芳香族残基：

Phe、Tyr、Trp、乙酰苯丙氨酸

本文中使用的术语“原生胰高血糖素”指的是由氨基酸序列SEQ ID NO:1组成的肽，术语“原生GIP”指的是由氨基酸序列SEQ ID NO:4组成的肽，并且术语“原生GLP-1”是表示GLP-1（7-36）酰胺（由氨基酸序列SEQ ID NO:3组成）、GLP-1（7-37）酸（由氨基酸序列SEQ ID NO:2组成）或这两种化合物的混合物的总称术语。若无任何进一步的指示，则本文中使用的对“胰高血糖素”或“GIP”或“GLP-1”的一般引用意欲分别指原生胰高血糖素或原生GIP或原生GLP-1。

本文中使用的对肽的一般引用意欲涵盖具有修饰的氨基和羧基末端的肽。例如，意欲由表示标准氨基酸的氨基酸序列来涵盖包含代替末端羧酸的酰胺基的氨基酸链。

本文中使用的术语分子对第一受体相对于第二受体的“选择性”指的是以下比例：分子在第二受体的EC₅₀除以分子在第一受体的EC₅₀。例如，在第一受体具有1nM的EC₅₀并且在第二受体具有100nM的EC₅₀的分子具有对第一受体相对于第二受体的100倍的选择性。

本文中使用的GLP-1效价百分比是GLP-1的EC₅₀除以半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的EC₅₀，乘以100%。

本文中使用的GIP效价百分比是GIP的EC₅₀除以半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的EC₅₀，乘以100%。

本文中使用的胰高血糖素效价百分比是胰高血糖素的EC₅₀除以半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的EC₅₀，乘以100%。

本文中使用的术语“治疗”包括特定病症或病状的预防，或与特定病症或病状有关的症状的减轻和/或预防或消除所述症状。例如，本文中使用的术语“治疗糖尿病”一般来说指的是使血糖水平朝正常水平方向改变并且可以包括取决于特定病况来升高或降低血糖水平。

术语“肠胃外”意思是不经由消化道，但通过某些其它路线，诸如皮下、肌肉内、脊柱内或静脉内。

本文中使用的术语“药学上可接受的载体”包括任何标准的药用载体，诸如磷酸盐缓冲生理盐水溶液、水、乳剂（诸如油/水或水/油乳剂）和各种类型的润湿剂。所述术语也涵盖由美国联邦政府管理机构批准或在美国药典中列出的用于动物（包括人类）的任何药剂。

本文中使用的术语“药学上可接受的盐”指的是化合物的盐，其保留了母体化合物的生物活性并且不是生物学上或其它方面不希望的盐。本文中公开的许多化合物能够凭借存在的氨基和/或羧基或与其类似的基团来形成酸式和/或碱式盐。

药学上可接受的碱加成盐可由无机和有机碱制备。由无机碱衍生的盐包括（仅以举例的方式）钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐和镁盐。由有机碱衍生的盐包括（但不限于）伯胺、仲胺和叔胺的盐。

药学上可接受的酸加成盐可由无机和有机酸制备。由无机酸衍生的盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐和类似盐。由有机酸衍生的盐包括乙酸盐、丙酸盐、乙醇酸盐、丙酮酸盐、草酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐和类似盐。

GLP-1/GIP协同激动肽实施方案

本文中描述的本发明涉及对有需要的成人施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的方法。WO2010/011439中详尽地描述了GLP-1/GIP协同激动肽和此类肽的半衰期延长的变型，该专利在此以引用方式全部并入本文。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是或包含(a)SEQID NO:5-94、99-169和173-262中任何一个，其对应于WO2010/011439中的SEQ ID NO:5-94、99-169和173-262，(b)SEQ ID NO:263-277中任何一个，其对应于以引用方式并入本文的美国临时专利申请第61/29,8812号中的SEQ IDNO:19-28和33-36，或(c)SEQ ID NO:178-413中任何一个，(d)具有一个或多个氨基酸修饰（包括最多2、3、4、5、6、7、8、9或10个进一步修饰（包括，例如，保守取代））的上述肽中任何一个的任何类似物，或(e)上述肽中任何一个的聚乙二醇化衍生物，前提是所述类似物在GLP-1和GIP受体保留了母体肽的所需活性（例如，至少1%、10%、20%、30%、40%或50%）。WO2010/011439也提供关于可改变的氨基酸的一些指导；此外，本发明涵盖在以下一个或多个位置具有添加、删除、非保守取代和/或非保守取代的肽：1、2、5、7、8、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、24、27、28或29。所述肽和类似物可包含额外异源部分，包括一个或多个额外氨基酸序列（例如，融合蛋白），或一个或多个产生SEQ ID NO:1-413中任何一个的聚乙二醇化衍生物的PEG链。在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是SEQ IDNO:75、99-103、140、153、166和261中任何一个。众所周知，虽然在一些情况下（例如，聚乙二醇化情况下），可首先制备母体肽然后再聚乙二醇化，但是类似物是通过重新合成制备而不是通过制备母体肽随后修饰来制备。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在GIP受体的EC₅₀是在不同于（高于或低于）其在GLP-1受体的EC₅₀的约20倍、约15倍以内，或优选约10倍、9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或约2倍以内。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的GLP-1效价百分比是在不同于（高于或低于）GIP效价百分比的约20倍、约15倍以内，或优选约10倍、9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或约2倍以内。在示例性实施方案中（例如，在本文中的任何实施方案中），半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示至少约1%、至少约5%或至少约10%的GIP效价百分比。在示例性实施方案中（例如，在本文中的任何实施方案中），半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示至少约1%的效价百分比。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在胰高血糖素受体的活性是原生胰高血糖素的约10%或更少，例如约1-10%，或约0.1-10%，或大于约0.1%但小于约10%。在本文中的任何实施方案中，例如，与GIP受体相比，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽对GLP-1受体的选择性小于100倍，或GLP-1效价百分比除以GIP效价百分比的比率小于100，小于约20、15、10、9、8、7、6或5。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽（例如）由于在循环中延长的半衰期而具有延长的作用持续时间（例如，约5至6天），这允许更长时间间隔的用药（例如，每周用药一次，或甚至两周用药一次）。在某些实施方案中，根据本发明使用的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽具有的半衰期范围是约3至约15天内，例如约3-5、3-6、3-7、3-8、3-9、3-10、3-11、3-12、3-13、3-14、3-15、4-5、4-6、4-7、4-8、4-9、4-10、4-11、4-12、4-13、4-14、4-15、5-6、5-7、5-8、5-9、5-10、5-11、5-12、5-12、5-14、5-15、6-7、6-8、6-9、6-10、6-11、6-12、6-13、6-14或6-15天。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在约10天至约30天以内（例如约20天）经历完全清除。

例如，延长的作用持续时间可能是由于对二肽酶IV裂解的抵抗或敏感度的降低和/或与在循环中延长半衰期的异源部分的共轭。对二肽酶IV裂解的抵抗或敏感度的降低是（例如）通过位置1和/或2处的氨基酸修饰（对“DPP-IV保护氨基酸”的修饰）提供的。适当的取代实例包括：位置1处的D-组氨酸、α,α-二甲基咪唑乙酸（DMIA）、N-甲基组氨酸、α-甲基组氨酸、咪唑乙酸、脱氨组氨酸、羟基-组氨酸、乙酰组氨酸、同型组氨酸；或位置2处的D-丝氨酸、D-丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、N-甲基丝氨酸或α-氨基异丁酸（AIB）。

延长作用持续时间的异源部分的实例包括（但不限于），酰基或烷基；二肽前体药物部分（经由（例如）酰胺键或酯键连接）或其它前体药物部分；聚乙二醇（PEG）或其它亲水聚合物；白蛋白或其它血浆蛋白；免疫球蛋白的Fc区或其片段；rPEG。此类组分是本领域中已知的。国际公布第WO2010/011439号中描述了例如，酰化或烷基化、亲水聚合物、白蛋白或其它血浆蛋白以及免疫球蛋白的Fc区或其片段，该专利在此以引用方式全部并入本文。国际公布第WO2009/099763号中描述了酯前体药物部分，该专利在此以引用方式全部并入本文，国际公布第WO2010/071807号中描述了酰胺前体药物部分，该专利在此以引用方式全部并入本文。国际公布第WO2009/023270号中描述了重组PEG或rPEG。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽包含在以下任何位置与亲水聚合物共价连接的氨基酸：氨基酸位置16、17、20、21、24或29，位置29之后的在C末端延伸链内（例如，30、31、32、33、34、35、36、37、38、39）添加的氨基酸（例如，位置30）处，或C末端氨基酸（例如，40、41、42或更高编号）处，如WO2010/011439所述。在示例性实施方案中，该亲水聚合物是在这些位置中任何位置处与Lys、Cys、Orn、同型半胱氨酸或乙酰苯丙氨酸残基共价连接。示例性亲水聚合物包括一个或多个（例如）集体分子量为约或约20,000道尔顿至约40,000道尔顿的聚乙二醇（PEG）链，如WO2010/011439所述。在某些实施方案中，聚乙二醇聚合物的分子量为约30,000道尔顿至约60,000道尔顿，或约30,000道尔顿至约50,000道尔顿（例如，40,000道尔顿）。

异源部分

本文中使用的术语“异源部分”与术语“共轭部分”同义，并且指的是不同于其所连接的肽的任何分子（化学或生物化学的、天然的或非编码的分子）。在某些实施方案中，异源部分是另一个肽或蛋白质。在某些实施方案中，异源部分是血浆蛋白，例如，白蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原和球蛋白。在某些实施方案中，血浆蛋白是白蛋白或转铁蛋白。

在某些实施方案中，异源部分是免疫球蛋白（Ig，例如，IgG、IgA、IgE、IgD或IgM）的Fc部分，或其片段或修饰的类似物，优选是保留FcRn结合位点的片段。Fc区是Ig重链的C末端区，其负责与实现诸如使免疫球蛋白再循环并且使其返回循环（其产生延长的半衰期）的活性的Fc受体（FcRn）结合。例如，根据某些定义，人类IgG重链Fc区从Cys226延伸至所述重链的C末端。与FcRn受体结合的IgG的Fc部分的区域已基于X-射线晶体衍射得以描述（Burmeister等，1994，Nature372:379）。Fc与FcRn的主要接触区靠近CH2和CH3域的接合处并且包括CH2域的氨基酸残基248、250-257、272、285、288、290-291、308-311和314以及CH2域的氨基酸残基385-387、428和433-436。某些共轭部分可包括或不包括FcγR的结合位点，其负责ADCC和CDC；或可包括设计来降低ADCC或CDC的修饰。

在某些实施方案中，异源部分是聚合物。在某些实施方案中，聚合物选自由以下组成的群组：聚酰胺、聚碳酸酯、聚烷撑和其衍生物（包括聚亚烷基二醇、聚氧化烯、聚对苯二甲酸烷二酯（polyalkylene terepthalates））、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的聚合物（包括聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙基酯)、聚(丙烯酸异丁酯)和聚(丙烯酸十八烷基酯)）、聚乙烯聚合物（包括聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯酯、聚乙烯卤化物、聚(乙酸乙烯酯)和聚乙烯吡咯烷酮）、聚乙交酯、聚硅氧烷、聚氨基甲酸酯和其共聚合物、纤维素（包括烷基纤维素、羟烷基纤维素、纤维素醚、纤维素酯、硝基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丁基甲基纤维素、纤维素乙酸酯、纤维素丙酸酯、纤维素乙酸丁酸酯、纤维素乙酸苯二甲酸酯、羧乙基纤维素、纤维素三乙酸酯和纤维素硫酸酯钠盐）、聚丙烯、聚乙烯（包括聚(乙二醇)、聚氧化乙烯）和聚(对苯二甲酸乙二酯)，和聚苯乙烯。

在某些方面中，聚合物是可生物降解的聚合物，包括合成的可生物降解的聚合物（例如，乳酸和乙醇酸的聚合物、聚酐、聚原酸酯、聚氨基甲酸酯、聚(丁酸)、聚(戊酸)和聚(丙交酯共聚己内酯)，以及天然的可生物降解的聚合物（例如，海藻酸酯和其它多糖，包括葡聚糖和纤维素）、胶原蛋白、其化学衍生物（化学基团的取代、加成，例如，烷基、亚烷基、羟基化、氧化和由本领域技术人员常规进行的其它修饰）、白蛋白和其它亲水蛋白质（例如，玉米醇溶蛋白和其它醇溶谷蛋白和疏水蛋白质）），以及其任何共聚物或混合物。

在某些方面中，聚合物是生物黏附性聚合物，诸如由H.S.Sawhney、C.P.Pathak和J.A.Hubbell在Macromolecules,1993,26,581-587（该文献教导的内容并入本文）中描述的生物可降解水凝胶、聚透明质酸、酪蛋白、明胶、明胶蛋白、聚酐、聚丙烯酸、海藻酸酯、壳聚糖、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙基酯)、聚(丙烯酸异丁酯)和聚(丙烯酸十八烷基酯)。

在某些实施方案中，聚合物是水溶性聚合物或亲水聚合物。适当的水溶性聚合物是本领域中已知的并且包括（例如），聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素（HPC；Klucel）、羟丙基甲基纤维素（HPMC；Methocel）、硝基纤维素、羟丙基乙基纤维素、羟丙基丁基纤维素、羟丙基戊基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素（Ethocel）、羟乙基纤维素、各种烷基纤维素和羟烷基纤维素、各种纤维素醚、纤维素乙酸酯、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、乙酸/巴豆酸乙烯酯共聚物、聚甲基丙烯酸羟烷基酯、甲基丙烯酸羟甲酯、甲基丙烯酸共聚物、聚甲基丙烯酸、聚甲基丙烯酸甲酯、马来酸酐/甲基乙烯基醚共聚物、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠和钙、聚丙烯酸、酸性羧基聚合物、聚羧乙烯、羧基乙烯聚合物、聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物、聚甲基乙烯基醚共聚马来酸酐、羧甲基酰胺、甲基丙烯酸钾二乙烯基苯共聚物、聚氧乙二醇、聚氧化乙烯以及其衍生物、盐和组合。

在某些实施方案中，异源部分是碳水化合物。在某些实施方案中，碳水化合物是单糖（例如，葡萄糖、半乳糖、果糖）、二糖（例如，蔗糖、乳糖、麦芽糖）、低聚糖（例如，棉籽糖、水苏糖）、多糖（淀粉、淀粉酶、支链淀粉、纤维素、壳多糖、胼胝质（callose）、昆布多糖、木聚糖、甘露聚糖、岩藻聚糖、半乳甘露聚糖）。

在某些实施方案中，异源部分是脂质。在某些实施方案中，脂质是脂肪酸、类花生酸、前列腺素、白三烯、血栓素、N-酰基乙醇胺、甘油酯（例如，单、二、三取代甘油）、甘油磷脂（例如，磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸）、鞘脂（例如，鞘氨醇、神经酰胺）、固醇脂质（例如，类固醇、胆固醇）、异戊烯醇脂质、糖脂，或聚酮、油、石蜡、胆固醇、固醇、脂溶性维生素、甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯、磷脂。

亲水聚合物

带来增加的流体动力学半径和增长的血清半衰期的适当亲水聚合物包括聚乙二醇（PEG）、聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇（例如，POG）、聚氧乙烯化山梨糖醇、聚氧乙烯化葡萄糖、聚氧乙烯化甘油（POG）、聚氧化烯、聚乙二醇丙醛、乙二醇/丙二醇共聚物、单甲氧聚乙二醇、单-(C1-C10)烷氧基-或芳氧基-聚乙二醇、羧甲基纤维素、聚缩醛、聚乙烯醇（PVA）、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊环、聚-1,3,6-三氧杂环己烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚(β-氨基酸)（均聚物或无规共聚物）、聚(n-乙烯吡咯烷酮)聚乙二醇、聚丙二醇均聚物（PPG）和其它聚氧化烯、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、结肠酸（colonic acid）或其它多糖聚合物、聚蔗糖或葡聚糖以及其混合物。葡聚糖是具有葡萄糖亚基的多糖聚合物，主要由α1-6键连接。可用的葡聚糖有许多分子量范围，例如，约1kD至约100kD，或约5、10、15或20kD至约20、30、40、50、60、70、80或90kD。

根据某些实施方案，与肽连接的一个或多个亲水部分（例如，聚乙二醇链）具有的集体分子量选自约20,000道尔顿至约60,000道尔顿的范围。在某些实施方案中，聚乙二醇链具有的分子量选自约500至约5,000道尔顿或约1,000至约5,000道尔顿的范围。在另一个实施方案中，亲水部分（例如，聚乙二醇链）具有约20,000至约60,000道尔顿的分子量。在又一示例性实施方案中，亲水部分（例如，聚乙二醇链）具有的集体分子量为约30,000至约50,000道尔顿（例如，40,000道尔顿）。例如，可将两个20,000道尔顿的PEG链连接到肽的相同或不同位置以达到40,000道尔顿的集体分子量。

涵盖直链或支链亲水聚合物。因此而得的共轭物的制备大体上可为单分散或多分散的，并且每个肽可具有约0.5、0.7、1、1.2、1.5或2以上聚合物部分。

在某些实施方案中，肽的原生氨基酸是由具有适于与亲水部分交联的侧链的氨基酸取代，以便于亲水部分与肽连接。示例性氨基酸包括Cys、Lys、Orn、同型Cys或乙酰苯丙氨酸（Ac-Phe）。在其它实施方案中，将被修饰成来包含亲水基的氨基酸添加到肽的C末端上。

国际专利申请公布第WO2009/023270号和美国专利申请案公布第US2008/0286808号中描述了能够形成类似于化学PEG（例如，重组PEG（rPEG）分子）的延长构型的附属肽。rPEG分子不是聚乙二醇。在某些方面中，rPEG分子是包含甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸或脯氨酸中一个或多个的多肽。在某些方面中，rPEG是均聚物，例如，聚甘氨酸、聚丝氨酸、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚丙氨酸或聚脯氨酸。在其它实施方案中，rPEG包含重复的两种类型氨基酸，例如，聚(Gly-Ser)、聚(Gly-Glu)、聚(Gly-Ala)、聚(Gly-Asp)、聚(Gly-Pro)、聚(Ser-Glu)等。在某些方面中，rPEG包含三种不同类型的氨基酸，例如，聚(Gly-Ser-Glu)。在特定方面中，rPEG增长半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的半衰期。在某些方面中，rPEG包含净正电荷或净负电荷。在某些方面中，rPEG缺少二级结构。在某些实施方案中，rPEG的长度大于或等于10个氨基酸，并且在某些实施方案中，长度是约40至约50个氨基酸。在某些方面中，附属肽是经由肽键或蛋白酶裂解位点与本发明的肽的N-或C末端融合。在某些方面中，rPEG包含亲合力标记物或与大于5kDa的PEG连接。

酰化或烷基化

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽包含含有非原生酰基或烷基的氨基酸（本文中分别称为“酰化氨基酸”或“烷基化氨基酸”，不管其是如何制备的，例如，不管是通过将预先酰化/烷基化的氨基酸并入肽中，还是在合成肽之后进行酰化/烷基化）。酰基或烷基可与肽的氨基酸直接共价连接，或经由间隔基与肽的氨基酸间接共价连接。肽可在连接亲水聚合物的同一氨基酸位置处酰化，或在不同氨基酸位置处酰化。

酰基或烷基可为任何大小，可包含任何长度的碳链，并且可为直链或支链的。在本发明的某些示例性实施方案中，酰基是C4至C30脂肪酸。例如，酰基可为以下任何脂肪酸：C4脂肪酸、C6脂肪酸、C8脂肪酸、C10脂肪酸、C12脂肪酸、C14脂肪酸、C16脂肪酸、C18脂肪酸、C20脂肪酸、C22脂肪酸、C24脂肪酸、C26脂肪酸、C28脂肪酸或C30脂肪酸。在某些实施方案中，酰基是C8至C20脂肪酸，例如，C14脂肪酸或C16脂肪酸。

在其它示例性实施方案中，烷基是C4至C30烷基。例如，烷基可为以下任何烷基：C4烷基、C6烷基、C8烷基、C10烷基、C12烷基、C14烷基、C16烷基、C18烷基、C20烷基、C22烷基、C24烷基、C26烷基、C28烷基或C30烷基。在某些实施方案中，烷基是C8至C20烷基，例如，C14烷基或C16烷基。

在某些实施方案中，酰基是胆汁酸，包括但不限于，胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸、牛磺胆酸、甘胆酸以及胆固醇酸。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的治疗用途

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽适用于治疗肥胖、诱导体重减轻（例如，通过体重的降低测量）、使身体脂肪分布正常化、预防或降低体重增加和/或降低食欲，如在此以引用方式全部并入本文的WO2010/011439中所述。

在一个方面中，本发明涉及通过对有需要的成人施用周剂量为约1mg至约40mg的半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽来降低所述成人的体重增加或诱导所述成人的体重减轻的方法。希望用于降低体重增加或诱导体重减轻的方法适用于由各种原因（包括药物诱发的肥胖）的体重过重和肥胖，以及减少与肥胖有关的并发症，包括血管疾病（冠状动脉疾病、心肌梗塞、中风、周围血管疾病、缺血性再灌注等）、高血压、II型糖尿病发病、高脂血症和肌肉骨胳疾病。希望此类方法也尤其适用于具有心血管疾病的其它危险因素的患者的肥胖，诸如患有胰岛素抵抗或II型糖尿病、高血压、高脂血症或这些危险因素的组合的患者。

在本发明的这个方面的某些实施方案中，成人具有任何阶段的非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）或任何阶段的酒精性肝病，或酒精诱发的肝脏疾病。NAFLD指的是从单纯性脂肪肝（脂肪变性）到非酒精性脂肪肝炎（NASH）到肝硬化（肝脏的不可逆、晚期瘢痕）的广系肝脏疾病。NAFLD的所有阶段的共同点是在肝脏细胞（肝细胞）中的脂肪堆积（脂肪浸润）。单纯性脂肪肝是某种类型脂肪（例如，甘油三酯）在肝细胞中的异常堆积，没有炎症或瘢痕。在NASH中，脂肪堆积与肝脏的不同程度的炎症（肝炎）和瘢痕（纤维化）有关。炎症细胞可破坏肝细胞（肝细胞坏死）。术语“脂肪肝炎”和“脂肪坏死”中的脂肪指的是脂肪肝，肝炎指的是肝脏炎症，并且坏死指的是被破坏的肝细胞。NASH最终可导致肝脏的瘢痕（纤维化），然后是不可逆的、晚期的瘢痕（肝硬化）。由NASH引起的肝硬化是NAFLD系列的最后和最严重的阶段。（Mendler,Michel,“Fatty Liver:Nonalcoholic Fatty Liver Disease(NAFLD)andNonalcoholic Steatohepatitis(NASH)”，主编Schoenfield,Leslie J.,MedicineNet.com,2005年8月29日）。

酒精性肝病涵盖与过量使用酒精有关或由过量使用酒精引起的三种病理学相异的肝脏疾病：脂肪肝（脂肪变性）、慢性或急性肝炎和肝硬化。酒精性肝炎可从轻度肝炎（异常的实验测试是该疾病的唯一指证）发展到具有并发症的严重肝脏功能障碍，诸如黄疸（由胆红素滞留引起的黄色皮肤）、肝性脑病（由肝衰竭引起的神经功能障碍）、腹水（腹部中的体液堆积）、食管静脉曲张出血（在食管中的静脉曲张）、凝血异常和昏迷。组织学上的酒精性肝炎具有肝细胞气球样变的特征呈现，伴有嗜中性粒细胞和有时的马洛里小体（Mallorybody）的炎症（细胞中间丝蛋白的异常聚集）。肝硬化的解剖学上的特征为在肝脏中广布的结节与纤维化的合并。（Worman,Howard J.,“Alcoholic LiverDisease”,Columbia University Medical Center网站）。

本发明的这个实施方案中的治疗方法包括降低以下的一个、两个、三个或多个：肝脏脂肪含量、肝硬化的发病率或进程、肝细胞癌的发病率、炎症病征（诸如异常的肝酶（例如，天冬氨酸转氨酶AST和/或丙氨酸转氨酶ALT或LDH）水平、血清铁蛋白增加、血清胆红素增加）和/或纤维化病征（例如TGF-β水平增加）。在优选实施方案中，使用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽来治疗进程已超过单纯性脂肪肝（脂肪变性）并且显示炎症或肝炎病征的患者。此类方法可引起（例如）AST和/或ALT水平的降低。

在本发明的这个方面的某些实施方案中，成人具有代谢综合症。代谢综合症（也称为代谢综合症X、胰岛素抵抗综合症或雷文综合症（Reaven'ssyndrome））是一种波及影响超过五千万美国人的病症。代谢综合症的特征通常是一连串的以下危险因素中的至少三个或多个：(1)腹部肥胖（在腹部内部和周围的过多脂肪组织），(2)致动脉粥样硬化性血脂异常（包括高甘油三酯、低HDL胆固醇和高LDL胆固醇的增强斑块在动脉壁堆积的血脂病症），(3)血压升高，(4)胰岛素抵抗或葡萄糖耐受性不良，(5)血栓前状态（例如，血液中的高纤维蛋白原或纤溶酶原激活因子抑制剂-1），和(6)促炎性状态（例如，血液中的C-反应性蛋白升高）。其它危险因素可包括衰老、激素失衡和遗传倾向性。

代谢综合症与冠心病和与血管动脉粥样斑堆积相关的其它病症（诸如中风和周围血管疾病（称为动脉粥样硬化心血管疾病（ASCVD）））的风险增加有关。患有代谢综合症的患者可能从早期的胰岛素抵抗状态进程到具有进一步增加的ASCVD风险的全面的II型糖尿病。不希望受任何特定理论的限制，胰岛素抵抗、代谢综合症与血管疾病之间的关系可涉及一种或多种并行的发病机理，包括胰岛素刺激血管舒张、归结于氧化应激增强的胰岛素抵抗相关的NO可用度降低，以及脂肪细胞源性激素（诸如脂联素）的异常（Lteif和Mather,Can.J.Cardiol.20(增刊B):66B-76B(2004)）。

根据2001全美胆固醇教育计划的成人治疗小组（ATP III），同一个体中的以下特征中的任何三个特征即符合代谢综合症的标准：(a)腹部肥胖（男性腰围超过102cm，女性腰围超过88cm）；(b)血清甘油三酯（150mg/dL或以上）；(c)HDL胆固醇（男性40mg/dL或更低，女性50mg/dL或更低）；(d)血压（130/85或以上）；和(e)空腹血糖（110mg/dL或以上）。根据世界卫生组织（WHO），具有高胰岛素水平（单独的空腹血糖升高或餐后葡萄糖升高）的个体具有以下标准中至少两个即符合代谢综合症的标准：(a)腹部肥胖（腰臀比率大于0.9、体重指数为至少30kg/m²或腰围超过37英寸）；(b)胆固醇研究显示甘油三酯水平至少150mg/dL或HDL胆固醇低于35mg/dL；(c)血压140/90或以上，或正在治疗高血压。（Mathur,Ruchi,“Metabolic Syndrome”，主编Shiel,Jr.,WilliamC.,MedicineNet.com,2009年5月11日）。

为说明本文目的，如果个体符合2001全美胆固醇教育计划的成人治疗小组或WHO之一或两者提出的标准，那么该个体视为患有代谢综合症。

在另一个方面中，本发明涉及通过对有需要的成人施用周剂量为约1mg至约40mg的半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽来治疗所述成人的高血糖、降低所述成人的血糖水平或使所述成人的血糖水平正常化（例如，使血糖水平恢复正常，诸如，如果血糖水平比正常值高，则降低血糖水平）的方法。希望用于治疗高血糖的此类方法适用于各种类型的高血糖（包括胰岛素依赖性或非胰岛素依赖性糖尿病（例如，I型糖尿病、II型糖尿病或妊娠期糖尿病））并且适用于减少包括肾病变、视网膜病变和血管疾病的糖尿病并发症。因此，在某些实施方案中，成人患有I型糖尿病、II型糖尿病或妊娠期糖尿病。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用可引起选自由以下组成的群组的生物学反应：胰岛素水平升高、葡萄糖水平降低、C-肽水平升高、HbA_1c水平降低、果糖胺水平降低，和其组合。胰岛素水平的升高表明半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用有效地治疗糖尿病；并且葡萄糖水平的降低表明半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用起到降低血糖水平的作用，从而治疗高血糖。

HbA_1c水平取决于血糖浓度（即，血液中葡萄糖浓度越高，HbA_1c水平越高），但并不受血糖浓度昼夜波动的影响。相反，HbA_1c水平表示大约过去4周的平均血糖水平，强烈地偏重于表示最近2周的平均血糖水平。HbA_1c水平的降低表明半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用长期降低平均血糖水平。

C-肽在胰岛素A链与B链之间充当连接体并且便于胰岛素在内质网中有效的装配、折叠和加工。高水平的C-肽通常表明高水平的内源性胰岛素产生，而低水平的C-肽通常表明低水平的胰岛素产生。C-肽水平的升高表明半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用增加胰岛素的产生。

果糖胺可用来鉴定血浆葡萄糖浓度。一般来说，果糖胺浓度越高，平均血糖水平越高。正常果糖胺水平可表明患者不是糖尿病患者或所述患者良好控制了糖尿病。果糖胺水平的升高表明患者过去2到3周的平均葡萄糖已升高。果糖胺水平的降低表明半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用降低平均血糖水平。

在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可单独施用或与有效量的一种或多种第二治疗剂组合施用。在某些实施方案中，第二治疗剂是抗糖尿病剂、抗肥胖剂或其混合物。本领域已知的或处在研究中的抗糖尿病剂包括胰岛素；磺酰脲类，诸如甲苯磺丁脲（山地酶（Orinase））、醋磺环已脲（戴美乐（Dymelor））、甲磺氮卓脲（妥拉磺脲（Tolinase））、氯磺丙脲（特泌胰（Diabinese））、格列吡嗪（瑞易宁（Glucotrol））、优降糖（达安疗（Diabeta）、甲糖宁（Micronase）、格列本脲（Glynase））、格列美脲（亚莫利（Amaryl））或格列齐特（达美康（Diamicron））；氯茴苯酸类，诸如瑞格列奈（普瑞丁（Prandin））或那格列奈（使糖立释（Starlix））；双胍类，诸如二甲双胍（格华止（Glucophage））或苯乙双胍；噻唑烷二酮类，诸如罗格列酮（文迪雅（Avandia））、吡格列酮（爱妥糖（Actos））或曲格列酮（瑞素灵（Rezulin））或其它PPARγ抑制剂；抑制碳水化合物消化的α葡萄糖苷酶抑制剂，诸如米格列醇（Glyset）、阿卡波糖（拜唐平（Precose）/拜糖平（Glucobay））；艾塞那肽（exenatide）（百泌达（Byetta））或普兰林肽（pramlintide）；二肽基肽酶-4（DPP-4）抑制剂，诸如维达列汀（vildagliptin）或西他列汀（sitagliptin）；SGLT（钠依赖性葡萄糖转运蛋白1）抑制剂；葡糖激酶活化剂（GKA）；胰高血糖素受体拮抗剂（GRA）；或FBPase（果糖1,6-二磷酸酶）抑制剂。例如，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可与胰岛素一起施用。

本领域已知的或处在研究中的抗肥胖剂包括，来普汀（Leptin）和成纤维细胞生长因子21（FGF-21）、食欲抑制剂（诸如苯乙胺型刺激剂、苯丁胺（任选地与苯氟拉明（fenfluramine）或右旋芬氟拉明（dexfenfluramine）一起）、二乙胺苯酮

苯甲曲嗪（phendimetrazine，

）、苄非他明（benzphetamine，

）、西布曲明（sibutramine，

））；利莫那班（rimonabant，

）、其它大麻素受体拮抗剂；胃泌酸调节素；盐酸氟西汀（百忧解（Prozac））；Qnexa（托吡酯（topiramate）和苯丁胺）、Excalia（安非他酮（bupropion）和唑尼沙胺（zonisamide）或Contrave（安非他酮（bupropion）和纳曲酮（naltrexone））；或脂肪酶抑制剂，类似罗氏鲜（xenical）（奥利司他（Orlistat））或西替利司他（Orlistat，也称为ATL-962）或GT389-255。

用药和施用

半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽可以约1mg至约40mg的周剂量（总的周剂量）来施用。例如，半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽可以以下周剂量来施用：约1mg、约2mg、约3mg、约4mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、约10mg、约11mg、约12mg、约13mg、约14mg、约15mg、约16mg、约17mg、约18mg、约19mg、约20mg、约21mg、约22mg、约23mg、约24mg、约25mg、约26mg、约27mg、约28mg、约29mg、约30mg、约31mg、约32mg、约33mg、约34mg、约35mg、约36mg、约37mg、约38mg、约39mg和约40mg。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽可以约4mg至约30mg的周剂量来施用。例如，半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽可以以下周剂量来施用：约4mg、约12mg、约20mg、或约30mg、或约4mg至约20mg、或约4mg至约12mg、或约6mg至约30mg、或约6mg至约20mg、或约6mg至约12mg、或约8mg至约30mg、或约8mg至约20mg、或约12mg至约30mg、或约12mg至约25mg、或约12mg至约20mg、或约10mg至约30mg、或约10mg至约25mg、或约10mg至约20mg。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以约2mg至约10mg的周剂量来施用。例如，半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽可以以下周剂量来施用：约2mg、约4mg、约6mg、约8mg、或约10mg、或约2mg至约8mg、或约2mg至约6mg、或约2mg至约4mg、或约4mg至约10mg、或约4mg至约8mg、或约4mg至约6mg。

给定的剂量是用于具有范围在约35kD至65kD或约35kD至约55kD的（例如约45kD）分子量的半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽。本发明涵盖对具有不同分子量的肽的等效摩尔的用药。因此，本发明涵盖约23nmol至约930nmol的周剂量，或约93nmol至约465nmol的周剂量。适当mg的周剂量容易算出。例如，对具有约40-50kD分子量的肽的12mg剂量是对具有约20-25kD分子量的肽的6mg剂量的摩尔等效量。

可以产生所需总的周剂量的任何频率（例如，每两周、每10天、每周一次、每周两次、每周三次、每周四次、每周五次、每周六次或每天一次）对所述成人施用半衰期延长的GLP-1/GLP协同激动肽。例如，如果所需的周剂量是约4mg，则半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以每两周8mg、每周一次4mg或每周两次2mg来施用。例如，如果所需的周剂量是约12mg，则半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以每两周24mg、每周一次12mg或每周两次6mg来施用。例如，如果所需的周剂量是约20mg，则半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以每两周40mg、每周一次20mg或每周两次10mg来施用。例如，如果所需的周剂量是约30mg，则半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以每两周60mg、每周一次30mg或每周两次15mg施用。

对比平均体重低的人、青少年或儿童可施用等效的降低剂量（根据体表面积或体重来成比例地降低）。例如，对于体表面积是普通成年男性的约一半的人来说，将12mg的总的周剂量调整为6mg的总的周剂量。另一个实施例是，对于平均70kg的人而言，12mg的周剂量等效于每周约0.17mg/kg；对于平均70kg的人而言，20mg的周剂量等效于每周约0.28mg/kg。因此，例如，本发明涵盖以以下剂量来施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽：约0.029mg/kg至约0.143mg/kg（即，对于70kg的人来说是2mg至10mg）、或每周约0.057mg/kg至约0.28mg/kg（即，对于70kg的人来说是4mg至20mg）、或每周约0.014mg/kg至约0.5mg/kg（即，对于70kg的人来说是1mg至35mg）。

药物制剂和施用路线

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可以药物组合物来施用，所述药物组合物任选包含可接受的稀释剂、载体、赋形剂或其混合物。在某些实施方案中，药物组合物是无菌的并且具有以下纯度水平：例如，至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%或至少约99%。

在某些实施方案中，药物组合物包含以下浓度的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动剂：约1mg/mL至约50mg/mL，例如，约1mg/mL、约2mg/mL、约3mg/mL、约4mg/mL、约5mg/mL、约6mg/mL、约7mg/mL、约8mg/mL、约9mg/mL、约10mg/mL、约11mg/mL、约12mg/mL、约13mg/mL、约14mg/mL、约15mg/mL、约16mg/mL、约17mg/mL、约18mg/mL、约19mg/mL、约20mg/mL、约21mg/mL、约22mg/mL、约23mg/mL、约24mg/mL、约25mg/mL、约26mg/mL、约27mg/mL、约28mg/mL、约29mg/mL、约30mg/mL、约31mg/mL、约32mg/mL、约33mg/mL、约34mg/mL、约35mg/mL、约36mg/mL、约37mg/mL、约38mg/mL、约39mg/mL、约40mg/mL、约41mg/mL、约42mg/mL、约43mg/mL、约44mg/mL、约45mg/mL、约46mg/mL、约47mg/mL、约48mg/mL、约49mg/mL和约50mg/mL。

在一个实施方案中，药物组合物包含灭菌并且任选贮存在各种容器内的水溶液。在某些实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽可用来制备用于注射的预先配制的溶液。在其它实施方案中，药物组合物包含冻干粉末。药物组合物可进一步包装为试剂盒的一部分，该试剂盒包括用于对患者施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的一次性装置。可将容器或试剂盒标记以便在室内环境温度贮存或在冷藏温度贮存。

在一个实施方案中，试剂盒具备用于对患者施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的装置，例如注射器针头、笔装置、喷射注射器或其它无针注射器。或者或此外，试剂盒可包括一种或多种容器，例如，小瓶、药管、药瓶、单腔或多腔预填注射器、药盒、输注泵（外用的或可植入的）、喷射注射器、预填笔装置和类似容器，任选含有呈冻干形式或呈水溶液的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。优选地，试剂盒也要包括使用说明书。在某些实施方案中，试剂盒的装置是气溶胶分配装置，其中半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是预先包装在所述气溶胶装置内。在另一个实施方案中，试剂盒包含注射器和针头，并且在一个实施方案中，无菌的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是预先包装在所述注射器内。

可使用任何标准的施用路线对患者施用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，所述施用路线包括肠胃外路线，诸如静脉内路线、腹腔内路线、皮下路线或肌肉内路线、鞘内路线、透皮路线、直肠路线、口服路线、鼻腔路线或通过吸入施用。（例如）经1、2、3、4、5、6、7、8、12或24小时时期的肠胃外注射或连续输注是可能的。在某些实施方案中，包含半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的药物组合物是经由肠胃外注射来施用，例如通过皮下注射、静脉内注射或肌肉内注射来施用。

在某些实施方案中，药物组合物包含本公开的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体和/或一种或多种药学上可接受的成分。在此以引用方式全部并入本文的Remington’sPharmaceutical Sciences，第十六版，E.W.Martin（Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1980）公开了用于配制药学上可接受的组合物的各种组分和用于制备所述组分的已知技术。除非任何惯用药剂与药物组合物不相容，否则涵盖其在药物组合物中的使用。补充的活性成分也可合并到所述组合物中。

在某些实施方案中，药学上可接受的成分选自由以下组成的群组：糖（例如，葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乳糖、果糖、麦芽糖、葡聚糖、甘油、葡聚糖、蜜二糖、松三糖、棉籽糖、甘露三糖、水苏糖、麦芽糖、乳果糖、麦芽酮糖或异麦芽酮糖，或这些糖的组合）、糖醇（例如，乙二醇、甘油、赤藓醇、苏糖醇、阿糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露醇、山梨糖醇、半乳糖醇、艾杜糖醇、异麦芽糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇或葡糖醇，或这些糖醇的组合）、盐（例如，氯化钠）、乳化剂或表面活性剂（例如，聚山梨醇酯（诸如聚氧乙烯20去水山梨糖醇单油酸酯）或氧化乙烯和氧化丙烯的其它嵌段共聚物）、冻干保护剂，和其混合物。例如，诸如糖或糖醇的赋形剂是以（例如）约20mg/mL至约40mg/mL或25至45mg/mL（诸如35mg/mL）的浓度存在。

可配制药物组合物以达到生理学相容的pH，例如约pH4至约pH11。在某些实施方案中，药物组合物的pH是（例如）约7至10。在其它实施方案中，药物组合物的pH是（例如）约4至7或4.5至约5.5，例如约5。

在某些实施方案中，药物组合物可包含缓冲剂以达到生理学相容的pH。缓冲剂可包括能够在所需的pH下进行缓冲的任何化合物，诸如，磷酸盐缓冲液（例如PBS）、三乙醇胺、Tris、N-二羟乙基甘氨酸、TAPS、N-三（羟甲基）甲基甘氨酸、HEPES、TES、MOPS、PIPES、二甲胂酸盐、MES、乙酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、组氨酸或其它药学上可接受的缓冲液。在某些实施方案中，缓冲液的浓度是至少0.5mM、至少1mM、至少5mM、至少10mM、至少20mM、至少30mM、至少40mM、至少50mM、至少60mM、至少70mM、至少80mM、至少90mM、至少100mM、至少120mM、至少150mM或至少200mM。在某些实施方案中，缓冲液的浓度不多于300mM，例如至多200mM、至多100mM、至多90mM、至多80mM、至多70mM、至多60mM、至多50毫米、至多40mM、至多30mM、至多20mM、至多10mM、至多5mM、至多1mM。例如，缓冲浓度可为约2mM至约100mM或约10mM至约50mM。

应了解，本文中描述的治疗方法、药物组合物、试剂盒和其它类似实施方案的全部描述涵盖的是肽包括其全部药学上可接受的盐、酯、共轭物或前体药物。本发明的特定实施方案在以下说明各种特征的非限制性实施例中进一步描述。所述实施例不应该解释为对本发明范畴的限制，因为根据本文中的全部公开可实践并且可以理解这些实施方案的许多变化形式。

示例性实施方案

A.示例性实施方案

在示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：

(a)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，

(b)选自由以下组成的群组的修饰：

(i)在位置i与i+4处的氨基酸侧链之间或位置j与j+3处的氨基酸侧链之间的内酰胺桥，其中i是12、13、16、17、20或24，并且其中j是17，和

(ii)所述类似物的位置16、20、21和24处的一个、两个、三个或所有的氨基酸由α,α-二取代的氨基酸取代，和

(c)1-10（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个其它氨基酸修饰；其保留了所需的GIP和GLP-1活性。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸是缺少咪唑侧链的氨基酸，任选是大的、芳香族氨基酸（例如，Tyr）。在任何示例性实施方案中，肽可在位置16与20处的氨基酸之间（例如在Glu与Lys之间）具有内酰胺桥。在任何示例性实施方案中，α,α-二取代的氨基酸可为AIB并且任选位置16处的氨基酸是正电荷的氨基酸。在任何示例性实施方案中，带正电荷的氨基酸是式IV的氨基酸：

[式IV]，

其中n是1至7，其中R1和R2各自独立地选自由以下组成的群组：H、C₁-C₁₈烷基、(C₁-C₁₈烷基)OH、(C₁-C₁₈烷基)NH₂、(C₁-C₁₈烷基)SH、(C₀-C₄烷基)(C₃-C₆)环烷基、(C₀-C₄烷基)(C₂-C₅杂环)、(C₀-C₄烷基)(C₆-C₁₀芳基)R₇和(C₁-C₄烷基)(C₃-C₉杂芳基)，其中R₇是H或OH，并且式IV氨基酸的侧链包含游离氨基；任选同型Lys、Lys、Orn或2,4-二氨基丁酸（Dab）。

在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：位置10处的酰化的氨基酸，或包含酰化的氨基酸的1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸的延伸链；进一步任选具有(i)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，和(ii)以下至少一个或两者：(A)位置i与i+4处的氨基酸侧链之间或位置j与j+3处的氨基酸侧链之间的内酰胺桥，其中i是12、13、16、17、20或24，并且其中j是17；和(B)所述类似物的位置16、20、21和24处的一个、两个、三个或所有的氨基酸由α,α-二取代的氨基酸取代，和(iii)最多十（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个其它氨基酸修饰。位置16处的氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

在任何示例性实施方案中，所述肽在位置27、28和29的一个、两个或所有位置处也包含氨基酸修饰，例如其中(a)位置27处的Met由大的脂肪族氨基酸取代，任选是Leu，(b)位置28处的Asn由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Ala，(c)位置29处的Thr由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Gly，或(d)(a)、(b)和(c)的两个或全部的组合。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如，AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链；所述延伸链的1-6氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

B.示例性实施方案

在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：位置10处的酰化的氨基酸，或包含酰化的氨基酸的1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸的延伸链；任选具有(i)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，和(ii)以下至少一个或两者：(A)位置i与i+4处的氨基酸侧链之间或位置j与j+3处的氨基酸侧链之间的内酰胺桥，其中i是12、13、16、17、20或24，并且其中j是17；和(B)所述类似物的位置16、20、21和24处的一个、两个、三个或所有位置处的氨基酸由α,α-二取代的氨基酸取代，和(iii)最多十（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个其它氨基酸修饰；其保留了所需的GIP和GLP-1活性。位置16处的氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

在任何示例性实施方案中，所述肽在位置27、28和29的一个、两个或所有位置处也包含氨基酸修饰，例如其中(a)位置27处的Met由大的脂肪族氨基酸取代，任选是Leu，(b)位置28处的Asn由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Ala，(c)位置29处的Thr由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Gly，或(d)(a)、(b)和(c)的两个或全部的组合。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如，AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链；所述延伸链的1-6氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：(a)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，例如，所述氨基酸修饰是由缺少咪唑侧链的氨基酸取代His，(b)位置i与i+4处的氨基酸侧链之间或位置j与j+3处的氨基酸侧链之间的内酰胺桥，其中i是12、13、16、17、20或24，并且其中j是17，(c)位置27、28和29处的一个、两个或所有位置处的氨基酸修饰(d)1-9（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个其它氨基酸修饰；其保留了所需的GIP和GLP-1活性。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸是缺少咪唑侧链的氨基酸，任选是大的、芳香族氨基酸（例如，Tyr）。在任何示例性实施方案中，肽可在位置16与20处的氨基酸之间（例如在Glu与Lys之间）具有内酰胺桥。在任何示例性实施方案中，所述肽也包含(a)位置27处的Met由大的脂肪族氨基酸取代，任选是Leu，(b)位置28处的Asn由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Ala，(c)位置29处的Thr由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Gly。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如，AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链；所述延伸链的1-6氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：(a)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，(b)所述类似物的位置16、20、21和24处的一个、两个、三个或所有的氨基酸由α,α-二取代的氨基酸取代，例如AIB，(c)位置27、28和29处的一个、两个或所有位置处的氨基酸修饰，和(d)1-9（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9）个其它氨基酸修饰；其保留了所需的GIP和GLP-1活性。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸是缺少咪唑侧链的氨基酸，任选是大的、芳香族氨基酸（例如，Tyr）。在任何示例性实施方案中，肽可在位置16与20处的氨基酸之间（例如在Glu与Lys之间）具有内酰胺桥。在任何示例性实施方案中，所述肽也包含(a)位置27处的Met由大的脂肪族氨基酸取代，任选是Leu，(b)位置28处的Asn由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Ala，(c)位置29处的Thr由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Gly。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如，AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链；所述延伸链的1-6氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

在某些示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其特征如下：(a)位置1处的氨基酸修饰，其带来GIP激动剂活性，(b)位置16处的式IV氨基酸：

[式IV]，

其中n是1至7，其中R1和R2各自独立地选自由以下组成的群组：H、C₁-C₁₈烷基、(C₁-C₁₈烷基)OH、(C₁-C₁₈烷基)NH₂、(C₁-C₁₈烷基)SH、(C₀-C₄烷基)(C₃-C₆)环烷基、(C₀-C₄烷基)(C₂-C₅杂环)、(C₀-C₄烷基)(C₆-C₁₀芳基)R₇和(C_1-C₄烷基)(C₃-C₉杂芳基)，其中R₇是H或OH，并且式IV氨基酸的侧链包含游离氨基，(c)位置20处的α,α-二取代氨基酸，例如AIB，(d)位置27、28和29的一个、两个或所有位置处的氨基酸修饰，和(e)1-9（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9）个其它氨基酸修饰；其保留了所需的GIP和GLP-1活性。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸是缺少咪唑侧链的氨基酸，任选是大的、芳香族氨基酸（例如，Tyr）。在任何示例性实施方案中，所述肽也包含(a)位置27处的Met由大的脂肪族氨基酸取代，任选是Leu，(b)位置28处的Asn由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Ala，(c)位置29处的Thr由小的脂肪族氨基酸取代，任选是Gly。在任何示例性实施方案中，(b)中的式IV氨基酸包含同型Lys、Lys、Orn或2,4-二氨基丁酸（Dab）。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如，AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链；所述延伸链的1-6氨基酸任选是带正电荷的氨基酸。

其它任选的修饰包括

(a)位置2处的Ser由D-Ser、Ala、D-Ala、Gly、N-甲基-Ser、AIB、Val或α-氨基-N-丁酸取代；

(a)位置10处的Tyr由Trp、Lys、Orn、Glu、Phe或Val取代；

(b)酰基与位置10处的Lys的连接；

(c)位置12处的Lys由Arg或Ile取代；

(d)位置16处的Ser由Glu、Gln、同型谷氨酸、同型半胱氨酸、Thr、Gly或AIB取代；

(e)位置17处的Arg由Gln取代；

(f)位置18处的Arg由Ala、Ser、Thr或Gly取代；

(g)位置20处的Gln由Ser、Thr、Ala、Lys、瓜氨酸、Arg、Orn或AIB取代；

(h)位置21处的Asp由Glu、同型谷氨酸、同型半胱氨酸取代；

(i)位置23处的Val由Ile取代；

(j)位置24处的Gln由Asn、Ser、Thr、Ala或AIB取代；和

(k)位置2、5、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、24、27、28、和29中任何位置处的保守取代。

C.示例性实施方案

在示例性实施方案中，半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是具有GIP激动剂活性的胰高血糖素（SEQ ID NO:1）的类似物，其包含：

(a)位置1处包含咪唑侧链的氨基酸，

(b)位置16处的式IV氨基酸：

[式IV]

其中n是1至7，其中R1和R2各自独立地选自由以下组成的群组：H、C1-C18烷基、(C1-C18烷基)OH、(C1-C18烷基)NH2、(C1-C18烷基)SH、(C0-C4烷基)(C3-C6)环烷基、(C0-C4烷基)(C2-C5杂环)、(C0-C4烷基)(C6-C10芳基)R7和(C1-C4烷基)(C3-C9杂芳基)，其中R7是H或OH，并且式IV氨基酸的侧链包含游离氨基，

(c)位置20处的α,α-二取代的氨基酸，

(d)相对于SEQ ID NO:1最多十（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个额外氨基酸修饰；保留了所需的GIP和GLP-1活性。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸可为His或His衍生物。在任何示例性实施方案中，(b)中的式IV氨基酸可为同型Lys、Lys、Orn或2,4-二氨基丁酸（Dab）。在任何示例性实施方案中，α,α-二取代的氨基酸包含R1和R2（其各自与α碳键合），其中R1和R2各自独立地选自由C1-C4烷基（任选由羟基、酰胺、硫醇、卤素取代）组成的群组，或R1和R2和与其连接的α碳一起形成环；并且任选是AIB。位置2处的氨基酸任选是DPP-IV保护性氨基酸，例如α,α二取代的氨基酸（例如AIB）。在任何示例性实施方案中，所述肽具有C末端酰胺或酯。在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸（例如，GPSSGAPPPS）的延伸链或保守取代的序列。

D.示例性实施方案

在示例性实施方案中，本公开的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是包含以下的原生胰高血糖素的类似物：(i)位置1处包含咪唑侧链的氨基酸，(ii)位置2处的DPP-IV保护性氨基酸，(iii)任选位置9、10、12、16、20或37-43中任何位置处的酰化氨基酸或烷基化氨基酸，其中任选酰基或烷基经由间隔基连接到所述氨基酸；(iv)位置16-21中一个或多个位置处的α螺旋稳定氨基酸，和(v)相对于原生胰高血糖素的最多十（例如，最多2、3、4、5、6、7、8、9或10）个其它氨基酸修饰，其保留了所需的GIP和GLP-1活性的。

在本部分的任何示例性实施方案中，位置1处的氨基酸可为His或His衍生物。在任何示例性实施方案中，位置2处的氨基酸是α,α-二取代的氨基酸。在任何示例性实施方案中，α,α-二取代的氨基酸包含R1和R2（其各自与α碳键合），其中R1和R2各自独立地选自由C1-C4烷基（任选由羟基、酰胺、硫醇、卤素取代）组成的群组，或R1和R2和与其连接的α碳一起形成环；并且任选是AIB或ACPC。在任何示例性实施方案中，所述胰高血糖素类似物位置20处包含诸如α,α二取代的氨基酸的α螺旋稳定氨基酸。

在任何示例性实施方案中，所述肽包含1至21氨基酸C末端向位置29处的氨基酸的延伸链，其包含形成Trp笼结构的氨基酸序列；任选是GPSSGAPPPS或其保守取代序列；并且任选包含至少一个带电荷的氨基酸。

实施例

实施例1：具有约5天延长半衰期的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是良好耐受的

在健康男性受试者中进行I期、随机、安慰剂对照、连续、单一递增、两时期研究以评定半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的安全性、耐受性、药物动力学（PK）和药效学（PD）性质。基于病史、体检、ECG和常规实验室测试（例如，血液、化学、血常规、尿检和药物筛检）选择体重指数在20kg/m²与30kg/m²之间的健康成年男性受试者（约18至55岁）用于研究。在所有实施例中测试的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽都是是SEQ ID NO:153。

将受试者随机分为若干队。第1、2、3、4、5和6队各自由6名分别接受0.1mg、0.3mg、1mg、2mg、4mg和8mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。第1’、2’和3’队各自由6名分别接受16mg、24mg和32mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。

至少10小时的整夜禁食之后，受试者接受单一剂量的研究药物或安慰剂的腹部皮下注射（SC）。在第1日和第2、3、4、5、6和7日用药前（即在用药之前30分钟以内），采集血液样品来分析空腹胰岛素、葡萄糖和胰高血糖素水平。在第1日和第2、3、4、5、6、7、14、28和35日用药前和用药后0.5、1、2、4、8和12小时，采集用于药物动力学的血浆样品。在第35日监测受试者的不良事件、体重和生命体征。

在研究期间，血浆AUC_0-τ、AUC_0-inf和C_max随研究药物的剂量而增加并且表观t_1/2是大约5天。在0.1mg至32mg的剂量范围下，认为半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是与AUC和C_max是剂量成比例的。在0.1mg剂量时，平均C_max是183pM，AUC（AUC_0-144）是12,349pM·hr。在8mg剂量时，平均C_max是12,989pM，AUC（AUC_0-144）是1,382,376pM·hr。在32mg剂量时，平均C_max是54.8nM，AUC（AUC_0-最终）是12,582nM·hr。

以最低量的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽用药的受试者（16mg，112.5h）的最大观察血浆浓度的时间（T_max）比以更高浓度的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽用药的那些受试者（24mg，56.0h；32mg，80.0h）的高。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的绝对生物可用度是100%并且其堆积指数是1.7至2倍。治疗通常是安全和良好耐受的。

正如对健康受试者的预料，没有观察到空腹胰岛素、葡萄糖和胰高血糖素水平的与剂量相关的趋势。然而，与安慰剂组相比，截至第7日，治疗组的平均每天空腹葡萄糖水平在数字上倾向于更大降低（安慰剂：78.7mg/dL；16mg剂量：76.5mg/dL；24mg剂量：72.7mg/dL；32mg剂量：71.7mg/dL）。虽然这些降低是在研究的健康受试者的正常范围以内，但是患有糖尿病的患者中的下降幅度在临床上可能是重要的。

实施例2：半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽以剂量依赖性方式增加胰岛素分泌

在健康男性和女性受试者中进行I期、随机、安慰剂对照、阳性对照双组研究以评定一定范围的剂量对β-细胞对葡萄糖负荷应答的作用以及评定这些剂量对胃排空的作用。β-细胞功能是通过计算应答梯度葡萄糖输注的肝前胰岛素分泌来评定。胃排空是通过测量吸收的醋氨酚的血浆质貌来评定。

第1组（第1队）中的受试者在第1日接受相隔2小时的安慰剂的两次腹部皮下注射（SC），接着第2日接受相隔2小时（总共10μg）的BYETTA（AmylinPharmaceuticals）的两次5μg腹部皮下注射（SC）。在第2组，第2队的受试者在第1日接受安慰剂，接着在第2日接受8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。第3队的受试者在第1日接受安慰剂，接着在第2日接受4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。第4队的受试者在第1日接受安慰剂，接着在第2日接受16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。

第1组（第1队）

在第1日，≥10小时的整夜禁食之后，第1组（第1对）的受试者在-120分钟接受安慰剂的单一SC注射。在-120分钟，测量体重以计算梯度葡萄糖输注。在-120、-15和-10分钟，抽取血液样品用于葡萄糖、C-肽、胰岛素和安全性实验室测试。在-10分钟，受试者用240mL水摄入1000mg醋氨酚酏剂。在0分钟，开始葡萄糖（20%右旋糖）的逐步输注，施用安慰剂的第二次SC注射，并且抽取血液样品用于葡萄糖、C-肽、胰岛素和安全性实验室测试。葡萄糖是以2、4、6、8和12mg/kg/min的速率经总共2.5小时来输注。各水平的葡萄糖输注保持30分钟。在各30分钟输注期间，在10、20和30分钟再次抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10、30、60、90、120、150、180、210、240、300和480分钟抽取血液样品来分析血浆醋氨酚浓度。在210分钟，进行12导联ECG。

在第2日，≥10小时的整夜禁食之后，第1队的受试者在-120分钟通过SC注射接受5μg BYETTA。在-120、-15和-10分钟抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10分钟，受试者用240mL水摄入1000mg醋氨酚酏剂。在0分钟，开始葡萄糖（20%右旋糖）的逐步输注，受试者接受5μg BYETTA的第二次SC注射，并且抽取血液样品用于C-肽、胰岛素、葡萄糖和安全性实验室测试。葡萄糖是以2、4、6、8和12mg/kg/min的速率经总共2.5小时来输注。各水平的葡萄糖输注保持30分钟。在0、60和120分钟抽取血液样品来分析BYETTA浓度。在各30分钟输注期间，在10、20和30分钟抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10、30、60、90、120、150、180、210、240、300和480分钟抽取血液样品来分析血浆醋氨酚浓度。在210分钟，进行12-导联ECG。

在第3日，采集血液样品用于安全性实验室测试并且进行12-导联ECG。第1队的受试者在第3日晚上从研究地点被放走。

第2组（第2队至第4队）

在第1日，≥10小时的整夜禁食之后，第2组（第2至4队）的受试者在-120分钟接受安慰剂的单一SC注射。在-120分钟测量体重以计算梯度葡萄糖输注。在-15和-10分钟抽取血液样品用于葡萄糖、C-肽、胰岛素和安全性实验室测试。在-10分钟，受试者用240mL水摄入1000mg醋氨酚酏剂。在0分钟，开始葡萄糖（20%右旋糖）的逐步输注，并且抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。葡萄糖是以2、4、6、8和12mg/kg/min的速率经总共2.5小时来输注。各水平的葡萄糖输注保持30分钟。在各30分钟输注期间，在10、20和30分钟再次抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10、30、60、90、120、150、180、210、240、300和480分钟抽取血液样品来分析血浆醋氨酚浓度。在210分钟，进行12-导联ECG。

在第2日，≥10小时的整夜禁食之后，在-10分钟抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在0分钟，受试者接受半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽注射。第2队的受试者接受8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，第3队的受试者接受4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽，第4队的受试者接受16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。在0分钟，抽取血液样品用于半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽浓度、C-肽、胰岛素、葡萄糖和安全性实验室测试。在210分钟，进行12-导联ECG。

在第3日和第4日，采集血液样品用于安全性实验室测试。

在第5日（半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽用药72小时之后），≥10小时的整夜禁食之后，在-15分钟和-10分钟抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10分钟，受试者用240mL水摄入1000mg醋氨酚酏剂。在0分钟，开始葡萄糖（20%右旋糖）的逐步输注，并且抽取血液样品用于葡萄糖、C-肽、胰岛素、安全性实验室测试和半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽浓度。葡萄糖是以2、4、6、8和12mg/kg/min的速率经总共2.5小时来输注。各水平的葡萄糖输注保持30分钟。在各30分钟输注期间，在10、20和30分钟抽取血液样品来分析葡萄糖、C-肽和胰岛素。在-10、30、60、90、120、150、180、210、240、300和480分钟抽取血液样品来分析血浆醋氨酚浓度。在120分钟抽取血液样品来分析半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽浓度。在210分钟，进行12-导联ECG。

第组2队至第组4队中的受试者仍被限制在研究地点直到第7日晚上。在第6日和第7日，采集血液样品用于安全性实验室测试的血液。在第7日，进行12-导联ECG。

结果

在第1组，用BYETTA治疗之后观察到胰岛素分泌速率随着各次葡萄糖输注速率增加的葡萄糖剂量依赖性增加。在各葡萄糖输注速率（0.12μIU/mL每mg/dL）的安慰剂和BYETTA之间的胰岛素分泌速率的最小二乘法（LS）平均变化的治疗比较是统计上显著的（p<0.0001）。

与安慰剂相比，用BYETTA的治疗与显著的醋氨酚吸收延缓有关。用BYETTA治疗之后，受试者具有降低的C_max和从30分钟平移到210分钟的T_max。所述结果与公开的BYETTA胃排空作用一致。

在第2组，与安慰剂相比，用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽治疗之后观察到剂量依赖性、剂量成比例的胰岛素分泌速率（ISR）增加。在最大剂量（16mg）胰岛素分泌速率增加大约44%（p=0.001）。在各葡萄糖输注速率的安慰剂和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.07μIU/mL）、安慰剂和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.04μIU/mL）、安慰剂和4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.03μIU/mL）、8mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.03μIU/mL每mg/dL）、4mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.04μIU/mL每mg/dL）以及4mg和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.01μIU/mL每mg/dL）之间的胰岛素分泌速率的最小二乘法（LS）平均变化的治疗比较是统计上显著的（分别是p<0.001，p<0.001和p<0.001，p<0.0001，p<0.0001和p=0.0067）。结果在图1中说明。所有半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽剂量组比安慰剂组显示更高的胰岛素分泌速率。16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组在4mg/kg/min至12mg/kg/min葡萄糖输注速率一致地显示比其它2个的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽治疗组更高的胰岛素分泌速率。

一般来说，在所有葡萄糖输注速率，所有半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽剂量组具有比安慰剂组降低的葡萄糖水平。一般来说，与其它半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽剂量组相比，在各葡萄糖输注速率观察到16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组的平均葡萄糖值更低。对于16mg和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组，在8mg/kg/min与12mg/kg/min输注速率之间没有葡萄糖水平的增加。图2A说明对安慰剂和4mg剂量半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的比较结果。图2B说明对安慰剂和8mg剂量半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的比较结果。

在各葡萄糖输注速率下的安慰剂和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.43μIU/mL每mg/dL）、安慰剂和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.35μIU/mL每mg/dL）、安慰剂和4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.27μIU/mL每mg/dL）、8mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.08μIU/mL每mg/dL）、4mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.17μIU/mL每mg/dL）、4mg和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.09μIU/mL每mg/dL）之间的胰岛素LS平均变化的治疗比较是统计上显著的（分别是p<0.0001，p<0.0001，p<0.0001，p=0.0316，p<0.0001和p=0.0251）。

与观察到的胰岛素分泌速率增加一致，与安慰剂相比，用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽治疗之后观察到剂量依赖性、剂量成比例的C-肽水平增加（图3）。在各葡萄糖输注速率的安慰剂和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.05ng/mL每mg/dL）、安慰剂和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.03ng/mL每mg/dL）、安慰剂和4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.02ng/mL每mg/dL）、8mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.02ng/mL每mg/dL）、4mg和16mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.03ng/mL每mg/dL）和4mg和8mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽组（0.01ng/mL每mg/dL）之间的C肽LS平均变化的治疗比较是统计上显著的（分别是p<0.0001，p<0.0001，p<0.0001，p<0.0001，p<0.0001和p=0.0055）。一般来说，随着各次葡萄糖输注速率增加，用半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽治疗之后观察到葡萄糖剂量依赖性C-肽增加。

半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽与醋氨酚吸收显著的延缓无关。更高剂量的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽倾向于更低的C_max，但T_max并不显著地不同于安慰剂，总醋氨酚吸收（AUC_0-4hr）也不显著地不同于安慰剂。图4对在4mg、8mg和16mg剂量下的BYETTA与半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的（AUC_0-4hr）进行比较。半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在增加胰岛素分泌对葡萄糖输注应答的剂量下不会延缓胃排空。

4mg、8mg和16mg剂量的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在梯度葡萄糖输注期间以剂量依赖性方式增加胰岛素分泌而没有胃排空作用。施用4mg剂量半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者平均显示胰岛素分泌速率的增加、C-肽水平的增加和对葡萄糖输注应答的更低的葡萄糖水平。

实施例3：半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽在患有II型糖尿病的患者中的作用

在诊断患有2型糖尿病并且处于稳定的二甲双胍单一疗法（即，在研究之前以相同剂量施用至少约2个月）的男性和女性患者（18至70岁，HbA_1c水平为至少约6.5%并且不超过10.5%）中进行随机、安慰剂对照、连续、多剂量递增研究。其它标准包括110mg/dL至200mg/dL的空腹葡萄糖水平、27kg/m²至40kg/m²的体重指数、收缩压小于155mmHg、舒张压小于95mmHg，并且没有显著的其它疾病或并发症病史。

将患者随机分成4队。第1队由8名接受4mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。第2队由8名接受12mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。第3队由8名接受20mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。第4队由8名接受30mg半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的患者和2名接受安慰剂的患者组成。

患者在第1、8、15、22、29和36日接受总共6次每周一次的SC剂量的研究药物。在第1、4、36、43和50日进行进餐耐量试验。在这几天，整夜禁食（即10小时）之后，获取血液样品来分析空腹胰岛素、葡萄糖、胰高血糖素和C-肽。患者经约10分钟摄入Sustacal早餐（16oz）。开始Sustacal摄取10分钟之后再次获取的血液样品来分析胰岛素、葡萄糖、胰高血糖素和C-肽，Sustacal摄取结束之后经3小时继续。接着进餐耐量试验，患者接受研究药物的单一SC注射（第4和43日除外）。在注射研究药物之前和之后获取一系列定时的血浆PK血液样品。

每周至少记录6次在家的毛细管葡萄糖值（Home capillary glucose values）。贯穿本研究，定期测量的分析物包括化学分析物（例如，碱性磷酸酶、淀粉酶、钠、钾、总蛋白、钙、氯离子、碳酸氢盐、葡萄糖、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸转氨酶、白蛋白、天冬氨酸转氨酶、总/直接/间接胆红素、血尿素氮、肌酸酐）、血常规分析物（例如，血红蛋白、红细胞压积、红细胞计数、白细胞计数和分类、平均红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞计数、平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白、血小板计数）、脂质（例如，低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三酯）、凝结（例如，活化部分凝血活酶时间、前凝血酶时间、国际标准化比值）、尿检中获取的分析物（例如，pH、比重、蛋白质、葡萄糖、白血球酯酶、胆红素、血液、硝酸盐、酮）和促卵泡激素。

评定了药物动力学学参数。此外，评定的药效学参数包括胰岛素、葡萄糖、胰高血糖素、C-肽、HbA_1c和果糖胺。希望半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用将在一个或多个这些参数中产生生物学应答。例如，可观察到胰岛素水平的升高、葡萄糖水平的降低、C-肽水平的升高、HbA_1c水平的降低、果糖胺水平的降低，和其组合。

本文中引用的所有参考文献（包括公布、专利申请和专利）均以引用方式并入本文，达到如同逐一个别地和特别地指出的将各参考文献以引用方式将各参考文献并入本文以及并且在本文中全部阐述的相同程度。

除非另外在文中指出或明显与上下文矛盾，否则描述本发明的上下文中（特别是在以上权利要求书的上下文中）的术语“一（个/种）”和“所述”以及类似指示对象视为同时包括单数和复数。除非另有说明，否则术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”应解释为开放式术语（即，表示“包括但不限于”）。

本文中叙述的数值范围仅意欲作为逐一地提及属于所述范围的各单独的数值的简写方法，并且将各端点（除非另外在文中指出）和各单独的数值和端点并入本说明书，如同其个别地在本文中叙述一样。

除非另外在文中指出或明显与上下文矛盾，否则本文中描述的所有方法可以任何适当的顺序进行。除非另外声明，否则使用的任何和所有实施例，或本文中提供的示例性语言（例如“诸如”）仅是为了更好地阐明本发明并且不对本发明的范畴构成限制。不应该将说明书中的语言理解为指示的任何未提出权利要求的要素对本发明的实践是必需的。

本文中描述了本发明的优选实施方案，包括为本发明人所知的实现本发明的最佳方式。在理解上述描述的基础上，那些优选实施方案的变化形式对本领域的普通技术人员而言可变得显而易见。本发明人希望熟练的技术人员会适当地使用此类变化形式，并且本发明人希望本发明以本文中特定描述之外的形式实践。因此，经适用的法律许可，本发明包括所有在此附加的权利要求中叙述的主题的所有修改形式和等价形式。此外，除非另外在文中指出或明显与上下文矛盾，否则本发明在所有可能的变化形式中涵盖上述要素的任何组合。

Claims (24)

1.一种减少体重增加或诱导体重减轻的方法，其包括对有需要的成人施用周剂量为约1mg至约40mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述周剂量是约2mg至约10mg。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述成人患有体重过重、II型糖尿病、胰岛素抵抗、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝病（NAFLD）或代谢综合症。

4.一种治疗高血糖、降低血糖水平或使血糖水平正常化的方法，其包括对有需要的成人施用周剂量为每周约1mg至约40mg的半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述周剂量是约2mg至约10mg。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述成人患有I型糖尿病、II型糖尿病或妊娠期糖尿病。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是每周施用一次。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是每周施用两次。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的GLP-1效价百分比在GIP效价百分比的约10倍以内。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的GLP-1受体的EC₅₀是在GIP受体的EC₅₀的约10倍以内。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示至少1%的GIP效价百分比或至少1%的GLP-1效价百分比。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽显示的半衰期是约4天至约7天。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽包含分子量为约30,000道尔顿至约60,000道尔顿的聚乙二醇部分。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述聚乙二醇部分的分子量是约40,000道尔顿。

15.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是SEQ ID NO:5-94、99-169、173-413中任何一个，或是与SEQ ID NO:5-94、99-169、173-413中任何一个相比包含最多6个氨基酸修饰的氨基酸序列。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述GLP-1/GIP协同激动肽是SEQID NO:75、99-103、140、153、166和261中任何一个，或是与SEQ ID NO:75、99-103、140、153、166和261中任何一个相比包含最多6个氨基酸修饰的氨基酸序列。

17.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其进一步包括施用第二治疗剂。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述第二治疗剂是抗糖尿病剂。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述第二治疗剂是抗肥胖剂。

20.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是以药物组合物来施用。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述药物组合物是经由皮下注射、静脉内注射或肌肉内注射来施用。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述药物组合物是通过皮下注射来施用。

23.根据权利要求1或4所述的方法，其中半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽的施用引起胰岛素水平升高、葡萄糖水平降低、C-肽水平升高、HbA_1c水平降低、或果糖胺水平降低或其任何组合。

24.根据权利要求20-23中任一项所述的方法，其中所述半衰期延长的GLP-1/GIP协同激动肽是由预先填充的注射器来施用。

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