CN103393634B - 一种治疗消化系统疾病的药物组合物及制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗消化系统疾病的药物组合物及制备方法和用途，其药物组合物由以下组分及重量比组成：苍术酮5～20重量份，厚朴酚5～20重量份。本发明由天然药用原料的有效成分组合而成，无须煎煮服用，具有疗效好，无毒副作用，不易产生耐受性，可制备成片剂、胶囊、丸剂、颗粒剂、口服液等，便于携带，服用方便等优点，各味药物在提取组方前后均无毒无害，正常剂量服用时没有发现任何副作用，普遍适用于消化系统疾病患者。

Description

一种治疗消化系统疾病的药物组合物及制备方法和用途

技术领域

本发明属于药物领域，涉及一种治疗消化系统疾病的药物组合物，特别是涉及一种以中药饮片提取物为原料制成的用于治疗消化系统疾病的药物组合物及制备方法。

背景技术

随着生活节奏的加快，饮食无规律或工作压力的增大，导致越来越多的人患上消化系统疾病，例如各种胃炎、肠炎、十二指肠溃疡等，胃肠是消化系统的主要组成部分，是消化食物、吸收营养的主要器官，一旦出现异常将会严重影响人们的身体健康，且胃肠病一般都具有病程长、治疗见效慢、费用高、愈后易复发等特点。对于该类疾病的治疗，目前多采用合成的化学药物进行对症治疗，虽然具有较为确切的临床疗效，但是毒副作用明显，且容易复发。辨证论治是中医的特色，对于该类疾病的治疗具有明显的优势。随着现代科技的进步，多学科的交叉与融合，对于传统的中医中药进行现代化的深入研究，以期利用现代科技开发出疗效显著，毒副作用小的天然药物。

苍术始载于《神农本草经》，为菊科苍术属的草本植物，分布在江苏、湖南、吉林、河南、山西、四川、河北等地，其主要化学成分为苍术素、苍术酮、茅术醇、β-桉油醇、榄香油醇等。厚朴始载于《神农本草经》，木兰属植物，分布在陕西、甘肃、河南、湖北、湖南、四川、贵州、广西、江西等地，其主要化学成分为厚朴酚、四氢厚朴酚、异厚朴酚、β-桉叶醇、生物碱等。现代科学对于苍术、厚朴的化学成分及每个成分的药理药效研究目前已较为深入，但是对其各化学成分或有效部位之间相互配伍后的药理药效研究则甚少。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种由天然药用原料的有效成分或其药用原料提取物组合而成的具有治疗消化系统疾病的药物组合物。该药物组合物具有疗效好，无毒副作用，不易产生耐受性，服用方便，普遍适用于消化系统疾病患者。

本发明的另一个目的在于提供一种该药物组合物的制备方法和用途。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

该药物组合物是由以下原料及重量比组成：苍术酮1～20重量份，厚朴酚5～30重量份；优选地，苍术酮5～18重量份，厚朴酚7～25重量份；优选地，苍术酮7～15重量份，厚朴酚10～20重量份；优选地，苍术酮10重量份，厚朴酚15重量份；优选地，苍术酮10重量份，厚朴酚10重量份。本发明所述的苍术酮为中药饮片苍术中提取分离后得到的提取物；所述的厚朴酚为中药饮片厚朴中提取分离后得到的提取物。

本发明的药物组合物可以根据制药领域的常规方法制备成任何一种药剂学上所述的剂型；本发明的药物组合物可以通过口服、吸入或肠外给药的方式施用于患者。口服给药时可以制备成片剂、泡腾片、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、糖浆或口服液等；在肠外给药时可以制备成冻干粉针及注射液等。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。

本发明药物组合物的制备方法，它包括以下步骤：S1：按前述组分及重量比称取原料；S2：将原料混合均匀后，加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。

本发明所述的药物组合物在制备治疗消化不良药物中的应用。

本发明所选用初始原料苍术和厚朴为2010版《中国药典》第一部收载的中药或其炮制品。其中苍术具有燥湿健脾，祛风湿的功效，厚朴具有燥湿行气，消积平喘的功效。

本发明的有益效果是：

（1）本发明提供一种由天然药用原料的有效成分组合而成的具有治疗消化系统疾病的药物组合物及该药物组合物的制备方法和用途，具有疗效好，无毒副作用，不易产生耐受性，服用方便，普遍适用于消化系统疾病患者等优点；

（2）本发明药物组合物具有良好的兼顾性，除对消化系统疾病患者具有良好的治疗效果外，对免疫力功能低下均有较好的治疗作用。

（3）苍术酮、厚朴酚在单独应用是对湿阻中焦消化系统疾病治疗作用不明显，当两种成分组合配伍后在对湿阻中焦消化系统疾病具有较好的治疗作用。

具体实施方式

下面结合实施例进一步详细描述本发明的技术方案，但本发明的保护范围不局限于以下所述。

实施例1：

苍术酮的制备：称取苍术饮片粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中萃取，得萃取物，然后注入到分子蒸馏器内进行2级分子蒸馏，其中第1级蒸馏的蒸发面温度为60～90℃，压力为100～150Pa，蒸馏时间40～80min，收集馏出物进行第2级蒸馏，蒸发面温度为30～50℃，压力为60～80Pa，蒸馏40～80min，收集馏出物，加入丙酮，冷藏析晶，分离结晶、洗涤、干燥即得。除本方法制备苍术酮之外，也可以采用其它常规方法制备。

实施例2：

厚朴酚的制备：称取厚朴饮片粉碎，加入氢氧化钠溶液提取2次，过滤得碱提液；向碱提液中加入盐酸，调节溶液PH至2～3，并且搅拌2～3小时，静置14小时，板筛过滤，滤液保存，沉淀物水洗至中性，进入下一步骤；将沉淀物使用浓度重量含量为70%的乙醇溶解，加热提取，过滤，得滤液I；向滤液I中加入除杂剂，静置12小时，过滤，得滤液II；将滤液II过混合树脂，静置2小时后，分离溶液水洗至为无色溶液；洗脱步骤是先使用氢氧化钠溶液洗至颜色变浅，再用3倍于混合树脂体积的氢氧化钠与4倍于混合树脂体积的的氢氧化钠溶液分别进行洗脱，收集制成无色溶液；向无色溶液中加入盐酸溶液，调节溶液的PH值至2～3沉淀，静置，结晶得结晶体；将结晶体经真空干燥即得。除本方法制备厚朴酚之外，也可以采用其它常规方法制备。

实施例3：

称取原料苍术酮10g，厚朴酚50g，加入辅料淀粉100g制粒，硬脂酸镁5g，糊精100g、微晶纤维素100g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例4：

称取原料苍术酮30g，厚朴酚50g，加入辅料淀粉120g制粒，硬脂酸镁5g，糊精110g、微晶纤维素110g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例5：

称取原料苍术酮50g，厚朴酚70g，加入辅料淀粉150g制粒，硬脂酸镁5g，糊精150g、微晶纤维素150g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例6：

称取原料苍术酮70g，厚朴酚100g，加入辅料淀粉200g制粒，硬脂酸镁6g，糊精200g、微晶纤维素200g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例7：

称取原料苍术酮100g，厚朴酚100g，加入辅料淀粉350g制粒，硬脂酸镁10g，糊精300g、微晶纤维素300g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例8：

称取原料苍术酮100g，厚朴酚150g，加入辅料淀粉400g制粒，硬脂酸镁10g，糊精350g、微晶纤维素300g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例9：

称取原料苍术酮150g，厚朴酚200g，加入辅料淀粉450g制粒，硬脂酸镁12g，糊精380g、微晶纤维素350g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例10：

称取原料苍术酮180g，厚朴酚250g，加入辅料淀粉600g制粒，硬脂酸镁15g，糊精500g、微晶纤维素500g，均匀制得颗粒，压片，得到片剂。

实施例11：

称取原料苍术酮200g，厚朴酚300g，加入辅料淀粉800g制粒，硬脂酸镁20g，糊精600g、微晶纤维素600g，均匀制得颗粒，装入胶囊，得到胶囊剂。

实施例12：

称取原料苍术酮10g，厚朴酚50g，加入辅料淀粉100g制粒，硬脂酸镁5g，糊精100g、微晶纤维素100g，均匀制得颗粒，装入胶囊，得到胶囊剂。

实施例13：

称取原料苍术酮30g，厚朴酚50g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成丸剂。

实施例14：

称取原料苍术酮50g，厚朴酚70g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成丸剂。

实施例15：

称取原料苍术酮70g，厚朴酚100g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成注射液。

实施例16：

称取原料苍术酮100g，厚朴酚100g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成注射液。

实施例17：

称取原料苍术酮100g，厚朴酚150g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成颗粒剂。

实施例18：

称取原料苍术酮150g，厚朴酚200g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成颗粒剂。

实施例19：

称取原料苍术酮180g，厚朴酚250g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成泡腾剂。

实施例20：

称取原料苍术酮200g，厚朴酚300g，按照常规工艺加入辅料淀粉，制备成泡腾剂。

下面通过具体的药学试验来验证本发明的有益效果：

1本发明组合物的水盐代谢试验

1.1试验材料

1.1.1试验动物

选用健康成年SD系大鼠70只，雌雄各半，体重18O～250g，成都中医药大学实验动物中心提供。试验前将动物称重，编号，随机分成正常对照组、湿阻造模组、平胃散组、自然恢复组、组合物组、苍术酮组和厚朴酚组，每组10只大鼠。

1.1.2实验仪器及试剂

LD5-2A型离心机(北京医用离心机厂制造)；数字显示移液器(芬兰雷勃集团中国总部生产)；赛多利斯Bp-61型电子天平(德国，分辨率0.1mg)；电解质分析仪(美国MediaCorporation，Bedford，MA01730)；一次性硬质塑料试管(四川省迈克科技有限责任公司提供)；ADH放免试剂盒（欧洲诊断公司生产）；ALD、ANP放免试剂盒（天津九鼎医学生物工程有限公司生产）。

1.2试验样品制备

（1）平胃散：苍术15g，厚朴9g，陈皮9g，甘草4g。将药物加凉水300mL浸泡30min后，加水500mL水煎10min，滤出药液；又加水500mL水煎15min，滤出药液：将两次滤液合并置70～80℃水浴浓缩得400mL，制成0.3g/mL浓度的中药煎剂，置于4℃冰箱里备用。

（2）组合物组：按照实施例8的配伍比例称取苍术酮1g，厚朴酚1.5g。加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

（3）苍术酮组：称取苍术酮1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

（4）厚朴酚组：称取厚朴酚1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

1.3试验方法及步骤

本实验采用湿阻中焦证模型，动物造模成功后，随机取1O只湿阻造模组大鼠及正常对照组大鼠10只于次日处死，测定ADH、ALD及ANP。剩下的大鼠于正常环境中饲养，平胃散组以0.6g/100g的原药材剂量每日灌胃1次，自然恢复组每日以常温等量的自来水灌胃，组合物组、苍术酮组及厚朴酚组均按照0.5mg/100g的剂量灌胃。于第4天灌胃后处死，测定血浆ADH、ALD及ANP。正常对照组大鼠于正常环境中喂养，温度19～25℃，相对湿度42～65％，自由进食饮水。

1.4指标检测方法

ADH、ALD及ANP：采用大鼠股动脉放血法取新鲜全血4mL，EDTA抗凝，并加抑肽酶400U，以4℃2000r/min离心分离血浆，-3O℃保存，以备测定ADH、ALD及ANP。按药盒要求用放免法测定血浆ADH、ALD及ANP的浓度，具体由四川大学华西医学中心基础同位素室检测。

Na⁺、K⁺：将邻苯二甲酸二丁酯0.6mL加入上面分离出血浆后所剩的血液中，充分摇匀，以4℃2000r/min离心，弃去分离剂和红细胞表面层，从其底层吸取红细胞0.4mL，注入内有3.6mL无离子水的试管中，用红细胞粉碎仪将红细胞粉碎，得红细胞稀释液，-3O℃保存，待测电解质Na⁺、K⁺。测定时将红细胞稀释液以2000r/min离心后，取上清0.2mL，用电解质分析仪测定，其结果为所测数据的10倍。

1.5统计学处理

运用SPSS统计软件进行数据处理，各组实验数据以表示，组间均数比较采用单因素方差分析。

1.6实验结果

(1)各组ADH、ALD及ANP的浓度比较(pg/mL)。结果见下表1：

表1各组ADH、ALD及ANP的浓度比较(pg/mL)

注：与正常对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；与模型组比较★P＜0.05，★★P＜0.01。

(2)各组电解质Na+、K+的比较(mmol/L)。结果见下表2：

表2各组电解质Na⁺、K⁺的比较(mmol/L)

注：与正常对照组比较，ΔP＜0.05，ΔΔP＜0.01；与模型组比较★P＜0.05，★★P＜0.01。

表1、表2结果显示模型组大鼠ADH较正常组显著升高，表明模型组大鼠远端肾小管与集合管水分重吸收加强，被保留在体内，有水、钠潴留现象。经平胃散及组合物治疗后，ADH基本恢复正常，说明两者均能通过抑制ADH释放，促使机体内潴留的水、钠排泄，从而调节机体水、电解质趋于平衡。经过苍术酮、厚朴酚治疗后ADH有所降低，其疗效低于平胃散和药物组合组。

模型大鼠ALD较正常组虽无显著性差异，但有明显升高的趋势，表明湿阻中焦证大鼠ALD分泌有增强的趋势，促进Na⁺、水的吸收及K⁺的排出，经各治疗组治疗后，ALD明显降低，说明各治疗组均可抑制ALD的分泌，但是平胃散组、组合物组优于苍术酮组和厚朴酚组。

研究结果还显示，湿阻中焦证大鼠细胞内Na+较正常组明显升高，K⁺明显降低，这与湿阻中焦证大鼠ADH的释放和ALD的分泌增强而进行的调节趋势完全一致。经过平胃散及药物组合物治疗后，Na⁺恢复至正常，无明显变化，说明平胃散及药物组合物能促进细胞内潴留的钠排泄，同时，不会使钾丢失，起到保钾排钠的作用。经过苍术酮组和厚朴酚组治疗后其治疗后Na⁺基本趋于正常，但作用明显低于平胃散组和组合物。

综上所述，在相同给药浓度条件下，苍术酮和厚朴酚组合后的疗效明显优于苍术酮和厚朴酚单独应用时的疗效，表明两种活性成分组合配伍之后具有协同增效的作用。

2本发明组合物对免疫功能的影响

2.1试验材料

2.1.1试验动物

选用健康成年SD大鼠70只，雌雄各半，体重180±220g，由成都中医药大学实验动物中心提供。试验前将动物称重，编号，随机分成空白对照组、模型组、治疗组、自然恢复组、组合物组、苍术酮组和厚朴酚组，一共七组，每组10只。

2.1.2实验仪器及试剂

550型酶标仪(BIORAD公司)、1575型半自动洗板机(BIORAD公司)、包埋机、切片机、光学显微镜、BI2000组织形态分析系统等。鼠白细胞介素6(II-6)试剂盒(RapidBioI公司)；鼠免疫球蛋白-G(IgG)试剂盒(ADRDIAGNOS—TICS公司)。

2.2试验样品制备

精炼纯猪油、0.9生理盐水、平胃散先按照临床用药煎煮方法制备常规药液，再低温浓缩成含生药lg/ml的高浓度药液。组合物组按照实施例8的配伍比例称取苍术酮1g，厚朴酚1.5g。加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。苍术酮组按照常规方法称取苍术酮1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。厚朴酚组按照常规方法称取厚朴酚1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

2.3试验方法及步骤

本实验采用湿阻中焦证模型，将大鼠放在温度18～25℃、湿度(9O±5%)的造模箱内饲养；造模鼠单日禁食并给予4℃冰水(2ml/只)灌胃1次，双日供应充足饲料并给予猪油(4ml/只)灌胃1次；每日8：00～l6：00令大鼠站在4cm深的水中，控制睡眠时间8小时。连续造模20天，治疗组和自然恢复组造模方法同模型组。治疗组造模20天后，给予平胃散灌胃(浓缩的原药液加等量蒸馏水稀释)10ml/kg体重(即5g生药/kg体重)，组合物组、苍术酮组及厚朴酚组均按照0.5mg/100g的剂量灌胃，共5天。同时空白对照组和自然恢复组灌胃0.9%生理盐水(10ml/kg)。模型组动物造模20天完成后处置、取样，其余各组5天后处置取样。

2.4指标检测方法

2.4.1脾脏、胸腺湿重及脏器系数

所有动物处置后取样，动物处死后将脾脏、胸腺等器官取出，立即在电子天平上称重，记录数值并计算脏器系数。

2.4.2脾脏、胸腺病理观察

所有动物处置后取样，打开腹腔，分别将脾脏、胸腺取出，立即浸泡10%的甲醛溶液中固定。常规HE染色，光学显微镜下观测并计量胸腺皮质厚度和脾脏中央动脉淋巴鞘直径。

2.4.3血清IL-6和IgG含量测定

所有动物处置前，采用股动脉放血法采血5ml，置于试管中，不抗凝，室温下静置1小时，2000转/分钟离心5分钟，分离血清，置-20℃冰箱保存，待测血清IL-6及IgG含量。

2.5统计学处理

运用SPSS统计软件进行数据处理，各组实验数据以表示，组间均数比较采用单因素方差分析。

2.6实验结果

2.6.1各组大鼠脾脏、胸腺湿重及脏器系数变化比较见表3。

表3各组大鼠脾脏和脾脏器系数变化比较()

注：与空白对照组比较，★P<0.01；与模型组比较，△P<0.05。

表4各组大鼠胸腺湿重和脏器系数变化比较()

注：与空白对照组比较，★P<0.01；与模型组比较，△P<0.05。

表3、表4所示，动物模型建成后模型组动物脾脏、胸腺湿重大幅下降(P<0.01)，自然恢复后有一定上升，但经本发明组合物治疗后恢复更为显著。模型组动物脾脏、胸腺脏器系数低于空白对照组，经本发明组合物治疗后恢复效果优于自然恢复组，但两组间差异无显著性意义。

2.6.2各组大鼠胸腺皮质厚度和脾脏中央动脉淋巴鞘直径变化比较

表5各组大鼠胸腺皮质厚度和脾脏中央动脉淋巴鞘直径变化比较(um，)

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.01；与模型组比较，△P<0.01。自然恢复组由于灌胃死亡1只，故动物数为9只。

表5示，模型组动物胸腺皮质厚度及脾脏中央动脉淋巴鞘直径明显变小(P<0.01)，但经各药物组治疗后，胸腺皮质厚度及脾脏中央动脉淋巴鞘直径有不同程度的恢复，其中药物组合物治疗后有明显恢复(P<0.01)。

2.6.3各组大鼠血清IL-6和IgG含量变化比较

表6各组大鼠血清IL-6和IgG含量变化比较（）

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.01；与模型组比较，△P<0.01。自然恢复组由于灌胃死亡1只，故动物数为9只。

表6示，模型组动物血清IL-6含量明显升高(P<0.01)，经各药物组治疗后，IL-6降低，其中组合物组治疗后IL-6降低最为明显(P<0.05)，与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01)；模型组动物血清IgG含量明显降低(P<0.05)，经各药物组治疗后IgG有升高趋势，效果优于自然恢复组，但差异无显著性意义。

综上述试验研究结果表明平胃散及组合物组均对湿困脾胃证大鼠模型的免疫功能异常具有明显改善作用。组合物组与苍术酮组、厚朴酚组相比，组合物组的治疗作用更为明显，表明在相同给药浓度条件下苍术酮、厚朴酚组合后的治疗作用优于单独应用的苍术酮、厚朴酚，表明两种活性成分组合配伍之后具有协同增效的作用。

3本发明组合物对肠粘膜的影响

3.1试验材料

3.1.1试验动物

选用健康成年SD大鼠70只，雌雄各半，体重180±220g，由成都中医药大学实验动物中心提供。试验前将动物称重，编号，随机分成空白对照组、模型组、治疗组、自然恢复组、组合物组、苍术酮组和厚朴酚组，一共7组，每组10只。

3.1.2实验仪器及试剂

D-乳酸测试盒(北京锐鑫农科贸有限公司，200809)，二胺氧化酶(DAO)测试盒(南京建成科技有限公司，20080706)，谷胱甘肽过氧化物(CsH—PX)测试盒(南京建成生物工程研究所20070529)，超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(南京建成生物工程研究所，20070528)，丙二醛(MDA)测试盒(南京建成生物工程研究所，20070614)，考马斯亮蓝测试盒(南京建成生物工程研究所，20070714)。

3.2试验样品制备

平胃散组：称取苍术24g，厚朴18g，陈皮12g，炙甘草6g，先将药物加水500ml浸泡1h，然后与大枣1Og、生姜6g一同煎煮至300ml左右，再浓缩成浓度为1g/ml生药的储备药液。组合物组按照实施例8的配伍比例称取苍术酮1g，厚朴酚1.5g。加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。苍术酮组按照常规方法称取苍术酮1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。厚朴酚组按照常规方法称取厚朴酚1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

3.3试验方法及步骤

本实验采用湿阻中焦证模型，动物造模成功后，将大鼠放在温度18～25℃、湿度(9O±5％)的造模箱内饲养。模型组于造模结束当日处死取材，其余各组3d后处死取材。股动脉取血，静置2h左右，低温离心机离心2000r·min^-1，5min，取上清，分装，-80℃冰箱冻存，待测D-乳酸含量和DAO活性。冰上取空肠组织各100mg，冰水匀浆。

GSH-Px、MDA：配制10％匀浆液，4℃3000r·min^-1，1Omin，离心取上清液，-80℃冰冻保存待测。SOD：配制1％匀浆液，4℃10000r·min^-1，15min，离心取上清液，-80℃冰冻保存待测；考马斯亮蓝测定蛋白含量：配制成2％匀浆液，4℃1500r·min^-1，10min，离心取上清液，-8O℃冰冻保存待测。

3.4统计学处理

运用SPSS13.0统计软件进行数据处理，各组实验数据以表示，组间均数比较采用单因素方差分析或非参数检验。

3.5实验结果

(1)血清D-乳酸含量及二胺氧化酶活性，结果见表7。

表7各组D-乳酸及DAO结果（）

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.1；与模型组比较，ΔP<0.05．ΔΔP<0.01。

由表7实验结果可知，模型组大鼠血清D-乳酸含量明显增高，与空白组比较有统计学意义(P<0.01)，给予药物治疗后含量降低，效果明显好于自然恢复。模型组大鼠二胺氧化酶活性降低，但与空白组比较无意义(P>0.05)；经组合物治疗后活性增高；自然恢复组与模型组比较无明显变化(P>0.05)。

（2）空肠GSH-Px活力、SOD活力、MDA含量变化，结果见表8。

表8空肠GSH-Px活力、SOD活力、MDA含量变化（）

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

如表8所述，造模后空肠GSH-Px活力显著下降(P<0.01)，经自然恢复有一定程度好转，但与空白对照组比较仍有差距(P<0.05)；经各药物组治疗后，活力显著恢复(P<0.05)，其中平胃散组和药物组合物组的疗效最为明显(P<0.01)。造模后空肠SOD活力显著下降(P<0．01)，自然状态下基本未恢复(与模型组比较，P>0.05)；经过各药物组治疗后，活力有明显恢复，其中平胃散和药物组合物组活力恢复最为显著(与模型组比较，P<0.01)，趋于正常。造模后MDA浓度升高(P<0.01)，自然状态下有一定程度回落，但与空白组及模型组均无统计学意义；经组合物治疗后，疗效趋势略好于自然恢复组，除药物组合物组有统计学意义之外，其余各组与空白组及模型组对照亦不具统计学意义。

综上所述，本发明组合物组能够提高SOD及GSH-Px活力，具有清除肠道自由基、抗脂质过氧化，保护抗氧化酶系统的作用，从而改善模型大鼠受损的肠道粘膜屏障。

4本发明组合物对胃肠功能的影响

4.1试验材料

4.1.1试验动物

选用健康成年SD大鼠70只，雌雄各半，体重180±220g，由成都中医药大学实验动物中心提供。试验前将动物称重，编号，随机分成空白对照组、模型组、平胃散组、自然恢复组、组合物组、苍术酮组和厚朴酚组，一共7组，每组10只。

4.1.2实验仪器及试剂

GastrinIEnzymeImmunoAssay，ADRDIAGNOSTICS，BatchNo．：050504。胃动素(MTL)放射免疫分析试剂盒，解放军总医院科技开发中心东亚免疫所提供，批号：0506。

4.2试验样品制备

平胃散由苍术12g，厚朴9g，陈皮6g，炙甘草3g组成，均购自同仁堂成都分店。药液由制剂室制备，先按照临床用药煎煮方法熬制成常规药液，再低温浓缩成含1g生药/ml的高浓度药液。组合物组按照实施例8的配伍比例称取苍术酮1g，厚朴酚1.5g。加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。苍术酮组按照常规方法称取苍术酮1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。厚朴酚组按照常规方法称取厚朴酚1g，加入蒸馏水制备成1mg/mL浓度的药液，置于4℃冰箱里备用。

4.3试验方法及步骤

本实验采用湿阻中焦证模型，将大鼠放在温度18～25℃、湿度(9O±5％)的造模箱内饲养。造模大鼠单日禁食并给予4℃冰水(2ml/只)灌胃1次，双日供应充足饲料并给予猪油(4ml/只)灌胃1次；每日8：00～16：00使大鼠站在4cm深的水中，控制睡眠时间8h。连续造模20d。平胃散组造模2Od后，灌胃治疗方药(10ml/kg)，组合物组、苍术酮组及厚朴酚组均按照0.5mg/100g的剂量灌胃，共5d。同时空白对照组和自然恢复组灌胃0.9％生理盐水(10ml/kg)。

4.4指标检测

4.4.1一般体征的观察

实验过程中密切观察大鼠的一般状态，如：饮水摄食情况、生长情况、体重、皮毛色泽等，造模及治疗结束后测量不同组大鼠体重、24h摄食量(代谢笼法)和腹围指数。

4.4.2胃肠相关指标的测定

胃排空及小肠推进实验采用半固体营养糊法，半固体营养糊：取羧甲基纤维素5g，溶于125ml蒸馏水中，然后依次加入奶粉8g，白糖6g，淀粉6g，且每加1次搅拌1次，搅拌均匀后，再加入少量伊红染料，搅拌均匀，最后配成150ml含150g营养糊的红色混合物，放入4℃冰箱储藏。使用前2h取出，恢复至室温。

胃排空试验：按公式计算胃残留百分比：胃残留率(%)=(第1次的胃总重-第2次的胃净重)/2×100%。

小肠推进试验：按公式计算小肠推进营养糊的百分比：小肠推进率(%)=营养糊在小肠中的推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100%

胃肠激素测定：所有组动物处置前，采用股动脉放血法采血5ml，置于试管中，不抗凝，室温下静置1h，离心5min，转速2000r/min，分离取血清，置-20℃冰箱保存，待测胃泌素、胃动素。

4.4.3胃肠组织形态学观察

所有组动物处置后取样，打开腹腔，肉眼观察胃肠组织形态，然后分别将胃、十二指肠、空肠、结肠取出，立即浸泡于10％的福尔马林液中固定。常规HE染色，光学显微镜下观测组织形态。

4.5统计学处理

运用SPSS13.0统计软件进行数据处理，各组实验数据以x±s表示，组间均数比较采用单因素方差分析或非参数检验。

4.6实验结果

4.6.1一般体征的观察

造模后模型组大鼠出现食欲不振，饮食量减少，大便溏，皮毛色泽晦暗发黄，消瘦，腹胀，体重减轻等症状，造模第18天自然恢复组死亡1只大鼠。给药后，治疗组大鼠症状基本好转，自然恢复组大鼠体征改善不明显。实验后体重、24h摄食量及腹围指数见表9。

表9体重、24h摄食量及腹围指数（）

注：与空白对照组比较，★★P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05。

由表9可见动物模型建成后体重大幅下降，有一定的自然恢复，但经平胃散及组合物治疗后体重恢复更为显著。造模后动物24h摄食量明显降低，治疗后逐步恢复。造模后动物腹围指数明显升高，治疗后有降低趋势。

4.6.2胃排空及小肠推进率的测定结果见表10。

表10胃肠运动功能变化（）

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

由表10可见模型建成后，模型组动物胃残留率升高，胃排空能力降低，自然恢复过程中继续降低，平胃散组及组合组略好于自然恢复组；模型组小肠推进功能下降，经组合物治疗后明显改善。

4.6.3血清胃泌素及胃动素含量的测定结果见表11。

表11胃泌素及胃动素含量变化（）

注：与空白对照组比较，★P<0.05，★★P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

由表11可见动物模型建成后血清胃泌素含量降低，经组合物治疗后血清胃泌素含量恢复正常。造模后动物胃动素含量升高，自然恢复过程中继续升高，平胃散组与组合组略有降低。

综上试验所述，在相同给药浓度条件下，苍术酮和厚朴酚组合配伍后的疗效明显优于苍术酮和厚朴酚单独应用时的疗效，表明两种活性成分按本发明剂量组合配伍之后具有协同增效的作用，本发明组合物组对消化系统疾病及胃肠功能异常有较好的治疗作用。

Claims (10)

1.一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：它是由以下组分及重量比组成：苍术酮1～20重量份，厚朴酚5～30重量份。

2.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：它是由以下组分及重量比组成：苍术酮5～18重量份，厚朴酚7～25重量份。

3.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：它是由以下组分及重量比组成：苍术酮7～15重量份，厚朴酚10～20重量份。

4.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：它是由以下组分及重量比组成：苍术酮10重量份，厚朴酚15重量份。

5.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：它是由以下组分及重量比组成：苍术酮10重量份，厚朴酚10重量份。

6.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：所述的苍术酮为中药饮片苍术中提取分离后得到的提取物。

7.根据权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：所述的厚朴酚为中药饮片厚朴中提取分离后得到的提取物。

8.根据权利要求1至5任意一项权利要求所述的治疗消化系统疾病的药物组合物，其特征在于：其剂型为丸剂、片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、糖浆、口服液、冻干粉针或注射液。

9.权利要求1所述的一种治疗消化系统疾病的药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：

S1：称取原料：按前述组分及重量比称取原料；

S2：将原料混合均匀后，加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。

10.如权利要求1至5中任意一项权利要求所述的药物组合物在制备治疗消化不良药物中的应用。