CN103389277A - 一种胶囊制剂中囊壳的铬含量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明属胶囊制剂领域，具体来说是提供一种胶囊制剂中囊壳的铬含量检测方法，特别是硬空心胶囊的检测方法，通过在供试品样品中加入双氧水，并优选进一步的通过预消解，使消解过程加入的强酸量减少，强酸用量的减少，也使得操作简便、快速，稳定性、回收率提高。本方法的建立，有利于对现有明胶胶囊壳的真伪优劣进行快速鉴别，有利于公众的用药安全。

Description

一种胶囊制剂中囊壳的铬含量检测方法

技术领域

本发明涉及药剂领域胶囊制剂囊壳中铬含量的检测方法，特别是硬胶囊制剂的囊壳检测方法。

背景技术

胶囊剂是将药物填装于空心硬质胶囊中或密封于弹性软质胶囊中而制成的固体制剂，与其他剂型相比，其具有很多特点，如能掩盖药物不良嗅味、提高稳定性、生物利用度提高，可弥补其他固体剂型的不足等等。

明胶是胶囊剂的主要囊材，它的安全决定了空心胶囊的安全性。近来有很多不法分子采用制革厂经鞣制过的含铬皮废料生产工业明胶，这是较多劣质明胶的来源。六价铬离子是铬离子中毒性最大的一种，容易引起粘膜发炎、溃疡、皮肤过敏、皮肤湿疹等病症，如被人体长期吸收，容易诱发癌症。

医用胶囊对重金属含量有严格的要求，但目前的检验方法存在强酸用量大、需要赶酸以及回收率、稳定性不高的缺陷，并且当消解不完全时，需要用氢氟酸等更强酸或混酸，不但使后序处理复杂、处理时间延长，也对结果的稳定性造成影响，因此，存在对现有铬含量检测方法进行改进的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的更稳定的铬含量测量方法，与现有技术相比，其具有很多优点，如强酸用量低，回收率、稳定性更高，无需赶酸步骤而操作简便。

本发明的另一目的是提供一种检测胶囊壳中铬含量的测定标准。

本发明具体检测方法如下：

1.标准品和供试品溶液的配制方法：

1.1配制系列标准溶液

取铬标准溶液适量于一定量的容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，分别制备得到浓度为0、5、10、20、40、60、80ng/ml标准系列溶液。

优选的，精密吸取1000μg/ml铬标准溶液1ml于100ml容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，摇匀即为10μg/ml铬标准储备液。再精密吸取10μg/ml铬标准储备液5ml于50ml容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，混匀，即为1μg/ml铬标准使用液。

优选的，系列标准溶液配制方法为，精密吸取1μg/ml铬标准使用液0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml于10ml容量瓶中，用2％硝酸定容至刻度，混匀，即为0、5、10、20、40、60、80ng/ml标准系列溶液。

1.2配制供试品溶液

方法一：称取胶囊壳适量，于消解罐中，精确至0.1mg，加少量硝酸，放置过夜，加少量双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至定量容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，离心，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

优选的，称取胶囊壳约0.5g于消解罐中，精确至0.1mg，加5ml硝酸，放置过夜，加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

方法二：称取胶囊壳适量于消解罐中，精确至0.1mg，加少量硝酸，加热预消解3h，冷却后加少量双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至定量容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，离心，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

优选的，称取胶囊壳约0.5g于消解罐中，精确至0.1mg，加5ml硝酸，于50-80℃，更优选的于80℃预消解3h，冷却后加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

2、制备标准曲线：

精密量取铬对照贮备溶液标准溶液1μg·mL^-1，用2％硝酸稀释制成0、5、10、20、40、60和80ng·mL^-1系列对照溶液。以铬元素的浓度为横坐标，响应值为纵坐标，铬在0～80ng·mL^-1的范围内线性关系良好，得出铬元素线性回归方程，y＝0.00331x-0.000504，相关系数为0.9990。见表1

表1线性范围考察结果

3、方法学考察：

3.1回收率的考察：

精密称取明胶空心胶囊约0.5g，共8份，分为2组，分别精密加入对照溶液10μg·mL^-1各0.025mL、1mL、0.2mL，其余操作同供试品溶液制备。其结果见表2、3。表2为方法一的回收率，表3为方法二的回收率

表2回收率的结果

表3回收率的结果

3.2、重复性试验

精密称取明胶空心胶囊6份，进行供试品溶液的制备(方法同供试品溶液制备方法)，按照标准曲线法计算结果，见表4、5。表4为方法一的重现性结果，表5为方法二的重现性结果。

表4重复性试验结果

表5重复性试验结果

4.酸度对响应值的影响考察

分别采用2％、5％、10％的硝酸溶液，配制20ng·mL^-1铬标准溶液，在相同条件下，对上述铬标准溶液进行测试，结果显示硝酸浓度在2％～10％之间时，对测定结果无明显影响。测试结果见表6。

表6酸度对响应值的影响

5.结果计算：

结果计算公式： $X=\frac{(C_1-C_2)\×V_1\×1000}{m\×1000\×1000}$

式中：X---样品中铬含量mg/kg

C₁---测试样品溶液中铬含量ng/ml

C₂---样品空白溶液中铬含量ng/ml

V₁---样品消解液定容体积ml

m----试样质量g

此方法相关系数R≥0.999

6.仪器和设备条件：

原子吸收分光光度计(日立Z2000型)，密里博纯水机，微波消解仪(CEM)。

硝酸(北京化学试剂研究所BV-III级)，双氧水(分析纯)，铬标准溶液(浓度为μg·mL^-1)、空心胶囊(来源市场抽检)。

优选的微波消解条件如表7：

表7微波消解条件

序号	温度	升温/保持时间(min)
			1	室温～120℃	5/3
2	120～150℃	6/2
			3	150～180℃	6/30

原子化方式为石墨炉法，保护气体为氩气，灯电流：7.5mA，狭缝：1.3nm，时间常数：0.1s，检测波长：359.3nm，样品及标准系列溶液进样量：20μl，优选的石墨炉法附加条件如表8：

表8.石墨炉工作条件

本发明采用石墨炉原子吸收法测定胶囊壳中铬含量，其加入双氧水并优选进行预消解过程，使得减少了消解过程中强酸的用量，从而进一步简化了检测步骤，节省检测成本并提高了稳定性和回收率。

具体实施方式：

实施例1

1.仪器设备：选择铬空心阴极灯，测定波长为359.3nm，狭缝为1.3nm，C型石墨管，石墨炉控制程序见表9。载气为高纯氩气。原子吸收分光光度计(日立Z2000型)，密里博纯水机，微波消解仪(CEM)。硝酸(北京化学试剂研究所BV-III级)，双氧水(分析纯)，铬标准溶液(浓度为μg·mL^-1)、空心胶囊(来源市场抽检)。

表9石墨炉控制程序

2、溶液的制备

2.1对照溶液的制备

精密量取铬元素标准溶液(浓度为1000μg·mL^-1)1mL，置100mL量瓶中，用2％硝酸稀释至刻度，摇匀，其浓度为10μg·mL^-1的对照贮备溶液；精密量取对照贮备溶液5mL，置50mL量瓶中，用2％硝酸稀释至刻度摇匀，其浓度为1μg·mL^-1对照溶液。

2.2供试品溶液的制备

称取胶囊壳约0.5g于消解罐中，精确至0.1mg，加5ml硝酸，放置过夜，加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

其中步骤2.2中的微波消解程序升温过程如表10。

表10微波消解程序

3、标准曲线的制备：

精密量取铬对照贮备溶液标准溶液1μg·mL^-1，用2％硝酸稀释制成0、5、10、20、40、60和80ng·mL-1系列对照溶液。以铬元素的浓度为横坐标，响应值为纵坐标，铬在0～80ng·mL^-1的范围内线性关系良好，得出铬元素线性回归方程，y＝0.00331x-0.000504，相关系数为0.9990。

4、结果

结果计算公式： $X=\frac{(C_1-C_2)\×V_1\×1000}{m\×1000\×1000}$

式中：X---样品中铬含量mg/kg

C₁---测试样品溶液中铬含量ng/ml

C₂---样品空白溶液中铬含量ng/ml

V₁---样品消解液定容体积ml

m----试样质量g

按照上述的供试品制备方法一得到的6批空心胶囊铬含量结果如下：

实施例2.

仪器设备选择、对照品溶液的配制方法以及标准曲线的制备方法均与实施例1相同。

1.供试品溶液的配制方法：

称取胶囊壳约0.5g于消解罐中(精确至0.1mg)，加5ml硝酸，于80℃预消解3h，冷却后加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。用石墨炉原子吸收法进行测定吸收值。

2、结果

结果计算公式： $X=\frac{(C_1-C_2)\×V_1\×1000}{m\×1000\×1000}$

式中：X---样品中铬含量mg/kg

C₁---测试样品溶液中铬含量ng/ml

C₂---样品空白溶液中铬含量ng/ml

V₁---样品消解液定容体积ml

m----试样质量g

按照上述的方法二得到的6批空心胶囊的结果如下：

Claims (7)

1.一种胶囊制剂中囊壳的铬含量检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)制备铬标准溶液：

取一定量铬溶液于容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，分别制备得到浓度为0、5、10、20、40、60、80ng/ml标准系列溶液；

2)制备供试品溶液

称取胶囊壳适量，于消解罐中，精确至0.1mg，加少量硝酸，放置过夜，加少量双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至定量容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，离心，取上清液测试。同时做试剂空白。采用石墨炉原子吸收法测定吸收值；

3)制备标准曲线并计算浓度：

精密量取铬对照贮备溶液标准溶液1μg·mL^-1，用2％硝酸稀释制成0、5、10、20、40、60和80ng·mL^-1系列对照溶液。以铬元素的浓度为横坐标，响应值为纵坐标，铬在0-80ng·mL^-1的范围内线性关系良好，得出铬元素线性回归方程，按得到的标准曲线以及吸收值结果计算供试品浓度；

4)计算铬含量：

结果计算公式： $X=\frac{(C_1-C_2)\×V_1\×1000}{m\×1000\×1000}$

式中：X---样品中铬含量mg/kg

C₁---测试样品溶液中铬含量ng/ml

C₂---样品空白溶液中铬含量ng/ml

V₁---样品消解液定容体积ml

m----试样质量g。

2.如权利要求1所述的铬含量检测方法，其特征在于：

步骤2)供试品溶液的制备方法为：

称取胶囊壳适量于消解罐中，精确至0.1mg，加少量硝酸，加热预消解3h，冷却后加少量双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至定量容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，离心，取上清液测试。同时做试剂空白。采用石墨炉原子吸收法测定吸收值。

3.如权利要求1所述的铬含量检测方法，其特征在于：

步骤1)制备铬标准溶液优选的方法为精密吸取1000μg/ml铬标准溶液1ml于100ml容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，摇匀即为10μg/ml铬标准储备液。再精密吸取10μg/ml铬标准储备液5ml于50ml容量瓶中，加入2％硝酸定容至刻度，混匀，即为1μg/ml铬标准使用液。精密吸取1μg/ml铬标准使用液0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8ml于10ml容量瓶中，用2％硝酸定容至刻度，混匀，即为0、5、10、20、40、60、80ng/ml标准系列溶液。

4.如权利要求1所述的铬含量检测方法，其特征在于：

步骤2)制备供试品溶液的方法为称取胶囊壳约0.5g于消解罐中，精确至0.1mg，加5ml硝酸，放置过夜，加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。采用石墨炉原子吸收法测定吸收值。

5.如权利要求1所述的铬含量检测方法，其特征在于：

步骤2)制备供试品溶液的方法为称取胶囊壳约0.5g于消解罐中，精确至0.1mg，加5ml硝酸，于80℃预消解3h，冷却后加2ml双氧水，盖上内外盖后移入微波消解仪中消解，将消解后的样液用水转移至50ml容量瓶中，并用水洗涤消解罐，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，3000r/min离心5min，取上清液测试。同时做试剂空白。采用石墨炉原子吸收法测定吸收值。

6.如权利要求1-5任一项所述的铬含量检测方法，其特征在于：

微波消解的升温过程为：

  序号   温度   升温/保持时间(min)   1   室温～120℃   5/3   2   120～150℃   6/2   3   150～180℃   6/30

7.如权利要求1-5任一项所述的铬含量检测方法，其特征在于：

控制原子吸收法灯电流：7.5mA，狭缝：1.3nm，时间常数：0.1s，检测波长：359.3nm，样品及标准系列溶液进样量为20μl，石墨炉原子吸收法条件为：