CN103356758A

CN103356758A - 制附片的炮制加工方法

Info

Publication number: CN103356758A
Application number: CN2012100906534A
Authority: CN
Inventors: 陈燕; 唐小龙; 黄志芳; 刘云华; 刘玉红; 刘倩伶; 易进海
Original assignee: Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences SACMS
Current assignee: Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences SACMS
Priority date: 2012-03-31
Filing date: 2012-03-31
Publication date: 2013-10-23
Anticipated expiration: 2032-03-31
Also published as: CN103356758B

Abstract

制附片的炮制加工方法。将生附片在102~240℃下维持0.25~2小时进行热处理后，干燥，即得到炮制后的制附片。其中所说的热处理优选为在102~108℃的水蒸汽湿热条件下保持0.5~2小时，或在140~240℃的干热条件下保持0.25~1小时。实验表明，本发明方法炮制加工的制附片可显著降低有毒成分双酯型生物碱的含量，同时能有效保留单酯型生物碱及附子强心、升压的有效成分盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱，确保了制附片回阳救逆、强心升压药效作用的发挥。

Description

制附片的炮制加工方法

技术领域

本发明涉及一种中药饮片，具体讲是的制附片的炮制加工方法。

背景技术

附子为毛莨科植物乌头(Aconitum carmichaeli Debx)子根的加工品，是一味著名和疗效确切的中药材。附子性辛、甘，大热，有毒，归心、肾、脾经，具有回阳救逆、补火助阳、散寒止痛之功效。附子既为有毒中药的代表，亦为临床常用的中药，历代医家特别重视附子的炮制减毒工艺研究。

已有研究表明，附子中的有效成分和毒性成分均为生物碱。其中主要的毒性成分是双酯型生物碱，因此附子炮制的目的就是为去除其毒性成分。双酯型生物碱的毒性与其结构中的酯键直接相关，此类生物碱的酯键不稳定，加热水解可使其断裂。在炮制过程中，首先是乌头碱水解掉其8位的乙酰基生成苯甲酰乌头原碱（其毒性约为乌头碱的1/200），再进一步水解掉其14位的苯甲酰基生成乌头原碱（其毒性仅为乌头碱的1/2000），同时也伴随发生脱氧反应，生成塔拉乌头胺。附子中的新乌头碱、次乌头碱也会发生类似反应。另外，乌头碱类生物碱中8位上的乙酰基还可以被一些脂肪酰基置换生成毒性较小的脂类生物碱（lipo-alkaloid），附子炮制过程中因生物碱被破坏和流失，也可以使毒性降低。

附子的炮制始于我国汉代。自清代开始采用胆巴水浸泡、煮、漂、蒸等方法。中国药典（2010版）沿用了胆巴炮制方法。例如将生附子用食用胆巴水浸泡、煮透、水漂、切片、再水漂、染色、蒸制、干燥即为黑附片。白附片同样亦需经蒸制炮制。因炮制过程需经反复的水浸泡、漂洗等处理，炮制工艺繁琐，方法复杂，可控性差，有效成分损失严重，存在炮制过度之嫌。附子炮制过程中生物碱的减少主要在于胆巴水泡（损失31.6%）、漂片（损失33.6%）、水解（损失16.9%），生物碱总量减少了81.3%，又因为泡、煮、漂、蒸的时间、温度等不同，不同批次附片成分含量相差可高达10倍。此外，胆巴漂洗不尽或残留也是影响附片质量和安全性的重要因素之一。亦有文献报道生附片用水润透后再蒸制，或生附子经蒸制后再切片干燥的加工方法。

公开号CN1785328A的中国专利报道了一种附子的炮制方法，采用水浸阴干烘制法，常温下将附子生品置水中浸泡后，取出阴干，用烘箱高温烘烤后取出，即得制附子。其将附子生品置水中浸泡后会导致有效成分的流失。公开号CN101485746A的中国专利报道了一种附子的炮制方法，是将附子原料去皮后用碱水充分浸润，再采用高温高压设备进行加热减毒处理后烘干，即得附子炮制成品。其将附子用碱水浸润后使炮制品呈碱性，可能会影响后续的中药复方配伍，导致药物煎煮成分的变化。而且，这些文献报道的炮制方法，都是将生附子干品用水或碱水浸泡/浸润后再加热干燥等处理，炮制加工方法较为复杂繁琐。

发明内容

针对上述情况，本发明提供了一种更为简单、有效的制附片的炮制加工方法，既能使所得到的制附片显著降低有毒成分双酯型生物碱的含量，同时能有效保留单酯型生物碱及附子强心、升压的有效成分盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱，确保制附片回阳救逆、强心升压药效作用的发挥。

本发明制附片的炮制加工方法，是将生附片在102~240℃温度下进行维持0.25~2小时的热处理后，干燥，即得到炮制后的制附片。

本发明上述炮制方法中所说的生附片，可以包括有润湿状态的生附片或干燥状态的生附片等不同形式。不同形式的生附片进行炮制时还可分别采用下述的优选条件和方式：

对于润湿状态的生附片，如直接由新鲜生附子得到的切片，或是由干燥的附片被水充分润湿后所成的生附片，可直接在102~108℃的水蒸汽湿热条件下进行维持0.5~2小时的热处理。更进一步，热处理优选温度为105℃和/或，热处理时间为保持0.5~1小时。

对于新鲜生附子切片后经晒干或烘干后的干燥状态的生附片，可于140~240℃的干热条件下进行维持0.25~1小时的热处理。更进一步的热处理优选温度为140~200℃。

本发明上述炮制加工方法在具体实施时，可以采用如制药工业中的干热灭菌（干热空气烘制）、湿热灭菌（湿热水蒸汽蒸制）等常用设备及方式进行。

本发明上述炮制加工方法，充分利用了附子中酯型生物碱对热不稳定的特点，直接通过加热使其酯键断裂，先热解（水解）掉其8位的乙酰基生成苯甲酰乌头类原碱，再进一步热解（水解）掉其14位的苯甲酰基生成乌头类原碱，从而达到减毒增效的目的。

本发明上述炮制加工方法由于不对附子用胆巴水浸泡、煮和水漂洗等处理，有效避免了生物碱等水溶性有效成分的流失。而将附子切片后直接采用目前的干热灭菌柜、高压蒸汽灭菌柜等进行干热烘制或湿热蒸制，简便高效，且附片受热均匀、质量稳定可控，适合于工业化大生产。

以下通过实施例的具体实施方式再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均应包括在本发明的范围内。

具体实施方式

实施例1

取新鲜生附子，按药典规定的方法（以下同此）除去母根、须根及泥沙，洗净，切片，晒干，即为生附片。将生附片置干热灭菌柜中，于200℃干热高温烘制30 min，即得本发明所述的制附片。

实施例2

取新鲜生附子，除去母根、须根及泥沙，洗净，切片后，直接置于湿热灭菌柜中，于105±3 ℃湿热高压蒸制60 min，再晒干，即得本发明所述的制附片。

实施例3

取新鲜生附子，除去母根、须根及泥沙，洗净，切片，晒干，即为生附片。取生附片置干热灭菌柜中，于240℃干热高温烘制15 min，即得本发明所述的制附片。

实施例4

取新鲜生附子，除去母根、须根及泥沙，洗净，切片，烘干，即为生附片。取生附片置干热灭菌柜中，于140℃干热高温烘制60 min，即得本发明所述的制附片。

对采用本发明上述炮制方法得到的制附片进行的下述检测，表明了其能具有理想的效果。

本发明炮制方法中的干热烘制和湿热蒸制对附子6种酯型生物碱含量的影响实验

1.1 炮制加工新方法与制附片制备

取新鲜生附子，除去母根、须根及泥沙，洗净，切片（0.3-0.5cm），晒干，即为生附片；取生附片分别于140、200、240 ℃干热高温烘制15，30，60 min，即为干热烘制附片。上述新鲜生附子切片后直接采用105±3 ℃、115±3 ℃、125±3 ℃湿热高压蒸制30，60，120 min，再晒干，即为湿热蒸制附片。

HPLC法测定6种酯型生物碱的含量

1.2.1 色谱条件色谱柱：Agilent Eclipse XDB C₁₈柱（4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相A为0.1 mol·L^-1醋酸铵溶液（每1000 mL加0.5 mL冰醋酸），B相为乙腈-四氢呋喃（25:15）混合溶液，梯度洗脱程序：0～48 min：85%～74%A，48～49 min：74%～65%A，维持9 min。流速：1 mL·min^-1，检测波长：235 nm；柱温：35 ℃。

对照品溶液的制备取新乌头碱、次乌头碱、乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰乌头原碱对照品适量，精密称定，加0.05%盐酸甲醇溶液配置成每1 mL含新乌头碱14.85 μg、次乌头碱15.01 μg、乌头碱15.36 μg、苯甲酰新乌头原碱14.79 μg、苯甲酰次乌头原碱15.13 μg、苯甲酰乌头原碱15.64 μg的混合对照品溶液

1.2.3 供试品溶液的制备上述制附片粉碎过三号筛，分别称取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.05 mol·L^-1盐酸溶液50 mL，摇匀，超声处理（功率250 W，频率40 kHz）30 min，放冷，摇匀，于12 000r·min^-1离心5 min。取上清液，即得。

含量测定照现行版中国药典中高效液相色谱法（附录Ⅳ D）测定，分别精密吸取对照品溶液10-20μL与供试品溶液50μL，注入液相色谱仪，测定，计算含量，结果见表1。

表1 6种酯型生物碱含量测定结果（10^-5 g·g^-1，n=3）

样品编号	炮制方法	苯甲酰新乌头碱	苯甲酰乌头碱	苯甲酰次乌头碱	新乌头碱	次乌头碱	乌头碱	单酯型生物碱总量	双酯型生物碱总量
										1	生附片	5.73	1.13	1.95	42.7	151.4	7.38	8.81	201.48
2	140℃/15min	10.1	1.45	8.28	12.4	57.3	2.17	19.83	71.87
										3	140℃/30min	26.5	14.73	20.9	4.8	13.7	—	62.13	18.5
4	140℃/60min	78.6	20.8	25.3	3.5	8.1	—	124.7	11.6
										5	200℃/15min	20.3	2.86	28.9	—	9.01	—	52.06	9.01
6	200℃/30min	76.0	20.5	27.3	—	4.12	—	123.8	4.12
										7	200℃/60min	42.5	8.53	11.6	—	2.74	—	62.63	2.74
8	240℃/15min	32.6	5.74	31.5	—	5.14	—	74.6	5.14
										9	240℃/30min	33.2	7.3	15.7	—	2.23	—	56.2	2.23
10	240℃/60min	29.5	5.86	7.9	—	1.05	—	43.26	1.05
										11	105±3℃/30min	21.0	2.34	10.5	1.14	16.0	—	33.84	17.14
12	105±3℃/60min	35.8	5.50	21.8	—	1.25	—	63.1	1.25
										13	105±3℃/120min	63.6	12.7	29.3	—	—	—	105.6	—
14	115±3℃/30min	71.4	13.5	15.2	—	—	—	100.1	—
										15	115±3℃/60min	105.1	21.3	45.4	—	—	—	171.8	—
16	115±3℃/120min	83.9	19.7	27.2	—	—	—	130.8	—
										17	125±3℃/30min	96.5	23.4	22.6	—	—	—	142.5	—
18	125±3℃/60min	85.1	16.8	37.3	—	—	—	139.2	—
										19	125±3℃/120min	56.5	12.4	25.0	—	—	—	93.9	—

注：— 未检出

1.3 结论由表1可见，附子在140-240℃干热烘制，双酯型生物碱含量迅速降低，与加热温度和受热时间呈负相关；140℃干热烘制，单酯型生物碱逐渐增加，200-240℃干热烘制，单酯型生物碱先增后降；其中140-200℃干热烘制单酯型生物碱含量总体高于240℃。附子在105-125℃湿热蒸制，双酯型生物碱极不稳定，含量迅速降低；105℃湿热蒸制，单酯型生物碱逐渐增加，115-125℃湿热蒸制，单酯型生物碱先增后降。中国药典规定制附片含双酯型生物碱总量不得过0.020%，含单酯型生物碱总量不少于0.010%，本发明上述的制附片除140℃烘制15 min外，其余均符合药典规定。

本发明炮制方法中的湿热蒸制对附子中2种水溶性生物碱含量的影响实验

2.1 炮制加工新方法与制附片制备

HPLC法测定盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱2种水溶性生物碱的含量

2.2.1 色谱条件色谱柱：Agilent Eclipse C₁₈（250 mm × 4.6 mm，5 μm）；流动相：0.1%磷酸水溶液；流速：1.0 mL·min^-1；检测波长：280 nm；柱温：35 ℃；进样量：10~50 μL。

对照品溶液的制备取盐酸多巴胺对照品和去甲猪毛菜碱对照品适量，精密称定，加流动相溶解并配置成每1 mL含盐酸多巴胺2.54 μg和去甲猪毛菜碱2.49 μg的混合对照品溶液。

供试品溶液的制备上述制附片粉碎过三号筛，分别称取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入0.05 mol·L^-1盐酸50 mL，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 kHz ）30 min，放冷，再称定重量，用0.05 mol·L^-1盐酸补足减失的重量，摇匀，高速离心（12 000 r·min^-1）5 min，取上清液，即得。

含量测定照现行版中国药典中高效液相色谱法（附录Ⅳ D）测定，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，计算含量，结果见表2。

表2 制附片中盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱的含量测定结果

样品编号	炮制方法	盐酸多巴胺/mg·g^-1	去甲猪毛菜碱/mg·g^-1
				1	生附片	0.304	0.270
11	105±3℃/30min	0.285	0.248
				12	105±3℃/60min	0.261	0.223
13	105±3℃/120min	0.246	0.205
				14	115±3℃/30min	0.240	0.191
15	115±3℃/60min	0.217	0.164
				16	115±3℃/120min	0.185	0.112
17	125±3℃/30min	0.194	0.133
				18	125±3℃/60min	0.119	0.087
19	125±3℃/120min	0.042	0.028

注：— 未检出

2.3 结论由表2可见，附子在105-125℃湿热蒸制，对盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱含量有明显影响，与温度和时间呈负相关。105℃湿热蒸制对盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱含量影响较小，115-125℃湿热蒸制可显著降低盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱的含量。盐酸多巴胺和去甲猪毛菜碱为附子强心、升压的有效成分，故为确保制附片回阳救逆、强心升压的药效作用，以105℃湿热蒸制附片为佳。

不同炮制方法所得制附片中生物碱含量的比较实验

3.1 不同炮制方法与制附片样品制备

新鲜生附子，除去母根、须根及泥沙，洗净，切片（0.3-0.5cm），晒干，即为生附片；取生附片置烘箱中于200 ℃烘制20 min，即为附子炮制成品Ⅰ。另取生附片用pH 11.5的碱水充分浸润，浸润过程中附片的吸液量控制在0.25-0.5ml/g，浸润后采用高温高压设备于210℃热处理20min，随后置于真空度为0.090MPa、85℃烘制6h，即得附子炮制成品Ⅱ。再取生附片置水中泡24小时，取出阴干，置烘箱中于200℃烘制20 min，即得附子炮制成品Ⅲ。上述新鲜生附子切片后直接采用105±3 ℃湿热高压蒸制60 min，再晒干，即为湿热蒸制附片。

6种酯型生物碱和总生物的含量测定

按上述方法和药典方法分别测定生附片、附子炮制成品Ⅰ～Ⅲ、湿热蒸制附片中6种酯型生物碱和总生物的含量，结果见表3。

表3 6种酯型生物碱含量（10^-5 g·g^-1）和总生物碱的含量（10^-3 g·g^-1）测定结果

附片样品	苯甲酰新乌头碱	苯甲酰乌头碱	苯甲酰次乌头碱	新乌头碱	次乌头碱	乌头碱	单酯型生物碱总量	双酯型生物碱总量	总生物碱含量
										生附片	5.45	1.27	2.11	41.9	154.6	7.25	8.83	203.75	127.4
炮制成品Ⅰ	31.4	8.49	30.3	—	7.17	—	70.19	7.17	103.5
										炮制成品Ⅱ	—	—	3.82	—	—	—	3.82	—	95.8
炮制成品Ⅲ	22.3	6.05	21.9	—	4.31	—	50.25	5.31	78.1
										湿热蒸制附片	34.7	6.14	23.5	—	1.96	—	63.44	1.96	105.6

注：— 未检出

3.3 结论由表3可见，附子炮制成品Ⅱ不符合药典规定，附子炮制成品Ⅲ单酯型生物碱和总生物损失严重，综合评价以附子炮制成品Ⅰ和湿热蒸制附片为佳。

Claims

1.制附片的炮制加工方法，其特征是将生附片在102~240℃温度下进行维持0.25~2小时的热处理后，干燥，即得到炮制后的制附片。

2.如权利要求1所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的生附片为润湿状态的生附片，直接在102~108℃的水蒸汽湿热条件下进行维持0.5~2小时的热处理。

3.如权利要求2所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的润湿状态的生附片为新鲜生附子的切片。

4.如权利要求2所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的润湿状态的生附片为由干燥的附片被水充分润湿后所成的生附片。

5.如权利要求2至4之一所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的热处理温度为105℃。

6.如权利要求2至4之一所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的热处理时间为保持0.5~1小时。

7.如权利要求1所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的生附片为干燥的生附片，于140~240℃的干热条件下进行维持0.25~1小时的热处理。

8.如权利要求7所述的制附片的炮制加工方法，其特征是所说的热处理温度为140~200℃。