CN103344717A - 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 - Google Patents
一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103344717A CN103344717A CN2013102566584A CN201310256658A CN103344717A CN 103344717 A CN103344717 A CN 103344717A CN 2013102566584 A CN2013102566584 A CN 2013102566584A CN 201310256658 A CN201310256658 A CN 201310256658A CN 103344717 A CN103344717 A CN 103344717A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bletilla
- minutes
- chromatographic
- methyl alcohol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明提供了一种白及HPLC指纹图谱的建立方法，以及由此得到的白及标准指纹图谱。本发明的方案是：（1）供试品溶液的制备，（2）HPLC色谱分析。白及HPLC标准指纹图谱共有色谱峰13个，其保留时间分别为2.024min、5.928min、10.765min、16.133min、17.279min、20.999min、23.232min、24.678min、25.924min、28.287min、30.366min、32.529min、34.291min。本发明的方法供试品制作简便，色谱条件容易实现，方法的稳定性和重现性好，能有效控制白及质量，为白及的质量控制提供参考。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药材指纹图谱的建立方法，特别是白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的白及标准指纹图谱。属于药物分析技术领域。
背景技术
白及（Bletilla striata(Thunb.)Reichb.F.）为兰科植物，块茎干燥，性微寒，味苦、甘、涩，归肺、胃、肝经；有收敛止血，消肿生肌的功效，用于咯血、吐血、外伤出血、疮疡肿毒、皮肤皲裂。《中国药典》2010年版对白及饮片的质量控制只限于原植物品种、药材性状和简单的理化鉴别，缺乏一套行之有效的内在质量控制方法。虽然陆续有文献对白及中化学成分进行含量测定，包括肉桂酸、2,7-二羟基-4-甲氧基-9,10-二氢菲、2,4-二甲氧基-3,7-二羟基菲、总酚、总多糖，但是对于白及这样有效成分类型多、组分复杂的中药材，仅测定某类成分的含量，难以客观、有效地评价或控制药材的质量。
中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。色谱指纹图谱技术作为一种多组分复杂样品的有效质量控制方法，能够反映出待测样品的整体性、特征性，目前已被广泛用于中草药及其各种制剂的质量控制。目前，中药指纹图谱技术已涉及众多方法，由于高效液相色谱（HPLC）具有分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广等特点，且中药成分绝大多数可在高效液相色谱仪上进行分析检测，因此高效液相色谱法已成为中药指纹图谱技术的首选方法。但目前还未见有利用高效液相色谱（HPLC）方法对白及指纹图谱进行测试和分析的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的白及标准指纹图谱。该方法及图谱提供了一种能有效控制白及质量的方法，为白及的质量控制提供参考。
为了实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
（1）供试品溶液的制备：精密称定白及粉末，过四号60目筛，得到白及粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，称定重量，静置0min，超声提取30min，超声的功率为280W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足失去的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液进行色谱测定。
（2）高效液相HPLC色谱分析条件：
色谱柱：大连依利特公司Hypersil ODS2柱（4.6mm×250mm，5μm）；
柱温：40℃；
检测波长：277nm；
流动相：乙腈-水，梯度洗脱；
流速：1mL/min；
梯度洗脱程序：时间梯度为
。
白及HPLC指纹图谱的建立方法所得的标准指纹图谱共有色谱峰13个，其保留时间分别为2.024min、5.928min、10.765min、16.133min、17.279min、20.999min、23.232min、24.678min、25.924min、28.287min、30.366min、32.529min、34.291min。
与现有技术相比，本发明提供的白及HPLC指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱可作为一种能有效控制白及质量的方法，并为白及的质量控制提供参考。本发明方法供试品制作简便，色谱条件容易实现，方法的稳定性和重现性好。
附图说明
图1为不同溶剂提取白及主要成分色谱图比较；
图2为不同比例溶剂提取白及主要成分色谱图比较；
图3为加热回流与超声波提取白及主要成分色谱图比较；
图4为不同超声时间提取白及主要成分色谱图比较；
图5为不同静置时间对白及主要成分提取效率的影响图；
图6为超声提取次数对提取白及主要成分影响色谱图比较；
图7为不同超声功率对提取白及主要成分影响色谱图比较；
图8为不同流动相洗脱比较图；
图9为选用的梯度洗脱程序图谱；
图10为PAD检测器全波长扫描图；
图11为不同流速色谱图比较；
图12为不同柱温比较图；
图13为空白溶剂（甲醇）图谱；
图14为供试品仪器精密度色谱图；
图15为供试品重复性色谱图；
图16为供试品稳定性色谱图，其中，S1代表0h、S2代表6h、S3代表12h、S4代表24h、S5代表32h、S6代表48h；
图17为白及饮片主要成分指纹图谱，其中，S1-S12分别为白及饮片20090101-20120302，R为白及主要成分指纹图谱的共有模式；
图18为白及饮片主要成分指纹图谱共有模式图谱。
具体实施方式
为使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按照常规实验方法进行。
本发明所用实验材料为经广州中医药大学中药鉴定学教研室鉴定为兰科植物白及Bletillastriata（Thunb.）Reichb.f.的块茎。
本发明所用仪器包括：高效液相色谱仪：Waters e2695系列（型号：Waters e2695，厂家：美国Waters公司），包括PDA二极管阵列检测器（型号：Waters2998，厂家：美国Waters公司）和Empower工作站（美国Waters公司）；色谱柱：大连依利特Hypersil ODS2色谱柱（4.6mm×250mm，5μm)，天平：千分之一天平（上海恒平JA2003），万分之一天平（SartoriusBS224S），十万分之一天平（Precisa XR205SM DR）；超声波发生器：（昆山超声KQ-700DE40KHz280W）；超纯水系统：美国Millipore(密理博)公司。
本发明所用试剂与试药包括：甲醇、乙醇、磷酸、醋酸等均为国产分析纯；HPLC用甲醇、乙腈均为色谱纯（德国Merck公司，Darmstadt，Gemany）；水为超纯水（电阻率18.2mΩ.cm）。
实施例1：供试品溶液的制备
（1）提取溶剂的选择
经文献检索，指纹图谱的研究常用溶剂为乙醇、甲醇。因此分别采用甲醇和乙醇作为提取溶剂对白及饮片粉末进行提取，比较两种溶剂对白及中主要成分的提取效率。
样品处理：精密称定2份白及粉末（批号：20110702）（过四号筛60目）各1.0g，分别精密加入20mL甲醇或乙醇，称定重量，超声提取30min（280W，40kHz），放冷后用溶剂补足重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。
通过此两种溶剂提取比较，乙醇提取物色谱图主要成分色谱峰信息小于甲醇提取物，而且相应值较低，因此采用甲醇作提取溶剂，以期得到较好试验结果。甲醇和乙醇不同溶剂提取白及主要成分色谱图比较结果见图1。
（2）提取溶剂浓度的选择
考察甲醇和水不同配比（体积比）提取白及的提取效率，比较50%、60%、70%、80%、90%和100%甲醇提取结果。
样品处理：精密称定6份白及粉末（过四号筛）各约1.0g，批号：20110702，分别精密加入20mL不同浓度的甲醇：60%、70%、80%、90%、100%，称定重量，超声提取30min（功率280W，频率40kHz），放冷后用相应溶剂补足重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供品溶液。
通过六种浓度甲醇提取试验比较，各种浓度甲醇所提取的样品图谱中色谱峰的信息量接近，但100%甲醇提取样品中干扰峰相对较少，故采用100%甲醇作提取溶剂，以期得到较好试验结果。不同比例溶剂提取白及主要成分色谱图比较见图2。
（3）提取方法比较
精密称定2份白及粉末（过四号筛）各约1.0g，批号：20110702，精密加入20mL甲醇，称定重量，其中一份置电热套中加热保持微沸回流提取30min，另一份超声提取30min（功率280W，频率40kHz），放冷后用甲醇补足重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供品溶液。
比较两种不同方法提取所得白及供试液的HPLC色谱图，回流提取所得样品色谱图中色谱峰面积稍大于超声提取样品，但鉴于超声提取操作易于进行，实验选择超声提取作为白及的提取方法。加热回流与超声波提取白及主要成分色谱图比较见图3。
（4）提取时间的考察
考察提取时间对白及提取效率的影响，比较提取15min、30min、45min提取液的色谱图。
样品处理：精密称定3份白及粉末（过四号筛）各约1.0g，批号：20090101，精密加入50mL甲醇，称定重量，分别超声提取30min、45min和60min（功率280W，频率40kHz），放冷后用甲醇补足重量，滤过，弃去初滤液，精密移取续滤液25mL，置蒸发皿中蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至5mL，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供品溶液。
比较三份提取样品的色谱图，超声提取15min、30min和45min样品色谱图中主要色谱峰面积相近，超声30min的主要色谱峰面积及峰形优于15min，因此选择提取时间为30min。不同超声时间提取白及主要成分色谱图比较见图4。
（5）静置时间的考察
考察加入溶剂后样品的静置时间对白及中成分提取效率的影响。
精密称取3份白及粉末（过四号筛）各约1.0g，批号：20110702，精密加入20mL甲醇，称定重量，分别静置0min、30min和静置过夜，超声提取30min（功率280W，频率40kHz），放冷后用甲醇补足重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供品溶液。
比较静置不同时间后提取所得供试液的HPLC色谱图，静置0min、静置30min和静置过夜样品色谱图中主要色谱峰面积相近，因此选择静置0min后超声提取。不同静置时间对白及主要成分提取效率的影响见图5。
（6）提取次数的考察
考察提取次数对白及主要成分提取的影响。参照本文前述方法提取一次提取液，将过滤残渣进行二次重提得到二次提取液。比较一次和二次提取液的色谱图，主要成分的一次提取效率远远大于二次提取，故而二次提取可忽略。试验选取只进行一次甲醇超声提取的方法。超声提取次数对提取白及主要成分影响色谱图比较见图6。
（7）不同超声功率的比较
精密称取3份白及粉末（过四号筛）各约1.0g，精密加入20mL甲醇，称定重量，分别以280W、420W、560W的功率超声提取30min，放冷后用甲醇补足重量，滤过，弃去初滤液，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，作为供品溶液。
比较3份提取液的HPLC色谱图，280W、420W和560W提取样品图谱中主要色谱峰面积相近，因此最终选择280W作为样品超声提取的功率。不同超声功率对提取白及主要成分影响色谱图比较见图7。
（8）最终提取方案
取本品粉末（过四号筛）1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，称定重量，静置0min，超声提取30min（功率280W，频率40kHz），放冷，再称定重量，用甲醇补足失去的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，即得。
实施例2：色谱分析条件的确定
（1）流动相的选择
白及所含成分复杂，且极性范围跨度比较大，等度洗脱很难分离，故采用梯度洗脱方式。比较甲醇-水，乙腈-水，乙腈-0.1%磷酸水，乙腈-0.1%醋酸水系统的洗脱效果。
从实验过程中所优化的洗脱程序中选择分离效果较好的洗脱程序，分别用甲醇-水，乙腈-0.1%磷酸水，乙腈-水，乙腈-0.1%醋酸水作为流动相，对同一份样品进行测定，比较它们的图谱，结果采用乙腈-水系统所测定的图谱基线较平稳，主要色谱峰信息较多，因此最终选择乙腈-水作为流动相，表1为洗脱程序，图8为不同流动相洗脱比较图。
表1洗脱程序
（2）流动相梯度
在实验过程中采用了多个不同的洗脱梯度对同一份白及提取样品进行测定，通过比较不同洗脱程序所测定的样品色谱图，从中优选色谱信息较丰富，主要色谱峰分离度高，基线较平稳且分析时间较为合理的梯度3洗脱程序作为最终的色谱分析条件，表2为梯度1的洗脱程序，表3为梯度2的洗脱程序，表4为梯度3的洗脱程序，图9为选用的梯度洗脱程序图谱。
表2
表3
表4
（3）检测波长的选择
通过对样品全波长检测发现，白及甲醇提取液主要的成分最大吸收波长为276.9nm，所以确定波长277nm为白及图谱的检测波长，见图10，图10为PAD检测器全波长扫描图。
（4）不同流速考察
采用上述色谱条件，柱温25℃，考察不同流速条件下（0.8mL/min、1.0mL/min、1.2mL/min）同一份样品的色谱图，结果各主要成分的色谱峰分离度和峰面积差异不大，其中以流速1.0mL/min的图谱峰形较好，因此选用流速1.0mL/min。图11为不同流速色谱图比较图。
（5）柱温的选择
考察不同柱温（20℃、25℃、30℃、35℃、40℃）对色谱峰的影响，结果柱温40℃时，各主要成分的色谱峰分离度、峰面积和理论塔板数较好，综合考虑柱温采用40℃。图12为不同柱温比较图。
（6）最终色谱条件
色谱柱：大连依利特公司Hypersil ODS2柱（4.6mm×250mm，5μm)；
柱温：40℃；
检测波长：277nm；
流动相：乙腈-水，梯度洗脱；
流速：1mL/min；
梯度洗脱程序如表5所示：
表5
实施例3：白及饮片主要成分指纹图谱
参照《中药注射剂指纹图谱研究的技术指南（试行）》，利用中国药典委员会推荐的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件，通过对所得指纹图谱的进行相似度比较（以中位数建立参照指纹图谱），并进行方法学考察。
根据实施例1和2，确定白及HPLC指纹图谱按如下方法建立，（1）供试品溶液的制备：精密称定白及粉末，过四号60目筛，得到白及粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20mL，称定重量，静置0min，超声提取30min，超声的功率为280W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足失去的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液进行色谱测定。
（2）高效液相HPLC色谱分析条件：
色谱柱：大连依利特公司Hypersil ODS2柱（4.6mm×250mm，5μm)；
柱温：40℃；
检测波长：277nm；
流动相：乙腈-水，梯度洗脱；
流速：1mL/min；
梯度洗脱程序：时间梯度为
按上述方法进行专属性考察、仪器精密度实验、重复性实验和稳定性实验。
（1）专属性考察
考察此方法建立的白及指纹图谱是否能够表达该品种的特征，即唯一性。考察空白溶剂（甲醇）图谱，图13为空白溶剂（甲醇）图谱，甲醇阴性样品在相应保留时间处无色谱峰，无干扰，符合要求。
（2）仪器精密度试验
取同一批次供试品溶液（样品号：20110702），连续进样6次，记录指纹图谱。用“中药指纹图谱相似度计算软件”计算，各图谱的相似系数为0.994，0.994，0.999，0.992，0.989，0.987，0.969。图14为供试品仪器精密度色谱图。
（3）重复性实验
取同一批次样品(样品号：20090101)，按供试品溶液的制备方法分别制备6份供试品，记录指纹图谱，用“中药指纹图谱相似度计算软件”计算相似度，分别为0.981，0.994，0.986，0.953，0.957，0.974。图15为供试品重复性色谱图。
（4）稳定性试验
取同一批次供试品溶液（样品号：20110702），在室温下放置，分别于0、6、12、24、32、48h检测指纹图谱，考察样品溶液的稳定性。用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件（中国药典会推荐）计算相似度，分别为0.988，0.984，0.984，0.977，0.981，0.990。图16为供试品稳定性色谱图，其中S1表示0h、S2表示6h、S3表示12h、S4表示24h、S5表示32h、S6表示48h。
（5）白及饮片主要成分指纹图谱的共有模式的建立
取12个批次的白及饮片样品作为供试品溶液，通过高效液相色谱得到白及主要成分指纹图谱，图17为白及饮片主要成分指纹图谱(S1-S12分别为白及饮片20110701-20120302批)。
利用中国药典委员会推荐的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版”软件，对所得指纹图谱的进行相似度比较（以中位数建立参照指纹图谱，时间窗为0.50），得到十二批白及的相似度，并建立白及主要成分指纹图谱的共有模式，相似度均大于0.798，图17为白及饮片主要成分指纹图谱(S1-S12分别为白及饮片20090101～20120302，R为白及主要成分指纹图谱的共有模式)、图18为白及饮片主要成分指纹图谱共有模式图谱，该标准图谱共有色谱峰13个，其保留时间分别为2.024min、5.928min、10.765min、16.133min、17.279min、20.999min、23.232min、24.678min、25.924min、28.287min、30.366min、32.529min、34.291min。表6为十二批白及相似度计算结果。
表6
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (2)
1.一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）供试品溶液的制备：称定白及粉末，过四号60目筛，得到白及粉末1.0g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇20mL，称定重量，静置0min，超声提取30min，超声功率为280W，频率为40kHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足失去的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm微孔滤膜过滤，取滤液进行色谱测定；
（2）高效液相色谱分析条件：
色谱柱：大连依利特公司Hypersil ODS2柱（4.6mm×250mm，5μm）；
柱温：40℃；
检测波长：277nm；
流动相：乙腈-水，梯度洗脱；
流速：1mL/min；
梯度洗脱程序如下：
。
2.根据权利要求1所述的方法得到的白及标准指纹图谱，其特征在于，所述标准指纹图谱共有色谱峰13个，其保留时间分别为2.024min、5.928min、10.765min、16.133min、17.279min、20.999min、23.232min、24.678min、25.924min、28.287min、30.366min、32.529min、34.291min。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310256658.4A CN103344717B (zh) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310256658.4A CN103344717B (zh) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103344717A true CN103344717A (zh) | 2013-10-09 |
| CN103344717B CN103344717B (zh) | 2015-02-25 |
Family
ID=49279531
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310256658.4A Expired - Fee Related CN103344717B (zh) | 2013-06-25 | 2013-06-25 | 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103344717B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105954411A (zh) * | 2016-05-09 | 2016-09-21 | 贵州医科大学 | 白及中六种成分在Caco-2细胞模型中吸收转运量的测定方法 |
| CN106501422A (zh) * | 2016-10-31 | 2017-03-15 | 皖西学院 | 一种鉴别三种药用白及的色谱指纹图谱方法 |
| CN107340348A (zh) * | 2017-06-07 | 2017-11-10 | 贵阳中医学院 | 一种白及药材hplc指纹图谱的建立方法 |
| CN112083087A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-12-15 | 贵州省农作物品种资源研究所(贵州省现代中药材研究所) | 一种白及提取液获取方法及其操作参数选取方法 |
-
2013
- 2013-06-25 CN CN201310256658.4A patent/CN103344717B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| JIA-QUAN FENG,ET AL: "Novel Bibenzyl Derivatives from the Tubers of Bletilla striata", 《HELVETICA CHIMICA ACTA》 * |
| YAN-RU CAO，ET AL: "Planosporangium mesophilum sp. nov., isolated from rhizosphere soil of Bletilla striata", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF SYSTEMATIC AND EVOLUTIONARY MICROBIOLOGY》 * |
| 李及等: "中药白及的质量标准研究", 《成都中医药大学学报》 * |
| 韩广轩等: "8种产地白及中两种菲类的含量比较", 《中国药师》 * |
| 麻秀萍等: "高效液相色谱法测定白及中肉桂酸", 《中成药》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105954411A (zh) * | 2016-05-09 | 2016-09-21 | 贵州医科大学 | 白及中六种成分在Caco-2细胞模型中吸收转运量的测定方法 |
| CN105954411B (zh) * | 2016-05-09 | 2019-01-11 | 贵州医科大学 | 白及中六种成分在Caco-2细胞模型中吸收转运量的测定方法 |
| CN106501422A (zh) * | 2016-10-31 | 2017-03-15 | 皖西学院 | 一种鉴别三种药用白及的色谱指纹图谱方法 |
| CN106501422B (zh) * | 2016-10-31 | 2019-05-17 | 皖西学院 | 一种鉴别三种药用白及的色谱指纹图谱方法 |
| CN107340348A (zh) * | 2017-06-07 | 2017-11-10 | 贵阳中医学院 | 一种白及药材hplc指纹图谱的建立方法 |
| CN107340348B (zh) * | 2017-06-07 | 2020-05-12 | 贵阳中医学院 | 一种白及药材hplc指纹图谱的建立方法 |
| CN112083087A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-12-15 | 贵州省农作物品种资源研究所(贵州省现代中药材研究所) | 一种白及提取液获取方法及其操作参数选取方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103344717B (zh) | 2015-02-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103800523A (zh) | 一种抗病毒中药组合物的制备方法及指纹图谱的测定方法 | |
| CN102370891A (zh) | 一种用hplc指纹图谱鉴别铁皮石斛真伪的方法 | |
| CN105842373A (zh) | 一种建立金银花的药物制剂的指纹图谱的方法 | |
| CN102141555B (zh) | 吴茱萸及其提取物的高压液相指纹图谱的建立方法 | |
| CN103344717B (zh) | 一种白及高效液相色谱指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN101419200B (zh) | 一种用于原产地人参保护的hplc指纹图谱鉴别方法 | |
| CN103969360B (zh) | 川芎的检测方法 | |
| CN102309531B (zh) | 一种西洋参药材指纹图谱的测定方法 | |
| CN103048408B (zh) | 活血止痛膏的特征图谱测定和其质量检测方法 | |
| CN103575821A (zh) | 一种糖敏灵制剂中14种化学成分的检测方法 | |
| CN104849362A (zh) | 灯盏细辛破壁饮片的指纹图谱共有模式构建及其质量检测方法 | |
| CN103033570B (zh) | 一种昆明山海棠药材的质量检测方法 | |
| CN107576739A (zh) | 一种龙牡壮骨颗粒的hplc指纹图谱检测方法 | |
| CN102048906B (zh) | 鸡骨草胶囊的含量测定方法 | |
| CN108693289B (zh) | 一种人字果药材中木兰花碱的含量测定方法 | |
| CN114942291B (zh) | 潜阳育阴颗粒的质量检测方法 | |
| CN114965802B (zh) | 一种更年安片的质量控制方法 | |
| CN101890071B (zh) | 坚龙胆和关龙胆药材的鉴别方法 | |
| CN102119997A (zh) | 川麦冬hplc指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
| CN104133028B (zh) | 一种茜草配方颗粒高效液相色谱指纹图谱的建立方法 | |
| CN101354381A (zh) | 一种枇杷叶药材的质量评价方法 | |
| CN106324146A (zh) | 苦瓜叶的hplc指纹图谱检测方法 | |
| CN110308213B (zh) | 滋肾育胎丸指纹图谱构建方法及其在质量检测中的应用 | |
| CN103792303A (zh) | 翼首草药材的检测方法 | |
| CN104020229A (zh) | 扯根菜单一药材制备的提取物或制剂的hplc指纹图谱检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150225 Termination date: 20210625 |