CN103341026B - 一种防治流感的组合物及其制剂制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治流感的组合物及其制剂制备方法和应用。以质量份数计，包括以下组份：防风10～20份、芝麻七10～20份、扁担七10～20份和太白贝母10～20份。本发明受国家林业局林业公益性行业科研专项“秦岭林药资源保护及其开发利用技术研究”资助，优选出四味秦岭太白山中特色中草药组成以防风为君药的抗流感中药方剂。通过药效学动物试验、急性毒理试验和长期毒理试验对本发明方剂进行药效学疗效评价和毒理学安全性评价，确证该方剂在治疗流感病毒感染，特别是H1N1流感病毒引起的感冒具有显著疗效，安全无毒。

Description

一种防治流感的组合物及其制剂制备方法和应用

技术领域

本发明属于中药防治流感技术领域，涉及一种防治流感的组合物及其制剂制备方法和应用。

背景技术

流感（Influenza）是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，无论是人流感还是动物的流感都具有很强的传染性。流感病毒是一股负单链分节段的RNA病毒，由于其表面抗原HA和NA易发生变异，给流感的防治带来了巨大的困难，同时也是导致其世界大流行的原因。历史上4次流感的大流行都给全球公共卫生、经济造成极大破坏，而我国几乎每年都有流感的局部暴发或流行。安全、高效的抗流感药物在医学界备受关注。

目前，防治流感的措施主要是疫苗接种和药物治疗。疫苗接种存在接种率低、预防效果差等缺点。因此，抗流感药物始终是防控流感的主要选择。抗流感药物主要包括西药和中药两大类。西药主要分两类：一类是神经氨酸酶抑制剂，如扎那米韦和达菲；一类为M2离子通道阻断剂，如金刚乙胺和金刚烷胺。然而两类药物陆续出现不同程度的耐药性，临床治疗效果差，难以控制流感的流行。中药具有抑制流感病毒复制、调节免疫功能、改善血液循环、解热镇痛等功能。此外，中药价格便宜、耐约性低以及毒副作用小，在防治流感病毒方面具有独特的优势和广阔的发展前景。2009年卫生部所颁发的《甲型H1N1流感诊疗方案》中，中医药成为其中重要的组成部分。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种防治流感的组合物及其制剂制备方法和应用，该组合物配伍得当、组方严谨、安全无毒，具有清热解毒、宣肺化痰的功效，可应用于流感的防治。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种防治流感的组合物，以质量份数计，包括以下组份：

防风10～20份、芝麻七10～20份、扁担七10～20份和太白贝母10～20份。

进一步，以质量份数计，包括以下组份：

防风15～20份、芝麻七10～15份、扁担七10～15份和太白贝母10～15份。

更进一步，以质量份数计，包括以下组份：

防风20份、芝麻七12～15份、扁担七10～12份和太白贝母10～12份。

具体的，以质量份数计，包括以下组份：

防风20份、芝麻七10份、扁担七12份和太白贝母15份。

该组合物的有效成分是将防风、芝麻七、扁担七和太白贝母粉碎后先用冷水浸泡，然后煎煮提取至少30min，过滤所得的煎出液。

一种防治流感的中药制剂的制备方法，包括以下步骤：

1）按照以下质量份数计，防风10～20份、芝麻七10～20份、扁担七10～20份和太白贝母10～20份粉碎后，加相当于药材量5～8倍的冷水浸泡2～4h；

2）浸泡结束后，煮沸30～60min，滤过；药渣加3～5倍质量水再次煎煮20～40min，滤过；

3）合并两次煎出液，于水浴上浓缩至浸膏。

所述的防治流感的中药制剂的制备方法，其特征在于，以所制备的浸膏作为有效成分，添加辅料制成煎剂、药丸、片剂或胶囊。

所述的防治流感的组合物在制备防治流感病毒的药物中的应用。

所述的药物为提高机体流感病毒抗体水平的药物。

所述的防治流感的组合物在制备防治流感病毒引起的感冒的药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明提供的防治流感的组合物及其制剂制备方法，该组合物配伍得当，组方严谨，具有清热解毒，宣肺化痰的功效，可应用于流感的防治。

本发明提供的防治流感的组合物及其制剂制备方法，优选出四味秦岭太白山中特色中草药组成以防风为君药的抗流感中药方剂。通过动物药效学试验、急性毒理试验和长期毒理试验进行药效学疗效评价和毒理学安全性评价，确证该方剂在治疗流感病毒感染，特别是H1N1流感病毒引起的感冒具有显著疗效，安全无毒。

本发明受国家林业局林业公益性行业科研专项“秦岭林药资源保护及其开发利用技术研究”资助，将传统中医药理论与现代科学技术相结合，在动物体内实验的基础上，研究秦岭太白山中特色中草药各配伍组对流感病毒的抑制作用，筛选出最佳药物配伍，为临床用药提供了理论依据。同时揭示了使用此方剂治疗流感的科学性和严谨性，组方中的中草药均来自于我国秦岭山区特色林药，对于发掘秦岭太白山中草药资源具有重要指导意义。

附图说明

图1为不同处理对流感病毒感染小鼠体重的影响。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

本发明总结陕西省太白山区民间用药的经验，优选出四味秦岭太白山中特色中草药组成以防风为君药的抗流感中药方剂。通过药效学动物试验、急性毒理试验和长期毒理试验进行药效学疗效评价和毒理学安全性评价，确证该方剂在治疗流感病毒感染，特别是H1N1流感病毒引起的感冒具有显著疗效，安全无毒。

本发明方剂防风（DivaricateSaposhnikoviaRoot）为君药，由防风（DivaricateSaposhnikoviaRoot）、芝麻七（Pedicularis resupinala）、扁担七（Peliosanthes macrostgia Hahce）和太白贝母（Fritillaria taipaiensis P.Y.Li）组成，其重量配比如下（60kg成人临床拟用剂量）：

防风为祛风解表药，主治外感风寒、头痛身痛、恶寒发热、耳鸣鼻塞等症。现代药理学研究成果表明：防风在止痛、抗炎和镇静方面的功效与阿司匹林相当；此外，防风水煎剂对实验动物有降温和解热作用。当前临床多以防风为主药配成祛风解表方，治外感表证，取得了良好的治疗效果。

芝麻七为陕西“太白七药”之一，中医认为芝麻七具有止咳化痰、平喘益气的功效。使用芝麻七治疗感冒引起的咳嗽症状在太白山地区民间流传已久，并取得了良好的治疗效果。目前关于芝麻七的现代药理学研究尚无相关文献报道。本发明首次以流感动物模型治疗试验进行药效学疗效评价，对于揭示使用以芝麻七治疗流感的科学性和严谨性具有重要意义。

扁担七为陕西“太白七药”之一，具有很强的清热解毒功效。中医认为清热解毒类中药适用于风热型感冒，用板蓝根等清热解毒中药防治感冒的做法早已深入人心。

太白贝母为百合科植物太白贝母Fritillaria taipaiensis P.Y.Li的鳞茎，是太白山特色中草药之一。具有润肺、化痰和止咳的功效。用于治疗流感病毒感染后的肺热咳嗽，支气管炎，咳痰不利等症。

上述各味中药的抗流感、解热、镇痛、抗炎、润肺、止咳等作用均有研究，但作为方剂尚无人使用。本发明方剂配伍得当、组方严谨，具有清热解毒、宣肺化痰的功效，使用本发明方剂治疗流感理论上具有可行性。为了进一步证实本发明方剂的抗性流感病毒功效，以H1N1流感病毒感染小鼠作为药效评价模型，通过感染小鼠存活率、存活天数、肺脏指数、流感病毒抗体滴度变化等指标，评价了本发明方剂对H1N1流感病毒感染小鼠具有明显的保护作用，为流感的临床治疗提供一定的支持。

下面给出一些具体的组方实施例。

实施例1

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七10g，扁担七12g，太白贝母15g。

实施例2

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七10g，扁担七15g，太白贝母12g。

实施例3

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七15g，扁担七10g，太白贝母12g。

实施例4

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七15g，扁担七12g，太白贝母10g。

实施例5

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七12g，扁担七15g，太白贝母10g。

实施例6

本实例所需原料药为防风20g，芝麻七12g，扁担七10g，太白贝母15g。

实施例7

本实例所需原料药为防风15g，芝麻七12g，扁担七10g，太白贝母10g。

实施例8

本实例所需原料药为防风10g，芝麻七10g，扁担七10g，太白贝母10g。

以上实施例的制备工艺如下：

将四味药粉碎后，准确称量置煎煮容器内，煎煮容器以瓦罐、砂锅为佳，加相当于药材量5～8倍的冷水浸泡2h，煮沸30～60min，滤过；药渣加3～5倍量水继续煎煮，煮沸20～40min，滤过。合并两次煎出液，于水浴上浓缩至每1ml相当于药材量1～2g的水煎剂。

上述的中药方剂，可利用通用的中药制药工艺和设备制成不同剂型：水煎剂、药丸、药片和胶囊等，能满足不同病人的需要。

下面给出动物实验。

通过药效学动物试验以期对本发明方剂8个实施例所得水煎剂进行抗流感疗效评价，并进一步筛选最佳药物配伍；通过急性毒理试验和长期毒理试验验证该方剂的安全性。

药效学试验

1、实验材料

1.1动物

BALB/c小鼠350只，SPF级，体重（18±2）g，雌雄各半,由西安交通大学医学院实验动物中心提供，动物合格证号:SCXK（陕）2007-001。

1.2病毒株

H1N1流感病毒株A/swine/Shaanxi/sf/2011(H1N1)，GenBank序列号:JX860700.1，为H1N1流感病毒地方分离株。将上述病毒株经MDCK细胞和鸡胚中增值，HA试验测得病毒滴度达8Log2，-80℃冻存备用。

1.3药物与试剂

方剂由防风、芝麻七、扁担七和太白贝母组成，均在适宜季节采摘自秦岭太白山，于干燥通风处自然阴干，保存。参照李仪奎主编的《中药药理实验方法学》，把人药剂量换算成BALB/c小鼠的剂量，制备水煎剂，高压蒸汽灭菌（110℃、15min），4℃保存、备用；达菲(Tamiflu，磷酸奥司他韦胶囊)：瑞士巴塞尔豪夫迈·罗氏有限公司产品，上海罗氏制药有限公司分装，批号B1162，分装批号SH0033。

1.4仪器

TGL-19台式高速冷冻离心机(上海市离心机械研究所产品)；电热恒温水浴箱(上海方瑞仪器厂产品)；MP2000D电子天平(上海恒平科学仪器有限公司产品)；IVC小鼠饲养笼，苏州教学笼具厂产品。

2方法

2.1本方剂对流感病毒感染小鼠体重、血清中流感病毒抗体水平、肺指数的影响

取132只BALB/c小鼠，随机分为11组，分别为空白对照组、模型组、达菲-阳性药物对照组（以下简称达菲组）以及本发明方剂的8个实施例组，每组12只。除空白对照组外，小鼠用乙醚轻度麻醉，以15个LD₅₀的H1N1流感病毒滴鼻感染，每只35uL。感染当天开始给药，连续5d，空白对照组和模型组灌喂等体积蒸馏水。每天观察小鼠生存及活动情况并称重，第6天摘眼球取血制备血清，HI试验测定血清中流感病毒抗体水平。解剖小鼠，称肺质量，计算肺指数及肺指数抑制率。

肺指数=肺湿重量(g)／体重(g)

2.2本方剂对流感病毒感染小鼠肺炎模型死亡率、存活时间和生命延长率的影响

取200只BALB/c小鼠，随机分为10组，分别为模型组、达菲组以及本发明方剂的8个实施例组，每组20只。各组小鼠用乙醚轻度麻醉，以15个LD₅₀流感病毒液滴鼻感染，每只35uL。感染当天开始给药，连续5d，模型组灌喂等体积蒸馏水。观察感染后2周内动物的死亡情况，计算死亡率、平均存活天数和生命延长率。

2.3数据处理

所有数据均以表示，组间差异用SPSS20.0统计学软件进行单因素方差分析。

3结果

3.1本方剂对流感病毒感染小鼠体重的影响

结合表1和图1可以看出：小鼠在人工感染流感病毒后两天内体重有所下降或增长缓慢，经本方剂治疗后，各治疗组小鼠体重逐步回升，其中实施例1组小鼠体重增长最明显。治疗结束后，各治疗组小鼠体重与模型组相比均差异极显著（P﹤0.01）。以上试验结果提示：本发明方剂对于保护流感模型小鼠的体重增长具有一定作用。

表1本方剂对流感病毒感染小鼠体重的影响

注：1)与空白对照组比较：*表示P﹤0.05，**表示P﹤0.01，***表示P﹥0.05；2)与模型组比较：A表示P﹤0.05，B表示P﹤0.01.

将上表各组小鼠体重数据绘制成折线图如图1所示。

3.2本方剂对流感病毒感染小鼠血清中流感病毒抗体水平的影响

由表2可以看出：本方剂可以提高流感模型小鼠血清中流感病毒抗体水平，提示本方剂对小鼠的免疫保护力具有增强作用。

表2本方剂对流感病毒感染小鼠血清中流感病毒抗体水平的影响

3.3本方剂对流感病毒感染小鼠肺指数的影响

由表3可以看出：采用H1N1流感病毒感染BALB/c小鼠后，小鼠的肺指数明显增高。经本发明方剂治疗5d，各实施例组和达菲组小鼠肺指数均有不同程度降低。与模型组比较，实施例1和实施例5组差异极显著(P﹤0.01)，而其它实施例组和达菲组差异显著(P﹤0.05)。

表3本方剂对流感病毒感染小鼠肺指数的影响

注：与模型组比较：1表示P﹤0.05，2表示P﹤0.01.

3.4本方剂对流感病毒感染小鼠死亡率的影响

由表4可以看出：采用HlNl流感病毒感染小鼠14d后，小鼠死亡率为90％，平均存活天数为8.50d；服用本方剂5天后，小鼠死亡数明显减少，死亡率均明显下降；各实施例组和达菲组均可延长动物平均存活天数，与模型组比较均差异极显著(P<0.01)。

表4本方剂对流感病毒感染小鼠死亡率、存活时间的影响

注：与模型组比较：*表示P﹤0.05，**表示P﹤0.01.

4结论

本发明方剂各实施例所得水煎剂能明显降低H1N1流感病毒感染后小鼠的肺指数、降低死亡率、延长存活时间，同时能维持流感病毒感染后小鼠体重稳定增长。此外，本发明方剂能提高流感病毒感染后小鼠血清中流感病毒抗体水平。以上试验结果提示：本发明方剂对HlNl流感病毒感染小鼠造成的病毒性流感动物模型具有显著治疗作用，其中作用效果最好的是实施例1所制得水煎剂。

急性毒理试验

根据以上治疗试验结果可知，本发明方剂实施例1的抗流感病毒感染的作用效果最好，对其开展急性毒理试验，检验该方剂的安全性。试验过程及结果如下：

因预试验实验测不出LD₅₀，只做最大给药量实验。以所能制得的最大可灌浓度（4.0g/ml），小鼠最大灌胃容量（0.4ml/20g）经胃一共两次灌服药物，其中第二次灌胃容积减半。

结果：灌胃后小鼠外观、行为活动、呼吸、分泌物、排泄物未见异常，未出现小鼠死亡情况。测得最大耐受量≧120g/kg，此剂量是成人(以60kg计算)临床拟用剂量0.33g/kg的363倍以上。按照急性毒性分级标准，认为该受试药物对受试动物无急性毒性。

长期毒理试验

对本发明方剂实施例一所得水煎剂开展长期毒理试验，通过对SD大鼠长期、高剂量灌胃观测其临床反应。试验分4组：空白对照组、12.5倍人药剂量组、25倍人药剂量组和50倍人药剂量组，空白对照组给予等体积蒸馏水。每天灌胃一次，连续90天。结果：各给药组SD大鼠的体重增长水平、脏器指数、血常规、肝功能、肾功能、心肌酶谱等指标与空白对照组相比无显著性差异（P＞0.05），主要脏器病理组织学检查亦无病理变化。结论：本发明方剂安全无毒，在临床剂量下一般不会产生不良反应。

Claims (8)

1.一种防治流感的组合物，其特征在于，以质量份数计，由以下组份组成：

防风15～20份、芝麻七10～15份、扁担七10～15份和太白贝母10～15份，该组合物的有效成分是将防风、芝麻七、扁担七和太白贝母粉碎后先用冷水浸泡，然后煎煮提取至少30min，过滤所得的煎出液。

2.如权利要求1所述的防治流感的组合物，其特征在于，以质量份数计，由以下组份组成：

防风20份、芝麻七12～15份、扁担七10～12份和太白贝母10～12份。

3.如权利要求1所述的防治流感的组合物，其特征在于，以质量份数计，由以下组份组成：

防风20份、芝麻七10份、扁担七12份和太白贝母15份。

4.一种防治流感的中药制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)按照以下质量份数计，防风15～20份、芝麻七10～15份、扁担七10～15份和太白贝母10～15份粉碎后，加相当于药材量5～8倍的冷水浸泡2～4h；

2)浸泡结束后，煮沸30～60min，滤过；药渣加3～5倍质量水再次煎煮20～40min，滤过；

3)合并两次煎出液，于水浴上浓缩至浸膏。

5.如权利要求4所述的防治流感的中药制剂的制备方法，其特征在于，以所制备的浸膏作为有效成分，添加辅料制成煎剂、药丸、片剂或胶囊。

6.权利要求1所述的防治流感的组合物在制备防治H1N1流感病毒的药物中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的药物为提高机体流感病毒抗体水平的药物。

8.权利要求1所述的防治流感的组合物在制备防治H1N1流感病毒引起的感冒的药物中的应用。