CN103340909A - 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法 - Google Patents

一种灵芝孢子粉的生物破壁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103340909A
CN103340909A CN2013102290606A CN201310229060A CN103340909A CN 103340909 A CN103340909 A CN 103340909A CN 2013102290606 A CN2013102290606 A CN 2013102290606A CN 201310229060 A CN201310229060 A CN 201310229060A CN 103340909 A CN103340909 A CN 103340909A
Authority
CN
China
Prior art keywords
spore powder
cordyceps militaris
link
ganoderma
ganoderma spore
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013102290606A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103340909B8 (zh
CN103340909B (zh
Inventor
吴学谦
徐娟
吴学良
吴庆其
陈如楚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZHEJIANG WU YANG TANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Original Assignee
ZHEJIANG WU YANG TANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZHEJIANG WU YANG TANG PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical ZHEJIANG WU YANG TANG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201310229060.6A priority Critical patent/CN103340909B8/zh
Publication of CN103340909A publication Critical patent/CN103340909A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103340909B publication Critical patent/CN103340909B/zh
Publication of CN103340909B8 publication Critical patent/CN103340909B8/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Soil Conditioners And Soil-Stabilizing Materials (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法是以无菌的灵芝孢子粉中加入蛹虫草进行固体发酵,使灵芝孢子粉破壁。本发明利用可分泌几丁质酶的蛹虫草作为溶壁菌,可对灵芝孢子进行有效、安全的破壁,使灵芝孢子粉的活性物质得到最大程度低保留和保护,有利于人体吸收利用;本发明中蛹虫草发酵过程不仅能使灵芝孢子破壁,作为一种有益微生物,蛹虫草菌丝体不必去除,而且其产生的虫草多糖、虫草酸、虫草素等活性物质可协同强化灵芝孢子粉的功效。

Description

一种灵芝孢子粉的生物破壁方法
(一)技术领域
本发明涉及一种灵芝孢子粉的生物破壁方法。
(二)背景技术
灵芝是中国传统的食药两用的名贵药材,具有扶正固本等功效,被《本草纲目》列为上品。灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出的极其细小的孢子,积聚了大量的灵芝多糖、三萜类、灵芝孢子油等活性成分。大量的现代药理学研究及临床案例证实灵芝孢子粉对免疫系统、神经系统、内分泌和代谢系统以及心血管系统等都具有很好的调节作用。但是灵芝孢子具有一层极难被人体胃酸消化的几丁质构成的双层外壁,阻碍其内活性物质有效地被人体吸收和利用。研究表明破壁可大大提高灵芝孢子粉的生物利用度,破壁后人体对灵芝孢子粉的吸收率可提高50倍之高,灵芝孢子多糖含量可提高2倍左右。
目前灵芝孢子粉的破壁方法有物理、化学及生物法。物理及化学法易导致有效物质的流失及破坏。生物法是采用酶解、微生物发酵等温和手段,能有效地保存灵芝孢子功效成分,同时具有能量消耗小、破壁效果好等优点。但是酶解法破壁存在成本高,破壁后外源酶难除去等不足,而采用有益的微生物发酵破壁,破壁后有益微生物不必除去,其发酵还可增添新的活性成分。
蛹虫草是我国独特名贵的中药之一,具有多种药理活性。研究表明蛹虫草菌丝在其生长过程中可分泌出能够分解昆虫体壁的水解酶系如几丁质酶、蛋白酶等。因此利用可分泌几丁质酶的蛹虫草作为溶壁菌,对灵芝孢子粉进行发酵破壁,不仅破壁效果好,可最大限度地保留灵芝孢子的有效成分,同时其发酵可产生虫草多糖、虫草酸、虫草素等活性物质,还可起到协同强化灵芝孢子粉功效的作用。
(三)发明内容
针对常规的物理及化学灵芝孢子破壁方法容易导致活性物质损失,而酶法破壁存在成本高、外源酶难去除等问题,本发明提供一种以可分泌几丁质酶的有益微生物作为灵芝孢子的溶壁菌,对灵芝孢子粉进行有效、安全地破壁的方法。
本发明采用的技术方案是:
一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法包括:
(1)采用辐照或中成药灭菌柜对灵芝孢子粉进行灭菌;
(2)蛹虫草种子液的制备:将可分泌几丁质酶的蛹虫草斜面菌种接种于液体种子培养液,在18~28℃,150r/min下培养2~4d,得蛹虫草种子液备用;所述液体种子培养液组成如下:100~250g/L马铃薯,10~25g/L几丁质,15~30g/L酵母浸膏,30~60g/L蛋白胨,1~5g/LKH2PO4,0.1~1.0g/LMgSO4,溶剂为水;所述蛹虫草菌种为本领域常规课分泌几丁质酶的蛹虫草,如ACCC52244、ACCC52245、CICC14013、ACCC50383、ACCC50979、CGMCC No.5.699等。
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)蛹虫草种子液按固液质量比1:1~2混合均匀,18~28℃,静止,避光发酵4~6d,发酵结束后固液分离(过滤或离心),干燥,即得破壁后的灵芝孢子粉。
优选的,所述液体种子培养液组成如下:200g/L马铃薯,20g/L几丁质,20g/L酵母浸膏,50g/L蛋白胨,2g/LKH2PO4,0.5g/LMgSO4,溶剂为水。
优选的,步骤(2)所用蛹虫草为蛹虫草ACCC52244(购自ACCC)。
优选的,所述灵芝孢子粉为赤芝孢子粉。
本发明的有益效果主要体现在:
本发明利用可分泌几丁质酶的蛹虫草作为溶壁菌,可对灵芝孢子进行有效、安全的破壁,使灵芝孢子粉的活性物质得到最大程度低保留和保护,有利于人体吸收利用;本发明中蛹虫草发酵过程不仅能使灵芝孢子破壁,作为一种有益微生物,蛹虫草菌丝体不必去除,而且其产生的虫草多糖、虫草酸、虫草素等活性物质可协同强化灵芝孢子粉的功效。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:
实施例1:
一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法包括以下步骤:
(1)采用C060辐照对赤芝孢子粉进行灭菌,辐照剂量为25kGy;
(2)蛹虫草种子培养液的制备:斜面蛹虫草ACCC52244菌种接种于液体种子培养液,在18℃,150r/min下培养4d,备用。液体种子培养液配制:200g马铃薯,切成小块,加水1000毫升煮沸30分钟,滤去马铃薯块,将滤液补足至1000毫升,加入20g几丁质,20g酵母浸膏,50g蛋白胨,2g KH2PO4和0.5g MgSO4,121℃灭菌20min,备用;
(3)将(1)灭菌的赤芝孢子粉与(2)蛹虫草种子培养液按固液质量比1:1混合均匀,28℃,静止,避光发酵4d;发酵结束后固液分离,干燥,即得破壁后的灵芝孢子粉;以血球计数法检测,孢子粉破壁率约为99.5%。
实施例2:
一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法包括以下步骤:
(1)采用中成药灭菌柜对赤芝孢子粉进行灭菌,灭菌条件为121℃,30min。
(2)蛹虫草种子培养液的制备:斜面蛹虫草ACCC52244菌种接种于液体种子培养液(同实施例1),在28℃,150r/min下培养2d,备用。
(3)将(2)蛹虫草种子培养液与(1)灭菌的灵芝孢子粉按固液比1:1.5混合均匀,25℃,静止,避光发酵5d;发酵结束后固液分离,干燥,即得破壁后的灵芝孢子粉;以血球计数法检测,孢子粉破壁率约为98.5%。
实施例3:
一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法包括以下步骤:
(1)采用C060辐照对赤芝孢子粉进行灭菌,辐照剂量为25kGy
(2)蛹虫草种子培养液的制备:斜面蛹虫草ACCC52244菌种接种于液体种子培养液(同实施例1),在25℃,150r/min下培养3d,备用。
(3)将(2)蛹虫草种子培养液与(1)灭菌的赤芝孢子粉按固液质量比1:2混合均匀,18℃,静止,避光发酵6d;发酵结束后固液分离,干燥,即得破壁后的灵芝孢子粉;以血球计数法检测,孢子粉破壁率约为99.3%。
实施例4:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对小鼠免疫功能影响的实验
将按照实施例1方法生物破壁的灵芝孢子粉分为低、中、高3个剂量组(100、200、600mg/kg),并设置对照组(市售灵芝破壁孢子粉,破壁率99%),喂饲小鼠30d,分别进行脏器指数测定、绵羊红细胞诱导小鼠迟发型变态反应(DTH)试验、ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力试验、小鼠血清溶血素生成、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、小鼠碳廓清能力试验,结果见表1~表6:
表1:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对小鼠胸腺指数的影响(n=10,x±s)
Figure BDA00003320898600051
注:*与对照组比较,差异显著(P<0.05),下同。
表2:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对绵羊红细胞诱导小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响(n=10,x±s)
Figure BDA00003320898600052
注:*与对照组比较,差异显著(P<0.05),下同。
表3:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对ConA诱导的小鼠淋巴细胞的增殖能力的影响(n=10,x±s)
Figure BDA00003320898600061
注:*与对照组比较,差异显著(P<0.05),下同。
表4:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对小鼠血清溶血素的影响(n=10,x±s)
Figure BDA00003320898600062
表5:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响(n=10,x±s)
注:*与对照组比较,差异显著(P<0.05),下同。
表6:本发明生物破壁的灵芝孢子粉对小鼠巨噬细胞碳廓清能力的影响(n=10,x±s)
Figure BDA00003320898600064
Figure BDA00003320898600071
注:*与对照组比较,差异显著(P<0.05),下同。
结果表明,与对照组比较,本发明生物破壁的灵芝孢子粉中、高剂量组在提高小鼠胸腺指数和淋巴细胞的增殖能力差异显著,低、中、高剂量组在提高小鼠迟发型变态反应差异显著,说明经本发明生物破壁的灵芝孢子粉能增强破壁灵芝孢子粉的小鼠特异性免疫应答。低、中剂量组还能显著提高巨噬细胞碳廓清能力和吞噬鸡红细胞能力,说明经本发明生物破壁的灵芝孢子粉能增强破壁灵芝孢子粉的小鼠非特异性免疫应答。

Claims (4)

1.一种灵芝孢子粉的生物破壁方法,所述方法包括:
(1)采用辐照或中成药灭菌柜对灵芝孢子粉进行灭菌;
(2)蛹虫草种子液的制备:将可分泌几丁质酶的蛹虫草斜面菌种接种于液体种子培养液,在18~28℃,150r/min下培养2~4d,得蛹虫草种子液备用;所述液体种子培养液组成如下:100~250g/L马铃薯,10~25g/L几丁质,15~30g/L酵母浸膏,30~60g/L蛋白胨,1~5g/LKH2PO4,0.1~1.0g/LMgSO4,溶剂为水;
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)蛹虫草种子液按固液质量比1:1~2混合均匀,18~28℃,静止,避光发酵4~6d,发酵结束后固液分离,干燥,即得破壁后的灵芝孢子粉。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述液体种子培养液组成如下:200g/L马铃薯,20g/L几丁质,20g/L酵母浸膏,50g/L蛋白胨,2g/LKH2PO4,0.5g/LMgSO4,溶剂为水。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于步骤(2)所用蛹虫草为蛹虫草ACCC52244。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述灵芝孢子粉为赤芝孢子粉。
CN201310229060.6A 2013-06-07 2013-06-07 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法 Active CN103340909B8 (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310229060.6A CN103340909B8 (zh) 2013-06-07 2013-06-07 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310229060.6A CN103340909B8 (zh) 2013-06-07 2013-06-07 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法

Publications (3)

Publication Number Publication Date
CN103340909A true CN103340909A (zh) 2013-10-09
CN103340909B CN103340909B (zh) 2015-04-08
CN103340909B8 CN103340909B8 (zh) 2022-07-29

Family

ID=49275769

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310229060.6A Active CN103340909B8 (zh) 2013-06-07 2013-06-07 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103340909B8 (zh)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103815406A (zh) * 2014-03-13 2014-05-28 浙江森芝宝生物科技有限公司 一种灵芝孢子虫草组合物及其制备方法
CN104017729A (zh) * 2014-06-10 2014-09-03 信芝(厦门)生物科技有限公司 一种灵芝孢子粉原生态生物破壁技术
CN104940248A (zh) * 2015-07-15 2015-09-30 杭州德标科技有限公司 一种灵芝孢子粉的破壁方法
CN105614841A (zh) * 2016-02-05 2016-06-01 刘宏非 一种富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法
CN106350496A (zh) * 2016-09-06 2017-01-25 大连理工大学 一种昆虫来源的多结构域内切几丁质酶、其相关的生物材料及其应用
CN107779400A (zh) * 2016-08-25 2018-03-09 丹阳西联生物技术有限公司 一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法
CN107893029A (zh) * 2017-12-29 2018-04-10 安徽金寨乔康药业有限公司 一种灵芝孢子粉的复合破壁处理方法
CN108904551A (zh) * 2018-09-30 2018-11-30 杭州雪域生物技术有限公司 一种灵芝孢子粉深层发酵破壁方法
CN108938681A (zh) * 2018-07-25 2018-12-07 王碧光 一种兼具抗衰老抗癌抗肿瘤的灵芝孢子粉酶发酵软破壁方法
CN112245458A (zh) * 2020-10-29 2021-01-22 陕西省微生物研究所 利用鸡腿菇对灵芝孢子粉进行破壁的制备方法及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101596220A (zh) * 2009-04-07 2009-12-09 西藏月王生物技术有限公司 一种灵芝孢子的破壁方法
CN102604919A (zh) * 2012-04-16 2012-07-25 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用蛹虫草液体发酵生产纤溶酶的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101596220A (zh) * 2009-04-07 2009-12-09 西藏月王生物技术有限公司 一种灵芝孢子的破壁方法
CN102604919A (zh) * 2012-04-16 2012-07-25 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种利用蛹虫草液体发酵生产纤溶酶的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
夏志兰等: "灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究", 《食用菌学报》 *
顾宇翔等: "发酵蛹虫草菌丝体胞外几丁质酶活性研究", 《食品与发酵工业》 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103815406A (zh) * 2014-03-13 2014-05-28 浙江森芝宝生物科技有限公司 一种灵芝孢子虫草组合物及其制备方法
CN104017729A (zh) * 2014-06-10 2014-09-03 信芝(厦门)生物科技有限公司 一种灵芝孢子粉原生态生物破壁技术
CN104940248B (zh) * 2015-07-15 2018-12-21 杭州德标科技有限公司 一种灵芝孢子粉的破壁方法
CN104940248A (zh) * 2015-07-15 2015-09-30 杭州德标科技有限公司 一种灵芝孢子粉的破壁方法
CN105614841A (zh) * 2016-02-05 2016-06-01 刘宏非 一种富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法
CN105614841B (zh) * 2016-02-05 2018-11-27 李学龙 一种富含生物活性物质的蛹虫草提取物制备方法
CN107779400A (zh) * 2016-08-25 2018-03-09 丹阳西联生物技术有限公司 一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法
CN106350496A (zh) * 2016-09-06 2017-01-25 大连理工大学 一种昆虫来源的多结构域内切几丁质酶、其相关的生物材料及其应用
CN106350496B (zh) * 2016-09-06 2019-11-26 大连理工大学 一种昆虫来源的多结构域内切几丁质酶、其相关的生物材料及其应用
CN107893029A (zh) * 2017-12-29 2018-04-10 安徽金寨乔康药业有限公司 一种灵芝孢子粉的复合破壁处理方法
CN107893029B (zh) * 2017-12-29 2021-09-24 安徽金寨乔康药业有限公司 一种灵芝孢子粉的复合破壁处理方法
CN108938681A (zh) * 2018-07-25 2018-12-07 王碧光 一种兼具抗衰老抗癌抗肿瘤的灵芝孢子粉酶发酵软破壁方法
CN108904551A (zh) * 2018-09-30 2018-11-30 杭州雪域生物技术有限公司 一种灵芝孢子粉深层发酵破壁方法
CN108904551B (zh) * 2018-09-30 2021-03-30 杭州雪域生物技术有限公司 一种灵芝孢子粉深层发酵破壁方法
CN112245458A (zh) * 2020-10-29 2021-01-22 陕西省微生物研究所 利用鸡腿菇对灵芝孢子粉进行破壁的制备方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN103340909B8 (zh) 2022-07-29
CN103340909B (zh) 2015-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103340909B (zh) 一种灵芝孢子粉的生物破壁方法
CN104288302B (zh) 一种药/食用真菌发酵中草药的方法及其应用
CN103263448B (zh) 用于发酵预处理改进银杏叶黄酮提取的发酵菌种及应用
CN103083366B (zh) 血芝-香菇柄固态发酵复合物、其制备方法及其用途
CN101067146B (zh) 甘草酸的生物提取方法
CN106146684A (zh) 破壁灵芝孢子粉灵芝多糖的分离纯化方法
CN101138576B (zh) 一种党参发酵液及其应用
CN104845903B (zh) 嗜甘草的植物乳杆菌及其制备的甘草益生菌制剂
CN106727738A (zh) 一种桑黄灵芝粉及其制备方法
CN103923795B (zh) 一种银杏灵芝虫草酒及其制备方法
CN103421861B (zh) 一种液态发酵米糠麸皮全料生产冬虫夏草多糖的方法
CN105176844A (zh) 一种桦褐孔菌的中药材或中药渣的双向固体发酵方法
CN105368695B (zh) 一种茯苓蜂胶发酵醋及其制备方法
CN104839382B (zh) 一种灵芝海棠茶及制备工艺及其应用
CN103550264B (zh) 一种灵芝精华物质的提取方法
CN102498946A (zh) 一种食药用菌生物发酵灵芝孢子新技术
CN105106251B (zh) 一种破壁灵芝孢子粉胶囊的制备方法
CN107981327A (zh) 一种兼具缓解疲劳与免疫调节作用的发酵型复方制剂及其制备方法
CN104288187A (zh) 一种灵芝菌固体发酵提取物的制备方法
CN105079430A (zh) 一种增强免疫治疗慢性支气管炎的口服液及其生产工艺
CN106994172A (zh) 一种预防治疗对虾肠道微孢子虫的中药组合物、粉剂及其制备方法
CN105125646B (zh) 一种绿色木霉在提高枫蓼组方药材中槲皮素提取率中的应用
CN106235314A (zh) 一种高效保健口服液及其制备方法
CN106497795A (zh) 一种含有枸杞子的冬虫夏草菌种子培养基及其应用
CN105861614A (zh) 黑曲霉在制备黄芪甲苷中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CI03 Correction of invention patent

Correction item: Abstract

Correct: Correct

False: Error

Number: 14

Page: The title page

Volume: 31

CI03 Correction of invention patent
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A biological wall-breaking method of Ganoderma lucidum spore powder

Effective date of registration: 20230103

Granted publication date: 20150408

Pledgee: Zhejiang Tailong Commercial Bank Co.,Ltd. Lishui Branch

Pledgor: ZHEJIANG WUYANGTANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Registration number: Y2023330000015

PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right

Date of cancellation: 20230906

Granted publication date: 20150408

Pledgee: Zhejiang Tailong Commercial Bank Co.,Ltd. Lishui Branch

Pledgor: ZHEJIANG WUYANGTANG PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

Registration number: Y2023330000015

PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right