CN107779400A - 一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及灵芝孢子粉破壁技术领域，尤其是一种微生物发酵灵芝孢子破壁的方法，包括以下步骤：(1)灵芝孢子粉灭菌处理，(2)微生物液的制备，(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.1～1.8混合均匀，控制温度为20～25℃，静置，避光发酵5～7d，发酵结束后固液分离，干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉。采用本发明的技术方案的有益效果是：本发明灰色链霉菌作为溶壁菌，可对灵芝孢子进行有效、安全的破壁，使灵芝孢子粉的活性物质得到最大程度低保留和保护，有利于人体吸收利用；本发明中微生物发酵过程不仅能使灵芝孢子破壁，产生的微生物蛋白酶可协同强化灵芝孢子粉的功效。

Description

一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法
技术领域
本发明涉及灵芝孢子粉破壁技术领域，尤其是一种微生物发酵灵芝孢子破壁的方法。
背景技术
灵芝孢子粉是灵芝在生长成熟期，从灵芝菌褶中弹射出来的极其微小的卵形生殖细胞即灵芝的种子。每个灵芝孢子只有4－6个微米，是活体生物体，双壁结构，外被坚硬的几丁质纤维素所包围，人体很难充分吸收。破壁后更适合人体肠胃直接吸收。它凝聚了灵芝的精华，具有灵芝的全部遗传物质和保健作用，平均每100公斤灵芝才能采集到1公斤纯正的孢子粉。据测定它所含的灵芝多糖、灵芝多肽、三萜类、氨基酸、蛋白质等活性物质的量，是灵芝子实体的70倍。
破壁，是指松花粉和灵芝孢子粉之类细微且带有纤维质外壳，不宜直接为人体吸收消化的物质，通过人为的机械、物理化学方法、生物酶解法，将其纤维素外壁破碎或者消除之后，使其更加容易消化吸收纤维素壁内的营养物质。现在破壁方式有物理、化学及生物法。物理及化学法易导致有效物质的流失及破坏。生物法是采用酶解、微生物发酵等温和手段，能有效地保存灵芝孢子功效成分，同时具有能量消耗小、破壁效果好等优点。但是酶解法破壁存在成本高，破壁后外源酶难以除去等不足。
发明内容
本发明的目的是：克服上述灵芝孢子破壁方法中存在的技术不足，提供一种能对灵芝孢子粉进行安全有效的微生物破壁方法。
为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，所述方法包括以下步骤：
(1)灵芝孢子粉灭菌处理：采用微波照射法或者在灭菌柜中用环氧乙烷气体灭菌法对灵芝孢子粉进行灭菌处理；
(2)微生物液的制备：将能分泌几丁质酶的微生物接种于液体培养液中，在20～26℃，160r/min下培养2.5～3.5d，得到微生物液备用；所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉21～25份，硝酸钾1.2～1.8份，硫酸镁0.6～0.8份，氯化钠0.6～0.8份，磷酸氢二钾0.6～0.8份，硫酸铁0.02～0.05份，琼脂16～18份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在122～125℃下灭菌25～30min；
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.1～1.8混合均匀，控制温度为20～25℃，静置，避光发酵5～7d，发酵结束后固液分离，干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉。
进一步的，所述微波照射法的工艺条件为：微波频率3000MHz～30000MHz，照射时间为2～3min。
进一步的，所述环氧乙烷气体灭菌法的工艺条件为：灭菌柜内的温度为38～52℃，灭菌时间为12～24h，灭菌柜内的相对湿度为35～65％，环氧乙烷气体的浓度为900～1400mg/l。
进一步的，所述步骤(2)中所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉23份，硝酸钾1.5份，硫酸镁0.7份，氯化钠0.7份，磷酸氢二钾0.7份，硫酸铁0.03份，琼脂17份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在123℃下灭菌27min。
进一步的，所述步骤(2)中能分泌几丁质酶的微生物为灰色链霉菌。
进一步的，所述步骤(3)中的干燥步骤在50～65℃下进行。
本发明中采用微波灭菌法的原因是：微波能穿透到介质和物料的深部，可使介质和物料表里一致地加热；且具有低温、常压、高效、快速，低耗能、易操作、易维护等优点，不会污染灵芝孢子粉，也不会破坏灵芝孢子粉的有效成分。
本发明中采用环氧乙烷气体灭菌法的原因是：环氧乙烷具有广谱高效杀菌作用，穿透力强，具有很强扩散性，杀菌原理为烷基化作用，对有机物质无损害，属于最有效的化学冷灭菌剂之一，不会污染灵芝孢子粉，也不会破坏灵芝孢子粉的有效成分。
采用本发明的技术方案的有益效果是：本发明灰色链霉菌作为溶壁菌，可对灵芝孢子进行有效、安全的破壁，使灵芝孢子粉的活性物质得到最大程度低保留和保护，有利于人体吸收利用；本发明中微生物发酵过程不仅能使灵芝孢子破壁，产生的微生物蛋白酶可协同强化灵芝孢子粉的功效。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，所述方法包括以下步骤：
(1)灵芝孢子粉灭菌处理：采用微波照射法灵芝孢子粉进行灭菌处理，微波频率3000MHz，照射时间为2～3min；
(2)微生物液的制备：将灰色链霉菌接种于液体培养液中，在20℃，160r/min下培养3.5d，得到微生物液备用；所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉21份，硝酸钾1.2份，硫酸镁0.6份，氯化钠0.6份，磷酸氢二钾0.6份，硫酸铁0.02份，琼脂16份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在122℃下灭菌30min，此条件为灰色链霉菌发酵的最佳条件；
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.1混合均匀，控制温度为25℃，静置，避光发酵7d，发酵结束后固液分离，控制温度65℃进行干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉，以血球计数法检测，孢子粉破壁率约为98.8％。
实施例2
一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，所述方法包括以下步骤：
(1)灵芝孢子粉灭菌处理：在灭菌柜中用环氧乙烷气体灭菌法对灵芝孢子粉进行灭菌处理，环氧乙烷气体灭菌法的工艺条件为：灭菌柜内的温度为38～52℃，灭菌时间为12～24h，灭菌柜内的相对湿度为35～65％，环氧乙烷气体的浓度为900～1400mg/l。
(2)微生物液的制备：将灰色链霉菌接种于液体培养液中，在24℃，160r/min下培养3d，得到微生物液备用；所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉23份，硝酸钾1.5份，硫酸镁0.7份，氯化钠0.7份，磷酸氢二钾0.7份，硫酸铁0.03份，琼脂17份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在123℃下灭菌27min，此条件为灰色链霉菌发酵的最佳条件。
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.6混合均匀，控制温度为22℃，静置，避光发酵6d，发酵结束后固液分离，控制温度60℃进行干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉，以血球计数法检测，孢子粉破壁率约为99.8％。
本实施例为最佳实施方式。
实施例3
一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，所述方法包括以下步骤：
(1)灵芝孢子粉灭菌处理：采用微波照射法灵芝孢子粉进行灭菌处理，微波频率30000MHz，照射时间为2～3min；
(2)微生物液的制备：将灰色链霉菌接种于液体培养液中，在26℃，160r/min下培养2.5d，得到微生物液备用；所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉25份，硝酸钾1.8份，硫酸镁0.8份，氯化钠0.8份，磷酸氢二钾0.8份，硫酸铁0.05份，琼脂18份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在125℃下灭菌25min，此条件为灰色链霉菌发酵的最佳条件；
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.8混合均匀，控制温度为20℃，静置，避光发酵5d，发酵结束后固液分离，控制温度50℃进行干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉，以血球计数法检测，孢子粉破壁率约为98.5％。
尽管上述实施例已对本发明的技术方案进行了详细地描述，但是本发明的技术方案并不限于以上实施例，在不脱离本发明的思想和宗旨的情况下，对本发明的技术方案所做的任何改动都将落入本发明的权利要求书所限定的范围。

Claims (6)

1.一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)灵芝孢子粉灭菌处理：采用微波照射法或者在灭菌柜中用环氧乙烷气体灭菌法对灵芝孢子粉进行灭菌处理；
(2)微生物液的制备：将能分泌几丁质酶的微生物接种于液体培养液中，在20～26℃，160r/min下培养2.5～3.5d，得到微生物液备用；所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉21～25份，硝酸钾1.2～1.8份，硫酸镁0.6～0.8份，氯化钠0.6～0.8份，磷酸氢二钾0.6～0.8份，硫酸铁0.02～0.05份，琼脂16～18份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在122～125℃下灭菌25～30min；
(3)将步骤(1)灭菌后的灵芝孢子粉与步骤(2)中的微生物液按固液质量比1︰1.1～1.8混合均匀，控制温度为20～25℃，静置，避光发酵5～7d，发酵结束后固液分离，干燥，即得破壁后的灵芝孢子粉。
2.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述微波照射法的工艺条件为：微波频率3000MHz～30000MHz，照射时间为2～3min。
3.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述环氧乙烷气体灭菌法的工艺条件为：灭菌柜内的温度为38～52℃，灭菌时间为12～24h，灭菌柜内的相对湿度为35～65％，环氧乙烷气体的浓度为900～1400mg/l。
4.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述液体培养液质量份组成如下：可溶性淀粉23份，硝酸钾1.5份，硫酸镁0.7份，氯化钠0.7份，磷酸氢二钾0.7份，硫酸铁0.03份，琼脂17份，所述液体培养液的pH值为7.5，所述液体培养液在123℃下灭菌27min。
5.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述步骤(2)中能分泌几丁质酶的微生物为灰色链霉菌。
6.根据权利要求1所述的一种灵芝孢子粉的微生物破壁方法，其特征在于，所述步骤(3)中的干燥步骤在50～65℃下进行。
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