CN105498718B - 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用 - Google Patents

一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105498718B
CN105498718B CN201610065617.0A CN201610065617A CN105498718B CN 105498718 B CN105498718 B CN 105498718B CN 201610065617 A CN201610065617 A CN 201610065617A CN 105498718 B CN105498718 B CN 105498718B
Authority
CN
China
Prior art keywords
radiodurans
biosurfactant
functional modification
thalline
uranium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610065617.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105498718A (zh
Inventor
肖方竹
彭国文
符建文
何淑雅
黄波
唐艳
余丽梅
蒲移秋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of South China
Original Assignee
University of South China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of South China filed Critical University of South China
Priority to CN201610065617.0A priority Critical patent/CN105498718B/zh
Publication of CN105498718A publication Critical patent/CN105498718A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105498718B publication Critical patent/CN105498718B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/24—Naturally occurring macromolecular compounds, e.g. humic acids or their derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/006—Radioactive compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/10—Inorganic compounds
    • C02F2101/20—Heavy metals or heavy metal compounds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法。首先将稻谷秸秆和谷壳埋入农田土壤中堆肥，经富集培养、发酵培养和平板化学培养初筛，得到一种生物表面活性剂菌株液体，将其对耐辐射奇球菌DR进行功能化修饰，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，并将其应用于铀污染水体修复中。本发明方法所使用自然资源生物质为原料，对环境无毒无污染，实现了自然资源的再生利用和资源化。同时，方法简单、反应条件温和，所得吸附剂，能使浓度为0.45~0.50 mg/L铀污染水体中铀的含量下降95.2~95.78%，具有很好的社会效益和经济效益。

Description

一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法及其 应用
技术领域
本发明涉及铀污染水体的生物修复处理领域，具体是利用一种生物表面活性剂对耐辐射奇球菌DR进行功能化修饰的新方法，及其在铀污染水体修复中的应用。
背景技术
环境是人类赖以生存的空间，是人类进行生产活动的物质基础和必要条件。人与自然环境之关系的和谐是社会持续稳定发展的基本保证。随着社会经济的不断发展和人类开发创造能力的不断提高，对自然环境的改造力度和影响程度也越来越大。
核工业的发展、核技术的广泛应用以及其他工业、农业、能源、军事、交通、医疗卫生等领域内的活动使人类周围生态环境的放射性核素本底值不断增加，进入环境中的放射性核素会在大气、水和土壤中迁移，随食物链进入人和动物体内，产生辐射损伤，部分核素还将影响人体的生理生化反应及代谢过程。铀是一种重要的放射性核素，同时兼有化学污染毒性和放射性，在水体和土壤中大多以铀酰离子（UO2 2+）形式存在，可以通过采矿作业、核试验、核燃料、核武器和意外泄露等方式释放到土壤、沉积物和地下水中，造成土壤和地下水中的铀污染，危害人类赖以生存的环境。
目前，我国处理含铀废水的方法主要有化学沉淀法、离子交换法、混凝沉淀法、萃取法、氧化还原法、沉降-结晶法、凝结-絮凝法、膜分离法、蒸发浓缩法、浮选法、电化学处理法、渗析法、反渗透法和吸附法。这些传统方法虽然在一定程度上取得了较好的效果，但是普遍存在工艺流程冗长、后续工艺复杂，成本高、投资大，能耗高、效率低、操作困难、易产生二次污染，特别对于处理低含量铀污染水体时，其操作成本相对过高。
近年来发展的生物修复法，以其成本低廉、效率高、成本低、安全、环保等特点，成为铀污染水体修复技术的一个研究热点，吸引了众多学者进行了大量研究，并取得了很多可喜的研究成果，它利用生物体的生命代谢活动降低铀矿冶含铀废水中铀的浓度或使其完全无害化，使其部分或完全恢复到原始状态。但是，很多生物在修复铀矿冶含铀废水时，由于其对辐射比较敏感，因此它们修复铀污染水体的能力受到较大限制。
耐辐射奇球菌（Deinococcus Radiodurans，DR菌）是迄今为止地球上发现的辐射抗性最强的生物之一，能够在60 Gy/h的环境中正常生长，而且能在超过15 kGy 的急性γ辐照环境下不出现致死或发生诱变，一直倍受核环境工程界的广泛关注和重视。
然而，目前国内外开展耐辐射奇球菌DR修复铀污染水体的研究鲜有报道。另外，耐辐射奇球菌DR在含铀废水溶液中容易以悬浮态生长，菌体与水的密度差较小，难于与水分离，导致影响其修复铀污染水体的实际效果。因此，通过对耐辐射奇球菌DR进行功能化修饰，以增强其化学稳定性和机械强度，是实现耐辐射奇球菌DR对铀污染水体修复的有效途径。
发明内容
为了克服现有技术中的问题，本发明的目的是提供一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，该方法既具有取材方便、成本低廉、环境友好，修复效率高（尤其是对铀含量在0.5 mg/L的低浓度含铀废水效果更佳），又具有操作步骤简单，水体环境适中（pH值接近中性，适宜温度范围宽），环境风险小等多重特点。
一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其具体措施是：首先将稻谷秸秆和谷壳埋入农田土壤中堆肥，在低温条件下经过富集培养、发酵培养和平板化学培养初筛，得到一种生物表面活性剂菌株液体，将其代替传统的化学试剂对耐辐射奇球菌DR进行功能化修饰，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，并将其应用于铀污染水体修复中。
具体步骤如下：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按一定比例的接种量接种转至大瓶的培养基中，在一定温度下继续培养一段时间。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12 h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻干燥机中干燥，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取一定质量干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入一定体积生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在恒温水浴箱中磁力搅拌，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于真空冷冻干燥机中干燥，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL不同浓度的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入一定质量的生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值。然后将其放入恒温水浴箱中进行恒温振荡。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液并采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度，并根据吸附前后溶液中铀的浓度计算生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p (%)。
所述的步骤(1)中耐辐射奇球菌DR菌体的制备，使用的固体TGY培养基组成是：胰蛋白胨5 g；酵母提取物3 g；葡萄糖1 g；琼脂15 g；去离子水1000 mL；pH= 7.0。
所述的步骤(1)中耐辐射奇球菌DR菌体的制备，菌株接种量为0.5 ~ 1.5%；培养温度为25 ~ 35 ℃；培养时间为20 ~ 30 h；真空冷冻干燥温度为-50 ~ -60 ℃；真空冷冻干燥时间为28~ 30 h。
所述的步骤(2)中生物表面活性剂菌株液体的制备，使用的富集培养基组成是：氯化钾1.5 g；硫酸铵12 g；氯化钠1.2 g；七水硫酸亚铁3 × 10-5 g；磷酸氢二钾3.5 g；三水磷酸氢二钾0.65 g；EDTA 1.1 g；酵母浸膏0.6 g；植物油5 g；去离子水1000 mL。
所述的步骤(2)中生物表面活性剂菌株液体的制备，使用的发酵培养基组成是：氯化钾1.5 g；硫酸铵12 g；氯化钠1.2 g；七水硫酸亚铁3 × 10-5 g；磷酸氢二钾3.5 g；三水磷酸氢二钾0.65 g；硫酸镁0.6 g；氯化钙0.25 g；硫酸锌0.3 g；硫酸铜0.3 g；EDTA 1.1 g；酵母浸膏0.6 g；植物油5 g；去离子水1000 mL。
所述的步骤(2)中生物表面活性剂菌株液体的制备，使用的平板培养基组成是：葡萄糖20 g；蛋白胨5 g；酵母浸膏0.25 g；琼脂20 g；去离子水1000 mL。
所述的步骤(3)中生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR，使用的干燥的耐辐射奇球菌DR菌体质量为1.5 ~ 2.5 g；生物表面活性剂菌株液体体积为20 ~ 30 mL，功能化修饰温度为40 ~ 50 ℃；功能化修饰时间为4 ~5 h；真空冷冻干燥温度为70 ~ 80 ℃；真空冷冻干燥时间为2 ~ 3 h。
所述的步骤(4)中生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附，铀标准溶液的浓度为0.45 ~ 0.5 mg/L；吸附剂的质量为1 ~ 2 g；溶液的pH值为3 ~ 8；反应温度为25 ~ 50 ℃；吸附时间为20 ~ 70 min。
本发明所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法及其应用，相比现有的技术，具有以下显著优点：
（1）在生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的过程中，使用自制的生物表面活性剂代替传统方法中使用的化学试剂，从而避免了有毒有害的化学物质排入到环境中，真正做到了对环境友好。
（2）本发明使用的耐辐射奇球菌DR对铀污染水体具有较好的耐辐射性能，克服了常用吸附生物的耐辐射抗性问题。
（3）本发明在使用生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR过程中，制备工艺简单，反应条件温和，不需要任何加压等化工设备，加热条件也容易实现，能耗低。
（4）本发明使用生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR后，耐辐射奇球菌DR具有较好的铀除去能力，吸附率p均在95%以上，而且机械强度高、化学稳定性好，在8000 r/min的搅拌速率下可充分悬浮，不溶涨、不变形，并能确保与含铀溶液成分接触。
附图说明
图1为生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在不同吸附时间t内吸附铀的效果图，
图2为生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在不同投加量m下吸附铀的效果图，
图3为生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在不同溶液pH条件下吸附铀的效果图，
图4为生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在不同反应温度T下吸附铀的效果图。
具体实施方式
下面通过对实施例对本发明进行具体描述，它们只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，本领域的技术人员根据上述发明的内容做出一些非本质的改进或调整，均属于本发明保护范围。
实施例1：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按0.5 %的接种量接种转至大瓶的培养基中，在25℃下继续培养20 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12 h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-50℃真空冷冻干燥机中干燥 28 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取1.5 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入20 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在40℃恒温水浴箱中磁力搅拌4 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于70 ℃真空冷冻干燥机中干燥 2 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL0.45 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入1 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为3。然后将其放入25 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡20 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.021 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p 为95.33 %。
实施例2：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按0.5 %的接种量接种转至大瓶的培养基中，在30 ℃下继续培养25 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-55 ℃真空冷冻干燥机中干燥 29 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取2 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入25 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在45 ℃恒温水浴箱中磁力搅拌4.5 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于70 ℃真空冷冻干燥机中干燥 2.5 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL0.5 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入2 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为4。然后将其放入30 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡30 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.023 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p 为95.40 %。
实施例3：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按1%的接种量接种转至大瓶的培养基中，在35 ℃下继续培养30 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12 h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-60 ℃真空冷冻干燥机中干燥 30 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取2.5 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入30 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在50 ℃恒温水浴箱中磁力搅拌5 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于75 ℃真空冷冻干燥机中干燥 3 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL 0.5 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入3 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为5。然后将其放入35 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡40 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.022 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p 为95.60 %。
实施例4：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按1%的接种量接种转至大瓶的培养基中，在30 ℃下继续培养25 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12 h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-55 ℃真空冷冻干燥机中干燥 28 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取2 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入20 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在40 ℃恒温水浴箱中磁力搅拌5 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于75 ℃真空冷冻干燥机中干燥 2.5 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL 0.45 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入4 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为6。然后将其放入40 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡50 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.022 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p为95.78 %。
实施例5：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按1.5 %的接种量接种转至大瓶的培养基中，在35 ℃下继续培养20 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-60 ℃真空冷冻干燥机中干燥 29 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取1.5 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入25 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在50 ℃恒温水浴箱中磁力搅拌4.5 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于80 ℃真空冷冻干燥机中干燥 2 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL 0.45 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入5 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为7。然后将其放入45 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡60 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.020 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p为95.56 %。
实施例6：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按1.5 %的接种量接种转至大瓶的培养基中，在25 ℃下继续培养30 h。待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体。然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体， 经8000 r/min离心15 min 后，然后将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃条件下冷冻12 h，在-80 ℃条件下继续冷冻12h。最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于-55 ℃真空冷冻干燥机中干燥 30 h，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体。
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
将100 g稻谷秸秆和100 g谷壳风干后粉碎过筛，得到粉末生物质，从野外农田中采农田土壤样500 g。以粉末生物质作为堆肥的初始物料，埋入农田土壤中，并添加10 g风干粉碎后树枝皮作为填充剂，改善堆体的孔隙度。在4 ~ 5 ℃下培养7 d后，保存待用。
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液。吸取2 mL土壤悬浮液接种到富集培养基中，放入温度为25℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d。吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直至观测到乳化现象。取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d。挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即可得到驯化后的菌株。将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即为生物表面活性剂菌株液体。
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取2.5 g干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入30 mL生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在45 ℃恒温水浴箱中磁力搅拌4 h，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于80 ℃真空冷冻干燥机中干燥 3 h，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
（4）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附
量取50 mL 0.5 mol/L的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入6 g生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值为8。然后将其放入50 ℃恒温水浴箱中进行恒温振荡70 min。待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液，采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度为0.024 mg/L，生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p 为95.20 %。

Claims (9)

1.一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，首先将稻谷秸秆和谷壳埋入农田土壤中堆肥，在低温条件下经过富集培养、发酵培养和平板化学培养初筛，得到一种生物表面活性剂菌株液体，将其对耐辐射奇球菌DR进行功能化修饰，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，
具体步骤如下：
（1）耐辐射奇球菌DR菌体的制备
将真空冷冻保存在实验室的耐辐射奇球菌DR划线接种在预先配制好的固体TGY培养基上，使用接种环挑取单株耐辐射奇球菌DR接种于三角瓶中摇瓶培养至对数生长早期，然后按一定比例的接种量接种转至大瓶培养基中，在一定温度下继续培养一段时间，待耐辐射奇球菌DR细胞培养稳定后，离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经7000 r/min离心10 min 后，收集得到新鲜的耐辐射奇球菌DR菌体，然后使用pH值为7的磷酸缓冲溶液将菌体重新悬浮，充分振荡后，再次离心收集耐辐射奇球菌DR菌体，经8000 r/min离心15 min 后，将收集的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻箱中-20 ℃冷冻12 h，在-80 ℃继续冷冻12 h，最后将冷冻的耐辐射奇球菌DR菌体置于真空冷冻干燥机中干燥，得到干燥的耐辐射奇球菌DR菌体；
（2）生物表面活性剂菌株液体的制备
取10 g处理后的堆肥样品，置于装有90 mL无菌水的250 mL三角瓶中振荡25 min后，静置30 min，得到土壤悬液，吸取2 mL土壤悬液接种到富集培养基中，放入温度为25 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养5 d，吸取上述1 mL富集培养液接种于发酵培养基中，放入温度为30 ℃、转速为220 r/min的恒温培养箱中进行振荡培养，直到观测到乳化现象，取1 mL稀释至10-3之后，以该稀释发酵液1 mL涂布于平板培养基上，于37 ℃恒温静置培养3 d，挑选平板长势良好的菌落进行划线分离，按照上述方法进行再次发酵培养、驯化2次，即得到驯化后的菌株，将驯化后的菌株在富集培养液中继续培养1 d后，吸取1 mL菌液按4.5%的接种量接种于发酵培养基中，调节pH值为6.5，在温度为25 ℃、转速为200 r/min的恒温培养箱中，继续进行振荡培养2 d后，即得到生物表面活性剂菌株液体；
（3）生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR
称取一定质量干燥的耐辐射奇球菌DR菌体置于300 mL带塞三角瓶中，加入一定体积生物表面活性剂菌株液体，再加入50 mL去离子水，超声分散30 min，将三角瓶放在恒温水浴箱中磁力搅拌，待混合液混合均匀后，经8000 r/min离心15 min 后，再分别用无水乙醇和去离子水洗涤3 次，置于真空冷冻干燥机中干燥，得到一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂。
2.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（1）中使用的固体TGY培养基组成是：胰蛋白胨5 g；酵母提取物3 g；葡萄糖1 g；琼脂15 g；去离子水1000 mL；pH= 7.0。
3.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（1）中：按一定比例的接种量接种转至大瓶培养基中，在一定温度下继续培养一段时间具体为：菌株接种量为0.5 ~ 1.5%；培养温度为25 ~ 35 ℃；培养时间为20~ 30 h；
步骤（1）中所述真空冷冻干燥温度为-50 ~ -60 ℃；真空冷冻干燥时间为28~ 30 h。
4.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（2）中使用的富集培养基组成是：氯化钾1.5 g；硫酸铵12 g；氯化钠1.2g；七水硫酸亚铁3 × 10-5 g；磷酸氢二钾3.5 g；三水磷酸氢二钾0.65 g；EDTA 1.1 g；酵母浸膏0.6 g；植物油5 g；去离子水1000 mL。
5.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（2）中使用的发酵培养基组成是：氯化钾1.5 g；硫酸铵12 g；氯化钠1.2g；七水硫酸亚铁3 × 10-5 g；磷酸氢二钾3.5 g；三水磷酸氢二钾0.65 g；硫酸镁0.6 g；氯化钙0.25 g；硫酸锌0.3 g；硫酸铜0.3 g；EDTA 1.1 g；酵母浸膏0.6 g；植物油5 g；去离子水1000 mL。
6.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（2）中使用的平板培养基组成是：葡萄糖20 g；蛋白胨5 g；酵母浸膏0.25 g；琼脂20 g；去离子水1000 mL。
7.根据权利要求1所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR的方法，其特征在于，所述步骤（3）中使用的干燥的耐辐射奇球菌DR菌体质量为1.5 ~ 2.5 g；生物表面活性剂菌株液体体积为20 ~ 30 mL，功能化修饰温度为40 ~ 50 ℃；功能化修饰时间为4~5 h；真空冷冻干燥温度为70 ~ 80 ℃；真空冷冻干燥时间为2 ~ 3 h。
8.根据权利要求1所述方法制备的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在铀污染水体修复中的应用，其特征在于，具体步骤是：取50 mL不同浓度的铀标准溶液，装入150 mL的锥形瓶中，随后加入一定质量的生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂，调节溶液的pH值，然后将其放入恒温水浴箱中进行恒温振荡，待吸附反应完成后，经6000 r/min离心15 min 后，取上清液并采用三氯化钛还原/钒酸铵氧化滴定法测定铀的剩余浓度，并根据吸附前后溶液中铀的浓度计算生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂对铀的吸附率p (%)。
9.根据权利要求8所述的一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌DR吸附剂在铀污染水体修复中的应用，其特征在于，铀标准溶液的浓度为0.45 ~ 0.5 mg/L；吸附剂的质量为1 ~ 2 g；溶液的pH值为3 ~ 8；反应温度为25 ~ 50 ℃；吸附时间为20 ~ 70 min。
CN201610065617.0A 2016-02-01 2016-02-01 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用 Active CN105498718B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610065617.0A CN105498718B (zh) 2016-02-01 2016-02-01 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610065617.0A CN105498718B (zh) 2016-02-01 2016-02-01 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105498718A CN105498718A (zh) 2016-04-20
CN105498718B true CN105498718B (zh) 2017-09-05

Family

ID=55707251

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610065617.0A Active CN105498718B (zh) 2016-02-01 2016-02-01 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105498718B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109226222B (zh) * 2018-09-03 2021-06-22 南华大学 一种表面活性剂的应用、用于铀污染土壤的淋洗液及修复方法
CN109294932A (zh) * 2018-10-22 2019-02-01 南京航空航天大学 一种耐辐射酿酒酵母菌及其诱导方法
CN113185003B (zh) * 2021-03-18 2022-04-15 浙江大学 一种生物除磷的方法和磷离子吸附剂
CN114203324A (zh) * 2021-11-12 2022-03-18 中核核电运行管理有限公司 生物制剂去除金属离子的方法及生物制剂的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101898100A (zh) * 2010-04-13 2010-12-01 东北农业大学 生物表面活性剂及其制备方法和应用
CN103877927A (zh) * 2014-04-14 2014-06-25 南华大学 磁性纳米Fe3O4生物催化制备法及其在含铀废水处理中的应用
CN105132403A (zh) * 2015-09-01 2015-12-09 南华大学 一种功能化磁性载体固定耐辐射奇球菌的方法及其应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011005522A2 (en) * 2009-06-22 2011-01-13 Allegheny-Singer Research Institute Biofilm remediation of fracture fluid

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101898100A (zh) * 2010-04-13 2010-12-01 东北农业大学 生物表面活性剂及其制备方法和应用
CN103877927A (zh) * 2014-04-14 2014-06-25 南华大学 磁性纳米Fe3O4生物催化制备法及其在含铀废水处理中的应用
CN105132403A (zh) * 2015-09-01 2015-12-09 南华大学 一种功能化磁性载体固定耐辐射奇球菌的方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105498718A (zh) 2016-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105498718B (zh) 一种生物表面活性剂功能化修饰耐辐射奇球菌dr的方法及其应用
CN105689375B (zh) 一种生物表面活性剂强化植物—微生物共生体系的方法及其在原位修复铀污染土壤中的应用
KR101122766B1 (ko) 혼합미생물（ｂｍ－ｓ－1）을 포함한 미생물 제제, 이를 이용한 하천?호수의 생물학적 처리방법 및 슬러지 자가 소화공정
CN102533718A (zh) 一种高效降解餐厨垃圾的复合菌剂和制备方法及用途
CN103820340A (zh) 一种富硒酵母及其制备方法
CN103805546B (zh) 约翰逊不动杆菌aj-3菌株及其用途
CN102391960A (zh) 一种根际促生菌及其应用
CN109337826B (zh) 一种真菌及真菌-蓝藻复合地衣结皮的快速培育方法
CN108531424A (zh) 一株用于土壤改良的高效溶磷菌及其应用
CN103740634A (zh) 一种棘孢木霉菌厚垣孢子粉剂及其制备方法与它的用途
CN106635909A (zh) 一种原油降解混合菌、菌剂及其应用
CN105617980B (zh) 一种生物表面活性剂改性磁性膨润土的方法及其应用
CN104911173A (zh) 一种用于处理水中有机物和氨氮的磁性生物微胶囊的制备方法
CN105296392B (zh) 防治十字花科根肿病解淀粉芽孢杆菌Bam22的发酵方法
CN104630092A (zh) 一种烟草根际促生菌yc9及其应用
CN106348887A (zh) 海藻复合分级发酵制备氨基酸液体水溶肥的方法
CN104478184B (zh) 一种城市污泥清洁利用的方法
CN105349461A (zh) 一株产琼胶酶溶藻弧菌及应用
CN107841464A (zh) 一种藻类的培养方法
CN106701641A (zh) 能矿化固定重金属离子的菌lrp3及其应用
CN109052650A (zh) 一种固定化微藻水质调控剂的制备
CN105219685B (zh) 一种脱酚嗜盐菌及其应用
CN105217799A (zh) 一种溶藻链霉菌活性物质的工业化发酵方法
CN107930590A (zh) 高效耐强酸型活性炭吸附剂
CN108004190A (zh) 芽孢杆菌用于增加小球藻生物量的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant