CN103316330A

CN103316330A - 一种软组织创伤护理材料的组方与用途

Info

Publication number: CN103316330A
Application number: CN2013102039779A
Authority: CN
Inventors: 巴桑次仁
Original assignee: TIBET BEIZHUYA PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: Tibet Bezhuya Pharmaceutical Group Co ltd
Priority date: 2012-06-28
Filing date: 2013-05-21
Publication date: 2013-09-25
Anticipated expiration: 2033-05-21
Also published as: CN103316330B

Abstract

本发明涉及一种软组织创伤护理材料的组方与用途，主要活性成分为ε-聚赖氨酸与胶原蛋白，主要用于预防伤口感染、加快伤口愈合、促进皮肤生长、减少瘢痕等。本发明制备工艺简单，成本低廉，具有很好的临床价值和推广使用的社会意义。

Description

一种软组织创伤护理材料的组方与用途

技术领域本发明涉及一种软组织创伤护理材料的组方与用途，属于创伤治疗的医药技术领域。

背景技术软组织创伤指皮肤、皮下组织和肌肉的机械损伤。

在软组织创伤发生以后，有机体细胞原生质溶解。由于糖皮质类固醇和儿茶酚胺的作用，机体蛋白质分解加速，其中耗损最大的是骨骼肌的细胞群。细胞溶解产物被释放进细胞外液，某些化合物转变为葡萄糖，并经碳水化合物氧化途径而燃烧掉，绝大部分氮质以尿素经尿排泄。细胞原生质溶解产物释放进细胞外液以及其排泄产生了负氮平衡。在严重创伤伴有感染时，肌肉的50～60％可以消耗掉，中度创伤时，肌肉细胞可以消耗约30g的氮(相当于220g蛋白质，或相当于约1kg的瘦肉)。同时，还有脂肪的丧失。蛋白质缺乏时，肉芽组织及胶原形成不良，伤口愈合延缓。

感染与异物感染对再生修复的妨碍甚大。许多化脓菌产生一些毒素和酶，能引起组织坏死，基质或胶原纤维溶解。这不仅加重局部组织损伤，也妨碍愈合。伤口感染时，渗出物很多，可增加局部伤口的张力，常使正在愈合的伤口或已缝合的伤口裂开，或者导致感染扩散加重损伤。因此，对于感染的伤口，不能缝合，应及早引流，只有感染被控制后，修复才能进行。

此外，由于瘢痕组织在一定条件下可以造成危害，因而有时需要抑制瘢痕的形成或者促进瘢痕的吸收。

因此在软组织创伤护理中，做好创伤部位的感染预防控制的同时，给创伤部位提供局部营养，保证组织再生所需的氧和营养，促进胶原纤维的形成，对软组织创伤部位的修复愈合具有重要意义。

为此，本发明提出一种用于预防伤口感染、加快伤口愈合、促进皮肤生长、减少瘢痕等功能的软组织创伤护理的组方与用途，其主要活性成分是ε-聚赖氨酸与胶原蛋白。

ε-聚赖氨酸(ε-PL，分子式C₁₈₀H₃₆₂N₆₀)是一种营养型抑菌剂，它是一种靠肽键连接羧基与氨基基团的多聚L-赖氨酸，是一种具有抑菌功效的多肽。它是一种广谱的体外抑菌剂，进入人体后可分解为人体必需的营养氨基酸——赖氨酸，而赖氨酸是人体必须的八种氨基酸，因此，ε-聚赖氨酸具有极高的安全性。ε-聚赖氨酸具有强烈的抑菌能力，它能够破坏微生物的细胞膜结构，引起细胞的物质、能量及信息传递中断，最终导致细胞死亡。它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均有很好的抑菌效果，而且对其他抑菌剂不易抑制的大肠杆菌、沙门氏菌抑菌效果非常好，对耐热性芽孢杆菌和一些病毒也有抑制作用，Hiraki对ε-聚赖氨酸不同微生物的最小抑菌浓度(MIC)实验，结果如下表：

表1 ε-聚赖氨酸抑制微生物生长的最小抑菌浓度

胶原蛋白(collagen)是一种生物性高分子物质，在动物细胞中扮演结合组织的角色，是一种白色、不透明、无支链的纤维性蛋白质。对人体皮肤、血管、骨骼、筋腱、牙齿和软骨的形成都十分重要，是这些结缔组织的主要物质基础。胶原蛋白不仅可以补充皮肤各层所需的营养，使皮肤中胶原活性增强，能对受损肌肤有效好的修复作用。同时，由于当血小板接触到血管壁的胶原蛋白时才会产生止血作用，胶原蛋白具有很好的止血效果。

胶原蛋白在临床中用于软组织修复的效果现已被广泛认可，研究报道很多：

1、马慧军，贾赤字，魏蓉，杨扬，张大艳.胶原蛋白凝胶促皮肤创面修复的临床研究[J]，中国美容医学，2011，2(20)，235-236

2、曾彦，朱安琪.类人胶原蛋白临床应用30例观察[J]，中国基层医药，2011，3(18)，672-673

3、刘慧玲，王栋，章金刚.胶原蛋白在临床医学中的应用[J]，北京生物医学工程，2005，6(24)，239-241

4、张红，孙明江，代龙.胶原蛋白对大鼠创伤模型愈合影响的实验研究[J]，中国实验方剂学杂志，2009，8(15)，78-79

限于篇幅，相关研究报道不一一列举，由此可见胶原蛋白用于制作软组织修复材料是可行的。但是，单一采用胶原蛋白不能有效抑制软组织损伤部位的感染，而且适合创伤部位使用的胶原蛋白的常规制剂(如溶液、凝胶、软膏等)稳定性较差、保存时间较短。因此，采用ε-聚赖氨酸与胶原蛋白组方，不仅可以抗感染、促进创伤部位愈合双效合一，而且可以大大增加胶原蛋白创伤护理适用剂型(如溶液、凝胶、软膏等)的稳定性。

发明内容本发明旨在提供一种软组织创伤护理材料的组方与用途，主要用于预防伤口感染、加快伤口愈合、促进皮肤生长、减少瘢痕等，其主要活性成分是ε-聚赖氨酸与胶原蛋白。具体如下：

1、本发明涉及的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，主要活性成分为ε-聚赖氨酸与胶原蛋白。

2、本发明涉及的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，ε-聚赖氨酸与胶原蛋白的组成含量比例为3×10^-6(百万分之三)至20％(百分之二十)区间内，优选的组成含量比例是5×10^-4(万分之五)至0.25％之间。

3、本发明涉及的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，还可以含有赋形剂，所述的赋形剂包括水、甘油、羊毛脂等常规药用赋形辅料。

4、本发明涉及的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，根据选择赋形剂与制备工艺的不同，可以制备成为溶液剂、软膏、凝胶、喷雾剂、散剂、巴布贴膏等剂型中的任意一种剂型，本发明不限于以上剂型举例。

本发明的意义在于：ε-聚赖氨酸无任何毒副作用，抑菌谱广，无刺激性和致敏性，因此，将ε-聚赖氨酸应用于创伤护理护理材料，不仅能起到很好的抗菌消炎作用，而且ε-聚赖氨酸失活分解成赖氨酸后，与胶原蛋白有很好的协同作用，能同时为创伤软组织提供营养支持。

具体实施方式本发明可用下面实施例加以说明

下面结合实施例进一步对本发明组方的稳定性以及对常见致病菌的抑菌作用进行验证，报告如下：

(一)本发明实施例1，并进行组方稳定性试验

1、供试品制备：

1.1组方：分三批次次精密称(量)取ε-聚赖氨酸各2000mg、胶原蛋白各1000g、蒸馏水各10000ml。

1.2制备：分三批次将ε-聚赖氨酸2000mg、胶原蛋白1000g分别到溶到10000ml蒸馏水中，搅拌至完全溶解。按照每支10ml剂量分别密闭封装于小口径透明玻璃瓶内，每批次制备1000支，并依次分别标示批号110301、110302、110303。

1.3技术要求：每支含量比为：每10ml中含有ε-聚赖氨酸2mg、胶原蛋白1.0g。微生物限度：细菌菌落总数应≤100cfu/ml、霉菌和酵母菌数≤100cfu/ml、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。

2、仪器与试剂

2.1仪器见表2。

表2：仪器、设备一览表

名称	型号	生产厂家
			紫外光栅分光光度计	752	上海精密科学仪器有限公司.
高效液相色谱仪	LC-15C	日本岛津制作所
			离心机	80-2	江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司
电热恒温水浴锅	----	天津泰斯特仪器有限公司
			电热恒温鼓风干燥箱	立鹤牌	山东潍坊精鹰医疗器械有限公司

2.2试剂：

甲基橙，天津市凯通化学试剂有限公司；磷酸甲盐，天津金汇太亚化学试剂有限公司。

3、稳定性考察项目及方法

影响因素试验、室温长期留样试验，考察项目为供试品的性状、鉴别、微生物限度等按照通用方法测定。

胶原蛋白含量测定：使用Sepax nanofilm SEC-150(4.6mm×300mm，5μm)色谱柱，流动相为0.15mol·L^-1磷酸钾盐缓冲液(pH6.7)，流速0.35mL·min^-1，UV检测波长210nm，柱温25℃条件下测定供试品胶原蛋白的含量。

ε-聚赖氨酸含量测定：甲基橙从水中重结晶后，溶于pH6.6、0.1mol/L磷酸钠缓冲液中，终浓度为1mmol/L；将2ml的ε-聚赖氨酸溶液与2mL1mmol/L甲基橙溶液混合；混合物在30℃条件下剧烈振荡30min，4000r/min离心15min；取1ml上清液稀释50倍，在465nm波长下测吸光度，计算ε-聚赖氨酸含量。

3.1影响因素试验

供试品一批样品(批号：110301)分别在光照(4500±500Lx)、高温(60℃)、高湿(RH75％)条件下放置，于5、10天取样，检测各项指标并与0天结果相比较。结果见表3。

表3：供试品影响因素考察结果

结论：由光照、高温、高湿试验结果可知，该样品性状、pH值、微生物限度、含量百分比无明显变化。

3.2室温留样试验

供试品三批样品(批号：110301、110302、110303)采用原有的包装，于室温条件下放置12个月，分别于第1、2、3、6、9、12个月各取样一次，检测各项指标并与0月结果相比较，结果见表4。

表4供试品室温留样试验结果

结论：本品经12个月的长期留样试验，该样品性状、pH值、微生物限度、含量百分比无明显变化。与0月相比均无明显变化，本品在室温长期留样试验12个月内质量稳定。

3.结论稳定性试验结论：经影响因素光照、高温、高湿条件下5天、10天考察，结果表明，光照，高温条件下各指标均无明显变化。本品采用此包装经室温留样12个月考察，各项指标均无明显变化，因此该产品组方相容性好，质量稳定。

(一)本发明实施例2，并进行体外抑菌试验

1、材料与方法

1.1菌种：金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa)、白色念珠菌(Monilia albican)等三种常见致病菌，从四川省食品药品检验所购入。

1.2供试品制备：公司按照以下组方制备含量为20％胶原蛋白100ml水溶液与50mg的ε-聚赖氨酸组方配比而成的溶液。其中胶原蛋白由日本Maruha Nichiro生产，分子量约1000D左右；ε-聚赖氨酸浙江银象集团生产。

1.1.3培养基：血清肉汤，高压灭菌后备用。

1.2方法

1.2.1菌种的活化：将各供试菌种分别接种于新配制的液体培养基中，细菌37℃培养24h，然后分别取0.2mL倾注培养于平板培养基，再挑取单个生长好的菌落接种于液体培养基中培养，制成菌液，浓度相当于0.5麦氏比浊管。

1.2.2含不同浓度供试品培养基制备：取无菌小试管若干，采用两倍稀释法用液体培养液(血清肉汤)，将供试品分别按照100％、50％、25％、12.5％、6.25％稀释倍数制成不同浓度装入管内。各管加入30L菌液，同时设阴性对照管和阳性对照管，备用。对照管要求：不含供试品而加实验菌的为阳性对照管；含供试品但不加实验菌的为阴性对照管。

1.2.3接种培养：将各管37℃培养24h后取出观察结果，在对照管符合要求的情况下，逐一观察各试验管，并将各试管中内容物转接至血培养液上，37℃培养24h后取出观察结果。

2结果与分析

在相同实验条件下重复3次实验，以3次或2次结果相同者为报告依据，结果见表5。

表5：不同浓度的供试品体外抑菌试验结果

注：(-)表示无菌生长，(+)表示可见细菌生长

从表5可以看出，供试品对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌等常见致病菌具有很强的抑制作用。而且抗菌活性与浓度成正比，药物浓度越高，抗菌能越强，因此具有进一步研究的临床价值。

本发明不限于以上具体实施方法。

Claims

1.本发明涉及的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，主要活性成分为ε-聚赖氨酸与胶原蛋白，每100ml或100g产品中，含有ε-聚赖氨酸3×10^-6(百万分之三)至20％(百分之二十)之间、含有胶原蛋白的1％至100％之间；同时还可以含有赋形剂、稳定剂与矫味剂等常规药用辅料。

2.权利要求1所述的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，优选方案是：每100ml或100g产品中，含有ε-聚赖氨酸0.1％、含有胶原蛋白30％。

3.权利要求1所述的一种软组织创伤护理材料的组方与用途，其临床应用包括用于预防伤口感染并能加快伤口愈合、促进皮肤生长、减少瘢痕。