CN103266067A - 一种人参内生多粘类芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种人参内生多粘类芽孢杆菌及其应用。本发明所述人参内生多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)，已于2013年2月5日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.7250。人参内生多粘类芽孢杆菌，是从人参植株中分离鉴定的Paenibacillus polymyxa菌株，可广泛直接应用在人参、西洋参、五味子、平贝母、黄芪等植物病害的防治，也可应用在制备防治人参、西洋参等植物病害的制剂中，可有效解决老参地及人参、西洋参等植物连作障碍问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种人参内生多粘类芽孢杆菌及其应用，属生物技术领域。
背景技术
人参、西洋参为五加科植物,是世界驰名的珍贵药用植物。含化学成分包括人参皂苷、糖类、氨基酸、维生素、蛋白质、多肽、有机酸、脂溶性成分以及近40种无机元素等。临床和实验室的研究表明,其在调节免疫力、抗压抗疲劳、抗氧化、抗炎、抗肿瘤、降血糖、保肝护肝等方面有着好的药理作用。
根类病害是制约人参、西洋参产量和质量的主要因素之一, 在我国每年由于根病所造成的产量损失可达20%～50%,特别是老参地病害泛滥导致严重连作障碍,严重地削弱了我国人参、西洋参产品在国际市场上的竞争能力。因此,长期以来很多研究者都致力于寻求一种有效的防治方法,以减少根病的发生和危害，人们通过改进栽培方式,施加有机肥整地改土，人参与绿肥、粮食、经济作物轮作，及土壤、种子和种苗消毒等农业或化学防治措施防治根病, 虽取得了一定的防治效果。但由于危害人参、西洋参根组织病原菌为土传病原菌,它在土壤中既有良好的的兼性寄生能力,同时又具有较强的营腐生存能力,这些病原菌在土壤中的增殖速度和它们的致病力与土壤环境有着密切关系。因此，采用上述措施对根病进行治理远未达到人们预期，难以从根本上解决问题，长期使用化学农药会使病原菌产生抗药性, 过量地使用农药也会破坏土壤的微生物环境,还对环境造成了污染，同时造成有害有毒物质在作物体内残留过高的恶果，严重影响了人参的品质，目前农药残留已成为制约中药出口的瓶颈。
国家GAP标准规定,在病害防治上,要求使用广谱、低毒、低残留的药剂,提倡使用生防制剂。人参、西洋参植株和参地土壤中存在着大量对人参、西洋参土传病害有拮抗作用的有益微生物，利用这些拮抗微生物对人参、西洋参病害进行生物防治，能够从本质上改善人参、西洋参植株的微生态环境，且具有无毒、无污染等特点，又不会引入外来生物，是防治人参、西洋参土传病害的一条有效途径。已有研究表明,生物防治是解决这一难题的有效方法。
人参、西洋参是多年生宿根植物,利用内生菌进行生物防治将是一条最有希望的防治的途径。内生菌是指一类在其部分或全部生活史中存活于健康植物组织内部、不使宿主植物表现出明显感染症状的微生物。植物内生菌包括内生真菌和细菌。内生菌在植物体内广泛存在,分布于植物的叶鞘、叶片、花、茎、果实和种子等器官、组织的细胞或细胞间隙中。从蕨类、藻类、裸子植物和被子植物中均已分离得到了内生菌，但关于五加科人参属植物人参、西洋参等内生菌相关性的研究还鲜有报道。
发明内容
本发明提供一种人参内生多粘类芽孢杆菌，该菌株抑菌谱广、抑菌能力强，能在人参、西洋参等植物的植株中定殖，用于防治人参、西洋参等植物的病害。该菌株应用在制备防治人参、西洋参等植物病害的制剂中。该菌株可有效解决老参地及人参、西洋参等植物连作障碍问题。
本发明所述一种人参内生多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)，已于2013年2月5日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No. 7250。
本发明所述人参内生多粘类芽孢杆菌在LB培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈乳白色，不透明，菌落较小，直径多在0.5-1mm，不规则圆形或椭圆形，表面不光滑，中间凸起，边缘不整齐，发粘，无色素。该菌在PDA培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈无色透明状，直径0.8-1.5mm，圆形，表面较光滑，凸起，边缘较整齐，湿润发粘，无色素产生。该菌菌体为杆状，大小为0.6～0.8μm×3～5μm，芽孢为卵圆形，芽孢囊膨大，革兰氏染色呈阳性。该菌接触酶试验有气泡产生，为阳性。该菌能水解淀粉，菌落周围出现无色透明环，琼脂培养基被染成深蓝色。该菌V-P试验菌液立即显红色，为阳性。该菌甲基红试验菌液显淡红色，为弱阳性。该菌柠檬酸盐利用试验斜面培养基颜色没发生变化，为阴性。该菌葡萄糖氧化试验的结果是开管及闭管的都变黄产酸，故为发酵型，且为兼性厌氧。该菌经Biolog仪和16srDNA序列鉴定为Paenibacillus polymyxa（多粘类芽孢杆菌）。
本发明所述人参内生多粘类芽孢杆菌制剂的制备：将保存的人参内生多粘类芽孢杆菌接入灭菌的PDA斜面培养基，25℃培养24h-48h，进行人参内生多粘类芽孢杆菌菌种活化。挑取活化的人参内生多粘类芽孢杆菌菌种，接入灭菌的PDB培养基中，120rpm/min,25℃培养24h-48h，培养到OD600值为0.5左右，得种子液。将人参内生多粘类芽孢杆菌种子液按体积比2%接种量，接种入灭菌的PDB培养基中，通入无菌空气，25℃培养24h-48h，芽胞形成85%以上时，得发酵液。将人参内生多粘类芽孢杆菌发酵液经细菌计数后，调整到106CFU/ml，加入微生物菌肥的稳定剂、助剂，包装，阴凉避光保存。
本发明所述人参内生多粘类芽孢杆菌应用方法：人参内生多粘类芽孢杆菌发酵液对1年生、2年生、3年生及4年生人参、西洋参分别进行喷施处理（浓度为108CFU/ml，喷施量按50mL/m2对全株进行喷施）、灌根处理（浓度为108CFU/ml，灌施量按50mL/m2对进行灌施）、喷施与灌根联用处理（浓度为108CFU/ml，喷施量按25mL/m2对全株进行喷施，灌根浓度为108CFU/ml，灌施量按25mL/m2对进行灌施）。从人参、西洋参展叶期开始，每隔30天施用1次，共3次。
具体实施方式
本发明提供了一种人参内生多粘类芽孢杆菌，本发明领域技术人员可借鉴本发明内容，适当改进工艺参数实现，所有类似的替换和改动对本领域技术人员是显而易见的，都视为本发明。本发明所述人参内生多粘类芽孢杆菌已通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
下面结合实施例，进一步阐述本发明。
实施例1 ：本发明人参内生多粘类芽孢杆菌的分离
从老参地采回生长健康的人参植株，用自来水将新鲜人参表面的土壤洗净，用无菌水冲洗数次，用无菌滤纸吸干，然后用75%乙醇浸泡1min，无菌水冲洗4次，用5%次氯酸钠溶液浸泡5min，无菌水冲洗4次，再用75%乙醇浸泡30s，无菌水冲洗4次，用无菌滤纸吸干人参表面残留的水。收集最后1次冲洗人参的洗涤液，取200μl涂布于PDA平板培养基上，25℃下置培养箱中培养两天，观察平板上是否长菌落，作为空白对照。将无菌处理好的人参用无菌手术刀片切成1cm×1cm左右的薄片，然后放置在PDA平板培养基上，25℃下置培养箱中培养两天，根据菌落形态分离菌种，挑取内生菌继续接于PDA平板培养基上进行菌种纯化，纯化后的内生菌接种于PDA斜面培养基上，置4℃中保存。
实施例2 本发明人参内生多粘类芽孢杆菌的鉴定
1、人参内生多粘类芽孢杆菌菌落形态特征、革兰氏染色、芽孢染色鉴定
人参内生多粘类芽孢杆菌菌落特征、革兰氏染色、芽孢染色鉴定方法主要参考R.E.布坎南等编的《伯杰细菌鉴定手册》。鉴定结果如下：该菌在LB培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈乳白色，不透明，菌落较小，直径多在0.5-1mm，不规则圆形或椭圆形，表面不光滑，中间凸起，边缘不整齐，发粘，无色素。该菌在PDA培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈无色透明状，直径0.8-1.5mm，圆形，表面较光滑，凸起，边缘较整齐，湿润发粘，无色素产生。该菌菌体为杆状，大小为0.6～0.8μm×3～5μm，芽孢为卵圆形，芽孢囊膨大，革兰氏染色呈阳性。
2、人参内生多粘类芽孢杆菌生理生化特性的鉴定
人参内生多粘类芽孢杆菌接触酶试验、淀粉水解试验、V-P试验、甲基红（Methyl Red）试验、葡萄糖氧化试验、柠檬酸盐利用试验等生理生化特性鉴定方法主要参考东秀珠等编的《常见细菌系统鉴定手册》。鉴定结果如下：该菌接触酶试验有气泡产生，为阳性。该菌能水解淀粉，菌落周围出现无色透明环，琼脂培养基被染成深蓝色。该菌V-P试验菌液立即显红色，为阳性。该菌甲基红试验菌液显淡红色，为弱阳性。该菌葡萄糖氧化试验的结果是开管及闭管的都变黄产酸，故为发酵型，且为兼性厌氧。该菌柠檬酸盐利用试验斜面培养基颜色没发生变化，为阴性。
3、人参内生多粘类芽孢杆菌Biolog和16S rDNA基因序列鉴定
人参内生多粘类芽孢杆菌Biolog鉴定方法和16S rDNA基因序列鉴定参考姬广海等发表论文(一种新型生防细菌菌株 13-1 鉴定及其生物学特性[J].微生物学通报,2009, 36(7): 974~980)。鉴定结果如下：该菌Biolog鉴定结果见表1，可见，SIM值=0.592>0.5，DIS值=6.35，PROB为99%。系统得到的3个重要参数比较理想，与数据库匹配良好，SIM值越接近1.00，说明鉴定结果的可靠性更高，故该菌为Paenibacillus polymyxa(多粘类芽孢杆菌)。
表1 人参内生多粘类芽孢杆菌Biolog鉴定结果
| NAME | PROB | SIM | DIST | TYPE | |
| 1 | Paenibacillus polymyxa | 99% | 0.592 | 6.35 | GP-ROO SD |
| 2 | Bacillus circulans | 0% | 0.000 | 11.50 | GP-ROO SD |
| 3 | Paenibacillus macerans | 0% | 0.000 | 11.78 | GP-ROO SD |
该菌16S rDNA基因序列为：
<110> 吉林农业大学
<120> 一种人参内生多粘类芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170>
<210> 1
<211> 610
<212> 16S rDNA
<213> 人参内生多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）
<220>
<221> CDS
<222>
<223> n =a或g或c或t
<220>
<221> CDS
<222>
<400> 1
TTGCTGCTTA CCCTTCCCAC CTTGAATGGT ATCATCTAGC GTCATCCGCC CAGTTGCTTC 60
AAGTGAGCTT CGTTTTCGTG CTCATTGAAG GTTACCCTGG CCATTGCCTC GTTTGACAAC 120
GGATATTTCG TTCCCGTATA AAATTGCTTA TCGTTCTGGT TCCAGAACAT CACTGTGAAA 180
TCTTGGTCCG AGCGATTCGC GTTTACAGCT TGGATACCTG ACCGTGCTAC CAGTCTCCCT 240
TCACCTGGCT AGATTCCCTG GAAACAGATA TTGTAAGAAC GCAGGAGAAT CAGGACATGC 300
TTGACATACG GAAGCTGTAT CCGCGAGGGT CTTGTGGAAG AGTGTCTCAG CTGCTCCCAC 360
ACGCTGGAAA CTGGTACCAA GGTGTAGTAT CCTAATTAAA TCTTGATCAA ATTAGGATGC 420
TTTGCCTTGT TACCTGTTAT GCTTTAGAGG GACCAAGTGA TGCAGTCTTG CACAAGACCC 480
TCTTTGATGC GTGTGCCGTA TGTCGATCAT ACTCCGATGC GTGCGCACTA CATATATATG 540
CGTGTCCACT GACTCTCACT CGCTTCACTG ATAACGTGAA CCACGACCGG TATTCCTTGT 600
GTCCACGTGC 610
该序列经Blast同源性比对显示, 人参内生多粘类芽孢杆菌与Paenibacillus polymyxa同源性最高达78%,故该菌为Paenibacillus polymyxa(多粘类芽孢杆菌)，见表2。
表2 人参内生多粘类芽孢杆菌Blast结果
| 登录序列号 | 菌株 | 同源性 |
| CP000154.1 | Paenibacillus polymyxa E681, complete genome | 74% |
| HE577054.1 | Paenibacillus polymyxa M1 main chromosome, complete genome | 78% |
| CP002213.1 | Paenibacillus polymyxa SC2, complete genome | 78% |
试验例1 人参内生多粘类芽孢杆菌室内抑菌效果
1、材料
人参黑斑病菌（Alternaria panax Whetz）、 人参锈腐菌（Cylindrocarpon destructans Zinns）、人参菌核病菌（Sclerotinia schinseng Wang）、人参立枯病菌（Rhizoctonia solani Kuhn）、人参根腐病菌（Fusarium solani App）及人参细菌性软腐病（Erwinia carotovora subsp）等病原菌本实验室保存，本发明的人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保存。
2、方法
病原真菌采用对峙培养法测定人参内生多粘类芽孢杆菌对病原菌的抑菌作用。即在 PDA 平板中心接入直径为 5 mm 生长旺盛的病原菌菌块, 再在距离菌块中心 2.5 cm 处点接细菌, 每皿接种细菌 3 点, 重复3皿, 25°C 培养 5 d 测量抑菌圈半径。病 原 细 菌 采 用 将 目 标 病 原 细 菌 制 成3×108CFU/mL 菌悬液, 与 NA 培养基混合制备含菌平板, 冷却后将人参内生多粘类芽孢杆菌点接到平板上, 每皿接种细菌 4 点, 重复3 皿, 25°C 培养3 d, 测量抑菌圈半径。
3、结果
人参内生多粘类芽孢杆菌与人参黑斑病菌、人参锈腐菌、人参菌核病菌、人参立枯病菌、人参根腐病菌、疫病、人参细菌性软腐病进行抑菌圈对峙培养试验结果见表3。由表3中可以看出，人参内生多粘类芽孢杆菌对几种人参病原菌都有较好的拮抗作用,说明其有很好的广谱抗菌性,有较高的研究开发价值。
表 3 人参内生多粘类芽孢杆菌对人参西洋参病原菌的影响
| 病原菌 | 抑菌圈直径/mm |
| 人参黑斑病菌（Alternaria panax Whetz） | 19.1 |
| 人参锈腐菌（Cylindrocarpon destructans Zinns） | 23.5 |
| 人参菌核病菌（Sclerotinia schinseng Wang） | 13.6 |
| 人参立枯病菌（Rhizoctonia solani Kuhn） | 13.1 |
| 人参根腐病菌（Fusarium solani App） | 14.9 |
| 人参疫病（Phytophthora cactorum Schrot） | 17.5 |
| 人参细菌性软腐病（Erwinia carotovora subsp） | 16.8 |
试验例2 人参内生多粘类芽孢杆菌对人参、西洋参田间发病率的影响
1、材料
吉林农业大学药植园种植过人参、西洋参的老参地，连作的1年生、2年生、3年生及4年生的人参和西洋参，本发明的人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂。
2、方法
对连作1年生、2年生、3年生及4年生人参、西洋参分别进行喷施处理（浓度为108CFU/ml，喷施量按50mL/m2对全株进行喷施）、灌根处理（浓度为108CFU/ml，灌施量按50mL/m2对进行灌施）、喷施与灌根联用处理（浓度为108CFU/ml，喷施量按25mL/m2对全株进行喷施，灌根浓度为108CFU/ml，灌施量按25mL/m2对进行灌施）、清水对照共24个处理。从人参、西洋参展叶期开始，每隔30天施用1次，共3次，结合秋季起参对人参、西洋参发病率进行调查。
3、结果
人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂对人参、西洋参发病率的影响见表4，表5，人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂喷施与灌根联用人参、西洋参发病率最低，生物防治效果最好，单独喷施或单独灌根对人参、西洋参发病率也有较好的抑制作用。
表4 人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂对人参发病率的影响
| 处理 | 调查株数 | 发病株数 | 发病率% |
| 1年生喷施对照 | 300 | 47 | 15.67 |
| 1年生喷施 | 300 | 25 | 8.33 |
| 1年生灌根对照 | 300 | 53 | 17.67 |
| 1年生灌根 | 300 | 20 | 6.67 |
| 1年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 55 | 18.33 |
| 1年生喷施与灌根联用 | 300 | 14 | 4.67 |
| 2年生喷施对照 | 300 | 93 | 31.00 |
| 2年生喷施 | 300 | 62 | 20.67 |
| 2年生灌根对照 | 300 | 81 | 27.00 |
| 2年生灌根 | 300 | 53 | 17.67 |
| 2年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 84 | 28.00 |
| 2年生喷施与灌根联用 | 300 | 31 | 10.33 |
| 3年生喷施对照 | 300 | 116 | 38.67 |
| 3年生喷施 | 300 | 64 | 21.33 |
| 3年生灌根对照 | 300 | 110 | 36.67 |
| 3年生灌根 | 300 | 55 | 18.33 |
| 3年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 105 | 35.00 |
| 3年生喷施与灌根联用 | 300 | 40 | 13.33 |
| 4年生喷施对照 | 300 | 136 | 45.33 |
| 4年生喷施 | 300 | 82 | 27.33 |
| 4年生灌根对照 | 300 | 144 | 48.00 |
| 4年生灌根 | 300 | 78 | 26.00 |
| 4年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 149 | 49.67 |
| 4年生喷施与灌根联用 | 300 | 67 | 22.33 |
表5 人参内生多粘类芽孢杆菌菌剂对西洋参发病率的影响
| 处理 | 调查株数 | 发病株数 | 发病率% |
| 1年生喷施对照 | 300 | 58 | 19.33 |
| 1年生喷施 | 300 | 21 | 7.00 |
| 1年生灌根对照 | 300 | 61 | 20.33 |
| 1年生灌根 | 300 | 18 | 6.00 |
| 1年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 64 | 21.33 |
| 1年生喷施与灌根联用 | 300 | 12 | 4.00 |
| 2年生喷施对照 | 300 | 101 | 33.67 |
| 2年生喷施 | 300 | 53 | 17.67 |
| 2年生灌根对照 | 300 | 91 | 30.33 |
| 2年生灌根 | 300 | 49 | 16.33 |
| 2年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 97 | 32.33 |
| 2年生喷施与灌根联用 | 300 | 27 | 9.00 |
| 3年生喷施对照 | 300 | 121 | 40.33 |
| 3年生喷施 | 300 | 59 | 19.67 |
| 3年生灌根对照 | 300 | 129 | 43.00 |
| 3年生灌根 | 300 | 53 | 17.67 |
| 3年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 118 | 39.33 |
| 3年生喷施与灌根联用 | 300 | 38 | 12.67 |
| 4年生喷施对照 | 300 | 146 | 48.67 |
| 4年生喷施 | 300 | 79 | 26.33 |
| 4年生灌根对照 | 300 | 153 | 51.00 |
| 4年生灌根 | 300 | 72 | 24.00 |
| 4年生喷施与灌根联用对照 | 300 | 157 | 52.33 |
| 4年生喷施与灌根联用 | 300 | 65 | 21.67 |
试验例3 人参内生多粘类芽孢杆菌对五味子、平贝母、黄芪田间发病率的影响
采用上述方法证明人参内生多粘类芽孢杆菌对五味子白粉病、五味子叶枯病、五味子茎基腐病，平贝母锈病、平贝母菌核病、平贝母灰霉病、黄芪白粉病、黄芪锈病、黄芪紫纹羽病、黄芪枯萎病等发病率也有较好的抑制作用。
110> 吉林农业大学
<120> 一种人参内生多粘类芽孢杆菌及其应用
<160> 1
<170>
<210> 1
<211> 610
<212> 16S rDNA
<213> 人参内生多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）
<220>
<221> CDS
<222>
<223> n =a或g或c或t
<220>
<221> CDS
<222>
<400> 1
TTGCTGCTTA CCCTTCCCAC CTTGAATGGT ATCATCTAGC GTCATCCGCC CAGTTGCTTC 60
AAGTGAGCTT CGTTTTCGTG CTCATTGAAG GTTACCCTGG CCATTGCCTC GTTTGACAAC 120
GGATATTTCG TTCCCGTATA AAATTGCTTA TCGTTCTGGT TCCAGAACAT CACTGTGAAA 180
TCTTGGTCCG AGCGATTCGC GTTTACAGCT TGGATACCTG ACCGTGCTAC CAGTCTCCCT 240
TCACCTGGCT AGATTCCCTG GAAACAGATA TTGTAAGAAC GCAGGAGAAT CAGGACATGC 300
TTGACATACG GAAGCTGTAT CCGCGAGGGT CTTGTGGAAG AGTGTCTCAG CTGCTCCCAC 360
ACGCTGGAAA CTGGTACCAA GGTGTAGTAT CCTAATTAAA TCTTGATCAA ATTAGGATGC 420
TTTGCCTTGT TACCTGTTAT GCTTTAGAGG GACCAAGTGA TGCAGTCTTG CACAAGACCC 480
TCTTTGATGC GTGTGCCGTA TGTCGATCAT ACTCCGATGC GTGCGCACTA CATATATATG 540
CGTGTCCACT GACTCTCACT CGCTTCACTG ATAACGTGAA CCACGACCGG TATTCCTTGT 600
GTCCACGTGC 610
Claims (8)
1.提供一种人参内生多粘类芽孢杆菌，该菌是从人参植株中分离鉴定的多粘类芽孢杆菌，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7250。
2.按权利要求1所述，该菌在LB培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈乳白色，不透明，菌落较小，直径多在0.5-1mm，不规则圆形或椭圆形，表面不光滑，中间凸起，边缘不整齐，发粘，无色素；该菌在PDA培养基上，经25℃培养24-48h后，菌落呈无色透明状，直径0.8-1.5mm，圆形，表面较光滑，凸起，边缘较整齐，湿润发粘，无色素产生。
3.按权利要求1所述，该菌菌体为杆状，大小为0.6～0.8μm×3～5μm，芽孢为卵圆形，芽孢囊膨大，革兰氏染色呈阳性；该菌接触酶试验有气泡产生，为阳性；该菌能水解淀粉，菌落周围出现无色透明环，琼脂培养基被染成深蓝色；该菌V-P试验菌液立即显红色，为阳性；该菌甲基红试验菌液显淡红色，为弱阳性；该菌柠檬酸盐利用试验斜面培养基颜色没发生变化，为阴性；该菌葡萄糖氧化试验的结果是开管及闭管的都变黄产酸，故为发酵型，且为兼性厌氧。
4.按权利要求1所述，该菌经Biolog仪鉴定为Paenibacillus polymyxa（多粘类芽孢杆菌）。
5.按权利要求1所述，该菌经16srDNA序列鉴定为Paenibacillus polymyxa（多粘类芽孢杆菌）。
6.按权利要求1所述，该菌16srDNA基因部分序列为：
TTGCTGCTTACCCTTCCCACCTTGAATGGTATCATCTAGCGTCATCCGCCCAGTTGCTTCAAGTGAGCTTCGTTTTCGTGCTCATTGAAGGTTACCCTGGCCATTGCCTCGTTTGACAACGGATATTTCGTTCCCGTATAAAATTGCTTATCGTTCTGGTTCCAGAACATCACTGTGAAATCTTGGTCCGAGCGATTCGCGTTTACAGCTTGGATACCTGACCGTGCTACCAGTCTCCCTTCACCTGGCTAGATTCCCTGGAAACAGATATTGTAAGAACGCAGGAGAATCAGGACATGCTTGACATACGGAAGCTGTATCCGCGAGGGTCTTGTGGAAGAGTGTCTCAGCTGCTCCCACACGCTGGAAACTGGTACCAAGGTGTAGTATCCTAATTAAATCTTGATCAAATTAGGATGCTTTGCCTTGTTACCTGTTATGCTTTAGAGGGACCAAGTGATGCAGTCTTGCACAAGACCCTCTTTGATGCGTGTGCCGTATGTCGATCATACTCCGATGCGTGCGCACTACATATATATGCGTGTCCACTGACTCTCACTCGCTTCACTGATAACGTGAACCACGACCGGTATTCCTTGTGTCCACGTGC。
7.按权利要求1所述，该菌株抑菌谱广、抑菌能力强，能在人参、西洋参等植物的植株中定殖，用于防治人参、西洋参、五味子、平贝母等植物的病害；该菌株也可应用在制备防治人参、西洋参等植物病害的制剂中。
8.按权利要求1所述，该菌株可有效解决老参地及人参、西洋参等植物连作障碍问题。
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