CN103211864B - 地菍提取物及其在制备治疗艾滋病药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物技术领域，具体地说，涉及中草药地菍的医药新用途，更具体地说，涉及地菍提取物在制备治疗艾滋病药物中的用途。本发明经抗病毒实验结果显示，地菍提取物在体外对艾滋病病毒株HIV-1 NL4-3呈现明显抑制作用，地菍提取物可单独应用或者与其它药物合用，或者与适宜的赋形剂结合，制备抗病毒药物用于艾滋病的预防和治疗。

Description

地菍提取物及其在制备治疗艾滋病药物中的用途

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体地说，涉及中草药地菍的医药新用途，更具体地说，涉及地菍提取物在制备治疗艾滋病药物中的用途。

背景技术

现有技术公开了艾滋病是由于感染艾滋病病毒(HIV)而引起的一种传染病，可以通过血液、性、吸毒、母婴等四种途径传播。由于相关疫苗研究至今仍未成功，该疾患的抗病毒治疗成为目前唯一的手段。但是本领域公知抗艾滋病病毒药物其毒副作用大，将严重降低患者的生活质量。而且，由于临床抗药病毒株的不断出现，导致现有的抗病毒药物的疗效显著降低甚至丧失。另据报道，在非洲等一些经济落后地区，虽然艾滋病流行形势十分严峻，但是由于经济落后，当地无法担负抗病毒药物价格，多数患者得不到适当的治疗，成为影响当地经济社会发展的严重制约。因此，研究开发低毒、有效、廉价的抗艾滋病药物适合当前社会发展需求。

我国有丰富的中草药资源，中草药化学成分的多样性是中草药发挥各种不同药效的物质基础。国内、外研究表明，天然产物包括中草药的部分品种显示出对艾滋病病毒的显著拮抗作用，有可能在艾滋病的治疗领域发挥积极作用。根据已有的文献典籍，结合现代药理研究方法，研究者发现部分中草药显示出对艾滋病病毒的抑制作用。

地菍(Melastoma dodecandrum Lour)为野牡丹科植物地菍的全草，又名山地菍、地葡萄、金头石榴、铺地菍、落地菍等。分布我国东南、西南各地，是广东省和浙江省正式收录的地方药材。其味甘、涩，性凉，具有活血止血，消肿祛瘀，清热解毒之功效。临床用于治疗高热、肿痛、咽喉肿痛、牙痛、黄疽、水肿、痛经、崩漏、带下、产后腹痛、痈肿、疗疮、痔疮、毒蛇咬伤等病症。另有报道地菍有抗肿瘤、抗衰老、降血糖、降血脂等作用。迄今，尚未见有关地菍及其提取物对由于HIV感染引起的艾滋病的治疗用途。

发明内容

本发明的目的是提供地菍提取物的医药新用途，具体地说，涉及地菍提取物在制备治疗HIV感染引起的艾滋病的药物中的用途。

本发明经筛选研究发现，地菍的提取物对HIV-1NL 4-3呈现显著抑制作用，IC₅₀低于0.49ug/ml，结果显示，地菍该药用植物具有防治艾滋病的崭新用途。

本发明的地菍提取物由地菍的地上部分、地菍的根或其全草经由本领域已知的方法制备获得。

本发明以地菍地上部分、地菍的根或其全草为原料，采用溶剂提取法以及溶剂萃取法制成浓缩提取物；

所采用的溶剂提取法中，选用水、甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂或以上溶剂的多种混和溶剂，在室温下浸渍提取或加热条件下回流提取，提取次数为2～3次获得地菍提取物。本发明的实施例中优选95％乙醇为提取溶剂；

上述得到的地菍提取物采用溶剂萃取法进行萃取，将所述的地菍提取物悬浮于水中，石油醚、乙酸乙酯等适宜的溶剂依次进行萃取，萃取次数为2～3次，萃取液合并，减压浓缩挥去有机溶剂，获得不同极性有机溶剂萃取部位。

本发明将获得的地菍不同极性有机溶剂萃取部位进行抗病毒实验，3次实验结果的平均值显示，所述地菍的乙酸乙酯萃取部位(DN-EA)对HIV-1NL4-3呈现显著剂量依赖的抑制活性(如表1所示)。本发明中，实验结果还显示，样品DN-EA起始浓度为800ug/ml，当其稀释1620倍达到0.49ug/ml的浓度时，仍然对HIV病毒的抑制率达到70％，活性显著。

表1 是地菍不同极性有机溶剂萃取部位抗病毒实验结果。

表1.

NS:受试浓度无抑制活性作用。

本发明进一步的细胞毒测试结果证明DN-EA在180-1620倍稀释时细胞毒作用很小(如表2所示)，实验结果表明，地菍提取物的抗病毒作用是在安全剂量范围内。

表2 是地菍提取物的细胞毒测试结果。

表2

本发明提供了地菍提取物的医用新用途，所述的地菍提取物可单独应用或者合用，或与适宜的赋形剂结合，按照常规方法制成口服或者非口服剂型应用于艾滋病的预防及治疗。

本发明具有以下明显优点：

地菍资源丰富，在我国东南、西南各地都有分布；地菍作为地方药物在广东、浙江正式收录，有一定临床应用的历史，至今未发现严重的毒副作用，临床应用较为安全可靠；另外，地菍的活性部位可以单独从其地上部分获取，有利于资源的再生和可持续利用。

下面结合实施例对本发明作进一步阐述，但这些实施例绝非对本发明有任何限制。本领域技术人员在本说明书的启示下对本发明实施中所作的任何变动都将落在本发明权利要求书的范围内。

具体实施方式

实施例1

地菍地上部分100g，粉碎，用8倍量的95％乙醇回流提取2小时，抽滤，药渣同法提取1次。合并两次提取液，在60℃下减压浓缩，得到15g浸膏。浸膏用2倍量的水混悬，用与混悬液等倍量的石油醚萃取两次，然后用等倍量的乙酸乙酯萃取两次。乙酸乙酯萃取部分减压浓缩后得浸膏4g，为抗病毒活性部位。

实施例2

地菍全草100g，粉碎，用85％含水丙酮进行回流提取，每次两小时，合并两次提取液，60℃下减压浓缩得到18g浸膏。浸膏用2倍量的水混悬，用与混悬液等倍量的乙酸乙酯萃取两次，然后用等倍量的正丁醇萃取两次。乙酸乙酯萃取部分减压浓缩后得浸膏6g，为抗病毒活性部位。

实施例3

地菍的根50g粉碎，用80％乙醇室温下浸泡48小时，收集冷浸液；重复2次，合并三次冷浸液，60℃下减压浓缩得浸膏4g。浸膏用2倍量的水混悬，用与混悬液等倍量的石油醚萃取两次，然后用等倍量的乙酸乙酯萃取两次。乙酸乙酯萃取部分减压浓缩后得浸膏1.2g，为抗病毒活性部位。

实施例4

地菍活性部位对转染HIV-1NL4-3的TZM-bl细胞的保护作用

在一96孔培养板中，将实施例1～3所得的制备物作系列稀释，稀释倍数为20倍～43740倍。每孔分别加入25ul待测样品溶液，25ul新鲜配制的TZM-bl培养液，25ul细胞浓度为4×10⁵cells/ml的TZM-bl细胞液和25ul HIV-1NL4-3(100TCID50)。在37℃，5％CO₂培养箱培养48小时。吸弃培养液，加入100ul溶解于PBS中的底物工作液(Promega Bright-Glow luciferase assay system)，室温在暗处孵育5分钟，以荧光仪读取数值，通过荧光值强弱计算病毒受到样品的抑制程度。结果显示，所述地菍的乙酸乙酯萃取部位(DN-EA)对HIV-1NL4-3呈现显著剂量依赖的抑制活性(如表1所示)。

Claims (5)

1.地菍提取物在制备治疗艾滋病药物中的用途；所述的地菍提取物为地菍的乙酸乙酯萃取部位；

所述的地菍提取物通过下述方法制备：以地菍地上部分、地菍的根或其全草为原料，采用溶剂提取法以及溶剂萃取法制成浓缩地菍提取物；

所述的溶剂提取法中，有机溶剂选自水、甲醇、乙醇或丙酮或所述溶剂的多种混和溶剂，在室温下浸渍提取或加热条件下回流提取2～3次获得地菍粗提取物；

将制得的地菍粗提取物悬浮于水中，石油醚以及乙酸乙酯溶剂依次进行萃取2～3次，萃取液合并，减压浓缩挥去有机溶剂，获得地菍不同极性有机溶剂萃取部位。

2.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的溶剂提取法中采用95％乙醇为提取溶剂。

3.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的地菍乙酸乙酯萃取部位抑制HIV-1NL4-3活性。

4.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述地菍提取物单独或者与其它药物合用。

5.按权利要求1所述的用途，其特征在于，所述地菍提取物与赋形剂制成片剂、丸剂、胶囊剂或颗粒。